Reembasadores resilientes temporários contendo fármacos antifúngicos foram sugeridos como um tratamento adjunto para estomatite protética. No entanto, antes de utilizar clinicamente estes reembasadores modificados em humanos, é importante avaliar a sua biocompatibilidade em modelos animais. Este estudo avaliou a biocompatibilidade in vivo de um reembasador resiliente temporário para base de prótese (Trusoft) modificado por agentes antimicrobianos em suas mínimas concentrações inibitórias (MCIs) para biofilme de Candida albicans. Dispositivos acrílicos intra-orais (DIOs) foram confeccionados individualmente para 60 ratos Wistar. Os ratos foram divididos em 6 grupos (n=5): 3 grupos controle (Negativo: sem DIO; Geral: DIO sem reembasamento; Positivo: DIO reembasado com Trusoft sem fármacos) e 3 grupos experimentais (DIOs reembasados com Trusoft modificados por fármacos em suas respectivas MCIs: 0,032 g de nistatina, 0,064 g de diacetato de clorexidina e 0,128 g de cetoconazol). Os ratos com ou sem os DIOs foram eutanasiados após 7 e 14 dias de avaliação. A análise histopatológica qualitativa foi realizada comparando-se fotomicrografias de secções histológicas, que foram obtidas utilizando um microscópio óptico que abrangeu transversalmente a região intermolares. As alterações morfológicas no epitélio e queratina foram analisadas quantitativamente através da realização de planimetria computadorizada. Os dados quantitativos foram analisados utilizando ANOVA 2-fatores e teste de Tukey (=0,05). A análise quantitativa mostrou que apenas o grupo com DIO contendo cetoconazol diminuiu significativamente a espessura e a área do estrato córneo em comparação com os outros grupos (p<0,05), que não apresentaram diferenças significativas entre si (p>0,05). Estes resultados estiveram de acordo com os obtidos para análise qualitativa. A incorporação de MCIs de nistatina e diacetato de clorexidina no Trusoft não induziram alterações histopatológicas na mucosa palatina de ratos, sugerindo a biocompatibilidade in vivo deste protocolo para o tratamento de estomatite protética. / Temporary resilient denture liners containing antifungal drugs have been suggested as an adjunct treatment for denture stomatitis. However, before clinically using these modified liners in humans, it is important to assess their biocompatibility in animal models. This study evaluated the in vivo biocompatibility of a temporary soft denture liner (Trusoft) modified by antimicrobial agents at their minimum inhibitory concentrations (MICs) for biofilm formation by Candida albicans. Methods: Acrylic intraoral devices (IODs) were individually made for 60 Wistar rats. The rats were divided into the following 6 groups (n=5): 3 control groups (Negative: without IOD; General: IOD without relining; Positive: IOD relined with Trusoft without drugs) and 3 experimental groups (IOD relined with Trusoft modified by drugs at MICs: 0.032 g for nystatin, 0.064 g for chlorhexidine diacetate, and 0.128 g for ketoconazole). The rats with or without the IODs were sacrificed after 7 or 14 days of evaluation. Histopathological qualitative analysis was performed by comparing photomicrographs of histological sections, which were obtained using an optical microscope that transversely covered the inter-molar region. Morphological changes in the epithelium and keratin were quantitatively analyzed by performing computerized planimetry. Quantitative data were analyzed using 2-way ANOVA and Tukey\'s test (=0.05). Quantitative analysis showed that only the group with IOD containing ketoconazole significantly decreased the thickness and area of the stratum corneum compared with the other groups (p<0.05), which showed no significant differences between each other (p>0.05). These results were in accordance with those obtained for qualitative analysis. Incorporation of MICs of nystatin and chlorhexidine diacetate in Trusoft did not induce histopathological changes in the palatal mucosa of rats, suggesting the in vivo biocompatibility of this protocol for treating denture stomatitis.

No presente estudo, a proposta foi avaliar a ação antimicrobiana sobre o biofilme de Candida albicans (SC 5314) e determinar a mínima concentração inibitória (MCI) de cinco fármacos utilizados no tratamento de estomatite protética (nistatina, miconazol, cetoconazol, itraconazol e diacetato de clorexidina), quando incorporados em reembasadores resilientes temporários à base de resina acrílica (Trusoft e Softone) bem como o efeito dessa modificação sobre as propriedades de dureza Shore A e rugosidade superficial dos materiais. Para determinação das MCIs, o biofilme fúngico foi formado sobre corpos de prova circulares (10 mm x 1 mm) dos materiais (n = 6) modificados (experimentais) ou não (controle) pela adição dos fármacos. Diferentes concentrações dos antimicrobianos foram testadas e a viabilidade celular determinada espectrofotometricamente pelo ensaio de redução de sais de tetrazólio- XTT, nos períodos de 24 h, 48 h, 7 e 14 dias. As medidas espectrofotométricas foram convertidas em porcentagens de redução fúngica e as MCIs determinadas como aquelas suficientes para inibir 90% ou mais do crescimento de C. albicans. Para os ensaios de dureza e rugosidade, corpos de prova retangulares (36 mm x 7 mm x 6 mm) dos materiais resilientes (n= 8) foram confeccionados sem (controle) ou com incorporação dos fármacos nas MCIs previamente definidas. Após armazenamento em água destilada a 37°C por 24 h, 7 e 14 dias, foram realizados os testes de dureza em durômetro Shore A (Woltest, GSD-709A) e de rugosidade superficial em rugosímetro (Surftest SJ-301). Os resultados foram analisados estatisticamente por ANOVA 3 fatores, seguida pelo teste de Tukey (=0,05). De acordo com os resultados, as MCIs determinadas para fármacos incorporados aos materiais resilientes foram: 0,032, 0,256, 0,128, 0,256 e 0,064 g/mL para nistatina, miconazol, cetoconazol, itraconazol e clorexidina, respectivamente. A adição dos antimicrobianos em ambos os materiais não alterou os valores de dureza, ou resultou na sua diminuição em relação ao controle, exceto para a incorporação de miconazol ao Softone, que demonstrou maiores médias após 14 dias (P=0,0035). A incorporação de nistatina aos dois materiais, de clorexidina ao Trusoft e de cetoconazol ao Softone não alterou os valores de rugosidade em relação ao controle após 7 e 14 dias (P>0,05). Nesses períodos, o itraconazol aumentou a rugosidade dos materiais (P<0,0001). Em relação às 24 h iniciais, o período de 14 dias mostrou que a rugosidade com a adição de nistatina, miconazol e cetoconazol foi reduzida para o Trusoft (P<0,05) e não apresentou alteração para o Softone (P>0,05). Foi possível concluir que a incorporação dos antimicrobianos testados inibiu o crescimento de C. albicans nos materiais ao longo de 14 dias de avaliação. A adição de todos os fármacos testados, exceto o miconazol no Softone, não causou alterações deletérias à dureza dos materiais resilientes no período avaliado. No período final, a adição de nistatina, miconazol e cetoconazol em ambos os reembasadores e de clorexidina no Trusoft não resultou em efeitos adversos na rugosidade. / The purpose of this study was to evaluate the antimicrobial action on Candida albicans biofilm (SC5314) and determine the minimum inhibitory concentration (MIC) of five drugs for denture stomatitis\' treatment (nystatin, miconazole, ketoconazole, itraconazole, and chlorhexidine diacetate) incorporated into temporary denture relines (Trusoft e Softone) as well the effect of this addition on the Shore A hardness and surface roughness of the materials. For MIC determination, the fungal biofilm was formed on disc specimens (10mm x 1 mm) of the materials (n= 6) modified (experimental) or not (control) by the addition of drugs. Different dosages of the antimicrobials were tested and cellular viability was determined by spectrophotometric tetrazolium salt XTT reduction assay at 24 h, 48 h, 7 and 14 days of incubation. The spectrophotometric measurements were converted to percentage reduction in candidal growth and the MICs were determined as the concentrations necessary to inhibit 90% or more of fungal viability. For hardness and surface tests, rectangular specimens (36 mm X 7 mm X 6 mm) of the resilient materials (n= 8) were made without (control) or with incorporation of the MIC drugs. After storage in distilled water at 37°C for 24h, 7 and 14 days, the hardness tests were performed using a Shore A hardness tester (Woltest, GSD-709A) and the roughness assay was conducted in a surface roughness tester (Surftest SJ-301). Data were statistically analyzed by 3-way ANOVA followed by Tukeys test (=.05). According to the results, MICs of the drugs incorporated into the material were: 0.032, 0.256, 0.128, 0.256 e 0.064 g/mL for nystatin, miconazole, ketoconazole, itraconazole and chlorhexidine, respectively. The addition of the tested antimicrobial agents in both materials demonstrated no evident hardness change or resulted in its decrease compared to the control, except for miconazole incorporation into Softone, which increased the hardness values after 14 days (P = .0035). The addition of nystatin into the two materials, chlorhexidine into Trusoft and ketoconazole into Softone resulted in no significant changes of roughness values compared to the control after 7 and 14 days (P>.05). In these periods, itraconazole promoted increase of the roughness for both materials (P<.0001). Compare to the 24- h period, the roughness at 14- day time with the addition of nystatin, miconazole and ketoconazole was reduced for Trusoft (P<.05) and remained unaffected for Softone (P> .05). It can be concluded that the incorporation of antimicrobial agents inhibited the C. albicans growth on the materials up to 14 days. The addition of all tested drugs, except for the miconazole into Softone, resulted in no deleterious effects on hardness of the resilient materials over the evaluation time. At the end period, the incorporation of nystatin, miconazole and ketoconazole into both denture relines and chlorhexidine into Trusoft resulted in no detrimental changes on the roughness.

O objetivo deste estudo preliminar foi obter padrões metodológicos para viabilizar a utilização de um dispositivo acrílico intra-oral adaptável à mucosa palatina de ratos e passível de reembasamento com material resiliente temporário (Trusoft) modificado com antimicrobianos em suas mínimas concentrações inibitórias (MCIs) para biofilme de Candida albicans. Para delinear essa adequação, foram determinados parâmetros em relação à dieta e alojamento dos animais enquanto usuários desses dispositivos. A amostra total dos ratos (n=115) foi dividida em seis grupos: Controle Negativo (CN): sem dispositivo acrílico intra-oral; Controle Geral (CG): dispositivo acrílico sem reembasamento; Controle Positivo (CP): dispositivo reembasado com Trusoft sem fármaco; Diacetato de Clorexidina (CLO): dispositivo reembasado com Trusoft contendo clorexidina (0,064 g/mL); Cetoconazol (CET): dispositivo reembasado com Trusoft contendo cetoconazol (0,128 g/mL) e Nistatina (NIS): dispositivo reembasado com Trusoft contendo nistatina (0,032 g/mL). Os animais foram eutanasiados após 7 ou 14 dias da instalação dos dispositivos intraorais. As adaptações para a obtenção dos dispositivos incluíram a técnica de moldagem, método de reembasamento e formas de retenção à mucosa palatina dos animais. Para proporcionar a análise histopatológica descritiva padronizada, foram estabelecidos critérios em relação à obtenção das amostras histológicas, à seleção da região de interesse (RI) da análise e aos determinantes utilizados na descrição. Foi observado que a dieta pastosa e o alojamento em gaiolas com piso aramado sobre base de maravalha e papel craft possibilitaram melhores condições de sobrevivência aos animais. Os dispositivos intra-orais confeccionados individualmente e retidos via amarrilhos com fios ortodônticos nos incisivos e molares se mantiveram satisfatoriamente em posição durante todo o experimento para a maioria dos animais (72,6%), sobretudo no período inicial de 7 dias. O procedimento para o reembasamento dos dispositivos foi considerado apropriado em ambos os períodos testados. Houve perda de alguns animais por desnutrição (9,5%) ou durante a anestesia (4,1%). As amostras histológicas obtidas da mucosa palatina (tecido mole) foram descartadas por serem adequadas para a determinação da RI, sendo utilizadas apenas aquelas provenientes de tecidos mole e duro (n=12). A RI mais satisfatória para análise histopatológica correspondeu à área entre os primeiros molares, de um feixe neurovascular ao outro. A simples comparação visual das fotomicrografias obtidas na análise histopatológica descritiva sugeriu a ausência de infiltrado inflamatório em todos os grupos testados para ambos os períodos de avaliação. Após 7 dias, a espessura da camada córnea, estratificação das camadas do epitélio e disposição das fibras colágenas, dos vasos e das células da lâmina própria dos grupos de estudo se apresentaram similares ao observado para o grupo CN, havendo sinais de reabsorção óssea palatina apenas no grupo CG. Aos 14 dias, foi observado aumento da espessura de ortoqueratina e compressão das células epiteliais e do tecido conjuntivo da lâmina própria de todos os grupos em relação ao CN. Neste período, a reabsorção óssea palatina foi presente em todos os grupos, exceto CN e CP, com maior intensidade no grupo CG. Foi possível sugerir que os dispositivos acrílicos intra-orais podem ser considerados funcionais e viáveis para os testes de materiais para base de próteses e avaliação de tratamento para estomatite protética em ratos, sobretudo em períodos de até 7 dias. / The purpose of this study was to produce preliminary methodological standards to allow the use of an intraoral acrylic device adjusted to the palatal mucosa of rats and capable of relining with temporary resilient material (Trusoft) modified with antimicrobial agents in the minimum inhibitory concentrations (MICs) for Candida albicans biofilm. To design this adjustment, parameters were determined in relation to the diet and housing of animals as users of these devices. The total sample (n=115) was divided into six groups: Negative control (NC): without an acrylic intraoral device; Overall Control (OC): device without relining; Positive Control (PC): device relined with Trusoft without the addition of drugs; Chlorhexidine diacetate (CHL): device relined with Trusoft containing chlorhexidine diacetate (0.064 g/mL); Ketoconazole (KET): device relined with Trusoft containing ketoconazole (0.128g/mL); and Nystatin (NYT): acrylic device relined with Trusoft containing nystatin (0.032 g/mL). The animals were sacrificed after 7 or 14 days from the installation ofthe intra-oral devices. The adaptations for obtaining the devices included the impression technique, the reline method and the means of retaining in the palatal mucosa of animals. To obtain the standard descriptive histopathological analysis, criteria had been established in relation to obtaining the histological samples,selecting the region of interest (RI) of analysis and the criteria utilized in the description. It was observed that a paste diet and housing in cages with a wired fence floor with an additional base of wood shavings and craft paper enabled the best possible survival conditions for the animals. The individually made intra-oral devices retained with stainless steel wires at the incisors and molars remained satisfactorily in position throughout the experiment for most animals (72.6%), mainly in the initial period of 7 days. The procedure for the relining of the devices was deemed appropriate for both test periods. Some animals were lost from malnutrition (9.5%) or failure to recover from the anaesthetic (4.1%). The obtained histological samples of the palatine mucosa (soft tissue) were discarded as inappropriate for the determination of the RI, having utilized only those derived from hard and soft tissues (n = 12). The RI most satisfactory for the histopathological analysis corresponded to the area between the first molars from a palatal neurovascular bundle. A simple visual comparison of the photomicrographs obtained from the descriptive histopathological analysis suggested the absence of an inflammatory infiltrate in all the groups tested for both periods. After 7 days, the thickness of the keratin, the layers of the stratified epithelium and arrangement of the collagen fibers, cells and vessels of the lamina from the mucosa of the study groups presented similar findings to those observed for the NC group, having signals of palatine bone resorption only in the OC group. At 14 days, there was an increasing thickness of the keratin and compression of the epithelial cells and connective tissue of the lamina from the mucosa of all groups in relation to the NC group. In this period, the palatal bone resorption was present in all groups except the NC and PC groups, with a greater intensity in the OC group. It was possible to suggest that the intraoral acrylic devices may be considered as functional and viable for the testing of denture base materials and the evaluation of treatment for denture stomatitis in rats, especially in periods of up to 7 days.

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da adição de mínimas concentrações inibitórias (MCIs) de agentes antimicrobianos para biofilme de Candida albicans na sorção de água e solubilidade de materiais resilientes temporários (Softone e Trusoft) para reembasamento de próteses removíveis. Os grupos de estudo (n=10) foram formados por corpos de prova circulares (50 mm x 0,5 mm) dos materiais sem (controle) ou com a incorporação das MCIs de três fármacos utilizados para tratamento de estomatite protética: nistatina (Ni)-0,032g/mL; diacetato de clorexidina (Cl)- 0,064g/mL; cetoconazol (Ce)- 0,128g/mL. Para determinar a sorção de água e solubilidade, as amostras foram dessecadas, imersas em água por 24 h, 7 ou 14 dias, pesadas, dessecadas e pesadas novamente. Os dados obtidos (&#x3BC;g/mm3) foram analisados por ANOVA 3 fatores e teste de Tukey (&#x3B1;=0,05). Comparado aos respectivos controles, a sorção de água dos dois materiais avaliados aumentou com a adição de nistatina e clorexidina após 24 h e 7 dias de imersão em água (P<0,0001). Após 14 dias de avaliação, exceto pela clorexidina (P<0,0001) no Softone (483,00 ± 61,00 &#x3BC;g/mm3), a sorção dos materiais não foi afetada (P>0,05) pela adição dos fármacos (Softone: Ni- 310,72 ± 55,00 &#x3BC;g/mm3; Ce- 202,13 ± 52,28 &#x3BC;g/mm3/ Trusoft: Ni- 320,26 ± 22,89 &#x3BC;g/mm3; Ce: 300,45 ± 69,49 &#x3BC;g/mm3; Cl: 331,01 ± 48,18 &#x3BC;g/mm3) em comparação aos respectivos controles (Softone: 244,00 ± 42,00 &#x3BC;g/mm3; Trusoft: 274,85 ± 83,12 &#x3BC;g/mm3). Para todos os grupos, o tempo de imersão aumentou (P<0,0001) a solubilidade do Softone (24h: 18,82 ± 9,80 &#x3BC;g/mm3; 7d: 32,16 ± 4,48 &#x3BC;g/mm3; 14d: 58,81 ± 8,79 &#x3BC;g/mm3), mas não do Trusoft (24h: 12,46 ± 4,51 &#x3BC;g/mm3; 7d: 14,34 ± 5,20 &#x3BC;g/mm3; 14d: 15,48 ± 5,68 &#x3BC;g/mm3) (P>0,05). Em relação aos controles e para todos os períodos, a solubilidade dos dois materiais foi alterada com clorexidina e cetoconazol (P<0,0001), mas não sofreu influência da nistatina (P>0,05). Foi possível concluir após 14 dias de imersão em água, a adição das MCIs de nistatina e cetoconazol nos dois materiais resilientes e de clorexidina no Trusoft não interferiu com a sorção de água. A solubilidade dos dois materiais temporários testados não foi alterada pela nistatina em até 14 dias de avaliação. / The objective of the present study was to evaluate the addition of minimum inhibitory concentrations (MICs) of antimicrobial agents for C. albicans biofilm on the water sorption and solubility of temporary resilient materials (Softone e Trusoft) for denture base relining. Test groups (n=10) were formed by disc specimens (50 mm x 0.5 mm) of the materials without (control) or with incorporation of the MICs of three drugs for denture stomatitis\' treatment: nystatin (Nt)- 0.032g/mL; chlorhexidine diacetate (Cl)- 0.064g/mL; ketoconazole (Kt)- 0.128g/mL. To determine the water sorption and solubility, samples were dried, immersed in water for 24 h, 7 or 14 days, weighed, dried and weighed again. Data (&#x3BC;g/mm3) were analyzed by 3-way ANOVA and Tukeys test (&#x3B1;=.05). Compared to the respective controls, the water sorption of the two materials evaluated increased with the addition of nystatin and ketoconazole after 24 h and 7 days of water immersion (P<.0001). After 14 days of evaluation, except by chlorhexidine (P<.0001) in Softone (483.00 ± 61.00 &#x3BC;g/mm3), the sorption of the materials was not affected (P>.05) by the addition of the drugs (Softone: Nt- 310.72 ± 55.00 &#x3BC;g/mm3; Kt- 202.13 ± 52.28 &#x3BC;g/mm3 / Trusoft: Nt- 320.26 ± 22.89 &#x3BC;g/mm3; Kt: 300.45 ± 69.49 &#x3BC;g/mm3; Cl: 300.45 ± 69.49 &#x3BC;g/mm3) compared to the respective controls (Softone: 244.00 ± 42.00 &#x3BC;g/mm3; Trusoft: 274.85 ± 83.12 &#x3BC;g/mm3). For all groups, the immersion time increased (P<.0001) the solubility of Softone (24h: 18.82 ± 9.80 &#x3BC;g/mm3; 7d: 32.16 ± 4.48 &#x3BC;g/mm3; 14d: 58.81 ± 8.79 &#x3BC;g/mm3), but not of Trusoft (24h: 12.46 ± 4.51 &#x3BC;g/mm3; 7d: 14.34 ± 5.20 &#x3BC;g/mm3; 14d: 15.48 ± 5.68 &#x3BC;g/mm3) (P>.05). In comparison to the controls, and for all periods the solubility of the both materials was affected with chlorhexidine and ketoconazole (P<.0001), but not was influenced by nystatin (P>.05). It can be concluded that after 14 days of water immersion the addition of MICs of nystatin and ketoconazole in the both resilient materials and chlorhexidine in the Trusoft did not affect the water sorption. The solubility of the two temporary materials tested was not altered by nystatin up to 14 days.

O presente estudo in vitro objetivou avaliar a longo prazo o potencial antimicrobiano residual e a citotoxicidade de soluções químicas de limpeza de prótese quando incorporadas à resina acrílica termopolimerizável após sucessivos ciclos de imersão noturna diária. Discos (10mm x 1mm) de resina acrílica termopolimerizável para base de prótese (Lucitone 550) foram submetidos a três ciclos diários de desinfecção (8h/cada) em hipoclorito de sódio a 1% (NaClO), digluconato de clorexidina a 2% (CLX) ou água destilada (controle) durante 91 (T91) ou 183 dias (T183), simulando o período de 9 meses ou 1,5 ano de imersão noturna diária realizada pelo paciente. Inicialmente, foi utilizado o método de concentração inibitória mínima em caldo para determinar o possível efeito residual (incorporação) das soluções à resina acrílica. Metade dos discos imersos em cada agente de limpeza em um dos tempos de imersão (n=5) foi inoculada (1x107cels/mL) com um dos patógenos associados à estomatite protética: Candida albicans (Ca) e Staphylococcus aureus (Sa). Os discos foram incubados a 37oC para análise em espectrofotômetro após 24h, 7 e 14 dias. Os valores de absorbância foram convertidos em porcentagens de inibição microbiana. Confirmada a ação antimicrobiana residual dos agentes de limpeza incorporados à resina acrílica, foi então analisada sua citotoxicidade in vitro sobre fibroblastos gengivais humanos (L929). Os efeitos citotóxicos foram avaliados por meio do ensaio colorimétrico MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio] para a determinação da viabilidade celular, após as células serem expostas por 24h às amostras de cada condição experimentais (n=18) previamente imersas em uma das soluções por um dos períodos avaliados (T91 ou T183). A citotoxicidade foi determinada com base na atividade mitocondrial em relação a corpos de prova não submetidos à imersão nas soluções testadas. Os resultados do ensaio do MTT foram analisados estatisticamente por ANOVA-1 fator seguida pelo teste post-hoc de Tukey HSD (a=0,05). Para os períodos T91 e T183, não houve inibição microbiana com a imersão em água (controle) em até 14 dias de incubação. A CLX inibiu progressivamente o crescimento microbiano ao longo dos 14 dias para ambos os períodos de imersão (Ca: 19 a 73,58%; Sa: 0 a 87,08%), sendo observada maior ação antimicrobiana em T183. O NaClO apresentou discreta inibição microbiana apenas no período de 14 dias tanto em T91 (Ca: 0%; Sa: 2,70%) quanto em T183 (Ca: 8,50%; Sa: 15,08%). De acordo com os resultados do teste de MTT, as soluções químicas de limpeza testadas apresentaram uma redução significativa da viabilidade celular quando comparado às células controles propagadas apenas em meio de cultura (p<0,002). A CLX resultou na menor viabilidade celular em ambos os períodos de imersão (p<0,018). As amostras de resina acrílica imersas em água ou NaClO em T91 e T183 apresentaram viabilidade celular estatisticamente similar às amostras não imersas (p>0,05). Pode-se concluir que a CLX incorporada à resina acrílica para base de prótese apresentou um efeito antimicrobiano residual em ambos os períodos de imersão noturna, o que não foi observado com o NaClO. Por outro lado, a CLX residual resultou em efeito intensamente citotóxico aos fibroblastos gengivais humanos quando comparada ao NaClO e à agua destilada, que se apresentaram discretamente citotóxicos. Esses resultados sugerem precaução na seleção de agentes de limpeza para prótese como meio de prevenção e tratamento adjunto da estomatite protética, pois mesmo em concentrações baixas, recomendadas para imersão noturna, podem apresentar algum grau de toxicidade às mucosas de suporte protético. / This in vitro study aimed to evaluate the long-term residual antimicrobial activity and cytotoxicity of chemical denture cleansers incorporated into a heat-polymerized acrylic resin after successive cycles of daily overnight soaking. Discs (10mm x 1mm) were prepared from heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550) and submitted to three daily immersion (8h/each) in 1% sodium hypochlorite (NaClO), chlorhexidine digluconate 2% (CHX) or distilled water (control) for 91 days (T91) or 183 days (T183), simulating the period of 9 months or 1.5 year of nocturnal immersion performed by the patient. Initially, the method of minimum inhibitory concentration in broth was used to determine the possible residual effect (incorporation) of the acrylic resin solution. Half of the disks immersed in each cleaning agent for one of the period immersion (n=5) was inoculated (1x107cells/mL) with pathogens associated with denture stomatitis: Candida albicans (Ca) or Staphylococcys aureus (Sa). The disks were incubated at 37oC for analysis in a spectrophotometer after 24h, 7 and 14 days. The absorbance values were expressed as percentages of microbial inhibition. Confirmed the residual antimicrobial action of cleaning agents incorporated into the acrylic resin, its cytotoxicity was analyzed in vitro on human gingival fibroblasts (L929). Cytotoxic effects were evaluated by the colorimetric assay MTT [3- (4,5- dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide] to determine cellular viability after the cells were exposed for 24h to the samples of each experimental condition (n=18) previously immersed in one of the solutions for the evaluation periods (T91 or T183). Cytotoxicity was determined based on mitochondrial activity compared to the specimens not subjected to immersion in the solutions. The MTT assay results were 1-way ANOVA followed by Tukey\'s HSD post-hoc test (a=0.05). For the periods T91 and T183, no microbial inhibition was observed with immersion in water (control) for up to 14 days of incubation. The CHX progressively inhibited microbial growth over the 14 days for both immersion times (Ca: 19 to 73.58%, Sa: 0 to 87.08%); with greater antimicrobial activity in T183. The NaClO showed a slight microbial inhibition only in the 14-day period in both T91 (Ca: 0%; Sa: 2.70%) and T183 (Ca: 8.50%; Sa: 15.08%). According to the results of the MTT assay, the chemical cleaning solutions tested showed a significant reduction in cell viability when compared to the control cells propagated in normal culture medium (p<0.002). The CHX resulted in the lowest cell viability in both immersion periods (p<0.018). The acrylic samples immersed in water or NaClO in T91 and T183 showed cell viability statistically similar to nonimmersed samples (p>0.05). CHX incorporated into the acrylic resin denture base had a residual antimicrobial effect on both immersion periods, which was not observed with NaClO. On the other hand, the residual CHX were severely cytotoxic to human gingival fibroblasts compared to NaClO and distilled water which were slightly cytotoxic. These results suggest caution in selecting denture cleaning agents as a method of prevention and adjunct treatment of denture stomatitis because even at low concentrations recommended for overnight immersion, they may exhibit some degree of toxicity to the denture bearing mucosa.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_Rafael_Guerra_Lund.pdf: 8802929 bytes, checksum: ef093a1950314ad988093579ba1a09db (MD5) Previous issue date: 2008-05-15 / A great variety of diseases can affect the oral cavity, such as dental caries and candidosis, being the first one considered the most prevalent oral diseases worldwide. The multifactorial and infect-contagious characteristics of dental caries has been established, associated with resident bacterial pathogens of dental biofilm. These microorganisms are responsible by the production of acids and citotoxic products, which could promote the demineralization of dental structure. Currently, Candida infections constitute an important problem in Public Health. Such findings is basically due to the technological advancements of Medicine, increasing in AIDS infection and immune depressed patients in general, using prolonged antimicrobials therapies, which contributes to the microbial disequilibrium. Therefore, the use of efficient antimicrobial agents against pathogenic bacteria and yeasts is an important tool in the control of these infective diseases. Several natural antimicrobial agents are been investigated because of their possible pharmacological properties. Plants of genus Mikania are pointed out as natural products with noticeable antibacterial, antifungicidal, anti-inflammatory and antineoplasic properties. In this study the potential effect of two Mikania species was evaluated (Mikania glomerata Mg e Mikania hirsutissima Mh) using their crude ethanol extracts, based on the ethnobotanics (popular knowledge) and the literature. The test against mutans streptococci was assessed by the determination of Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Minimum Bactericidal Concentration (MBC) and inhibition of cell adherence to a glass surface (Adh). Also during a period of one year denture wearer patients with lesions compatible with Chronic Atrophic Candidiasis and assisted in the Center of Diagnosis of Mouth Diseases (CDMD), were investigated. It was applied a questionnaire a questionnaire including the identification of the subject, demographic, medical history and behaviour (oral hygiene and prosthesis wear). It also was carried out a intra-oral exam, where appearance and extension of the stomatitis lesion were evaluated. The microbiological collect was carried out frictioning sterilized swabs in the palate s mucosa, tongue or both of them. The samples were seeded in Agar Sabouraud Dextrose with 100mg/mL of chloramphenicol and they were incubated at 37oC for 24-48h. The presumptive identification of Candida species was based on the morphologic characteristics, Gram colorization of the yeasts, microculture test, hypertonic broth test and it was confirmed by the CHROMagar. The MIC against Streptococcus mutans UA159 was 44.45 Lg/mL (Mg) and 88.90 Lg/mL (Mh), and the MBC was 88.90 Lg/mL (Mh). Against Streptococcus sobrinus 6715, the MIC was 22.23 Lg/mL (Mh) and 88.90 Lg/mL (Mg), and the MBC was 177.80 Lg/mL (Mh). The celular adherence also was inhibited at concentrations of 20 Lg/mL(Mh) and 40 Lg/mL (Mg). These results provide promising baseline information for the potential use of two species of Mikania against mutans streptococci. These findings warrant more-in-depth studies of the active principles of this Mikania ethanol extracts. With regard to Candida isolation with clinical diagnosis of Chronic Atrophic Candidiasis: 1)the results did not confirm a significant difference between patients with clinical diagnosis of denture stomatitis concerning the presence or absence of yeasts; 2) the occurrence of Candida in patients with clinical diagnosis of Chronic Atrophic 6 Candidiasis was negatively related to important factors associated to this opportunistic infection; and 3) mycological findings from the present study do not indicate that the covariates investigated have a significant effect on oral infection by Candida albicans or other species of Candida genus / Uma variedade de doenças envolve a cavidade oral, dentre elas, a cárie dental e a candidíase, sendo que a primeira é considerada a mais prevalente em todo o mundo. Atualmente está bem estabelecido que cárie dental é uma doença multifatorial infecto-contagiosa associada a bactérias patogênicas residentes do biofilme dental. Estes microrganismos são os responsáveis pela produção de ácidos que levam à desmineralização do esmalte dental. As infecções por Candida consistem atualmente num problema de Saúde Pública. Isto se deve ao aumento de casos da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) e de hospedeiros imunodeprimidos de modo geral, bem como ao tratamento prolongado com antibacterianos o que contribui para o desequilíbrio da microbiota. Assim, o uso de agentes antimicrobianos eficientes contra bactérias e leveduras é um importante meio de controle destas infecções bucais. Vários agentes antimicrobianos de origem natural estão sendo investigados devido as suas possíveis propriedades farmacológicas. As plantas do gênero Mikania, conhecidas popularmente como guaco , destacam-se entre os produtos naturais com notáveis propriedades antibacterianas, antifúngicas, antiinflamatórias e antineoplásicas. Neste estudo foram avaliados extratos etanólicos brutos de duas espécies de Mikania (Mikania glomerata Mg e Mikania hirsutissima Mh)que foram pré-selecionadas com base na etnobotânica (conhecimento popular) e levantamento bibliográfico sobre as espécies a serem estudadas e suas congêneres. O teste foi realizado em Streptococcus do grupo mutans através da determinação da Concentração Inibitória Mínima (MIC), Concentração Bactericida Mínima (MBC) e inibição da aderência em superfície de vidro (Adh). Durante o período de um ano também foram estudados os pacientes usuários de prótese com lesões compatíveis com Candidíase Atrófica Crônica (CAC) encaminhados ao Centro de Diagnóstico de Doenças da boca. Foi aplicado um questionário para cada paciente, com informações referentes à sua identificação, dados demográficos, história médica e comportamento (hábitos de higiene e uso da prótese). Também foi realizado o exame intra-oral, onde eram avaliadas as variáveis: aparência e extensão da lesão de estomatite. A coleta microbiológica foi realizada com a fricção de swab estéril na mucosa com lesão compatível com CAC. Estas amostras foram semeadas em Agar Sabouraud Dextrose com 100mg/mL de cloranfenicol e incubadas a 37oC por 24-48h. A identificação presuntiva de espécies de Candida foram baseadas nas caracterísiticas macro e micromorfológicas, realização de microcultivo, teste em caldo hipertônico e CHROMagar. A maioria dos casos de CAC apresentou isolamento da levedura. As lesões de CAC foram mais frequentes em mulheres, com prótese total com uso há mais de 10 anos. A CIM frente a Streptococcus mutans UA159 foi 44,45Lg/mL (Mg) e 88,90Lg/mL (Mh), e a CBM foi 88,90Lg/mL (Mh). Frente a Streptococcus sobrinus 6715, a CIM foi 22.23Lg/mL (Mh) e 88,90Lg/mL (Mg), e a CBM foi 177,80 Lg/mL (Mh). A aderência celular também foi inibida em concentrações de 20Lg/mL(Mh) e 40Lg/mL (Mg). Estes resultados são informaçãoes de base para o uso potencial das duas espécies de Mikania contra Streptococcus do grupo mutans, necessitando outros estudos envolvendo os princípios ativos do extrato alcoólico de Mikania. 4 Quanto ao isolamento de Candida em pacientes com diagnóstico clínico de Candidíase Atrófica Crônica: 1) os resultados não confirmam uma diferença significante em pacientes com diagnóstico clínico de estomatite por dentadura com relação à presença ou ausência da levedura; 2) a ocorrência de Candida em pacientes com diagnóstico clínico de Candidíase atrófica Crônica foi negativamente relacionado a importantes fatores associados a esta infecção oportunista; e 3) os achados micológicos do presente estudo não indicaram queas variáveis investigadas tinham um efeito significativo na infecção oral por Candida albicans ou outras espécies do gênero Candida.

Objetivo: Comparar in vitro la precisión dimensional de la silicona por condensación mediante la técnica de impresión de doble mezcla; de doble impresión con alivio del margen y doble impresión con alivio total. Materiales y métodos: Las muestras estuvieron conformadas por 42 impresiones utilizando silicona por condensación Putty- Spedeex de un modelo maestro de acero inoxidable, el cual presentó dos pilares homogéneos que simularon la preparación para una corona. Estas muestras se dividieron en 3 grupos según la técnica de impresión (doble mezcla, doble impresión con alivio del margen y doble impresión con alivio total). Para determinar la precisión dimensional de los modelos definitivos en comparación al modelo maestro, se realizaron 7 mediciones (MD1, MD2, VL1, VL2, AL1, AL2, DI) con una máquina especializada en coordenadas, modelo Contura G2 con tecnología de Scanning por contacto ZEISS. Se realizaron las pruebas estadísticas Kruskal-Wallis y U de Mann-Whitney. Resultados: Se encontraron diferencias estadísticamente significativas (p˂0.001) en las medidas MD1, MD2, AL2 al comparar las 3 técnicas de impresión con el modelo maestro. La técnica de doble impresión con alivio total presentó una mayor cantidad de medidas (MD1, MD2, VL1, AL1, DI) que no mostraron diferencias estadísticamente significativas (p<0.005) en comparación al modelo maestro. Conclusiones: La técnica de doble impresión con alivio total presentó mayor precisión dimensional que las técnicas de doble mezcla y la técnica de doble impresión con alivio del margen utilizando silicona de condensación. / Objective: Compare in vitro the dimensional precision of the polivinil siloxano using the technique of impression of double mixture; double impression with margin relief and double impression with total relief. Materials and methods: The samples were composed of 42 impressions using Putty-Spedeex polivinil siloxano from a master stainless steel model, which presented two homogeneous pillars that simulated the preparation for a crown. These samples were divided into 3 groups according to the printing technique (double mix, double impression with margin relief and double impression with total relief). In order to determine the dimensional accuracy of the final models in comparison to the master model, 7 measurements (MD1, MD2, VL1, VL2, AL1, AL2, DI) were performed with a coordinated machine, Contura G2 model with contact scanning technology ZEISS. Statistical tests were performed Kruskal-Wallis and U of Mann-Whitney. Results: Statistically significant differences (p˂0.001) were found in measures MD1, MD2, AL2 when comparing the three printing techniques with the master model. The double impression technique with total relief presented a greater number of measures (MD1, MD2, VL1, AL1, DI) than did not show statistically significant differences (p <0.005) in comparison to the master model. Conclusions: The technique of double impression with total relief presented greater dimensional accuracy than the techniques of double mixing and the technique of double impression with relief of the margin using silicone of condensation.

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Adelaida S Aliaga.pdf: 5670394 bytes, checksum: 9cdda52bc2a6b833409747ce8d7cf507 (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Purpose: The purpose of this study was to evaluate the surface morphology and roughness and the in vitro leachability of temporary soft liners modified by the incorporation of antifungals, generally used for the denture stomatitis treatment, in their minimum inhibitory concentrations (MIC) for the biofilm of Candida albicans. Material and methods: The surface analyses of the tissue conditioner Softone (S) and the resilient liner Trusoft (T) modified or not by the addition of nystatin (Ny), miconazole (Mc), ketoconazole (Ke), chlorhexidine diacetate (Chx), and itraconazole (It) were made by using scanning electron microscopy and confocal laser microscopy. In vitro leachability of Ny and Chx was measured using Ultraviolet visible spectroscopy. Additional analyses of the modified materials containing Ny and Chx were made using differential scanning calorimetry (DSC). The antifungals were incorporated at their previously determined MIC for the biofilm of C. albicans (Ny = 0.032 g; Mc = 0.256 g; Ke = 0.128 g; Chx = 0.064 g; and It = 0.256 g/g of material). The specimens were stored in distilled water at 37ºC for up to 14 days previously to the analyses. Results: Softone had more irregular surface morphology than Trusoft did. Morphological changes were noted in both materials with increasing immersion time, particularly in those containing drugs. Ny and Ke showed the smallest particle sizes, while Chx and It showed the largest ones. Groups containing Chx and It presented extremely porous and irregular surface. Modified specimens had superior roughness (Ra) values in comparison with the control specimens. There was a trend towards an increase in Ra parameter after 7 days, followed by a decrease to values lower than the initial ones after 14 days, in the control and specimens with Ny, Mc, and Ke. Both materials had biexponential kinetics of release: a rapid initial release followed by a slower leaching. Softone leached more concentration of the antifungals than Trusoft and chlorhexidine was released at higher concentration than nystatin. DSC analysis revealed low Tg for Softone and that the fusion temperature of the drugs changed little after they had been added to the materials. Conclusion: The addition of Chx or It changed more significantly the surface of the materials. Softone was able to release more drug concentration and it was noted a weak chemical bond between the drugs and the evaluated materials. / Objetivo: A proposta deste estudo foi avaliar a morfologia e a rugosidade de superfície e a liberação in vitro de materiais macios temporários com incorporação de fármacos antifúngicos, comumente utilizados para o tratamento da estomatite protética, em suas concentrações mínimas inibitórias (CMI) ao biofilme de Candida albicans. Material e métodos: As análises de superfície do condicionador de tecido Softone (S) e do reembasador resiliente Trusoft (T) tanto controles como modificados pela incorporação de nistatina (Ni), miconazol (Mc), cetoconazol (Ce), diacetato de clorexidina (Clx) e itraconazol (It) foram feitas por meio de microscopia eletrônica de varredura e microscopia confocal laser. A liberação in vitro dos fármacos Ni e Clx foi quantificada utilizando espectrofotometria na região do Ultravioleta visível. Análises adicionais dos materiais contendo Ni e Clx foram feitas utilizando calorimetria exploratória diferencial (DSC). Os antifúngicos foram incorporados em suas CMI ao biofilme de C. albicans determinadas em estudo prévio (Ni = 0,032 g; Mc = 0,256 g; Ce = 0,128 g; Clx = 0,064 g e It = 0,256 g/g do material). Os corpos de prova foram armazenados em água destilada a 37ºC por até 14 dias previamente às análises. Resultados: O Softone apresentou morfologia mais irregular que o Trusoft. Foi notada alteração de superfície em ambos os materiais, principalmente naqueles contendo fármacos, com o aumento do tempo de imersão. Os maiores e os menores tamanhos de partículas foram dos fármacos Clx e It e Ni e Ce, respectivamente. Os grupos contendo Clx e It demonstraram superfícies extremamente porosas e irregulares. Os espécimes modificados apresentaram valores superiores de rugosidade média (Ra) em relação aos controles. Houve uma tendência de aumento de Ra após 7 dias, seguida por uma diminuição a valores inferiores aos iniciais após 14 dias para o grupo controle e aqueles contendo Ni, Mc e Ce. Ambos os materiais apresentaram cinética de liberação biexponencial: rápida liberação inicial seguida por uma liberação mais lenta. O Softone liberou maior concentração dos fármacos que o Trusoft e a clorexidina foi liberada em maior quantidade que a nistatina. As análises em DSC revelaram Tg mais baixa para o Softone e que a temperatura de fusão dos fármacos pouco alterou após terem sido incorporados aos materiais. Conclusão: A incorporação de Clx ou It alterou mais significativamente a superfície dos materiais. O Softone foi capaz de liberar maior concentração dos fármacos Clx e Ni e foi detectada uma fraca ligação química entre estes fármacos e os materiais avaliados.