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Desenvolvimento e caracterização de lipossomas com diferentes composições lipídicas contendo o peptídeo antifúngico 0WHistatina-5 / Development and characterization of liposomes with different lipid compositions containing the anti-fungal peptide 0WHistatin-5 / Desarrollo y caracterización de liposomas con diferentes composiciones lipídicas que contienen el péptido antifúngico 0WHistatina-5

Zambom, Carolina Reis 02 March 2018 (has links)
Submitted by Carolina Reis Zambom null (carolinarz@gmail.com) on 2018-03-20T17:16:52Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Carol_versão correçãotodos_versãofinalpósdefesa-edit.pdf: 2874016 bytes, checksum: 09ff8b1558d91035a2e106afc33f8bd8 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2018-03-23T17:38:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 zambom_cr_me_araiq_int.pdf: 2737311 bytes, checksum: 4eca302db8e9f1efe9d15f6049d7aa9a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-23T17:38:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 zambom_cr_me_araiq_int.pdf: 2737311 bytes, checksum: 4eca302db8e9f1efe9d15f6049d7aa9a (MD5) Previous issue date: 2018-03-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Atualmente aproximadamente 75-88% das infecções fúngicas são causadas por espécies de Candida, que geram um custo de 1,7 bilhões de dólares para a saúde pública, somente nos EUA. Candida albicans é o principal microrganismo causador da candidíase bucal, uma infecção da mucosa oral do organismo humano. A patogenicidade dessa espécie está relacionada com a formação de biofilmes, que agem como um revestimento impermeável e protetor, e tornam o microrganismo resistente a medicamentos convencionais. Neste caso, os antifúngicos mais comumente utilizados, não apresentam ação eficaz. Por esse motivo, a busca por novas opções de tratamento e por novos medicamentos está em constante desenvolvimento, principalmente na área da biotecnologia. Um exemplo disso são os peptídeos antifúngicos da família das Histatinas, entre eles a Histatina-5. Trata-se de um peptídeo naturalmente encontrado na saliva humana, mas que sofre rápida degradação quando presente na cavidade bucal, que é seu local de ação. Diante disto, o objetivo deste trabalho é o desenvolvimento de lipossomas de diferentes composições lipídicas, na intenção de proteger o peptídeo e melhorar sua ação, preservando seu potencial antifúngico. Para isso foi sintetizado o peptídeo 0WHistatina-5, um análogo do peptídeo Histatina-5, que contém o aminoácido triptofano em sua sequência. Foi utilizado o método de síntese em fase sólida, seguido de clivagem e purificação, com confirmação da massa molecular utilizando HPLC e ESI-MS. Os lipossomas foram produzidos pelo método de hidratação do filme lipídico, em 3 composições lipídicas diferentes, denominadas de F1, F2 e F3. F1 possui somente DPPC e Chol em sua composição, F2 contém, além desses componentes, PEG e F3 contém DPPC, Chol e POPG. Os lipossomas foram submetidos a processo de extrusão e sonicação para padronização do tamanho das vesículas, e estudo da melhor técnica para sua produção. Os lipossomas foram caracterizados por espalhamento de luz dinâmico determinação da eficiência de encapsulação, cinética de liberação, estabilidade e avaliação da atividade antifúngica. O método de síntese do peptídeo 0WHistatina-5 foi adequado e o processo de purificação possibilitou a obtenção do peptídeo com alto grau de pureza. Os lipossomas obtidos por extrusão apresentaram tamanho médio na faixa de 100 nm, enquanto os lipossomas obtidos por sonicação apresentaram tamanho menor, na faixa de 90 nm. Os lipossomas contendo 0WHistatina-5, apresentaram aumento em seu tamanho médio, indicando que o peptídeo está contido no compartimento interno aquoso dos lipossomas. A eficiência de encapsulação foi maior para os lipossomas obtidos por sonicação, sendo de 34,5% para a formulação F1, que contém DPPC e Chol em sua composição. A composição lipídica dos lipossomas está relacionada com a sua eficiência de encapsulação, e a presença de colesterol dificultou a encapsulação do peptídeo. A estabilidade das formulações também está relacionada com sua composição, sendo a formulação F3, obtida por sonicação e com POPG em sua formulação, a que apresentou melhor estabilidade quando armazenada por 60 dias a temperatura de 4°C. As formulações desenvolvidas apresentaram capacidade de liberar o peptídeo pelo tempo total de 96 horas, com o primeiro pico de liberação após 5 horas, e novo aumento do conteúdo liberado após 30 horas. O ensaio antimicrobiano foi realizado utilizando C. albicans ATCC 10231, e demostrou que no tempo de 4 horas a inibição para F1 foi de 66,5%. Assim, este trabalho demonstrou que a utilização de sistemas nanoestruturados é de grande importância para viabilizar a aplicação do peptídeo Histatina-5 em estudos terapêuticos, e em estudos in vivo no futuro. / Currently, approximately 75-88% of fungal infections are caused by Candida species, which generate a cost of $ 1.7 billion for public health in the US. Candida albicans is the main microorganism that causes oral candidiasis, an infection of the oral mucosa of the human organism. The pathogenicity of this species is related to the formation of biofilms, which act as an impermeable and protective coating, and make the microorganism resistant to conventional drugs. In this case, the most commonly used antifungals, have no effective action. For this reason, the search for new treatment options and new drugs is in constant development, especially in the biotechnology area. The antifungal peptides of the Histatin family, including Histatin-5, are an example. The Histatin-5 is a peptide naturally found in human saliva, but it undergoes rapid degradation when present in the oral cavity, which is its place of action. For this reason, this work aimed at developing liposomes of different lipid compositions, in order to protect the peptide, improve its action, and preserve its antifungal potential. For this, the peptide 0WHistatin-5, an analog of the peptide Histatin-5, was synthesized, which contains the amino acid tryptophan in its sequence. Therefore, the peptide was synthesized manually by the solid phase synthesis method, followed by cleavage and purification. The molecular weight was confirmed by using HPLC and ESI-MS. The liposomes were produced by the lipid film hydration method, with three different lipid compositions, named F1, F2 and F3. F1 has only DPPC and Chol in its composition, F2 contains, in addition to these components, PEG and F3 contains DPPC, Chol and POPG. The liposomes were submitted to extrusion and sonication processes, in order to standardize their vesicle size, and determine the best technique for their production. The dynamic light scattering technique was used to characterize the liposomes, which were tested for encapsulation efficiency, release kinetics, stability and evaluation of the antifungal activity. The synthesis method of the Histatin-5 was adequate and the purification process allowed to obtain the peptide in high purity. The liposomes obtained by extrusion presented average size in the range of 100 nm, while the liposomes obtained by sonication presented a smaller size, in the range of 90 nm. Liposomes loaded with Histatin-5 showed an increase in their mean size, which indicated that the peptide was contained in the intern aqueous compartment of the liposomes. The encapsulation efficiency was higher for the liposomes obtained by sonication. The F1 formulation presented an encapsulation efficiency of 34.5%, which contains DPPC and Chol in its composition. The lipid composition of the liposomes was related to their encapsulation efficiency, and the presence of cholesterol hindered the encapsulation of the peptide. The stability of the formulations was also related to their compositions. The F3 formulation obtained by sonication and containing POPG presented a higher stability when stored for 60 days at 4°C. The formulations showed the ability to release the peptide in the total period of 96 hours. The first release peak was observed after 5 hours, and a further increase of the released content was verified after 30 hours. The antimicrobial assay was performed using C. albicans ATCC 10231. It demonstrated that the inhibition for F1 was 66.5% after four hours of incubation, and it was maintained at 30% until the end of the experiment. Thus, this work conclusions showed that the use of nanostructured systems is of great importance to enable the application of Histatin-5 in therapeutic studies, and in vivo studies in the future. / 132393/20166
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Prevalência de Candida spp. na cavidade bucal de pacientes submetidos a transplante autólogo de células-tronco hematopoiéticas / Prevalence of Candida spp. in the oral cavity of patients undergoing autologous hematopoietic stem cells transplantation

Silva, Rosana Ferreira [UNESP] 01 December 2016 (has links)
Submitted by ROSANA FERREIRA SILVA (rosanafsilva@hotmail.com) on 2017-01-30T17:37:11Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO CORRIGIDA APROVADA 27.01.pdf: 1086012 bytes, checksum: 936dc95381491fd885964319d807944c (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-02-03T15:53:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_rf_me_sjc.pdf: 1086012 bytes, checksum: 936dc95381491fd885964319d807944c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-03T15:53:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_rf_me_sjc.pdf: 1086012 bytes, checksum: 936dc95381491fd885964319d807944c (MD5) Previous issue date: 2016-12-01 / Outra / Micro-organismos como fungos do gênero Candida, são habitantes comensais da cavidade bucal; em condições normais, co-existem com a microbiota normal sem provocar doenças. Entretanto, alterações locais ou sistêmicas como imunossupressão, desequilíbrio da microbiota oral, hipossalivação e mucosite, secundárias ao tratamento quimioterápico, predispõem pacientes com câncer a um alto risco de infecções fúngicas orais e sistêmicas. O objetivo desse trabalho foi avaliar a presença de leveduras do gênero Candida na cavidade bucal de pacientes onco-hematológicos submetidos a transplante autólogo de células-tronco hematopoiéticas (TACTH). Foram avaliados 27 pacientes, nos períodos pré, e pós-transplante. As amostras da cavidade bucal foram obtidas pela técnica de enxágüe bucal e semeadas em Chromagar Candida para triagem das cepas isoladas. Após o crescimento, foi extraído o DNA e submetido a identificação molecular (PCR) utilizando iniciadores para os genes ribossomais dessa levedura. Após a amplificação do fragmento esperado, as cepas foram sequenciadas utilizando sequenciador automático.Para análise descritiva e estatística dos resultados obtidos, os dados foram submetidos ao teste de Shapiro-Wilk para avaliação da normalidade. Em seguida, o teste de variância Wilcoxon foi utilizado. A significância adotada foi de 5%. Candida spp foi encontrada em 40,74% (11 pacientes), sendo que 2 (18,18%) possuíam mais de uma espécie, dos 9 pacientes colonizados por apenas uma espécie, 7 eram portadores de Candida albicans (77,77%) e 1 Candida dubliniensis (11,11%) e 1 C. krusei (11,11%). As colonizações mistas, nos outros dois pacientes, foram compostas de C. albicans + C. glabrata; C. albicans + C. dubliniensis. Na segunda coleta (C2), 9 (81,81%) dos portadores de Candida permaneciam colonizados, inclusive por espécies não albicans. A homologia na identificação das espécies com cepas padronizadas foi de 85 a 99%. Dentro das condições deste trabalho foi possível determinar, com precisão as espécies de Candida na cavidade oral dos pacientes, bem como observar que o uso profilatico de clorexidina tópica não elimina a colonização alertando para possibilidade de infecções sistêmicas. / Microorganisms such as fungi of the genus Candida, are commensal inhabitants of the oral cavity; under normal conditions co-exist with normal microflora without causing disease. However, local or systemic changes such as immunosuppression, imbalance in the oral microbiota, hyposalivation and mucositis, secondary to chemotherapy, predispose cancer patients at high risk of oral and systemic fungal infections. The aim of this project is to evaluate the presence of Candida species in the oral cavity of hematological malignances patients undergoing autologous transplantation of hematopoietic stem cells (HSCT). We evaluated 27 patients in pre- and post-transplant. Samples of the oral cavity were obtained by oral rinse technique and plated on Chromagar Candida for screening of the strains. After growth, the DNA was extracted and subjected to molecular identification (PCR) using primers for the ribosomal genes in this yeast. After amplification of the expected fragment, the strains were sequenced using the sequencer automático. For descriptive and statistical analysis of the results, the data will be submitted to the Shapiro-Wilk test for evaluation of normality. Then the variance Wilcoxon test was used. The significance of 5% was adopted. Candida spp was found in 40.74% (11pacientes), and 2 (18.18%) had more than one species, of the 9 patients colonized by only one species, 7 patients had Candida albicans (77.77%) and 1 Candida dubliniensis (11.11%) and 1 C. krusei (11.11%). Mixed settlements, in the other two patients were composed of C. albicans + C. glabrata; C. albicans + C. dubliniensis. In the second collection (C2), 9 (81.81%) of Candida carriers remained colonized, including by non albicans species. The homology identification of species standardized strains was 85 99%. Within the conditions of this study it was possible to determine with precision the species of Candida in the oral cavity of patients, and noted that the prophylactic use of topical chlorhexidine does not eliminate the possibility of colonization warning of systemic infections.
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Atividade antifúngica e modo de ação do extrato etanólico da folha de Schinopsis brasiliensis Engler, sobre espécies do gênero cândida

Lima, Monalyza Myllenna Silva Monteiro 28 July 2016 (has links)
Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2018-05-17T13:01:00Z No. of bitstreams: 1 PDF - Monalyza Myllenna Silva Monteiro Lima.pdf: 12304713 bytes, checksum: 703322ef151d8a2ec92306cccd842acc (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2018-05-23T16:59:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Monalyza Myllenna Silva Monteiro Lima.pdf: 12304713 bytes, checksum: 703322ef151d8a2ec92306cccd842acc (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-23T16:59:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Monalyza Myllenna Silva Monteiro Lima.pdf: 12304713 bytes, checksum: 703322ef151d8a2ec92306cccd842acc (MD5) Previous issue date: 2016-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Introduction: The use of natural products as an alternative therapy has become very promising in the treatment of various diseases in recent years, with this perspective; the agents that occur naturally stand out as a source of bioactive molecules with potential therapeutic application in the medical and dental fields. Objective: The objective of this study was to evaluate the antifungal activity and the ethanol extract mode of action of Schinopsis brasiliensis Engler sheet on the Candida genus. Methods: The plant material was collected in the city of Campina Grande -PB then was held to prepare the extract, for the determination of minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC). We conducted the phytochemical screening for the quantification of chemical constituents, then a test was made to verify the possible mechanism of action, whether via mobile or plasma membrane wall. Results: The MIC / MFC values for the ethanolic extract of S. brasiliensis (Braúna) ranged from 31.25 to 250 ug / ml on strains ATCC 60193 C. albicans, C. krusei ATCC 34135, C. tropicalis ATCC 705 C. albicans ATCC 18804, C. albicans and C. tropicalis CBS 562 94. CBS As for the mode of action, antifungal action S. brasiliensis (Braúna) seems to be related to the ionic permeability of the cell membrane. The extract exhibited an increased amount of total polyphenol, total saponins then in its composition, which are directly related to the antifungal activity of the extract. Conclusion: The extract of S. brasiliensis has a strong antifungal activity, acting probably in the ionic permeability of the fungal cell membrane. / Introdução: A Utilização de produtos naturais como alternativa terapêutica tem se tornado bastante promissora no tratamento de várias doenças nos últimos anos, com essa perspectiva, os agentes que ocorrem naturalmente se destacam como uma fonte de moléculas bioativas com potencial aplicação terapêutica nas áreas médicas e odontológicas. Objetivo: O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antifúngica e o modo de ação do extrato etanólico da folha de Schinopsis brasiliensis Engler sobre espécies do gênero cândida. Material e Métodos: O material vegetal foi coletado no município de Campina Grande –PB, em seguida foi realizada a preparação do extrato, para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM). Foi realizado o screening fitoquímico para a quantificação dos constituintes químicos, em seguida foi feito um teste para verificar o possível mecanismo de ação, se por via parede celular ou membrana plasmática. Resultados: Os valores de CIM/ CFM para o extrato etanólico de S. brasiliensis (Braúna) variaram de 31,25 a 250 µg/mL, sobre as cepas C. albicans ATCC 60193, C. krusei ATCC 34135, C. tropicalis ATCC 705, C. albicans ATCC 18804, C. albicans CBS 562 e C. tropicalis CBS 94. Quanto ao modo de ação, a ação antifúngica de S. brasiliensis (Braúna), parece estar relacionada com a permeabilidade iônica da membrana celular. O extrato exibiu uma maior quantidade de polifenóis totais, seguida de saponinas totais em sua composição, que estão diretamente relacionados com a atividade antifúngica do extrato. Conclusão: O extrato de S. brasiliensis apresenta uma forte atividade antifúngica, atuando, provavelmente, na permeabilidade iônica da membrana celular fúngica.
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Avaliação do potencial in vitro e in vivo de tiossemicarbazida, tiossemicarbazida em nanopartícula de quitosana e tiossemicarbazida derivada do canfeno como antifúngico sobre Candida albicans / Thiosemicarbazide, thiosemicarbazide in nanoparticle chitosan and thiosemicarbazide derived from camphene as antifungal over Candida albicans

Araújo, Deize Evangelista 06 May 2016 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-07-04T16:56:32Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deize Evangelista Araújo - 2016.pdf: 3131730 bytes, checksum: 8e60767c3408e2e5dff1bb07362a2c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-05T10:40:52Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deize Evangelista Araújo - 2016.pdf: 3131730 bytes, checksum: 8e60767c3408e2e5dff1bb07362a2c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-05T10:40:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Deize Evangelista Araújo - 2016.pdf: 3131730 bytes, checksum: 8e60767c3408e2e5dff1bb07362a2c80 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-05-06 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Candidiasis is a serious health problem that affects a large number of people arround the world. The treatment of this disease is carried out with antifungals, which do not provide an effective cure, besides having resistance reports and high toxicity. In this context, it is necessary to study new antifungal compounds. In addition, the delivery form of the compounds in the living organism is also target of research, since the controlled release of compounds in biological systems can improve the mode of action of many drugs. Therefore, nanostructured systems, such as nanoparticles of chitosan, have been widely studied as controlled delivery of drugs. Then, this study aimed to evaluate the antifungal potential against Candida albicans of thiosemicarbazide (TSC), thiosemicarbazide-camphene (TSC-C) and chitosan nanoparticles incorporated with thiosemicarbazide (nanoTSC). In in vitro assays, the compounds were effective to inhibit nearly 100% of the fungus in concentrations of 1,37 mM to TSC, 0,02 mM to TSC-C and 0,27 mM to nanoTSC, and the most effective compound was TSC-C. NanoTSC and empty nanoparticles were also evaluated as to cell toxicity, and the concentration able to inhibit the fungus showed no cytotoxic activity. To confirm the values observed in in vitro assays, experiments were conducted using an animal model for vulvovaginal candidiasis. The results showed that TSC-C was more efficient in inhibiting C. albicans compared with TSC and nanoTSC, but was less effective than miconazole. However, histopathological analysis showed that the groups treated with the compounds under study, showed less intensity of damage to the vaginal epithelium and inflammatory infiltrates, compared with the positive control and the group treated with miconazole. Thus, the results suggest that TSC, nanoTSC and TSC-C are promising compounds in the treatment of vulvovaginal candidiasis. / A candidíase constitui um sério problema de saúde, pois é uma doença que atinge uma grande parcela da população mundial. O tratamento dessa doença é realizado com antifúngicos, que, muitas vezes, não garantem uma cura efetiva, além de apresentarem relatos de resistência e alta toxicidade. Nesse âmbito, faz-se necessário o estudo de novos compostos antifúngicos. Aliado a isso, a forma de liberação de fármacos no organismo vivo é também alvo de pesquisas, uma vez que a liberação controlada de fármacos em sistemas biológicos pode melhorar a forma de ação dos mesmos. Para tanto, os sistemas nanoestruturados, como as nanopartículas de quitosana, têm sido amplamente estudados como meios de liberação controlada de princípios ativos. Sendo assim, esse trabalho teve como objetivo a avaliação do potencial antifúngico de tiossemicarbazida (TSC), tiossemicarbazida-canfeno (TSC-C) e de nanopartículas de quitosana incorporadas com tiossemicarbazida (nanoTSC) contra Candida albicans. Nos ensaios in vitro, os compostos foram eficientes em inibir quase 100% do crescimento do fungo em concentrações de 1,37 mM para TSC, 0,02 mM para TSC-C e 0,27 mM para nanoTSC, sendo que o composto mais eficiente foi TSC-C. NanoTSC e nanopartículas vazias também foram avaliadas quanto a toxicidade celular, sendo que não foi observada atividade citotóxica na concentração capaz de inibir o crescimento do fungo. Para avaliar a atuação dos compostos in vivo, foram realizados experimentos utilizando um modelo animal para candidíase vulvovaginal. Os resultados mostraram que TSC-C apresentou maior eficiência no tratamento de candidíase vulvovaginal em comparação com TSC e nanoTSC, porém foi menos eficiente do que miconazol. No entanto, a análise histopatológica mostrou que os grupos tratados com os compostos em estudo, apresentaram menor intensidade de danos ao epitélio vaginal e infiltrados inflamatórios, se comparados com o controle positivo e com o grupo tratado com miconazol. Dessa maneira, os resultados apresentados sugerem que TSC, nanoTSC e TSC-C são compostos promissores para o tratamento da candidíase vulvovaginal.
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Desenvolvimento e caracterização de sistema nanoestruturado contendo miconazol e farnesol para o tratamento de candidíase vulvovaginal / Development and characterization of a nanostructured system containing myco-nazole and farnesol for the treatment of vulvovaginal candidiasis

Costa, Adelaide Fernandes 15 April 2016 (has links)
Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2018-07-09T16:47:39Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adelaide Fernandes Costa - 2016.pdf: 3380283 bytes, checksum: 49241b96662ff74e75301658a9c75bf2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-10T11:12:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adelaide Fernandes Costa - 2016.pdf: 3380283 bytes, checksum: 49241b96662ff74e75301658a9c75bf2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T11:12:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Adelaide Fernandes Costa - 2016.pdf: 3380283 bytes, checksum: 49241b96662ff74e75301658a9c75bf2 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Vulvovaginal candidiasis (VVC) is caused mainly by opportunistic fungus Candida albicans and its yeast to hyphae transition is considered the major virulence factor of this pathogen. The increased incidence of VVC has highlighted the importance of developing new therapeutic strategies. The objective of this study was to develop a mucoadhesive nanostructured system comprising miconazole, and farnesol within chitosan for the treatment of VVC. The drug showed the antifungal miconazole expected efficacy with minimal inhibitory concentration (MIC) of 1 μg/mL. The farnesol quorum-sensing molecule was capable of inhibiting hypha-transition yeast at levels greater or equal to 300 μM. When tested together, farnesol has no effect compared to the MIC obtained for miconazole. Nanoparticles of chitosan-containing miconazole and farnesol were prepared by ionic gelation and showed favorable characteristics for use on mucous membranes, such as diameter less than 300 nanometers (nm), polydispersion index (PDI) less than 0.3, positive zeta potential and acid pH. The encapsulation efficiency (EE) of the nanoparticles was on average 81.1% for miconazole, 31.9% farnesol and 32.7% and 70.0% for miconazole and farnesol when co-encapsulated, respectively. The nanoparticles showed instability as the diameter and PDI, but were stable compared to the EE. Regarding toxicity in cultured fibroblasts (Balb/ c 3T3) were considered non-toxic. The nanoparticles showed antifungal activity against C. albicans strain used, with MIC of 2.5 μg/mL and 2 μg/mL for nanoparticles with miconazole and miconazole/ farnesol, respectively. Nanoparticles containing farnesol inhibit yeast-hyphae transition at concentrations greater than or equal to 240 uM. The antifungal activity in vivo was assessed in the murine model for VVC. Although there is no statistically significant difference between treatments in relation to the counting of colony forming units (CFU), the results suggest that chitosan nanoparticles containing miconazole and farnesol were effective for inhibiting fungal proliferation and chitosan nanoparticles containing farnesol were capable of decreasing the pathogenicity of infection demonstrated by the absence of inflammation. / A candidíase vulvovaginal (CVV) é causada principalmente pelo fungo oportunista Candida albicans. A transição de leveduras para hifas é considerada como um dos principais fatores de virulência deste patógeno. O aumento da incidência de CVV tem destacado a importância do desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. O objetivo do presente estudo foi o desenvolvimento de um sistema nanoestruturado muco-adesivo composto por miconazol e farnesol em quitosana para o tratamento de CVV. O fármaco miconazol apresentou eficácia antifúngica com concentração inibitória mínima (CIM) de 1 μg/mL. A molécula quorum sensing farnesol foi capaz de inibir a transição levedura-hifa em concentrações maiores ou iguais a 300 μM. Quando avaliados em conjunto, o farnesol não apresentou nenhum efeito em relação à CIM obtida para o miconazol. Nanopartículas de quitosana contendo miconazol e farnesol foram preparadas por gelificação iônica e apresentaram características favoráveis para utilização em mucosas, como diâmetro menor que 300 nanômetros (nm), índice de polidispersão (PDI) menor que 0.3, potencial zeta positivo e pH ácido. A eficiência de encapsulação (EE) das nanopartículas foram em média 81,1% para miconazol, 31,9% para o farnesol e 32,7% e 70,0% para o miconazol e farnesol quando co-encapsulados, respectivamente. As nanopartículas demonstraram instabilidade quanto ao diâmetro e PDI, porém foram estáveis em relação à EE. Quanto à toxicidade em culturas de fibroblastos (Balb/c 3T3) foram consideradas não tóxicas. As nanopartículas demonstraram ação antifúngica contra a cepa de C. albicans utilizada, apresentando CIM de 2,5 μg/mL e 2 μg/mL para nanopartículas com miconazol e miconazol/farnesol, respectivamente. Nanopartículas contendo farnesol inibiram a transição levedura-hifa em concentrações maiores ou iguais a 240 μM. A ação antifúngica in vivo foi avaliada no modelo murino para CVV. Apesar de não existir diferença estatisticamente significativa entre os tratamentos em relação à contagem de unidades formadoras de colônias (UFC), os resultados sugerem que nanopartículas de quitosana contendo miconazol e farnesol são eficazes, pois inibem a proliferação fúngica e que nanopartículas de quitosana contendo farnesol são capazes de diminuir a patogenicidade da infecção, demonstrada pela ausência de inflamação.
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Isolamento, quantificação, atividade enzimática e sensibilidade a antifúngicos de leveduras da saliva de pacientes imunocompetentes portadores de lesão bucal / Isolation, quantification, enzymatic activity and antifungal susceptibility of yeasts from whole saliva of non-compromised patients with clinical signs of candidiasis

Karen Regina Carim da Costa 31 July 2006 (has links)
A candidíase é a mais freqüente infecção fúngica oportunista, causada por leveduras do gênero Candida, de ocorrência comum na cavidade bucal. O aumento da incidência está relacionado, em grande parte, ao surgimento das terapias e patologias imunossupressoras, embora ela possa ocorrer em indivíduos considerados saudáveis. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar a microbiota leveduriforme de pacientes com lesão bucal suspeita de candidíase e compará-la com a de indivíduos saudáveis através da quantificação, produção de enzimas fosfolipase, proteinase e determinação da CIM dos antifúngicos: anfotericina B, itraconazol e fluconazol pelo método de microdiluição em caldo. As leveduras foram isoladas a partir de amostras de saliva não estimulada no meio CHROMagar® Candida, que permitiu a observação de colonização mista e uma identificação presuntiva. Posteriormente os isolados foram identificados pela metodologia clássica, através das provas: formação de tubo germinativo em soro humano, estudo da micromorfologia, crescimento a 37°C e 42°C, provas de assimilação e fermentação de carboidratos. Das 100 amostras de saliva dos pacientes com lesão, 70 apresentaram crescimento de leveduras e foram identificadas 63 C. albicans e 16 C. tropicalis. Entre as 50 amostras de salivas do grupo controle, 16 apresentaram crescimento e foram identificadas 14 C. albicans e 3 C. tropicalis. Quanto à capacidade de síntese das exoenzimas observou-se que 100% das C. albicans de ambos os grupos avaliados produziram as enzimas fosfolipase e proteinase em diferentes níveis de atividade. Os isolados de C. tropicalis não apresentaram produção da fosfolipase, com relação à proteinase 43,8% dos isolados de pacientes com lesão bucal foram positivos. Em relação aos testes de sensibilidade, a faixa da CIM para anfotericina B foi de 0,125 ? 4µg/mL para os isolados de C. albicans e de 2 ? 4 µg/mL para os de C. tropicalis, com o itraconazol o intervalo da CIM foi de 0,03 ? 16µg/mL para as duas espécies e para o fluconazol a faixa da CIM foi de 0,125 - ?64µg/mL para os isolados de C. albicans e de 0,25 - ?64µg/mL para os de C. tropicalis. Com base nos resultados obtidos conclui-se que: a análise de saliva é sensível para detecção de leveduras tanto em pacientes com sinais clínicos de candidíase quanto em indivíduos saudáveis portadores da levedura; C. albicans foi à espécie mais isolada em ambos os grupos; todas os isolados de C. albicans foram produtores das enzimas fosfolipase e proteinase; nenhum isolado de C. tropicalis apresentou atividade da enzima fosfolipase. A maioria dos isolados de C. albicans e C. tropicalis foram sensíveis in vitro aos antifúngicos testados / Candidiasis is the most frequent oportunistic fungal infection. It is caused by Candida yeasts, commonly seen in the oral cavity. Newer therapies and immunosupressive pathologies are related to the increase of oral candidiasis incidence, although it may occur in healthy subjects. Therefore, the aim of this work was to evaluate yeasts frequency in the oral cavity from patients with clinical signs of oral candidiasis and compare it with frequency observed in healthy subjects through quantification, phospholipase and proteinase activity tests and antifungal susceptibility (amphotericin B, itraconazole, fluconazole) by broth microdilution test. The yeasts were isolated from unstimulated whole saliva samples in CHROMagar® Candida medium, which allowed association between two or more species observation and presumptive identification. Latter, strains identification were confirmed by classical methodology. Of 100 candidiasis patients samples, yeast growth was observed in 70 samples and 63 C. albicans and 16 C. tropicalis strains were identified. Of 50 healthy subjects samples, yeast growth was observed in 16 samples and 14 C. albicans e 3 C. tropicalis strains were identified. Differential activity of phospholipase and proteinase enzymes was detected in 100% C. albicans strains in both groups. Phospholipase activity was not detected in C. tropicalis strains, and proteinase activity was detected in 43,8% strains from oral candidiasis group. Susceptibility tests showed amphotericin B MIC range from 0,125 ? 4 µg/mL for C. albicans strains and 2 ? 4 µg/mL for C. tropicalis strains; itraconazole MIC range from 0,03 ? 16 µg/mL for both species; fluconazole MIC range from 0,125 - ? 64 µg/mL for C. albicans strains and 0,25 - ? 64 µg/mL for C. tropicalis strains. In conclusion, our study demonstrates that saliva analysis is sensitive to detect yeasts from patients with clinical signs of oral candidiasis and from yeasts carriers; C. albicans was prevalent in both groups; all C. albicans strains showed phospholipase and proteinase activity; None C. tropicalis strains showed phospholipase activity. The majority of C. albicans and C. tropicalis strains were inhibited in vitro by antifungals evaluated
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Estudo comparativo de dois meios cromogênicos para identificação de espécies do gênero Candida, isoladas da mucosa oral de pacientes portadores de próteses totais completas ou uni maxilares superiores, com ou sem suspeita de candidíase oral / Comparative study between two chromogenic media for identification of species of genus Candida isolated from oral mucosa of patients wearing complete dentures or superior total prostheses and with signs or not of oral candidiasis

Elisangela Noborikawa Ferreira 15 December 2011 (has links)
O gênero Candida abriga várias espécies de importância médica e embora algumas venham adquirindo interesse crescente, Candida albicans continua sendo a mais importante e responsável pelo maior número de infecções. Encontrada na microbiota de seres humanos saudáveis, é responsável pela infecção oral fúngica mais comum, em relação bastante estreita com a estomatite sob prótese (EP). Esta é um processo inflamatório da mucosa oral, comum em portadores de próteses dentárias, parciais ou totais subjacentes a uma prótese, onde também podem estar outros microrganismos, interagindo com diversos fatores, ligados ao hospedeiro e aos próprios microrganismos presentes no biofilme da superfície interna da prótese. A maioria dos casos é assintomática e alguns pacientes relatam dor, prurido ou sensação de ardência. O diagnóstico é clínico, complementado por exames tais como o citológico e o micológico direto. O tratamento é quase sempre empírico, sem a clara certeza se o indivíduo é portador da levedura e se outras espécies, estão envolvidas. Os meios cromogênicos possibilitaram avanço no diagnóstico das candidíases orais. Sua utilização facilita a identificação destas leveduras, com resultados em menor tempo que os dos métodos já padronizados para outras espécies de Candida. O CHROMagar Candida (CC) é a referência, fornecendo resultados em 48 horas após semeadura direta do material coletado. O meio denominado Candida Chromogenic Agar (CCA), foi recentemente lançado em nosso mercado e tendo em vista o seu baixo custo parece ser mais uma ferramenta para o diagnóstico da candidíase, embora não haja, ainda, literatura disponível sobre o seu emprego. O objetivo do presente trabalho, foi comparar esse novo meio ao CHROMagar Candida, quanto à sensibilidade e especificidade no isolamento de espécies do gênero Candida da mucosa oral de portadores de próteses totais superiores, com ou sem sintomas de EP. Participaram do estudo, 61 pacientes, de ambos os gêneros, portadores de próteses totais (45,9%) ou uni maxilares superiores (54,1%). Dentre as 61 amostras coletadas, 45 (73,77%) foram positivas para leveduras em CC, sendo C. Albicans (38 amostras, 24 únicas e e 14 (36,84%) mistas. Destas, 8 de C. Albicans + C. Tropicalis (21,05%); 3 de C. Albicans + C. glabrata (7,89%); 3 de C. albicans + C. tropicalis + C. glabrata (7,89%). Outras espécies presentes foram, 15 C. tropicalis (33,33%). Duas únicas (13,33%), duas mistas, C. tropicalis + C. glabrata (13,33%) e uma C. tropicalis + C. parapsilosis (6,66%). Em CCA, das 45 amostras, 39 foram positivas (86,6%). C. albicans, foi a mais frequente, com 33 isolados (84,6%), sendo, 25 únicas (75,75%) e 8 mistas (24,25%). Assim, C. albicans + C. tropicalis (5 12,82%); C. albicans + C. glabrata (2 5,13%); C. albicans + C. tropicalis + C. glabrata (uma 2,56%). Outras espécies isoladas foram: C. tropicalis (3 7,7%), e C. glabrata, C. krusei e C. parapsilosis (uma de cada 2,56%). Foi possível concluir que o CHROMagar Candida foi mais sensível (100% x 65%) e mais específico para albicans (84,4% x 73,3%); tropicalis (33,3% x 20,0%) e glabrata (17,7 % x 8,8%). Ambos apresentaram a mesma especificidade (2,2%), para krusei e parapsilosis. / The genus Candida includes several species of medical importance and although some will acquire increasing interest, Candida albicans remains the most important and responsible for more infections. Found in the microbiota of healthy humans, is responsible for the most common oral fungal infection in very close relation with denture stomatitis (EP). This is a frequent inflammation of the oral mucosa in complete or partial dentures wearers, where may also be present other microorganisms, interacting with several factors linked to the host and the microorganisms present themselves, in the inner surface of the biofilm of the prostheses. Most cases are asymptomatic and some patients report pain, itching or burning sensation. The diagnosis is clinical, supplemented by tests such as cytological and mycological. Treatment is often empiric, with no clear certainty whether the individual is only a carrier of yeast and if other species are involved. The chromogenic media enabled advances in the diagnosis of oral candidiasis. Its use facilitates the identification of these yeasts, resulting in less time than those of already standardized methods for other species of Candida. The CHROMagar Candida (CC) is the reference, providing results in 48 hours from the material collection. The medium called Chromogenic Candida Agar (CCA) was recently launched in our market and in view of its low cost seems to be one more tool for the diagnosis of candidiasis, although there is a lack of literature available on it. The objective of this study was to compare this new medium to CHROMagar Candida for sensitivity and specificity in the isolation of species of genus Candida from the oral mucosa of patients with upper dentures with or without symptoms of EP. Sixty one patients of both genders were recruited wearing complete dentures (45.9%) or uni upper jaw (54.1%) prostheses. Among the 61 samples, 45 (73.77%) were positive for yeasts in CC, and C. albicans (38 samples, 24 unique and 14 (36.84%) mixed. From these, 8 of C. albicans + C. tropicalis (21.05%), 3 of C. albicans + C. glabrata (7.89%), 3 of C. tropicalis + C. albicans + C. glabrata (7.89%). Other species were present, being 15 C. tropicalis (33.33%). Two unique isolates (13.33%), two mixed: C. tropicalis + C. glabrata (13.33%) and C. tropicalis + C. parapsilosis (6.66%). In CCA, from the 45 samples, 39 were positive (86.6%). C. albicans was the most frequent, with 33 isolates (84.6%), being unique in 25 (75.75%) and eight in mixed cultures (24.25%). Thus, C. albicans + C. tropicalis (5 - 12.82%); C. albicans + C. glabrata (2 - 5.13%), C. tropicalis + C. albicans + C. glabrata (1- 2.56%). Other species isolated were C. tropicalis (3 7.7%) and C. glabrata, C. krusei and C. parapsilosis (one of each - 2.56%). It was possible to conclude that CHROMagar Candida was more sensitive (100% vs. 65%) and more specific for C. albicans (84.4% vs. 73.3%), C. tropicalis (33.3% vs. 20.0%) and C. glabrata (17.7% vs. 8.8%). Both media showed the same specificity (2.2%), for C. krusei and C. parapsilosis.
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Efeitos da Terapia Fotodinâmica mediada por laser de emissão vermelha e azul de metileno em vaginite induzida por Candida albicans / Effects of photodynamic therapy mediated by red laser and methylene blue aplied in induced vaginitis by Candida albicans

Rosa Maria Machado de Sena 28 November 2013 (has links)
A candidíase vaginal (CV) é uma doença causada por fungos do gênero Candida spp. que acomete milhares de mulheres no mundo. Estima-se que 75% das mulheres sofrerão CV pelo menos uma vez durante a vida fértil, 40 a 50% terão o segundo episódio e 5 a 8% sofrerão a forma recorrente, caracterizada pela ocorrência de quatro ou mais episódios durante um ano. O tratamento ainda permanece um desafio para as candidíases complicadas. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica que utiliza substâncias fotossensibilizadoras (FS) e uma fonte de luz, que juntas, produzem espécies reativas de oxigênio, tóxicas para micro-organismos e inofensivas para a célula animal hospedeira. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos antifúngicos e anti-inflamatórios da TFD mediada por azul de metileno (AM) e laser de emissao vermelha (LEV) no tratamento da CV em modelo animal. Fêmeas de camundongos BALB/c, com 6 a 10 semanas foram estrogenizadas e, 72h após, receberam via intravaginal 20μL de suspensão contendo 107 UFC/mL de C. albicans ATCC 90028. Cinco dias após, a TFD foi aplicada na vagina das fêmeas, utilizando AM 1000μM e laser (100mW, 660nm, energia de 36J por 6 min ou duas aplicações de 18J por 3min, com intervalo de 24h entre sessões). Após 0, 24 e 96h foram feitas lavagens vaginais para recuperação fúngica, cultivo microbiológico, eutanásia para remoção das vaginas e estudo histológico. Lâminas coradas por hematoxilina e eosina foram utilizadas para contagem da área de células inflamatórias (ACI), utilizando o programa ImageJ. Os resultados mostraram que TFD in vivo reduziu a carga fúngica em aproximadamente 1,6 log UFC/mL e, quando aplicada em duas sessões de 18J por 3min, diminuiu a ACI. A TFD mediada por LEV e AM 1000μM mostra-se como alternativa promissora para o desenvolvimento de novas modalidades terapêuticas para vaginites fúngicas. / Vaginal candidiasis (VC) is a disease caused by fungi of the genus Candida spp. that affects thousands of women worldwide. It is estimated that 75% of women in childbearing age will have VC at least once, 40 to 50% will have a second episode and 5 to 8 % will suffer recurrent form, characterized by the occurrence of four or more episodes during one year. Treatment remains a challenge for complicated candidiasis. Photodynamic therapy (PDT) is a therapeutic modality that uses photosensitizing (FS) substances and a light source, which together produce reactive oxygen species, toxic to microorganisms and harmless to host animal cell. The aim of this study was to evaluate antifungal and anti - inflammatory effects of PDT mediated by methylene blue (MB) and red laser (RL) in the treatment of CV in an animal model. Female BALB/c mice 6 to 10 weeks were estrous and 72h after received intravaginally 20μL of suspension containing 107 CFU/mL of C. albicans ATCC 90028. Five days after, PDT was applied in the vagina of females using MB 1000μM and laser (100mW, 660nm, 36J for 6 min or two applications of 18J for 3 min, with an interval of 24h between sessions). Vaginal washes for fungal recovery and microbiological culture, and euthanasia for removal of vaginas and histological study were made after 0, 24 and 96h. Glass slides stained by hematoxylin and eosin were used for counting the area of inflammatory cells (AIC) using ImageJ software. PDT in vivo reduced the fungal burden in approximately 1.6 log CFU/mL, and, when applied in two sessions with 18J for 3min, decreased the AIC. PDT mediated by RL and MB 1000μM shown as a promising alternative for the development of new therapeutic modalities for yeast vaginitis.
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Avaliação clínica e laboratorial de uma solução experimental à base de Ricinus communis em comparação ao hipoclorito de sódio para higiene de próteses totais / Clinical and laboratorial evaluation of an experimental solution based on Ricinus communis compared to sodium hypochlorite for denture cleansing

Mauricio Malheiros Badaró 06 December 2013 (has links)
Este estudo clínico-laboratorial avaliou uma solução à base de Ricinus communis para higiene de próteses totais, comparando-a ao hipoclorito de sódio, quanto à efetividade na remoção do biofilme, remissão de Candidíase Atrófica Crônica, grau de satisfação dos pacientes e rugosidade superficial da resina acrílica termopolimerizada. Sessenta e quatro usuários de próteses totais com ausência (n=40) ou presença de Candidíase (n=24) foram selecionados e orientados a escovar as próteses com escova específica e sabão neutro por 3 minutos, 3 vezes ao dia e imergi-las nas soluções de higiene (Hipoclorito de sódio 0,25% - S1; e 0,5% - S2; R. communisa 10% - S3; Salina - S4: controle) por 20 minutos. As soluções foram utilizadas de forma cruzada e randomizada com períodos de \"wash out\". Para quantificação do biofilme (ImageTool 3.0), a superfície interna foi evidenciada (vermelho neutro 1%) e fotografada ao final de cada período. A remissão da Candidíase foi avaliada por atribuição de escores antes e após o uso das soluções. A satisfação dos pacientes foi analisada por questionário. A rugosidade da superfície polida e não polida de 40 espécimes (90x30x4mm) de resina foi avaliada antes e após a exposição dos mesmos ao protocolo clínico de higiene por meio de rugosímetro e Microscopia Eletrônica de Varredura. A remoção do biofilme foi analisada como um \"split-plot\" com dois fatores de variação: presença de inflamação e soluções. A remissão da Candidíase foi analisada após ajuste dos dados por regressão logística multinomial. Para análise da satisfação dos pacientes os dados foram ajustados por regressões logísticas e foi adotada análise de simetria composta. Para avaliação da rugosidade das superfícies polida e não polida foi empregada análise de variância com dois fatores (período e solução). Todas as análises foram realizadas com nível de significância de 5%. Não houve diferença na porcentagem de biofilme entre pacientes com e sem inflamação, bem como na interação entre os fatores. Houve diferença entre soluções, sendo que o Hipoclorito de sódio a 0,25 e 0,5% promoveu as menores médias de biofilme (4,41±7,98 e 2,93±5,23), seguido do R. communis(6,95±10,93) e Salina (11,07±11,99). Para remissão da Candidíase, as soluções mais eficientes foram R. communis(50%) e Hipoclorito de sódio 0,25% (46%). O questionário de satisfação não indicou diferença entre as soluções. A rugosidade da superfície polida não foi alterada pelo período (p=0,062). Houve alteração em função das soluções (p=0,00) e da interação entre os fatores (p=0,005). Para S1 e S4, o período não influenciou na rugosidade. Para S2, houve alteração a partir de 07 dias, permanecendo estável após 14 dias. Para S3, houve alteração e estabilização a partir de 14 dias. Após 07 e 14 dias, S2 e S3 promoveram as maiores alterações, porém após 21 dias, não houve diferença entre as soluções, exceto a salina. A superfície não polida não foi influenciada pelos fatores período (p=0,358), solução (p=0,120) e interação (p=0,204). Concluiu-se que há viabilidade do uso do hipoclorito de sódio em menores concentrações e do Ricinus communis para remoção do biofilme, remissão da Candidíase e controle da rugosidade superficial. / This clinical-laboratory study evaluated a solution based on Ricinus communis for denture cleansing, comparing it to sodium hypochlorite, regarding biofilm removal capacity, remission of atrophic chronic candidiasis, degree of patient satisfaction and surface roughness of heat-polymerized acrylic resin. Sixty-four denture wearers with absence (n = 40) or presence of Candidiasis (n = 24) were selected and oriented on how to brush their dentures with a specific brush and mild soap for 3 minutes, 3 times a day and immerse them in hygiene solutions (0.25% sodium Hypochlorite - S1 and 0.5% - S2, R. communis 10% - S3; Saline - S4: control) for 20 minutes. The solutions were used in a randomized and cross form with \"washout\" periods. To quantify biofilm (ImageTool 3.0), the inner surface was disclosed (1% neutral red) and photographed at the end of each period. The remission of Candidiasis was assessed by assigning scores before and after using solutions. Patient satisfaction was assessed by questionnaire. The surface roughness of 40 polished and unpolished resin specimens (90x30x4mm) was evaluated before and after their exposure to clinical protocol hygiene by surface roughness and scanning electron microscopy. The biofilm removal was analyzed as a \"split-plot\" with two variation factors: inflammation and solutions. The candidiasis remission was analyzed after adjustment using multinomial logistic regression. For patient satisfaction logistic regression analysis was adopted and compound symmetry. For evaluation of surface roughness polished and unpolished was employed analysis of variance with two factors (time and solution). All the analysis were performed with a significance level of 5 %. There was no difference in the percentage of biofilm between patients with and without inflammation, as well as the interaction between the factors. There were differences among the solutions, having the Sodium Hypochlorite 0.25 % and 0.5% promoted the lowest average biofilm (4.41±7.98 and 2.93±5.23), followed by R. communis (6.95±10.93) and Saline (11.07±11.99) . For the remission of candidiasis, the most efficient solutions were R. communis (50%) and 0.25% sodium hypochlorite (46%). The satisfaction questionnaire indicated no difference among the solutions. The roughness of the polished surface was not affected by time (p = 0.062). There was a change in function of the solutions (p = 0.00) and the interaction between factors (p = 0.005). For S1 and S4, the period did not influence the roughness. For S2, there was a change from 07 days, remaining stable after 14 days. For S3, there were changes and stabilization from 14 days. After 7 and 14 days, S2 and S3 promoted major changes, but after 21 days, there were no difference among the solutions except the saline. The unpolished surface is not influenced by factors: period (p = 0.358), solution (p = 0.120) and interaction (p = 0.204). It was concluded that there is feasibility for using sodium hypochlorite at lower concentrations and Ricinus communis for the removal of biofilm, remission of candidiasis and control of surface roughness.
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Paracoccidioides lutzii e outros fungos de importância médica: desenvolvimento de vacina terapêutica e tratamento alternativo com compostos sintéticos no controle das micoses sistêmicas. / Paracoccidioides lutzii and other fungi of medical importance: development of therapeutic vaccine and alternative treatment with synthetic compounds in the control of systemic mycoses.

Diego Conrado Pereira Rossi 24 March 2017 (has links)
A maioria dos tratamentos antifúngicos são longos e não eficazes, portanto, há uma necessidade de pesquisa de novas alternativas. A fim de prospectar novos epitopos para uma vacina para Paracoccidioides lutzii e Cryptococcus spp.. Foi desenvolvido um sistema com o objetivo de purificar epitopos de macrófagos no contexto de MHCII. Além disso, houve pesquisa de epítopos na parede celular e sobrenadante de Paracoccidioides spp. A atividade antifúngica da miltefosina foi avaliada contra Paracoccicioides spp.. A miltefosina demonstrou atividade inibitória similar à anfotericina B. A atividade fungicida ocorreu em baixas concentrações, se observou alterações ultraestruturais e formação de melanina. A atividade do C7a in vitro e in vivo contra Candida spp. foi analisada. Os resultados mostraram atividade fungicida em valores baixos. Além disso, foi visto inibição da formação de hifas / pseudohifas e alterações morfológicas. Os ensaios in vivo demonstraram uma diminuição significativa na infecção em um modelo de candidíase vaginal e sistêmica. / Most of antifungal treatments are not completely effective or long, thus there is a need to search new alternatives. In order to prospect new epitopes for a vaccine to Paracoccidioides lutzii and Cryptococcus spp.. A system was developed with the purpose of purify epitopes from macrophages in the context of MHCII. Also, a search for epitopes in the cell wall and supernatant of Paracoccidioides spp. was done. The antifungal activity of miltefosina was evaluated against Paracoccicioides spp.. Miltefosine demonstrated inhibitory activity similar to amphotericin B. Fungicidal activity occurred at low concentrations, ultrastructural alterations and melanin production were observed. The activity of C7a in vitro and in vivo against Candida spp. was analyzed. The results showed fungicidal activity at low values. Also, it was revealed that inhibition of formation of hyphae/pseudohyphae and morphological alterations. In vivo assays demonstrated a significant decrease of fungal border of intravaginal and intravenous infected mice.

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