OBJETIVO: A via metabólica da lipoproteína de baixa densidade (LDL) em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES) em uso de difosfato de cloroquina (DFC) foi avaliada através do comportamento cinético de uma nanoemulsão radioativa rica em colesterol (LDE) que se assemelha à estrutura lipídica da LDL. MÉTODOS: LDE foi marcada com 14C-colesterol éster (14C-CE), sendo a seguir injetada endovenosamente em pacientes do sexo feminino com LES inativo: 10 tomando DFC (grupo DFC), 10 sem tratamento (grupo SEM TRATAMENTO); e 10 mulheres normais (grupo CONTROLE). Os grupos foram pareados pela idade e seguiram rigorosos critérios de seleção de condições que pudessem interferir no perfil lipídico. Amostras de sangue foram coletadas em intervalos pré-estabelecidos após a infusão para mensuração da radioatividade. Níveis séricos de jejum de lipoproteínas foram determinados no início dos estudos cinéticos. RESULTADOS: Idade e índice de massa corpórea (IMC) foram similares nos grupos estudados. A taxa fracional de remoção (TFR) de 14C-CE foi significativamente maior no grupo DFC comparada ao grupo SEM TRATAMENTO (0,076 ± 0,037 vs. 0,046 ± 0,021 h-1; p < 0,05) e CONTROLE (0,0516 ± 0,0125 h-1; p < 0,05). Em concordância, níveis significativamente menores de colesterol total e LDL foram observados no grupo DFC (156 ± 16 e 88 ± 16 mg/dl) comparando-se com SEM TRATAMENTO (174 ± 15 e 108 ± 17 mg/dl; p < 0,05) e CONTROLE (200 ± 24 e 118 ± 23 mg/dl; p < 0,05). Além disso, o incremento em 50% na TFR de 14C-CE no grupo DFC foi acompanhado por uma redução em 20% no LDL-C comparando-se a SEM TRATAMENTO. CONCLUSÃO: Esta é a primeira demonstração in vivo que a remoção de LDE do plasma encontra-se aumentada em pacientes com LES em uso de DFC. Estes dados suportam o benefício desta droga no tratamento do LES e identificam o receptor de LDL como um mecanismo promissor de DFC na redução de lípides em pacientes tomando corticosteróides. / OBJECTIVE: Low-density lipoprotein (LDL) pathway in systhemic lupus erythematosus (SLE) patients taking chloroquine diphosphate (CDP) was evaluated through the kinetic behavior of a radioactive cholesterol-rich nanoemulsion (LDE) that resembles the LDL lipidic structure. METHODS: LDE was labeled with 14C-cholesteryl ester (14C-CE), then IV injected in inactive female SLE patients: 10 taking CDP (CDP), 10 without therapy (NO THERAPY); and 10 normal subjects (CONTROL). Groups were age-matched and followed rigorous selection criteria of conditions that interfere in the lipid profile. Blood samples were collected in pre-established intervals after infusion for radioactivity measurement. Fasting lipoproteins were determined in the beginning of kinetic studies. RESULTS: Age and body mass index (BMI) were similar in the studied groups. Fractional clearance rate (FCR) of 14C-CE was significantly greater in CDP compared to NO THERAPY (0.076 ± 0.037 vs. 0.046 ± 0.021 h-1; p < 0.05) and CONTROL (0.0516 ± 0.0125 h-1; p < 0.05). Accordingly, a significant lower total and LDL cholesterol were observed in CDP (156 ± 16 and 88 ± 16 mg/dl) compared to NO THERAPY (174 ± 15 and 108 ± 17 mg/dl; p<0.05) and CONTROL (200 ± 24 and 118 ± 23 mg/dl; p < 0.05). Moreover, the 50% increase in 14C-CE FCR in CDP was paralleled by 20% decrease in LDL-c compared to NO THERAPY. CONCLUSION: This is the first in vivo demonstration that removal of LDE from plasma was increased in SLE patients taking CDP. These data support its beneficial use in SLE and identify the LDL receptor as a promising CDP mechanism for lowering lipids in patients taking corticosteroids.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O Brasil é um dos maiores consumidores per capita de açúcar e estudos têm mostrado um papel específico do consumo excessivo de açúcar no ganho de peso. Com o aumento do ganho de peso observado em vários países, e também no Brasil, é importante testar quais mensagens, estratégias e propostas de intervenção seriam eficazes na prevenção dessa epidemia. Os dados reportados são referentes a um ensaio randomizado por conglomerado, controlado, conduzido em 20 escolas municipais na cidade metropolitana de Niterói no Estado de Rio de Janeiro, de março a dezembro de 2007, que testou a eficácia de orientações para merendeiras objetivando reduzir a disponibilidade de açúcar e de alimentos fontes de açúcar na alimentação escolar e no consumo delas. A intervenção consistiu em um programa de educação nutricional nas escolas usando mensagens, atividades e material educativo que encorajassem a redução da adição de açúcar na alimentação escolar pelas merendeiras e no consumo delas. A redução da disponibilidade per capita de açúcar pelas escolas foi analisada através de planilhas com dados da utilização dos itens do estoque. O consumo individual das merendeiras foi avaliado através de questionário de freqüência de consumo alimentar. As medidas antropométricas e bioquímicas foram realizadas de acordo com técnicas padronizadas. As escolas de intervenção apresentaram maior redução da disponibilidade per capita de açúcar quando comparadas às escolas controle (-6,0 kg vs. 3,4 kg), mas sem diferença estatisticamente significante. Houve redução no consumo de doces e bebidas açucaradas nas merendeiras dos dois grupos, mas o consumo de açúcar não apresentou diferenças estatisticamente significativas entre eles. Houve redução do consumo de energia total nos dois grupos, mas sem diferença entre eles, e sem modificação dos percentuais de adequação dos macronutrientes em relação ao consumo de energia. Ao final do estudo somente as merendeiras do grupo de intervenção conseguiram manter a perda de peso, porém sem diferença estatisticamente significante. A estratégia de redução da disponibilidade e do consumo de açúcar por merendeiras de escolas públicas não atingiu o principal objetivo de redução de adição de açúcar. Uma análise secundária dos dados avaliou a associação entre a auto-percepção da saúde e da qualidade da alimentação com o excesso de peso e concentração elevada de colesterol sérico das merendeiras na linha de base. As perguntas de auto-percepção foram coletadas por entrevista. Dentre as que consideraram a sua alimentação como saudável, 40% apresentavam colesterol elevado e 61% apresentavam excesso de peso vs. 68% e 74%, respectivamente, para as que consideraram a sua alimentação como não-saudável. Dentre as que consideraram a sua saúde como boa, 41% apresentavam colesterol elevado e 59% apresentavam excesso de peso vs. 71% e 81%, respectivamente, para as que consideraram a sua saúde como ruim. A maioria das mulheres que relatou ter alimentação saudável apresentou maior frequência de consumo de frutas, verduras e legumes, feijão, leite e derivados e menor freqüência de consumo de refrigerante. Conclui-se que perguntas únicas e simples como as utilizadas para a auto-avaliação da saúde podem também ter importância na avaliação da alimentação. / Brazil is one of the largest per capita consumers of sugar and several studies have shown a specific role of excessive consumption of sugar on weight gain. With the increased weight gain observed in several countries, including Brazil, it is important to test which messages, strategies and proposals for intervention would be effective in preventing this epidemic. The data reported are for an intervention study that tested the efficacy of guidelines for school lunch cooks aiming to reduce the added sugar in schools meals and their sugar intake. A cluster randomized controlled trial was carried out in twenty public schools in the metropolitan city of Niterói in Rio de Janeiro, Brazil, from March to December 2007, to assess the change in the availability and consumption of sugar. The intervention consisted of a nutrition educational program in schools using messages, activities and printed educational materials that encouraged the reduction of added sugar in the schools meals by the school lunch cooks and in their consumption. The reduction in per capita sugar availability by the schools was examined through spreadsheets with data from the use of inventory items. Individual food intake of the school lunch cooks was evaluated by a Food Frequency Questionnaire. Anthropometric and biochemical measurements were performed according to standard techniques and the variation in weight change was measured throughout the study. Per capita sugar availability reduced most markedly in the intervention schools compared to the control schools (-6,0 kg vs. 3,4 kg), however this difference was not statistically significant. Both groups of school lunch cooks showed a reduction in the consumption of sweets and sweetened beverages, but the difference in sugar intake was not statistically significant. A reduction in total energy consumption was observed in both groups, but there was no difference between them. Also, there was no difference in the percentage of adequacy of nutrients in relation to energy consumption. Sweetened beverages presented the most important consumption reduction. At the end of the study, only school lunch cooks in the intervention group were able to maintain weight loss, but not statistically significant. The strategy of reducing the availability and consumption of sugar by the school lunch cooks from public schools did not achieve the main goal of reducing added sugar. A secondary analysis examined the association between self-perceived health status and diet quality with overweight and high serum cholesterol concentration of the school lunch cooks at baseline. The self-perception questions were collected by interview. Among women who reported healthy diet, 40% presented high serum cholesterol and 61% were overweight. Among women who reported unhealthy diet, 68% presented high serum cholesterol and 74% presented overweight. Most women who reported healthy diet showed a higher frequency of consumption of sweets, fruits, vegetables, beans, dairy products and lower frequency of consumption of soft drink. In conclusion, single and simple questions, such as those used for self-perceived health status may also be important in assessing the diet.

OBJETIVO: A via metabólica da lipoproteína de baixa densidade (LDL) em pacientes com lúpus eritematoso sistêmico (LES) em uso de difosfato de cloroquina (DFC) foi avaliada através do comportamento cinético de uma nanoemulsão radioativa rica em colesterol (LDE) que se assemelha à estrutura lipídica da LDL. MÉTODOS: LDE foi marcada com 14C-colesterol éster (14C-CE), sendo a seguir injetada endovenosamente em pacientes do sexo feminino com LES inativo: 10 tomando DFC (grupo DFC), 10 sem tratamento (grupo SEM TRATAMENTO); e 10 mulheres normais (grupo CONTROLE). Os grupos foram pareados pela idade e seguiram rigorosos critérios de seleção de condições que pudessem interferir no perfil lipídico. Amostras de sangue foram coletadas em intervalos pré-estabelecidos após a infusão para mensuração da radioatividade. Níveis séricos de jejum de lipoproteínas foram determinados no início dos estudos cinéticos. RESULTADOS: Idade e índice de massa corpórea (IMC) foram similares nos grupos estudados. A taxa fracional de remoção (TFR) de 14C-CE foi significativamente maior no grupo DFC comparada ao grupo SEM TRATAMENTO (0,076 ± 0,037 vs. 0,046 ± 0,021 h-1; p < 0,05) e CONTROLE (0,0516 ± 0,0125 h-1; p < 0,05). Em concordância, níveis significativamente menores de colesterol total e LDL foram observados no grupo DFC (156 ± 16 e 88 ± 16 mg/dl) comparando-se com SEM TRATAMENTO (174 ± 15 e 108 ± 17 mg/dl; p < 0,05) e CONTROLE (200 ± 24 e 118 ± 23 mg/dl; p < 0,05). Além disso, o incremento em 50% na TFR de 14C-CE no grupo DFC foi acompanhado por uma redução em 20% no LDL-C comparando-se a SEM TRATAMENTO. CONCLUSÃO: Esta é a primeira demonstração in vivo que a remoção de LDE do plasma encontra-se aumentada em pacientes com LES em uso de DFC. Estes dados suportam o benefício desta droga no tratamento do LES e identificam o receptor de LDL como um mecanismo promissor de DFC na redução de lípides em pacientes tomando corticosteróides. / OBJECTIVE: Low-density lipoprotein (LDL) pathway in systhemic lupus erythematosus (SLE) patients taking chloroquine diphosphate (CDP) was evaluated through the kinetic behavior of a radioactive cholesterol-rich nanoemulsion (LDE) that resembles the LDL lipidic structure. METHODS: LDE was labeled with 14C-cholesteryl ester (14C-CE), then IV injected in inactive female SLE patients: 10 taking CDP (CDP), 10 without therapy (NO THERAPY); and 10 normal subjects (CONTROL). Groups were age-matched and followed rigorous selection criteria of conditions that interfere in the lipid profile. Blood samples were collected in pre-established intervals after infusion for radioactivity measurement. Fasting lipoproteins were determined in the beginning of kinetic studies. RESULTS: Age and body mass index (BMI) were similar in the studied groups. Fractional clearance rate (FCR) of 14C-CE was significantly greater in CDP compared to NO THERAPY (0.076 ± 0.037 vs. 0.046 ± 0.021 h-1; p < 0.05) and CONTROL (0.0516 ± 0.0125 h-1; p < 0.05). Accordingly, a significant lower total and LDL cholesterol were observed in CDP (156 ± 16 and 88 ± 16 mg/dl) compared to NO THERAPY (174 ± 15 and 108 ± 17 mg/dl; p<0.05) and CONTROL (200 ± 24 and 118 ± 23 mg/dl; p < 0.05). Moreover, the 50% increase in 14C-CE FCR in CDP was paralleled by 20% decrease in LDL-c compared to NO THERAPY. CONCLUSION: This is the first in vivo demonstration that removal of LDE from plasma was increased in SLE patients taking CDP. These data support its beneficial use in SLE and identify the LDL receptor as a promising CDP mechanism for lowering lipids in patients taking corticosteroids.

Produtos de glicação avançada (AGE) prejudicam o transporte reverso de colesterol, por diminuírem o efluxo de colesterol de macrófagos, mediado por HDL. Neste estudo, avaliamos o papel da albumina modificada por glicação avançada (albumina-AGE) sobre a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) pela mitocôndria e pelo sistema NADPH oxidase, e sua implicação sobre o conteúdo do receptor de HDL (ABCA-1) em macrófagos. Albumina-AGE foi preparada pela incubação com glioxal (GO), metilglioxal (MGO) ou glicolaldeído (GAD) e albumina controle (albumina C), com tampão fosfato apenas. Albumina C e AGE foram incubadas com macrófagos, ao longo do tempo, para determinação da produção de ROS e do conteúdo de ABCA-1, por citometria de fluxo. Macrófagos tratados com albumina-GO, MGO e GAD apresentaram aumento na produção de ROS de, respectivamente, 24%, 25% e 24%, em comparação às células tratadas com albumina C. A elevação na produção de ROS foi prevenida pelo tratamento celular com inibidor de NADPH oxidase ou desacoplador mitocondrial, evidenciando o papel da NADPH oxidase e da mitocôndria na geração de ROS induzida pela albumina-AGE. Em comparação com as células tratadas com albumina-C, a respiração mitocondrial basal, determinada por oxigrafia, foi reduzida em 35% e 46% nas células expostas, respectivamente, à albumina-GO e albumina-GAD e não foi restabelecida após tratamento celular com desacoplador mitocondrial. O conteúdo total de proteínas carboniladas aumentou 41% em macrófagos tratados com albumina-GAD, em comparação à albumina-C. A redução no conteúdo de ABCA-1, observada após 8 horas de tratamento com albumina-GAD, foi paralela ao incremento na produção de ROS, sendo prevenida pelo tratamento com aminoguanidina, a qual também diminuiu a geração de ROS em macrófagos tratados com albumina-AGE. Por outro lado, a benfotiamina não conseguiu restaurar o conteúdo de ABCA-1, o que foi associado à menor redução na geração de ROS, promovida por este fármaco. Os resultados apontam para papel da albumina-AGE na diminuição do efluxo de colesterol celular, notadamente por reduzir a expressão de ABCA-1, vinculada ao aumento do estresse oxidativo em macrófagos. A inibição do estresse oxidativo, induzido pela albumina-AGE, previne distúrbios no transporte reverso de colesterol por impedir a redução de ABCA-1, contribuindo assim para prevenir a aterosclerose no diabete melito / Advanced glycation end products (AGE) impair reverse cholesterol transport, by decreasing the HDL-mediated cholesterol efflux from macrophages. We evaluated the role of advanced glycated albumin (AGE-albumin) on the generation of reactive oxygen species (ROS) by mitochondria and NADPH oxidase, and its implication on the HDL receptor (ABCA-1) level in macrophages. AGE-albumin was prepared by incubation with glyoxal (GO), methylglyoxal (MGO) or glycolaldehyde (GAD) and control albumin (C-albumin) with phosphate buffered saline alone. C and AGE-albumin were incubated along time with J774 macrophages in order to determine ROS production and ABCA-1 protein level by flow citometry. Macrophages treated with GO, MGO and GAD-albumin presented, respectively, 24%, 25% and 24% increased ROS production compared to cells treated with C-albumin. The increase in ROS production was prevented by cell treatment with a NADPH oxidase inhibitor or mitochondrial uncoupler, demonstrating a role of NADPH oxidase and mitochondria in AGE-albumin-induced ROS generation. Compared to cells treated with C-albumin, basal mitochondrial respiration, determined by oxygraphy, was 35% and 46% reduced in cells exposed, respectively, to GO and GAD-albumin and was not restored after cell treatment with mitochondrial uncoupling. Intracellular carbonyl content increased 41% in macrophages treated with GAD-albumin as compared to C-albumin. In macrophages treated with GAD-albumin, the reduction in ABCA-1 content observed after 8 hours of treatment was accompained by the increase of ROS production. Aminoguanidine that prevented ROS generation was able to restore ABCA-1 levels. On the other hand, benfotiamine failed to restore ABCA-1 protein levels which was ascribed to a lesser reduction in ROS generation by this compund. These results point to a role of AGE-albumin on the reduction of cellular cholesterol efflux, notably by diminishing ABCA-1 protein level in macrophages which is associated with intracellular oxidative stress. Inhibition of oxidative stress induced by AGE-albumin prevents disturbances in reverse cholesterol transport by curbing the reduction of ABCA-1 elicited by advanced glycation in macrophages and therefore may contribute to the prevention of atherosclerosis in diabetes mellitus

A Terapia Fotodinâmica é um tratamento promissor no cura de várias doenças oftalmológicas e dermatológicas, assim como tumores. Este tratamento utiliza a combinação de luz e um composto fotossensível na presença de oxigênio. Neste trabalho objetivamos entender mecanismos de fotossensibilização em membranas. Para isso, estudamos os efeitos de irradiação em Vesículas Unilamelares Gigantes (GUVs) compostas de POPC e Cardiolipina (CL) e POPC e Colesterol (Col), contendo uma molécula fotoativa (diC12-porf) ancorada à superfície dessas membranas. GUVs compostas por POPC e POPC:Col na presença da molécula fotoativa reagem ao estímulo da luz exibindo um aumento de área seguido de flutuações. O mesmo foi observado para membranas de POPC contendo menos que 50mol% de CL. Já para composições contendo 50mol% de CL, a membrana passa a formar domínios lipídicos podendo ou não ser destruída durante a irradiação. Estes domínios podem ser suprimidos com a adição de EDTA (agente quelante de íons divalentes) na solução. Ao adicionarmos CaCl2 ao meio externo das GUVs contendo EDTA, percebemos que o efeito dos domínios e destruição da membrana reaparece. Tal fato evidencia que íons Ca++ presentes em solução devem complexar com as cargas da CL, levando à formação de domínios lipídicos. Ao quantificar o aumento de área sofrido pelas membranas percebemos que a presença de CL na membrana de POPC inibe o aumento de área para concentrações acima de 40mol% de CL. Já a presença de Col na membrana parece não contribuir significativamente para o aumento de área, embora o mesmo sofra oxidação. Além disso, evidenciou-se que na presença de CL/Col o tempo de fotoclareamento de diC12-porf é muito maior do que na ausência destes. Estes resultados evidenciam que a inclusão de CL na membrana oferece um número maior de sítios de reação para o oxigênio singlete reduzindo a foto-degradação da molécula fotoativa. Já a inclusão de Col aumenta o tempo de vida da molécula fotoativa provavelmente devido ao fato da dupla ligação do Col estar mais próxima ao centro produtor de oxigênio singlete do que a dupla ligação do POPC. / Photodynamic Therapy is a promising treatment for the cure of many diseases, like tumors. This treatment uses a combination of light and a photosensitive molecule in the presence of oxygen. In this way, our objective is to understand photosensibilization mechanisms on membranes. For this purpose, we studied the effects of irradiation in Giant Unilamelar Vesicles (GUVs) composed of POPC and Cardiolipin (CL) and POPC and Cholesterol (Chol) in the presence of a photosensitive molecule (diC12-porf). When the GUVs composed of POPC or POPC and Cholesterol (Chol) in the presence of the photosensitive molecule were irradiated, increase in surface area followed by fluctuations was observed. For GUVs composed of low concentrations of CL, the membrane photo-response was similar to that observed for pure POPC. For GUVs composed of 50 mol% CL different responses to light irradiation were observed. Some lipid domains appear for GUVs in water under irradiation and the GUV might be destroyed. When the irradiation was done in the presence of EDTA (chelant agent), the formation of the domains was prevented. Further addition of CaCl2 to this solution induced the formation of domains again leading eventually to membrane disruption. These results suggest that divalent cations have effect on the binding to CL negative polar heads, favoring lipid domain formation. We quantified the area increase obtained for the GUVs. For GUVs composed of CL we observed that until 40mol% of CL, the maximum expansion reached by the membrane area was similar to that obtained for pure POPC. For 50mol% of CL the increase of area is smaller than that found for GUVs composed only by POPC. For GUVs composed of Chol the behavior of the area is similar to that found for POPC. This means that the increase of area is mainly related to POPC peroxidation, although Chol hydroperoxide must be concomitantly formed too. Further, we observed that the diC12-porf photobleaching characteristic time for GUVs composed of CL/Chol is greater than that noted for GUVs composed of POPC. This means that when we introduce CL we are increasing the possibilities of reaction of the singlet oxygen and the photosensitive molecule is protected. The insertion of Chol in the membrane also protects the photosensitive molecule.

CNPq / Brazil presents an important commercial fishing pole, which turns it to become relevant considering the benefits that consumption of fish plays in human nutrition. Canned fish promotes long shelf life of these food. However, foods that are rich sources of polyunsaturated fatty acids and cholesterol, such as tuna, have a great susceptibility for lipid oxidation when exposed to thermal processing. Cholesterol oxidation products (COP?s) are related to several diseases such as atherosclerosis, and can be absorbed from the diet. Thus, this study aimed to evaluate the lipid composition and COP?s production in canned tuna purchased from metropolitan area of Rio de Janeiro. Three trademarks of ?grated in brine? and ?in oil? canned tuna were evaluated. To determinate lipid oxidation, the fatty acid composition from the methyl esters of the fish and their brine were identified using gas chromatography with flame ionisation detector; cholesterol and cholesterol oxides were determined simultaneously, using high-performance liquid chromatography and confirmed by liquid chromatograph mass spectrometer (chemical ionization interface for atmospheric pressure) (APCI-MS). Tuna in ?brine? samples presented moisture contents in a range of 24.60 to 27.23g/100g; lipids contents ranging from 4.21 to 5.59g/100g; polyunsaturated fatty acids (PUFA) levels between 9.13 to 16,20g/100g, and high saturated fatty acids (SFA) contents (in a range of 54.66 to 59.85g/100g) (dry basis-DB). The nutritional quality index showed that lipid fractions presented undesirable values. These samples presented cholesterol concentration ranging from 190.95 to 399.28mg/100g, and high cholesterol oxidation products contents (between 321.42 and 414.94?g/100g- DB). Samples of ?in oil? canned tuna presented moisture and lipids contents of 31.93 to 51.33g/100g and 23.70 to 43.99g/100g, respectively; high polyunsaturated fatty acids concentration (46.06 to 49.92g/100g), especially the w6 series; and low levels of EPA and DHA amounts (in a range of 0.59 and 1.73g/100g). Cholesterol and COP?s contents varied from 135.90 to 191.92mg/100g and from 110.97 to 207.19?g/100g, respectively. Significate concentrations of cholesterol were identified in brine (18.99 to 37.10mg/100g) and ?in oil? samples (113.09 to 259.12mg/100g), and high COP?s contents were found (in a range of 230.54 and 477.12?g/100g from brine and 44.15 to 151.18?g/100g from ?in oil? samples). It was observed that there is a transference of lipids from fish to brine, as well as migration between fish lipids and vegetable oils in the ?oil? covers, changing the fatty acids profiles of both. It is considered that the production of canned fish contributes to loss of lipid quality, promotes fatty acids oxidation and induces the formation of cholesterol oxidation products. These results indicate that is necessary to conduct further studies to evaluate the occurrence of these undesirable compounds in fish products. / O Brasil possui um importante polo de pesca comercial, fato que se torna relevante considerando os benef?cios que o consumo de pescados desempenha na nutri??o humana. As conservas de peixes promovem nestes alimentos tempos de vida ?til prolongados. Entretanto, os alimentos ricos em ?cidos graxos poliinsaturados e colesterol, como os atuns, quando submetidos ao processamento t?rmico, apresentam grande potencial para a oxida??o lip?dica. Os produtos da oxida??o do colesterol (POC?s) est?o envolvidos no desenvolvimento de doen?as, como a aterosclerose, e podem ser absorvidos a partir da dieta. Desta forma, este trabalho teve como objetivos avaliar a composi??o lip?dica e a forma??o dos POC?s em conservas de atuns comercializadas na regi?o metropolitana do Rio de Janeiro. Foram avaliadas amostras de conservas ?raladas? em ?salmoura? e em ??leo? de 3 marcas comerciais. Para determina??o da oxida??o lip?dica, identificou-se a composi??o de ?cidos graxos dos atuns e respectivos l?quidos de coberturas a partir dos ?steres met?licos, atrav?s de Cromatografia Gasosa com detector de ioniza??o por chama; al?m da quantifica??o simult?nea do colesterol e dos POC?s, atrav?s de cromatografia l?quida de alta efici?ncia e confirmados por cromat?grafo l?quido com espetr?metro de massas (interface de ioniza??o qu?mica por press?o atmosf?rica) (APCI-MS). Os atuns em ?salmoura? apresentaram m?dias entre 24,60 a 27,23g/100g de umidade; entre 4,21 a 5,59g/100g de lip?deos; teores de 9,13 a 16,20g/100g de ?cidos graxos poliinsaturados (AGPI), e elevadas concentra??es de ?cidos graxos saturados (AGS) (entre 54,66 a 59,85g/100g), em base seca (BS). Foram evidenciados nos ?ndices de qualidade nutricional das fra??es lip?dicas com valores pouco desej?veis sob o ponto de vista nutricional. As concentra??es de colesterol nessas amostras variaram entre 190,95 a 399,28mg/100g, e foram identificados elevados teores de produtos de oxida??o do colesterol (entre 321,42 e 414,94?g/g/100g), em BS. As amostras de atuns em conservas contendo ??leo? apresentaram teores entre 31,93 e 51,33g/100g de umidade; entre 23,70 e 43,99g/100g de lip?deos, elevadas concentra??es de ?cidos graxos poliinsaturados (de 46,06 a 49,92g/100g), em especial os da s?rie w6 e reduzidos teores na soma de EPA e DHA (entre 0,59 e 1,73g/100g). As concentra??es de colesterol variaram entre 135,90 e 191,92mg/100g e os POC?s de 110,97 a 207,19?g/100g. Em rela??o aos l?quidos de coberturas, foram identificadas concentra??es significativas de colesterol (de 18,99 a 37,10mg/100g nas salmouras e de 113,09 a 259,12mg/100g nos ?leos, respectivamente), al?m de elevados teores de produtos de oxida??o do colesterol (entre 230,54 e 477,12?g/100g nas salmouras e entre 44,15 e 151,18?g/100g nos ?leos). Observou-se a transfer?ncia de lip?deos dos pescados para os l?quidos em ?salmoura?, al?m da migra??o de lip?deos entre os pescados e os ?leos vegetais nas conservas em ??leo?, alterando os perfis de ?cidos graxos de ambos os meios. Considera-se que a produ??o de conservas de peixes favorece a perda da sua qualidade lip?dica, promovem oxida??o de ?cidos graxos e induzem a forma??o de produtos de oxida??o do colesterol, fato que indica a necessidade da condu??o de novos estudos que avaliem a ocorr?ncia desses compostos indesej?veis oriundos da oxida??o lip?dica em produtos de pescados.

Produtos de glicação avançada (AGE) prejudicam o transporte reverso de colesterol, por diminuírem o efluxo de colesterol de macrófagos, mediado por HDL. Neste estudo, avaliamos o papel da albumina modificada por glicação avançada (albumina-AGE) sobre a geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) pela mitocôndria e pelo sistema NADPH oxidase, e sua implicação sobre o conteúdo do receptor de HDL (ABCA-1) em macrófagos. Albumina-AGE foi preparada pela incubação com glioxal (GO), metilglioxal (MGO) ou glicolaldeído (GAD) e albumina controle (albumina C), com tampão fosfato apenas. Albumina C e AGE foram incubadas com macrófagos, ao longo do tempo, para determinação da produção de ROS e do conteúdo de ABCA-1, por citometria de fluxo. Macrófagos tratados com albumina-GO, MGO e GAD apresentaram aumento na produção de ROS de, respectivamente, 24%, 25% e 24%, em comparação às células tratadas com albumina C. A elevação na produção de ROS foi prevenida pelo tratamento celular com inibidor de NADPH oxidase ou desacoplador mitocondrial, evidenciando o papel da NADPH oxidase e da mitocôndria na geração de ROS induzida pela albumina-AGE. Em comparação com as células tratadas com albumina-C, a respiração mitocondrial basal, determinada por oxigrafia, foi reduzida em 35% e 46% nas células expostas, respectivamente, à albumina-GO e albumina-GAD e não foi restabelecida após tratamento celular com desacoplador mitocondrial. O conteúdo total de proteínas carboniladas aumentou 41% em macrófagos tratados com albumina-GAD, em comparação à albumina-C. A redução no conteúdo de ABCA-1, observada após 8 horas de tratamento com albumina-GAD, foi paralela ao incremento na produção de ROS, sendo prevenida pelo tratamento com aminoguanidina, a qual também diminuiu a geração de ROS em macrófagos tratados com albumina-AGE. Por outro lado, a benfotiamina não conseguiu restaurar o conteúdo de ABCA-1, o que foi associado à menor redução na geração de ROS, promovida por este fármaco. Os resultados apontam para papel da albumina-AGE na diminuição do efluxo de colesterol celular, notadamente por reduzir a expressão de ABCA-1, vinculada ao aumento do estresse oxidativo em macrófagos. A inibição do estresse oxidativo, induzido pela albumina-AGE, previne distúrbios no transporte reverso de colesterol por impedir a redução de ABCA-1, contribuindo assim para prevenir a aterosclerose no diabete melito / Advanced glycation end products (AGE) impair reverse cholesterol transport, by decreasing the HDL-mediated cholesterol efflux from macrophages. We evaluated the role of advanced glycated albumin (AGE-albumin) on the generation of reactive oxygen species (ROS) by mitochondria and NADPH oxidase, and its implication on the HDL receptor (ABCA-1) level in macrophages. AGE-albumin was prepared by incubation with glyoxal (GO), methylglyoxal (MGO) or glycolaldehyde (GAD) and control albumin (C-albumin) with phosphate buffered saline alone. C and AGE-albumin were incubated along time with J774 macrophages in order to determine ROS production and ABCA-1 protein level by flow citometry. Macrophages treated with GO, MGO and GAD-albumin presented, respectively, 24%, 25% and 24% increased ROS production compared to cells treated with C-albumin. The increase in ROS production was prevented by cell treatment with a NADPH oxidase inhibitor or mitochondrial uncoupler, demonstrating a role of NADPH oxidase and mitochondria in AGE-albumin-induced ROS generation. Compared to cells treated with C-albumin, basal mitochondrial respiration, determined by oxygraphy, was 35% and 46% reduced in cells exposed, respectively, to GO and GAD-albumin and was not restored after cell treatment with mitochondrial uncoupling. Intracellular carbonyl content increased 41% in macrophages treated with GAD-albumin as compared to C-albumin. In macrophages treated with GAD-albumin, the reduction in ABCA-1 content observed after 8 hours of treatment was accompained by the increase of ROS production. Aminoguanidine that prevented ROS generation was able to restore ABCA-1 levels. On the other hand, benfotiamine failed to restore ABCA-1 protein levels which was ascribed to a lesser reduction in ROS generation by this compund. These results point to a role of AGE-albumin on the reduction of cellular cholesterol efflux, notably by diminishing ABCA-1 protein level in macrophages which is associated with intracellular oxidative stress. Inhibition of oxidative stress induced by AGE-albumin prevents disturbances in reverse cholesterol transport by curbing the reduction of ABCA-1 elicited by advanced glycation in macrophages and therefore may contribute to the prevention of atherosclerosis in diabetes mellitus

Produtos de glicação avançada (AGE) alteram o metabolismo de lípides e, em especial, o efluxo de colesterol de macrófagos, por meio da redução dos receptores ABCA-1 e ABCG-1. Isto prejudica o transporte reverso de colesterol, sistema que favorece o fluxo de colesterol de macrófagos arteriais ao fígado, permitindo sua excreção na bile e eliminação fecal. Óxidos de colesterol modulam favoravelmente a homeostase lipídica em macrófagos e favorecem o transporte reverso de colesterol, embora o acúmulo de 7-cetocolesterol, 7-hidroxicolesterol e 7-hidroxicolesterol associe-se à aterogênese e morte celular. Neste estudo, avaliou-se o efeito do tratamento com glicolaldeído (GAD; oxoaldeído que induz rápida geração intracelular de AGE), em macrófagos sobrecarregados com LDL oxidada e incubados com HDL ou HDL e indutor de LXR (T0901317) sobre: 1) a distribuição seletiva de óxidos de colesterol e o conteúdo total de esteróis intracelulares e 2) o conteúdo de ABCA-1 e ABCG-1. Colesterol total e os diversos subtipos de óxidos de colesterol foram determinados por cromatografia a gás acoplada à espectrômetro de massa. O conteúdo dos receptores de HDL (ABCA-1 e ABCG-1) foi avaliado por imunoblot. Em macrófagos controles (C), a adição de HDL ou HDL + T0901317 promoveu redução no conteúdo de esteróis totais (colesterol + óxidos de colesterol), colesterol e 7-cetocolesterol. No entanto, isto não foi observado em macrófagos GAD. Nas diversas condições experimentais, não houve diferença no conteúdo intracelular dos outros subtipos de óxidos de colesterol, em células C e GAD. Macrófagos GAD apresentaram menor conteúdo de ABCA-1 (45%), quando comparados aos macrófagos C, mesmo após adição de HDL ou HDL + T0901317. O conteúdo de ABCG-1 foi 36,6% menor em macrófagos GAD, na presença de HDL, em comparação às células C. Em conclusão, em macrófagos sobrecarregados com LDL oxidada, o tratamento com glicolaldeído diminui a exportação celular de colesterol e 7-cetocolesterol, mediada pela HDL. Isto é decorrente do menor conteúdo dos receptores ABCA-1 e ABCG-1 em macrófagos tratados com glicolaldeído, e pode contribuir para o desenvolvimento de aterosclerose no diabete melito / Advanced glycation end products (AGE) alter lipid metabolism and reduce the macrophage expression of ABCA-1 and ABCG-1 which impairs the reverse cholesterol transport, a system that drives cholesterol from arterial wall macrophages to the liver, allowing its excretion into the bile and feces. Oxysterols favors lipid homeostasis in macrophages and drive the reverse cholesterol transport, although the accumulation of 7-ketocholesterol, 7- hydroxycholesterol and 7- hydroxycholesterol is related to atherogenesis and cell death. We evaluated the effect of glycolaldehyde treatment (GAD; oxoaldehyde that induces a fast formation of intracellular AGE) in macrophages overloaded with oxidized LDL and incubated with HDL alone or HDL plus LXR agonist (T0901317) in: 1) the intracellular content of oxysterols and total sterols and 2) the contents of ABCA-1 and ABCG-1. Total cholesterol and oxysterol subspecies were determined by gas chromatography/mass spectrometry and HDL receptors content by immunoblot. In control macrophages (C), incubation with HDL or HDL + T0901317 reduced the intracellular content of total sterols (total cholesterol + oxysterols), cholesterol and 7-ketocholesterol, which was not observed in GAD macrophages. In all experimental conditions no changes were found in the intracellular content of other oxysterol subspecies comparing C and GAD macrophages. GAD macrophages presented a 45% reduction in ABCA-1 protein level as compared to C cells, even after the addition of HDL or HDL + T0901317. The content of ABCG-1 was 36.6% reduced in GAD macrophages in the presence of HDL as compared to C macrophages. In conclusion, in macrophages overloaded with oxidized LDL, glycolaldehyde treatment reduces the HDL-mediated cholesterol and 7-ketocholesterol efflux which is ascribed to the reduction in ABCA-1 and ABCG-1 protein level. This may contribute to atherosclerosis in diabetes mellitus

Dissertação de Mestrado em Nutrição Clínica apresentada à Faculdade de Ciências de Nutrição e Alimentação da Universidade do Porto / Resumo da dissertação: Os efeitos na saúde atribuídos as bactérias probióticas são cada vez mais numerosos. Alguns destes estão bem fundamentados, nomeadamente o efeito na prevenção, no tratamento e na recuperação de vários tipos de diarreia, enquanto outros são mais inconsistentes. O efeito hipocolesterolémico dos produtos lácteos fermentados tem sido estudado desde 1970, mas ainda é alvo de muitas controvérsias. Foram propostos alguns mecanismos de acção para explicar este efeito, contudo o mecanismo exacto continua por esclarecer. No presente trabalho foi investigado o efeito de um leite fermentado com Lactobacillus acidophilus e Bifidobacterium longum nos lípidos plasmáticos de mulheres com valores normais ou ligeiramente elevados de colesterol plasmático. O estudo consistiu num ensaio clínico controlado aleatoriamente por placebo, com delineamento cruzado e dupla ocultação, constituído por dois períodos de tratamento de 4 semanas cada, separados por uma semana de washout. Participaram nesta intervenção 34 mulheres saudáveis que foram distribuídas aleatoriamente por dois grupos. Durante os períodos de tratamento, as participantes consumiram 125 gramas do produto teste (leite fermentado com L. acidophilus e B. longum) ou do produto de referência (iogurte tradicional), três vezes por dia, integrados na alimentaçao habitual. As análises dos parâmetros do estudo (colesterol total, LDL, HDL e triglicerídeos) foram efectuadas nas semanas 0, 5 e 10, ou seja, antes da intervenção e no final de cada período de tratamento.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-05-26Bitstream added on 2014-06-13T19:46:46Z : No. of bitstreams: 1 yamamoto_sm_dr_jabo.pdf: 625093 bytes, checksum: 3467910294ca21242ca6c2fafbcbf3a5 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Cordeiros 7/8 Ile de France 1/8 Ideal com peso corporal inicial médio de 17,90 ± 1,27 kg foram distribuídos nas dietas: Controle; SRPAD – inclusão de 8% de silagem de resíduo de peixe de água doce (Oreochromis niloticus) e SRPAM - inclusão de 8% de silagem de resíduo de peixe de água marinha (Lophius gastrophisus). As silagens de resíduos de peixes substituíram parcialmente o farelo de soja, e como volumoso, utilizou-se 40% de silagem de milho. Os cordeiros foram mantidos em baias individuais até atingirem 32 kg, quando.os machos foram abatidos. O consumo de matéria seca e o ganho médio diário não apresentaram diferenças entre dietas e sexo, com média de 891,83 e 240,26 g/dia, respectivamente. Cordeiros que receberam SRPAD tiveram maiores ingestão e coeficiente de digestibilidade do extrato etéreo (3,20 g/kg0,75/dia e 90,39%, respectivamente). As dietas não afetaram as características quantitativas da carcaça e qualitativas da carne. Não foram detectadas diferenças no sabor (6,37), preferência (6,49) e aspecto geral (6,90) nas carnes de cordeiros alimentados com as diferentes dietas, porém na dos que receberam dieta controle, foi atribuída menor nota (5,93) para textura. As análises no músculo Longissimus lumborum mostraram que este continha 74,58% de umidade; 25,66% de proteína bruta; 3,48% de extrato etéreo; 1,03% de cinzas e teor de colesterol de 53,97mg/100g de carne. Os ácidos graxos encontrados em maior concentração na gordura intramuscular do músculo Longissimus lumborum foram oléico (41,46%); palmítico (25,93%); esteárico (19,75%); linolênico (2,96%) e mirístico (2,81%). Nas carnes congeladas por 30 e 90 dias, detectou-se maior número de substâncias reativas ao ácido 2- tiobarbitúrico (0,82 e 1,71 mg/ kg, respectivamente), em relação às não congeladas, evidenciando o processo de rancidez oxidativa... / 7/8 Ile de France 1/8 Polwarth lambs averaging 17.90 l 1.27 kg, were distributed among the following diets: D1- control; D2 - 8% freshwater fish (Oreochromis niloticus) residue silage diet; and 8% sea fish (Lophius gastrophisus) residue silage diet. The fish residue silages have parcially substituted the soybean meal and 40% of corn silage was used as roughage. The lambs were confined in individual cages until 32 kg of corporal weight, when were accomplished the biometrics measures and males slaughtered. The dry matter intake and average daily weight gain have not presented differences between diets and sex, with average of 891.83 and 240.26 g/day, respectively. The ether extraxt ingestion and digestibility coeficient was higher in lambs that received D2 (3.20 g/kg0.75/day e 90.39%, respectively). The diets did not affect quantitative carcass and qualitative meat traits. Differences were not detected in the flavor (6.37), preference (6.49) and general aspect (6.90) in the meats of lambs fed with the different diets, however in the meat of the ones that received the control diet, smaller note (5.93) was attributed for texture. The analysis in Longissimus lumborum muscle have shown that this contained 74.58% of moisture; 25.66% of crude protein; 3.48% of ether extract; 1.03% of ash and cholesterol of 53.97mg/100g of meat. The fat acids found in larger amount in intramuscular fat of same muscle there were oleic (41.46%), palmitic (25.93%), stearic (19.75%), linoleic (2.96%) and miristic (2.81%). The lambs meat frozen for 30 and 90 days showed higher TBARS (0.82 and 1.17 mg/kg, respectively) than unfrozen meat, evidencing the oxidative aging process in meat freezing. The partial substitution of the soybean meal for fish residue silage was a good proteic alternative in the feeding of lambs.