Objetivos: Testar a hipótese de que a mucosa do intestino delgado proximal de crianças com diarréia persistente apresenta alterações morfométricas e estereológicas proporcionais ao estado nutricional. Métodos: estudo transversal, incluindo 65 pacientes pediátricos internados no período de maio de 1989 a novembro de 1991, com idade entre 4 meses e 5 anos , com diarréia de mais de 14 dias de duração, que necessitaram realizar biópsia de intestino delgado como parte do protocolo de investigação. A avaliação nutricional foi realizada pelos métodos de Gomez, Waterlow e pelos escores z para peso/ idade (P/I), peso/estatura (P/E) e estatura/idade (E/I), divididos em: eutróficos = z ≥ 2 DP e desnutridos z < -2dp; eutróficos = z ≥ 2 DP, risco nutricional = z < -1DP e desnutridos = z < -2DP; e de maneira contínua em ordem decrescente, utilizando-se as tabelas do NCHS. A captura e análise das imagens por programa de computador foi efetuada com o auxílio do patologista. Nos fragmentos de mucosa do intestino delgado, foram medidas a altura dos vilos, a profundidade das criptas, a espessura da mucosa, a espessura total da mucosa e a relação vilo/cripta, com aumento de 100 vezes. Com aumento de 500 vezes, foram medidas a altura do enterócito, a altura do núcleo e do bordo em escova. O programa computadorizado utilizado foi o Scion Image. A análise estereológica, foi feita com o uso de arcos ciclóides. Resultados: Para os escores z P/I, P/E e E/I, divididos em duas categorias de estado nutricional, não houve diferença estatisticamente significante quanto às medidas da altura dos vilos, profundidade das criptas, espessura da mucosa, espessura total da mucosa e relação vilo/cripta. A altura do enterócito foi a característica que apresentou maior diferença entre os grupos eutrófico e desnutrido, para os índices P/I e P/E, em 500 aumentos, sem atingir significância estatística. Quando os escores z foram divididos em 3 categorias de estado nutricional, a análise morfométrica digitalizada mostrou diferença estatisticamente significante para a relação vilo/cripta entre eutróficos e desnutridos leves e entre eutróficos e desnutridos moderados e graves (p=0,048). A relação vilo/cripta foi maior nos eutróficos. A avaliação nutricional pelos critérios de Waterlow e a análise estereológica não mostraram associação com o estado nutricional. Pelo método de Gomez, houve diferença estatisticamente significante para a altura do enterócito entre eutróficos e desnutridos de Grau III: quanto maior o grau de desnutrição, menor a altura do enterócito (r= -.3330; p = 0,005). As variáveis altura do enterócito, altura do núcleo do enterócito e do bordo em escova apresentaram uma clara associação com os índices P/I (r=0,25;p=0,038), P/E (r=0,029;p=0,019) e com o critério de avaliação nutricional de Gomez (r=-0,33;p=0,007), quando foram avaliadas pelo coeficiente de correlação de Pearson. A altura do núcleo mostrou associação com o índice P/I (r=0,24;p=0,054). A altura do bordo em escova mostrou associação com o índice P/I (r=0,26;p=0,032) e a avaliação nutricional de Gomez (r=-0,28;p=0,020). Conclusões: As associações encontradas entre o estado nutricional - avaliado de acordo com Gomez e os índices P/I e P/E - e as variáveis da mucosa do intestino delgado mostraram relação com o peso dos pacientes. Embora estas associações tenham sido de magnitude fraca a moderada, há uma tendência à diminuição do tamanho do enterócito, seu núcleo e seu bordo em escova à medida que aumenta o grau de desnutrição. / Objectives: To test the hypothesis that the proximal small intestinal mucosa of children with persistent diarrhea presents morphometric and stereologic changes, proportional to their nutritional status. Methods: We performed a cross-sectional study with 65 pediatric patients, with ages varying from 4 months to 5 years, who were admitted between May 1989 and November 1991 with persistent diarrhea for over 14 days. These patients were submitted to small intestinal biopsy, as part of the investigation protocol. The nutritional assessment was performed according to the methods proposed by Gomez, Waterlow, and through z-scores for weight/age (W/A), weight/height (W/H) and height/age (H/A) ratios, divided into: eutrophic = z ≥ 2SD and malnourished z < -2SD; eutrophic = z ≥ 2SD, nutritional risk z < -1SD and malnourished = z < -2SD; and continuously, in descending order, using the NCHS charts. Computer images were obtained and analyzed with a pathologist assistance. Villous height, crypt depth, mucosal thickness, total mucosal thickness, and villous/crypt ratio were measured in the fragments of the small intestinal mucosa, enlarged 100 times. When images were enlarged 500 times, enterocyte height, nuclear height and brush-border height were measured. The software used was Scion Image. Stereologic analysis was performed using cycloid arcs. Results: For W/A, W/H and H/A z-scores, divided into two nutritional status categories, no statistically significant difference was observed in regard to villous height, crypt depth, mucosal thickness, total mucosal thickness and villous/crypt ratio. Enterocyte height presented the most significant difference between eutrophic and malnourished groups, for the W/A and W/H ratios, with a 500x enlargement, although this difference was not statistically significant. When z-scores were subdivided into three nutritional status categories, a digital morphometric analysis showed a statistically significant difference for the villous/crypt ratio between the eutrophic and slightly malnourished group and the eutrophic and mild to severe malnourished group (P=0.048). The villous/crypt ratio was higher among eutrophic children. Nutritional assessment, according to Waterlow criteria, and stereologic analysis were not associated with nutritional status. According to Gomez’s method, a statistically significant difference in enterocyte height was observed between eutrophic and level III malnourished children: the higher the level of malnutrition, the more reduced the height of the enterocyte (r= -.3330; P=0.005). The variables enterocyte height, height of enterocyte nucleus and brush-border height presented a clear association with the W/A ratio (r=0.25; P=0.038), W/H ratio (r=0.029; P=0.019), as well as with Gomez’s criterion for nutritional status (r=-0.33; P=0.007), when evaluated through Pearson’s correlation coefficient. The height of the nucleus was associated with W/A ratio (r=0.24; p=0.054). Brush-border height was associated with W/A ratio and with Gomez’s nutritional assessment (r=-0.28; P=0.020). Conclusions: The observed associations between nutritional status – evaluated according to Gomez and W/A and W/H ratios – and the analyzed small intestinal mucosa variables showed a positive correlation with patients’ weight. Although these associations were of a slight to moderate magnitude, we observed a tendency of enterocyte size reduction, as well as a reduction in the size of its nucleus and brush-border, as the level of malnutrition increases.

Orientador: Maria Jacira Silva Simões / Banca: José Paschoal Batistuti / Banca: Jonas Contiero / Resumo: A diarréia do viajante é o problema de saúde, mais comum, associado ao turista em termos de freqüência e impacto econômico contribuindo para a perda de rendimentos obtidos pelo turismo, em países em desenvolvimento. O objetivo da presente pesquisa foi identificar os agentes etiológicos mais freqüentes, nos surtos de doença transmitida por alimentos e/ou água em núcleos receptores turísticos, conhecer a sazonalidade e caracterizar a população segundo a idade e os alimentos suspeitos. Baseou-se nas notificações enviadas à Divisão de Doença de Transmissão Hídrica e Alimentar (DDTHA), Centro de Vigilância Epidemiológica (CVE), Secretaria Estadual de Saúde (SES) do Estado de São Paulo, no período 2002 a 2005 e informações das Vigilâncias Sanitárias da Direção Regional de Saúde (DIR). Os núcleos receptores turísticos selecionados foram: cidade de São Paulo e alguns municípios do interior como Águas de São Pedro, Campinas, Campos de Jordão, Franca, Jundiaí, Piracicaba, Pirassununga, Ribeirão Preto, São José dos Campos, São José do Rio Preto e do litoral como Guarujá, Peruíbe, Praia Grande, Santos e Ubatuba. Os resultados mostraram que o núcleo receptor turístico cidade de São Paulo, notificou 304 surtos, 3382 casos/doentes e dois óbitos. Do interior foram notificados 116 surtos e 8016 casos/doentes e três óbitos. Do litoral foram notificados 11 surtos, 253 casos/doentes e três óbitos, compreendendo um total de 431 surtos, sendo 129.340 comensais, 11.651 casos/doentes e 8 óbitos. Os agentes etiológicos mais freqüentes foram : vírus (58,08%), bactérias (72,72%), protozoários (4,67%), helmintos (0,83%), fungos (0,15%) e produtos químicos (0,12%). A freqüência dos agentes etiológicos foi: Rotavirus 31,86%; coliformes 28,38%; Salmonella sp. 13,55% (Salmonella Enteritidis 5,08% e Salmonella Typhimurium 2,88%)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Travelers' diarrhea is the most common travel-related health problem in terms of frequency and economic impact. Travelers' diarrhea also contributes to loss of income from tourism in developing countries. The aim of the present study was to find the principle pathogens involved in outbreaks of food poisoning in tourist centers, and discover in what season the outbreaks occur, and age of the population. This study was based on informations sent to Divisão de Doença de Transmissão Hídrica e Alimentar (DDTHA), Centro de Vigilância Epidemiológica (CVE), Secretaria Estadual de Saúde (SES) do Estado de São Paulo and Vigilâncias Sanitárias da Direção Regional de Saúde (DIR) from 2002 - 2005. The tourist centers selected for the study were: São Paulo city; Águas de São Pedro, Campinas, Campos de Jordão, Franca, Jundiaí, Piracicaba, Pirassununga, Ribeirão Preto, São José dos Campos, São José do Rio Preto; Guarujá, Peruíbe, Praia Grande, Santos, and Ubatuba. The results showed that São Paulo city reported 304 outbreaks, 3,382 cases/disease and two deaths. From the interior of the state of São Paulo (116 outbreaks), 8016 cases/disease and 3 deaths were registered. From the coast (11 outbreaks), 253 cases/disease and 3 deaths were registered. In total there were 431 outbreaks, 129,340 persons exposed, 11,651 cases/disease and 8 deaths. The etiological agents were bacteria (72.72%), virus (58.08%), protozoa (4.67%), nematodes (0.83%), fungi (0.15%) and chemical products (0.12%). The frequency of causative pathogens was: Rotavirus 31.86%, coliforms 28.38%... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-18Bitstream added on 2014-06-13T20:27:44Z : No. of bitstreams: 1 salles_r_me_jabo.pdf: 598083 bytes, checksum: 499f9c1f74412f0e6664ce1077b27a3c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente estudo teve como objetivo determinar a ocorrência de rotavírus do grupo A e a genotipagem G e P de estirpes detectadas em bezerros de rebanhos leiteiros e gado de corte, durante o período de julho de 2006 a setembro de 2008, em propriedades rurais do Estado de São Paulo, Brasil. Foram amostrados 395 bezerros, na faixa etária entre 1 e 60 dias, independentemente da manifestação clínica de diarréia, de 18 rebanhos bovinos, sendo nove de exploração leiteira e nove de gado de corte. Por meio da técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA), determinou-se a ocorrência de rotavírus em 33,3% (06/18) entre os rebanhos e de 8,6% (34/395) na população amostrada. A maior freqüência de infecção foi detectada em animais com idade entre 16 e 30 dias (p < 0,01). Foram diagnosticados bezerros infectados por rotavírus tanto em animais com sinais clínicos de diarréia (22%;29/133) quanto naqueles clinicamente normais (1,9%;05/262), existindo, porém, uma correlação entre a presença da infecção e a manifestação clínica da diarréia (p<0,01). Em relação ao tipo de exploração, nos rebanhos leiteiros 0 percentual de ocorrência foi de 5,3% (14/264), enquanto que nos rebanhos de gado de corte o rotavírus teve maior ocorrência (15,3%; 20/131). A análise do perfil do genoma de rotavírus por EGPA identificou dois eletroferótipos distintos, cujas diferenças estavam localizadas na posição de migração dos segmentos 2, 3, 7, 8 e 9. A genotipagem pela reação em cadeia pela polimerase (RT-SNMPCR) das amostras de rotavírus revelou a que as estirpes circulantes nos rebanhos eram G6P[5], G10P[5], não foi possível fazer associação com o genotipo P[1]. / The present study aimed to determine the Group A rotavirus and G/P genotyping in detected virus strains in dairy and beef cattle calves from July 2006 to September 2008 in São Paulo State-Brazil farms. 395 calves in 18 flocks (9 dairy cattle and 9 beef cattle) from 1 to 60-day-old were sampled, independently whether manifesting clinically diarrhea or not. By using Poliacrylamide Gel Electrophoresis Technique (PAGE), the rotavirus occurrence of 33.3% (06/18) among flocks and 8.6% (34/395) among the population sampled were determined. The higher infection frequency was detected in 16-to-30-day-old calves (P<0.01). Rotavirus-infected flocks rotavirus-infected were diagnosticated as much the ones having clinical symptoms of diarrhea (22%, 29/133) as the ones clinically normal (1.9%, 05/262), shawing a correlation between the presence of infection and the diarrhea manifestation (p<0.01). Related to the kind of exploration, the occurrence in dairy cattle was 5.3% (14/264) while in the beef cattle the occurrence was higher (15.3%, 20/131). The rotavirus genome profile analysis by PAGE identified two distinct electroferotypes, in which differences were located in the following segment migration positions: 2, 3, 7, 8 and 9. The genotyping of the Rotavirus sample by polymerase chain reaction (RT-snmPCR) revealed that the circulating strains among the flocks were G6P[5], G10P[5] e G?P[1].

Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA08MA061.pdf: 265338 bytes, checksum: c19e162cccc2db9c3e85bc6f8c74e017 (MD5) Previous issue date: 2008-10-10 / The Clostridium difficile is a Gram-positive opportunist rod, anaerobic, spore-forming, found in the soil, water and enteric microbiota of many animal species. It has been described as the cause for enteritis in human beings and animals. In pigs it has grown in importance due to the large number of cases of neonatal enteritis that affects the colon of one to seven day old piglets. This bacterium produces two kinds of toxins: A (enterotoxin) and B (cytotoxin) that have an important role in the disease s pathogenesis. With the objective of researching the presence of the bacterium in up to seven days piglets submitted to antibiotic therapy as well as the production of the toxins A and B in isolated samples, 8 collections were made in different regions of the state of Santa Catarina, totalizing 490 samples of stool and retal swabs of piglets, gathered in the period of January to March 2008. The retal swabs were processed in the same day they were collected in the Microbiology Lab of CAV/UDESC and the stools were frozen at -4oC in steril Ependorf so that they could be submitted to the ELISA test later. Twenty-tree colonies of C. difficile were isolated, but no one produced the A and B toxins according to the ELISA test. Of the 69 stools analyzed, 32 (46,37%) were positive samples, 3 (4,34%) were intermediate samples, and 34 (49,27%) were negative samples, according to the ELISA test / O Clostridium difficile é um bastonete oportunista Gram-positivo, anaeróbio obrigatório, formador de esporos, encontrado no solo, água e microbiota entérica de várias espécies animais. Tem sido descrito como causa de enterite em seres humanos e animais. Em suínos tem adquirido grande importância devido ao grande número de casos de enterites neonatais que afetam o cólon de leitões entre um a sete dias de idade. Essa bactéria produz dois tipos de toxinas: A (enterotóxica) e B (citotóxica) que possuem papel importante na patogênese da doença. Com o objetivo de pesquisar a presença da bactéria em leitões com até 7 dias de idade submetidos à antibioticoterapia, bem como a produção das toxinas A e B nas amostras isoladas realizaram-se 8 coletas em diferentes regiões do Estado de Santa Catarina, totalizando 490 amostras de fezes e suabes retais de leitões, coletados no período de Janeiro a Março de 2008. Os suabes retais foram processados no mesmo dia da coleta no Laboratório de Microbiologia CAV/UDESC e as amostras de fezes foram congeladas a -40C em ependorf estéril para posterior realização do teste de ELISA. Foram isoladas 23 colônias do C. difficile, sendo que nenhuma delas produziu as toxinas A e B, pela análise do teste do ELISA. Já das 69 amostras de fezes analisadas, 32 (46,37%) amostras foram positivas, 3 (4,34%) amostras intermediárias e 34 (49,27%) amostras negativas, conforme demonstrou o teste de ELISA

Introdução: Devido ao uso indiscriminado de antibióticos, infecção por Clostridium difficile (ICD) tem aumentado significativamente em frequência e severidade ao longo dos anos, acarretando em maior morbidade e mortalidade além de maiores custos hospitalares. Objetivo: O objetivo deste estudo é avaliar os fatores de risco e fatores associados à pior prognóstico por colite Clostridium difficile em pacientes adultos internados. Desenho do estudo: Estudo de caso-controle retrospectivo Métodos: Em um Hospital terciário, durante o período de 1° de janeiro de 2010 a 31 de julho de 2012, foram comparados 75 pacientes com colite por Clostridium difficile documentada com 75 controles correspondentes com diarreia de origem nosocomial devido a outras etiologias. Foram identificados pacientes com ICD aqueles cuja pesquisa de toxinas A ou B, exame imunoenzimático VIDAS®, foi positiva ou aqueles com exames negativos ou indeterminados para estas toxinas com colonoscopia compatível com colite por Clostridium difficile. Todas variáveis clínicas e microbiológicas com P <0,10 na análise univariada, foram incluídos na análise de regressão logística múltipla afim de avaliar potenciais fatores de risco e fatores de pior prognóstico associados a colite por C. difficile entre pacientes com diarréia internados. Na análise multivariada, variáveis independentes permaneceram se P < 0,05. Resultados: Uso prévio de antibióticos (OR, 13.3; 95% CI, 1.40-126.90), presença de distensão abdominal (OR, 3.85; 95% CI, 1.35-10.98) e leucócitos fecais (OR, 8.79; 95% CI, 1.41-54.61) diante a apresentação de diarreia foram de preditores de infecção por Clostridium difficile. Por outro lado, presença de anorexia esteve negativamente associado com ICD (OR, 0.15; 95% CI, 0.03-0.66). Em relação a análise multivariada, alimentação por sonda naso-entérica (SNE) mostrou-se o único fator independente associado a pior prognóstico, este avaliado como: pacientes admitos em unidade de terapia intensiva (UTI), mortalidade hospitalar e falência de tratamento (OR, 3.75; 95% CI, 1.24-11.29). Conclusão: Uso de antibiótico foi fator de risco para colite por Clostridium difficile observado neste estudo. O uso de suporte nutricional por SNE foi o único fator associado a pior prognóstico. / Background: Due to the indiscriminate use of antibiotics, Clostridium difficile infections (CDI) is increasing in frequency and severity over the years, resulting in increased morbidity and mortality as well as higher hospital costs. Objective: The aim of this study was to evaluate factors associated with Clostridium difficile infection among adult patients with hospital-acquired diarrhea and factors associated with poor prognosis. Study design: Retrospective case-control study. Methods: In a terciary hospital, during the period of january 1° 2010 to 31 july 2012, were compared 75 patients with documented Clostridum difficile colitis with 75 matched controls with hospital-acquired diarrhea secondary to an etiology other than Clostridium difficile. Patients with colits were identified by a positive toxins A or B, an immunoenzymatic test VIDAS®, or by a negative or indeterminate test for these toxins with colonoscopy compatible with Clostridium difficile colitis. All clinical and microbiological variables with a P value <0.10 in the univariate analysis were included in the stepwise multiple logistic regression to identify potential factors associated with C. difficile etiology among patients with hospital-acquired diarrhea and factors associated with poor prognosis among those patients with documented C.difficile colitis. In the multivariate model, independent variables remained in the model if the P value was < 0.05. Results: Previous antibiotic treatment (OR, 13.3; 95% CI, 1.40-126.90), presence of abdominal distension (OR, 3.85; 95% CI, 1.35-10.98) and fecal leukocytes (OR, 8.79; 95% CI, 1.41-54.61) at the onset of diarrhea were predictors of CDI. On the other hand, presence of anorexia was negatively associated with C.difficile etiology (OR, 0.15; 95% CI, 0.03-0.66). Upon multivariate analysis, enteral tube feeding was the only factor independently associated with a composite endpoint which included in-hospital mortality, ICU admission and treatment failure (OR, 3.75; 95% CI, 1.24-11.29). Conclusion:.Previous antibiotic use was risk factor for clostridium difficile colits. In this study tube feeding was the only factor associated with poor prognosis.

O sorotipo O125ac:H6 compreende amostras de Escherichia coli enteropatogênica atípicas que apresentam o padrão de adesão agregativa (AA) em células HEp-2. A construção de um banco de mutantes da amostra protótipo Ec292/84 com o transposon TnphoA gerou quatro mutantes não aderentes. O objetivo deste estudo foi a caracterização genotípica e fenotípica desses mutantes. As regiões adjacentes à inserção do TnphoA no mutante Ec2921/84::01 foram amplificadas, clonadas e seqüenciadas, revelando que a inserção do TnphoA ocorreu no gene secD, parte do sistema de secreção de proteínas do tipo 2 (SST2). O perfil de proteínas de membrana externa (OMP) dos mutantes, em comparação com a amostra selvagem, revelou a ausência de proteínas de 21 e 30 kDa nos mutantes. Um antissoro obtido contra o extrato de OMP da amostra protótipo inibiu o padrão AA e reconheceu a proteína de 30 kDa em immunoblottings com extratos de OMP. Esses dados indicam que esta proteína está envolvida no estabelecimento do padrão AA de E. coli O125ac:H6 e que essa proteína é transportada através do SST2. / The serotype O125ac:H6 comprises atypical Enteropathogenic Escherichia coli strains that express the aggregative adherence (AA) pattern to HEp-2 cells. We obtained four nonadherent mutants using TnphoA insertion in the Ec292/84 strain. The aim of this study was the genetic and phenotypic characterization of these mutants. The genetic analysis of the mutants revealed that the insertion of TnphoA ocurred in the secD gene, part of the bacterial type 2 secretion system (T2SS). The mutant outer membrane proteins (OMP) profile, in comparison to the prototype strain, demonstrated the lack of expression of proteins of 21 and 30 kDa in the mutant profile. An antiserum raised against the OMP extract of the prototype strain, in addition to inhibit the AA pattern, recognized the 30 kDa protein in immunoblotting assays with OMP extract. These data indicate this OMP is involved in the establishment of the AA pattern presented by the atypical EPEC strains of the O125ac:H6 serotype, and that this protein is transported via the T2SS.

Houve um crescimento no consumo de alimentos fora do domicílio nas últimas décadas, impulsionado pela urbanização, economia, fatores demográficos e participação das mulheres no mercado de trabalho. O consumo em restaurantes de hotéis passou de 1,4 kg para 7,2 kg per capita entre 2005 e 2014 e apesar de seguir as orientações sanitárias, pode ser risco à saúde humana, devido ao tipo de prato, matéria prima ou cozimento. Assim, foram avaliados os cardápios de hotéis através de um índice de risco sanitário para os usuários, e comparou-se este índice médio do cardápio com características organizacionais e demográficas dos hotéis, seu sucesso midiático e a percepção do pessoal de problemas sanitários. Foi possível mostrar que há um conhecimento de risco pelo maior preço de pratos com risco mais alto. Os hotéis com mais risco têm cardápios mais variados e taxa de ocupação mais alta, sem diferença nos demais critérios demográficos. O pessoal de atendimento tem mais consciência de riscos que a gerência e avaliações midiáticas são menores nos hotéis de maior risco. Quanto à gestão do restaurante pelo hotel, este se mostrou mais segura para os hóspedes na gestão, sendo os restaurantes independentes mais ativos em número de pratos e turismo gastronômico, o que leva a uma melhor avaliação midiática, independente do maior risco. A avaliação do risco médio do cardápio pode levar uma melhor segurança sanitária do hóspede, mas existem outros fatores mercadológicos que podem interferir no cardápio do restaurante. Este conhecimento de risco sanitário pode orientar a escolha mercadológica do restaurante do hotel, provendo um elemento de julgamento da oferta de alimentos que podendo aumentar a fidelização e a segurança sanitária dos hóspedes. A alimentação segura de hóspedes é um processo extremamente importante para o sucesso da hotelaria, já que estes são associados a problemas pelos clientes, o que implica em maior cuidado sanitário na atual expansão do turismo de negócio e lazer no Brasil. / There has been an increase in consumption of food outside the home in the last decades, driven by urbanization, economy, demographic factors and women\'s participation in the labor market. The consumption in hotel restaurants went from 1.4 kg to 7.2 kg per capita between 2005 and 2014 and despite following the sanitary guidelines, can be risk to human health, by type of dish, raw food or cooking. Thus, we evaluated the hotel menus through a sanitary risk index for the users, and compared this average menu index with organizational and demographic characteristics of the hotels, their media success and the staff\'s perception of health problems. It was possible to show that there is a knowledge of risk by the higher price of dishes with higher risk. The hotels with more risk have more varied menus and higher occupancy rate, with no difference in the other demographic criteria. Service staff are more aware of risks that management and media reviews are lower in hotels at higher risk. As for the management of the restaurant by the hotel, this is safer for guests in hotel management, with independent restaurants more active in number of dishes and gastronomic tourism, which leads to a better media assessment, regardless of the greater risk. The evaluation of the average risk of the menu may lead to a better sanitary security of the guest, but there are other marketing factors that can interfere with the menu of the restaurant. This knowledge of sanitary risk can guide the market choice of the hotel restaurant, providing an element of judgment of the food supply that can increase the loyalty and sanitary security of the guests. The safe feeding of guests is an extremely important process for the success of the hotel industry, since these are associated with problems by the clients, which implies in greater health care in the current expansion of business and leisure tourism in Brazil.

Escherichia coli enteropatogênica (EPEC) é uma importante causa de diarreia infantil. EPEC adere no epitélio intestinal e causa uma lesão conhecida como attaching and effacing (A/E). Cepas recombinantes de Mycobacterium smegmatis (Smeg) e Mycobacterium bovis (BCG) foram construídas para expressar BfpA ou Intimina. Os genes dessas proteínas foram amplificadas por PCR do DNA genômico de EPEC e inseridos nos sítios de BamHI/KpnI do vetor pMIP12. Os plasmídeos construídos pMIP-bfpA e pMIP-intimina foram introduzidos, separadamente,nas cepas de Smeg e BCG. Clones recombinantes foram selecionados baseado na resistência a kanamicina e nomeados como rSmeg pMIP (bfpA ou intimina) and rBCG pMIP (bfpA ou intimina). A expressão dos genes bfpA e intimina foram detectados por Western blotting usando anticorpos primários policonais anti-BfpA e anti-intimina. A imunogenicidade dessas proteínas foi avaliada em camundongos C57BL/6 pela presença de anticorpos anti-BfpA e anti-intimina IgA e IgG nas fezes e soro, respectivamente. TNF-a e INF-g foram produzidas in vitro por céulas do baço de camundongos imunizados com a vacina recombinante com BfpA e Intimina. A adesão de EPEC (E2348/69) em células alvo Hep-2 foi bloqueada pelos anticorpos IgA ou IgG de camundongos imunizados com as vacinas recombinantes, mas não por anticorpos de animais não imunizados. Vacinas recombinantes contendo as proteínas BfpA e Intimina de EPEC podem ser candidatas promissoras. / Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) is an important cause of diarrhea in children. EPEC adheres to the intestinal epithelium and causes attaching and effacing (A/E) lesions. Recombinant Mycobacterium smegmatis (Smeg) and Mycobacterium bovis BCG strains were constructed to express either BfpA or intimin. The entire bfpA gene and a portion of the intimin gene were amplified by PCR from EPEC genomic DNA and inserted into the pMIP12 vector at the BamHI/KpnI sites. The pMIP bfpA and pMIP intimin vectors were introduced separately into Smeg and BCG. Recombinant clones were selected based on kanamycin resistance and designated rSmeg pMIP (bfpA or intimin) and rBCG pMIP (bfpA or intimin). The expres-sion of bfpA and intimin was detected by Western blotting using polyclonal anti-BfpA and anti-intimin primary antibodies. The immunogenicity of these proteins was assessed in C57BL/6 mice by assaying the feces and serum for the presence of anti-BfpA and anti-intimin IgA and IgG antibodies. TNF-a and INF-g were produced in vitro by spleen cells from mice immunized with recombinant BfpA, whereas TNF-g was produced in mice immunized with recombinant intimin. The adhesion of EPEC (E2348/69) to Hep-2 target cells was blocked by IgA or IgG antibodies from mice immunized with recombinant BfpA or intimin but not by antibodies from non-immunized mice. Immunogenic non-infectious vectors containing relevant EPEC virulence genes may be promising vaccine candidates.

Introdução: Devido ao uso indiscriminado de antibióticos, infecção por Clostridium difficile (ICD) tem aumentado significativamente em frequência e severidade ao longo dos anos, acarretando em maior morbidade e mortalidade além de maiores custos hospitalares. Objetivo: O objetivo deste estudo é avaliar os fatores de risco e fatores associados à pior prognóstico por colite Clostridium difficile em pacientes adultos internados. Desenho do estudo: Estudo de caso-controle retrospectivo Métodos: Em um Hospital terciário, durante o período de 1° de janeiro de 2010 a 31 de julho de 2012, foram comparados 75 pacientes com colite por Clostridium difficile documentada com 75 controles correspondentes com diarreia de origem nosocomial devido a outras etiologias. Foram identificados pacientes com ICD aqueles cuja pesquisa de toxinas A ou B, exame imunoenzimático VIDAS®, foi positiva ou aqueles com exames negativos ou indeterminados para estas toxinas com colonoscopia compatível com colite por Clostridium difficile. Todas variáveis clínicas e microbiológicas com P <0,10 na análise univariada, foram incluídos na análise de regressão logística múltipla afim de avaliar potenciais fatores de risco e fatores de pior prognóstico associados a colite por C. difficile entre pacientes com diarréia internados. Na análise multivariada, variáveis independentes permaneceram se P < 0,05. Resultados: Uso prévio de antibióticos (OR, 13.3; 95% CI, 1.40-126.90), presença de distensão abdominal (OR, 3.85; 95% CI, 1.35-10.98) e leucócitos fecais (OR, 8.79; 95% CI, 1.41-54.61) diante a apresentação de diarreia foram de preditores de infecção por Clostridium difficile. Por outro lado, presença de anorexia esteve negativamente associado com ICD (OR, 0.15; 95% CI, 0.03-0.66). Em relação a análise multivariada, alimentação por sonda naso-entérica (SNE) mostrou-se o único fator independente associado a pior prognóstico, este avaliado como: pacientes admitos em unidade de terapia intensiva (UTI), mortalidade hospitalar e falência de tratamento (OR, 3.75; 95% CI, 1.24-11.29). Conclusão: Uso de antibiótico foi fator de risco para colite por Clostridium difficile observado neste estudo. O uso de suporte nutricional por SNE foi o único fator associado a pior prognóstico. / Background: Due to the indiscriminate use of antibiotics, Clostridium difficile infections (CDI) is increasing in frequency and severity over the years, resulting in increased morbidity and mortality as well as higher hospital costs. Objective: The aim of this study was to evaluate factors associated with Clostridium difficile infection among adult patients with hospital-acquired diarrhea and factors associated with poor prognosis. Study design: Retrospective case-control study. Methods: In a terciary hospital, during the period of january 1° 2010 to 31 july 2012, were compared 75 patients with documented Clostridum difficile colitis with 75 matched controls with hospital-acquired diarrhea secondary to an etiology other than Clostridium difficile. Patients with colits were identified by a positive toxins A or B, an immunoenzymatic test VIDAS®, or by a negative or indeterminate test for these toxins with colonoscopy compatible with Clostridium difficile colitis. All clinical and microbiological variables with a P value <0.10 in the univariate analysis were included in the stepwise multiple logistic regression to identify potential factors associated with C. difficile etiology among patients with hospital-acquired diarrhea and factors associated with poor prognosis among those patients with documented C.difficile colitis. In the multivariate model, independent variables remained in the model if the P value was < 0.05. Results: Previous antibiotic treatment (OR, 13.3; 95% CI, 1.40-126.90), presence of abdominal distension (OR, 3.85; 95% CI, 1.35-10.98) and fecal leukocytes (OR, 8.79; 95% CI, 1.41-54.61) at the onset of diarrhea were predictors of CDI. On the other hand, presence of anorexia was negatively associated with C.difficile etiology (OR, 0.15; 95% CI, 0.03-0.66). Upon multivariate analysis, enteral tube feeding was the only factor independently associated with a composite endpoint which included in-hospital mortality, ICU admission and treatment failure (OR, 3.75; 95% CI, 1.24-11.29). Conclusion:.Previous antibiotic use was risk factor for clostridium difficile colits. In this study tube feeding was the only factor associated with poor prognosis.

O coronavírus bovino (BCoV) é classificado no grupo 2 do gênero Coronavirus da ordem Nidovirales, família Coronaviridae, causando diarréia em bezerros neonatos, processos respiratórios em bezerros não neonatos e disenteria em vacas adultas. No presente estudo, 203 amostras fecais de bezerros de 19 propriedades leiteiras nos Estados de São Paulo e Minas Gerais foram submetidas à prova de hemaglutinação/ inibição da hemaglutinação (HA/HI) para a detecção de coronavírus e a uma reação de PCR dirigida ao gene codificador da RNA-polimerase RNA-dependente dos coronavírus (PCR pol), sendo feita a comparação entre as duas técnicas através dos testes Kappa e J de Youden. Amostras positivas à PCR pol foram submetidas a uma reação de PCR para amplificação de um segmento de 488 pares de bases correspondentes à região hipervariável do gene codificador da subunidade S1 da proteína S, sendo os fragmentos submetidos a seqüenciamento de DNA para a reconstrução genealógica das amostras estudadas. Ainda, a presença de rotavírus foi pesquisada pela técnica de PAGE. Segundo a técnica de HA/ HI, 35,47% das amostras e 73,68% das propriedades rurais forma positivas para BCoV, enquanto que pela PCR pol 25,12% das amostras e 52,63% das propriedades rurais foram positivas para este vírus. A comparação entre as duas técnicas resultou valores de kappa de -0,048 para os resultados individuais e -0,08 em relação às propriedades rurais e J de Youden de -0,045 para os resultados individuais e -0,1 em relação às propriedades rurais, demonstrando baixa concordância entre as duas provas. A genealogia obtida por máxima parcimônia através de algoritmo heurístico e baseada em seqüências da região hipervariável do gene codificador da subunidade S1 da proteína S de 15 amostras de campo aqui estudadas, da amostra Kakegawa de coronavírus bovino utilizada como controle positivo e de 10 seqüências recuperadas dos GenBank revelou a existência de dois genotipos dentro desta espécie viral, sendo os dois genotipos encontrados entre amostras brasileiras. A identidade média de nucleotídeos entre as 15 amostras brasileiras foi de 98,34%, com similaridade média de aminoácidos de 98%. Amostras pertencentes ao genotipo 2 apresentaram uma deleção de 18 nucleotídeos/ 6 aminoácidos dentro da região correspondente ao domínio II da proteína S. A árvore de máxima parcimônia enraizada tendo bredavírus como grupo externo revelou que esta deleção ocorreu em um único momento na genealogia dos coronavírus bovinos. Rotavírus foi encontrado em 12,6% das amostras fecais individuais e 28, 57% das propriedades rurais pesquisadas. Estes resultados são os primeiros baseados em amostras brasileiras de coronavírus bovino e contribuem para a caracterização molecular do BCoV, para a predição da eficiência de imunógenos e para o encontro de marcadores moleculares úteis para estudos epidemiológicos continuados em relação às diarréias neonatais em bovinos. / Bovine coronavirus (BCoV) belongs to group 2 of the genus Coronavirus from the order Nidovirales, family Coronaviridae and causes diarrhea in newborn calves, respiratory diseases in non-newborn calves and dysentery in cows. In the present study, 203 stool samples of calves from 19 dairy farms from São Paulo and Minas Gerais States were submitted to hemagglutination/ hemagglutination inhibition test (HA/HI) to bovine coronavirus detection and a PCR assay targeted to the RNA-polymerase RNA-dependent gene of coronaviruses (PCR pol), the comparison between the two tests carried out with Kappa and Youden´s J tests. Samples positive to PCR pol were submitted to a PCR assay that amplifies a 488 base-pair fragment which corresponds to the hypervariable region of the gene coding for the S1 subunit of the S protein; the amplified fragments were submitted to DNA sequencing aiming the genealogic reconstruction of the studied samples. Rotavirus was surveyed with the PAGE test. The HA/ HI test resulted 35.47% of samples and 73.68% of farms positive to BCoV, while, according to PCR pol, 25.12% of the samples and 52.63% of the farms were positive to this virus. The comparison between the two tests produced a kappa value of -0.048 to individual results and -0.08 to the farms and Youden´s J value of -0.045 to individual results and -0.1 to the farms, showing low agreement between the two tests. Maximum parsimony genealogy with an heuristic algorithm based on sequences of the hypervariable region of the gene coding for the S1 subunit of the S protein from 15 field samples here studied, from the Kakegawa bovine coronavirus strain used as positive control and from 10 sequences retrieved from GenBank showed the existence of two genotypes in this viral species. Mean nucleotide identity between the 15 Brazilian samples was 98.34%, with mean amino acid similarity of 98%. Samples from genotype 2 showed a deletion of 18 nucleotides/ 6 amino acids inside the domain II region of the S protein. Rooted maximum parsimony tree with bredavirus as an outgroup revealed that this deletion has happened only once in bovine coronavirus genealogy. Rotavirus was found in 12.6 % of stool samples and 28.57% of the surveyed farms. These are the first results based on Brazilian strains of bovine coronavirus and contribute to molecular characterization of BCoV, to the prediction of the efficiency of immunogens and to the finding of molecular markers useful to continued epidemiologic surveys on newborn bovine diarrhea.