Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-22T18:10:08Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_IsabelRoggia_parcial.pdf: 2275089 bytes, checksum: 85859128d6658714abfc7173f2587948 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-22T18:10:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_IsabelRoggia_parcial.pdf: 2275089 bytes, checksum: 85859128d6658714abfc7173f2587948 (MD5) Previous issue date: 2018-03-26 / The Paullinia cupana var. sorbilis, popularly known as guarana, is one of the most promising compounds in Brazilian flora. The presence of methylxanthines (caffeine, theophylline and theobromine) and tannins (caffeine and catechin) in its composition make it a potent therapeutic compound. Stimulant, antifungal, antimicrobial, antiparasitic activities, among others, are described in the literature as potentiality of this compound. On the other hand, when the product is exposed to high temperatures, in the presence of moisture, oxygen and in direct contact with light or, when stored in inadequate packaging, the integrity of the active ingredient may be impaired and consequently, the decrease and/or loss of activity and onset of toxicity can be observed. With the intent of obtaining a more stable, effective and safe product, the objective of this work was to prepare and characterize a liposomal system containing guarana powder and to evaluate its safety "in vitro" through a study of cytotoxicity and genotoxicity. First, analytical methods for the quantification of markers present in guarana were developed and validated by ultraviolet derivative (UVD), for caffeine and catechin, and by high performance liquid chromatography (HPLC), for quantification of caffeine, theophylline, theobromine, catechin and epicatechin in samples of guarana powder and liposomes. The methods developed proved to be linear, specific, precise, accurate and robust for the simultaneous determination of the different markers in the guarana powder sample and in the liposomes. Through the forced degradation study it can be observed, in general, a reduction of polyphenols content (catechin and epicatechin), compared to basic (0.1 M NaOH) and photolytic (fluorescence UVC) conditions, both for the standards and for guarana and for liposomes. For the latter, a reduction in the content of active compounds was also observed against oxidative conditions (3% H2O2). It is believed that this change is related to the process of epimerization and photostability, already described for polyphenols when in contact with basic and photolytic solutions, respectively. After conducting a preformulation study it was observed that liposomes containing 1 mg.mL-1 guarana powder, prepared by the reverse phase evaporation method and the ethanol injection method presented adequate characteristics and remained more stable in relation to the formulations containing 10 and 5 mg.ml-1. After the physical-chemical characterization and stability study of these formulations, the reverse phase evaporation method was chosen as the best method for encapsulation of guarana. These systems remained stable under 10 refrigeration without significantly modifying their characteristics for 60 days. A toxicological evaluation of liposomes in different cell cultures (3T3, HaCaT, A549, HepG2 and THP1) and in different concentrations (3.91-500 μg.mL-1) showed that, in general, the liposomes do not present significant toxicity up to a concentration of 125 μg.mL-1 when analyzed by the neutral red technique (NRU). By the (3-(4,5- Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) technique (MTT), the viability reduction was observed from the concentration of 31.25 μg.mL-1 for the 3T3 and HepG2 cells and 62.5 μg.mL-1 for the A549 cell. Hemolysis, photohaemolysis, and hemoglobin oxidation tests showed that the liposomes, in the absence of guarana, caused damage to the eritrocytes and that guarana can reverse and/or protect the cells against this damage. It was also observed that this damage is possibly related to the presence of polysorbate 80 present in the formulations. When chlorpromazine was added to the experiments, it was observed that the guarana containing liposomes were able to protect the cells from the damage caused by that compound. Through the genotoxicity study it was possible to observe that guarana and liposomes did not cause DNA damage. The evaluation of the antioxidant activity by the DPPH technique proved the antioxidant effect, already described for guarana and, it was verified that this activity was maintained after the incorporation of guarana in the liposomes. This activity observed for all treatments was dose dependent of the concentration of guarana in the formulation. In this way, we can conclude that it was possible to develop a liposome system through the reverse phase evaporation method containing 1 mg.mL-1 of guarana powder, remaining stable for 60 days and showing safety against the different cell types tested. It is also worth noting the importance of new experiments, mainly the performance of the spray drying to improve the stability of the active ingredients and the characterization of these new systems formed, as well as additional tests regarding the safety profile. / A Paullinia cupana var. sorbilis, popularmente conhecida por guaraná é um dos compostos mais promissores da flora brasileira. A presença de metilxantinas (cafeína, teofilina e teobromina) e taninos (cafeína e catequina) em sua composição, fazem deste, um potente composto terapêutico. Atividades estimulante, antifúngica, antimicrobiana, antiparasitária, dentre outras, estão descritas na literatura como potencialidade deste composto. Em contra partida, quando o produto encontra-se exposto a temperaturas elevadas, na presença de umidade, oxigênio e em contato direto com a luz ou ainda, quando conservado em embalagens inadequadas, a integridade dos ativos pode ser prejudicada e consequentemente a diminuição e/ou perda da atividade e surgimento de toxicidade podem ser observadas. Com a proposta de obter um produto mais estável, eficaz e seguro, o objetivo deste trabalho foi preparar e caracterizar um sistema lipossomal contendo pó de guaraná, além de avaliar a sua segurança “in vitro” através de estudo de citotoxicidade e genotoxicidade. Primeiramente, métodos analíticos para quantificação dos marcadores presentes no guaraná foram desenvolvidos e validados por espectrofotometria ultravioleta derivada (UVD), para a cafeína e a catequina e por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para quantificação de cafeína, teofilina, teobromina, catequina e epicatequina em amostras de pó de guaraná e nos lipossomas. Os métodos desenvolvidos demostraram-se lineares, específicos, precisos, exatos e robustos para determinação simultânea dos diferentes marcadores em amostra de pó de guaraná e nos lipossomas. Através do estudo de degradação forçada pode-se observar, de forma geral, redução no teor dos polifenóis (catequina e epicatequina), frente a condições básicas (NaOH 0,1 M) e fotolíticas (UVC fluorescentes), tanto para os padrões, como para o guaraná e para os lipossomas. Para esse último, observou-se também redução no teor dos compostos ativo frente a condições oxidativas (H2O2 3%). Acredita-se que essa alteração esteja relacionada ao processo de epimerização e fotoinstabilidade, já descrito para os polifenóis quando em contato com soluções básicas e fotolíticas, respectivamente. Após a realização de um estudo de pré-formulação observou-se que os lipossomas contendo 1 mg/mL de pó de guaraná, preparados pelo método de evaporação em fase reversa e pelo método de injeção de etanol apresentaram características adequadas e mantiveram-se mais estáveis em relação as formulações contendo 10 e 5 mg/mL. Posteriormente a caracterização físico-química e o estudo de estabilidade destas formulações, o método de evaporação em fase reversa foi escolhido 8 como o melhor método para encapsulação do guaraná. Esses sistemas mantiveram-se estáveis sobre refrigeração, sem modificar de forma significativa, das suas características por 60 dias. A avaliação toxicológica dos lipossomas frente á diferentes culturas celulares (3T3, HaCaT, A549, HepG2 e THP1) em diferentes concentrações (3,91 – 500 μg/mL), mostrou que, de forma geral, os lipossomas não apresentam toxicidade significativa até a concentração de 125 μg/mL quando analisados pela técnica de vermelho neutro (NRU). Já pela técnica de brometo de 3-(4,5-dimetil-2- tiazolil)-2, 5-difenil-2H-tetrazólio (MTT) a redução da viabilidade foi observada a partir da concentração de 31,25 μg/mL para as células 3T3 e HepG2 e 62,5 μg/mL para a célula A549. Os testes de hemólise, fotohemólise e oxidação da hemoglobina mostraram que os lipossomas sem a presença do guaraná apresentaram dano aos eritrócitos e que o guaraná consegue reverter e/ou proteger as células contra esse dano. Observou-se também que esse dano, possivelmente esteja relacionado à presença do polissorbato 80 presente nas formulações. Quando foi adicionado a clorpromazina aos experimentos, observou-se que os lipossomas contendo guaraná conseguiram proteger as células do dado provocado por esse composto. Pelo estudo de genotoxicidade foi possível observar que o guaraná e os lipossomas contendo guaraná não ocasionaram dano ao DNA. A avaliação da atividade antioxidante pela técnica de DPPH comprovou o efeito antioxidante, já descrito para o guaraná, e ainda, verificou-se que essa atividade foi mantida após a incorporação do guaraná nos lipossomas. Essa atividade observada para todos os tratamentos foi dose dependente da concentração de guaraná na formulação. Desta forma, podemos concluir que foi possível desenvolver um sistema lipossomal através do método de evaporação em fase reversa contendo 1 mg/mL de pó de guaraná, mantendo-se estável por 60 dias e mostrando-se seguro frente os diferentes tipos celulares testados. Resalta-se ainda, a importância de novos experimentos, principalmente a realização da secagem por aspersão para melhorar a estabilidade dos ativos e a caracterização destes novos sistemas formados, além de testes adicionais quanto ao perfil de segurança.

Orientador: Carol Hollingworth Collins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-05T16:30:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Magalhaes_DanielRodrigues_D.pdf: 3095259 bytes, checksum: 34caab6a50b8a2f3071fca69103ab15f (MD5) Previous issue date: 2005 / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

Orientador: Carol Hollingworth Collins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-08T23:26:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SilvaJunior_EliasSeveroda_M.pdf: 1708075 bytes, checksum: 992e31e82bde038aa81939043b9dd1a7 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Neste trabalho foram feitos estudos de otimização das condições de preparo de fases estacionárias para uso em Cromatografia Líquida de Alta Eficiência em fase reversa (CLAE-FR) da mistura de poli(dimetilsiloxano) (PDMS) e poli(metiloctadecilsiloxano) (PMODS), sorvidos e imobilizados por tratamento térmico (em atmosfera inerte) na superfície de sílica Kromasil (esférica, 5 mm). As fases estacionárias foram avaliadas por testes químicos, físicos, cromatográficos e de estabilidade em fases móveis em condições agressivas. As melhores condições de preparo das fases estacionárias foram: sorção de 25 % PMODS e 25 % PDMS sobre sílica, mantendo 15 dias de repouso, e imobilizados a 128 °C durante 8 horas e 40 minutos. As fases estacionárias preparadas nas melhores condições apresentaram eficiências de 60000 e 38000 pratos m, respectivamente, para os compostos naftaleno e N,N-dimetilanilina, além de picos simétricos mesmo para compostos ácidos (fenol) e básicos (N,N-dimetilanilina). O estudo de caracterização através das misturas-teste de Tanaka indicou a presença de silanóis residuais, mas os resultados dos parâmetros avaliados foram razoáveis, principalmente comparados a fases PMODS, PDMS e algumas comerciais. Quanto aos testes de estabilidade, a FE manteve-se estável durante 250 volumes de coluna para o teste básico apresentando queda significativa da eficiência (60%) para o naftaleno e pequena variação na assimetria para os compostos naftaleno e N,N-dimetilanilina, já no teste ácido a FE manteve-se estável por 950 volumes de coluna apresentando uma queda suave na eficiência (10%) e variações na assimetria a partir de 400 volumes de coluna, ambos para o acenafteno, porém o fator de retenção caiu nos dois testes indicando a perda de parte da mistura polimérica / Abstract: In this work the conditions for the preparation of a stationary phase of use in reverse phase high performance liquid cromatography (RP-HPLC) with a mixture of poly(dimethylsiloxane) (PDMS) and poly(methyloctadecilsiloxane) (PMODS) sorbed and immobilized by thermal treatment (in an inert atmosphere) on Kromasil silica (spherical, 5 mm) were optimized. The stationary phases were evaluatied by chemical, physical and chromatographic tests and for stability in mobile phases having agressive conditions. The best conditions for preparation of the stationary phases were: sorption of 25 % PMODS and 25 % PDMS on to the silica, storing for 15 days and then immobilizing at 128 °C for 8 hours and 40 minutes. The stationary phases from these conditions showed efficiencies of 60000 and 38000 plates m for naphthalene and N,N-dimethylaniline and symmetrical peaks for acidic (phenol) and basic (N,N-dimethylaniline) compounds. A characterization study using Tanaka's test-mixture indicated the presence of residual silanols, but evaluation parameters were still resonable, compared to PMODS, PDMS and some commercials phases. In the stability tests the stationary phase was for stable 250 column volumes in the basic test, showing a decrease of efficiency (60 %) for naphthalene but little change in asymmetry for naphthalene and N,Ndimethylaniline. In the acid test the stationary phase maintained efficiency for 950 column volumes with some decrease in efficiency (10 %) but showed a small change in asymmetry after 400 column volumes for acenaphtene. However, the retention factor fell in both tests, showing partical loss of the polymeric mixture without changing the coverage of the support / Mestrado / Quimica Analitica / Mestre em Química

Orientador: Isabel Cristina Sales Fontes Jardim / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-15T06:33:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maldaner_Liane_D.pdf: 4323260 bytes, checksum: 773bada382fd206c910361612918f566 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Novas fases estacionárias (FE) fluoradas foram preparadas a partir da imobilização do poli(metil-3,3,3-trifluorpropilsiloxano) (PMTFS) em partículas de sílica Kromasil de 5 mm, por tratamento termico (TT) ou por radiação micro-ondas (RM). As condições de imobilização otimizadas através do emprego de planejamento de experimentos foram, 200 °C por 12 horas para o TT e 126 °C (760 W) por 50 minutos para a RM. A caracterização físico-quimica permitiu concluir que o polímero ficou fisicamente adsorvido e também quimicamente ligado a superfície do suporte cromatografico, em ambos os procedimentos de imobilização, resultando em porcentagens de carbono de 9 % e 10 % para as FE obtidas por TT e por RM, respectivamente. A caracterização cromatográfica mostrou que as FE desenvolvidas apresentaram eficiências > 70.000 N m, características hidrofóbicas, seletividade estérica e metilênica e uma pequena interação entre os compostos básicos e os grupos silanóis residuais. Esta redução das interações indesejáveis pode estar associada com a presença dos átomos de fluor que promovem diferentes interações com os compostos básicos e, dessa forma, reduzem estes efeitos. As FE fluoradas foram seletivas para a separação de isômeros de posição e de fármacos, sendo uma alternativa atrativa as FE tradicionais / Abstract: New fluorinated stationary phases (SP) were prepared through thermal or microwave immobilization of poly(methyl-3,3,3-trifluoropropylsiloxane) (PMTFS) onto 5 mm Kromasil silica particles. The immobilization conditions were optimized employing experimental design and resulted in 200 °C for 12 hours for thermal treatment and 126 °C (760 W) for 50 minutes for microwave irradiation. Physical-chemical characterization showed that the polymer was both physically adsorbed and chemically bonded to the chromatographic support, in both immobilization procedures, resulting in a percent carbon load of 9 % and 10 % for the SP immobilized by thermal treatment and by microwave irradiation, respectively. Chromatographic characterization showed that the SP developed presented efficiencies > 70 000 N m, hydrophobic characteristics, steric and methylene selectivity and small interactions between the basic compounds and the residual silanol groups. This reduction of the undesirable interactions can be associated to the presence of the fluorine atoms that promote different interactions with the basic compounds and thus reduce these effects. The fluorinated SP were selective for the separation of positional isomers and pharmaceuticals and are an attractive alternative to the classical reversed stationary phases / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Nas Ãltimas dÃcadas a produÃÃo de fitoterÃpicos tem explorado novas possibilidades tecnolÃgicas como a produÃÃo de extratos secos padronizados. Isso decorre das vantagens apresentadas desses produtos em relaÃÃo Ãs soluÃÃes extrativas. A casca do caule de Amburana cearensis (cumaru, Fabaceae) à uma Ãrvore amplamente utilizada nas prÃticas caseiras da medicina popular nordestina indicado no tratamento da asma. A planta tem sido utilizada como matÃria-prima ativa na produÃÃo do xarope de cumaru por Programas PÃblicos de Fitoterapia e indÃstria FarmacÃutica. O objetivo do presente trabalho foi realizar o desenvolvimento e controle das etapas inerentes à produÃÃo do extrato seco padronizado de Amburana cearensis, bem como investigar seus efeitos tÃxicos prÃ-clÃnicos. Para tanto, foi desenvolvido selecionado o mÃtodo de secagem da planta (droga vegetal) monitorado pela determinaÃÃo de parÃmetros, como teor de umidade e de marcadores (cumarina e amburosÃdio A) determinados por CLAE-DAD. No desenvolvimento do mÃtodo extrativo, forma investigadas a influÃncia de algumas variÃveis sobre o processo (tempo de maceraÃÃo/percolaÃÃo, volume de extraÃÃo e % de etanol em Ãgua). O teor de marcadores (resposta) foi usado como critÃrio de avaliaÃÃo. A anÃlise estatÃstica, incluindo anÃlise de superfÃcie da resposta mostrou que a medida que o teor de etanol (20, 60 e 100% em Ãgua) aumenta, aumenta o teor de marcadores nos extratos, enquanto o tempo mostrou uma influÃncia sutil no processo. O volume de extraÃÃo apresentou um efeito inverso ao observado para o teor de etanol. Assim, o mÃtodo extrativo selecionado obtido por maceraÃÃo/percolaÃÃo a temperatura ambiente compreendeu: soluÃÃo extratora: Etanol a 100%; volume de extraÃÃo: 200 mL e tempo de extraÃÃo: 24h). As melhores condiÃÃes de secagem do extrato de cumaru foram a temperatura de entrada de 95ÂC e 25 % de diÃxido de silÃcio, resultando num rendimento de 40 %. A avaliaÃÃo toxicolÃgica prÃ-clÃnica preliminar in vivo â teste hipocrÃtico, mostrou que o extrato seco padronizado de cumaru (Cumarina: 123,0  0,08 mg/g extrato; amburosÃdio A: 496,8  0,29 mg/g) possui uma baixa toxicidade, porÃm mostrou uma citotoxicidade nas concentraÃÃes de 50, 100 e 200 Âg/mL em neutrÃfilo humano mensurada atravÃs da atividade da enzima lactato desidrogenase. Os resultados obtidos no presente estudo permitiram o desenvolvimento de mÃtodos de produÃÃo, alÃm de parÃmetros analÃticos que podem ser aplicados desde no controle de qualidade da droga vegetal à produtos derivados como o extrato seco de A. cearensis. AlÃm disso, a avaliaÃÃo toxicolÃgica prÃ-clÃnica permitiu uma visÃo preliminar do grau de seguranÃa prÃ-clÃnica do produto. / In recent decades the production of phytotherapy has explored new technological possibilities as the production of standardized extracts dried. This stems from the advantages offered these products for solutions extrativas. The bark of the stem of Amburana cearensis (cumaru, Fabaceae) is a tree widely used in home practice of medicine popular northeastern indicated for the treatment of asthma. The plant has been used as feedstock in the production of active syrup cumaru by Public Programs of Phytotherapy and pharmaceutical industry. The purpose of this study was the development and control of the steps involved in the production of dry extract standardized Amburana cearensis and investigate its pre-clinical toxicity. For both, was selected developed the method of drying of the (drug plant) monitored by the determination of parameters such as moisture content and labels (coumarin and amburosÃdio A) determined by HPLC-DAD. In developing the method extractive, shape investigated the influence of some variables on the process (of maceration time / percolation, and volume of extraction% ethanol in water). The content of labels (response) was used as a criterion for evaluation. The statistical analysis, including analysis of the surface of the response showed that the extent that the content of ethanol (20, 60 and 100% in water) increases, increases the level of markers in the extracts, while the time showed a subtle influence in the process. The volume of extraction had an effect opposite to that observed for the content of ethanol. Thus, the method selected extractive obtained by macerating / percolation at room temperature understood: extractor solution: Ethanol 100%; volume of extraction: 200 mL and time of extraction: 24h). The best conditions for drying the extrtao of cumaru were the temperature of entry of 95  C and 25% of silicon dioxide, resulting in a yield of 40%. The toxicological evaluation preliminary pre-clinical in vivo - hipocrÃtico test showed that the dry extract standardized cumaru (Coumarin: 123.0  0.08 mg / g extract; amburosÃdio A: 496.8  0.29 mg / g) has a low toxicity, but showed a cytotoxicity at concentrations of 50, 100 and 200 μ g / ml in human neutrophil measured by the activity of the enzyme lactate dehydrogenase. The results of this study enabled the development of production methods, and analytical parameters that can be applied from the quality control of drugs to plant products such as dried extract of A. cearenis. Moreover, the toxicological evaluation pre-clinical allowed a preliminary overview of the degree of pre-clinical safety of the product.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-16T19:24:09Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-17T14:43:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-17T14:45:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-17T14:49:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-17T14:49:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Milena Freitas de Lima.pdf: 3474577 bytes, checksum: aa6df2bc0ca2cc96c37f1e2422c7ae82 (MD5) Previous issue date: 2013-12-18 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Theobroma grandiflorum is a species native of the Amazon with high economic potential, which belongs to the same genus as cocoa (Theobroma cacao). Its fruit, known as cupuaçu, is the largest in the genus Theobroma, reaching up to 4 kg in weight. The economic base of this species is concentrated in the mesocarp (pulp), widely known and commercialized for the production of juices, nectars, ice cream and others. In the process of obtaining the the cupuaçu pulp byproducts are generated which correspond to 65% by weight of each fruit, that although they are sources of phenolic substances and antioxidants are not used. This study aimed to describe the chemical composition of phenolic extracts and alcaloídicos of the epicarp and endocarp cupuaçu using chromatographic and spectrometric techniques. Different methods combined with ethanol and ethanol / water (7:3) was used for the extraction of phenolic substances and for extraction of purine alkaloids four specific methodologies for methylxanthines were used, in order to obtain the best conditions for extractions. The total phenolic content ranged between 8.62% (113.30 mgGAEs/g) and 12.96% (157.8 mgGAEs/g) for the epicarp extracts and between 3.17% (64.5 mgGAEs/g) and 12.86% (182.6 mgGAEs/g) for cupuaçu endocarp. The optimum conditions that provided the highest levels of phenolics and flavonoids were the extraction by maceration of the epicarp hot ethanol and the extraction of the endocarp by soxhlet ethanol / water (7:3). The profile of extractions obtained by mass spectrometry indicates the íons of the m/z 339, 325 e 311 characteristic of phenolic acids, as a major component both epicarp as the endocarp cupuaçu. The epicarp extracts showed better capacity scavenging free radicals (CI50=69,5 μg/mL) in relation to the endocarp (CI50=223,6 μg/mL). The presence of methylxanthines caffeine and teacrina were confirmed by mass spectrometry (MS) and high performance liquid chromatography (HPLC-UV) by comparison of the retention time of their respective standards. The confirmation of the teacrina molecule was performed by nuclear magnetic resonance (1 H NMR) and carbon (13 C NMR). The study of the utilization of these residues indicates the endocarp cupuaçu as excellent raw material source teacrina methylxanthine, addition to the unprecedented presence of caffeine and valuing both epicarp and the endocarp since they are considered byproducts of industrial pulps Amazon. / Theobroma grandiflorum é uma espécie nativa da Amazônia com elevado potencial econômico, que pertence ao mesmo gênero que o cacau (Theobroma cacao). Seu fruto, conhecido como cupuaçu, é o maior no gênero Theobroma, chegando a atingir até 4 kg em massa. A base econômica dessa espécie concentra-se no mesocarpo (polpa), bastante conhecido e comercializado para a produção de sucos, néctares, sorvetes entre outros. No processo de obtenção da polpa do cupuaçu são gerados subprodutos que correspondem a 65% em peso de cada fruto, que apesar de serem fontes de substâncias fenólicas e antioxidantes não são aproveitados. Este estudo teve como objetivo descrever a composição química dos extratos fenólicos e alcaloídicos do epicarpo e endocarpo do cupuaçu utilizando técnicas espectrométricas e cromatográficas. Foram utilizados diferentes métodos combinados com etanol e etanol/água (7:3) para a extração das substâncias fenólicas e para a extração dos alcaloides purínicos quatro metodologias específicas para metilxantinas foram usadas, afim de obter as melhores condições para as extrações. O teor de fenólicos totais variou entre 8,62% (113,30 mgGAEs/g) e 12,96% (157,8 mgGAEs/g) para os extratos do epicarpo e entre 3,17% (64,5 mgGAEs/g) e 12,86% (182,6 mgGAEs/g) para o endocarpo do cupuaçu. As condições ótimas que proporcionaram maiores teores de fenólicos e flavonoides foram a extração por maceração do epicarpo à quente em etanol e a extração do endocarpo por soxhlet em etanol/água (7:3). O perfil das extrações obtido por Espectrometria de Massas indica os íons de m/z 339, 325 e 311 característicos de ácidos fenólicos, como componente majoritário tanto no epicarpo quanto no endocarpo do cupuaçu. Os extratos do epicarpo apresentaram melhores capacidades de sequestro de radicais livres (CI50=69,5 μg/mL) em relação ao endocarpo (CI50=223,6 μg/mL). A presença das metilxantinas cafeína e teacrina foram confirmadas por espectrometria de massas (EM) e por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-UV) por comparação do tempo de retenção de seus respectivos padrões. A confirmação da molécula da teacrina foi realizada por ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN1H) e carbono (RMN13C). O estudo do aproveitamento desses resíduos indica o endocarpo do cupuaçu como excelente matéria-prima fonte da metilxantina teacrina, além da inédita presença da cafeína valorizando tanto e epicarpo quanto o endocarpo uma vez que são considerados subprodutos das indústrias de polpas da Amazônia.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-16T19:33:56Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Mauro Galucio Garcia.pdf: 8414985 bytes, checksum: 192bccb9ac6b0279be9e5ff578bb8132 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-17T18:21:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Mauro Galucio Garcia.pdf: 8414985 bytes, checksum: 192bccb9ac6b0279be9e5ff578bb8132 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-17T18:26:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Mauro Galucio Garcia.pdf: 8414985 bytes, checksum: 192bccb9ac6b0279be9e5ff578bb8132 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-17T18:26:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Mauro Galucio Garcia.pdf: 8414985 bytes, checksum: 192bccb9ac6b0279be9e5ff578bb8132 (MD5) Previous issue date: 2013-08-01 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / During wood processing by timber industry around 70% of lumber becomes unusable (garbage), which usually is thrown away at inappropriate places, causing environmental troubles. In attempt to assuage this problem and trying harnessing the underused waste, some proposals have been emerged, like the use of these residues to produce handcrafts which reduces the waste of wood and adds a great value to a thing that is seen as a trash. Other proposal is the present study, which proposed the phytochemical study of three timber species of Fabaceae family: Dipteryx odorata (cumaru), Swartzia laevicarpa (saboarana) e Andira parviflora (sucupira-vermelha), contributing for the knowledge of the chemical constituents of the wood, and in search for secondary metabolites with biological activity or chemical relevance. The organic crude extracts were fractionated by chromatography column (CC). The fractionation of the dichloromethane extract from residues of S. laevicarpa, resulted in the isolation of 8-hydroxy-3,4,9,10-tetramethoxipterocarpan. The methanolic extract of D. odorata fractionated in CC led the isolation of four isoflavones: 8-O-metilretusin, cladrastrin, 7,3’-dihydroxy-8,4’dimethoxi-isoflavone and the 7,3’-dihydroxy-5,6,4’-trimethoxi-isoflavone, this last one is reported for the first time. The fractionation of the methanolic extract of the alburnum of A. parviflora in CC led the isolation of the isoflavone genistein, and in the methanolic extract of A. parviflora's core were isolated the 7,5’,6’-trihydroxy-4’-methoxi-isoflavan and biochanin A. The resulting mother liquor of biochanin A, was evaluated by HPLC-EFS-NMR, leading to the isolation and identification of substances 3,8-dihydroxy-9-methoxipterocarpan,8-dihydroxy-9-methoxipterocarpan, nissolin, medicarpin, biochanin A and the novel bipterocarpan medicarpin secundiflorol-I (OC 3 → C-3 '). In this work were identified by spectroscopic techniques flavonoids (isoflavone, isoflavan and pterocarpan) typical of the Fabaceae family. / lixo, geralmente descartado em locais inadequados causando grandes problemas ambientais. Na tentativa de amenizar esses problemas e na busca de aproveitamento dos resíduos sólidos têm surgido propostas como a produção de pequenos objetos a qual é uma forma sócio-econômica de agregar valor aos resíduos. Por meio de estudos fitoquímicos dos resíduos, a presente proposta visou proporcionar o conhecimento químico de madeiras das espécies de família Fabaceae Dipteryx odorata (cumaru), Swartzia laevicarpa (saboarana) e Andira parviflora (sucupira-vermelha). Os extratos orgânicos foram fracionados por cromatografia em coluna (CC). O fracionamento do extrato diclorometano dos resíduos de S. laevicarpa resultou no isolamento de 8-hidroxi-3,4,9,10-tetrametoxipterocarpano. O extrato metanólico de D. odorata fracionado em CC forneceu 4 isoflavonas: 8-O-metilretusina, cladastrina, 7,3’-dihidroxi-8,4’dimetoxiisoflavona e a inédita 7,3’-dihidroxi-5,6,4’-trimetoxiisoflavona. Os fracionamentos dos extratos metanólico do alburno de A. parviflora em CC forneceu a isoflavona genisteína e do cerne o isolamento de 7,5’,6’-trihidroxi-4’-metoxiisoflavana e biochanina A, ambas purificadas por recrsitalização. A água-mãe resultante desta última foi avaliada a técnica hifenada CLAE-EFS-RMN, levando ao isolamento e identificação das substâncias 3,8-dihidroxi-9-metoxipterocarpano, 8-dihidroxi-9-metoxipterocarpano, nissolina, medicarpina, biochanina A e o inédito bipterocarpano medicarpina-secundiflorol I (C-3→O-C-3'). Nesse estudo identificou-se por técnicas especteroscópicas flavonóides (isoflavona, isoflavana e pterocarpano) típicos da família Fabaceae.

A obesidade é uma doença crônica que atinge uma parcela preocupante da população mundial. É classificada pela OMS em graus l, ll e lll, de acordo com o Índice de Massa Corporal (IMC). A obesidade Grau lll, ou obesidade mórbida, é um fator agravante para inúmeras doenças crônicas como as doenças gastro-esofágicas, diabetes mellitus e câncer. A cirurgia bariátrica é uma intervenção bastante eficaz quando se fala em obesidade grau lll clinicamente severa. Porém, esta intervenção pode alterar a absorção e biodisponibilidade de fármacos como o inibidor da bomba de prótons, o omeprazol. O objetivo deste estudo foi desenvolver um método analítico sensível e rápido utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) acoplada a detector de ultra-violeta (UV) para quantificação de omeprazol em plasma de pacientes submetidos a cirurgia bariátrica no pré e pós-operatório. A preparação da amostra foi feita por extração em fase sólida utilizando uma coluna SPE DSC-18Lt. Com coluna cromatográfica Nucleosil standard C18 phases 250 x 4 mm, 5 µm e fase móvel tampão fosfato 50 mM pH 7,0:acetonitrila:metanol (60,5:35:4,5 (v/v/v)). As amostras foram analisadas e os resultados expressos em ng/mL. O método foi validado quanto à sensibilidade, linearidade, seletividade (especificidade), exatidão, precisão, limite de quantificação e robustez. A linearidade encontrada para o método foi de 5 a 1250 ng/mL. O limite de detecção estabelecido foi de 2 ng/mL e o de quantificação de 5 ng/mL. A metodologia apresentou valores de recuperação acima de 90%, exatidão e precisão interensaio variou de 96,5 a 98,1% e 5,4 a 7,0%, respectivamente. A precisão e exatidão intra-ensaio variou de 97,1 a 107,4%, respectivamente. A especificidade do método foi determinada para os seguintes interferentes: pantoprazol, metformina, fenformina, hidroclorotiazida, diazepam, lorazepam, oxazepam, clonazepam, ranitidina, propanolol, claritromicina e sulfametoxazol. A metodologia desenvolvida mostrou ser rápida e eficiente na correlação das concentrações plasmáticas do omeprazol administrado aos pacientes bariátricos, demonstrando uma porcentagem, estatisticamente significativa, na diminuição da absorção do fármaco no pós-operatório. / Obesity is a chronic disease that affects an alarming proportion of the population. This disease is classified by the WHO in grades l, ll and lll, according to the Body Mass Index (BMI). Grade lll obesity or morbid obesity, is an aggravating factor for innumerous chronic diseases such as gastro-esophageal diseases, diabetes mellitus and cancer. Bariatric surgery is a very effective intervention when it comes to clinically severe obesity class lll. However, this intervention can alter the absorption and bioavailability of drugs such as the proton pump inhibitor omeprazole. The objective of this study was to develop a sensitive and rapid analytical method using high performance liquid chromatography (HPLC) coupled to a ultra-violet detector (UV) for quantification of omeprazole in plasma of patients undergoing bariatric surgery before and after the procedure. Sample preparation was performed by solid phase extraction using a DSC-18Lt SPE column. Using a Nucleosil standard C18 phases 250 x 4 mm 5 µm column, mobile phase phosphate buffer 50 mM pH 7.0:acetonitrile:methanol in the proportions of 60.5:35:4.5 (v/v/v), samples were analyzed and the results expressed in ng/ml. The method was validated for sensitivity, linearity, selectivity (specificity), accuracy, precision, quantification limit and robustness. The linearity of this method ranged between 5 and 1250 ng/mL. The detection limit was set at 2 ng/mL and the quantification limit at 5 ng/mL. The methodology presented recovery values above 90%. Inter-assay accuracy and precision ranged from 96.5 to 98.1% and from 5.4 to 7.0%, respectively, while intra-assay accuracy and precision varied from 97.1 to 107.4 and from 2.8 to 4.1%, respectively. The specificity of the method was determined for the following interferers: pantoprazole, metformin, phenformin, hydrochlorothiazide, diazepam, lorazepam, oxazepam, clonazepam, ranitidine, propranolol, clarithromycin and sulfamethoxazole. The developed methodology proved to be fast and effective in correlating the plasmatic concentrations of omeprazole administered to patients undergoing surgery, demonstrating statistically significant percentage in the drug absorption decrease after surgery.

Made available in DSpace on 2016-08-19T12:56:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Karla.pdf: 1858742 bytes, checksum: 343bcd38edd54804af6d544de85e856d (MD5) Previous issue date: 2013-04-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fluoroquinolone antibacterial agents are widely used for treatment of infectious diseases. These compounds and their metabolites are excreted through the urinary tract, reaching the environment and cause many health hazards, human and animal, besides providing bacterial resistance. Given this, it was carried out an optimization of a chromatographic method for determination of three fluoroquinolone antibiotics (CIPRO, LEVO and NORF) by HPLC/FL in waters of Anil River at São Luís City-MA. For this, the chromatographic parameters were optimized and the linear range was obtained by constructing analytical curves and subsequently calibration curves for each analyte. The most satisfactory chromatographic conditions for analysis were: Luna column (250 x 4.6 mm, 5 mm), mobile phase consisting of a mixture of Methanol/Buffer (0,04 M NaHPO4.H₂O adjusted to pH 3 with H3PO4 85%) in proportion 30/70 (v/v), isocratic mode, flow 1 mL.minˉ¹, monitored at wavelengths of 278 nm and emission 450 nm excitation. The LD of the method for compounds CIPRO, LEVO and NORF were 1,8199, 4,0967 and 0,7567 μg.Lˉ¹ respectively and LQ of the method was 5 μg.Lˉ¹ for all three analytes. The studies of recovery by SPE showed levels from 77,95 to 100,28% for all three analytes. Subsequently the methodology was applied in water samples from the Anil River, being detected none of the analytes under study. Were performed acute toxicity tests with the test organism C. silvestrii, with EC(I)50,48h average of 0,4656 mg.Lˉ¹ for CIPRO and 0,6788 mg.Lˉ¹ for LEVO. / Os antibacterianos fluoroquinolônicos são amplamente utilizados para tratamentos de doenças infecciosas. Estes compostos e seus metabólitos são excretados pelas vias urinárias, podendo alcançar o ambiente e causar diversos danos à saúde, humana e animal, além de proporcionar resistência bacteriana. Diante disto, realizou-se a otimização de um método cromatográfico para determinação de três antibacterianos fluoroquinolônicos (CIPRO, LEVO e NORF) via CLAE/FL em águas do Rio Anil da cidade de São Luís-MA. Para isto, otimizou-se os parâmetros cromatográficos e verificou-se a faixa linear através da construção de curvas analíticas e posteriormente de curvas de calibração para cada um dos analitos. As condições cromatográficas que se mostraram mais satisfatórios para análise foram: coluna Luna (250 x 4,6 mm, 5 μm), fase móvel composta por uma mistura de Metanol/tampão fosfato (NaHPO.H₂O 0,04 M ajustado á pH 3 com H3PO4 85%), na proporção 30/70 (v/v), modo isocrático, fluxo de 1 mL.minˉ¹, monitorado a com comprimentos de onda de 278 nm de emissão e 450 nm de excitação. Os LD do método para os compostos CIPRO, LEVO e NORF foram de 1,8199, 4,0967 e 0,7567 μg.Lˉ¹, respectivamente e o LQ do método foi de 5 μg.Lˉ¹ para todos os três analitos. Os estudos de recuperação por EFS apresentaram níveis de recuperação entre 77,95 a 100,28% para os três analitos. Posteriormente a metodologia foi aplicada em amostras de água do Rio Anil, não sendo detectado nenhum dos analitos em estudo. Foram realizados ensaios de toxicidade aguda com o organismo teste C. silvestrii, apresentando CE(I)50,48h médio de 0,4656 mg.Lˉ¹ para o CIPRO e de 0,6788 mg.Lˉ¹ para o LEVO.

A fotoestabilidade é uma propriedade das moléculas que, quando utilizada como parâmetro farmacêutico, descreve como um fármaco responde à exposição à luz (solar ou artificial). No presente trabalho, foi avaliada a fotoestabilidade dos fármacos loratadina (LORA) e acetazolamida (ACZ) e de complexos LORA-ciclodextrinas. O estudo de fotoestabilidade de LORA (Capítulo 2) indicou que o fármaco é estável quando no estado sólido, porém, ocorre surgimento de coloração intensa. Por outro lado, quando em solução, observou-se degradação do fármaco, com surgimento de vários fotoprodutos denominados F1 a F15, dentre os quais foi possível identificar cinco compostos: F4 (C13H10N), F10 (C14H10CIN), F8 (C20H18CIN2O), F9 (C19H18CIN2) e F14 (C17H14CIN). A validação do método analítico CLAE, utilizado para quantificação de LORA em especialidades farmacêuticas (comprimidos e xaropes) é descrita no Capítulo 3. Na avaliação da fotodegradação forçada de formulações líquidas contendo LORA, foram degradados até 50% do fármaco. As formulações sólidas apresentaram-se fotoestáveis, observando-se perda de menos de 5% do fármaco. Não foram encontrados produtos de fotodegradação nas formulações, quando analisadas tal qual, obtidas do mercado. Dessa forma, as embalagens primárias garantiram sua estabilidade. A complexação de LORA com ciclodextrinas (Capítulo 4) mostrou-se um recurso bastante interessante para melhorar a fotoestabilidade do fármaco, uma vez que, após 12 horas de irradiação luminosa, é possível recuperar até 99% deste, quando na forma de complexo com γ-CD na proporção 1:1. Finalmente, o Capítulo 5 traz o método CLAE desenvolvido e validado para avaliação da acetazolamida (ACZ), o qual mostrou-se adequado para a quantificação do fármaco, obtendo-se ótima linearidade, precisão, exatidão e seletividade. Segundo as condições do guia Q1B, a ACZ se manteve estável quando submetida à radiação luminosa utilizando meios aquosos e no estado sólido. No entanto, a fotoestabilidade da ACZ foi afetada na presença de metanol, sendo possível quantificar três impurezas. / Photostability is a property of molecules that, when used as a pharmaceutical parameter, can describe how a drug responds to exposure to light (either solar or artificial). In this study, the photostability of the drugs loratadine (LORA) and acetazolamide (ACZ), as well as LORA-cyclodextrin complexes, was evaluated. A study of the photostability of LORA (Chapter 2) indicated that the drug is stable in its solid form, however intense coloring does occur. On the other hand, when in solution form, degradation of the drug was observed, with the appearance of several photoproducts that we labled F1 to F15, among which it was possible to identify five compounds: F4 (C13H10N), F10 (C14H10CIN), F8 (C20H18CIN2O), F9 (C19H18CIN2) and F14 (C17H14CIN). The validation of the analytical method by HPLC, used for the quantification of LORA in pharmaceutical products (tablets and syrups) is detailed in Chapter 3. In the evaluation of forced photodegradation of liquid formulations containing LORA, up to 50% of the drug was degraded. The solid formulations proved to be photostable, with a loss of less than 5% of the drug. No photodegradation products were found in the formulations when they were analyzed \"as is\" (the way they were obtained from the commercial market). Accordingly, their primary packaging protected their stability. The complexation of LORA with cyclodextrins (Chapter 4) proved to be an effective resource for improving the photostability of the drug, since, after 12 hours of luminous radiation, it was possible to recover up to 99% of the drug, when in the complex form with γ-CD, in the proportion 1:1. Finally, Chapter 5 describes the HPLC method developed and validated for the evaluation of acetazolamide (ACZ), which proved to be adequate for the quantification of the drug, with the attainment of optimal linearity, precision, exactness and selectivity. According to the conditions of the Q1B guideline, ACZ was stable when subjected to luminous radiation using aqueous means and in its solid state. However, the photostability of ACZ was affected by the presence of methanol, and we were able to quantify three impurities.