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Isolamento, identificação e caracterização das substâncias de Rapanea guianensis Aubl. (Myrsinaceae) e Diospyros hispida A. DC. (Ebenaceae) inibidoras de células de câncer

Dusi, Renata Garcia 14 July 2017 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2017. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo liberado: Resumos. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-08-14T20:55:48Z No. of bitstreams: 1 2017_RenataGarciaDusi_PARCIAL.pdf: 182462 bytes, checksum: 5d1da746070a4591696580c88f4519c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-09T12:37:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_RenataGarciaDusi_PARCIAL.pdf: 182462 bytes, checksum: 5d1da746070a4591696580c88f4519c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-09T12:37:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_RenataGarciaDusi_PARCIAL.pdf: 182462 bytes, checksum: 5d1da746070a4591696580c88f4519c7 (MD5) Previous issue date: 2017-10-09 / O câncer é um conjunto de doenças relacionadas entre si, cuja característica é a proliferação descontrolada de células com capacidade de invasão de outros tecidos e órgãos. Atinge crianças e adultos, homens e mulheres, todas as etnias e classes sociais. Traz prejuízos à saúde pessoal e pública, na esfera econômica e social, tornando-se um alvo para pesquisas de grupos do mundo inteiro. Cerca de 60% dos quimioterápicos utilizados na clínica são produtos naturais ou derivados de produtos naturais. A complexidade química encontrada na natureza, fruto de bilhões de anos de evolução tem sido importante fonte na busca de alternativas terapêutica. A biodiversidade do Cerrado brasileiro se traduz em uma grande e pouco explorada quimiodiversidade, o que o torna uma interessante fonte de novos fármacos. Neste trabalho, o extrato etanólico da madeira da raiz de Rapanea guianensis e o extrato acetato de etila da raiz (madeira com casca) de Diospyros hispida foram submetidos a fracionamento bioguiado após demonstrarem atividade no painel de 60 linhagens do Instituto Nacional do Câncer dos Estados Unidos (NCI60). A partir do extrato de R. guianensis foi isolada a saponina Ardisiacrispin A (1) e a lignana (-)-lyoniresinol 3-O- β-D-glucopyranoside (2). A saponina (1) foi ativa em cinco diferentes linhagens com IC50 de 1,1 μM a 46,32 μM e também teve atividade na via de sinalização RasRaf. Já a lignana (2) não foi ativa em nenhuma linhagem e nem na Topoisomerase I. Do extrato de D. hispida foram isoladas três quinonas diméricas: um derivado clorado de isodiospirina que ainda não havia sido reportado - nomeado brazisodiospirina (3), isodiospirina (4) e habibona (5), além dos fitoesteróis lupeol (6), β-sitosterol (7) e estigmasterol (8). Todas as naftoquinonas exibiram atividade nas linhagens testadas, mas isodiospirina foi a mais ativa, especialmente na linhagem de câncer renal UO31 com IC50 de 6,5 μM. / Cancer is a series of related diseases in which cells proliferate without control and have the ability to invade other tissues and organs. It is concerning for both children and adults, men and women, all ethnicities and social classes. It damages personal and public health, the economic and social sphere, becoming a target for research of academics from all over the globe. Around 60% of all chemotherapeutics are of natural origino or derived from a natural product. The chemical complexity of natural products, which is a result of billions of years of evolution, has been an important source in the search for alternative therapeutics. The biodiversity of the Brazilian Cerrado translates into a great and poorly explored chemodiversity, which makes it a usefull source of new drugs. In this work, the ethanolic extract of Rapanea guianensis root wood and the ethyl acetate extract of the root (wood with bark) of Diospyros hispida were submitted to bioguided fractionation after demonstrating activity in the panel of 60 cell lines screening of the National Cancer Institute of U.S. (NCI60). From the extract of R. guianensis was isolated the saponin Ardisiacrispin A (1) and the lignan (-) - lyoniresinol 3-O-β-D-glucopyranoside (2). Saponin (1) was active in five different strains with IC50 from 1.1 μM to 46.32 μM and also had activity on the RasRaf signaling pathway. The lignan (2) was not active in any strain or Topoisomerase I assay. Three dimeric quinones were isolated from D. hispida extract: a chlorinated derivative of isodiospirin that had not yet been reported (3), isodiospirin (4) and habibone (5) as well as the phytosterols lupeol (6), β-sitosterol (7) and stigmasterol (8). All of the naphthoquinones exhibited activity in the tested strains, but isodiospirin was the most active, especially in the renal cancer strain UO31 with IC50 of 6.5 μM.
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Estudo químico de folhas de Pouteria ramiflora (Mart.) Radlk. (Sapotaceae) : biomonitoramento por inibição da alfa-amilase

Rodrigues, Patrícia Marques 15 July 2015 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2015. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-02-15T12:20:13Z No. of bitstreams: 1 2015_PatriciaMarquesRodrigues.pdf: 10230066 bytes, checksum: 31622d20cc9eadea8b9dc79c08e4b2ce (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-02-19T16:26:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_PatriciaMarquesRodrigues.pdf: 10230066 bytes, checksum: 31622d20cc9eadea8b9dc79c08e4b2ce (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-19T16:26:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_PatriciaMarquesRodrigues.pdf: 10230066 bytes, checksum: 31622d20cc9eadea8b9dc79c08e4b2ce (MD5) / Pouteria ramiflora (Mart.) Radlk., espécie comumente encontrada no Cerrado é popularmente conhecida como, “curriola” (“curiola”), “brasa-viva”, “figo-do-cerrado” entre outros. Essa planta produz frutos comestíveis e é usada na medicina popular contra hiperlipidemias e para tratar vermes, disenteria, dor e inflamação. Extratos dessa espécie apresentam atividades alelopática, anti-inflamatória, antinociceptiva, antimicrobiana, antioxidante, citotóxica, mutagênica, neuroprotetora, sendo útil no controle glicêmico e de peso. Pouteria ramiflora apresenta ainda inibição das enzimas α-amilase e α-glicosidase motivo pelo qual foi escolhida para ser estudada visando a descoberta de novos inibidores da α-amilase. A inibição dessa enzima está relacionada ao controle glicêmico em pacientes com diabetes mellitus tipo 2, uma desordem metabólica que implica em várias complicações secundárias e atinge pessoas no mundo todo. Neste trabalho foi realizado o estudo químico e o biomonitoramento da atividade inibitória da enzima α-amilase por extratos de folhas de Pouteria ramiflora. A α-amilase foi exposta aos extratos brutos, aquoso, hexânico e etanólico e a atividade da enzima foi avaliada na presença e na ausência do possível inibidor pelo método colorimétrico descrito por Bernfeld (1955), com modificações. O extrato mais ativo foi definido com a obtenção do valor de CI50 em comparação ao padrão acarbose. Esse extrato foi fracionado com o objetivo de isolar o composto ativo. Os compostos foram isolados e identificados por técnicas cromatográficas e espectrométricas como CCD, CC, CLAE-DAD, IV, CG-EM e RMN de 1H e 13C e identificados. O extrato aquoso (CI50 = 9,51 μg/mL) e a fração aquosa (CI50 = 9,71 μg/mL) desse extrato foram os mais ativos contra a enzima avaliada com valores de IC50 próximos ao padrão acaborse (CI50 = 4,2 μg/mL). Os triterpenos epifriedelanol, friedelina e taraxerol foram identificados e/ou isolados a partir do extrato hexânico e o flavonoide miricitrina, marcador do gênero, foi isolado e identificado a partir do extrato aquoso de P. ramiflora. Até onde vai o nosso conhecimento, este é o primeiro relato da identificação de epi-friedelanol, friedelina, taraxerol e do isolamento miricitrina em P. ramiflora. A presença desses compostos pode justificar, pelo menos em parte, a atividade observada nos extratos desta planta. ______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Pouteria ramiflora (Mart.) Radlk., a species commonly found in Cerrado and populary known as curriola (curiola), brasa-viva, figo-do-cerrado among others. This plant produces edible fruits and is used in folk medicine as hyperlipaedemic and to treat worms, dysentery, pain and inflammation. Extracts of this species exhibit allelopathic, antiinflammatory, antinociceptive, antimicrobial, antioxidant, cytotoxic, mutagenic, neuroprotective activities and also is useful in glycemic and weight control. Because Pouteria ramiflora extracts present α-amylase and α-glucosidase inhibition, this species was chosen in this study toward the potential discovery of new α-amylase inhibitors. Inhibition of this enzyme is related to glycemic control in patients with diabetes mellitus type 2, a metabolic disorder that involves multiple secondary complications and affects people worldwide. In this work we performed the chemical and biomonitoring studies of the in vitro inhibition activity of extracts from Pouteria ramiflora against α-amylase enzyme. The aqueous, hexane and ethanol crude extracts were evaluated against α-amilase; and the enzyme activity was tested in the presence and absence of possible inhibitors by the colorimetric method described by Bernfeld (1955) with modifications. The IC50 was obtained and the most active extract was defined and compared to acarbose standard. This extract was fractionated with the purpose of isolating the active compound. The compounds were isolated and identified for chromatographic and spectrometric techniques such as TLC, CC, HPLC-DAD, IR, GC-MS and 1H NMR and 13C NMR and identified. Aqueous extracts ((IC50 = 9,51 μg/mL) and its aqueous fraction (IC50 = 9,51 μg/mL) were the most active against the α-amilase with the IC50 value similar to the standard acarbose (IC50 = 4,2 μg/mL). The triterpenes epi-friedelanol, friedelin and taraxerol were identified from the hexane extract and the myricitrin flavonoid, chemical marker of the genus Pouteria, was isolated and identified from the P. ramiflora aqueous extract. As far as know, this is the first report of the identification of epi-friedelanol, friedelin, taraxerol and the isolation of myricitrin from P. ramiflora. The presence of these compounds may help to clarify at least in part the reported biological activity for this species.
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Caraterização físico-química e avaliação dos compostos bioativos de óleos brutos e refinados de soja, canola, milho e girassol

Freitas, Irene Rodrigues [UNESP] 04 December 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2018-07-27T18:26:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-04. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-27T18:30:28Z : No. of bitstreams: 1 000868992.pdf: 1157720 bytes, checksum: 998052590c7e6b509e5685605fbaaec1 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os óleos são usados com frequência na alimentação humana. Por isso há necessidade de verificar a qualidade e de conhecer as suas substâncias bioativas, pois nos estágios da refinação comercial ocorre a remoção não somente de componentes indesejáveis, mas também compostos desejáveis. O objetivo deste trabalho foi avaliar óleos brutos e refinados de soja, canola, milho e girassol de cinco diferentes marcas comercializadas no mercado brasileiro. Foi feita a caracterização físico-química por meio das análises de ácidos graxos livres, índice de peróxidos, índice de p-anisidina, valor totox, extinção específica, matéria insaponificável e índice de estabilidade oxidativa. Os compostos bioativos foram determinados através das análises de fitosteróis, tocoferóis, carotenoides totais, compostos fenólicos totais e composição em ácidos graxos. A atividade antioxidante foi avaliada por meio dos sistemas ABTS●+, DPPH●, FRAP e β-caroteno/ácido linoleico. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância no nível de 1% seguida do teste de Tukey no nível de 5% de probabilidade. Pelas análises físico-químicas, os óleos brutos podem ser considerados de boa qualidade. Na refinação houve remoção de compostos indesejáveis, tais como ácidos graxos livres e índices de peróxidos, conforme esperado. Por outro lado, este processo reduziu, em média, de 22-42% de matéria insaponificável. De maneira geral, os óleos brutos analisados podem ser considerados fontes de compostos bioativos. No entanto, avaliando os óleos refinados, houve remoção destes compostos durante as diferentes etapas de refinação utilizadas pelas indústrias. Tais perdas variaram, em média, de 13-30% para fitosteróis totais, 14-57% para tocoferóis totais, 54-90% para carotenoides totais e 26-58% para compostos fenólicos totais. Após a refinação, o óleo de milho se destacou apresentando, em média,... / Oils are frequently used in human food. Therefore, there is need to check the quality and know their bioactive substances, since during the stages of commercial refining not only undesirable components are removed but also the desirable compounds. The objective of this study was to evaluate crude and refined soybean, canola, corn and sunflower oils of five different brands sold in the Brazilian market. The physicochemical characterization through the analysis of free fatty acids, peroxide index, p-anisidine index, totox value, specific extinction, unsaponifiable matter and oxidative stability index was carried out. The bioactive compounds were determined through the analysis of phytosterols, tocopherols, carotenoids, phenolic compounds and fatty acid composition. The antioxidant activity was evaluated by the ABTS●+ DPPH●, FRAP and β-carotene/linoleic acid systems. The obtained data was submitted to analysis of variance at the 1% significance level, followed by the Tukey test at a 5% probability level. Through the physicochemical analysis, the crude oils can be considered of good quality. During refining removal of undesirable compounds such as free fatty acids and peroxides indices occurred as expected. Moreover, this process reduced, on average, 22-42% of unsaponifiable matter. In general, the crude oils analyzed may be considered sources of bioactive compounds. However, during the evaluation of the refined oils, these compounds were removed during the different refining steps used by the industries. Such losses ranged, on average, from 13-30% for total phytosterols, 14-57% for total tocopherols, 54-90% for carotenoids and 26-58% for total phenolic compounds. After refining, corn oil stood out as having an average of 945.68 mg/100 g and 127.82 mg/kg of phytosterols and Total phenolic compounds, respectively, and soybean oil with 503.22 mg/kg of total tocopherols. Losses varied even between different brands for the same ...
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Efeitos anti-inflamatório e antitumoral dos constituintes de Qualea grandiflora no tumor de Ehrlich /

Quilles, Marcela Bassi. January 2013 (has links)
Orientador : Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Fernanda de Freitas Aníbal / Banca: Luis Vitor da Silva Sacramento / Banca: Luciana Simon Pereira Crott / Banca: \denise Fecchio / Resumo: O câncer de mama é uma das maiores causas de morte dentre as mulheres, seguido pelo câncer de colo de útero. Os tratamentos geralmente utilizados são extremamente agressivos e na maioria das vezes causando efeitos deletérios as células do hospedeiro. Os macrófagos são as primeiras células a serem ativadas para participar de uma resposta imunológica propriamente dita, são células capazes de secretar mais de cem produtos biologicamente ativos, entre esses, espécies reativas de nitrogênio e citocinas que atuam no contexto da resposta imunológica e/ou inflamatória. Qualea grandiflora Mart (Q. grandiflora) da família Vochysiaceae é uma planta do cerrado brasileiro, utilizada na medicina popular no tratamento de úlceras, gastrites, amebíase, diarréia com sangue, cólicas intestinais e inflamações. Estudos realizados anteriormente em nosso laboratório demonstraram que espécies de Qualea sp. apresentou atividade antitumoral in vitro extremamente seletiva para tumor de mama murino (linhagem LM3) e ainda apresenta características anti-inflamatórias através da inibição expressiva da produção dos mediadores imunológicos NO, IL-1 e IL-12 pelos macrófagos peritoneais murinos ativados com LPS. A partir destes resultados, propusemos avaliar neste trabalho uma forma alternativa de tratamento contra o câncer de mama experimental empregando-se um extrato bruto (EH), uma fração terpênica (FT) derivada do extrato hexânico de Q. grandiflora e a substância isolada β-sitosterol (BS), em modelo experimental de Ehrlich concomitante à avaliação dos efeitos imunológicos das substâncias testadas, no animal. Como droga padrão dos experimentos realizados, utilizou-se o Taxol® (Paclitaxel- TX). Foi determinado in vitro a citotoxicidade celular de células do exsudado peritoneal de camundongos e células tumorais de Ehrlich, após incubação com os diferentes tratamentos pela técnica de MTT, analise da angiogênese pela dosagem... / Abstract: Breast cancer is a leading cause of death among women, followed by cervix cancer. The treatments normally used are highly aggressive, and most often causing deleterious effects on host cells. Macrophages are the first cells to be activated to participate in an immune response itself, cells are able to secrete more than hundred biologically active products, among these, reactive nitrogen species and cytokines that act in the context of immune and / or inflammatory. Qualea grandiflora Mart (Q. grandiflora) family Vochysiaceae is a plant of the Brazilian Cerrado, used in folk medicine in the treatment of ulcers, gastritis, amebiasis, bloody diarrhea, intestinal cramps and inflammation. Previous studies in our laboratory have shown that species Qualea sp. showed in vitro antitumor activity extremely selective murine breast tumor (line LM3) and also has anti-inflammatory characteristics by the significant inhibition of the production of immune mediators NO, IL-1 and IL-12 by murine peritoneal macrophages activated with LPS. From these results, we propose to evaluate this work an alternative form of treatment for breast cancer by employing a crude extract (EH), a fraction terpene (FT) derived from the hexane extract of Q. grandiflora and substance isolated β-sitosterol (BS) in an experimental model of Ehrlich concomitant evaluation of the immunological effects of the tested substances in the animal. As standard drug of experiments, we used Taxol ® (Paclitaxel-TX). It has been determined in vitro cytotoxicity of peritoneal exudate cells of mice and Ehrlich tumor cells after incubation with the different treatments using the technique of MTT analysis of VEGF angiogenesis by measuring the ocorência apoptosis in tumor cells by techniques Tunel and annexin V as well as the inhibition of nitric oxide (NO) and TNF-α, IL-1, IL-12 and IL-6. In addition, it was determined the rate of in vivo tumor inhibition and histological analysis by light ... / Doutor
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Avaliação dos parâmetros físico-químicos e estabilidade de compostos bioativos em óleos de polpa e amêndoa de frutos amazônicos /

Costa-Singh, Tainara January 2015 (has links)
Orientador: Neuza Jorge / Banca: Odair Zenebon / Banca: Patrícia Vieira Del Ré / Banca: Ana Carolina da Silva / Banca: Ana Carolina Conti e Silva / Resumo: A demanda de óleos vegetais com constituintes bioativos vem aumentando nos últimos anos devido à presença de componentes especiais, os quais caracterizam esses óleos como alimentos funcionais. Por ser um campo de estudo relativamente recente, há necessidade de um maior número de pesquisas sobre os óleos vegetais que contêm substâncias biologicamente ativas assim como sobre a estabilidade destes compostos sob aquecimento. O presente estudo teve como objetivos identificar os compostos bioativos e determinar a atividade antioxidante de óleos extraídos de polpas e amêndoas de palmeiras amazônicas, além de avaliar a estabilidade destes compostos bioativos sob aquecimento. Foram caracterizadas as polpas e amêndoas das palmeiras amazônicas bacabá, inajá, patauá, pupunha, tucumã quanto à composição centesimal e teor de minerais. Os óleos destes frutos, extraídos via Soxhlet, foram analisados físico-quimicamente, bem como foram determinadas suas respectivas atividades antioxidantes e composição em bioativos, com o intuito de avaliar a possível aplicação desses óleos especiais como alimentos com alegação funcional. Os óleos das polpas de pupunha e tucumã, mais relevantes quanto ao teor de lipídios, matéria insaponificável e estabilidade oxidativa, foram selecionados e submetidos às análises da estabilidade de seus compostos bioativos quando submetidos ao processo de termoxidação e oxidação acelerada em estufa. Os resultados foram submetidos às análises de variância e testes de Tukey para as médias a 5% empregando o programa ASSISTAT 7.6. Todas as polpas dos frutos apresentaram maiores porcentagens de lipídios, 22-45% quando comparados com as amêndoas. Para os índices de estabilidade oxidativa, os valores variaram entre 0,18 e 112,89 h, sendo que os óleos extraídos da polpa de pupunha e da amêndoa de tucumã apresentaram período de indução significativamente superior aos demais óleos... / Abstract: The demand for vegetable oils with bioactive constituents has increased in recent years due to the presence of special components, which characterize these oils as functional foods. Since it is a relatively new field of study, a larger number of researches on vegetable oils which contain biologically active substances is necessary, as well as on the stability of these compounds under heating. This study aimed to identify the bioactive compounds and determine the antioxidant activity of oils extracted from pulp and almond of fruits from Amazonian palm trees, and to evaluate the stability of these bioactive compounds under heating. Pulps and almonds of fruits from from bacaba, inajá, patauá, peach palm, and tucumã Amazonian palm trees were characterized regarding chemical composition and mineral contents. The oils of these fruits, extracted via Soxhlet, were analyzed physicochemically and their respective antioxidant activity and bioactive composition were determined, in order to assess the possible application of these special oils as functional foods. The oils of peach palm and tucumã pulps more relevant as the lipid content, unsaponifiable matter and oxidative stability were selected and submitted to analysis of stability of their bioactive compounds when subjected to the process of thermoxidation and accelerated oxidation in an oven. The results were submitted to analysis of variance and Tukey test for the averages, at 5%, employing 7.6 ASSISTAT program. All fruit pulps showed higher percentages of lipids, 22-45%, when compared with the almonds. As to the contents of oxidative stability, the values ranged from 0.18 to 112.89 h, and the oils extracted from peach palm pulp and tucumã almond had significantly higher induction period compared to the other oils analyzed. The oils showed antioxidant activity to inhibit free radicals generated during linoleic acid peroxidation, in addition to... / Doutor
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Construção de biblioteca metagenômica para prospecção de genes envolvidos na biossíntese de antibióticos /

Schuch, Viviane. January 2007 (has links)
Orientadora: Eliana Gertrudes Macedo Lemos / Banca: Lúcia Maria Carareto Alves / Banca: Vanderlei Rodrigues / Resumo: Metabólitos secundários são compostos bioativos, com grande importância para a indústria farmacêutica e agropecuária, produzidos por certos grupos de microrganismos e plantas. Os policetídeos, que são sintetizados por complexos enzimáticos denominados policetídeos sintases (PKSs), desatacam-se entre os metabólitos secundários conhecidos e compõe a estrutura química básica de vários antibióticos. Todos os genes envolvidos na biossíntese de um policetídeo se encontram agrupados fisicamente no cromossomo, e contém genes que são altamente conservados, comumente chamados d~ pks mínima. Os métodos tradicionais para pesquisa de novas drogas, que envolvem o cultivo de microrganismos isolados do solo, não são mais tão promissores, devido à alta taxa de redescoberta de antibióticos já conhecidos, que chega a 99,9%, e à pequena parcela de microrganismos do solo que são cultiváveis pelas técnicas padrões de cultivo, cerca de 1 %. A Metagenômica é uma abordagem promissora que permite acessar o genoma desses organismos incultiváveis, pois consiste na extração de DNA diretamente do ambiente e construção de uma biblioteca com este genoma misto. Neste trabalho descrevemos a construção de uma biblioteca feita com DNA de alto peso molecular isolado diretamente de solo coletado sob arboreto de eucaliptos no Estado de São Paulo, Brasil. A biblioteca possui 9.320 clones e foi construída em vetor cosmídeo, com insertos de tamanho variando entre 30 e 45kb...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Secondary metabolites are bioactive compounds with great importance in the pharmaceutical and agriculture industries, procuced by a few groups of microrganisms and plants. The polyketides that are synthetized by enzimatic complexes, denominated polyketides synthases, outstand among the secondary known metabolites, which are part of the main structure of many antibiotics. Ali genes involved in the biosynthesis of antibiotics are found as clusters in the chromossome. The traditional methods for the research of new drugs that are made from microrganisms cultures isolated from the soil are not so promissing, due to the high rate of rediscorevy of already known species, reaching 99.9%. The other small piece of microrganisms are culturable by standards culture methods, reaching 1 % maximum. Metagenomics is a promissing approach that allows the access to genom of these organisms that are not culturable, as it is carried out by DNA extraction directly from the environment and construction of a mixed genomic library. In this work, we describe the construction of a library made from high molecular weight DNA isolated directly form the soi! undemeath a pinus forest in the State of São Paulo, Brazil. The library shows 9.320 dones and it was constructed in a cosmideo vector, with insert size ranging from 30 to 45 kb. Digestion with difterent restriction enzymes of cosmidial DNA randomly chosen allowed to visualize evident difterences in the restriction fragments among the clones, as does the possibility to determine the average insert size. The initial evaluation of the presence of genes involved in the biosynthesis of antibiotics synthesized by the enzymatic system PKS of kind I, was accomplished by the PCR amplification of clones from the library using specific primers. We studied 4.320 clones and the results suggest a great variety of these genes. The PCR products obtained were sequenced for the determination of identity of the amplified gene. / Mestre
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Avaliação das propriedades do óleo de buriti (Mauritia flexuosa L.) e sua aplicação em creme vegetal /

Pessôa, Pedro Alberto Pavão. January 2017 (has links)
Orientador: Neuza Jorge / Coorientador: João da Paixão Soares / Banca: Débora Maria Moreno Luzia / Banca: José Francisco Lopes Filho / Banca: Carolina Médici Veronezi / Banca: Ana Carolina da Silva / Resumo: O acelerado aumento no consumo de óleos vegetais no mundo tem impulsionado sua produção a partir de uma variedade extensa de matérias-primas. No Brasil, mais de 80% dos óleos produzidos são utilizados para fins alimentícios, desde tempero de saladas, frituras e até mesmo no preparo de bolos, maioneses, margarinas e cremes vegetais. Com o intuito de agregar valor nutricional, melhorar a conservação, a estabilidade e a aparência dos óleos, inúmeras pesquisas têm sido desenvolvidas. Partindo dessa premissa, esta pesquisa teve como objetivos caracterizar a polpa e os óleos de buriti extraídos por prensagem a frio (OBP) e artesanal (OBA), a fim de viabilizar a sua aplicação em creme vegetal à base de óleo de palma. A polpa de buriti foi analisada quanto à sua composição centesimal. Os óleos de buriti foram analisados quanto à caracterização físico-química, composição em ácidos graxos e triacilgliceróis, carotenoides totais, teores de fitosteróis e tocoferóis. O óleo de buriti foi termoxidado a 180ºC e analisado em diferentes intervalos de tempo (0, 1, 2, 3, 4 e 5 h). Foram produzidos dois tipos de cremes vegetais à base de óleo de palma, um com o OBP e outro com OBA, os quais foram submetidos às análises físico-químicas, composição em ácidos graxos e triacilgliceróis, perfil de fitosteróis e de tocoferóis, análises microbiológicas e sensorial. Pelos resultados, os óleos de buriti apresentaram acima de 70% de monoinsaturados e baixos valores de poli-insaturados, considerados alto... / Abstract: The accelerated increase in the consumption of vegetable oils in the world has enhanced their production from a large variety of raw materials. In Brazil, more than 80% of the oil produced is used for food purposes such as salad sauces, frying and even in the preparation of cakes, mayonnaise, margarine and vegetable creams. In order to aggregate nutritional value, to improve the conservation, the stability and the appearance of the oils, numerous researches have been developed. From that premise, this research had as objective to characterize the buriti pulp and oil extracted by cold pressing (OBP) and handmade (OBA), in order to enable its application in vegetable cream based on palm oil. The buriti pulp was analyzed about the centesimal composition. The buriti oils were analyzed about the physicochemical characterization, composition in fatty acid and triacylglycerol, total carotenoids, phytosterols and tocopherols contents. The OBP was thermoxidized at 180ºC and analyzed in different time intervals (0, 1, 2, 3, 4 and 5 h). Two types of vegetable cream based on palm oil were produced, one of them with the OBP and the another one with OBA, which were submitted to physicochemical analyses, composition in fatty acid and triacylglycerol, phytosterols and tocopherols profile, sensory and microbiological analyses. According to the results, the buriti oils presented more than 70% of monounsaturated and low values of polyunsaturated, they were considered high oleic, conferring ... / Doutor
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Estudo do efeito de cobertura comestível e secagem intermitente sobre a qualidade de manga desidratada /

Amado, Laís Ravazzi. January 2017 (has links)
Orientador: Maria Aparecida Mauro / Coorientador: Keila de Souza Silva / Banca: Carolina Castilho Garcia / Banca: Vânia Regina Nicoletti Telis / Resumo: Este trabalho teve como objetivo principal investigar métodos de desidratação de manga em pedaços a partir da combinação de revestimentos comestíveis e secagem intermitente, com o intuito de reduzir o tempo e o consumo energético da operação e melhorar a qualidade do produto desidratado em relação à secagem convencional. Primeiramente buscou-se estudar a intermitência térmica aplicada ao processo de secagem convectiva de fatias de manga (Mangifera indica L.), fruta tropical de elevado conteúdo nutricional e que apresenta ampla aceitação no mercado. A intermitência térmica consistiu em utilizar uma temperatura maior no início da secagem, enquanto a superfície da fruta encontra-se predominantemente saturada, o que fez sua temperatura permanecer baixa devido à intensa evaporação da água. As configurações foram combinações de 95 °C (40 min) e 80 °C (40 min) no primeiro estágio com 70 °C e 60 °C no segundo estágio. O tempo do primeiro estágio foi estabelecido de tal forma que as mangas não ultrapassaram 60 °C durante o período. As secagens controle foram contínuas, a 70 °C e 60 °C. Avaliou-se a influência dessas configurações sobre cinética de secagem, taxas de secagem, consumo energético (calculado através de balanço de entalpia), retenção de cor e de carotenoides. A intermitência aumentou as taxas de secagem, reduzindo o tempo e o consumo energético do processo total. As secagens intermitentes com temperatura de 95 °C no primeiro estágio apresentaram os menores consumos energéticos... / Abstract: The main objective of this work was to investigate the methods of drying mango into pieces from the combination of edible coatings and intermittent drying, in order to reduce the time and energy consumption of the operation and to improve the quality of the dried product in relation to the conventional drying. Firstly, we aimed to study the thermal intermittence applied to the convective drying process of mango slices (Mangifera indica L.), a tropical fruit with a high nutritional content and that has wide acceptance in the market. The thermal intermittent consisted of using a higher temperature at the beginning of the drying, while the surface of the fruit is predominantly saturated, which made its temperature remain low due to the intense evaporation of the water. The configurations were combinations of 95 °C (40 min) and 80 °C (40 min) in the first stage with 70 °C and 60 °C in the second stage. The time of the first stage was set in such a way that the sleeves did not exceed 60 °C during the period. Control dryings were continuous at 70 °C and 60 °C. The influence of these configurations on drying kinetics, drying rates, energy consumption (calculated by enthalpy balance), color retention and carotenoids were evaluated. The intermittency increased drying rates, reducing the time and energy consumption of the total process. Intermittent drying at 95 °C in the first stage showed the lowest energy consumption and similar values for the 60 °C and 70 °C temperatures applied to ... / Mestre
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Construção de biblioteca metagenômica para prospecção de genes envolvidos na biossíntese de antibióticos

Schuch, Viviane [UNESP] 28 February 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-28Bitstream added on 2014-06-13T20:47:49Z : No. of bitstreams: 1 schuch_v_me_jabo.pdf: 3089029 bytes, checksum: 0835ef08e49e97cfdf7ad571bdfc3671 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Metabólitos secundários são compostos bioativos, com grande importância para a indústria farmacêutica e agropecuária, produzidos por certos grupos de microrganismos e plantas. Os policetídeos, que são sintetizados por complexos enzimáticos denominados policetídeos sintases (PKSs), desatacam-se entre os metabólitos secundários conhecidos e compõe a estrutura química básica de vários antibióticos. Todos os genes envolvidos na biossíntese de um policetídeo se encontram agrupados fisicamente no cromossomo, e contém genes que são altamente conservados, comumente chamados d~ pks mínima. Os métodos tradicionais para pesquisa de novas drogas, que envolvem o cultivo de microrganismos isolados do solo, não são mais tão promissores, devido à alta taxa de redescoberta de antibióticos já conhecidos, que chega a 99,9%, e à pequena parcela de microrganismos do solo que são cultiváveis pelas técnicas padrões de cultivo, cerca de 1 %. A Metagenômica é uma abordagem promissora que permite acessar o genoma desses organismos incultiváveis, pois consiste na extração de DNA diretamente do ambiente e construção de uma biblioteca com este genoma misto. Neste trabalho descrevemos a construção de uma biblioteca feita com DNA de alto peso molecular isolado diretamente de solo coletado sob arboreto de eucaliptos no Estado de São Paulo, Brasil. A biblioteca possui 9.320 clones e foi construída em vetor cosmídeo, com insertos de tamanho variando entre 30 e 45kb... / Secondary metabolites are bioactive compounds with great importance in the pharmaceutical and agriculture industries, procuced by a few groups of microrganisms and plants. The polyketides that are synthetized by enzimatic complexes, denominated polyketides synthases, outstand among the secondary known metabolites, which are part of the main structure of many antibiotics. Ali genes involved in the biosynthesis of antibiotics are found as clusters in the chromossome. The traditional methods for the research of new drugs that are made from microrganisms cultures isolated from the soil are not so promissing, due to the high rate of rediscorevy of already known species, reaching 99.9%. The other small piece of microrganisms are culturable by standards culture methods, reaching 1 % maximum. Metagenomics is a promissing approach that allows the access to genom of these organisms that are not culturable, as it is carried out by DNA extraction directly from the environment and construction of a mixed genomic library. In this work, we describe the construction of a library made from high molecular weight DNA isolated directly form the soi! undemeath a pinus forest in the State of São Paulo, Brazil. The library shows 9.320 dones and it was constructed in a cosmideo vector, with insert size ranging from 30 to 45 kb. Digestion with difterent restriction enzymes of cosmidial DNA randomly chosen allowed to visualize evident difterences in the restriction fragments among the clones, as does the possibility to determine the average insert size. The initial evaluation of the presence of genes involved in the biosynthesis of antibiotics synthesized by the enzymatic system PKS of kind I, was accomplished by the PCR amplification of clones from the library using specific primers. We studied 4.320 clones and the results suggest a great variety of these genes. The PCR products obtained were sequenced for the determination of identity of the amplified gene.
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Influência das condições de cultivo e métodos de extração na produção de metabólitos antioxidantes por fungos isolados do litoral paulista

Leite, Carla Andréa [UNESP] 26 February 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-26Bitstream added on 2014-06-13T19:49:48Z : No. of bitstreams: 1 leite_ca_me_araiq.pdf: 5762801 bytes, checksum: bc09a9c50cb41d4cbe82e881237028f7 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Vários estudos indicam que os antioxidantes podem prevenir e/ou atenuar o dano oxidativo causado pelos radicais livres, os quais em excesso estão associados com várias doenças neurodegenerativas, como Alzheimer e Parkinson. Nos últimos anos houve um aumento na descoberta de antioxidantes naturais devido à possibilidade de produção em larga escala a um custo menor que a síntese química. Devido ao seu enorme potencial de exploração, os fungos derivados do ambiente marinho são considerados um dos mais importantes recursos para a obtenção de novos agentes terapêuticos, pois um grande número de metabólitos estruturalmente novos e biologicamente ativos tem sido relatado destes organismos. Estudos também mostraram que a quantidade e a diversidade dos metabólitos secundários produzidos pelos fungos podem variar de acordo com o método de extração aplicado e as condições de cultivo. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi identificar taxonomicamente algumas espécies de fungos isolados das praias do Cabelo Gordo de Fora (São Sebastião/SP) e Balneário (Peruíbe/SP) e avaliar a influência do solvente, tempo de extração, temperatura de evaporação dos solventes, o meio de cultura (Meio Completo Marinho e Meio Sabouraud) e a fase de crescimento do fungo (exponencial e estacionária) para obtenção de compostos com atividade antioxidante e também analisar cromatograficamente os extratos obtidos. Os fungos estudados foram identificados como: Aspergillus niger, A. versicolor, Aureobasidium pullulans, Cladosporium, Exophiala sp; Madurella grisea, Penicillium sp, Rhizopus oryzae, Trichophyton tonsurans e Trichophyton terrestre. Utilizando análise estatística, os resultados obtidos mostraram que a atividade antioxidante foi significantemente influenciada pelos parâmetros estudados. Em todos os extratos, independente da espécie do fungo, a atividade antioxidante... / Various studies indicate that the antioxidants can prevent and/or attenuate the oxidative damage caused by free radicals, which in excess are associated with various neurodegenerative disorders like Alzheimer's and Parkinson's disease. In recent years, there had a growing interest in the discovery of natural antioxidants due to the possibility of largescale production at a lower cost than chemical synthesis. Marine-derived fungi, due to its enormous potential for exploration, have been considered one of the most important resources to obtain of new therapeutic agents because a large number of structurally novel and biologically active metabolites have been reported from these organisms. Studies also have shown that the quantity and diversity of secondary metabolites produced by fungi can vary depending on the applied extraction method and the cultivation conditions. In the context, the objectives of this study were to identify taxonomically some fungi isolated from two locations: Cabelo Gordo de Fora beach (São Sebastião -SP) and Balneário beach, (Peruíbe – SP) and to evaluate the influence of solvent, extraction time, evaporation temperature of the solvents, the culture media (Marine Complete Medium and Sabouraud Medium) and stage of fungal growth (exponential and stationary phases) for obtaining compounds with antioxidant activity and also to analyze chromatographically the extracts obtained. The fungi studied were identified as: Aspergillus niger, A. versicolor, Aureobasidium pullulans, Cladosporium, Exophiala sp; Madurella grisea, Penicillium sp, Rhizopus oryzae, Trichophyton tonsurans and Trichophyton terrestre. Using statistical analysis, the results obtained showed that the antioxidant activity was significantly influenced by parameters studied. In all extracts, independent of the fungal species, the antioxidant activity increased with the longer time of extraction... (Complete abstract click electronic access below)

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