• Refine Query
  • Source
  • Publication year
  • to
  • Language
  • 122
  • 96
  • 7
  • 4
  • 2
  • 2
  • 2
  • 2
  • 2
  • 2
  • 1
  • 1
  • 1
  • 1
  • 1
  • Tagged with
  • 263
  • 42
  • 40
  • 33
  • 33
  • 33
  • 31
  • 29
  • 28
  • 24
  • 23
  • 22
  • 20
  • 17
  • 16
  • About
  • The Global ETD Search service is a free service for researchers to find electronic theses and dissertations. This service is provided by the Networked Digital Library of Theses and Dissertations.
    Our metadata is collected from universities around the world. If you manage a university/consortium/country archive and want to be added, details can be found on the NDLTD website.
111

Uso de inóculo de fezes como substituição do conteúdo ruminal de bubalinos na técnica in vitro de produção de gases / Use of faeces as inoculum as alternative for buffalo rumen contents in the in vitro gas production technique

Simões, Nancy Rodrigues 17 February 2012 (has links)
Com o objetivo de estudar o uso de inóculo de fezes em substituição do conteúdo ruminal de bubalinos na técnica in vitro de produção de gases, este presente trabalho comparou as avaliações realizadas em três ensaios. Foram utilizados três bubalinos da raça Mediterrâneo, machos, adultos, castrados, fistulados no rúmen com média de peso vivo de 450 (± 18,7) kg. Estes animais receberam uma dieta basal, composta de silagem de milho (70%) e concentrado (30%). Estes animais foram os doadores dos 2 tipos de inóculos, que foram conteúdo ruminal (CR) e fezes. O primeiro ensaio realizado foi com alimentos concentrados: grão de milho, farelo de soja, farelo de trigo e farelo de algodão; o segundo ensaio foi com leguminosas forrageiras: alfafa (Medicago sativa L. ), estilosantes pioneiro (Stylosanthes macrocephala cv. Pioneiro), soja perene (Neonotonia wightii) e leucena (Leucaena leucocephala); e o terceiro e último ensaio foi realizado com gramíneas forrageiras: capim braquiarão (Brachiaria brizantha cv. Marandu), capim buffel (Cenchrus ciliaris L. cv. Biloela), estrela africana (Cynodon plectostachyus) e capim mombaça (Panicum maximum Jacq. cv. Mombaça). Os valores médios obtidos de produção potencial de gases em cada ensaio foram menores (P<0,05) para as amostras fermentadas com inóculos de fezes que com conteúdo ruminal, sendo respectivamente, para concentrados (140,23 e 194,08 mL.g-1MS), gramíneas (161,99 e 230,25 mL.g-1MS) e leguminosas (141,78 e 170,70 mL.gm-1MS). Conclui-se que inóculos de fezes não apresentam condições satisfatórias para substituição do inóculum com conteúdo ruminal para uso na técnica de produção in vitro de gases. / In order to study the use of faeces as inoculum as alternative for buffalo rumen contents in the in vitro gas production technique, the present work evaluations of three tests. We used three Mediterranean buffalos, male, adult, neutered, fistulated in the rumen, with an average live weight of 450 (± 18.7) kg. These animals received a basal diet composed of corn silage (70%) and concentrated (30%). These buffalo were the donors of the two types of inocula, rumen content (CR) and faeces. The first test was carried out with concentrate foods: corn grain, soybean meal, wheat bran and cottonseed meal, the second test was with legumes: alfalfa (Medicago sativa L. ), Pioneiro estilo (Stylosanthes macrocephala cv. Pioneiro) , perennial soybean (Neonotonia wightii) and leucaena (Leucaena leucocephala) and the third and last test was carried out with grasses: Marandu grass (Brachiaria brizantha cv. Marandu), buffel grass (Cenchrus ciliaris L. cv. Biloela), African Star grass (Cynodon plectostachyus) and Mombasa grass (Panicum maximum Jacq. cv. Mombasa). The average values of potential production of gas in each test were lower (P<0.05) for samples fermented with an inoculum of faeces with rumen contents, being respectively, for concentrates (140.23 and 194.08 mL.g-1MS), grasses (161.99 and 230.25 mL.g-1MS) and legumes (141.78 and 170.70 mL.g-1MS). It follows that fecal inoculum unsatisfactory condition for replacing the inoculum with rumen technique for use in the in vitro production of gases technique.
112

Hemograma, perfil bioquímico e proiteínas de fase aguda em bovinos e bubalinos submetidos a laparotomia exploratória, tratados ou não com fenilbutazona /

Saquetti, Carlos Henrique Camara. January 2010 (has links)
Orientador: José Jurandir Fagliari / Banca: Rafael Resende Faleiros / Banca: Delphim da Graça Macoris / Banca: José Dantas Ribeiro / Banca: Daniela Gomes da Silva / Resumo: Este estudo teve como objetivo geral comparar os efeitos da laparotomia exploratória e do uso da fenilbutazona em bovinos e bubalinos. Para isso foram avaliados o perfil bioquímico, o proteinograma e o hemograma de 28 animais dos quais 14 eram búfalas e 14 vacas, todas fêmeas não lactantes, distribuídas em quatro grupos - VT: vacas tratadas com fenilbutazona; VC: vacas controle; BT: búfalas tratadas com fenilbutazona e BC: búfalas controle. Os animais dos grupos VT e BT receberam dose única de 10 mg/kg de fenilbutazona, por via intravenosa, uma hora antes da cirurgia. Foram coletadas amostras de sangue antes da laparotomia (0h) e 1(1h), 6(6h), 12(12h), 24(24h), 48(48h), 72(72h), 96(96h) e 120 horas (120h) e 15(15d) e 30(30d) dias após a intervenção. Os valores de creatinina foram mais elevados nas búfalas, e não sofram alteração devido à cirurgia, ou ao tratamento. O tratamento com fenilbutazona aumentou a concentração sérica de HDL em vacas e búfalas. Dentre as proteínas de fase aguda, a concentração de ceruloplasmina se elevou em todos os grupos de 48 horas a 120 horas após a cirurgia. A concentração sérica de haptoglobina se elevou mais nos grupos das búfalas do que nas vacas. A hemopexina foi verificada apenas na espécie bubalina e apenas até o 5º dia. O tratamento com fenilbutazona não alterou a contagem de hemácias nem o volume globular. Todas as vacas e búfalas apresentaram neutrofilia 12 horas após a laparotomia. O teor de fósforo aumentou no grupo controle das búfalas (BC) e no grupo tratado (BT), às 72h e 96h, respectivamente. O magnésio se apresentou, no início do experimento (0h) e ao final (30d), significativamente maior nos grupos das búfalas (BT e BC). A laparotomia e ou o tratamento com fenilbutazona não interferiram nas concentrações de sódio, potássio e cálcio ionizado / Abstract: This study aims to compare the effect of exploratory laparotomy and treated with phenylbutazone in bovine and buffaloes. To pursue this purpose, biochemical profile, proteinogram and blood count cell tests were performed in 28 animals, of which 14 were buffaloes and 14 cows, all of then non-nursing, distributed in four groups - VT: cows treated with phenylbutazone; VC: control cows; BT: buffaloes treated with phenylbutazone and BC: control buffaloes. Animals from VT and BT received a single administration of 10 mg/kg of phenylbutazone, intravenously one hour before surgery. Blood samples were taken before laparotomy (0h) and 1(1h), 6(6h), 12(12h), 24(24h), 48(48h), 72(72h), 96(96h) e 120 horas (120h) e 15(15d) e 30(30d) days after surgery. Creatinine values were higher in buffaloes, and there were no changes, despite surgery or treatment. HDL showed different values in both species, due to surgical procedure. The use of phenylbutazone increased serum HDL in cows and buffaloes. Among acute phase proteins, serum haptoglobin showed higher values in buffaloes than in cows. Hemopexina was foundetected only in buffaloes and until the 5th day. Treatment with phenylbutazone did not change RBCs or globular volume values. Cows and buffaloes showed neutrophilia 12 hours after laparotomy. Phosphorus content increased in control buffaloes (BC) and in the treated buffaloes (BT) at 72h and 96h, respectively. Magnesium presented higher itself at the beginning of the experiment (0h) and end (30d) in buffaloes groups (BT and BC). Laparotomy or treatment with phenylbutazone did not changed sodium, potassium and calcium ionized values / Doutor
113

Efeito do ambiente térmico na fisiologia adaptativa de bubalinos / Effect of termal environment in the adaptive physiology of water buffaloes

Vilela, Reíssa Alves 29 January 2013 (has links)
O objetivo do estudo foi a avaliação dos mecanismos termorreguladores, baseada numa abordagem temporal em função de diferentes armazenamentos de calor, proporcionados por diferentes tipos de ambientes térmicos (com e sem radiação solar). Foram utilizadas 12 búfalas da raça Mediterrânea que foram submetidas a quatro experimentos durante o verão de 2010 a 2012 delineados para o comprimento dos objetivos específicos. Nos vários experimentos os parâmetros meteorológicos registrados foram: temperatura de bulbo seco, temperatura de bulbo úmido, umidade relativa do ar, velocidade do vento e temperatura de globo negro. Os parâmetros fisiológicos avaliados foram: temperatura retal, temperatura da base da cauda, temperatura da epiderme, temperatura de superfície do pelame, frequência respiratória e taxa de sudação. As análises estatísticas foram realizadas com auxílio do programa Statistical Analysis System, versão 9.1.3 (SAS Institute Inc., Cary, NC, USA), utilizando-se os procedimentos PROC MIXED. No experimento 1 que visou verificar as reações termorreguladoras ao ambiente aquecido em unidade biometeorológica, o aumento da temperatura do ar em ambiente controlado influenciou todas as variáveis fisiológicas ao longo do dia (P<0,01). O incremento na taxa de sudação durante o período de estresse térmico determinou a depleção na concentração plasmática de potássio (P=0,0051). No experimento 2que avaliou as reações termorreguladoras na presença de radiação solar direta averiguamos que houve influência da exposição ao sol sobre todas as variáveis fisiológicas ao longo do dia (P<0,01). O gradiente térmico favorável no período noturno atenuou os efeitos do estresse térmico não constatando o efeito da exposição a radiação solar direta sobre os constituintes sanguíneos. No experimento 3que objetivou quantificar a velocidade de aquisição de calor ao sol comparando-a posteriormente com a velocidade de dissipação do calor à sombra, constatamos que a exposição por uma hora ao sol incrementou a frequência respiratória em 189,24 % e a temperatura retal em 1,46 %, após o retorno a sombra, por uma hora, verificamos uma redução de 191,75 % e 0,57 %, respectivamente. No experimento 4avaliamos a dinâmica da termólise evaporativa e o balanço térmico de radiação e convecção em condições de radiação solar direta. À medida que reduz a temperatura radiante média, os animais passam a perder o calor armazenado por radiação, reduzem as perdas por polipnéia térmica ao passo que as perdas por sudação permanecem altas. / The aim of the study was to evaluate the thermoregulatory mechanisms, based on a temporal approach, in relation to different heat storages provided by different types of thermal environments (with and without solar radiation). Twelve Mediterranean buffalo heifers were submitted to four experiments during the summer of 2010 to 2012 outlined to achieve specific objectives. Environmental parameters dry bulb temperature; wet bulb temperature; relative humidity; winds speed and black globe temperature were measured. Physiological parameters rectal temperature; base of tail temperature; skin temperature; hair coat surface temperature; respiratory rate and sweating rate were measured. The statistical analysis were done with the assistance of the Statistical Analysis System, version9.1.3(SAS Institute Inc., Cary, NC, USA), using procedures UNIVARIATE,CORR, GLM and MIXED. The first experiment aimed to verify the thermoregulatory reactions of the warm environment in the climatic chamber. Increasing the air temperature in a controlled environment influenced all physiological variables throughout the day (P<0,01). The increase in the sweating rate during heat stress led to the depletion of plasma potassium (P=0,0051). In experiment 2, which assessed the thermoregulatory reactions in the presence of direct solar radiation, it was observed the influence of sun exposure on all physiological variables throughout the day (P<0.01). The favorable thermal gradient at night attenuated the effects of heat stress without identifying the effect of direct sun exposure on blood constituents. In experiment 3, that aimed to measure the heat acquisition rate under the sun subsequently comparing it with the speed of heat dissipation under the shade, it was observed that one hour exposure to the sun increased respiratory rate at 189,24 % and rectal temperature at 1,46 %. After returning the shade for one hour, it was found reductions of 191,75 % and 0,57 %, respectively. The Experiment 4 evaluated the dynamics of evaporative thermolysis and thermal balance of radiation and convection under conditions of direct solar radiation. Reducing the mean radiant temperature, the animals started to lose the stored heat by radiation, reduced losses by thermal polipneia while the losses by sweating remain high.
114

Estudo de provas microbiológicas e celulares em amostras de leite provenientes de fêmeas bubalinas (Bubalus bubalis) no Estado de São Paulo / Study of microbiological and cellular tests on milk samples from buffalo females (Bubalus bubalis) in State of São Paulo

Kapronezai, Josana 03 March 2004 (has links)
O presente trabalho teve como objetivo a análise microbiológica das amostras de leite de fêmeas bubalinas, a avaliação da quantidade de UFC/mL dos microrganismos isolados e a contagem de células somáticas/mL. Os quartos mamários foram submetidos ao teste de tamis e CMT e foram colhidas 262 amostras de leite de fêmeas bubalinas primíparas e pluríparas; para análise microbiológica, quantificação das UFC/mL e contagem de células somáticas/mL. A contagem das células somáticas foi realizada através da leitura em microscopia ótica dos esfregaços de leite. A leitura foi realizada utilizando-se a totalidade dos campos existentes no esfregaço de 1cm2. No teste do tamis, 99,6% das amostras apresentaram resultado negativo. No CMT, observamos resultado negativo em 88,2% das amostras; traços (8%), positivo 1+ (1,5%); positivo 2+ (1,15%); positivo 3+ (1,15%). A análise microbiológica apresentou amostras sem crescimento de microrganismos (75,6%); isolamento de Staphylococcus spp. (11,8%); Corynebacterium spp. (7,3%); Streptococcus spp, (3,1%) e crescimento de microrganismos associados (1,2%). A contagem total de células somáticas das amostras avaliadas apresentou mediana de 2300 células/mL de leite; a mediana da contagem de PMN e MN foi, respectivamente, 700 células/mL e 1500 células/ml de leite, com diferença estatisticamente significante (P<0,0001). As quantidades totais de células somáticas/mL e as quantidades de células polimorfonucleares e mononucleares nas amostras negativas ao exame microbiológico foram estatisticamente menores do que nas amostras que apresentaram isolamento de microrganismos. A mediana relativa às quantidade de UFC/mL foi de 550 UFC/mL para as amostras com isolamento de Corynebacterium spp.; 500 UFC/mL para as amostras com isolamento de Staphylococcus spp e 1100 UFC/mL para Streptococcus spp. ,sendo que não houve diferença estatisticamente significativa entre eles. Concluiu-se que a espécie bubalina, apresenta baixos índices de mastite; nas amostras com isolamento de microrganismos, o número de UFC/mL é pequeno.Existe um número de animais que apresenta resultado positivo no exame microbiológico do leite, sem contudo apresentar sinais de processo inflamatório. / The aim of the present study was the microbiological analysis of milk samples from female buffaloes, the amount evaluation of CFU/mL of the isolated microorganisms and the somatic cells counting/mL. The mammary quarters were submitted to strip cup test and CMT and 262 milk samples were colletected from buffalo cows to microbiological analysis, CFU/mL quantification and somatic cells counting. The somatic cells countings were obtained through optical microscopy reading of the milk smears, where all fields of the 1 cm2 smears area were considered. In the strip cup test, 99,6% of the samples had negative results. In the CMT, the negative results were observed in 88,2% of the samples; traces (8%), 1+ positive (1,5%), 2+ positive (1,15%) and 3+ positive (1,15%). The microbiological analysis resulted in samples with no microorganism growth (75,6%); Staphylococcus spp (11,8%); Corynebacterium spp (7,3%) and Streptococcus spp (3,1%) and associated microorganisms growth (1,15%). The total counting of somatic cells in the evaluated milk samples showed median of 2300 cells/mL; while PMN and MN counting median were 700 cells/mL and 1500 cells/mL respectivelly, with a significant statisticall difference (P< 0,0001). The total somatic cells counting/mL and the amount of PMN and MN cells in the microbiological negative samples were statistically smaller than the findings in the samples that showed microorganism isolation. Concerning the amount of CFU/mL, the median obtained for samples with Corynebacterium spp was 550CFU/mL; 500 CFU/mL for Staphylococcus spp samples and 1100 CFU/mL for Streptococcus spp results, with no statiscally significant difference between them. It follows that he buffalo species has a low rate of mastitis; the number of CFU/mL is small in the microbiological positive samples. There are a number of animals that despite presenting milk microbiological exam with positive results, showed no signs of inflamatory process.
115

Metabolismo ruminal e balanço de minerais em bubalinos com diferentes níveis de ingestão de fósforo / Rumen metabolism and the mineral balance in water buffaloes with different levels of the phosphorus intake

Souza, Nedilse Helena de 26 November 2004 (has links)
Quatro bubalinos adultos com fístulas ruminais foram utilizados com o objetivo de se estudar os efeitos da ingestão de níveis de fósforo sobre as características do metabolismo ruminal e digestão das rações. Foram avaliados os seguintes parâmetros: pH; concentração de amônia; volume e taxa de passagem do líquido ruminal; quantificação de minerais no conteúdo ruminal; digestibilidade com marcador (Cr2O3) e estimativa de excreção fecal de minerais. Os animais foram delineados em Quadrado Latino (4x4), com ingestão de quatro diferentes níveis de fósforo na dieta (8, 12, 15 e 18 gramas), mantendo-se a relação volumoso:concentrado foi de 85:15 e com o uso de cana de açúcar como único volumoso. Cada sub-período compreendeu 28 dias, sendo 14 de adaptação. Não houve influencia no pH,n a concentração de amônia, no volume e na taxa de passagem do líquido ruminal; nas concentrações de minerais no conteúdo ruminal (P, Ca, Mg, Na, K, S, Fe, Cu, Zn e Mn) e nos coeficientes de digestibilidade da matéria seca, fibra em detergente neutro, proteína bruta e energia bruta. Observou-se excreção linear de fósforo nas fezes em função ao fósforo ingerido da dieta, podendo ser estimada pela equação de regressão Y = 0,03 + 0,610 * X, onde Y é a quantidade de fósforo excretado nas fezes diariamente em g/kg0,75 e X é a quantidade de fósforo ingerido diariamente em g/kg0,75. / Four mature buffaloes fitted with rumen cannulas were used to study the effects of different levels of the phosphorus intake on the ruminal metabolism and the digestion in the diets. Ammonia concentration, pH, fluid and solid outflow rates, rumen volume; concentration of mineral in the ruminal content; digestibility and estimate of faecal output of minerals were determined. The animals were designed in Latin Square experiment (4x4) with each period of 28 d of duration. Treatments were applied four rations with different levels of P intake (8, 12, 15 e 18 grams). The proportion forage for concentrate was 85:15 with only using fresh chopped sugar cane. No differences were observed among the treatments in the rumen parameters evaluated and digestibility. Increasing in phosphorus intake resulted in simple linear regression equation Y = 0.03 + 0.610 * X, where P output daily (g (kg bodyweight)-0,75) was used as the dependent variable (Y) and P intake daily (g / kg-0,75) was used as the independent variable (X).
116

Conteúdo celular do leite bubalino proveniente de quartos mamários sadios e portadores de mastite /

Pardo, Renata Bonini. January 2007 (has links)
Orientador: Antonio Nader Filho / Banca: Hélio Langoni / Banca: Nilson Roberti Benites / Banca: Humberto Tonhati / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Resumo: Os exames de palpação, inspeção e teste da caneca de fundo escuro, bem como o California Mastitis Test (CMT) foram realizados em 735 quartos mamários de búfalas leiteiras pesquisa de alterações clínicas e subclínicas nos quartos e em suas respectivas secreções. Independentemente dos resultados encontrados, foram coletadas amostras de leite para análises microbiológicas e de contagem de células somáticas (CCS). O isolamento microbiológico foi realizado em ágar sangue de ovino 5% e em ágar MacConkey, com 72 horas de incubação em aerobiose a 37oC. Foram procedidas, a cada 24 horas, leitura e identificação dos isolamentos. A ocorrência de quadros de mastite clínica foi representada por um único caso (0,14%) entre os 735 quartos mamários analisados, ocorrendo na fase inicial da lactação e envolvendo microrganismos de origem ambiental (Morganella morganii, Enterobacter aerogenes). Foram considerados quadros de mastite subclínica aqueles com resultados positivos ao CMT acompanhados de exame microbiológico positivo. A freqüência observada de quadros de mastite subclínica entre os 734 quartos mamários estudados foi de 20,03%, dos quais isolou-se principalmente microrganismos contagiosos. Os resultados negativos ao CMT predominaram durante todo o estudo (69,07%), independente da fase de lactação ou estação do ano consideradas, tendo sido observados resultados positivos do exame microbiológico em 57,58% das amostras CMT negativas. Foi elevada a freqüência de microrganismos classificados como contagiosos entre as amostras de leite analisadas, independente da estação do ano e da fase de lactação, entre os quais prevaleceu o Corynebacterium spp. (47,67%), entre os 579 microrganismos pertencentes a 19 gêneros bacterianos crescidos em cultura pura ou em associação. Considerando-se a falta de homogeneidade entre as variâncias, as contagens de células... (Resumo completo, clicar acesso eletrônicio abaixo) / Abstract: A total of 735 mammary quarters from buffalo cows were submitted to inspection, palpation, strip cup test and California Mastitis Test (CMT) in order to diagnose clinical and subclinical mastitis. Independent of the observed results, milk samples were collected from each mammary quarter to microbiological exams and automatic somatic cell counts (SSC). Milk samples were inoculated in 5% ovine blood agar and MacConkey agar and incubated for 72 hours under 37oC and aerobic condition. Growth observations and identifications were performed every 24 hours. One (0,14%) out of 735 mammary quarters studied presented clinical mastitis. It occurred in first stage of lactation (0 to 60th day post calving) and environmental microorganisms were isolated (Morganella morganii, Enterobacter aerogenes). Mammary quarters presenting positive results to CMT and microbiological exams were considered as subclinical mastitis cases and these represented 20,03% among 734 studied samples. CMT negative results were the most frequent observed during the study (69,07%), independent of lactation stage or season of the year considered. Among these CMT negative milk samples, 57,58% were positive in microbiological exams. There was a high occurrence of contagious microorganisms among the 579 identified bacteria from 19 different genus, isolated in pure or in association. Corynebacterium spp. was the most prevalent (47,67%), in every lactation stage or season of the year. Considering the absence of a normal distribution, somatic cell counts were submitted to a logarithmic transformation, log2(CCS/100)+3, originating the transformed somatic cell count (TSCC). There were statistically significant differences between TCCS means from milk samples with positive (2,23) and negative (1,71) results to CMT. Such differences were also observed in milk... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
117

Efeitos da uréia em dietas com duas proporções volumoso: concentrado no metabolismo ruminal e na produção de metano avaliados pela técnica de fermentação ruminal ex-situ (micro-rúmen) em búfalos e bovinos / Effect of urea in diets with two ratio forage:concentrate in ruminal metabolism and methane production evaluated by technique of ex situ ruminal fermentation (micro-rumen) in buffaloes and cattle

Mariane Ceschin Ernandes 25 July 2014 (has links)
No presente trabalho estudou-se o metabolismo ruminal e a fermentação com produção de gases e de metano avaliadas pela técnica de ex-situ (micro-rúmen) em duas espécies de ruminantes domésticos, o bovino e o bubalino, visando contribuir com a importante área da nutrição de ruminantes na geração de dados para realização de uma alimentação mais eficiente e econômica desses animais. Para tanto, o trabalho está apresentado em forma de capítulos com uma Introdução sobre o tema, uma revisão da literatura e o Capítulo 3 redigido na forma de um artigo científico para futura publicação. Na revisão da literatura (Capítulo 2) são apresentadas discussões sobre os principais trabalhos publicados em literatura especializada em importantes aspectos, subdivididos nos seguintes tópicos: Diferenças fisiológicas no processo digestivo entre bovinos e bubalinos; a proteína na nutrição de ruminantes; a uréia como fonte proteica; fermentação ruminal e seus produtos e fatores que influenciam a fermentação ruminal. Ressalta-se, porém, que há escassez de trabalhos publicados comparando as duas espécies de ruminantes nessa área, especialmente com o uso de uréia em dietas. Como os ruminantes possuem a capacidade de transformar fonte de nitrogênio não proteico em proteína de alto valor biológico há necessidade de explorar essa vantagem da espécie para diminuir os custos de produção sem afetar a produção desses animais. Há vantagens e desvantagens do uso da uréia na alimentação animal, mas é necessário elucidar as diferenças que existem nas duas espécies quando utilizamos essa fonte de nitrogênio. Neste estudo foi possível caracterizar o perfil da fermentação ruminal das duas espécies estudadas. A produção de metano pelos ruminantes é apontada como fator contribuidor para o efeito estufa, e neste trabalho avaliamos esses parâmetros tanto de metabolismo como de fermentação existentes nessas espécies e a influência da uréia nesses sistemas. A utilização de uréia em uma dieta com 50% de volumoso promoveu maior consumo de matéria seca e extrato etéreo e maior produção de ácido propiônico com menos relação acético:propiônico, não influenciando nos coeficientes de digestibilidade dos nutrientes, na dinâmica ruminal e no pH em relação às dietas com 50% de volumoso sem uréia e com 80% de volumoso com uréia. Além disso, essa última dieta promoveu redução da produção de metano em relação à dieta contendo 50% de volumoso e 50% de concentrado com nitrogênio proteico com farelo de soja, modulando de forma a evidenciar sua importância na nutrição de ruminantes, com redução de custos de produção e dos efeitos deletérios causados pelo gás metano ao meio ambiente. / We have studied the ruminal metabolism fermentation with gas production and methane measured by ex-situ technique (micro-rumen) in two species of domestic ruminants, cattle and buffaloes to contribute to the important area of ruminant nutrition in order to become more efficient and economical feeding of these animals. To this end, the work is presented in the form of chapters with an introduction on the topic, a literature review and Chapter 3 written as a scientific paper for future publication. In the literature review (Chapter 2) discussions of important papers published in specialized literature is divided into the following topics: cattle vs buffaloes - physiological differences; protein in ruminant nutrition; urea as the protein source; ruminal fermentation and its products; factors that influence the rumen fermentation,. It is noteworthy, however, that there is scarcity of studies comparing the two ruminant species in this area, especially with the use of urea in diets. As ruminants have the ability to transform source of non-protein nitrogen in protein of high biological value there is need to explore this kind of advantage to reduce production costs without affecting the total production. There are advantages and disadvantages of the use of urea in animal feed, but it is necessary to elucidate the differences between the two animal species when using this source of nitrogen. In this study it was possible to characterize the profile of ruminal fermentation of both species. Methane production by ruminants is implicated as contributing factor to the greenhouse effect, and in this paper we have evaluated these parameters as fermentation metabolism in buffalo and cattle and the influence of urea on feeding systems. The use of urea in a diet with 50% forage promoted greater dry matter and fat intake and increased propionic acid production with less acetic:propionic ratio, but no influence was observed in the digestibility of nutrients, ruminal pH and rumen dynamics when compared to diets with 50% forage without urea and 80% of forage with urea. Moreover, this latest diet promoted reduction of methane production in relation to the diet containing 50% forage and 50% concentrate without urea, modulating in order to highlight its importance in ruminant nutrition, reducing costs production and the damaging effects to the environment by emission of methane gas.
118

Sincronização da ovulação para a inseminação artificial em tempo fixo (IATF) durante a estação reprodutiva desfavorável em fêmeas bubalinas / Synchronization of ovulation for fixed-time artificial insemination (FTAI) during the off breeding season in buffalo.

Roberto Mendes Porto Filho 29 September 2004 (has links)
Foram comparadas diferentes doses de eCG e hCG associadas a dispositivos intravaginais de progesterona (DIV), para avaliar o crescimento folicular e a ovulação, bem como a taxa de prenhez após a IATF e a funcionalidade do CL 12 dias após a sincronização em búfalas, durante a estação reprodutiva desfavorável. Para tanto, foram realizados cinco experimentos. Nos experimentos 1, 2 e 4, os grupos foram estabelecidos em função da ciclicidade dos animais, avaliada pelas concentrações plasmáticas de progesterona mediante colheita de sangue por punção da veia jugular no D-10 e no D0. Nos experimentos 3 e 5, os grupos foram estabelecidos em função da condição corporal e da ordem de parto. Em todos os experimentos as búfalas receberam um DIV associado a 2mg de Benzoato de Estradiol (BE) no D0. No D9 o DIV foi retirado, e procedeu-se à administração de 0,150mg de prostaglandina (PGF). No experimento 1, as búfalas do G1 (Controle, n=9) e do G2 (eCG, n=10) receberam 1500UI de hCG no D11; o G2 recebeu também 500UI de eCG no D-9; a IATF foi realizada no D12. Nesse experimento, o diâmetro máximo do folículo dominante (DMFD) foi de 12,6 ± 3,0 e 13,4 ± 1,7mm para o G1 e o G2, respectivamente (P>0,05); o diâmetro do folículo ovulatório (DFO) foi de 14,9 ± 2,9 (G1) e de 14,0 ± 1,6mm (G2; P>0,05); o intervalo entre a retirada do DIV e a ovulação (IROV) foi de 78,0 ± 12 (G1) e 68,0 ± 9,0h (G2; P>0,05); a taxa de ovulação (TO) foi de 44,4 (G1) e 70,0% (G2; P> 0,05). A área do CL (ACL) foi de 31,6 ± 19,9 (G1) e de 29,9 ± 9,7mm2 (G2; P>0,05); a concentração plasmática de P4 (P4) foi de 1,3 ± 1,4 (G1) e 2,0 ± 1,6ng/ml (G2; P>0,05); a taxa de prenhez (TP) foi de 22,2 (G1) e 60% (G2; P=0,11). No experimento 2, as búfalas do G1 (1500 UI de hCG; n=21) e do G2 (1000UI de hCG; n=21) receberam 500UI de eCG no D9; no D11, o G1 recebeu 1500UI de hCG e o G2 1000UI de hCG. Os resultados desse experimento são relatados a seguir: DMFD de 12,4 ± 2,3 (G1) e 12,2 ± 2,5mm (G2; P>0,05); DFO de 12,6 ± 2,3 (G1) e 12,5 ± 2,7mm (G2; P>0,05); IROV de 67,7 ± 18,1 (G1) e 72,8 ± 16,7h (G2; P>0,05); TO de 67,7 (G1) e 67,7% (G2; P>0,05); ACL de 24,8 ± 9,2 (G1) e 28,3 ± 17,2mm2 (G2; P>0,05); P4 de 2,3 ± 1,4 (G1) e 2,4 ± 1,3ng/ml (G2; P>0,05). No experimento 3, os animais foram tratados de forma idêntica àqueles do experimento 2, porém as búfalas do G1 (n=83) e do G2 (n=91) receberam a IATF no D12. Nesse experimento, foi obtida TP de 53 (G1) e de 53,8% (G2; P>0,05). No Experimento 4, as búfalas do G1 (n=10) receberam 500UI e as do G2 (n=11) 400UI de eCG; os dois grupos receberam 1000UI de hCG no D11. Esse experimento teve como resultados: DMFD de 13,2 ± 1,4 (G1) e 13,8 ± 1,8mm (G2; P>0,05); DFO de 13,7 ± 1,1 (G1) e 14,2 ± 1,5mm (G2; P>0,05); IROV de 71,1 ± 11,7 (G1) e 75,0 ± 5,5h (G2; P>0,05); TO de 70,0 (G1) e 72,7% (G2; P>0,05); ACL de 28,4 ± 8,6 (G1) e 31,6 ± 10,3mm2 (G2; P>0,05); P4 de 2,7 ± 1,2 (G1) e 3,3 ± 2,9ng/ml (G2; P>0,05). No experimento 5 (G1/n=54; G2/n=51) foi adotado o mesmo protocolo do experimento 4, porém as búfalas receberam a IATF no D12. Esse experimento resultou em TP de 42,6 (G1) e 43,1% (G2; P>0,05). Assim, foi possível concluir que as concentrações de 400UI de eCG e de 1000UI de hCG, associadas ao DIV, foram suficientes para induzir o crescimento folicular, a ovulação e a prenhez em búfalas durante o período reprodutivo desfavorável. / Different dosage of eCG and hCG were compared in association to progesterone intravaginal device (IVD) in female buffalo during the off breeding season with the purpose of evaluating the follicular growing and ovulation as well as the pregnancy rate after FTAI and functionality of the CL, twelve days after the synchronization. For this, 5 experiments were done. For the establishments of the groups in the experiments 1,2 and 4 blood samples were collected for the analysis of plasmatic concentrations of P4 on D -10 and D0 to verify the cyclicity. In the experiments 3 and 5 the groups were established due body condition score and number of calving. In all the experiments the buffaloes received a IVD associated with 2mg of estradiol benzoate (EB) on D0. On D9 the IVD was extracted and it was followed by the administration of 0,150mg of prostaglandin (PGF). In the exp. 1 the buffaloes of G1 (control, n=9) and G2 (eCG, n=10) received 1500IU of hCG on D11. On G2 was administrated 500IU of eCG on D9. The FTAI was done on D12. The maximun diameter of dominant follicle (MDDF) was 12.6 ± 3.0 and 13.4 ± 1.7mm to the G1 and G2, respectively (P>0,05). The diameter of the ovulatory follicle (DOF) was 14.9 ± 2.9 (G1) and 14.0 ± 1.6mm (G2; P>0,05). The interval between the device withdrawn and ovulation (DWO) was 78.0 ± 12.0 (G1) and 68.0 ± 9.0h (G2; P>0,05). The ovulation rate (OR) was 44.4 (G1) and 70.0% (G2; P>0,05). The CL area (CLA) was 31.6 ± 19.9 (G1) and 29.9 ± 9.7mm2 (G2; P>0,05). The plasmatic concentration of P4 (P4) was 1.3 ± 1.4 (G1) and 2.0 ± 1.6ng/ml (G2; P>0,05). The pregnancy rate (PR) was 22.2 (G1) and 60% (G2; P=0,11). In the exp. 2 the buffalo females of G1 (1500IU of hCG; n=21) and G2 (1000IU of hCG; n=21) received 500IU of eCG on D9. On D11, G1 received 1500IU of hCG and G2 1000IU of hCG. The MDDF was 12.4 ± 2.3 (G1) and 12.2 ± 2.5mm (G2; P>0,05), the DOF was 12.6 ± 2.3 (G1) and 12.5 ± 2.7mm (G2; P>0,05), DWO was 67.7 ± 18.1 (G1) and 72.8 ± 16.7h (G2; P>0,05), the OR was 67.7 (G1) and 67.7% (G2; P>0,05), the CLA was 24.8 ± 9.2 (G1) and 28.3 ± 17.2mm2 (G2; P>0,05) and the P4 was 2.3 ± 1.4 (G1) and 2.4 ± 1.3ng/ml (G2; P>0,05). The exp. 3 was identical to exp.2, although the animals of G1 (n=83) and G2 (n=91) received the FTAI on D12. The PR was 53.0 (G1) and 53,8% (G2; P>0,05). In exp. 4, the animals of G1 (n=10) received 500IU and G2 (n=11) 400IU of eCG. Both groups received 1000IU of hCG on D11. The MDDF was 13.2 ± 1.4 (G1) and 13.8 ± 1.8mm (G2; P>0,05), the DOF was 13.7 ± 1.1 (G1) and 14.2 ± 1.5mm (G2; P>0,05), the DWO was 71.1 ± 11.7 (G1) and 75.0 ± 5.5h (G2; P>0,05), the OR was 70.0 (G1) and 72.7% (G2; P>0,05), the CLA was 28.4 ± 8.6 (G1) and 31.6 ± 10.3mm2 (G2; P>0,05) and the P4 was 2.7 ± 1.2 (G1) and 3.3 ± 2.9ng/ml (G2; P>0,05). In exp. 5 (G1/n=54; G2/n=51) was done the same protocol in the exp. 4, although the animals received the FTAI on D12. The PR was 42.6 (G1) and 43.1% (G2; P>0,05). Dosage of 400IU of eCG and 1000IU of hCG, associated to IVD for FTAI were enough to induce follicular growing, ovulation and pregnancy in buffalo females during the off breeding season.
119

Eficiência reprodutiva de búfalas leiteiras submetidas a protocolos de IATF à base de P4/E2 e eCG durante as estações reprodutivas favorável e desfavorável / Reproductive performance of dairy buffaloes submitted to TAI protocols based on P4/E2 and eCG during breeding and nonbreeding seasons

Bruno Moura Monteiro 17 April 2015 (has links)
Os objetivos da tese foram comparar a dinâmica folicular e luteínica (Experimento 1), bem como a eficiência reprodutiva (Experimento 2) de búfalas leiteiras submetidas a protocolos de IATF à base de progesterona/estrógeno (P4/E2) e eCG durante as estações reprodutivas favorável (ERF; maio, junho e julho) e desfavorável (ERD; novembro, dezembro e janeiro) do ano. No Experimento 1 foram utilizadas 51 búfalas leiteiras de uma propriedade e no Experimento 2, 351 búfalas leiteiras de 5 propriedades. Para comparar o efeito das ER, cada propriedade teve semelhante número de animais submetidos à IATF nas respectivas ERF e ERD, tanto no Experimento 1 (n=25 vs. n=26) quanto no Experimento 2 (n=168 vs. n=183). Todas as propriedades se localizavam na região do Vale do Ribeira, Estado de São Paulo. Em dias aleatórios do ciclo estral (D-12; 16:00 h), todas as búfalas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1 g de P4 (iP4; Sincrogest&reg;, Ourofino Agronegócio) mais 2,0 mg de benzoato de estradiol i.m. (Sincrodiol&reg;, Ourofino Agronegócio). No D-3 (16:00 h), as fêmeas receberam 0,53 mg de PGF2&#945; i.m. (Cloprostenol, Sincrocio&reg;, Ourofino Agronegócio) e 400 UI de eCG i.m. (Novormon&reg; MSD Saúde Animal), seguido de remoção do dispositivo de progesterona. No D-1 (16:00 h), 10 &micro;g de acetado de buserelina (GnRH, Sincroforte&reg; Ourofino Agronegócio) foram administrados i.m. A IATF foi realizada 16 horas após a administração de GnRH (D0; 8:00 h). No D0 foram determinados o intervalo de dias em lactação (DEL) e o escore de condição corporal das fêmeas (ECC; 1-5). Avaliações ultra-sonográficas (Chison D600Vet, China) foram realizadas no Experimento 1 para determinar: diâmetro do folículo dominante entre a retirada do iP4 e a IATF (&#216;FD), o diâmetro do folículo ovulatório (&Oslash;FO), o momento da ovulação, a dispersão das ovulações, a presença e o diâmetro do corpo lúteo (&#216;CL) após a ovulação. No Experimento 2, determinaram-se a taxa de ciclicidade (presença de corpo lúteo no D-12 e/ou no D-3); o diâmetro do folículo dominante nos D-3 e D0 (&#216;FD); a taxa de ovulação e diâmetro do corpo lúteo 10 dias após a IATF (&#216;CL D+10); os diagnósticos de gestação aos 30 (P/IA 30 d) e 45 dias (P/IA 45 d) após a IATF, além da taxa de mortalidade embrionária (ME) entre 30 e 45 dias, a mortalidade fetal (MF) entre 45 dias e o nascimento e a perda gestacional (PG) entre 30 dias e o nascimento. As variáveis contínuas foram apresentadas como média e erro padrão da média (média±EPM) e as frequências como porcentagem [% (n/n)]. A comparação entre as variáveis foi realizada por análise de variância (ANOVA), por meio do programa SAS&reg;. Foi considerada diferença quando P < 0,05. No Experimento 1, observou-se que a dinâmica ovariana não foi influenciada pelas respectivas ERF e ERD para as seguintes variáveis: &#216;FD (0 h 10,3±0,4 vs. 9,9±0,5 mm; 24 h 11,8±0,5 vs. 12,0±0,4; 48 h 12,8±0,5 vs. 13,2±0,4; e 60 h 13,8±0,6 vs. 13,1±0,5; P=0,80); &#216;FO (14,3±0,4 vs. 14,2±0,3 mm; P=0,94); momento da ovulação (76,5±1,9 vs. 72,0±2,5 h; P=0,85); dispersão das ovulações (24 |- 48 h 0,0 vs. 0,0%; 48 |- 60 h 12,5 vs. 37,5%; 60 |- 72 h 41,7 vs. 33,3%; 72 |- 84 h 41,7 vs. 25,0%; 84 |- 96 h 4,2 vs. 0,0%; e 96 |- 108 h 0,0 vs. 4,2%; P=0,18) e &#216;CL (D+6 17,3±0,5 vs. 16,9±0,4; D+10 21,5±0,6 vs. 18,4±0,5; e D+14 20,6±0,6 vs.19,9±0,6; P=0,06). No Experimento 2, pôde-se observar que apesar das búfalas apresentarem semelhança em DEL (111,1±8,8 vs. 144,3±8.6 dias; P=0,27) e ECC (3,3±0,0 vs. 3,3±0,0; P=0,41) nas respectivas ERF e ERD, houve diferença nas taxas de ciclicidade [76,2 (128/168) vs. 42,6% (78/183); P=0,02]. Nenhuma das outras respostas diferiu entre as ERF e ERD, respectivamente: &#216;FD D-3 (9,6±0,2 vs. 9,8±0,2 mm; P=0,35); &#216;FD D0 (13,1±0,2 vs. 13,2±0,2 mm; P=0,47); taxa de ovulação [86,9 (146/168) vs. 82,9% (152/182); P=0,19]; &#216;CL D+10 (19,0±0,3 vs. 18,4±0,3 mm; P=0,20); P/IA 30 d [66,7 (112/168) vs. 62,7% (111/177); P=0,31]; P/IA 45 d [64,8 (107/165) vs. 60,2% (106/176); P=0,37]; ME [1,8 (2/111) vs. 3,6% (4/110); P=0,95]; MF [21,9 (18/82) vs. 8,0% (7/87); P=0,13]; e PG [23,8 (20/84) vs. 12,1% (11/91); P=0,13]. Foi possível concluir que búfalas leiteiras apresentam semelhantes respostas ovarianas ao protocolo de sincronização e equivalente eficiência reprodutiva nas ERF e ERD do ano, quando submetidas a programas de IATF à base de P4/E2 e eCG. / This thesis aimed to compare the follicular and luteal dynamics (Experiment 1) and reproductive efficiency (Experiment 2) of dairy buffaloes submitted to TAI protocols based on progesterone/estrogen (P4/E2) and eCG during the breeding (On-BS; May, June and July) and nonbreeding seasons (Off-BS; November, December and January). In Experiment 1, 51 dairy buffalo of one farm were used, and in Experiment 2, 351 dairy buffaloes of 5 farms were used. To compare the effect of BS, each property had similar number of animals submitted to TAI in each, both in Experiment 1 (n = 25 vs. n = 26) as in Experiment 2 (n = 168 vs. n = 183). All properties were located in the Vale do Ribeira, State of São Paulo, Brazil. On random days of the estrous cycle (D-12; 4:00 PM), all buffaloes received an intravaginal device containing 1 g of P4 (Sincrogest&reg;, Ourofino Agronegócio) plus 2.0 mg of estradiol benzoate im (Sincrodiol&reg;, Ourofino Agronegócio). On D-3 (4:00 PM), females received 0.53 mg of PGF2&#945; im (Cloprostenol, Sincrocio&reg;, Ourofino Agronegócio) and 400 IU of eCG im (Novormon&reg;, MSD Animal Health), followed by removal of progesterone device. On D-1 (4:00 PM), 10 mg of buserelin acetate (GnRH Sincroforte&reg;, Ourofino Agronegócio) were administered im. The TAI was performed 16 hours after application of GnRH (D0; 8:00 AM). At the beginning of each protocol (D-12), it was recorded the number of days in milk (DIM) and body condition score of females (BCS, 1-5). Ultrasonography (Chison D600Vet, China) were performed in Experiment 1 to determine: the diameter of the dominant follicle between withdraw of iP4 and TAI (&#216;DF), the diameter of the ovulatory follicle (&#216;OF), the time of ovulation, the dispersion of ovulation, and the presence and diameter of the corpus luteum (&#216;CL) after ovulation. In Experiment 2, was determined cyclicity rate (the presence of corpus luteum in the D-12 and/or D-3), diameter of the dominant follicle in the D-3 and D0 (&#216;DF), ovulation rate, diameter of the corpus luteum 10 days after artificial insemination (&#216;CL D+10); pregnancy rates to 30 (P/AI 30 d) and 45 days (P/AI 45 d) after TAI, embryonic mortality (EM) between 30 and 45 days, fetal mortality (FM) between 45 days and birth, and pregnancy loss (PL) between 30 days and birth. Continuous variables were presented as mean and standard error of the mean (mean±SEM) and frequencies as a percentage [% (n/n)]. The comparison between variables was performed through analysis of variance (ANOVA) using the SAS&reg; program. Difference was considered when P < 0.05. In Experiment 1, it was found that the ovarian dynamics was not influenced by the respective On-BS and Off-BS for the following variables: &#216;DF (0 h 10.3±0.4 vs. 9.9±0.5 mm; 24 h 11.8±0.5 vs. 12.0±0.4; 48 h 12.8±0.5 vs. 13.2±0.4; and 60 h 13.8±0.6 vs. 13.1±0.5; P = 0.80); &#216;OF (14.3 ± 0.4 vs. 14.2 ± 0.3 mm; P = 0.94); timing of ovulation (76.5 ± 1.9 vs. 72.0 ± 2.5 h; P = 0.85); dispersion of ovulations (24 |- 48 h 0.0 vs. 0.0%; 48 |- 60 h 12.5 vs. 37.5%; 60 |- 72 h 41.7 vs. 33.3%; 72 |- 84 h 41.7 vs. 25.0%; 84 |- 96 h 4.2 vs. 0.0%; and 96 |- 108 h 0.0 vs. 4.2%; P = 0.18) and &#216;CL (D+6 17.3±0.5 vs. 16.9±0.4; D+10 21.5±0.6 vs. 18.4±0.5; and D+14 20.6±0.6 vs.19.9±0.6; P = 0.06). In Experiment 2, it was observed that despite the similarity of DIM (111.1 ± 8.8 vs. 144.3 ± 8.6 d, P = 0.27) and BCS (3.3 ± 0.0 vs. 3.3 ± 0.0; P = 0.41) on respective On-BS Off-BS, buffalo females showed different cyclicity rates [76.2 (128/168) vs. 42.6% (78/183); P = 0.02]. None of the other answers differ between On-BS and Off-BS respectively: &#216;DF D-3 (9.6 ± 0.2 vs. 9.8 ± 0.2 mm; P = 0.35); &#216;DF D0 (13.1 ± 0.2 vs. 13.2 ± 0.2 mm; P = 0.47); ovulation rate [86.9 (146/168) vs. 82.9% (152/182); P = 0.19]; &#216;CL + D 10 (19.0 ± 0.3 vs. 18.4 ± 0.3 mm, P = 0.20); P/AI d 30 [66.7 (112/168) vs. 62.7% (111/177); P = 0.31]; P/AI d 45 [64.8 (107/165) vs. 60.2% (106/176); P = 0.37]; EM [1,8 (2/111) vs. 3.6% (4/110); P = 0.95]; FM [21.9 (18/82) vs. 8.0% (7/87); P = 0.13]; and PL [23.8 (20/84) vs. 12.1% (11/91); P = 0.13]. It was concluded that dairy buffaloes have similar responses to ovarian synchronization protocol and equivalent reproductive efficiency during OnBS and OffBS, when subjected to TAI programs based on P4 / E2 and eCG.
120

FGF básico e seus receptores em relação à atividade proliferativa na placenta bubalina em diferentes fases da gestação / Basic FGF and its receptors in relation to proliferative activity in the buffalo placenta during gestation

Laura Pacheco Artoni 19 August 2005 (has links)
O bFGF (fator de crescimento fibroblástico básico) é um dos fatores envolvidos na organogênese placentária. O fator participa da regulação dos processos de angiogênese, de crescimento e desenvolvimento placentário e de proliferação e diferenciação das células placentárias. A homeostase tecidual requer balanço entre proliferação e morte celular. A identificação de células em atividade proliferativa pode ser feita pela detecção do antígeno Ki-67 presente no núcleo das células em proliferação. Objetivou-se estudar a distribuição espaço-temporal do bFGF e dois de seus receptores, FGFR1 e FGFR2, na placenta bubalina correlacionando-a à proliferação celular. Foram utilizadas treze placentas de fêmeas da espécie bubalina em diferentes fases da gestação, divididas em quatro grupos. Grupo 1 (n=4), placentas de 3 meses; grupo 2 (n=4), 5 meses; grupo 3 (n=1), 8 meses e grupo 4 (n=4), 9,5 meses. Para a detecção da proteína do bFGF, FGFR1 e FGFR2 bem como do antígeno Ki-67 foram realizados testes de imuno-histoquímica. Para tal, bloqueou-se a peroxidase endógena com peróxido de hidrogênio PA a 1% em metanol e as reações inespecíficas com soro eqüino. A incubação com os anticorpos primários anti-Ki-67, anti-bFGF, anti-FGFR1 e anti-FGFR2 foi feita a 4°C por vinte e quatro horas e a incubação com o anticorpo secundário universal por vinte minutos em temperatura ambiente. Foi utilizado um complexo avidina-biotina para amplificar a reação e para revelação utilizou-se Nova Red&reg;. A análise dos resultados foi feita em microscópio óptico em aumento de 400 vezes através do sistema de imagens KS-400. Utilizou-se o programa Graph Prism 4 para análise estatística dos resultados. Foi detectada a expressão da proteína do bFGF e seus receptores no núcleo e citoplasma de células do estroma e epitélio maternos e fetais da placenta bubalina de maneira tempo-dependente ao longo da gestação. A atividade proliferativa apresentou perfil decrescente do início até o final da gestação. A correlação observada entre a expressão do bFGF e do Ki-67 nas células do epitélio materno e fetal e estroma materno foi positiva (r = 0,282, r = 0,313 e r = 0,469, respectivamente; p < 0.05); entre FGFR1 e Ki-67 a correlação foi mais elevada para as células do estroma e epitélio maternos e estroma fetal (r = 0,739, r = 0,511 e r = 0,358; p<0,0001) e negativa para o epitélio fetal (r = -0.211); FGFR2 e Ki-67 a correlação foi negativa para as células epitélio materno (r = -0,027) e positiva para o epitélio e estroma fetal (r = 0,384 e r = 0,268; respectivamente; p < 0.05). Pode-se concluir a partir dos resultados obtidos que existe uma correlação positiva entre a expressão da proteína do bFGF de seus receptores 1 e 2 e o antígeno Ki-67. No entanto, essa correlação é dependente do tipo celular e da fase de gestação analisadas, e aponta para um possível envolvimento do bFGF e seu receptor 2 na proliferação do trofoblasto enquanto o receptor 1 modularia a ação de outro agente proliferativo no epitélio materno e estromas materno e fetal. / The bFGF (basic Fibroblast Growth Factor) is involved in the placental organogesis as a potent angiogenic molecule and is related to the growing and development of the placenta and proliferation of placental cells. Tissue homeostasis requires a balance between cell proliferation and cell death. The identification of proliferating cells can be made through the detection of Ki-67 nuclear antigen, present in these cells. The aim of this study was to evaluate the space-temporal expression of bFGF and two of its receptors, FGFR1 and FGFR2, in buffalo placenta in correlation to proliferative activity. In this study 13 buffalo placentas in different gestational phases were collected and divided into four groups. Group 1 (n=4), three moth-old placentas; group 2 (n=4), five month-old; group 3 (n=1), eight month-old and group 4 (n=4), 9.5 month-old. For the localization of bFGF, FGFR1, FGFR2 proteins and Ki-67 antigen, immunohistochemical assays were carried out. For that purpose, endogenous peroxidase activity was blocked with 1% Hydrogen Peroxide PA in methanol and non-specific binding with equine serum (1:10). Incubations with primary antibodies anti-Ki-67, anti-bFGF, anti-FGFR1 and anti-FGFR2 were made for 24 hours at 4°C. Incubation with universal secondary antibody (1:200) was made for 20 minutes in moist chamber at room temperature. Avidin/biotinylated horseradish ABC Elite Kit was used to amplify and Nova Red&reg; to develop the immunostaining. Slides were observed under a light microscope at 400 times magnification and photographed with KS-400 image program. Graph Prism 4.0 program was used for statistical analysis. Expression of the bFGF and its receptors proteins was detected in the nucleus and cytoplasm of buffalo placental cells during gestation. Placental proliferative activity was evaluated through the expression of Ki-67 antigen. The correlation observed between bFGF and Ki-67 expression in the maternal and fetal epithelium and maternal stroma cells was positive (r = 0,282, r = 0,313 e r = 0,469, respectively; p < 0.05). Between FGFR1 and Ki-67 the correlation was higher for maternal epithelial and stroma and fetal stroma cells (r = 0,739, r = 0,511 e r = 0,358, respectively; p<0,0001) and negative for fetal epithelium (r = -0.211). FGFR2 and Ki-67 correlation observed was negative for maternal epithelium cells (r = -0,027) and positive for fetal epithelium and stroma cells (r = 0,384 e r = 0,268; respectively; p < 0.05). We conclude that bFGF and its receptors 1 and 2 are positively correlated to the expression of the Ki-67 antigen, depending on cell type and gestational period. The results suggest that bFGF and its receptor 2 may be involved in the modulation of trophoblast proliferation, whereas FGFR1 may modulate proliferation in the maternal epithelium and fetal and maternal stroma, probably through the binding to another growth factor (s).

Page generated in 0.1604 seconds