Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-08T12:58:17Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3353141 bytes, checksum: 13cb9ec91eb861205d128514b24d68a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T12:58:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3353141 bytes, checksum: 13cb9ec91eb861205d128514b24d68a6 (MD5) Previous issue date: 2004-04-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As terapias periodontais têm como objetivos não apenas estacionar a progressão da doença, pela interrupção da ação inflamatória da placa bacteriana, mas também possibilitar a restauração das estruturas perdidas, especialmente quanto à manutenção da arquitetura e estado funcional dessas. Assim, os tratamentos tidos como regenerativos ou reconstrutivos apresentam como finalidade a formação de novos tecidos de inserção (cemento, ligamento periodontal e osso alveolar) na área envolvida pela periodontopatia. Exemplos de terapias periodontais regenerativas incluem enxertos ósseos e regeneração tecidual guiada (RTG). O objetivo deste trabalho foi avaliar a matriz óssea bovina mineralizada como substituto ósseo na reparação alveolar da mandíbula de cães e sua associação com uma membrana de colágeno seguindo a técnica da regeneração tecidual guiada (RTG). Para tal, foram utilizados 48 cães, divididos em três grupos. Defeitos de aproximadamente 6 x 5 x 5 mm foram criados entre as raízes do quarto pré-molar direito na superfície vestibular do osso alveolar. Em um grupo, esses defeitos foram totalmente preenchidos com o xenoenxerto, em outro grupo, o defeito foi totalmente preenchido com o xenoenxerto e coberto pela membrana, enquanto no último grupo, permaneceram sem tratamento, sendo utilizados como controle. Foram realizadas avaliações clínicas diárias por uma semana, assim como radiográficas logo após a cirurgia e aos 7, 14, 21, 30, 42, 60, 90 e 120 dias. A cicatrização da ferida cirúrgica ocorreu de forma satisfatória e semelhante entre os cães dos três grupos. O exame radiográfico revelou uma reparação mais lenta no grupo controle, onde aos 120 dias o defeito ainda foi visualizado, em comparação ao grupo tratado com a matriz óssea bovina mineralizada, que aos 60 dias não foi mais observado e em comparação ao grupo tratado com a associação matriz óssea bovina mineralizada e membrana de colágeno, que aos 90 dias a falha não foi mais visualizada. Portanto, pode-se concluir que os materiais utilizados apresentam características desejáveis como biocompatibilidade e propriedade osteocondutora, sendo alternativas viáveis no auxílio da reparação óssea alveolar. Foi coletado, de dois animais de cada grupo, material para biópsia do sítio operado aos 7, 14, 21, 30, 42, 60, 90 e 120 dias e foram realizadas avaliações histológicas. No grupo controle, o processo de formação óssea se iniciou aos 14 dias e evoluiu progressivamente até os 120 dias, quando não foi mais distinguível o limite entre a periferia da falha e o novo osso formado. No grupo tratado somente com a matriz óssea bovina mineralizada, logo ao sétimo dia observou-se abundante celularidade ao redor do material e o início do processo de reparação, que aos 60 dias já havia preenchido todo o defeito produzido. Além disso, nenhuma reação do tipo corpo estranho foi observada e, portanto, pode-se concluir que o material utilizado apresenta características desejáveis a um substituto ósseo como biocompatibilidade e propriedade osteocondutora, sendo uma alternativa para o auxílio da reparação óssea alveolar. No grupo tratado com a associação matriz óssea bovina mineralizada e membrana de colágeno, observou-se o processo de reparação mais avançado em relação ao grupo controle até os 42 dias. Depois, observou-se um processo inflamatório crônico, até os 120 dias, levando a uma estagnação dessa reparação óssea. Apesar disso, nenhuma reação do tipo corpo estranho foi observada e, portanto, pode-se concluir que os materiais utilizados apresentam biocompatibilidade, característica desejável a substitutos ósseos e que a membrana, a partir dos 42 dias, provoca reação indesejável. / The periodontal therapies have as objectives not only to stop the progression of the disease, by the interruption of the inflammatory action of the bacterial plate, but also to make possible the restoration of the lost structures, especially as for the maintenance of the architecture and the functional state of those. Thus, the obtained treatments as regenerative or reconstrutivos present as a purpose the formation of new insertion tissues (cement, periodontal linking and alveolar bone) in the involved area by the periodontopaty. Examples of regenerative periodontal therapies include bone grafts and guided tissue regeneration (GTR). The objective of this work was to evaluate the mineralized bovine bone matrix as a substitute bone in the alveolar repairing of the jaw of dogs and its association with a collagen membrane a following the technique of the guided tissue regeneration (GTR). For such, 48 dogs were used, divided in three groups. Defects of approximately 6 x 5 x 5 mm were created among the roots of the fourth right premolar in the vestibular surface of the alveolar bone. In a group, those defects were totally filled out with the xenograft, and in another group, the defect was totally filled out with the xenograft and covered by the membrane, while in the last group, they stayed without treatment, being used as control. Daily clinical evaluations were accomplished for one week, as well as radiographic soon after the surgery and to the 7, 14, 21, 30, 42, 60, 90 and 120 days. The cicatrization of the surgical wound happened in a satisfactory and similar way among the dogs of the three groups. The radiographic exam revealed a slower repairing in the control group, where to the 120 days the defect was still visualized, in comparison with the group treated with the mineralized bovine bone matrix, than to the 60 days was not observed anymore and in comparison with the group treated with the mineralized bovine bone matrix and collagen membrane, than to the 90 days the failure was not visualized anymore. Therefore, it can be concluded that the used materials presented desirable characteristics as biocompatibility and property osteoconductor, being viable alternatives in the aid of the alveolar bone repairing. It was vicollected, from two animals of each group, material for biopsy of the operated ranch at the 7, 14, 21, 30, 42, 60, 90 and 120 days and histological evaluations were accomplished. In the control group, the bone formation process began at the 14 th day and it developed progressively until the 120 th day, when the limit between the periphery of the flaw and the new formed bone was not more distinguishable. In the group treated only with the mineralized bovine bone matrix, right at seventh it was observed abundant cellularity around the material and the beginning of the repairing process, that it had already filled out the whole produced defect at the 60 th day. Besides, no reaction of the strange body type was observed and, therefore, it can be concluded that the used material presents desirable characteristics to a substitute bone as biocompatibility and property osteoconductor, being an alternative for the aid of the alveolar bone repairing. In the group treated with the mineralized bovine bone matrix and collagen membrane, a more advanced repairing process was observed in relation to the control group until the 42 th day. Then, a chronic inflammatory process was observed, until the 120 th day, taking it to a repairing bone stagnation. In spite of that, no reaction of the strange body type was observed and, therefore, it can be concluded that the used materials present biocompatibility, desirable characteristic to substitute bone and that the membrane, starting from the 42 th day, provokes undesirable reaction.

Os métodos de tratamento para a obesidade em cães e gatos focam na restrição calórica, seja restringindo a ingestão de alimento ou alimentando o animal com dietas hipocalóricas. Entretanto, esses métodos frequentemente falham, sendo necessárias estratégias alternativas para promover a perda de peso. O objetivo desse estudo foi investigar as diferenças na microbiota fecal entre animais magros e obesos e determinar se a castração e/ou a perda de peso estão associadas com mudanças na população microbiana. No primeiro experimento, a composição da microbiota fecal foi avaliada nos gatos magros inteiros, magros castrados e obesos castrados, antes e depois da perda de peso. Os gatos obesos foram submetidos a seis semanas de restrição energética e apresentaram redução na massa gorda após a perda de peso (P<0,001), embora o peso corporal não tenha mudado (P>0,05). Firmicutes, seguido de Bacteroidetes foram os filos predominantes em todos os grupos. O grupo dos magros castrados tiveram o perfil de bactérias que era esperado para os obesos, com maior abundância de Firmicutes e menor de Bacteroidetes (P<0,05). Não foram observadas diferenças entre os grupos magros inteiros e obesos castrados. A população microbiana dos gatos obesos mostrou poucas alterações com a perda de peso. No segundo experimento, o teste foi realizado quando os cães estavam magros, após consumo ad libitum para promover o ganho de peso e após a perda de peso. As seguintes concentrações séricas foram analisadas: glicose, colesterol, triglicerídeos, albumina, creatinina, fosfatase alcalina (FA), alanina aminotransferase (ALT), proteínas totais (PT), insulina e leptina. As amostras de fezes foram analisadas para determinar a abundância de Bacteroidetes e Firmicutes. As concentrações de triglicerídeos, colesterol, albumina, FA, ALT e PT foram maiores (P<0,05) nos cães obesos quando comparados aos magros. Bacteroidetes foi mais abundante (P<0,001) nos magros e Firmicutes não diferiu entre os grupos (P>0,05). Após a perda de peso, os níveis de colesterol e PT e a abundância de Bacteroidetes permaneceram inalteradas estatisticamente. Conclui-se então que, nos modelos testados, há diferenças na microbiota fecal entre os grupos dos estudos realizados. Entretanto, no estudo com os gatos a obesidade pareceu não influenciar o crescimento das diferentes populações de microorganismos. / Treatment methods for obesity in dogs and cats focus on calorie restriction, either by restricting the calorie intake of the animal, or by feeding energy diluted diets. However, these methods often fail, requiring additional strategies to promote weight loss. The objective of this study was to investigate differences in the gut microbiota between lean and obese animals and determine whether neutering and/or weight loss are associated with changes in the microbial populations. In the first experiment, the composition of the faecal microbiota was evaluated in lean intact, lean neutered and obese neutered cats, before and after weight loss. The obese cats were submitted to six weeks of energy restriction and showed less fat body mass after weight loss (p<0.001), although the body weight has not changed (P>0.05). Firmicutes followed by Bacteroidetes were the predominant bacterial phyla in all groups. The lean neutered cats had a bacterial profile of what one would expect from the obese cats, with greater abundance (P<0.05) of Firmicutes and lower abundance (P<0.05) of Bacteroidetes. There were no significant differences between lean intact and obese neutered. The microbe populations of obese cats showed very few changes with weight loss. In the second experiment, testing was performed when the dogs were lean, after ad libitum feeding to promote weight gain and after weight loss. Serum concentrations were analyzed: glucose, cholesterol, triglycerides, albumin, creatinine, alkaline phosphatase (ALP), alanine aminotransferase (ALT), total proteins (TP), insulin and leptin. Faecal samples were analyzed to determine the abundances of Bacteroidetes and Firmicutes. Triglycerides, cholesterol, albumin, PA, ALT and TP were greater (P<0.05) in obese dogs when compared to the lean. The abundance of Bacteroidetes was greater (P<0.001) in the lean group and the phylum Firmicutes showed no differences among the groups (P>0.05). After weight loss, the levels of cholesterol and TP and the abundance of Bacteroidetes remained unchanged statistically. In conclusion, differences in the faecal microbiota were observed among the groups of both studies. However, in the study with cats, obesity seems not to influence the growth of diverse populations of microrganisms.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-05-11T16:05:45Z No. of bitstreams: 1 Barbara Maria Nascimento de Oliveira Produção... 2016.pdf: 2363764 bytes, checksum: ec48ade14eccf109aecb436eec7cd66a (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2016-05-11T16:05:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Barbara Maria Nascimento de Oliveira Produção... 2016.pdf: 2363764 bytes, checksum: ec48ade14eccf109aecb436eec7cd66a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-11T16:05:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barbara Maria Nascimento de Oliveira Produção... 2016.pdf: 2363764 bytes, checksum: ec48ade14eccf109aecb436eec7cd66a (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / INTRODUÇÃO. A interleucina 7 (IL-7) é uma citocina pleiotrópica produzida principalmente por células estromais da medula óssea, células epiteliais tímicas e intestinais. IL-7 e que promove o desenvolvimento de linfócitos T e B e diferenciação de células T memória, especialmente CD4+. Por isso, diversos autores têm estudado a capacidade de IL-7 promover a restauração da população de linfócitos em situações de linfopenia e resposta imune de memória. Cães que desenvolvem leishmaniose visceral e recebem tratamento especfico apresentam cura clínica. No entanto, após a interrupção do tratamento, a maioria dos animais exibe recaída da doença, mesmo na ausência de reinfecção. É possível que esse fenômeno esteja associado a uma dificuldade de estabelecimento de linfócitos T de memória específicos para Leishmania em cães. Em nosso laboratório, tentativas prévias foram realizadas para produzir a IL-7 canina em Escherichia coli, no entanto, o rendimento da proteína biologicamente ativa foi pequeno. OBJETIVO. Por isso, resolveu-se avaliar a viabilidade de produzir IL-7 do sistema baculovírus-células de inseto. MATERIAL E MÉTODOS. No presente trabalho, uma construção de DNA foi concebida contendo uma sequência de nucleotídeos que codificam o peptídeo sinal da proteína GP64 do baculovírus da Autographa californica (AcMNPV), a IL-7 canina (proteína madura) com códons otimizados para a tradução em Trichoplusia ni, um espaçador com 23 aminoácidos e uma cauda de seis histidinas. A construção de DNA elaborada foi sintetizada quimicamente, inserida em um plasmídeo de clonagem (pUC57-GP64caIL-7), subclonada em um plasmídeo carreador (pFastBac1- GP64caIL-7), adequado para o sistema baculovirus-célula de inseto, e transferida para o cromossoma artificial do baculovírus recombinante (bacmídeo). RESULTADOS. A produção de IL-7 recombinante canina (rcaIL-7) em células de inseto infectadas com baculovírus recombinante foi otimizada. Em seguida, a rcaIL-7 foi produzida em células High-five cultivadas em suspensão utilizando multiplicidade de infecção (MOI) de 5 e tempo de infecção (TOI) de 48 h. A proteína recombinantes foi purificada por cromatografia de afinidade em Sepharose-níquel, obtendo-se um rendimento médio de 5,5 mg por litro de cultivo. CONCLUSÃO. RcaIL-7 purificada, avaliada a 40 ng/mL, mostrou-se capaz de promover a proliferação de células mononucleares de sangue periférico de cães sadios, sem estímulo prévio ou concomitante, indicando que a proteína foi produzida biologicamente ativa. Futuros estudos serão realizados para avaliar a capacidade imunomoduladora da rcaIL-7 em cães e determinar a utilidade dessa citocinas no tratamento de enfermidades caninas, como por exemplo, na leishmaniose visceral canina. / INTRODUCTION. The interleukin 7 is a pleiotropic cytokine produced mainly by bone marrow stromal cells, thymus and intestinal epithelial cells. IL-7 promotes the development of T and B limphocytes and differentiation T cells to memory cells, especially T CD4+ cells. For these reasons, several authors have studied the ability of IL- 7 to promote restoration of the lymphocyte population in cases of lymphopenia and memory imune responses. Dogs which develop visceral leishmaniasis and are treated with specific drugs develop only transient clinical cure. After treatment withdrawal, most animals show disease relapse, even in the absence of reinfection. One possible explanation for the lack of control of the infection after treatment in dogs is a difficulty to develop/maintain specific memory T cells. Therefore, it is possible that effective treatments for canine visceral leishmaniasis be developed by manipulating the immune system. Previously, in our laboratory, it was attemped to produce recombinant canine IL- 7 (rcaIL-7) in Escherichia coli, however there was a low yield of biologically active protein. OBJECTIVE. In the current project, the baculovírus-insect cell system was evaluated to produce rcaIL-7. MATERIAL AND METHODS. In this study, a construction of DNA was designed to encode nucleotides of Autographa californica GP64 signal peptide, canine IL-7 (mature protein) with optimized codons for Trichoplusia ni, a 23-amino acid spacer and a six histidine tail. The DNA construct was chemically synthesized, inserted into a cloning plasmid (pUC57-GP64caIL-7), subcloned into a carrier plasmid (pFastBac1-GP64caIL-7), suited to the baculovirus-insect cell expression system, and transfered to an artificial chromosome of the recombinant baculovirus (bacmid). RESULTS. Recombinant protein expression was optimizatized, then, the rcaIL-7 was produced in a cell culture in suspension using multiplicity of infection (MOI) 5 and time of infection (TOI) 48 hours. Subsequently rcaIL-7 was purified by Nickel Sepharose-Affinity chromatography, obtaining an average yield of 5.5 mg per liter of culture. CONCLUSION. The purified recombinant rcaIL-7 at 40 ng/mL was able to induce prolifereation of peripheral blood mononuclear cells of heath adult dog, suggesting it was biologically active. Given the results, the rcaIL-7 may be used in further studies to assess its ability to modulate canine immune system, that would be useful for the development immunotherapy

Foram conduzidos três experimentos com o objetivo de avaliar a palatabilidade, o coeficiente de digestibilidade aparente (CDA) dos nutrientes e da energia bruta (EB) , a energia metabolizável (EM), o balanço de cálcio (Ca) e fósforo (P), o pH urinário e as características fecais de cães adultos alimentados com dietas contendo farelo de arroz integral (FAI), suplementadas ou não com complexo enzimático (CE), ou farinha de penas hidrolisada (FPH), processada ou não com protease e lipase. O experimento 1 avaliou o efeito da inclusão de 20 e 40% de FAI, em substituição a farinha de trigo (FT), sobre a primeira escolha e a relação de consumo (RC) das dietas pelo método de livre escolha com três comparações de A vs. B (controle vs FAI 20; controle vs FAI 40 e FAI 20 vc FAI 40). Além disso, foram realizados dois testes de digestibilidade e metabolizabilidade para avaliar três níveis de FAI (experimento 2) ou de FPH (experimento 3). Os resultados do experimento 1 indicaram que os cães preferiram a dieta contendo 20% de FAI em relação a dieta controle (P<0,10) e não apresentaram preferência específica entre as demais comparações (P>0,10). No experimento 2, foi observado que o aumento do nível de FAI na dieta reduziu linearmente os CDA dos nutrientes e da EB e a EM (P<0,05). A adição do CE, sobre as dietas contendo FAI, não teve efeito sobre nenhuma das variáveis analisadas (P>0,05). A análise de regressão permitiu estimar os CDA da matéria seca (MS), proteína bruta (PB), extrato etéreo (EE) e EB em 60,5%; 74,8%; 88,4%, 70,8% e o coeficiente de metabolizabilidade aparente (CMA) da energia (66,4%) do FAI, respectivamente. A inclusão de FAI não afetou o pH urinário, mas causou desbalanço na relação Ca:P. A EM do FAI foi estimada em 3440 kcal/kg de MS. No experimento 3, a adição de protease e lipase, associada a baixa temperatura e pressão do digestor, aumentou o CDA e o CMA da energia de 67% para 77,4% e de 56,7% para 66,6%, respectivamente (P<0,05), e disponibilizou cerca de 280 kcal de ED/kg de MS a partir da pena. A EM da FPH foi estimada em 2486 kcal/kg de MS. Os ingredientes testados possuem valor nutricional satisfatório para cães, embora alguns ajustes devam ser considerados. / Three experiments were conducted to evaluate the palatability, apparent digestibility coefficient (ADC) of nutrients and gross energy (GE), the metabolizable energy (ME), the calcium (Ca) and phosphorus (P) balance, urinary pH and fecal characteristics of dogs adults fed diets containing rice bran (RB), supplemented with enzyme complex (EC), or hydrolyzed feather meal (HFM), processed or not with protease and lipase. The first experiment evaluated the effect of adding 20 and 40% of RB, replacing wheat flour (WF) on the first choice and the intake ratio (IR) of diets by the method of free choice with three comparisons A vs. B (control vs. RB 20, control vs. RB 40 and RB 20 vc. RB 40). In addition, we performed two tests of digestibility and metabolizable to evaluate three levels of RB (experiment 2) or HFM (experiment 3). The results of experiment 1 indicated that the dogs preferred the diet containing 20% of RB compared to control diet (P<0.10) and showed no specific preference between the other comparisons (P>0.10). In experiment 2, we observed that the increased level of RB in the diet decreased linearly the ADC nutrients and GE and MS (P<0.05). The addition of the EC, on diets containing RB, had no effect on any of the variables (P>0.05). The regression analysis allowed us to estimate the ADC of dry matter (DM), crude protein (CP), ether extract (EE) and GE in 60.5%, 74.8%, 88.4%, 70.8% and the apparent metabolizable coefficient (AMC) of energy (66.4%) of the RB, respectively. The inclusion of RB did not affect urinary pH, but caused an imbalance in the Ca:P ratio. The ME of RB was estimated at 3440 kcal / kg DM. In Experiment 3, the addition of protease and lipase, associated with low temperature and pressure of the digester, increased energy ADC and AMC from 67% to 77.4% and from 56.7% to 66.6%, respectively (P<0.05), and provided about 280 kcal DE/kg DM from the feather. The ME of HFM was estimated at 2486 kcal/kg DM. The ingredients have tested nutritional value suitable for dogs, although some adjustments should be considered.

Submitted by Maykon Nascimento (maykon.albani@hotmail.com) on 2015-09-09T20:26:32Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Pessoas em situacao de rua e seus caes fragmentos de uniao em historias de fragmentacao.pdf: 1314509 bytes, checksum: cc0e086963ae43681f2081ec0e7ccf4d (MD5) / Approved for entry into archive by Elizabete Silva (elizabete.silva@ufes.br) on 2015-09-10T23:34:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Pessoas em situacao de rua e seus caes fragmentos de uniao em historias de fragmentacao.pdf: 1314509 bytes, checksum: cc0e086963ae43681f2081ec0e7ccf4d (MD5) / Made available in DSpace on 2015-09-10T23:34:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Pessoas em situacao de rua e seus caes fragmentos de uniao em historias de fragmentacao.pdf: 1314509 bytes, checksum: cc0e086963ae43681f2081ec0e7ccf4d (MD5) Previous issue date: 2015 / CAPES / O interesse pelo relacionamento entre humanos e cães tem sido crescentemente refletido em produções científicas, apesar destas ainda se mostrarem incipientes no contexto latino-americano, e, por conseguinte, no brasileiro. Nestes termos, quando se toma como foco o relacionamento específico entre cães e pessoas em situação de rua, a incipiência se mostra ainda mais notória, apesar de se tratar de fenômeno que abarca questões interessantes, tanto de cunho individual quanto social e de políticas públicas. Diante disto, a realização do presente estudo se justificou por contribuir com a elucidação da temática, haja vista que teve por objetivo geral: investigar, apontar e compreender relacionamentos estabelecidos por pares que se caracterizem por pertencerem às espécies em questão e por fazerem das ruas espaços para estabelecimento de suas rotinas. Sendo estes critérios de seleção de participantes somados a idade mínima de 18 anos, foram entrevistadas 12 pessoas que nas ocasiões se encontravam em logradouros públicos dos municípios de Vitória, Serra e Vila Velha. Para guiar as entrevistas, foi utilizado roteiro semiestruturado com o intuito de coletar: dados sociais e econômicos dos participantes; conhecer aspectos dos relacionamentos interpessoais dos participantes; acessar relatos que dissessem respeito a partes das histórias de vida de moradores de rua que envolvessem relacionamento com cães; e por fim, recolher informações acerca do uso de serviços de assistência à população de rua, seja na presença ou na ausência do(s) cão(es). Em adição, foram utilizados dados provenientes de conversa informal e voluntária entre a pesquisadora e três funcionárias do Serviço Especializado em Abordagem Social do município de Vitória. A partir daí, os dados coletados foram organizados em cinco grandes itens, nos quais foram detalhadamente analisados e discutidos. Estes itens são: Caracterização sociodemográfica e econômica dos participantes; Caracterização geral dos relacionamentos; Concepções dos participantes acerca dos cães em suas vidas; Repercussões individuais e sociais do relacionamento; e “Sobre pessoas em situação de rua e cães: o "último vínculo"?”. Diante da análise destes, então, tornou-se possível inferir que o relacionamento entre humanos e cães, apesar de manter semelhanças que, por vezes, fazem com que sejam comparados ou equiparados a amizades ou a relacionamentos familiares, se trata de um tipo a parte. Além disto, quando o humano do par homem-cão se encontra em situação de rua, algumas peculiaridades se fazem bastante evidentes, dentre as quais a dificuldade de afastamento do animal, quando em situações momentâneas (por exemplo, em ocasiões de deslocamentos pelas cidades) ou duradouras (como quando por motivos de idas a instituições de abrigamento), em que não é possível tê-lo junto. Por fim, aponta-se como ponderável a recorrente colocação de que o cão seria o único e/ou último vínculo da pessoa em situação de rua com que convive, já que não raramente os participantes mencionaram rearranjos relacionais com humanos posteriores ao início da situação em questão. / Interest in the relationship between humans and dogs has been increasingly reflected in scientific production, although researches are still insufficient in the Latin American context, and therefore in Brazil. Accordingly, when focusing on the specific relationship between dogs and homeless persons, the insufficiency is even more apparent, even though it is a phenomenon that raises interesting issues of both individual and social nature and public policy. Therefore, this study is justified by its contribution to elucidate the issue, given that its overall objective was: to investigate, identify and understand relationships established by pairs of humans and dogs that have the streets as the main environment in which their routines are based on. These criteria were used for the selection of participants, besides a minimum age of 18 years, and the interviews were carry out with 12 people who were in public places of the cities of Vitória, Serra and Vila Velha. Open-ended questions and a semi-structured interview were used in order to: collect socioeconomic data of the participants; understand aspects of interpersonal relationships of participants; access stories about parts of the life stories of homeless involving relationship with dogs; and finally, gathering information about the use of support services to the homeless population, either in the presence or absence of dogs. In addition, data from informal and voluntary conversation between the researcher and three employees of Specialized Social Approach of the city of Vitória was used. Then, the data collected was divided into five major items, which were thoroughly analyzed and discussed. These items are: Socio-demographic and economic characterization of the participants; General characterization of relationships; Views of participants about the dogs in their lives; Individual and social repercussions of the relationship; and "About homeless and dogs: the" last bond"?". After the analysis it was possible to conclude that the relationship between humans and dogs, despite maintaining similarities that sometimes cause them to be compared or equated with friendships or family relationships, is of a different kind. Furthermore, when the human in the human-dog pair is homeless, some peculiarities are quite obvious, such as difficulty of animal separation, whether momentary (e.g. when they wander through the cities) or lasting (e.g. when they go to homeless shelters); when it is not possible to take the animal along with them. At last, it is important to highlight the statement that the dog may be the only and/or last bond that the homeless person maintains, considering that some participantes mentioned rearrangements in their relathionships after they began living in the streets.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Maurílio Figueiredo (maurilioafigueiredo@yahoo.com.br) on 2015-01-28T18:30:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_AvaliaçãoVacinaTerapêutica.pdf: 4719587 bytes, checksum: fbf50068d5dc813bd5c3fd46d7b45a88 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-01-28T19:37:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_AvaliaçãoVacinaTerapêutica.pdf: 4719587 bytes, checksum: fbf50068d5dc813bd5c3fd46d7b45a88 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-28T19:37:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_AvaliaçãoVacinaTerapêutica.pdf: 4719587 bytes, checksum: fbf50068d5dc813bd5c3fd46d7b45a88 (MD5) Previous issue date: 2013 / A leishmaniose visceral (LV) é uma das doenças mais negligenciadas no mundo, que afeta principalmente os países mais pobres. Epidemias urbanas de LV são observadas em várias cidades do Brasil e a doença tem sido verificada como infecção oportunista em pacientes com AIDS. Estima-se que a infecção HIV/L. infantum aumenta o risco em 100 a 2.320 vezes de se desenvolver uma LV grave. Atualmente, diversos são os relatos do surgimento de cepas resistentes do parasito aos fármacos convencionais. Sendo assim, o desenvolvimento de novas estratégias profiláticas/terapêuticas (imunofármacos) contra a doença se faz necessário e urgente. Neste contexto, muitos modelos animais experimentais já foram avaliados e o cão, se destaca como um dos melhores modelos experimentais para o estudo da LV humana (LVH) bem como seu emprego em ensaios pré-clínicos, pois apresenta características clínico-patológicas e uma história natural de doença extremamente semelhantes à LVH ativa e grave. Dessa forma, nosso estudo buscou avaliar a estratégia de tratamento empregando uma vacina terapêutica composta por antígenos totais de L. braziliensis associada ao adjuvante MPL (vacina LBMPL) para LVH empregando cães sintomáticos, naturalmente infectados por L. infantum. Assim, 16 cães infectados foram subdivididos em dois grupos experimentais: um grupo que recebeu como imunoterapia o adjuvante monofosforil lipídeo A apenas, sendo considerado grupo controle (MPL; n=6) e outro que recebeu como imunoterapia a vacina composta por antígenos de L. braziliensis associada ao adjuvante MPL (LBMPL n=10). Os animais foram submetidos a um esquema imunoterapêutico composto por 3 séries de tratamento, cada série de 10 doses com concentrações crescentes do antígeno vacinal (60μg – 300μg de antígeno protéico + 5μg - 25μg de MPL (dias 1-5) e / 300μg Ag + 25μg MPL (dias 6-10) 1ª série / 300μg Ag + 25μg MPL 2ª e 3ª séries) sob a via subcutânea com intervalo de 10 dias de descanso entre cada série. Os cães foram avaliados antes de serem tratados (T0) e após 15 (T15), 30 (T30) e 90 (T90) dias do tratamento sob os aspectos hemato-bioquímicos, imunológicos, clínicos e parasitológicos. Nossos principais resultados revelaram que a imunoterapia com a vacina LBMPL foi capaz de restabelecer e normalizar as principais alterações hematológicas (eritrócitos, hemoglobina, hematócrito e plaquetas) e bioquímicas (uréia, AST ou TGO, fosfatase alcalina, bilirrubina, e proteína total) decorrentes da LVC e presentes antes do tratamento. Além disso, cães imunotratados com a vacina LBMPL responderam na avaliação ex vivo, com aumento de linfócitos T CD3+ e suas subpopulações (T CD4+ e T CD8+), redução de linfócitos B CD21+, redução na razão T CD4+/T CD8+, aumento da razão LT/LB, aumento de células NK CD5-CD16+ e aumento de monócitos CD14+ circulantes como principais biomarcadores celulares de sucesso terapêutico no sangue periférico. Já no contexto das avaliações in vitro, animais submetidos à vacinoterapia com LBMPL desenvolveram forte memória imunológica antígeno-específica, capaz de induzir elevada atividade linfoproliferativa frente ao estímulo com antígeno solúvel de L. infantum (ASLi) acompanhado por reconhecimento preferencial de células T CD4+ e T CD8+-ASLi específicas. Interessantemente, foi também observado aumento tanto de linfócitos T CD4+IFN-+ e T CD8+IFN-+ bem como redução de linfócitos T CD4+ IL-4+ e T CD8+ IL-4+ após estimulação com ASLi e aumento na produção/secreção de citocinas pró-inflamatórias como TNF- e redução na produção de citocinas imunomodulatórias como IL-10 por células mononucleares do sangue periférico (CMSP); citocina esta, responsável pela imunopatogênese da LV grave. Estes achados caracterizam perfil de resistência a infecção por Leishmania e resposta positiva ao tratamento nos cães imunotratados com a vacina terapêutica LBMPL. De forma surpreendente, em relação aos sinais clínicos sugestivos de LVC, os animais imunotratados com LBMPL apresentaram redução drástica na intensidade e na quantidade de sinais/sintomas clínicos da LV, aumento da massa corporal além de redução da esplenomegalia avaliada clinicamente e por ultrassom, fatores estes intimamente associados ao sucesso terapêutico na doença humana. Somado-se a isso, a vacina LBMPL promoveu ainda uma redução da carga parasitária, avaliada aqui pela PCR em Tempo Real (qPCR), na medula óssea, baço e pele nos cães infectados, sendo até mesmo possível observar em alguns animais ausência de parasitismo nestes órgãos. Os resultados obtidos no presente estudo, confirmam e reafirmam a indicação do cão naturalmente infectado com L. infantum, como modelo experimental pré-clínico de altíssimo valor na leishmaniose visceral. Além disto, nossos resultados permitem também sugerir o uso da imunoterapia com a vacina terapêutica LBMPL como uma potencial proposta de tratamento na leishmaniose visceral canina e/ou humana. / ABSTRACT: Visceral leishmaniasis (VL) is one of the most neglected diseases in the world, affecting mostly the poorest countries. Urban epidemics of VL are observed in several cities in Brazil and the disease has been seen as an opportunistic infection in HIV patients. It is estimated that, HIV/L. infantum co-infection increases the risk by 100-2320 times to develop a severe VL. Currently, several studies have addressed the rise of resistant strains of the parasite to conventional drugs. Thus the development of new prophylactic/therapeutic (immunological agents) strategies against the disease is necessary and urgent. In this context, many animal models have been evaluated, and the dog stands as one of the best experimental models for the study of human VL (HVL) as well as in preclinical trials, since dogs present clinical and pathological characteristics and natural history of the disease extremely similar to the active and severe HVL. Thus, our study aimed to evaluate the treatment strategy employing a therapeutic vaccine composed by antigens of L. braziliensis associated with MPL adjuvant (LBMPL vaccine) for HVL using symptomatic dogs naturally infected by L. infantum. Thus, 16 infected dogs were divided into two experimental groups: a group that received immunotherapy only with monophosphoryl lipid A adjuvant, considered the control group (MPL, n=6) and another group that received immunotherapy using the vaccine composed by antigens of L. braziliensis associated with MPL as adjuvant (LBMPL, n=10). The animals were subjected to an immunotherapeutic scheme consisting of 3 treatment series, each series composed of 10 doses with increasing concentrations of the vaccine antigen (60μg - 300μg antigen protein + 5μg - 25μg of MPL (day 1-5) and 300μg of LB antigen + 25μg of MPL (day 6-10) 1st series / 300μg antigen protein + 25μg of MPL 2nd and 3rd series) by subcutaneous route and a 10-day interval between each series. The dogs were evaluated before treatment (T0) and 15 (T15), 30 (T30) and 90 (T90) days after treatment under the hematological, biochemical, immunological, clinical and parasitological aspects. Our major results showed that immunotherapy with LBMPL vaccine was able to restore and normalize main hematological (erythrocytes, hemoglobin, hematocrit and platelets) and biochemical (urea, AST or SGOT, alkaline phosphatase , bilirubin , and total protein ) parameters resulting from CVL present before treatment. In addition, in ex vivo analysis, immunotreated dogs with LBMPL vaccine responded with increased CD3+ T lymphocytes and their subpopulations (T CD4+ and T CD8+), reduction of CD21+ B lymphocytes and in the T CD4+/T CD8+ ratio, increased TL/BL ratio, NK cells (CD5-CD16+) and CD14+ monocytes as the main cellular biomarkers of therapeutic success in peripheral blood. In the in vitro context, animals subjected to LBMPL vaccinetherapy developed a strong antigen-specific immunologic memory, able to induce a high lymphoproliferative activity against L. infantum soluble antigen (ASLi) followed by a preferential recognition of ASLi-specific T CD4+ and T CD8+. Interestingly, an increase in both T CD4+IFN-+ and T CD8+IFN-+ lymphocytes was also observed as well as reduction of T CD4+IL-4+ and T CD8+IL-4+ lymphocytes after ASLi stimulation and increased production/secretion of pro inflammatory cytokines such as TNF- and reduced production of immunomodulatory cytokines such as IL-10 by peripheral blood mononuclear cells (PBMC). This cytokine (IL-10) is responsible for the severe VL immunopathogenesis. These findings characterize a resistante profile to Leishmania infection and positive response in dogs immunotreated with LBMPL therapeutic vaccine. Interestingly, concerning clinical signs of CVL, animals submitted to LBMPL vaccinetherapy showed drastic reduction in the intensity and number of clinical signs/symptoms of VL, increased body mass as well as reduction of splenomegaly assessed clinically and by ultrasound, factors closely associated with success in the treatment of human disease. In addition, the LBMPL vaccine also promoted a reduction in parasite burden, assessed by Real Time PCR (qPCR) in bone marrow, spleen and skin of infected dogs, being even possible to observe some animals with no parasitism in these organs. The results obtained in this study confirm and reaffirm the statement that naturally infected dogs with L. infantum are the most important experimental preclinical model in visceral leishmaniasis. Furthermore, our results also allow recommending the use of immunotherapy with the LBMPL therapeutic vaccine proposed as a potential treatment for visceral leishmaniasis in both the canine and human disease.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2015-02-11T15:19:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoProduçãoVacina.pdf: 1373045 bytes, checksum: b2b1f1d6c6a072fb1d3e7addbdcb321e (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-02-11T17:49:25Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoProduçãoVacina.pdf: 1373045 bytes, checksum: b2b1f1d6c6a072fb1d3e7addbdcb321e (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-11T17:49:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoProduçãoVacina.pdf: 1373045 bytes, checksum: b2b1f1d6c6a072fb1d3e7addbdcb321e (MD5) Previous issue date: 2011 / No Brasil, o controle da leishmaniose visceral (LV) tem sido baseado num “tripé” de ações que preconiza o tratamento de casos humanos, o combate ao vetor e a eliminação de cães soropositivos, que infelizmente não tem alcançado bons resultados na redução dos casos de LV humana e canina. Assim, a imunoprofilaxia surge como uma das alternativas mais importantes para o controle da LV. Considerando que até o momento ainda não existem vacinas que sejam comprovadamente protetoras, nosso grupo de pesquisa tem empregado esforços no desenvolvimento de protótipos vacinais contra leishmaniose visceral canina (LVC). Um destes protótipos é a vacina LBSapSal, composta por antígenos de Leishmania braziliensis associada ao extrato de glândula salivar de Lutzomyia longipalpis (SGE) e ao adjuvante saponina. Estudos prévios em cães vacinados com a vacina LBSapSal revelaram a indução de forte imunogenicidade, marcada pelo aumento de linfócitos T CD8+ circulantes, dos níveis de óxido nítrico séricos e por uma produção balanceada de isotipos de IgG (IgG1/IgG2) indicando uma resposta imune mista do tipo 1 e tipo 2. Tais resultados indicam que a vacina LBSapSal induz uma resposta imune protetora anti-LVC. Desta forma o presente trabalho tem como objetivo central avaliar a capacidade imunoprofilática da vacina LBSapSal através de estudos de proteção após o desafio experimental com promastigotas de Leishmania chagasi. Foram utilizados 20 cães, com idade de 210 dias, sem raça definida que foram subdivididos em quatro grupos experimentais com cinco animais cada um, entre os quais: (i), grupo CID, (ii) grupo Sal, (iii) grupo LBSal e (iv) grupo LBSapSal. Foram ministradas três aplicações vacinais subcutâneas em intervalos de 30 dias. Após 3 meses do último inóculo, os cães foram desafiados com 1x107 promastigotas de L. chagasi associadas ao conteúdo de cinco ácinos de glândula salivar de L. longipalpis por via intradérmica. Estes animais foram acompanhados por um período de 885 dias após o desafio, onde foi coletado material biológico para a realização de análise parasitológica da proteção vacinal. Coletas de tecidos de pele e baço foram realizadas para uma investigação da presença do parasito e da carga parasitária nestes órgãos. Nesta investigação foi realizado o isolamento do parasito pela técnica de esplenocultura utilizando o meio NNN/LIT e avaliação do parasitismo por meio de imunohistoquímica anti-Leishmania, análise de imprints de tecidos por microscopia óptica (Giemsa) e reação de PCR em Tempo Real (qPCR) nos tecidos. Dentre as metodologias parasitológicas, a qPCR apresentou alta sensibilidade para detectar L. chagasi na pele e no baço de cães que apresentam baixa carga parasitária. Os resultados de qPCR nos permitiu observar o aumento dos níveis de eficácia vacinal experimental, em relação ao grupo controle (CID) ao se incorporar antígeno de saliva (Sal) e saliva mais antígeno de Leishmania (LBSal). Adicionalmente, aumento dos níveis de proteção e eficácia foram obtidos pela incorporação do adjuvante saponina aos antígenos de saliva de flebotomíneo e de Leishmania (LBSapSal). Neste sentido, os resultados mostraram que a vacina LBSapSal conferiu 80% de proteção na pele, enquanto que todos os cães apresentaram parasitismo no baço. Nossos dados nos permite supor o potencial que a vacina LBSapSal tem em proteger a pele contra a infecção por L. chagasi Desta forma, nos animais imunizados com LBSapSal, a redução da frequência do parasitismo cutâneo poderia implicar na redução da transmissão de Leishmania para o inseto vetor, podendo contribuir no controle deste parasito. __________________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: Brazil, control of visceral leishmaniasis (VL) has been based on a "tripod" of action that addresses the treatment of human cases, the vector control and elimination of seropositive dogs, which unfortunately hasn´t achieved good results in reducing cases of human and canine VL. Thus, immunoprophylaxis appears as one of the most important alternative for the control of VL. Considering that so far there are still no proven vaccines that are protective, our research group has used efforts in developing prototypes vaccine against canine visceral leishmaniasis (CVL). One of these prototypes is LBSapSal vaccine consisting of antigens of Leishmania braziliensis associated with salivary gland extract of Lutzomyia longipalpis (SGE) and the saponin adjuvant. Previous studies in dogs vaccinated with LBSapSal revealed the induction of strong immunogenicity, marked by increased levels of CD8 + T circulating cells, of serum nitric oxide and a balanced production of IgG isotypes (IgG1/IgG2), indicating a mixed immune response type 1 and type 2. These results indicate that the vaccine LBSapSal induces an immune response anti-LVC. Thus the present work is mainly aimed to assess the immunoprophylactic ability of the vaccine LBSapSal through studies of protection after experimental challenge with promastigotes of Leishmania chagasi. We used 20 mongrel dogs, aged 210 days, that were divided into four groups with five animals each, including: (i), group CID, (ii) Sal group, (iii) group LBSal and (iv) group LBSapSal. Three vaccine subcutaneous applications were given at intervals of 30 days. After three months of last inoculum, the animals were challenged, intradermally, with 1x107 promastigotes of L. chagasi associated with five lobes of the salivary gland of L. longipalpis. These animals were followed for a period of 885 days after the challenge, wich was collected biological material to perform parasitological analyses of vaccine protection. Samples of skin and spleen were performed to investigate the presence of a parasite and the parasite burden in this organs. In this investigation we performed the isolation of the parasite in spleen samples using NNN/LIT medium, and to evaluate the parasitism by immunohistochemical anti-Leishmania, analysis of tissues imprints by optical microscopy (Giemsa) and by PCR Real-Time (qPCR). Among the parasitological methods, the qPCR presented high sensitivity to detect L. chagasi in the skin and spleen of dogs presenting low parasite burden. The results allowed us to observe the increased levels in the experimental vaccine efficacy in comparission to the control group (CID) by incorporating saliva (Sal) and saliva more Leishmania antigen (LBSal). Additionally, increased levels of protection and efficacy were obtained by incorporation of saponin adjuvant to Leishmania an sand fly saliva antigens (LBSapSal). In this sense, the results shoed that the LBSapSal vaccine elicited 80% of protection in the skin, whereas all dogs presented parasitism in the spleen. Our data allows us hypothesize the potencial that LBSapSal vaccine has in protect the skin againts L. chagasi. Thus, in the animals immunized with LBSapSal the reduction of the frequency of parasitism in the skin could result in the reduction of Leishmania transmission to the insect vector, which may contribute to control this parasite.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2015-03-16T20:00:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoTratoDigestório.pdf: 2128923 bytes, checksum: bc9e8b3b565ff4319486b7f5221aaa47 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-03-17T19:13:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoTratoDigestório.pdf: 2128923 bytes, checksum: bc9e8b3b565ff4319486b7f5221aaa47 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-17T19:13:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) DISSERTAÇÃO_AvaliaçãoTratoDigestório.pdf: 2128923 bytes, checksum: bc9e8b3b565ff4319486b7f5221aaa47 (MD5) Previous issue date: 2011 / O protozoário hemoflagelado Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, apresenta uma ampla variabilidade intraespecífica que determina a existência de subpopulações com características genéticas, morfológicas, moleculares e bioquímicas distintas. Este polimorfismo tem sido associado ao desenvolvimento das diferentes formas clínicas da doença de Chagas e suas implicações epidemiológicas. Neste contexto, a forma digestiva parece estar ausente na América Central, México e Venezuela, porém em países como Brasil e Bolívia pode ocorrer sozinha ou em associação com a forma cardíaca. O megaesôfago e o megacólon, manifestações mais comuns da forma digestiva, são caracterizados por acalásia e obstrução parcial/total do cólon, respectivamente. Achados histopatológicos demonstram o envolvimento do sistema nervoso entérico na patogênese dessas visceromegalias, porém poucos estudos têm abordado qual é o limite de desnervação necessário para as alterações da motilidade. Neste trabalho, cães da raça Beagle foram infectados com as cepas Y ou Berenice-78 do T. cruzi e necropsiados durante as fases aguda (30 dias após infecção-DAI) ou crônica (730 DAI) da doença experimental para avaliação histopatológica do esôfago e cólon. Ambas as cepas foram capazes de infectar o esôfago e o cólon e provocar resposta inflamatória durante a fase aguda. Na fase crônica, a PCR convencional detectou parasitismo tecidual apenas no grupo infectado com a cepa Be-78 o que poderia estar relacionado com a manutenção do processo inflamatório neste grupo. Apenas nos animais infectados com a cepa Y foi observada fibrose na fase crônica. Desnervação dos gânglios mientéricos foi observada na infecção com ambas as cepas durante a fase aguda, porém na fase crônica a desnervação foi persistente apenas nos animais infectados com a cepa Be-78. O comprometimento das células gliais foi precoce nos animais infectados com a cepa Y enquanto os animais infetados com a cepa Be-78 apresentaram redução de células gliais entéricas GFAP-IR apenas na fase crônica. Estes resultados sugerem que embora as duas cepas sejam capazes de provocar lesões no trato digestório, a cepa Y controla precocemente essas alterações, enquanto a cepa Be-78 sustenta as alterações ao longo da infecção experimental, sugerindo o desenvolvimento de lesões digestivas crônicas. ______________________________________________________________________ / ABSTRACT: The flagellate protozoan Trypanosoma cruzi, etiologic agent of Chagas disease, presents a wide intraspecific variability that determines the existence of subpopulations with distinc genetic, morphological, molecular and biochemical feactures. This polymorphism has been associated with the development of different clinical forms of Chagas disease and its epidemiological implications. In this context, the digestive form seems to be absent in Central America, Mexico and Venezuela, but in countries like Brazil and Bolivia may occur alone or in combination with the cardiac form. Megaesophagus and megacolon, the most common manifestations of the digestive form, are characterized by achalasia and colon partial /total obstruction, respectively. Histopathologic findings demonstrate the involvement of enteric nervous system in these visceromegalies pathogenesis, but few studies have addressed the limit of what is necessary for denervation changes in motility. In this study, Beagle dogs were infected with strains Y or Berenice-78 of T. cruzi and necropsied during the acute phase (30 days post infection-DPI) or chronic (730DPI) of the experimental disease for esophagus and colon post-mortem histopathological evaluation. Both strains were able to infect the esophagus and colon and cause an inflammatory response during the acute phase. In the chronic phase, the conventional PCR detected only tissue parasitism in the group infected with Be-78 strain that is associated with the inflammatory process maintenance in this group. Only in animals infected with the Y strain was observed fibrosis in chronic phase. Denervation of myenteric ganglia was observed in infection with both strains during the acute phase, but in chronic phase, denervation was persistent only in animals infected with Be-78 strain. The glial cells involvement was earlier in animals infected with Y strain while animals infected with Be-78 strain showed a reduction in enteric glial cells GFAP-IR only in the chronic phase. These results suggest that although the two strains are capable of causing injury in the digestive tract, the Y strain control these changes earlier, while the Be-78 strain sustain alterations throughout the experimental infection, suggesting the development of chronic digestive lesions.

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:02:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-21. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:19:31Z : No. of bitstreams: 1 000848501.pdf: 435668 bytes, checksum: bb762dddb385a43a1d0a10209e8b53e9 (MD5) / A Fisiologia do Exercício é um ramo da ciência que elabora métodos e programas de condicionamento aplicados no controle, prevenção e tratamento de enfermidades, bem como explica os mecanismos adaptativos comparando espécies animais. A espécie canina ainda é pouco estudada em seu perfil atlético mais amplo, sendo as raças tradicionalmente escolhidas para este fim o Greyhounds, cães de trenó e Retrievers do Labrador. O American Pit Bull Terrier, apesar de sua popularidade mundial, tem sido negligenciado pela comunidade acadêmica, apesar de sua versatilidade comprovada por sua participação bem sucedida em diversos esportes. Esta revisão traz aspectos relevantes sobre a raça e sua origem, bem como sobre as expectativas de inovadores estudos com enfoque no Pit Bull como modelo experimental

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:02:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-21. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:19:28Z : No. of bitstreams: 1 000848868.pdf: 401988 bytes, checksum: 08ca73724d8938b9b116d34fb50815a0 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / In humans, the immunosuppression observed in uremic patients is associated with the neutrophil dysfunction caused by uremic toxins. P-cresol accumulates in the blood of patients with chronic renal failure (CRF) promoting the inhibition of neutrophil oxidative metabolism. This study aimed to measure the plasma concentrations of p-cresol in dogs with CRF and test the hypothesis that free p-cresol causes neutrophil dysfunction. To this end, plasma concentration of p-cresol was determined using high pressure liquid chromatography (HPLC) in dogs presenting stage IV of CRF. The in vitro specific effect of p-cresol on the oxidative metabolism and apoptosis rate of neutrophils from healthy dogs was also evaluated, considering the highest plasma concentration of this toxin observed on the in vivo measurement of dogs with CRF. Isolated neutrophils from 20 healthy dogs were incubated in RPMI medium alone, supplemented with p-cresol or plasma from dogs with CRF. Neutrophil oxidative metabolism was assessed by capillary flow cytometry using the probes hydroethidine and 2',7'- dichlorofluorescein diacetate with or without stimulus with phorbol myristate acetate and N-formyl-methionyl-leucylphenylalanine. Apoptosis and viability of neutrophils were quantified also in capillary flow cytometry using Annexin V-PE system with or without stimulus with camptothecin. Dogs with CRF presented oxidative stress and increased plasma levels of p-cresol, the higher concentration of p-cresol caused in vitro neutrophil dysfunction. It can be concluded that p-cresol may be involved with in vivo oxidative stress that its higher concentration decreases the viability and lead to a reduced production of reactive oxygen species