Orientador: Kátia Sivieri / Banca: Luís Fernando Barbisan / Banca: Fernanda Lopes Kinoushi / Banca: Luis Vitor Silva do Sacramento / Banca: Ana Lúcia Martiniano Nasser / Resumo: Ocâncer de cólon e reto representa a terceira causa mais comum de câncer no mundo, sendo que pesquisas apontam ação benéfica dos probióticos, prebióticos e simbióticos no câncer de cólon. O objetivo desta pesquisa foi definir as etapas da carcinogênese de cólon que são mais afetadas pelo consumo de extrato aquoso de yacon, Lactobacillus acidophilus CRL 1014 e extrato aquoso de yacon + Lactobacillus acidophilus CRL 1014 em ratos induzidos quimicamente ao câncer de cólon com 1,2-dimetilhidrazina (DMH). Cem ratos Wistar machos foram divididos aleatoriamente em cinco tratamentos: G1: ratos não tratados; G2: DMH; G3 (probiótico): DMH + L. acidophilus CRL 1014; G4 (prebiótico): DMH + extrato aquoso de yacon; G5 (simbiótico): DMH + L. acidophilus CRL 1014 + extrato aquoso de yacon. Todos os tratamentos foram administrados via oral durante 8 meses, sendo que o L. acidophilus CRL 1014 foi administrado na quantidade de 3 mL/ kg de peso/ dia na concentração de 109 UFC/ mL e o extrato aquoso de yacon administrado foi calculado em relação ao seu conteúdo de frutooligossacarídeos (FOS). Os animais ingeriram 10% de FOS na dieta. A concentração de FOS no extrato aquoso de yacon foi previamente determinada utilizando kit enzimático (Megazyme®). Cinco animais pertencentes a cada grupo experimental foram sacrificados após a primeira administração de DMH, no terceiro, quinto e oitavo meses. Os tecidos foram submetidos à análise macroscópica, verificando-se o número e volume de massa tumorais, análise de focos de criptas aberrantes (FCA), análise histológica do tecido, ensaio cometa em amostras de sangue periférico, índice de apoptose, imunohistoquímica para p53 e Ki-67. Houve redução no dano no DNA nos tratamentos G3, G4 e G5. Os grupos G5 e G4 apresentaram aumento no índice de apoptose e diminuição da proliferação celular em relação ao G2 (p<0.05). Não houve diferença na marcação de p53 nos grupos G3, G4 e G5 ... / Abstract: Colorectal cancer is the third commonest type of cancer in both sexes in the world. Research suggests beneficial effects of consuming probiotics and prebiotics on colon cancer. The aim of this project was to define the phases of the development of colon cancer that are more affected by aqueous yacon extract, Lactobacillus acidophilus CRL 1014 and aqueous yacon extract + Lactobacillus acidophilus CRL 1014 ingested by rats chemically treated with 1,2 dimethylhydrazine (DMH) to induce colon cancer. Hundred male Wistar rats were randomly divided into five treatments: G1: untreated rats; G2: DMH; G3 (probiotic): DMH + L. acidophilus CRL 1014; G4 (prebiotic): DMH + aqueous yacon extract; G5 (synbiotic): DMH + L. acidophilus CRL 1014 + aqueous yacon extract. All treatments were administered orally for 8 months, L. acidophilus CRL 1014 was administered at 109 CFU/ mL in 3 mL/ kg body weight and amount of aqueous yacon extract administered was calculated in relation of its fructooligosaccharides (FOS) content using fructan assay kit (Megazyme®). Animals ingested 10% of FOS in diet. Five animals from each treatment group were sacrificed after the first DMH injection and in the third, fifth and eighth months. Tissues were subjected to macroscopic analysis, measuring polyp number, volume and thickness, aberrant crypt foci (ACF) analysis, histological tissue analysis, comet assay in peripheral blood, apoptosis index, and colon samples from the first sacrifice were assessed for K-67 and p53 by immunohistochemical procedures. G3, G4 and G5 showed DNA damage reduction. G5 and G3 groups showed higher apoptosis index and decrease of Ki-67, compared to G2 (p<0.05). p53 staining did not differ among G2, G3, G4, G5. G5 showed fewer ACF number per colon in third month and in the fifth month G3, G4 and G5 showed a reduction of ACF number per colon relative to G2 (p<0.05). In the last month, G3, G4 and G5 showed no effect on ACF number per colon relative to G2.. / Doutor

Orientador: Maria Aparecida Marchesan Rodrigues / Coorientador: Bonifácio Katsunori Takegawa / Banca: Erika Veruska Paiva Ortolan / Banca: Márcia Guimarães Silva / Banca: Cleverson Teixeira Soares / Banca: Gisele Alboghetti Nai / Resumo: A identificação pré-operatória da zona de transição na Doença de Hirschsprung (DH) tornou-se um passo fundamental para o planejamento cirúrgico, especialmente para a técnica de abaixamento endorretal transanal. O presente estudo tem como objetivo investigar prospectivamente o valor da determinação colonoscópica da zona de transição na avaliação pré-operatória dos pacientes com DH. A colonoscopia foi realizada em doze pacientes com diagnóstico de DH previamente confirmado pela manometria anorretal, enema opaco e biópsia de sucção do reto. Endoscopicamente, o primeiro local com ausência de peristaltismo foi identificado como o início da zona agangliônica. Pouco acima deste ponto, a zona de transição foi marcada através de uma tatuagem com tinta nanquim. Durante o abaixamento endorretal transanal, uma biópsia de congelação envolvendo a espessura total da parede foi sempre realizada. Os resultados da determinação colonoscópica da zona de transição foram comparados com os obtidos pelo enema opaco. A colonoscopia permitiu a identificação da zona de transição em todos os 12 casos (100%). O enema opaco revelou a presença da zona de transição em apenas 7 pacientes (58,3%). A análise das amostras de congelação, obtidas pouco acima das áreas endoscopicamente marcadas, revelou a presença de células ganglionares em todos os casos. A análise histopatológica das peças cirúrgicas confirmou o diagnóstico de DH em todos os casos, assim como a localização da zona de transição no mesmo local previamente tatuado endoscopicamente. O exame colonoscópico pré-operatório demonstrou ser uma ferramenta útil para determinar a localização da zona de transição em pacientes com DH / Abstract: Preoperative identification of the transition zone in Hirschsprung's disease (HD) has become an essential issue for surgical planning, especially for Transanal Endorectal Pull- Through (TEPT) procedure. The present study aimed to investigate prospectively, the value of endoscopic marking of the transition zone between normal and aganglionic bowel, as a landmark of the location of pull-through procedure for treatment of HD. Colonoscopy was performed on twelve patients with HD diagnosis, previously confirmed by anorectal manometry, contrast enema and rectal suction biopsies. Endoscopically, the first site with absence of motility was identified as the beginning of the aganglionic area. Just above this point, the transition zone was marked with an Indian Ink tattooing. During the TEPT, a full-thickness biopsy for frozen section analysis was performed just above this mark. The results of colonoscopic making were compared with contrast enema. Colonoscopy allowed the identification and tattooing of the junction between normal bowel with peristalsis and aganglionic bowel without peristalsis in all 12 cases (100%). Barium enema revealed the transition zone in 7 patients (58.3%). Frozen samples, obtained just above the marked areas revealed the presence of ganglion cells in all cases and the histopathological analysis of surgical specimens confirmed the diagnosis of HD in all cases and checked the location of the transition zone at the same site previously identified by colonoscopy. Colonoscopic marking of the transition zone may be a useful tool to set the location of pull-through procedure for treatment of HD / Doutor

Orientador: Luís Fernando Barbisan / Resumo: O ferro heme presente na carne vermelha está associado ao aumento da incidência do câncer colorretal (CCR). O heme pode catalisar a formação de compostos nitrosos e a peroxidação lipídica no lúmen intestinal. No entanto, os efeitos pró-carcinogênicos do heme podem ser inibidos por alguns compostos como os sais de cálcio, clorofila entre outros. Sabe-se que o indol-3-carbinol (I3C), presente nas plantas da família das Brassicas e os simbióticos são compostos promissores na prevenção do câncer de cólon, atuando em via de proliferação, apoptose e modulação da microbiota intestinal. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi o de avaliar os efeitos da ingestão de simbiótico (prebiótico inulina associado ao probiótico Bifidobacterium lactis bb-12) e de I3C, isolados ou em associação sobre o processo de carcinogênese de cólon induzido pela 1,2-dimetilhidrazina (DMH) em ratos Wistar alimentados ou não com dieta suplementada com heme. Os animais foram alocados em 9 grupos, os grupos 1 a 8 (n=12) receberam quatro doses de DMH (40 mg/Kg) nas duas semanas iniciais do experimento. Os grupos 1 e 9 (n=12 e 5) receberam ração basal até o final do experimento e os grupos 2 a 8 receberam ração basal suplementada com heme, heme+I3C, heme+simbiótico, heme+I3C+simbiótico, I3C, simbiótico e I3C+simbiótico, respectivamente. A eutanásia ocorreu ao final da 25ª semana. Neste momento foi realizada a coleta do cólon com os respectivos tumores e amostras de fezes do ceco. Em seguida, procedeu-se a... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Colorectal cancer (CRC) is the third most common type of cancer worldwide. Hemin iron, which is found in red meat, catalyzes the formation of carcinogenic N-nitroso compounds and lipid peroxidation end-products in the colon lumen. The procarcinogenic effect of hemin is known to be inhibited by molecules, such as calcium, chlorophyll and others. However, the preventive effect of indole 3-carbinol and synbiotics on colon carcinogenesis remains uninvestigated. The aim of this study was to assess the modifying effects of a synbiotic (inulin+ Bifidobacterium lactis) and/or I3C against dimethylhidrazine (DMH)-induced colon carcinogenesis in hemin-fed male Wistar rats. Nine groups of animals were evaluated. Groups 1–8 received a total of four s.c. DMH injections (40 mg/kg b.w.) over 2 weeks, whereas group 9 was given EDTA solution (vehicle). Two weeks after DMH-initiation, G1 and G9 were fed a basal diet while groups G2, G3, G4, G5, G6, G7 and G8 received a basal diet containing hemin, hemin+I3C, hemin+synbiotic, hemin+I3C+synbiotic, I3C, synbiotic and I3C+synbiotic, respectively, during 23 weeks. At 25 week, all animals were killed and their colons were removed. Cecal contents were collected to determine fecal water cytotoxicity and genotoxicity (DNA damage) in Caco-2 cells. Colon tumors were measured and samples were collected and stored at -800C. The colons were fixed flat in 10% buffered formalin for 24 h and stained with 1.0% methylene blue for classical ACF analysis and qua... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-10-30T14:14:14Z No. of bitstreams: 1 2014_MarthaSilvaEstrela.pdf: 2513527 bytes, checksum: c69499a20e04f540457a226399f7f1f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2014-10-30T15:07:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_MarthaSilvaEstrela.pdf: 2513527 bytes, checksum: c69499a20e04f540457a226399f7f1f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-30T15:07:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_MarthaSilvaEstrela.pdf: 2513527 bytes, checksum: c69499a20e04f540457a226399f7f1f9 (MD5) / O câncer colorretal (CCR) é o terceiro tipo de câncer mais comum entre os homens e o segundo entre as mulheres em todo o mundo. O rastreamento regular pode prevenir muitos casos de CCR e resultar na detecção e diagnóstico precoce, quando pode ser altamente curável. Vários fatores de risco tem sido identificados na gênese do CCR, porém nenhum de forma isolada explica completamente a carcinogênese do cólon e reto. O CCR se desenvolve ao longo de décadas e consiste em uma série de alterações genéticas e epigenéticas que conduzem à transformação maligna. Algumas das alterações genéticas já descritas relacionadas com a carcinogênese colorretal envolvem os genes KRAS, p53 e elementos da via de sinalização TGF-β, como TGFBR2 e SMAD4. Alterações epigenéticas tem se mostrado cada vez mais relevantes na gênese de vários tumores, e tem como característica básica não causar modificações na sequência do DNA, mas sim promover expressão seletiva dos genes dependente do nível do empacotamento do DNA. A metilação de histonas é um dos principais e mais estudados eventos epigenéticos. SETD e NSD são famílias de metiltransferases composta por 10 e 3 genes, respectivamente, que codificam proteínas com domínio SET. Este domínio está envolvido na metilação de resíduos de lisina em histonas e proteínas não-histonas. Até o momento, pouco se sabe sobre a relação de genes das famílias SETD e NSD com a carcinogênese colorretal. No presente estudo foi realizada a avaliação de expressão relativa de todos os genes das famílias SETD e NSD em amostras de tecidos tumorais e normais de pacientes portadores de CCR através de técnica de PCR em tempo real. O perfil de expressão comparativa dessas famílias de genes foi correlacionado com as informações clínico-patológicas de maior relevância prognóstica, disponíveis dos pacientes. Notamos que os genes SETD1A e SETD6 encontram-se significativamente superexpressos nas amostras tumorais de pacientes com até 60 anos quando comparadas às amostras tumorais de pacientes acima de 60 anos. Esses dois genes também apresentaram expressão correlacionada nesse grupo avaliado. Quando analisamos apenas as amostras tumorais de pacientes com invasão perineural não evidenciada, comparadas às amostras tumorais de pacientes com invasão perineural evidenciada, observamos superexpressão do gene NSD3. Em análise pareada de amostras de tecidos normal e tumoral verificamos a hipoexpressão dos genes SETD2 e SETD8 nas amostras tumorais. Esses dois genes também possuem expressão correlacionada nesses tecidos. Desta forma, nossos dados sugerem NSD3 como um possível marcador molecular de melhor prognóstico para pacientes diagnosticados com CCR, além de SETD2 e SETD8 como um possível alvo molecular para o diagnóstico do CCR. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Colorectal cancer (CRC) is the third most common type of cancer among men and the second among women worldwide. Regular screening can prevent many cases of CRC and result in early detection and diagnosis, as can be highly curable. Several risk factors have been identified in the genesis of CRC, but none alone explains the carcinogenesis in colon and rectum. CRC develops over decades and consists of a series of genetic and epigenetic alterations that lead to malignant transformation. Some of these genetic changes related to colorectal carcinogenesis involves KRAS, p53 and signaling pathway components of the TGF-β as TGFBR2 and SMAD4. Epigenetic changes have been shown to be increasingly important in the genesis of many tumor types, and its basic characteristic is not cause changes in the DNA sequence but also induce selective gene expression dependent on DNA packaging level. Histone methylation is one of the leading and most studied epigenetic events. SETD and NSD methyltransferase families are composed of 10 and 3 genes, respectively, encoding proteins with SET domain. This domain is involved in methylation of lysine residues on histones and non-histone proteins. So far, little is known about the relation of SETD and NSD genes with colorectal carcinogenesis. In this study we evaluated relative expression of all genes of SETD and NSD families in samples of normal tissue and tumor tissue of patients with CRC through real time PCR. The comparative expression profile of these gene families was correlated with clinical and pathological information of greater prognostic relevance available from patients. Here we show that SETD1A and SETD6 genes are significantly overexpressed in tumor samples from patients younger than 60 years when compared to tumor samples from patients over 60 years. These two genes also showed correlated expression in this evaluated group. When we analyzed only tumor samples from patients without perineural invasion, compared to tumor samples from patients with perineural invasion, we observed overexpression of NSD3 gene. In paired analysis of normal tissue samples and tumor tissues samples we verified low expression of SETD2 and SETD8 genes in tumor samples. These two genes also have correlated expression in these tissues. Thus, our data suggested NSD3 as a possible molecular marker of better prognostic for patients diagnosed with CRC, and SETD2 and SETD8 as a possible molecular target for the diagnostic of CRC.

Orientador: Ramon Kaneno / Resumo: O câncer colorretal (CCR) é o terceiro tipo mais prevalente de câncer no mundo, com frequentes complicações metastáticas muitas vezes associadas ao desenvolvimento de resistência adquirida aos fármacos. Uma das estratégias terapêuticas utilizadas no tratamento de pacientes que não respondem bem à quimioterapia convencional é a imunoterapia baseada na aplicação de anticorpos monoclonais cetuximab ou panitumumab, ambos dirigidos ao receptor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). Em alguns casos observa-se associação da resistência aos anticorpos com a superexpressão de HER2, outro membro da família do EGFR. Assim, esta dissertação foi elaborada para testar a hipótese de que o uso conjunto de anticorpos anti-EGFR e anti-HER será capaz de reduzir o escape das células tumorais e que a associação com fármacos antitumorais tornará mais efetiva sua eliminação. Com esse propósito, nosso objetivo foi utilizar nanopartículas ouro (AuNP) para o transporte de 5-fluorouracil (5FU), endereçando esses nanocarreadores para as células de câncer colorretal recobrindo-os com anticorpos contra os receptores para fator de crescimento epidérmico EGFR (ErbB-1) e HER2 (ErbB-2). Os nanocarreadores foram testados in vitro quanto a sua interação por células de câncer colorretal HCT-116 e Caco-2 por citometria de fluxo, sua capacidade de induzir apoptose/necrose e seu efeito sobre a atividade proliferativa das células testadas. Nossos dados indicam que as AuNP produzidas e funcionalizadas com as molé... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Colorectal cancer (CRC) is the third most prevalent type of cancer in worldwide and is frequently associated with metastatic complications. Therapeutic strategies to treat those patients who do not respond to conventional chemotherapy is based on the application of monoclonal antibodies cetuximab or panitumumab, both directed targeting the epidermal growth factor receptor (EGFR). However, in some cases resistance is associated with an overexpression of HER2, another receptor belonging to the EGFR family. Therefore, this dissertation was designed to test the hypothesis that the combination of anti-EGFR and anti-HER antibodies will be able to reduce the escape of tumor cells, and that their association with antitumor drugs could improve the elimination of tumor cells. Then, our goal was to use gold nanoparticles (AuNP) for transporting 5-fluorouracil (5FU), addressing them to colorectal cancer cells by coating them with antibodies against the receptors of epidermal growth factor EGFR (ErbB-1) and HER2 (ErbB-2). Nanocarriers were tested in vitro by flow cytometry for their interaction and internalization by the colorectal cancer cell line HCT-116 and Caco-2, their ability to induce apoptosis/necrosis and stop cell proliferation. Our results show that AuNP produced and functionalized with the molecules of interest have spherical structure, however, some formulations showed agglomeration due to the incorporation of organic molecules. Biological assays showed that AuNP 5FU EGFR had... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A serotonina (5-HT) é um neuro-hormônio com complexos efeitos em humanos e animais. Embora se acredite que a sinalização serotoninérgica promova o desenvolvimento de tumores de cólon, também tem sido observado que a redução dos níveis de 5-HT aumenta o risco de malignidades neste órgão. Assim, é necessário investigar como a síntese de 5-HT modula a carcinogênese de cólon. Esta hipótese será explorada em experimentos mecanísticos envolvendo a exposição ou não de camundongos a um agente carcinogênico (azoximetano). Estes experimentos revelaram que a exposição carcinogênica aumentou a síntese de 5-HT no cólon, uma vez que os processos de liberação e degradação de 5-HT foram reduzidos, enquanto que a sua síntese e recaptação aumentaram. Após 24 semanas da 1° exposição carcinogênica, a deleção da síntese de 5-HT promoveu a multiplicidade tumoral no cólon, enquanto que ao longo de 12 semanas ocorreu um aumento de lesões preneoplásicas e proliferação celular. É interessante que 72 hrs após a sexta e última exposição carcinogênica o número de criptas aberrantes foram detectadas reduzidas na ausência de 5-HT, o que ocorreu em conjunto com uma redução da atividade proliferativa, aumento de células apoptóticas, e maior dano de DNA. Finalmente, a 5-HT modulou mecanismos de reparo genômico. Concluímos que a síntese serotoninérgica parece ser um fator de proteção do cólon intestinal, que caso inibida facilitaria o desenvolvimento tumoral neste tecido. / Serotonin (5-HT) is a neurohormone with complex effects in humans and animals. Although serotonergic signaling has been suggested to promote the development of colon tumors, the reduction in 5-HT levels was reported to increase the risk of colon cancer. Here, we sought to investigate how 5-HT synthesis modulates colon carcinogenesis. This hypothesis was explored in mechanistic experiments that carcinogenically exposed or not mice to azoxymethane. It revealed that carcinogenic exposure increased the synthesis of 5-HT in the colon since 5-HT release and decay were inhibited, while its synthesis and reuptake are promoted. After 24 weeks from the first carcinogenic exposure, the deletion of 5-HT synthesis increased tumor multiplicity, while following 12 weeks it promoted the development of preneoplastic lesions, and cell proliferation in the colon. Interestingly, 72 hrs after the sixth and last carcinogenic exposures the number of aberrant crypts were detected reduced in the absence of 5-HT, which occurred together with a reduced proliferation, but increased apoptosis and DNA damage. Finally, 5-HT modulated genomic repair mechanisms. We conclude that serotonergic synthesis seems to be a protective factor of the intestinal colon, which inhibited case facilitates tumor development in this tissue.

A flora brasileira possui plantas com grande potencial de investigação na carcinogênese humana, sendo uma delas o Pequi (Caryocar brasiliense Camb.). Esta fruta da região central do Brasil contém na sua polpa e principalmente no extrato do óleo da sua polpa, várias substâncias antioxidantes, as quais estão relacionadas com a redução do risco de doenças degenerativas. Neste estudo propomos avaliar o potencial quimiopreventivo do C. brasiliense contra mecanismos pré-neoplásicos no cólon induzidas quimicamente pelo azoximetano (AMO) em camundongos. O iniciador AMO na concentração 10mg/kg foi injetado por injeção subcutânea em camundongos de 40 dias de idade. Foram formados quatro grupos experimentais: C (controle sem tratamento); AMO (azoximetano 10mg/kg), PQ400 (óleo de pequi 400mg/kg) e OMAPQ400 (OMA+ 400mg/kg de óleo de pequi). Estes dois últimos grupos receberam o óleo de pequi a partir do 40º dia até o 110° dia de vida. A altura das criptas intestinais analisadas, não revelou diferença em nenhum dos grupos. O óleo de C. brasiliense reduziu em 18,7% a proliferação celular no grupo OMAPQ400 quando comparado com os grupos C e AMO. Houve aumento da produção de muco neutro no grupo AMO quando comparado com o C e diminuição no grupo AMOPQ400. Houve hipermetilação do DNA no grupo AMO, e hipometilação no grupo AMOPQ400, sendo estes iguais ao grupo controle (C). A expressão do gene oncogênico (c-Myc) diminuiu no grupo tratado com óleo de pequi em comparação com o grupo tratado com o iniciador AMO. Todos esses efeitos podem ser devidos à presença de antioxidantes na polpa do óleo. Por isso, concluímos que o óleo de C. brasiliense possui efeito protetor contra alguns mecanismos precursores de lesões pré-neoplásicas do cólon / The Brazilian native flora has several plants which have thigh research potential, among those the Pequi (Caryocar brasiliense Camb.). This fruit from the central region of Brazil contains several antioxidant substances in its pulp and mainly in its pulp oil extract, which are related with the reduction of the risk of degenerative diseases. In this study we propose to evaluate the chemopreventive potential of C. brasiliense against neoplastic mechanisms in the colon induced chemically by azoximetano (AMO) in mice. AMO 10mgkg concentration initiator was subcutaneous injection in mice of 40 days of age. Four experimental groups were formed: C (untreated control); AMO (azoximetano 10mg/kg), PQ400 (pequi oil 400mgkg) and AMOPQ400 (AMO 400mgkg pequi oil). These last two groups received the pequi. The height of the intestinal crypts analyzed revealed no difference among groups. The oil of C. brasiliense reduced the cell proliferation by 18.7% in AMOPQ400 group when compared with the groups C and AMO. There was increased production of neutral mucus in the group AMO when compared with the C group and decrease in the AMOPQ400 group. The pequi oil induced DNA hipomethylation in the AMOPQ400 group and hipermethylation in AMO group. The expression of the oncogenic gene c-Myc decreased in the group treated with pequi oil compared to the group treated with the initiator AMO alone. All these effects can be due to the presence of antioxidants in pulp oil. Therefore, we conclude that the oil of C. brasiliense has protective effect against some mechanisms that precede of neoplastic lesions of the colon

Sendo a constipação intestinal queixa freqüente em gestantes, procuramos verificar se o complexo hormonal da gestação, e em especial a progesterona, diminui a atividade muscular colônica. Para tanto, estudamos in vivo o registro do sinal mioelétrico, sob diferentes estados hormonais, em quatro pontos do cólon de ratas: ascendente proximal, ascendente distal, médio e cólon descendente por meio de implante de eletrodos na camada sero-muscular colônica. As ratas foram divididas em 5 grupos: controle, ooforectomizadas, ooforectomizadas tratadas com estrógeno, ooforectomizadas tratadas com progesterona e ratas prenhes. Os resultados mostraram uma maior atividade elétrica no cólon proximal em ratas prenhes e nas pré-tratadas com progesterona. Nas ratas prenhes a duração da atividade elétrica máxima foi, de modo significante, maior em todas as distâncias quando comparada com ratas controle. Os resultados sugerem que in vivo a progesterona e o complexo hormonal da prenhez aumentam a atividade mioelétrica do cólon proximal e que a prenhez aumenta a duração da atividade elétrica máxima no cólon em cada distância estudada, levando à formação de fezes mais desidratadas. Progesterona e prenhez não devem ser responsabilizadas por hipomotilidade do cólon, uma das hipóteses que poderia explicar a constipação intestinal em gestantes / The aim of this study was to find out if the hormonal complex of pregnancy, especially progesterone, could be responsible for decreasing colon myoelectric activity in female rats. We analyzed the records of colon myoelectric activity in vivo using the method of musculoserosal implantation of electrodes in four regions of the colon: proximal ascendent colon, distal ascendent colon, medial colon and descendent colon. The rats were divided in five groups: control, ovariectomized, ovariectomized and treated with estrogen, ovariectomized and treated with progesterone and pregnant rats. The results showed a greater electric activity in the proximal colon in pregnant and progesterone pretreated rats. In pregnant rats the duration of maximum electric activity was significantly greater in all distances studied. The results suggest that in vivo progesterone and the hormonal complex of pregnancy increase myoelectric activity of the proximal colon, and that pregnancy increases the duration of the maximum electric activity of the colon in every distance studied leading to more dehydrated fecal material. Progesterone and pregnancy should not be responsible for colon hypomotility, one of the hypothesis that could explain intestinal constipation in pregnant women

Orientador: Jose Barreto Campello Carvalheira / Tese (Doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-22T00:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Flores_MarceloBeneditodaSilva_D.pdf: 2957448 bytes, checksum: f168cee98307f1e264e0d77d10a83423 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: O câncer colorretal é um dos maiores problemas de saúde em todo o mundo acometendo 1 milhão de pessoas por ano. O índice de morte associado a essa doença é de aproximadamente 33% no mundo desenvolvido. A associação entre a obesidade e o risco para o desenvolvimento desse câncer é observada tanto em homens quanto em mulheres. A inflamação e a hiperinsulinemia, condições verificadas na obesidade podem contribuir, a princípio, para o risco de desenvolvimento do câncer colorretal. O fator de necrose tumoral alfa (TNF-alfa) é um dos mais importantes mediadores da resposta inflamatória e sua alta expressão pelo tecido adiposo é verificada nas condições de obesidade tanto em modelos animais quanto em humanos. O TNF-alfa contribui para a desregulação da via da sinalização insulínica através da fosforilação em serina dos substratos do receptor desse hormônio (IRS) mediada pela ativação de quinases como c-jun N terminal quinase (JNK) e da quinase inibidora do fator nuclear NF-kB (IKK). A ativação dessas quinases induz a fosforilação inibitória do substrato 1 do receptor de insulina (IRS-1) através da serina 307 (Ser307). Esse mecanismo reduz a ativação da via da fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K)/Akt e da proteína alvo da rapamicina em mamíferos (mTOR) mediada pela insulina. TNF-alfa foi, a princípio, identificado como um agente antitumoral. Atualmente essa citoquina é reconhecida como uma promotora da tumorigênese e que associa a inflamação ao câncer. A importância do TNF-alfa e de seus mediadores intracelulares, JNK e IKK, como promotores do câncer de cólon é corroborada por estudos farmacológicos que utilizaram o azoximetano (AOM) ou AOM associado ao dextran sulfato de sódio (DSS) como indutores do câncer colorretal. Ademais, o aumento das concentrações do TNF-alfa associado à obesidade é um mecanismo comprovado de aumento do câncer de fígado em modelos animais. Embora as evidências de que a inflamação e a hiperinsulinemia tenham um envolvimento em potencial na gênese tumoral mediada pela obesidade, à avaliação sistemática da contribuição independente desses fatores para o desenvolvimento do câncer colorretal ainda é inconsistente. Neste trabalho, foi avaliado se a obesidade modulou a sinalização insulínica e a inflamação em tecido colônico e nos tumores colorretais. Foi mostrado que a resposta inflamatória anormal induzida pela obesidade promoveu de forma contundente o câncer colorretal / Abstract: Colorectal cancer (CRC) remains a major health burden with more than 1 million cases worldwide and a disease-specific mortality of approximately 33% in the developed world. The association between obesity and the risk for CRC development is observed in both men and women. In addition to its association with obesity, inflammation and hyperinsulinemia also primarily may contribute to the risk for development of CRC. Among the major mediators of the inflammatory response is tumor necrosis factor (TNF-alfa), whose overexpression in adipose tissue is a common feature in human and animal models of obesity. TNF-alfa contributes to the deregulation of the insulin-signaling pathway, including serine phosphorylation of insulin-receptor substrate (IRS) proteins by kinases such as c-jun N terminal kinase (JNK) and inhibitor of nuclear factor-kB kinase (IKK). JNK and IKK activation induce inhibitory serine 307(Ser307) phosphorylation of IRS-1, which decreases insulin-mediated phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K)/Akt/mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway activation. TNF-alfa, first identified as an antitumor agent, now also is recognized as a tumor-promoting cytokine that links inflammation and cancer. The importance of TNF-alfa and its intracellular mediators, such as JNK and IKK, as colonic tumorigenic promoters is strengthened by knockout and pharmacologic studies, using azoxymethane (AOM) or AOM combined with dextran sulfate sodium (DSS) as inducers of colorectal carcinogenesis. Furthermore, the increased TNF-alfa levels associated with obesity are a potent liver tumor promoter in mice. Although the evidence for the potential involvement of inflammation and hyperinsulinemia in the development of obesity-mediated cancer is quite extensive, a systematic evaluation of the independent contribution of these factors to CRC development is lacking. Here, we examined whether obesity modulates insulin signaling and inflammation in the colon and CRC. We show that the obesity induced abnormal inflammatory response strongly promotes CRC / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Maria Palmira Daflon Gremião / Coorientador: Flávia Chiva Carvalho / Banca: Beatriz Stringuetti Ferreira Cury / Banca: Marco Vinícius Chaud / Resumo: O metotrexato (MTX) é um fármaco com solubilidade pH dependente, utilizado no tratamento de doenças do trato gastrointestinal, como a doença de Crohn, retocolite ulcerativa e carcinomas colorretal. O desenvolvimento de micro/nanossuspensões podem ser uma estratégia promissora para incorporação de fármacos que possuem solubilidade pH dependente, oferecendo vantagens como a redução do tamanho da partícula do fármaco que pode levar ao aumento da taxa de dissolução e da permeabilidade. Adicionalmente, polímeros estímulo-responsivos podem sofrer transição de fase sol-gel in situ, promovendo a mucoadesão e uma maior retenção do sistema no local de ação. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi desenvolver micro/nanossuspensões contendo polímeros mucoadesivos para liberação cólon-específica do MTX. As partículas foram obtidas pelo método Bottom-up, utilizando reações de ácido-base e estabilizadas com hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) e poloxâmero 407 (P407), através de agitação em Ultra-turrax ou Sonicador. Foram incorporados polímeros derivados do ácido poliacrílico como, Carbopol® ETD 2020 e Ultrez 10NF, poloxâmero 407 e goma gelana, pois estes polímeros atuam por diferentes mecanismos na mucoadesão como pH, temperatura e concentração iônica. A caracterização fíquico-química das micro/nanossuspensões foi realizada por espalhamento de luz, medida do potencial zeta, microscopia eletrônica de varredura (MEV), análise de textura (TPA) e ensaios de mucoadesão ex vivo. No método Bottom-up foram otimizadas condições para alcançar a solubilização e principalmente a precipitação do fármaco. Essa variação nas condições de precipitação, demonstrou que o aumento da proporção de ácido, permite modular o tamanho da partícula para a escala micro/nanométrica, na ausência... / Abstract: The methotrexate (MTX) is pH-dependent solubility drug used in the treatment of gastrintestinal diseases, such as Crohn's disease, ulcerative colitis and colorectal carcinomas. The micro/nanosuspensions development is a promising strategy to incorporate this type of drug, since it offers important advantages, such as particle size reducing of drug, which may lead to the increase of the dissolution and permeability rates of the drug. Additionaly, responsive-polymers can undergo in situ sol-gel phase transition, promoting mucoadhesion process followed by a greater retention of system in the action site. In this sense, the aim of this work was to develop micro and nanosuspensions associated to mucoadhesive polymers for colon specific release of MTX. The particles were obtained from Bottom-up method by acid-base reactions, employing the Ultra- Turrax or Sonicator and hydroxypropylmethylcellulose (HPMC) and poloxamer 407 (P407) as stabilizing. Polyacrylic acid (PAA), poloxamer 407 and gellan gum, which have different mucoadhesion mechanisms (pH, temperature and ionic concentration) were incorporated. The physic-chemical characterization of micro/nanosuspensions was realized by light scattering, measurement of zeta potential, scanning electron microscopy (SEM), texture profile analysis (TPA) and ex vivo mucoadhesion test. In the bottom-up method, the conditions were optimized to reach the solubilization and, mainly, the precipitation of drug. This variation in precipitation conditions showed that increasing the acid proportion is possible to modulate the particle size to the micro/nano-range, in the absence of stabilizer. The nanosuspensions exhibited pH above 5.0, while the microsuspensions below 4.0. For microsuspensions, analysis of the results showed that depending on the stirring process and type of stabilizer used it was possible ... / Mestre