Orientador: Eduardo Alves de Almeida / Coorientador: Lucilene Regina Maschio / Banca: Alcir Luiz Dafre / Banca: Daniel Junqueira Dorta / Resumo: A composição do ambiente aquático influencia diretamente os organismos que nele vivem e a liberação de xenobióticos neste meio pode perturbar sua estrutura e funcionamento. Os praguicidas são graves contaminantes, pois são desenvolvidos para eliminar alguma forma de vida, atingindo também espécies não-alvo. Para avaliar os impactos desses poluentes na qualidade ambiental, é importante mensurar seus efeitos nos organismos vivos, usando-se biomarcadores. O trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos genotóxicos/ mutagênicos, bioquímicos e histológicos de diferentes concentrações dos herbicidas Combine *500 SC (0,125; 0,25 e 0,5 ml/L) e Velpar K® WG (0,125; 0,25 e 0,5 mg/L) em Oreochromis niloticus. Dois experimentos foram realizados em animais de 10 e 20 cm. Para cada tamanho havia o grupo controle e três grupos com as diferentes concentrações do herbicida testado. Os peixes foram expostos por 72 horas e sacrificados. Com o fígado foi realizada a análise da etoxirresorufina-O-desetilase (EROD); com o fígado e brânquias foram feitas as análises da glutationa-S-transferase (GST), superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx), catalase (CAT) e peroxidação lipídica; e com o sangue foram feitos o teste do micronúcleo e o ensaio cometa. Além disso, parte do fígado dos peixes maiores foi utilizada em análise histológica. Os resultados indicaram que ambos os herbicidas induziram a atividade EROD, mas não produziram alteração na atividade GST. Não foi evidenciada peroxidação lipídica por meio da análise de MDA, mas pode ter ocorrido uma maior formação de espécies reativas de oxigênio (ERO), pouco evidenciada pelas enzimas antioxidantes CAT e SOD. O ensaio cometa revelou maior frequência de células com danos no DNA em indivíduos expostos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The composition of the aquatic environment influences the organisms that live at this environment, and the release of xenobiotics into the environment may disrupt its structure and functioning. Pesticides are serious contaminants because they are designed to eliminate pests, but affecting non-target species. To assess the impacts of these pollutants on environmental quality, it is important to measure their effects on living organisms, using biomarkers. The present study aimed to evaluate the genotoxic/mutagenic, biochemical and histological effects of different concentrations of herbicides Combine * 500 SC (0.125, 0.25 and 0.5 ml / L) and Velpar K® WG (0.125, 0.25 and 0, 5 mg / L) in Oreochromis niloticus. Two experiments were performed. Each one with two groups of animals of different mean sizes: 10 and 20 cm. For each size we had the control group and three groups with different concentrations of the tested herbicide. Fish were exposed for 72 hours and thereafter sacrificed. Etoxiresorufin-O-desetilasis analysis (EROD) was performed in the liver; the analysis of glutathione-S-transferase (GST), superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GPx), catalase (CAT), and lipid peroxidation were done in liver and gills; and the comet assay and micronucleus test were performed in the blood. In addition, part of the larger fish liver was used in histological analysis. The results indicated that both herbicides induced the EROD activity, but produced no change in GST activity. There was no evidence of lipid peroxidation by MDA analysis, but an increase in the formation of reactive oxygen species (ROS) can be ocurred, evidenced by SOD and CAT. The comet assay showed higher frequency of cells with DNA damage in animals exposed to herbicides than in control ones, however, there were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Eduardo Alves de Almeida / Banca: Eny Maria Vieira / Banca: Cláudia Regina Bonini Domingos / Resumo: Estudos de alterações bioquímicas em espécies aquáticas expostas a poluentes são abundantes na literatura. Todavia, existem poucas pesquisas voltadas a compreender de que forma animais de uma mesma espécie, mas com pesos diferentes, respondem a contaminantes. Então, identificar a influência deste fator nas respostas de peixes a contaminantes ambientais é extremamente importante para estudos ecotoxicológicos. No presente estudo, tilápias do Nilo de diferentes portes (jovens, adultas de menor peso e adultas de maior peso) foram tratadas com benzo(a)pireno (0,5 mg L-1), diazinon (1,0 mg L-1), cádmio (0,5 mg L-1) e cobre (0,5 mg L-1) por três dias. Após as exposições, as tilápias foram anestesiadas com benzocaína (40,0 mg L-1) e sacrificadas para retirada do cérebro, fígado e brânquias para análise de biomarcadores: tais como de extresse oxidativo (que incluem as enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa peroxidase (GPx)); enzimas de fase I e II de biotransformação (7-etoxiresorufina-O-deetilase (EROD) e glutationa S-transferase (GST), respectivamente); enzimas esterases (acetilcolinesterase (AChE) e carboxilesterase (CbE)); e níveis de peroxidação lipídica. Os resultados mostraram que a exposição ao diazinon e ao cádmio provocou inibição das esterases nos fígado e nas brânquias das tilápias adultas. A atividade da SOD e da CAT foi afetada (diminuiu) apenas nas tilápias jovens, enquanto que a GPx foi afetada nas tilápias adultas, porém, esses efeitos não implicaram em aumento nos níveis de peroxidação lipídica dos peixes. Já as enzimas de biotransformação de fase I e II apresentaram indução significativa para a exposição ao benzo(a)pireno nas tilápias jovens e adultas de menor peso, indicando o envolvimento das mesmas na detoxificação do composto. A falta de indução... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Studies of biochemical changes in aquatic species exposed to pollutant are abundant in literature. However, there are little researches aimed to understand whether animals of the same species, but with different weights, respond to contaminants. Then, the identification of the influence of this factor in the responses of fish to environmental contaminants is of primordial importance for ecotoxicological studies. In this study, Nile tilapia of different sizes (juvenile, adults of lower weight and adults of higher weight) were exposed to benzo(a)pyrene (0.5 mg L-1), diazinon (1.0 mg L-1), cadmium (0.5 mg L-1) and copper (0.5 mg L-1) for three days. After the exposure, the tilapias were anesthetized with benzocaine (40.0 mg L-1) and sacrificed to remove the brain, the liver and the gills for analysis of biomarkers: such as of oxidative stress ( that include the enzymes superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx)); enzymes of phase I and II biotransformation (7-etoxiresorufina-O-deetilase (EROD), glutathione S-transferase (GST), respectively); esterase enzymes (acetylcholinesterase (AChE), carboxylesterase (CbE)); and levels of lipid peroxidation. The results showed that exposure to diazinon and to cadmium caused inhibition of esterases in the liver and in the gills of the adults tilapias. The activity of SOD and CAT was affected (decreased) only in juvenile tilapia while GPx was affected in adult tilapia, however, these effects did not result in increases in the levels of lipid peroxidation of the fish. Since the phase I and II biotransformation enzymes showed significant induction to exposure the benzo[a]pyrene only in juvenile tilapia and in adults of lower weight tilapia, it would be suggested the involvement of the same in the detoxification of the compound. The lack of induction in adults of higher... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2017-08-30T14:31:00Z No. of bitstreams: 2 Denise Michelle Indras.pdf: 1849747 bytes, checksum: 07aa936d5e799c6b5d67a84cd73ad9eb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-30T14:31:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Denise Michelle Indras.pdf: 1849747 bytes, checksum: 07aa936d5e799c6b5d67a84cd73ad9eb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-07 / The popular use of medicinal plants are common practices and among them is a bottle, a multiple plant base product, which promises to cure various diseases. Many animal studies show in hepatic, renal enzymes and our hematological parameters after administration of plant extracts. The objective of this study was to verify a correlation between the use of multiple medicinal plants with hepatic, renal and hematological found in a patient that made use of bottle, composed of echinacea, graviola, ipé purple, sucupira and cat's claw. The bottle has 4.32 mg.mL-1 of alcohol. Pharmacological and UV/Scan tests were performed, showing some classes of secondary metabolites in plant and bottle species. A bioassay was performed with Artemia salina, and a bottle had mortality up to a concentration of 0.1 mg.mL-1. Cytotoxic effects on erythrocytes revealed hemolytic activity for echinacea, graviola, purple ipe and sucupira. The Escherichia coli test showed sensitivity to graviola, purple ipe, sucupira and cat's claw. In vivo experiment using mice. Two treatments were performed, single dose and 30 days, administering water, alcohol and bottle by gavage. Biochemical, coagulation, hematological and histopathological parameters were evaluated. In the single dose treatment were alterations of uric acid, cholesterol, creatinine, alkaline phosphatase, iron and glucose (p<0.05). Already in the treatment of 30 days were alterations of uric acid, total and indirect bilirubins, creatinine, alkaline phosphatase, glucose, triglycerides, red blood cells and leukocytes (p<0.05), beyond hepatic sinusoidal dilatation. The data showed that the alcohol present in the bottle can alter biochemical, hematological parameters and cause liver damage in rats. The bottle, although not showing alterations in important biochemical and hematological parameters, but had more pronounced hepatic histopathological alterations. / O uso popular de plantas medicinais são práticas comuns e entre elas está a garrafada, produto a base de múltiplas plantas, que promete curar várias doenças. Muitos estudos com animais mostram alterações em enzimas hepáticas, renais e nos parâmetros hematológicos após administração de extratos vegetais. O objetivo deste estudo foi verificar a correlação entre o uso de múltiplas plantas medicinais com as alterações hepáticas, renais e hematológicas encontradas em um paciente que fez uso de garrafada, composta por equinácea, graviola, ipê roxo, sucupira e unha de gato. A garrafada possui 4,32 mg.mL-1 de álcool. Foram realizados testes farmacognósticos e UV/Varredura, mostrando algumas classes de metabólitos secundários nas espécies vegetais e na garrafada. Foi realizado bioensaio com Artemia salina, e a garrafada teve mortalidade até a concentração de 0,1 mg.mL-1. Efeitos citotóxicos em eritrócitos revelaram atividade hemolítica para equinácea, graviola, ipê roxo e sucupira. O teste com Escherichia coli mostrou sensibilidade para graviola, ipê roxo, sucupira e unha de gato. No experimento in vivo utilizando ratos Wistar foram realizados dois tratamentos, dose única e 30 dias, administrando água, álcool e garrafada por gavagem. Foram avaliados parâmetros bioquímicos, de coagulação, hematológicos e histopatológicos. No tratamento com dose única foram encontradas alterações de ácido úrico, colesterol, creatinina, fosfatase alcalina, ferro e glicose (p<0,05). Já no tratamento de 30 dias foram encontradas alterações de ácido úrico, bilirubinas total e indireta, creatinina, fosfatase alcalina, glicose, triglicerídeos, hemácias e leucócitos (p<0,05), além de dilatação sinusoidal hepática. Os dados mostraram que o álcool presente na garrafada pode alterar parâmetros bioquímicos, hematológicos e causar danos ao fígado de ratos. A garrafada, apesar de não mostrar alterações em parâmetros bioquímicos e hematológicos importantes, teve alterações histopatológicas hepáticas mais pronunciadas.

Câncer é a denominação de um conjunto de mais de cem doenças causadas pelo crescimento e multiplicação desordenados de células anormais capazes de invadir e se disseminar por diversos tecidos e órgãos. É considerado um problema de saúde mundial, sendo uma das maiores causas de morte. Dados da Organização Mundial da Saúde (OMS) indicam que 15% das mortes no mundo serão causadas por câncer em 2015. No Brasil, o Instituto Nacional do Câncer (INCA) estima 580 mil novos casos da doença para 2014. Apesar da vasta quimioterapia disponível, os tratamentos possuem alta toxicidade e estão sujeitos à resistência. Nesse contexto, a presente dissertação de mestrado tem como foco principal a identificação e caracterização de novos compostos com propriedades anticâncer. Os estudos foram realizados com base em dois alvos principais. O primeiro foi a proteína tubulina, um alvo anticâncer validado que é modulado por moléculas importantes como o taxol, a vimblastina e a colchicina. O segundo alvo foi a migração celular, característica relacionada ao processo de metástase, que é responsável por 90% das mortes por câncer. Uma série de acridinonas sintéticas foi avaliada in silico frente à proteína tubulina empregando métodos de modelagem molecular. Para tanto, fez-se uso de estruturas cristalográficas da proteína disponíveis no PDB (Protein Data Bank). Os resultados das análises de docagem molecular indicaram que as moléculas poderiam interagir com o sítio da colchicina e, dessa forma, atuariam como inibidoras da polimerização dos microtúbulos. Ensaios wound healing e em câmara de Boyden permitiram a identificação de quatro compostos com potente efeito de inibição da migração celular (valores de IC50 variando entre 0,294 e 1,7 &mu;M) em uma linhagem metastática (MDA-MB-231). Estes compostos foram submetidos a ensaios de citotoxicidade frente à mesma linhagem tumoral e também apresentaram boa potência, com valores de IC50 variando entre 0,110 e 3 &mu;M. Além disso, ensaios de citotoxicidade em células saudáveis mostraram que estes compostos inviabilizaram seletivamente células tumorais. Para a validação dos estudos in silico, ensaios de polimerização da tubulina foram conduzidos. Os resultados mostraram que as quatro moléculas ativas nos ensaios celulares atuam como inibidores de polimerização dos microtúbulos, com valores de IC50 variando entre 0,9 e 13 &mu;M. Estudos das relações entre a estrutura e atividade (SAR) revelaram alguns aspectos interessantes nesta série de acridinonas, como, por exemplo, a perda de atividade, que se deu tanto nos ensaios celulares quanto nos ensaios bioquímicos, causada pela substituição de um grupo nitro da posição meta- por para- em duas moléculas da série. A progressão do ciclo celular foi analisada por citometria de fluxo e os resultados mostraram que os compostos estudados são capazes de interromper o ciclo celular entre as fases G2 e M. A citometria fluxo também permitiu verificar a indução da apoptose celular devida à ação das moléculas. Em resumo, este trabalho possibilitou a identificação e caracterização de quatro compostos com propriedades antitumorais promissoras que serão utilizados como compostos líderes para posterior desenvolvimento como agentes anticâncer. / Cancer is a set of diseases with high diversity and aggressiveness. It is one of the major causes of death according to the World Health Organization (WHO), being responsible for 15% of worldwide deaths in 2015. In Brazil, the National Institute of Cancer (INCA) estimates 580,000 new cases of cancer for the year of 2014. Despite the vast availability of cancer chemotherapy, the treatments cause high toxic effects and are liable to resistance. In this context, the main goal of the present master\'s dissertation is the identification and the characterization of new compounds having anticancer properties. These studies were conducted based on two main targets. The first one was the protein tubulin, a validated anticancer target that is modulated by important molecules such as taxol, vinblastine and colchicine. The second target was the cellular migration, a feature related to the metastasis process, which causes 90% of the cancer deaths. A series of synthetic acridinones was studied in silico employing molecular modeling methods. For this, crystallographic structures of tubulin were collected from PDB (Protein Data Bank). The docking results indicated that the molecules could interact with the colchicine site and, thereby, could act as tubulin polymerization inhibitors. The series was assessed by the wound healing and Boyden chamber\'s assays using the metastatic cell line MDA-MB-231. In these assays, four compounds were identified as good inhibitors of cellular migration (IC50 values varying between 0.294 and 1.7 &mu;M). These compounds were evaluated in cytotoxicity assays using the same cell line and presented good potency, with IC50 values varying between 0.110 and 3 &mu;M. Furthermore, cytotoxicity assays using a healthy cell line showed that these compounds act selectively in tumor cells. For the validation of the in silico studies, tubulin polymerization assays were conducted. The results showed that the four active molecules in the cellular assays act as tubulin polymerization inhibitors, with IC50 values varying between 0.9 and 13 &mu;M. Structure-activity relationship (SAR) studies revealed interesting structural aspects in this series of acridinones, for instance, the exchange of the nitro group substituent from the meta- to the para- position in two molecules of the series led to a lack of activity in both cellular and biochemical assays. The cell cycle progression was evaluated by flow cytometry, and the results showed that the four compounds are capable of arrest cells in the G2/M phase. Moreover, the apoptosis induction was verified using flow cytometry. In summary, this work provided the identification and characterization of four new compounds with promising antitumor properties. These molecules will be used as lead compounds for further development as anticancer agents.

Guarana (Paullina cupana) is a functional food and previous studies suggest antioxidant, antiplatelet,antiobesogenic lipid-lowering and modulating activities of the levels of nitric oxide (ON) effects.The probably effects of guarana are related to their chemical composition consisting mainly of xanthine as caffeine, theophylline, theobromine and polyphenols such as catechins and their derivatives. The identification of bioactive compounds in Brazilian fruit is ofextreme relevance for the development of natural products that have therapeutic activity and, in this context, is guarana. Evidence suggests that consumption may intervene in the establishment of atherosclerosis pathology in determining cardiovascular diseases (CVDs). Most previous studies examined herbal compounds containing guarana in its composition, in experimental animal models or observational cross-sectional population studies. Therefore, is incipient research to analyze if the guarana presents activity on biomarkers blood glucose, lipid, nutritional, oxidative - inflammatory and ischemic. Objectives: Investigate whether supplementation with a low dose of guarana in a short space of time could have an influence on biochemical markers associated with atherosclerosis in young adults overweight, therefore at risk of developing pathology. Methods: We performed a clinical trial, randomized, placebo-controlled trial, to test whether supplementation of a minimum daily dose (90mg) of guarana may affect blood biomarkers metabolic, oxidative and ischemic. Healthy volunteers (n = 14) overweight consumed capsules guarana powder (90/mg day) for 14 days. The results showed that supplementation with guarana reduced by 20% triglyceride levels (p = 0.015). It was also observed reductions in uric acid levels (p = 0.042) and markers of oxidative metabolism, such as TBARS (p = 0.0015), protein carbonylation (p <0.0001) and AOPP (p = 0.025) while there was an increase in blood levels of catalase (p = .001), albumin (p <0.0001) and for total protein (p = 0.0005). These results were independent of gender and age. The present study suggests that a minimum dose of guarana in a reduced period of time causes a positive modulatory effect on some blood biomarkers of human cardiovascular risk, regardless of the weight loss, showing thus a positive effect on atherosclerotic risk modulators. / Guaraná (Paullina cupana) é um alimento funcional e estudos prévios sugerem atividades antioxidante, antiplaquetária, antiobesogênica, hipolipemiante e moduladora dos níveis de óxido nítrico (ON). Os prováveis efeitos do guaraná relacionam-se à sua composição química constituída principalmente por xantinas como a cafeína, teofilina, teobromina e de polifenóis como as catequinas e seus derivados. A identificação de compostos bioativos em frutos brasileiros é de extrema relevância para o desenvolvimento de produtos naturais que apresentem atividade terapêutica e, nesse contexto, encontra-se o guaraná. Evidências sugerem que o seu consumo pode intervir no estabelecimento da aterosclerose, patologia determinante nas doenças cardiovasculares (DCVs). A maior parte dos estudos prévios realizados, analisou compostos herbais que continham guaraná na sua composição, em modelos experimentais animais ou em estudos populacionais transversais observacionais. Portanto, é incipiente a investigação para analisar se o guaraná apresenta atividade sobre biomarcadores sanguíneos glicêmicos, lipídicos, nutricionais, oxidativo-inflamatórios e isquêmicos. Objetivos: investigar se a suplementação com uma reduzida dose de guaraná em um curto espaço de tempo poderia ter influência sobre marcadores bioquímicos associados à aterosclerose em adultos jovens com sobrepeso, portanto, com risco de desenvolver a patologia. Métodos: foi realizado um ensaio clínico, randomizado, controlado por placebo para testar se a suplementação de uma dose mínima diária (90mg) de guaraná poderia afetar biomarcadores sanguíneos metabólicos, oxidativos e isquêmicos. Voluntários saudáveis (n=14) com sobrepeso consumiram cápsulas de guaraná pó (90/mg dia) durante 14 dias. Os resultados mostraram que o suplemento com guaraná reduziu em 20% os níveis de triglicerídeos (p=0,015). Observou-se também redução nos níveis de ácido úrico (p=0,042) e marcadores do metabolismo oxidativo, como TBARS (p=0,0015), carbonilação de proteínas( p<0,0001) e AOPP (p=0,025) enquanto houve um aumento nos níveis sanguíneos da enzima catalase (p=0,001), albumina(p<0,0001) e proteína total(p=0,0005). Estes resultados foram independentes de sexo e idade. O presente estudo sugere que uma dose mínima de guaraná em um período reduzido de tempo provoca efeito modulador positivo em alguns biomarcadores sanguíneos de risco cardiovascular humano independentemente da perda de peso, apresentando, desta forma, efeito positivo sobre os moduladores de risco ateroscleróticos.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:56:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 946361 bytes, checksum: 1766fac9ee5a060f38a21f6c3c424890 (MD5) Previous issue date: 2014-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to compare artificial carious enamel lesions induced with an acid gel containing large amounts of organic matter and artificial carious lesions induced by an acidic solution (with little organic constituent) regarding organic volume and permeability (&#61537;d). Thirty teeth (twenty third molar and ten molars with inactive white spot lesions) were divided into three groups. In order to induce artificial caries, ten teeth were exposed to an acid gel containing hydroxyethylcellulose 2% and 50 mM lactic acid at pH 4.5 (Gel; n = 10) while the other ten teeth a demineralizing solution (0,1 mM lactic acid, 11.7 mM of calcium, chloroform 0.5% v/v, 6 mM phosphate, pH 4.5) (Solution; n = 10). As a control group, the teeth containing white spot lesions were also analyzed (Natural Caries, n = 10). Three points were analyzed in each sample at the surface layer in each lesion at 50&#956;m intervals. The results obtained in each of the three groups were compared with theoretical mathematical found values in the literature as a way to standardize the comparison. Finally, variations in organic volume (Ratio &#61538;) and permeability (Ratio &#61537;d) in relation to predicted values were compared between groups. For variable Ratio &#61538;, there was a significant difference between the gel and solution [p<0.0001, ANOVA; Effect Size (ES)=1.84] and between solution and the natural caries (p=0.001, ANOVA; ME=0.46). Similarly, the values of Ratio &#61537;d between Gel/Solution (p<0.0001, Mann-Whitney, ES=0.96) and Solution/Natural caries (p<0.0001; Mann-Whitney; ME=1.15) differed significantly. There was no statistically significant difference between the groups Gel and Natural Caries for Ratio &#61538; (p=0.585, ANOVA, ES=0.30) and the Ratio &#61537;d (p=0.940, Mann-Whitney, ES=0.01). It was concluded that, as in natural decay, the surface layer of artificial carious enamel lesions created with organic acid gel showed higher organic matter and lower permeability compared to those induced in acidic solution. / O objetivo deste estudo foi comparar lesões cariosas artificiais de esmalte induzidas com gel ácido contendo grande quantidade de matéria orgânica e lesões cariosas artificiais induzidas com solução ácida com pouco constituinte orgânico, quanto ao volume orgânico e à permeabilidade (&#61537;d). Trinta dentes (vinte terceiros molares inclusos e dez molares com lesão de mancha branca inativa) foram distribuídos em três grupos. Com o intuito de se induzir cárie artificial, dez dentes inclusos foram expostos a um gel ácido de hidroxietilcelulose 2% e ácido lático 50 mM com pH 4,5 (Gel; n=10) e os outros dez a uma solução desmineralizante (0,1 mM de ácido lático, 11,7 mM de cálcio, clorofórmio 0,5% v/v e 6 mM de fosfato, com pH 4,5) (Solução; n=10). Como grupo controle, os dentes contendo lesões de mancha branca também foram analisados (Cárie Natural; n=10). De cada amostra analisou-se três pontos da camada superficial da lesão, em intervalos de 50 &#956;m. Os pontos analisados em cada um dos três grupos foram comparados com valores teóricos estabelecidos matematicamente na literatura, como forma de padronizar as comparações. E, por fim, as variações de volume orgânico (Razão &#61538;) e permeabilidade (Razão &#61537;d) em relação a valores previstos foram comparadas entre os grupos. Para a variável Razão &#61538;, houve diferença significante entre os grupos Gel e Solução [p<0,0001, ANOVA; Magnitude do efeito (ME)=1,84] e entre Solução e Cárie Natural (p=0,001; ME=0,46; ANOVA). Da mesma forma, os valores da Razão &#61537;d do cruzamento Gel/Solução (p<0,0001, Mann-Whitney; ME=0,96) e Solução/Cárie Natural (p<0,0001, Mann-Whitney; ME=1,15) diferiram de maneira significativa. Não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos Gel e Cárie Natural para a Razão &#61538;&#61472;(p=0,585; ANOVA; ME=0,30) e a Razão &#61537;d (p=0,940; Mann-Whitney; ME=0,01). Concluiu-se que, semelhantemente à cárie natural, a camada superficial das lesões cariosas artificiais de esmalte criadas com gel ácido apresentaram maior volume orgânico e menor permeabilidade, comparadas às induzidas em solução ácida.

Made available in DSpace on 2016-12-23T13:53:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Raphael Pires Bolzan.pdf: 255186 bytes, checksum: b4c5317a3c518a2e50145e1e51dd83ef (MD5) Previous issue date: 2010-08-30 / O Perfil Metabólico (PM) é utilizado de maneira confiável para avaliar o estado nutricional do animal, podendo ser usado para monitorar a adaptação metabólica, diagnosticar desequilíbrios da homeostase de nutrientes e revelar as causas da manifestação das doenças nutricionais, também conhecidas como doenças metabólicas. No Brasil, a utilização de cruzamentos de raças européias especializadas na produção de leite com raças zebuínas adaptadas às condições tropicais, contribui significativamente na produção leiteira do país. Entretanto, os estudos do PM de vacas leiteiras são direcionados principalmente para as raças puras, geralmente presentes em regiões de clima temperado e subtropical. Por meio da revisão bibliográfica, buscou-se descrever aspectos importantes sobre as condições particulares da produção leiteira nos trópicos, a importância dos marcadores bioquímicos utilizados na avaliação do PM, bem como os principais metabólitos utilizados para avaliar o PM protéico, e, com a pesquisa, aferir os valores e avaliar o comportamento dos marcadores bioquímicos protéicos em dois grupos genéticos de vacas primíparas holandês x gir, em dois períodos da lactação, no período da seca, nos trópicos. O experimento foi realizado no município de Passos MG. Utilizou-se dados coletados nos meses de maio e agosto de 2009, referente ao período da seca na região. O rebanho foi composto por 45 vacas ½ Holandesa x ½ Gir (½ HG) com produção leiteira média de 13,8 kg/vaca/dia e 39 vacas ¾ Holandesa x ¼ Gir (¾ HG) com produção leiteira média de 16,3 kg/vaca/dia, todas primíparas, com escore de condição corporal inicial entre 2,5 e 3,0 pontos, não variando mais que 0,5 pontos. Concentrou-se os estudos em dois períodos da lactação, de 28 a 60 dias (P1 da lactação) e de 110 a 130 dias (P2 da lactação). A dieta foi composta por ração total. Foram analisados os indicadores bioquímicos do perfil metabólico protéico por meio da quantificação da uréia, albumina, proteínas totais, hemoglobina e globulinas. Utilizou-se a estatística descritiva para obtenção de médias, desvio padrão e coeficiente de variação, analisados pelo t de Student, com nível de significância de 5%, para se estabelecer possíveis diferenças entre os períodos de lactação e os grupos genéticos. Houve diferença significativa (P<0,05) dos dias em lactação sobre os teores séricos de uréia e albumina para as primíparas ½ e ¾ HG, do P1 para o P2 da lactação. Para efeito do grau genético, não se observou diferença significativa (P>0,05) para a uréia, enquanto para a albumina, foi observado diferença significativa (P<0,05) apenas no P2 da lactação, podendo presumir a existência de possíveis diferenças na capacidade de recuperação dos teores séricos de albumina entre grupos genéticos. Em manejo onde a ingestão protéica não foi limitante, obteve-se intervalos de normalidade para animais cruzados ½ e ¾ HG mais restritos que os intervalos propostos pela literatura científica para a espécie bovina. Os teores séricos de uréia observados denotam ter havido subutilização de proteína da dieta no P1 da lactação

The pesticides are substances widely used in agriculture, because it enhances productivity. However, its excessive and disordered use has caused different impacts on the environment. Therefore, this study investigated the effects in carps (Cyprinus carpio) exposed to carbofuran (two agricultural years) and fipronil (one agricultural years) in rice field condition for 7, 30 and 90 days, as in laboratory condition for 30 days. In addition, evaluation of growth fish parameters and pesticides concentrations in the experimental water. The SOD activity in liver increased after 7, 30 and 90 days of exposure to 50.0 μg/L of carbofuran under rice field condition in the years 1 and 2. A decrease in hepatic CAT activity was showed after 30 days of exposure in both experimental years. GST activity in liver showed a significant increase after 30 days of exposure, and decrease after 7 and 90 days in both experimental years. Protein carbonyl levels decreased after 90 days in the first experimental year. During the second experimental year the protein carbonyl levels were reduced in all the periods of exposure. In both experimental years TBARS increased significantly in the brain after all periods studied, while in liver and muscle significant increase occurred only after 30 and 90 days of exposure. The carbofuran did not affect fish growth compared to control group in both experimental years. The SOD activity in liver increased whereas the hepatic activity of CAT was inhibited at 7, 30 and 90 days of exposure to fipronil. There were no changes in GST activity in all experimental periods. The protein carbonyl levels increased after 30 and 90 days of exposure, as TBARS levels increased in all the analyzed tissues (muscle, liver and brain) and periods analyzed. Regarding the growth of carp during the experimental period, no significant differences were observed in fish treated with fipronil when compared with the control group. In a third study were performed evaluations in carp exposed to the carbofuran and fipronil for 30 days in laboratory conditions. An increased in TBARS liver, muscle and brain of fish as the protein carbonyl levels in the liver after exposure to both insecticides tested. Liver CAT activity remained unaltered, as GST in liver, muscle and brain after exposure to carbofuran fipronil. The antioxidant enzymatic system showed an increase of GSH in the liver after exposure to both insecticides, whereas in the brain and muscle are not altered. Acid ascorbic levels demonstrated increased in liver, muscle and brain after exposure to carbofuran. After exposure to fipronil this parameter were increased only in the brain. The AChE activity was inhibited in brain and muscle of fish after exposure to both insecticides. The results from these studies show that carbofuran and fipronil cause disturbances in biochemical parameters of fish exposed in rice field as in laboratory condition. These studies revealed the occurrence of oxidative stress, without affecting the survival of fish, but can be harmful to your health. / Os pesticidas são substâncias amplamente usadas na agricultura, pois os mesmos possibilitam o aumento da produtividade. Entretanto, seu uso desordenado e excessivo vem provocando diversos impactos sobre o meio ambiente. Em razão disso neste estudo investigaram-se os efeitos da exposição de carpas (Cyprinus carpio) aos inseticidas carbofuran (2 anos agrícolas) e fipronil (1 ano agrícola) em condição de lavoura de arroz irrigado por 7, 30 e 90 dias, bem como em condição de laboratório por 30 dias. Além de avaliações de parâmetros de crescimento e de resíduos dos pesticidas na água. A atividade SOD em fígado aumentou após 7, 30 e 90 dias de exposição a 50,0 μg/L de carbofuran sob condições de lavoura de arroz irrigado nos anos 1 e 2. Uma diminuição na atividade da CAT hepática foi observada após 30 dias de exposição em ambos os anos experimentais. Na atividade da GST em fígado ocorreu um aumento significativo após 30 dias de exposição, e uma diminuição após 7 e 90 dias em ambos os anos experimentais. Os níveis de proteína carbonil diminuíram após 90 dias no primeiro ano experimental. Durante o segundo ano experimental, os níveis de proteína carbonil foram reduzidos em todos os períodos de exposição. Em ambos os anos experimentais, os níveis de TBARS aumentaram significativamente em cérebro após todos os períodos analisados, enquanto que no fígado e músculo um aumento significativo ocorreu apenas após 30 e 90 dias de exposição. O carbofuran não influenciou significativamente o crescimento dos peixes quando comparado ao grupo controle em ambos os anos experimentais. A atividade da SOD em fígado aumentou enquanto a atividade hepática da CAT foi inibida nos períodos de 7, 30 e 90 dias de exposição ao fipronil em condições de lavoura de arroz irrigado. Não foram observadas alterações na atividade da GST em todos os períodos experimentais. O conteúdo de proteína carbonil aumentou após 30 e 90 dias de exposição, ao passo que, os níveis TBARS aumentaram em todos os tecidos analisados (músculo, fígado e cérebro) e períodos analisados. Em relação ao crescimento das carpas durante o período experimental, não foram observadas diferenças significativas nos peixes tratados com fipronil em relação ao grupo controle. Em um terceiro estudo realizaram-se avaliações em carpas expostas aos inseticidas carbofuran e fipronil por 30 dias em condições de laboratório. Ocorreu um aumento nos níveis de TBARS em fígado, músculo e cérebro dos peixes, assim como da carbonilação de proteínas em fígado após exposição a ambos os inseticidas testados. A atividade da CAT hepática permaneceu inalterada assim como a GST em fígado, músculo e cérebro tanto na exposição ao carbofuran como ao fipronil. O sistema antioxidante não enzimático apresentou aumento dos níveis de GSH em fígado após exposição a ambos inseticidas, enquanto que, em músculo e cérebro não se alteraram. Assim como, demonstrou aumento nos níveis de ácido ascórbico em fígado, músculo e cérebro após exposição ao inseticida carbofuran. Após exposição ao fipronil somente ocorreu aumento dos níveis deste parâmetro em cérebro. A atividade da enzima AChE mostrou-se inibida em cérebro e músculo dos peixes após exposição a ambos os inseticidas. Os resultados obtidos nestes estudos mostram que os inseticidas carbofuran e fipronil provocam desordens em parâmetros bioquímicos nos peixes expostos em condições de campo bem como, em condições de laboratório. Evidenciou-se a ocorrência de estresse oxidativo, sem afetar na sobrevivência dos peixes, mas podendo ser prejudicial para a saúde destes.

Orientador: José Luiz Riani Costa / Coorientador: Márcia Regina Cominetti / Banca: Sofia Cristina Iost Pavarini / Banca: Hanna Karen Moreira Antunes / Resumo: Sabe-se que a atividade física é capaz de promover várias alterações nas funções cognitivas e hoje em dia é tida como uma forma não farmacológica de tratamento e prevenção para a Doença de Alzheimer. Um dos mecanismos que levam a essas alterações é a produção e captação de neurotransmissores os quais possuem ação direta no sistema nervoso central e, além disso, podem ter relação direta com a modulação e produção de biomarcadores relacionados à doença. Atualmente, os principais postulados têm recomendado novos critérios de diagnóstico e pesquisa na Doença de Alzheimer (DA). Entre os vários exames realizados existem os biomarcadores que no momento são utilizados com finalidade exclusiva de pesquisa, mas que cada vez mais vêm ganhando espaço para diagnóstico clínico. Entre os biomarcadores relacionados com a DA existe uma enzima catalítica da família das desintegrinas e metalopeptidadse, a ADAM 10 que possui entre suas várias funções, a capacidade de clivar a proteína precursora de amilóide (APP) e promover a liberação de uma substância neurogênica e neuroprotetora aos neurônios. Para elucidar essa possível relação entre atividade física e a concentração dessa enzima específica, o objetivo do estudo foi verificar o efeito do nível de atividade física nas concentrações da enzima ADAM10 em idosos saudáveis e com DA. Participaram do estudo 29 hígidos e 28 idosos com DA. Para verificar o nível de atividade física os idosos utilizaram um acelerômetro e responderam ao questionário Baecke modificado para idosos. Além disso, foi aplicado um teste de rastreamento da função cognitiva e também, foram avaliados os sintomas depressivos dos sujeitos. Por meio de uma coleta sanguínea serão analisadas as concentrações de ADAM10. Resultados e Conclusão: Observou-se que nos dois grupos as concentrações de ADAM10 aumentavam conforme o aumento do nível de atividade física. Houve... / Abstract: It is known that physical activity can promote several changes in cognitive functions and today is regarded as a non-pharmacological form of treatment and prevention for Alzheimer's disease. One of the mechanisms that lead to these changes is the production of neurotransmitter uptake and which have a direct action on the central nervous system and, moreover, can be directly related to the modulation and production of biomarkers related to disease. Currently, the main postulates have recommended new diagnostic criteria and research in Alzheimer's disease (AD). Among the various examinations are biomarkers that currently are used solely for the purpose of research, but more and more are gaining space for clinical diagnosis. Among the biomarkers associated with AD there is a catalytic enzyme family of disintegrins and metalopeptidadse, ADAM 10 has among its various functions, the ability to cleave the amyloid precursor protein (APP) and promote the release of a substance and neurogenic neuroprotection to neurons. To elucidate this possible relationship between physical activity and the concentration of that specific enzyme, the study aimed to verify the effect of physical activity at concentrations of enzyme ADAM10 in healthy elderly with AD. The study included 29 healthy and 28 older people with AD. To check the level of physical activity using an accelerometer the elderly and answered the questionnaire Baecke modified for the elderly. In addition, a cognitive function screening test was also applied and evaluated the depressive symptoms of the subjects. By means of a blood collection ADAM10 concentrations are analyzed. Results and Conclusion: It was observed that in both groups the ADAM10 concentrations increased with increasing the physical activity level. There was a significant difference in the average level of physical activity, sedentary behavior, time of moderate / vigorous physical activity, Baeck questionnaire modified for the... / Mestre

Orientador: Classius de Oliveira / Coorientador: Guillermo S. Natale / Banca: Monica Jones Costa / Banca: Lucilene Regina Maschio / Resumo: Atualmente, Brasil é o maior consumidor mundial de herbicidas. Além, o cultivo de cana de açúcar é a prática agrícola com maios extensão no Brasil, acompanhada por o uso de herbicidas como atrazina (ATRZ). A metade de estes poluentes é distribuída pelo só, ar e lagunas, abarcando amplia diversidade de microhábitats. Os efeitos de ATRZ têm sido muito documentados em anuros. O objetivo deste trabalho tem como objetivo avaliar efeito do herbicida atrazina na pigmentação cutânea e hepática como novo biomarcador de efeito e exposição, assim como os parâmetros toxicológicos clássicos (efeitos subletais e letais) em girinos de R. schneideri e P. nattereri. Foram coletadas desovas nas proximidades da cidade de São Jose do Rio Preto e mantidas em condições controladas de laboratório, posteriormente foram acondicionadas e alimentadas (fotoperiodo 16:8; temperatura 25° C) ate alcançar o estádio de desenvolvimento 30 segundo Gosner. Posteriormente os girinos foram expostos durante 48 e 96 h á formulação SIPTRAN (50:100 gr ATRZ) em seis diferentes concentrações entre 1,5 - 25 mg ATRZ/L de acordo as referências bibliográficas. Dez girinos foram expostos por concentração usando três replicas por grupo exposto, além foi usada água de rede declorinada como controle negativo. Depois de concluídos os ensaios, foram estimadas as curvas dose-resposta e demais parâmetros toxicológicos para os dois tempos de exposição. Foram analisados efeitos letais (mortalidade), subletais (alterações na natação, crescimento, desenvolvimento, massa corporal, MNs e anormalidades nucleares e presencia de anormalidades morfológicas) e o novo biomarcador proposto: pigmentação extra-cutânea nos melanóforos e pigmentação hepática com contagem dos MMCs. Os dados foram analisados utilizando o método Probit, ANOVA e post hoc Dunnett, test-t e análises de componentes... / Abstract: Currently, Brazil is the world's largest consumer of herbicides. Besides, sugar cane cultivation is the agricultural practice with more extension in Brazil, accompanied by the use of herbicides as atrazine (ATRZ). Half of these pollutants is distributed in soil, air and lagoons, covering a wide variety of microhabitats. The effects of ATRZ have been widely documented in anurans. This study aims to evaluate the effect of ATRZ on extra cutaneus pigmentation and liver as a new biomarker of exposure and effect, as well as the classical toxicological parameters (sublethal and lethal effects) in tadpoles of R. schneideri and P. nattereri. Spawns were collected near the city of Sao Jose do Rio Preto, after preparation were maintained and fed under controlled laboratory conditions (photoperiod 16:8; temperature 25 °C) until reaching the development stage 30 described by Gosner. Later the tadpoles were exposed for 48 and 96 h to SIPTRAN formulation (50: 100 gr ATRZ) in six different concentrations between 1.5 to 25 mg ATRZ / L according references. Ten tadpoles were exposed for concentrations using three replicates per treatment group, in addition were used declorinated water as negative control. Finishing the test, the dose-response curves and other toxicological endpoints for the two exposure times were estimated. Lethal (mortality) and sublethal effects were analyzed (changes in swimming behavior, growth, development, body weight, MN and nuclear abnormalities and presence of morphological abnormalities) and the proposed new biomarker: extra cutaneous pigmentation in cutaneous melanophores and liver pigmentation with counting of MMCs. Data were analyzed using the Probit method, ANOVA and post-hoc Dunnett, t-test and principal components analysis. The LC50 value was 22.18 and 33.71 mg / L ATRZ in R. schneideri and P. nattereri, respectively after 96 h of exposure. The results showed ... / Mestre