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Acesso a produtos naturais mediante a estratégia de cultivos mistos de endofíticos: o fungo Colletotrichum boninense FLe 8.1 e a actinobactéria Streptomyces albospinus RLe 7 / Access to natural products by using the co-culture strategy of endophytic microorganisms: fungus Colletotrichum boninense FLe 8.1 and actinobacteria Streptomyces albospinus RLe 7.

Rodriguez, Andrés Mauricio Caraballo 22 February 2013 (has links)
Na literatura encontram-se referências de estudos envolvendo micro-organismos endofíticos, e mais recentemente estudos que avaliam a interação entre micro-organismos o que resulta na modificação, no tipo ou quantidade dos compostos que são produzidos. Neste trabalho foram realizados cultivos simples e mistos do fungo Colletotrichum boninense FLe 8.1 e da actinobacteria Streptomyces albospinus RLe 7, endófiticos isolados de Lychnophora ericoides que pertencem à coleção do Laboratório de Química de Microorganismos (LQMo) da FCFRP-USP, com o objetivo de aumentar suas capacidades de produção de novos compostos com atividade biológica. O cultivo misto, ou co-cultivo, é uma estratégia que tem sido usada para o acesso aos produtos naturais de origem microbiana. Existem poucos relatos de compostos com atividade biológica isolados a partir de S. albospinus e não há relatos de metabólitos secundários obtidos a partir de C. boninense. Nenhum desses micro-organismos tem sido descrito como endofítico na literatura e não existem relatos sobre co-cultivos envolvendo qualquer um deles na busca de compostos bioativos. Juntando as informações geradas através das diferentes técnicas de detecção utilizadas, como TLC, HPLC-DAD, GC-MS, ESI-MS, RMN e depois da análise correspondente, foi possível identificar e atribuir as estruturas de algumas substâncias conhecidas de origem microbiana como a mevalonolactona, o tirosol, a fisostigmina, a desferrioxamina E. ESI-MS foi utilizada para análises dos extratos brutos originados dos cultivos em meio arroz parbolizado permitindo visualizar compostos produzidos em baixas quantidades pelos micro-organismos na cultura simples quanto na co-cultura. Além disso, foram obtidos os perfis metabólicos desses micro-organismos a partir de cultivos em placa de Petri, possibilitando a detecção dos metabólitos em regiões específicas da interação microbiana, o que conduziu à identificação da fisostigmina e o seu análogo N-etilcarbamato produzidos pela actinobactéria, na interação com o fungo. Análises posteriores de MS sequencial permitiram obter perfis de fragmentação, os quais, juntamente com os dados dos íons detectados nos extratos, foram comparados com a informação disponível em bases de dados como DNP, METLIN e MassBank. Tais informações geradas a partir dessas análises permitiram sugerir possíveis compostos envolvidos na interação dos micro-organismos endofíticos mencionados. Foi sugerido que a fisostigmina, substância produzida pela actinobactéria S. albospinus RLe 7 e isolada nesse trabalho, poderia ter algum papel na inibição do crescimento do fungo C. boninense FLe 8.1 já que a inibição só foi observada quando cultivados ambos os micro-organismos na mesma placa de Petri. Porém, bioensaios com fisostigmina pura demonstraram que essa substância não possui atividade antifúngica per se, mas é possível que exista uma sinergia com outras substancias produzidas pela actinobactéria. Os resultados apresentados nesse trabalho demonstram a importância do uso de técnicas de detecção muito sensíveis, como a ESI-MS, na identificação de substâncias envolvidas na troca metabólica e permitiram gerar informações que serão utilizadas em estudos futuros utilizando esses micro-organismos endofíticos. / There are several studies involving endophytic microorganisms, and more recently some studies evaluate microbial interaction resulting in metabolic profiles modifications. In this study, simple and mixed cultures of the fungus Colletotrichum boninense FLe 8.1 and the actinobacteria Streptomyces albospinus RLe 7 were carried out. These endophytic microorganisms, isolated from Lychnophora ericoides, belong to the collection of the Laboratory of Microbial Chemistry (LQMo) of the FCFRP-USP. The main goal of this work was to increase the bioactive compounds production capacities. Co-culture, or mixed culture, is a recent strategy for accessing microbial natural products. There are few reports of bioactive metabolites from S. albospinus RLe 7 and there are no one about secondary metabolites obtained from C. boninense FLe 8.1. Neither the actinobacteria nor the fungus have been described as endophytic microorganisms and there are no co-culture studies involving these microorganisms in order to obtain natural products. Joining and analyzing all together the generated information from several detection techniques, such as TLC, HPLCDAD, GC-MS, ESI-MS, NMR, it was possible to identify and attribute the chemical structures of some known natural, such as mevalonolactone, tyrosol, physostigmine and deferrioxamine E. ESI-MS was used for extracts analysis from cultures in parboiled rice medium, allowing visualization of compounds produced in very low yields. Besides that, it was possible to obtain metabolic profiles from cultures in Petri dishes, leading to the detection of metabolites in specific regions of the microbial interaction. Physostigmine and its N-ethylcarbamate analogue were identified as actinobacteria metabolites in the interaction against the fungus. Posterior analysis by MS/MS allowed to obtain fragmentation profiles, which together with the ions detected from the extracts analysis, were compared by searching in databases, such as DNP, METLIN and MassBank. Such information allowed to suggest possible candidates for the compounds involved in the microbial metabolic exchange. It was hypothesized that physostigmine, isolated from the actinobacteria in this work, had a role in the fungal growth inhibition observed when both microorganisms were co-cultured. However, this substance did not show considerable antifungal activity when tested against C. boninense FLe 8.1, but it is possible that other compounds produced by this actinobacteria are acting in a synergistic way. The results showed here demonstrated the importance of very sensitive techniques, as ESI-MS, in the identification of molecules involved in the microbial metabolic exchange and will help in the generation of information for future studies involving those endophytic microorganisms.
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Isolamento, caracterização e avaliação da atividade fotossensibilizadora de cumarinas e furanocumarinas extraídas de espécies de Citrus / Isolation, characterization and evaluation of photosensitizer activity of coumarins and furocoumarins extracted from Citrus species

Fracarolli, Letícia 23 September 2015 (has links)
O crescente aumento da tolerância aos fungicidas atualmente utilizados é um dos principais problemas tanto na área clínica quanto na agrícola e tem estimulado o desenvolvimento de estratégias alternativas para o controle de fungos patogênicos, tais como o tratamento fotodinâmico antimicrobiano (TFA), que pode utilizar fotossensibilizadores (FS) de origem natural ou sintética. Alguns FS, como as cumarinas e furanocumarinas, são produzidos por espécies de Citrus como limão Tahiti (Citrus latifolia) e toranjas (Citrus paradisi). O presente estudo investigou o TFA in vitro de conídios do fungo fitopatogênico Colletotrichum acutatum com: (1) o corante fenotiazínico azul de metileno (MB), (2) uma furanocumarina comercial, 8-metoxipsoraleno (8-MOP), (3) uma cumarina comercial, (2H-chromen-2-one), (4) a cumarina 5,7-dimetoxicumarina extraída no presente trabalho a partir de óleo da casca do limão Tahiti, (5) a cumarina 7-hidroxicumarina extraída no presente trabalho a partir de óleo essencial de toranja rubi, (6) duas frações extraídas por De Menezes e colaboradores (2014a) a partir de um resíduo da indústria citrícola, uma delas constituída pela furanocumarina isopimpinelina e outra constituída por uma mistura das cumarinas 7-metoxicumarina e 5,7-dimetoxicumarina (3:1), (7) cinco extratos brutos obtidos a partir de óleos da casca e essencial de limão Tahiti e óleos essenciais de toranjas rubi e branca. Com exceção do extrato bruto obtido do óleo essencial de toranja branca, todos os demais extratos apresentaram cumarinas e/ou furanocumarinas em sua composição. As suspensões de conídios foram tratadas com os diferentes compostos (50 ?M para os compostos comerciais e as frações puras e 12,5 mg L-1 para os extratos e a mistura) e expostas à radiação solar por 1 h. O MB foi exposto à radiação solar por 30 min, 1 e 2 h. Determinou-se o efeito do tratamento fotodinâmico em folhas de mudas de laranja Valencia (Citrus sinensis) com (1) 8-MOP, (2) mistura de cumarinas, (3) 5,7-dimetoxicumarina e (4) o extrato bruto de limão Tahiti. Adicionalmente, experimentos para avaliar a estabilidade do 8-MOP exposto à radiação solar por até 12 h foram realizados. Nesses experimentos, soluções de 8-MOP (50 ?M) foram expostas à radiação solar e alíquotas foram retiradas após os diferentes tempos de exposição. Após as exposições, estudos de espectroscopia de absorção no UV e emissão de fluorescência foram realizados, além da realização de experimentos para avaliar a eficácia do TFA com os FS previamente expostos à radiação solar por 6 e 12 h. Os TFA mais eficazes foram com o MB, 8-MOP (ambos 50 ?M), a mistura de cumarinas e um dos extratos brutos obtidos de limão Tahiti (ambos 12,5 mg L-1), que mataram 99,998%, 99,378%, 99,336% e 65,049% dos conídios, respectivamente, após 1 h de exposição à radiação solar. Nenhum dano nas folhas de laranja foi observado após o TFA com os compostos. Os espectros de absorção e emissão de fluorescência das soluções de 8-MOP expostas à radiação solar mostraram fotodegradação do composto após 12 h de exposição. Entretanto, as soluções de 8-MOP expostas por 6 e por 12 h ainda foram capazes de matar 99,978% e 95,591% dos conídios de C. acutatum, respectivamente / Increasing tolerance to currently used fungicides is a major problem both in clinical and agricultural areas and has stimulated the development of alternative strategies to control pathogenic fungi such as the antimicrobial photodynamic treatment (APDT), that can use natural or synthetic photosensitizers (PS). Some PS, such as coumarins and furocoumarins are produced by Citrus species such Tahiti acid lime (Citrus latifolia) and grapefruit (Citrus paradisi). This study investigated the in vitro APDT of conidia of the plant-pathogenic fungi C. acutatum with: (1) the phenothiazinium dye methylene blue (MB), (2) commercial furocoumarin, 8-methoxypsoralen (8-MOP), (3) commercial coumarin (2H-chromen-2-one), (4) coumarin 5,7-dimethoxycoumarin, extracted in this study from Tahiti lime peel oil, (5) coumarin 7-hidroxycoumarina, extracted in this study from ruby grapefruit essential oil, (6) two fractions extracted by De Menezes et al (2014a) from a Citrus industry residue, one of them constituted by the furocoumarin isopimpinellin, and the other constituted by the mixture of coumarins 7-methoxycoumarin and 5,7-dimethoxycoumarin (3:1), (7) five crude extracts obtained from Tahiti lime peel or essential oil and ruby and white grapefruit essential oil. Except the extract from the white grapefruit, all the others presented coumarins and/or furocoumarins in their composition. Conidial suspentions were treated with the different PS (50 ?M for commercial and pure compounds and 12.5 mg L-1 for the extracts and the mixture) and exposed to solar radiation for 1 h. The MB was exposed to solar radiation for 30 min, 1 and 2 h. The APDT effect on the leaves of Valencia orange trees (Citrus sinensis) with (1) 8-MOP, (2) the mixture of coumarins, (3) 5,7-dimethoxycoumarin, and (4) the most efective extract from Tahiti lime were determined. Additionally, experiments to assess the 8-MOP stability after exposure to solar radiation for 12 h were realized. 8-MOP solutions (50 ?M) were exposed under solar radiation and rates were removed after different times of exposition. After the expositions, absorption spectroscopic studies in UV and fluorescence emission were realized, as well as holding the realization of experiments of APDT efficacy evaluation after 6 and 12 h to exposure under solar radiation. The more effective treatments were with MB, 8-MOP (both 50 ?M), the coumarins mixture and one of the extracts from Tahiti lime (both 12.5 mg L-1), killing at least 99,998%, 99,378%, 99,336% and 65,049% of the conidia, respectively after 1 h under solar radiation. No damage to orange tree leaves was observed after APDT with any of the compounds. The absorption and fluorescence intensity spectra showed the 8-MOP photodegradation after 12 h of exposition, although the 8-MOP solutions exposed under solar radiation for 6 and 12 h still killed at least 99,978% and 95,591% of the C. acutatum conidia, respectively
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ESTIMATIVA DE PARÂMETROS GENÉTICOS E MAPEAMENTO MOLECULAR DE QRLs À ANTRACNOSE DO COLMO EM MILHO TROPICAL

Tasior, Daniele 27 June 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-21T19:59:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daniele Tasior.pdf: 2815536 bytes, checksum: dc7cea7fc9b3fc00f6be08c2ce7825cd (MD5) Previous issue date: 2014-06-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The study aimed to characterize the resistance of F2:3 progenies of maize inoculated with Colletotrichum graminicola, genetic parameters and map genomic regions associated with quantitative resistance alleles to anthracnose stalk in tropical maize determining the effects of each locus on resistance/susceptibility C. graminicola. Individuals of the F2 generation were selfed to generate F2:3 progenies, which were evaluated phenotypically for resistance to anthracnose stalk in three experiments. The treatments were consisted of 121 F2:3progenies, parental lines (L04-2 and L99-4) and the F1 generation, which were used as control. The experimental plots were arranged in a randomized block design with three replications. Each plot consisted in one row of 3 m in length with rows spaced 0.90 m apart, with a total of 15 plants per plot. The plants were inoculated in the anthesis stage by injecting 1 mL of spore suspension into the first or second elongated internode above ground. The data was collected 30 days after inoculation by evaluating the internal lesion length (CINT), external lesion length (CEXT) in cm and the number of discolored internodes (INT). From the phenotypic evaluations of 121 F2:3 progenies genetic parameters were associated with resistance to all three forms of assessment (CINT, INT and CEXT) in each experiment. The association of microsatellites and AFLP markers to resistance alleles was performed using multiple regression. AFLP and SSR loci used to form the construction of the linkage map by MAPMAKER version 3.0. Detection of the QRL was performed by composite interval mapping method using QTLCartographer program. The experimental results showed the existence of high genetic variability among the F2:3 progenies for resistance/susceptibility to C. graminicola. The forms of assessment of anthracnose stalk (CINT, INT and CEXT) were equally effective in discriminating susceptible from resistant individuals. The high broad-sense heritability confirms the great contribution of genetic variance for resistance, which ensures genetic gain for artificial selection in this pathosystem. The AFLP marker E55534 individually explained the greatest proportion of the phenotypic variation for the internal length (- 28.43%), external lesion length (- 27.70%) and the number of discolored internodes (- 27.45%) in F2:3 progenies of maize. The composite interval mapping identified 31 QRLs to anthracnose stalk segregating in the mapping population, which were mapped across the 10 linkage groups. This is the first report of the QRL to anthracnose stalk mapped on chromosomes 2, 3 and 10. At large number of mapped QRL is suggested that the inheritance of resistance in this tropical germplasm is more complex, conditioned by a large number of genes, some large phenotypic effects and the vast majority with small effects for resistance in this pathosystem. / O trabalho objetivou caracterizar a resistência de progênies F2:3 de milho inoculados com Colletotrichum graminicola, estimar os parâmetros genéticos e mapear regiões genômicas associados à alelos de resistência quantitativa à antracnose do colmo em milho tropical determinando os efeitos de cada loco sobre a resistência/suscetibilidade a C. graminicola. Os indivíduos da geração F2 foram autofecundados para gerar as progênies F2:3, as quais foram avaliadas fenotipicamente para resistência à antracnose do colmo em três experimentos de campo. Os tratamentos foram constituídos de 121 progênies F2:3, linhagens parentais (L04-2 e L99-4) e da geração F1, os quais foram utilizados como tratamentos controle. O delineamento experimental foi o de blocos aleatorizados, com três repetições. Cada parcela foi constituída de 3 m de comprimento e 0,90 m na entrelinha, com aproximadamente 15 plantas por parcela. As plantas dos experimentos foram inoculadas no estádio de florescimento pleno da cultura, através da injeção de 1mL da suspensão de esporos, no meio do primeiro ou segundo internódio visível acima do solo. A avaliação dos sintomas foi realizado 30 dias após a inoculação, através da avaliação do comprimento interno de lesão (CINT), comprimento externo de lesão (CEXT) em cm e do número de internódios descoloridos (INT). A partir das avaliações fenotípicas das 121 progênies F2:3 foram estimados os parâmetros genéticos associados a resistência para as três características avaliadas (CINT, CEXT e INT) em cada experimento. A associação dos marcadores microssatélites e AFLPs a alelos de resistência foi realizada através da regressão linear múltipla. Locos SSR e AFLPs foram utilizados na construção do mapa de ligação através do MAPMAKER versão 3.0. A detecção dos QRLs foi realizada pelo método de mapeamento por intervalo composto utilizando o programa QTLCartographer. Os resultados experimentais evidenciaram existência de grande variabilidade genética entre as progênies F2:3 de milho para resistência/suscetibilidade à C. graminicola. As formas de avaliação da antracnose do colmo (CINT, CEXT e INT), foram igualmente eficientes em discriminar os indivíduos resistentes dos suscetíveis. Os elevados coeficientes de herdabilidade no sentido amplo confirmam a grande contribuição da variância genética para resistência, o que assegura ganhos genéticos com a seleção artificial neste patossistema. A regressão linear múltipla possibilitou identificar marcadores microssatélites e AFLPs altamente associados a alelos de resistência à C. graminicola. O marcador AFLP E55534 explicou individualmente a maior proporção da variação fenotípica para o comprimento interno (- 28,43%), comprimento externo de lesão (- 27,70%) e para o número de internódios descoloridos (- 27,45%) nas progênies F2:3 de milho. O mapeamento por intervalo composto identificou 31 QRLs à antracnose do colmo segregando na população de mapeamento, os quais foram mapeados entre os 10 grupos de ligação. Este é o primeiro relato de QRLs à antracnose do colmo mapeados nos cromossomos 2, 3 e 10. Pelo grande número de QRLs mapeados sugere-se que a herança da resistência neste germoplasma tropical seja mais complexa, condicionada por um grande número de genes, sendo alguns de grande efeito fenotípico e a grande maioria com pequenos efeitos para a resistência neste patossistema.
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CONTROLE GENÉTICO DA RESISTÊNCIA DE MILHO À ANTRACNOSE DO COLMO

Máximo, Débora da Silva 20 March 2013 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-25T19:30:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Debora Silva Maximo.pdf: 2516559 bytes, checksum: f42192c8a7ed6389d9fb8661f4c843b0 (MD5) Previous issue date: 2013-03-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objectives of this study were to determine the genetic control of resistance to anthracnose stalk rot of corn and estimate the gene action involved in the generations descended from crosses between inbred lines of tropical maize. The estimation of genetic parameters was used to determine the mode of inheritance of resistance in nine families derived from crosses between resistant and susceptible inbred lines to Colletotrichum graminicola. Each family consisted of six generations (P1, P2, F1, RC1 and RC2), which were evaluated for resistance in two experiments implanted in a randomized block design in a split plot design, with three replications. Inoculations were performed using a suspension of 5 x 105 conidia mL-1 applied into the stalk. The quantification of the disease was performed using the external and internal length of lesion (cm), and number of internodes discolored. The three forms of assessment were effective in discriminating individuals resistant and susceptible to the pathogen. Through the analysis of mean generations, it was observed that there is great genetic variability among inbred lines used, where the LR 04-2 was the most effective in all families/ generations in which participated, always conditioning the lower values of lesion. The results indicated a similar mode of inheritance among families, with a predominance of additive genetic effects explaining 81.92% on average. The heritability coefficients (broad and narrow sense) were of high magnitude, indicating facility in the process of artificial selection by breeding programs. Estimates of heterosis were high and negative in all families studied, revealing the ability of resistant inbred lines to transfer the character resistance for the next generations, reducing the length of the lesions. The results showed that the genetic control of corn to anthracnose stalk rot is governed by a few genes of large effect on phenotypic expression. The addictive nature of inheritance, associated with higher estimates of heritability and oligogenic genetic control, infer that the genetic gains with selection will be successful in breeding programs that develop maize populations resistant to anthracnose stalk rot. / Os objetivos do presente trabalho foram determinar o controle genético da resistência de milho à antracnose do colmo e estimar a ação gênica envolvida nas gerações descendentes de cruzamentos entre linhagens endogâmicas de milho tropical. A estimativa dos parâmetros genéticos foi utilizada para determinar o modo de herança da resistência, em nove famílias derivadas dos cruzamentos entre linhagens resistentes e suscetíveis à Colletotrichum graminicola. Cada família foi constituída de seis gerações (P1, P2, F1, F2, RC1 e RC2), as quais foram avaliadas para resistência em dois experimentos implantados no delineamento de blocos casualizados, em esquema de parcelas subdivididas, onde nas parcelas foi estudado o efeito de famílias e nas subparcelas o efeito das gerações, com três repetições. As inoculações dos colmos foram realizadas no estádio de florescimento pleno com suspensão de 5,0 x 105 conídios mL-1. A quantificação da doença foi realizada no estádio de florescimento pleno da cultura, através do comprimento externo e interno de lesão (cm), e pelo número de internódios descoloridos. As três formas de avaliação foram eficientes em discriminar indivíduos resistentes e suscetíveis ao patógeno. Na análise das médias das gerações, observou-se a existência de grande variabilidade genética entre as linhagens endogâmicas utilizadas. A linhagem LR 04-2 destacou-se em todas as famílias/gerações em que participou, sempre condicionando os menores valores de lesão. Os resultados indicaram modo de herança semelhante entre as famílias, com predomínio de efeitos genéticos aditivos explicando em média 81,92%. Os coeficientes de herdabilidade (sentido amplo e restrito) foram de elevada magnitude, indicando a facilidade no processo de seleção artificial pelos programas de melhoramento. As estimativas de heterose foram altas e negativas em todas as famílias estudadas, revelando a capacidade das linhagens resistentes em transmitir o caráter resistência para as gerações filiais, diminuindo o comprimento das lesões. Os resultados demonstraram que o controle genético da resistência de milho à antracnose do colmo é governado por poucos genes de grande efeito na expressão fenotípica. A herança de natureza aditiva, associada às altas estimativas de herdabilidade e controle genético oligogênico, permitem inferir que os ganhos genéticos com a seleção lograrão êxito em programas de melhoramento, que buscam desenvolver populações de milho resistentes à antracnose do colmo.
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EFEITO DE PRODUTOS ALTERNATIVOS PARA O CONTROLE DA ANTRACNOSE EM FEIJÃO

Truylio, Carlos Eduardo Carbonar 18 August 2015 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-25T19:30:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carlos E C Truylio.pdf: 2023652 bytes, checksum: f7445141bbdc3047ed1e8401c8bc1697 (MD5) Previous issue date: 2015-08-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / management of crop diseases. The objective of this study was to evaluate different alternative products against anthracnose, with the detached leaf assay method, and in field conditions in common beans. The experiment with detached leaf assay method was conducted in laboratory. The experimental design was completely factorial randomized in a factorial arrangement 10 (treatment) x 2 (application or not in half the leaf) with 5 repetitions. The evaluation of severity and area under the anthracnose progress curve was performed. The experiments under field conditions were conducted in 2013/2014 and 2014/2015 harvest, at Fazenda Escola Capão da Onça. The experimental had a randomized blocks design, with four repetitions. The evaluation of severity, area under the disease progress curve and anthracnose index in the pods, in addition to crop production components were performed. The treatments for the experiments were: 1- V- 6 (Meristem enzymes, 5,4%; Mn, 2,5%; Zn, 1,9%; Mo, 0,16%), 2- Wert plus (toxins produced by cultivating from different microorganisms, such as Bacillus subtilis, Gliocladium catenulatum, Trichoderma sp, Trichoderma harzianum, Azotobacter chroococcum, e micronutrients Cu, Zn e Mg), 3- High Roots (12% of seaweed; 4,8% of K2O; 0,2% of CaO), 4- Max Fruit (4,61% of calcium), 5- Rocksil (20,56% of Al2O3, 17,43% of SiO2; 9,82% of S; 1,31 of CaO; 0,34% of TiO2; 0,18 of MgO; 0,16% of Fe2O3; 0,1% of P2O5), 6- Herbagreem (36,7% of CaO; 17 to 20% of SiO2; 2,4% of MgO; 3,4% of Fe2O3; 0,7% of K2O; 0,5% of Na2O; 0,4% of SO3; 0,2% of P2O5; 0,1% of MnO; 1 mg kg-1 of B; 13 mg kg-1 of Co; 26 mg kg-1 of Cu; 34 mg kg-1 of Zn), 7-Fluisan (hop extract: 80,7 %), 8- Herbagreen + Fluisan, 9- trifloxystrobin + tebuconazol and 10- control. In the detached leaf assay, Wert Plus had a negatively influence, increasing the severity of the disease. At field conditions, there was no statistical difference in severity between treatments in both harvests. The Wert Plus treatment had a higher rate of anthracnose on pods in 2013/2014 harvest. The yield components of culture, number of plants per meter, number of pods per plant, number of seeds per pod, weight of 100 grains and productivity were not affected by treatments. / manejo das doenças de plantas cultivadas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes produtos alternativos, contra a antracnose na cultura do feijão, em experimento em folha destacada e em condições de campo. O experimento em folha destacada foi conduzido em laboratório. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 10 (produtos) x 2 (aplicação ou não em metade da folha) com 5 repetições. Foi realizada a avaliação de severidade e calculada a área abaixo da curva de progresso da antracnose. Os experimentos em condições de campo foram realizados nas safras 2013/2014 e 2014/2015, na Fazenda Escola Capão da Onça. O delineamento experimental foi de blocos ao acaso com 4 repetições. Foi realizada a avaliação da severidade, calculada a área abaixo da curva de progresso da doença e o índice de antracnose nas vagens, além dos componentes de rendimento da cultura. Os tratamentos realizados foram: 1 - V-6 (5,4% de enzimas de meristema;2,5% de Mn; 1,9% de Zn; 0,16% de Mo,), 2 - Wert plus (toxinas produzidas pelo cultivo de diferentes microrganismos: Bacillus subtilis, Gliocladium catenulatum, Trichoderma sp, Trichoderma harzianum, Azotobacter chroococcum, e micronutrientes (Cu, Zn e Mg), 3 - High Roots (algas marinhas a 12%; K2O a 4,8%; CaO a 0,2%), 4 - Max Fruit (4,61% de cálcio), 5 - Rocksil (20,56% de Al2O3, 17,43% de SiO2; 9,82% de S; 1,31 de CaO; 0,34% de TiO2; 0,18 de MgO; 0,16% de Fe2O3; 0,1% de P2O5), 6 - Herbagreem (36,7% de CaO; 17 a 20% de SiO2; 2,4% de MgO; 3,4% de Fe2O3; 0,7% de K2O; 0,5% de Na2O; 0,4% de SO3; 0,2% de P2O5; 0,1% de MnO; 1 mg kg-1 de B; 13 mg kg-1de Co; 26 mg kg-1 de Cu; 34 mg kg-1 de Zn), 7 - Fluisan (extrato de lúpulo: 80,7 % de planta e 19,3% de água), 8 - Herbagreen + Fluisan, 9 - trifloxistrobina + tebuconazole e 10 - testemunha. No teste da folha destacada, os tratamentos V-6, Wert Plus, High Roots, Max Fruit, Rocksil, Herbagreem, Fluisan, Herbagreen +Fluisan e trifloxistrobina + tebuconazole, não apresentaram potencial de induzir resistência contra C. lindemuthianum. O tratamento Wert Plus aumentou a severidade da doença. No experimento a campo, não se observou diferença estatística na severidade entre os tratamentos nas duas safras. O tratamento Wert Plus apresentou um maior índice de antracnose nas vagens na safra 2013/2014. Os componentes de rendimento da cultura, número de plantas por metro, número de vagens por planta, número de grãos por vagem, massa de 100 grãos e produtividade não foram afetados pelos tratamentos.
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MANEJO DE DOENÇAS DA CULTURA DO MILHO: ÓLEOS ESSENCIAIS, FUNGICIDAS E HÍBRIDOS

Trojan, Daiane Garabeli 19 December 2016 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-25T19:31:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DAIANE GARABELI TROJAN.pdf: 2801962 bytes, checksum: 4032c900eac779c95e3b32f342408d9f (MD5) Previous issue date: 2016-12-19 / The increase in diseases in maize crops, with emphasis on the region of Campos Gerais in Paraná, has been relevant due to the commitment quantitative and qualitative of the grain. Because of this, the purposes of this work were: to evaluate the incidence of leaf diseases and their impact on productivity; to evaluate the effect of different fungicides to control pathogens that cause damaged grains; to relate the incidence of the main leaf diseases in corn crop and its interference with the production components; to evaluate the performance of corn inoculated with Colletotrichum graminicola to treatments with different mixtures of fungicides of strobilurins and triazoles groups; to verify the effect of various essential oils and fungicides on mycelial growth of C. graminicola; to develop a diagrammatic scale to assess the severity of anthracnose leaf blight in maize crop and to verify the best concentration of essential oils in the control of leaf anthracnose and to estimate possible effects of phytotoxicity of the essential oils on the corn crop. For that were installed 14 experimental fields with several hybrids of corn during harvest 2011/12, one in the 2012/13 crop, and one in the 2013/14 crop; in laboratory were installed a 2012 experiment, and another between 2014/15; It was developed a diagrammatic scale in 2015 and carried out an experiment in a greenhouse in 2016. The results brought information such as: between the late material and early ones, the results were specific to each location where Puccinia sorghi, Phaeosphaeria maydis, Exserohilum turcicum had greater severity of disease in 6 of the 9 experiments, and was also the most sensitive in the experiment installed in late materials; there was difference of fungicide control depending on the studied pathogen; regarding to yields higher than 10 tons, the components production that directly interfered were: length and diameter of the ear, number of kernels per row and weight of 1000 grains, on the other hand the most affected yield components in those hybrid with productions around 8.5 tons were: diameter of the ear, number of kernels per row and the 1000 grains; None of the Colletotrichum graminicola application times obtained results regarding the incidence of leaf anthracnose. The treatments with fungicides scored lower percentage of damaged kernels; regarding the use of essential oils, clove, oregano and cinnamon there were inhibitory effect on mycelial growth of C.graminicola at all concentrations tested, citronella, lime and orange, showed fungistatic effects at concentrations of 5 and 10%, while lemongrass and thyme showed better results in concentrations of 15 and 20%; the scale was presented as an assertive tool to quantify the severity of anthracnose leaf blight; it was observed that independent of concentration, all essential oils showed phytotoxicity on corn plants, none of the essential oils in the used concentrations totally controlled C. graminicola. / O aumento de doenças na cultura do milho (Zea mays L.), na Região dos Campos Gerais do Paraná, tem sido relevante em virtude do comprometimento quantitativo e qualitativo dos grãos. Em função disso, foram objetivos deste trabalho: verificar o efeito de diferentes óleos essenciais e fungicidas sobre o crescimento micelial de Colletotrichum graminicola; verificar a melhor concentração dos óleos essenciais no controle da antracnose da folha e estimar possíveis efeitos de fitotoxicidade dos óleos essenciais; elaborar uma escala diagramática para estimar a severidade da antracnose foliar na cultura do milho; avaliar o efeito de diferentes fungicidas no controle de patógenos causadores de grãos ardidos, avaliar a ocorrência de doenças foliares e seu impacto na produtividade; relacionar a ocorrência das principais doenças foliares na cultura do milho e a sua interferência sobre os componentes de produção; avaliar o desempenho da cultura do milho inoculada com C. graminicola a tratamentos com diferentes misturas de fungicidas dos grupos de estrobilurinas e triazóis; sobre a cultura do milho. Para isso em laboratório foram instalados experimentos; também foi elaborada uma escala diagramática em 2015 e realizado um experimento em casa de vegetação em 2016; além da instalação de 14 campos experimentais com diversos híbridos de milho, durante as safras agrícolas 2011/2012, 2012/2013 e 2013/2014. Nenhuma das épocas de aplicação de Colletotrichum graminicola obtiveram resultados quanto à ocorrência da antracnose foliar. Os tratamentos que receberam fungicidas obtiveram as menores porcentagens de grãos ardidos; quanto ao uso de óleos essenciais, cravo da índia, canela e orégano tiveram efeito inibitório no crescimento micelial de C. graminicola em todas as concentrações testadas, citronela, laranja e lima, apresentaram efeito fungistático nas concentrações de 5 e 10%, enquanto erva cidreira e tomilho apresentaram melhores resultados nas concentrações de 15 e 20%; a escala apresentou-se como uma ferramenta assertiva para a quantificação da severidade da antracnose foliar. Constatou-se que independente da concentração, todos osóleos essenciais apresentaram fitotoxicidade sobre as plantas de milho, nenhum dos óleos essenciais nas concentrações utilizadas controlaram totalmente C. graminicola. Entre os materiais tardios e os precoces, os resultados foram específicos para cada localidade onde a ferrugem comum (Puccinia sorghi), mancha branca (Phaeosphaeria maydis) e mancha de turcicum (Exserohilum turcicum) tiveram maior severidade da doença em 6 dos 9 experimentos, e também foi o mais suscetível no experimento instalado com materiais tardios. Houve diferença de controle fungicida dependendo do patógeno estudado; com relação às produtividades maiores que 10 toneladas, os componentes de produção que interferiram diretamente foram: comprimento e diâmetro da espiga, número de grãos por fileira e massa de 1000 grãos, em contrapartida os componentes de produção mais afetados nos híbridos com produções em torno de 8,5 toneladas foram: diâmetro da espiga, número de grãos por fileira e massa de 1000 grãos.
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Biološko suzbijanje Colletotrichum spp. parazitauskladištenih plodova jabuke

Grahovac Mila 28 May 2014 (has links)
<p>Colletotrichum spp. su značajni prouzrokovači bolesti biljaka u svetu i u na&scaron;oj zemlji, u polju i u skladi&scaron;tu. Na plodovima jabuke prisutne su dve vrste ovog roda, C. acutatum i C. gloeosporioides. Pomenute vrste uzrokuju ekonomski značajne gubitke posle berbe plodova jabuke, tokom skladi&scaron;tenja, transporta i plasmana na trži&scaron;te. Nedoumice sa kojima se naučna javnost suočava kada je u pitanju ovaj rod jeste precizno utvrđivanje sistematske pozicije i definisanje vrsta i nižih kategorija. Klasične fitopatolo&scaron;ke metode ne omogućavaju preciznu<br />iv<br />identifikaciju do nivoa vrste. Otuda su molekularni pristupi sve zastupljeniji u identifikaciji Colletotrichum spp. U suzbijanju skladi&scaron;nih patogena pretežno se primenjuju hemijski fungicidi. Zbog nepovoljnih toksikolo&scaron;kih svojstava i pojave rezistentnosti, primena hemijskih fungicida se sve vi&scaron;e redukuje, a njihova upotreba posle berbe plodova zabranjena je u većini zemalja. Stoga, za održivi razvoj poljoprivredne proizvodnje neophodna su istraživanja usmerena ka otkrivanju mikroorganizama i prirodno sintetisanih materija koje imaju potencijala za primenu u biolo&scaron;koj za&scaron;titi.<br />Cilj ovog rada je da se utvrdi zastupljenost Colletotrichum spp. na uskladi&scaron;tenim plodovima jabuke u R. Srbiji, kao i pouzdanost klasičnih i molekularnih metoda za njihovu identifikaciju do nivoa vrste i nižih kategorija. Utvrđivanje filogenetske pozicije i genetičke udaljenosti izolata je takođe svrstano u ciljeve istraživanja. Nadalje, cilj je i da se izdvoje mikroorganizami i etarska ulja koja ispoljavaju antifungalno delovanje na Colletotrichum spp. Zatim, da se za mikroorganizam sa najizraženijim antifungalnim delovanjem defini&scaron;u uslovi kultivacije (sastav hranljive podloge i trajanje) koji maksimizuju njegovu antifungalnu aktivnost i utvrdi način njegovog delovanja.<br />Utvrđeno je da su Colletotrichum spp. redovno prisutni na uskladi&scaron;tenim plodovima jabuke u Vojvodini i delovima zapadne, centralne i jugoistočne Srbije i da je njihova zastupljenost u odnosu na druge fitopatogene gljive 7,8-10%. Zbog osetljivosti C. gloeosporioides na niske temperature, C. acutatum postaje sve dominantnija vrsta ovog roda na uskladi&scaron;tenim plodovima jabuke. Razlikovanje C. acutatum i C. gloeosporioides je moguće na osnovu fenotipskih karakteristika kolonija (u slučaju hromogenih izolata C. acutatum), dužine konidija, rasta kolonija na 5 i 35&deg;C i brzine rasta kolonija na različitim podlogama. Oblik i &scaron;irina konidija i optimalna temperatura rasta su nedovoljno pouzdani kriterijumi za identifikaciju do nivoa vrste. PCR metodom uz primenu prajmera specifičnih za vrstu uspe&scaron;no se identifikuju C. acutatum i C. gloeosporioides. Primenom univerzalnih prajmera ITS1 i ITS4 amplifikuju se rDNK-ITS sekvence ovih izolata. Analizom sekvenci izrađuju se filogenetska stabla visoke stabilnosti i jasno razdvajaju C. acutatum i C. gloeosporioides, a u okviru C. acutatum se odvajaju nehromogeni i hromogeni izolati. S. hygroscopicus, S. aureus, B. cereus, P. aeruginosa i B. subtilis sojevi N146, ST 1/III, Č13 i QST 713 ispoljavaju antifungalnu aktivnost na Colletotrichum spp. in vitro i in vivo. S. hygroscopicus obezbeđuje za&scaron;titu plodova na nivou sa hemijskim fungicidima (trifloksistrobin, boskalid+piraklostrobin, pirimetanil+flukvinkonazol, kaptan). Kultivacijom S. hygroscopicus u podlozi sa 15,07 g/l glicerola, 5,28 g/l ekstrakta kvasca i 0,81 g/l fosfata, u<br />v<br />trajanju 3-4 dana, postiže se maksimalno antifungalno delovanje na Colletotrichum spp. Antifungalno delovanje S. hygroscopicus zasnovano je na produkciji ekstracelularnih, termostabilnih metabolita. Dvomesečno skladi&scaron;tenje trtiranih plodova na 2&plusmn;0,5&deg;C ne slabi antifungalno delovanje S. hygroscopicus. Etarska ulja origana i timijana ispoljavaju snažno inhibitorno delovanje na Colletotrichum spp.</p> / <p>Colletotrichum spp. are significant plant pathogens worldwide in field, as well as on stored fruits. Two species of this genera, C. acutatum and C. gloeosporioides, can occur on apple fruits. The species cause significant economic losses on apple fruits after harvest, during storage, transport and marketing. Scientific community faces confusion in defining precise systematic position of this genera, as well as in identification to the species level and lower categories. Conventional<br />viii<br />phytopathological methods do not provide precise identification to the species level. Thus, molecular approaches are taking the lead in Colletotrichum spp. identification. Post-harvest pathogens are mainly managed by chemical fungicides. Due to adverse toxicological properties and resistance occurrence, use of chemical fungicides is being reduced, and their application after harvest is prohibited in most countries. Therefore, studies regarding detection of microorganisms and naturally synthetized substances with a potential for application in biological control are necessary for sustainable development of agriculture.<br />The aim of this study was to determine frequency of Colletotrichum spp. on stored apple fruits in the Republic of Serbia as well as reliability of conventional and molecular methods in their identification to the species level and lower categories. Determination of phylogenetic position and molecular distance of the isolates were also set as investigation goals. The aim was also to determine microorganisms and essential oils with antifungal activity against Colletotrichum spp. Defining of cultivation conditions (nutrient medium composition and duration) for the microorganism with the most pronounced antifungal activity which maximize its activity and defining its mode of action were also set as goals.<br />It was found that Colletotrichum spp. are commonly present on stored apple fruits in Vojvodina Province and in western, central and southeastern parts of Serbia with a share of 7.8-10% among other phytopathogenic fungi. Due to susceptibility of C. gloeosporioides to low temperatures, C. acutatum is becoming dominant species of this genus on stored apple fruits. Discrimination between C. acutatum and C. gloeosporioides is possible on the basis of phenotypic characteristics of colony (in the case of chromogenus isolates of C. acutatum), conidium length, colony growth at 5 and 35&deg;C and colony growth rate on different media. Conidium shape and width and optimal growth temperature are insufficient criteria for identification to the species level. PCR method using species-specific primers is reliable for identification of C. acutatum and C. gloeosporioides. rDNK-ITS sequences of the isolates can be successfully amplified with universal primers, ITS1 and ITS4. Analyses of the sequences alow construction of highly stable phylogenetic trees with distinctively separated C. acutatum and C. gloeosporioides clades, and also additional clades of non-chromogenum and chromogenum C. acutatum isolates. S. hygroscopicus, S. aureus, B. cereus, P. aeruginosa and B. subtilis strains N146, ST 1/III, Č13 and QST<br />ix<br />713 exhibit antifungal activity against Colletotrichum spp. in vitro and in vivo. S. hygroscopicus ensures fruit protection at the same level as chemical fungicides (trifloxistrobin, boscalid+pyraclostrobine, pyrimethanil+flukvinconazol, captan). Cultivation of S. hygroscopicus in the medium with 15.07 g/l glycerol, 5.28 g/l yeast extract and 0.81 g/l phosphates, for 3-4 days, ensures maximal antifungal activity against Colletotrichum spp. Antifungal activity of S. hygroscopicus is based on production of extracelular, thermostable metabolites. Two-month storage of treated apple fruits at 2&plusmn;0.5&deg;C does not reduce antifungal activity of S. hygroscopicus. Oregano and thyme essential oils exhibit strong inhibitory effects on Colletotrichum</p>
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Purificação e caracterização bioquímica de uma &#946;-xilosidase halotolerante de Colletotrichum graminicola / Purification and biochemical characterization of a halotolerant ß-xylosidase of Colletotrichum graminicola

Carvalho, Daniella Romano de 07 March 2017 (has links)
A fim de garantir a viabilidade econômica da produção de etanol de segunda geração é necessário o desenvolvimento de tecnologias eficientes para a hidrólise enzimática dos materiais lignocelulósicos. Além disso, o elevado consumo de água pelas biorrefinarias tem despertado grande atenção para a utilização de recursos hídricos não-potáveis, como a água do mar. Assim, atualmente busca-se por enzimas tolerantes a altas concentrações salinas, bem como aos subprodutos gerados e/ou acumulados nas etapas de pré-tratamento da biomassa. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi a purificação e caracterização cinética e bioquímica de uma ß-xilosidase produzida por uma linhagem do fungo mesófilo Colletotrichum graminicola. A enzima purificada (Bxcg) apresentou conteúdo de carboidratos totais de 54% (m/m), ponto isoelétrico de 4,2 e uma massa molecular aparente de cerca de 130 kDa, que foi reduzida para cerca de 92 kDa após deglicosilação. A enzima mostrou boa tolerância a elevadas concentrações de sal e manteve cerca de 90% da atividade controle na presença de NaCl 0,5 mol L-1 (concentração média de NaCl na água do mar). A temperatura e pH ótimos de reação foram 65 ºC e 4,5, respectivamente, tanto na ausência quanto na presença de NaCl 0,5 mol L-1. Já na presença de NaCl 2,5 mol L-1 o pH ótimo de atividade foi alterado para 5,0. Bxcg permaneceu estável numa ampla faixa pH (4,0 - 7,5) tanto na ausência quanto na presença de sal. A enzima mostrou ótima estabilidade térmica e manteve completamente estável à 50 ºC após 24 horas de incubação. A presença de elevada concentração de NaCl (2,5 mol L-1) resultou num aumento na termoestabilidade da enzima. A atividade enzimática foi tolerante aos íons Ca2+, Sr2+, Co2+, Zn2+, Ni2+, Mn 2+, Mg2+, K+ e Na+. Na ausência de sal, Bxcg hidrolisou p-nitrofenil-?-D-xilopiranosídeo (pNP-XIL) com Vmáx de 348,8 ± 11,5 U mg-1, KM de 0,52 ± 0,02 mmol L-1 e alta eficiência catalítica (kcat/KM = 1432,7 ± 47,3 L mmol-1 s-1). Em presença de sal, a afinidade aparente de Bxcg pelo substrato foi levemente menor e a hidrólise ocorreu com Vmáx menor, resultando em eficiência catalítica cerca de 1,5 de vezes menor, se comparadas as condição de ausência de sal. A enzima apresentou atividade bifuncional de ?-xilosidase/?-L-arabinofuranosidase. Bxcg hidrolisou p-nitrofenil-?-L-arabinopiranosídeo com afinidade aparente cerca de 18 vezes menor (KM = 9,6 ± 0,5 mmol L-1) que a estimada para pNP-XIL e a hidrólise do substrato ocorreu com Vmáx de 148,4 ± 4,4 U mg-1 e eficiência catalítica de 33,1 ± 1,6 L mmol-1 s-1. A enzima foi fortemente inibida por xilose com KI de 3,3 mmol L-1. Bxcg foi capaz de hidrolisar xilooligossacarídeos até xilohexaose, inclusive aqueles com ramificação de ácido 4-O-metilglucurônico. Bxcg e uma endo-xilanase purificada do mesmo microrganismo apresentaram um forte efeito sinérgico (3,1 vezes) para hidrólise de xilana beechwood. A enzima mostrou-se tolerante aos solventes butanol, glicerol, tolueno e acetona, bem como aos surfactantes Triton X-100, Tween 80 e Tween 20, enquanto que o líquido iônico acetato de 1-etil-3-metilimidazólio inibiu fortemente a atividade enzimática. De uma maneira geral, Bxcg apresenta propriedades atraentes para a aplicação em processos de sacarificação da biomassa lignocelulósica, incluindo aqueles conduzidos em elevada salinidade e/ou em presença de compostos residuais gerados ou acumulados nas etapas de pré-tratamento da biomassa / In order to ensure the economic viability of the production of second-generation ethanol, it is necessary the development of efficient technologies for the enzymatic hydrolysis of lignocellulosic materials. In addition, the large consumption of water by biorefineries has attracted great attention for the use of non-potable water resources, such as seawater. Therefore, enzymes tolerant to high salt concentrations and the by-products generated and/or accumulated in the biomass pretreatment steps are widely studied. In this context, the objective of this study was the purification and kinetic and biochemical characterization of a ?-xylosidase produced by a strain of the mesophilic fungus Colletotrichum graminicola. The pure enzyme (Bxcg) showed a total carbohydrate content of 54% (w/w), isoelectric point of 4.2 and an apparent molecular weight of 130 kDa, which was reduced to 92 kDa after deglucosylation. The enzyme showed good tolerance to high salt concentrations and retained aproximately 90% of the control activity in the presence of 0.5 mol L-1 NaCl (NaCl concentration in seawater). The optimum reaction temperature and pH were 65 °C and 4.5, respectively, both in the absence and presence of 0.5 mol L-1 NaCl. In the presence of 2.5 mol L-1 NaCl, the optimum pH was altered to 5.0. Bxcg retained stable over a wide pH range (4.0 - 7.5) both in the absence and presence of salt. The enzyme showed excellent thermal stability and retained completely stable at 50 °C after 24 hours of incubation. The presence of high NaCl concentration (2.5 mol L-1) resulted in an increase in the thermostability of the enzyme. The enzymatic activity was tolerant to Ca2+, Sr2+, Co2+, Zn2+, Ni2+, Mn2+, Mg2+, K+ and Na+. In the absence of salt, Bxcg hydrolyzed p-nitrophenyl-?-D-xylopyranoside (pNP-XIL) with Vmax of 348.8 ± 11.5 U mg-1, KM of 0.52 ± 0.02 mmol L-1 and high catalytic efficiency (kcat/KM = 1432.7 ± 47.3 L mmol-1 s-1). In the presence of salt, the apparent affinity for the substrate was slightly lower and the hydrolysis occurred with smaller Vmax, resulting in catalytic efficiency 1.5 fold lower, when compared to the salt. The enzyme showed bifunctional ?-xylosidase/?-L-arabinofuranosidase activity. Bxcg hydrolyzed p-nitrophenyl-?-L-arabinopyranoside with apparent affinity 18-fold lower (KM = 9.6 ± 0.5 mmol L-1) than that estimated for pNP-XIL and substrate hydrolysis occurred with Vmax of 148.4 ± 4.4 U mg-1 and catalytic efficiency of 33.1 ± 1.6 L mmol-1 s-1. The enzyme was strongly inhibited by xylose with KI of 3.3 mmol L-1. Bxcg was able to hydrolyze xylooligosaccharides from xylohexaose, including those with 4-O-methyl-glucuronic acid branch. Bxcg and a pure endo-xylanase from the same microorganism had a strong synergistic effect (3.1 fold) for hydrolysis of xylan beechwood. The enzyme was tolerant to the butanol, glycerol, toluene and acetone solvents, as well as the Triton X-100, Tween 80 and Tween 20 surfactants, whereas the 1-ethyl-3-methylimidazolium acetate ionic liquid strongly inhibited the enzymatic activity. In summary, Bxcg has attractive properties for application in saccharification processes of the lignocellulosic biomass, particularly under high salinity and/or in the presence of residues of biomass pretreatment steps
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Eficiência de diferentes produtos fungicidas no controle da antracnose em manga / Efficiency of different fungicides to control anthracnosis in mangos

Silva, George Fagner da 13 April 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GEORGE FAGNER.pdf: 234473 bytes, checksum: 5420749a8c2e87f6e7ab26164467f3ca (MD5) Previous issue date: 2008-04-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Anthracnosis is a serious disease that limits the production of healthy and marketable mangos (Mangifera indica). Due to the serious nature of this disease, a study was undertaken to test the efficacy of azoxystrobin as compared to different fungicides commonly utilized for the control of this disease, in two experiments. Each experiment consisted of ten treatments with four replicates. The plots were consisted of three plants of cv. Tommy Atkins. The products tested were azoxystrobin + difenoconazole WG (200; 300; 400 e 600 mL ha-1p.c.); azoxystrobin (120 mL ha-1p.c.); chlorothalonil WP (1500 e 2000 mL ha-1p.c.); difenoconazole (300 e 500 mL ha-1p.c.), and an unsprayed control. A total of four applications were performed at 15 days intervals, the first one performed at panicle plain flux. 40 days after the last application were collected 25 fruits for plot. The same ones were conditioned in cardboard boxes and stored at ambient temperature during 15 days, when the evaluated of anthracnosis incidence was accomplished. In the first experiment, the with azoxystrobin in its composition didn t differ between then. In the second experiment, the treatments with fungicides were similars, althought these had differed from the unsprayed control. The analysis of regression pointed azoxystrobin + difenoconazole 600 mL ha-1p.c. as the most efficient in the control of anthracnosis in both experiments / A antracnose da mangueira (Mangifera indica), causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides, é um dos fatores limitantes à produção de frutos sadios e comercializáveis. Conhecendo-se o problema e consciente das perdas resultantes do ataque do fungo na cultura, avaliou-se a eficiência de diferentes fungicidas no manejo da antracnose da manga, em dois ensaios. Cada ensaio constou de dez tratamentos, com quatro repetições. Sendo que as unidades experimentais foram constituídas por três plantas de manga da cv. Tommy Atkins. Os produtos utilizados foram Azoxystrobin + difenoconazole SC 200 + 125 (200; 300; 400 e 600 mL.ha-1p.c.) Azoxystrobin GrDa 500 (120 mL.ha-1p.c.); Chlorothalonil SC 720 (1.500 e 2.000 mL.ha-1p.c.); Difenoconazole CE 250 (300 e 500 mL.ha-1p.c.), e uma testemunha absoluta. Foi realizado um total de quatro aplicações com intervalos de 15 dias, sendo estas iniciadas no momento da floração plena da panícula. Aos 40 dias após a última pulverização foram coletados 25 frutos por parcela. Os mesmos foram acondicionados em caixas de papelão e armazenados a temperatura ambiente durante 15 dias, quando foi realizada a avaliação de incidência de antracnose. No primeiro ensaio os tratamentos que apresentaram azoxystrobin na sua composição não diferem entre si, já no segundo ensaio não houve diferença significativa entre os tratamentos com aplicação de fungicidas, tendo estes diferido datestemunha. A análise de regressão apontou Azoxystrobin + difenoconazole na dosagem 600 mL.ha-1p.c. como o mais eficiente no controle da antracnose nos dois ensaios
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Eficiência de diferentes produtos fungicidas no controle da antracnose em manga / Efficiency of different fungicides to control anthracnosis in mangos

Silva, George Fagner da 13 April 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GEORGE FAGNER.pdf: 234473 bytes, checksum: 5420749a8c2e87f6e7ab26164467f3ca (MD5) Previous issue date: 2008-04-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Anthracnosis is a serious disease that limits the production of healthy and marketable mangos (Mangifera indica). Due to the serious nature of this disease, a study was undertaken to test the efficacy of azoxystrobin as compared to different fungicides commonly utilized for the control of this disease, in two experiments. Each experiment consisted of ten treatments with four replicates. The plots were consisted of three plants of cv. Tommy Atkins. The products tested were azoxystrobin + difenoconazole WG (200; 300; 400 e 600 mL ha-1p.c.); azoxystrobin (120 mL ha-1p.c.); chlorothalonil WP (1500 e 2000 mL ha-1p.c.); difenoconazole (300 e 500 mL ha-1p.c.), and an unsprayed control. A total of four applications were performed at 15 days intervals, the first one performed at panicle plain flux. 40 days after the last application were collected 25 fruits for plot. The same ones were conditioned in cardboard boxes and stored at ambient temperature during 15 days, when the evaluated of anthracnosis incidence was accomplished. In the first experiment, the with azoxystrobin in its composition didn t differ between then. In the second experiment, the treatments with fungicides were similars, althought these had differed from the unsprayed control. The analysis of regression pointed azoxystrobin + difenoconazole 600 mL ha-1p.c. as the most efficient in the control of anthracnosis in both experiments / A antracnose da mangueira (Mangifera indica), causada pelo fungo Colletotrichum gloeosporioides, é um dos fatores limitantes à produção de frutos sadios e comercializáveis. Conhecendo-se o problema e consciente das perdas resultantes do ataque do fungo na cultura, avaliou-se a eficiência de diferentes fungicidas no manejo da antracnose da manga, em dois ensaios. Cada ensaio constou de dez tratamentos, com quatro repetições. Sendo que as unidades experimentais foram constituídas por três plantas de manga da cv. Tommy Atkins. Os produtos utilizados foram Azoxystrobin + difenoconazole SC 200 + 125 (200; 300; 400 e 600 mL.ha-1p.c.) Azoxystrobin GrDa 500 (120 mL.ha-1p.c.); Chlorothalonil SC 720 (1.500 e 2.000 mL.ha-1p.c.); Difenoconazole CE 250 (300 e 500 mL.ha-1p.c.), e uma testemunha absoluta. Foi realizado um total de quatro aplicações com intervalos de 15 dias, sendo estas iniciadas no momento da floração plena da panícula. Aos 40 dias após a última pulverização foram coletados 25 frutos por parcela. Os mesmos foram acondicionados em caixas de papelão e armazenados a temperatura ambiente durante 15 dias, quando foi realizada a avaliação de incidência de antracnose. No primeiro ensaio os tratamentos que apresentaram azoxystrobin na sua composição não diferem entre si, já no segundo ensaio não houve diferença significativa entre os tratamentos com aplicação de fungicidas, tendo estes diferido datestemunha. A análise de regressão apontou Azoxystrobin + difenoconazole na dosagem 600 mL.ha-1p.c. como o mais eficiente no controle da antracnose nos dois ensaios

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