Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-07-10T22:49:41Z No. of bitstreams: 1 472135 - Texto Completo.pdf: 929985 bytes, checksum: 28553b1c8275c157e5128080cce87fe9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-10T22:49:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 472135 - Texto Completo.pdf: 929985 bytes, checksum: 28553b1c8275c157e5128080cce87fe9 (MD5) Previous issue date: 2015-02-04 / The Cortical dysplasia is one of the most frequent forms of malformations of cortical development, with a condition that causes a large portion of refractory partial epilepsy to drug treatment. This condition is characterized by a heterogeneous group of cortical lesions and can also be described as cortical dysgenesis or neuronal migration disorder. The genetic factors involved in cortical dysplasia, such as the expression of the telomerase enzyme, are not commonly investigated, mainly due to the limited number of cases is the lack of an experimental model. Objective: This study aimed to analyze the activity and the expression of the enzyme telomerase in patients with cortical dysplasia of Taylor, normal fibroblasts, stem cells from umbilical cord tissue and human tumor. Methodology: the activity and expression of hTERT portion of telomerase were evaluated in patient fibroblasts with Cortical Dysplasia of Taylor (n = 1) and compared with control patients fibroblasts (n = 3) and umbilical cord stem cells (n = 3) and human tumor cell line A549 were maintained in culture. The analysis of the hTERT gene was done by PCR and the telomerase activity was measured by TRAP assay that uses real-time PCR. Results: telomerase activity was higher in tumor cells (Ct = 28.32), while in other cell types and other types studied values were similar: control (Ct = 33.73) Umbilical Cord (Ct = 32.88) and dysplasia (Ct = 33.56). The expression of hTERT portion of telomerase was the control group was 2,58x more expressed, the Dysplasia and tumor groups were 61,25x and 635,48x more expressed respectively as the control. Conclusion: The telomerase appeared to be more active and higher expression in the tumor cell line when compared to other cell types surveyed. The hTERT gene was more expressed in the patient Taylor cortical dysplasia than in the other groups and control umbilical cord indicating that telomerase is expressed in most patients with this disease. / A Displasia Cortical ? uma das formas mais frequentes de malforma??es do desenvolvimento cortical, sendo uma patologia que causa uma grande parcela de epilepsias parciais refrat?rias ao tratamento medicamentoso. Essa patologia ? caracterizada por um grupo heterog?nio de les?es corticais, podendo tamb?m ser descrita como disgenesia cortical ou desordem de migra??o neuronal. Os aspectos gen?ticos envolvidos na displasia cortical, como a express?o da enzima telomerase, n?o s?o comumente investigados, principalmente devido ao n?mero limitados de casos e a pela falta de um modelo experimental. Objetivo: este estudo teve como objetivo analisar a atividade e a express?o da enzima telomerase em pacientes com displasia cortical de Taylor, fibroblastos normais, c?lulas-tronco de tecido de cord?o umbilical e linhagem tumoral humana. Metodologia: a atividade e express?o da por??o hTERT da telomerase foram avaliadas em fibroblastos de paciente com Displasia Cortical de Taylor (n=1) e comparada com fibroblastos de pacientes do grupo controle (n=3) e c?lulas-tronco de cord?o umbilical (n=3) e a linhagem tumoral A549 humanos que foram mantidas em cultura. A an?lise do gene hTERT foi feita por PCR e a atividade da telomerase foi medida pelo ensaio TRAP que utiliza a PCR em tempo real. Resultados: a atividade da telomerase foi maior nas c?lulas tumorais (Ct=28,32), ao passo que nos demais tipos celulares e nos demais tipos estudados os valores foram semelhantes: Controle (Ct=33,73) Cord?o Umbilical (Ct=32,88) e Displasia (Ct=33,56). A express?o da por??o hTERT da telomerase foi do grupo Controle foi 2,58x mais expresso, os grupos Dsiplasia e Tumor estavam 61,25x e 635,48x mais expressos, respectivamente que o Controle. Conclus?o: a telomerase se mostrou mais ativa e com maior express?o na linhagem tumoral do que quando comparada com os outros tipos celulares pesquisados. O gene hTERT e mostrou mais expresso, no paciente com Displasia Cortical de Taylor do que nos outros grupos Controle e Cord?o Umbilical, indicando que a telomerase ? mais expressa em pacientes com esta patologia.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 409851.pdf: 2435075 bytes, checksum: 483573dacd4f6b92b9892d200b25faea (MD5) Previous issue date: 2009-01-12 / Objetivo: Analisar a associa??o entre corioamnionite histol?gica e fun??o pulmonar em RNs pr?-termo nos primeiros meses de vida. Tipo de estudo: Estudo de coorte prospectivo Pacientes e M?todos: Foram recrutados rec?m-nascidos pr?-termo (<37 semanas de idade gestacional). Placenta e membranas foram coletadas ao nascimento e avaliadas para corioamnionite histol?gica. Os testes de fun??o pulmonar foram realizados nos primeiros meses de vida, atrav?s da T?cnica da Compress?o Tor?cica R?pida. Resultados: Cento e setenta e um RNs pr?-termo foram inclu?dos no estudo. Placenta e membranas foram coletadas em 161 pacientes. Noventa e seis pacientes foram avaliados para corioamnionite histol?gia e realizaram o teste de fun??o pulmonar. Encontramos uma associa??o sigificativa entre corioamnionite e DBP (Qui-quadrado 6.708, p=0.005) e ventila??o mec?nica (Qui-quadrado 4.414, p=0.027). Os lactentes pr?-temo apresentaram redu??o significativa nos fluxos expirat?rios for?ados, com volumes pulmonares normais. O sexo masculino e a prematuridade estiveram significativamente associados ? redu??o de fluxos expirat?rios. Corioamnionite histol?gica foi significativamente associada a fluxos expirat?rios reduzidos nos pr?-termos do sexo feminino (p<0.05 para FEF50, FEF75, FEF25-75 e VEF0.5). Conclus?es: Encontramos um aumento significativo de DBP nos RNs pr?-termo expostos ? corioamnionite. Al?m disso, nossos dados sugerem uma redu??o nos fluxos expirat?rios m?ximos em pr?-termos femininos expostos ? corioamnionite, efeito esse n?o observado no sexo masculino. Estes resultados sugerem um efeito seletivo negativo de inflama??o no desenvolvimento pulmonar em RNs pr?-termo do sexo feminino. Este estudo confirma, em parte, as associa??es previamente descritas entre corioamnionite e DBP

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 438475.pdf: 1199552 bytes, checksum: 11115a2a9f4a42a185a775b4a566fe5b (MD5) Previous issue date: 2012-03-02 / ADULT (acro-dermato-ungueal-tooth) is a human genetic syndrome that manifests clinically by skin and embryonic appendages anomalies. This syndrome pathogenesis was first identified in 2001, but nowadays it is related to more than one mutation in p63 gene. Although described almost 20 years ago (1993) in Germany, this syndrome still have few reports and this is the first brazilian family. We report here the clinical aspects of five members of a family which clinical features corresponded to phenotypic ADULT manifestations. The clinical aspects included athelia/hypotelia, photosensitivity, dystophic nails, tooth anomalies and lacrimal duct obstruction. The adermatoglyphia, manifestation found in all affected members of this family, was not described before. The histologic examination demonstrated flattening of dermal papillae and electron microsopy showed disrupted collagen fibers. The genetic sequencing of blood ssample found a mutation in p63 gene, already known as R298Q. / A ADULT (acro-dermato-ungueal-lacrimal-tooth) ? uma s?ndrome gen?tica humana que se manifesta clinicamente por altera??es cut?neas e do desenvolvimento dos ap?ndices embrion?rios. Sua etiologia foi identificada inicialmente em 2001, mas atualmente sabe-se que est? relacionada a mais de uma muta??o no gene p63. Apesar de descrita pela primeira vez h? quase duas d?cadas (1993) na Alemanha, a s?ndrome ainda ? pouco reportada e esta ? a primeira fam?lia brasileira descrita. Neste trabalho descrevemos os aspectos cl?nicos de cinco indiv?duos de uma mesma fam?lia, os quais apresentavam manifesta??es fenot?picas compat?veis com a s?ndrome ADULT. Os achados cl?nicos incluem atelia/hipotelia, fotossensibilidade, distrofia ungueal, anormalidades dent?rias e obstru??o do ducto lacrimal. A adermatoglifia, manifesta??o cl?nica demonstrada em todos os acometidos desta fam?lia, n?o fora descrita anteriormente nos portadores da s?ndrome. A avalia??o histol?gica por microscopia ?ptica evidenciou retifica??o das papilas d?rmicas e a an?lise por microscopia eletr?nica mostrou altera??o nas fibras col?genas da derme. O sequenciamento gen?tico atrav?s de amostras de sangue perif?rico identificou uma muta??o no gene p63, previamente conhecida como R298Q.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-06-22T19:22:17Z No. of bitstreams: 1 TES_DANIEL_RODRIGO_MARINOWIC_COMPLETO.pdf: 16202491 bytes, checksum: 5bb7aaf0de3a700a163c7437ecf2adef (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-22T19:22:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_DANIEL_RODRIGO_MARINOWIC_COMPLETO.pdf: 16202491 bytes, checksum: 5bb7aaf0de3a700a163c7437ecf2adef (MD5) Previous issue date: 2016-03-03 / Changes in the cerebral cortex development are presented as a group of distinct defects with a not well-defined pathogenesis. The focal cortical dysplasia (FCD) is one of the most frequent form of cortical development malformation, that encompasses multiple types of changes both in the cortical architecture and cytological abnormalities. It is an underlying pathology of a significant proportion of partial epilepsy refractory to drug treatment. Especially the limited number of cases and the lack of suitable experimental models rarely document the mechanisms involved with the genesis of FCD. The scarse predictive preclinical models that can be used to study the pathophysiology and to translate the therapeutic discovery from animal models to human use, strengthens the need to study the brain development from cells originated from patients that harbor these central nervous systems diseases. The generation of iPSC cells and the differentiation into specific cells and tissues will provide important testing and an unique ability to study the development and progress of CNS diseases. The objective of this study was to establish a cellular model of focal cortical dysplasia through the generation of induced pluripotent stem cells (iPSC) from fibroblasts derived from affected patients. Human fibroblasts were obtained from skin biopsies from two patients and cultured up to the fifth passage. Immunofluorescence analysis of AKT/mTOR signaling pathways was performed in the dysplastic brain tissue. iPSC cells were generated from fibroblasts through transfection with a viral vector containing the genes OCT4, KLF4, SOX2, and C-MYC and characterized by immunohistochemistry. Cell migration co-cultured with fibroblast and iPSC was investigated. Morphological and molecular characterization of neurodifferentiated iPSC were performed by immunohistochemistry and PI3K/ATK/mTOR signaling pathway analysis. Both patients were diagnosed with FCD type IIb. The AKT and mTOR phosphorylated and non-phosphorylated was higher in brain sections from patient 01. iPSC clones from patients and controls were generated from skin fibroblasts. Both iPSC from patients and controls showed polarization and morphology similar to nerve cells. In the cell migration assay, fibroblasts derived from FCD migrate with greater intensity within 24 hours (p<0,0001) and 48 hours (p<0,001), and iPSC cells did not present difference in cell migration. During neurodifferentiation, iPSC cells from patients with FCD showed lower values of 4EBP-1, ?-catenin, CIAP-1, CIAP-2 and PI3K, and higher values of MCL 1 gene expression. Changes in cell migration in adult tissue, uncontrolled cell proliferation, cell adhesion protein deficiency, and alterations in the expression of genes responsible for apoptosis and PI3K pathway that are implicated with an complete and well successful CNS formation. Alterations in some of these were detected in cells and iPSC from patients with FCD and may be related to the ethiopathology of the disease. / As altera??es do desenvolvimento do c?rtex cerebral apresentam-se como um grupo de malforma??es com uma distin??o e patog?nse ainda n?o bem definidas. A displasia cortical focal (DCF) ? uma das formas mais frequentes de malforma??es do desenvolvimento cortical, sendo a patologia subjacente a uma parcela significativa de epilepsias parciais refrat?rias ao tratamento medicamentoso. A displasia cortical focal engloba m?ltiplos tipos de altera??es tanto na arquitetura cortical quanto em anormalidades citol?gicas. Palmini e colaboradores classificaram as displasias corticais focais de acordo com observa??es na subst?ncia branca e na arquitetura da camada cortical. Os mecanismos envolvidos na g?nese da DCF s?o pouco investigados, principalmente pelo n?mero limitado de casos e a falta de modelos experimentais adequados e suas causas provavelmente est?o relacionadas a muta??es som?ticas. A falta de modelos pr?-cl?nicos preditivos que possam ser utilizados no estudo da fisiopatologia e o hist?rico enfraquecido quando se trata em traduzir a descoberta terap?utica de modelos animais para o uso humano, fortalece a necessidade de estudar o desenvolvimento cerebral a partir de c?lulas originadas do pr?prio paciente. A gera??o de c?lulas iPSC e diferencia??o tecidual espec?fica de c?lulas de pacientes acometidos por doen?as neurol?gicas relevantes possui um valor inestim?vel para a realiza??o de testes al?m de fornecerem uma capacidade adicional e ?nica para estudar o desenvolvimento inicial e a progress?o das patologias associadas ao SNC. O objetivo do presente trabalho ? estabelecer um modelo celular de Displasia Cortical Focal atrav?s da gera??o de c?lulas-tronco pluripotentes induzidas (iPSC) a partir de fibroblastos de pacientes afetados. Fibroblastos humanos foram obtidos de bi?psias de pele de dois pacientes com DCF e foram cultivados at? a quinta passagem. Foi realizada an?lise imunopatol?gica e das vias de sinaliza??o AKT/mTOR no tecido cerebral displ?sico. C?lulas iPSC foram geradas a partir dos fibroblastos atrav?s da exposi??o a vetores virais contendo os genes OCT4, KLF4, SOX2, e C-MYC e caracterizadas por imunohistoqu?mica. Foi realizado ensaio de migra??o celular dos fibroblastos (24h, 48h e 72h) e das iPSC (3 dias e 7 dias). As c?lulas iPSC foram neurodiferenciadas e analisadas nos per?odos de 14 dias, 22 dias e 35 dias. Nesses per?odos, foram realizadas an?lises morfol?gicas, imunohistoqu?mica (polariza??o) e moleculares (genes relacionados a via PI3K/ATK/mTOR). Ambos os pacientes foram diagnosticados com DCF tipo IIb. O paciente 01 apresentou valores maiores que o paciente 02 em rela??o ? ?rea marcada das vias AKT e mTOR, tanto na via fosforilada como n?o fosforilada no tecido cerebral, com diferen?as estatisticamente significativas. Clones iPSC dos pacientes e controles foram gerados e caracterizados a partir dos fibroblastos de pele. Tanto as iPSC dos pacientes quanto do controle apresentaram morfologia e polariza??o semelhante a c?lulas nervosas ap?s protocolo de neurodiferencia??o. No ensaio de migra??o celular, fibroblastos com DCF migraram com mais intensidade em 24 horas (p<0,0001) e 48 horas (p<0,001). As c?lulas iPSC n?o apresentaram diferen?a no potencial de migra??o celular nos per?odos analisados. Durante o protocolo de neurodiferencia??o, as c?lulas iPSC dos pacientes com DCF apresentaram valores menores de express?o dos genes 4EBP-1, ?-Catenina, CIAP-1, CIAP-2 e PI3K, e valores mais elevados da express?o de MCL 1. Altera??es na migra??o celular no tecido adulto e em processos como de prolifera??o celular acentuada, defici?ncia de prote?na de ades?o celular, altera??o na express?o de genes respons?veis pelo controle de apoptose e altera??o na via PI3K respons?vel no sistema nervoso central pela sobreviv?ncia celular, controle de apoptose, migra??o neuronal, desenvolvimento morfol?gico dos neur?nios e forma??o das neurotransmiss?es, puderam ser evidenciadas nas c?lulas dos pacientes com DCF em rela??o aos pacientes controle e podem estar relacionadas com a forma??o do c?rebro com displasia.

Displasia ectodérmica hipoidrótica é uma doença genética rara, clinicamente caracterizada por alterações envolvendo os dentes, pele e suas estruturas anexas. Manifestações orais comuns incluem anadontia ou oligodontia, dentes conóides e xerostomia. Poucos relatos associam displasia ectodérmica e redução do fluxo salivar. O objetivo desse estudo é analisar possíveis alterações nas glândulas salivares de dez portadores de displasia ectodérmica que fazem acompanhamento no Departamento de Dermatologia Pediátrica da Universidade de São Paulo. Ultrassonografia foi realizada em dez casos em infantes portadores de displasia ectodérmica hipoidrótica nas suas glândulas salivares parótida e submandibular. Três apresentaram alterações na glândula parótida e/ou submandibular. Aplasia ou hipoplasia das glândulas salivares maiores é associada a casos de displasia ectodérmica e sugere-se acompanhamento rotineiro das glândulas salivares maiores usando ultrassonografia para prevenção de alterações decorrentes da hiposalivação na cavidade oral. / Background- Hypohidrotic ectodermal dysplasia is a rare genetic disease, clinically characterized by defects involving skin and their adnexal structures, as well as oral structures such as teeth, and occasionally salivary glands. These latter manifestations include anodontia or hypodontia, conical teeth and xerostomia. Objective- To analyze possible alterations in major salivary glands of ten patients with ectodermal dysplasia, using image exam. Methods- Ultrasonography was performed in ten pediatric cases of hypohidrotic ectodermal dysplasia to investigate the status of parotid and submandibular salivary gland. Results- Three patients presented aplasia/hypoplasia of at least one gland examined. The other 7 patients did not present any alterations in parotid and submandibular glands. Limitations- Although ultrasonography exam is adequate to investigate the presence and status of major salivary glands, other important glands such as sublingual and minor mucous salivary glands are not well-visualized using this technique. Conclusions- Aplasia or hypoplasia of the major salivary gland is strongly related to ectodermal dysplasia and we suggest routine evaluation of the major salivary gland using ultrasound to monitor and manage the possible impact of xerostomia in oral health.

Um dos objetivos da pesquisa científica, atualmente, é encontrar biomarcadores que possam auxiliar na definição da probabilidade de progressão das lesões orais displásicas, e ainda sejam capazes de identificar os principais agentes moleculares envolvidos na carcinogênese de um determinado tipo de tumor. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar a expressão de &#x3B2;-catenina, ciclina D1 e Ki-67 em 15 espécimes de epitélio oral normal, 45 queilites actínicas displásicas e em 30 carcinomas espinocelulares de lábio. Essa amostra foi constituída por pacientes tratados na Faculdade de Medicina de Botucatu (Brasil) e no Hospital Clínico San Cecílio de Granada (Espanha). O grau de displasia epitelial e de diferenciação tumoral foi classificado com base nos critérios definidos pela Organização Mundial da Saúde. A avaliação dos biomarcadores foi realizada por meio da técnica imunohistoquímica, dividindo a espessura do epitélio em quatro compartimentos (basal, suprabasal, terço médio e terço superior) para o grupo controle e para as queilites actínicas e em três compartimentos (basal, suprabasal e região interna) para o grupo dos carcinomas espinocelulares de lábio. Para a comparação da média de expressão de cada marcador, nas diferentes localizações do epitélio foi utilizado o teste estatístico de Kruskal-Wallis. Para a correlação da expressão dos três marcadores entre os grupos foi utilizada a correlação de Spearman, com nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram uma perda discreta da expressão membranosa de &#x3B2;-catenina na camada basal das queilites actínicas com displasia epitelial intensa (Cis) e nos carcinomas espinocelulares de lábio, assim como uma expressão citoplasmática e nuclear, discreta e diretamente proporcional à desorganização epitelial nas camadas basal e suprabasal das queilites actínicas e carcinomas espinocelulares de lábio. Notou-se também um aumento da expressão de ciclina D1 e Ki-67 na camada basal à medida que aumentava a desorganização epitelial. Houve uma associação estatisticamente significativa da expressão de ciclina D1 e Ki-67 na camada suprabasal do grupo controle (p=0,030) e das queilites actínicas (p=0,001) e ainda na região interna dos carcinomas espinocelulares de lábio (p=0,000). Não houve correlação significativa entre as expressões nucleares de ß-catenina e de ciclina D1. Nossos resultados reforçam que a &#x3B2;-catenina, a ciclina D1 e o Ki-67, podem ser utilizados como biomarcadores preditivos para o câncer de lábio. Além disso, sugerem que a &#x3B2;-catenina e a ciclina D1 participam da carcinogênese labial, em eventos independentes da via de sinalização/Wnt. / One of the goals of scientific research today is to find predictive biomarkers that can help define the probability of progression of dysplastic oral lesions, and are still able to identify key molecular agents involved in the carcinogenesis of a particular type of tumor. The objective of this study was to investigate &#x3B2;-catenin, cyclin D1 and Ki-67 expression in 15 specimens of normal oral epithelium, 45 dysplastic actinic cheilitis and 30 squamous cell carcinoma of the lip. This sample consisted of patients treated at the Botucatu Medicine School (Brazil) and the Clinical Hospital San Cecilio of Granada (Spain). The degree of epithelial dysplasia and tumor differentiation was classified based on the criteria defined by the World Health Organization. The evaluation of biomarkers was performed by immunohistochemical technique, dividing the thickness of the epithelium into four compartments (basal, suprabasal, middle third and upper third) for the control group and actinic cheilitis and three compartments (basal, suprabasal and inner region) to the group of squamous cell carcinoma of the lip. For comparing the average expression of each marker in different locations of the epithelium we used the statistical test of Kruskal-Wallis. For the correlation of the three markers expression between the groups was used Spearman, with 5% significance level. The results showed a slight loss of membranous expression of &#x3B2;-catenin in the basal layer of actinic cheilitis with severe epithelial dysplasia (Cis) and squamous cell carcinoma of the lip, and a cytoplasmic and nuclear expression, slight and directly proportional to the epithelial disorganization in layers basal and suprabasal of actinic cheilitis and squamous cell carcinoma of the lip. It was also noted an increase in expression of cyclin D1 and Ki-67 in the basal layer as increased epithelial disorganization. There was a statistically significant association of cyclin expression D1 and Ki-67 in the suprabasal layer of the control group (p=0.030) and actinic cheilitis (p=0.001) and also in the inner region of squamous cell carcinoma of the lip (p=0.000). There was no significant correlation between the nuclear expression of ß-catenin and cyclin D1. Our results emphasize that &#x3B2;-catenin, cyclin D1 and Ki-67 can be used as predictive biomarkers for lip cancer. Moreover, they suggest that &#x3B2;-catenin and cyclin D1 acts on the lip carcinogenesis, in independent events signaling pathway/Wnt.

INTRODUÇÃO: A lesão pulmonar da nova displasia broncopulmonar se caracteriza por uma diminuição da septação alveolar e do desenvolvimento vascular, ocorre um bloqueio no desenvolvimento pulmonar e consequentemente uma diminuição da alveolarização. A lesão pulmonar ocorre devido à associação de diversos fatores, incluindo a prematuridade, defesas antioxidantes inadequadas, e a ativação da resposta inflamatória. A exposição prolongada ao oxigênio também resulta em anormalidades na formação e na morfologia dos alvéolos, com redução tanto do volume pulmonar como da área de superfície interna alveolar. O objetivo do presente estudo foi comparar dois modelos de indução de lesão pulmonar através da exposição à hiperoxia prolongada em coelhos. MÉTODOS: Coelhas grávidas da raça New-Zealand-White foram sedadas para realização do parto cesáreo no 28º dia de gestação (termo = 31dias), coelhos prematuros foram expostos ao ar ambiente ou FiO295%. Outro grupo nasceu no 29º dia de gestação e foi exposto ao ar ambiente ou a uma FiO2=80%. Os animais foram mantidos em incubadora com controle de temperatura e alimentação e uma fórmula especial de leite similar ao leite de coelha por 11 dias. Desta forma, foram constituídos quatro grupos de estudo: Ar ambiente com 28 dias de gestação (Ar 28); exposição ao oxigênio (FiO2 95%) com 28 dias de gestação (O2 28); ar ambiente com 29 dias de gestação (Ar 29); exposição ao oxigênio (FiO2 = 80%) com 29 dias de gestação (O2 29). Após o sacrifício os pulmões foram fixados com 30 cmH2O de pressão transtraqueal. As lâminas do tecido pulmonar foram submetidas às seguintes colorações: hematoxilina e eosina para análise morfométrica; Weigert, resorcina-orceína modificado para a análise das fibras elásticas e Picrosirius para análise do colágeno. Foi realizada a contagem do Intercepto Linear Médio (Lm), determinada a Área de Superfície Interna (ISA), o número de alvéolos por campo microscópico, o espessamento septal e a proporção de fibras elásticas e colágenas. Análise Estatística: As variáveis contínuas foram analisadas por ANOVA One Way e a análise da sobrevida foi realizada através de uma curva de Kaplan-Meyer. O nível de significância adotado foi de 0.05. RESULTADOS: A sobrevida nos grupos de 29 dias foi melhor quando comparados com o grupo 28 dias. A hiperoxia bloqueou o desenvolvimento normal do pulmão, demonstrado por um aumento no Lm, uma diminuição significativa na ISA, uma diminuição no número de alvéolos, um aumento na espessura do septo interalveolar e também um aumento na proporção de fibras elásticas e uma diminuição na proporção de fibras colágenas nos dois grupos de animais expostos ao oxigênio em relação aos grupos que permaneceram em ar ambiente. CONCLUSÕES: Em coelhos prematuros o uso de uma concentração de oxigênio menor e um dia a mais de gestação reduziu a taxa de mortalidade mantendo os achados histopatológicos compatíveis aos da displasia broncopulmonar em humanos / INTRODUCTION: The lung injury of the \"new\" bronchopulmonary dysplasia is characterized by a decrease in alveolar septation and vascular development, resulting in a pulmonary arrest and a decrease in alveolarization. Lung damage occurs due to the association of many factors, including prematurity, inadequate antioxidant defenses and activation of the inflammatory response. Prolonged exposure to oxygen also results in abnormalities in the formation and morphology of the alveoli, with reduced lung volume and alveolar internal surface area. The aim of this study was to compare two models of lung injury induced by prolonged exposure to hyperoxia in rabbits. METHODS: New Zealand-White pregnant rabbits were sedated to perform a cesarean section on day 28 of gestation (term = 31days), premature rabbits were exposed to room air or FiO295%. Another group of animals was born at day 29 of gestation and was exposed to room air or FiO2=80%. The animals were kept in an incubator with temperature control and fed with a special milk formula similar to rabbit milk for 11 days. Four study groups were formed: Room air and 28 days of gestation (Air 28); exposure to oxygen (FiO295%) and 28 days of gestation (O2 28); room air and 29 days of gestation (Air 29 ); exposure to oxygen (FiO2=80%) and 29 days of gestation (O2 29). For microscopic evaluation, after sacrifice the lungs were fixed in situ at a constant inflation pressure of 30 cm H20. Lung slices were processed for hematoxylin-eosin staining - for morphometric analysis, Weigert\'s resorcin-orcein modified for the analysis of elastic fibers and Picrosirius - for analysis of collagen. The mean linear intercept (Lm), the internal surface area (ISA), the number of alveoli, the septal thickness and the proportion of elastic and collagen fibers were quantified. Statistical analysis was by One Way ANOVA for continuous variables, survival analysis was performed using a Kaplan-Meyer plot. The level of significance was 0.05. RESULTS: Survival in both 29 days groups was better when compared with 28 days groups. Hyperoxia impaired the normal development of the lung, demonstrated by an increase in Lm, a significant decrease in ISA, a decrease in the alveoli number, an increase in the septal thickness and an increase in the proportion of fibers elastic and a decrease in the proportion of collagen fibers in oxygen exposed animals. CONCLUSIONS: In premature rabbits using a lower concentration of oxygen and one more day of gestation reduced the mortality rate maintaining the histopathological findings similar to bronchopulmonary dysplasia in humans

Submitted by Cristiane Chim (cristiane.chim@ucpel.edu.br) on 2018-05-21T12:08:38Z No. of bitstreams: 1 Renan Brabosa.pdf: 1060823 bytes, checksum: fc955ead19a6d7919dd5e205508e4971 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-21T12:08:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renan Brabosa.pdf: 1060823 bytes, checksum: fc955ead19a6d7919dd5e205508e4971 (MD5) Previous issue date: 2017-11-07 / Developmental dysplasia of the hip (DDH) is one of the main causes in early degeneration of the hip joint, which causes pain, gait alteration, funcional and labor incapacity in the young adult, often leading to total arthhroplasty of hip. It is know that with early diagnosis, in the first months of life, a succes rate of about ninety percent is achieved with the use of the Pavlik suspender. The study estimated the prevalence of DDH in newborns(NB) from Pelotas city. For the accomplishment of the study was carried out the revision of the medical records of DDH carriers in the period from January 2014 to December 2016 and the data of Information System on Live Births (SINASC), of the same period was used. We observed 33 patients with DDH, 2.3 cases per 1000 live births, the following characteristics were evaluated: gender, color, maternal age, birth order, gestational age, fetal position, family history, affected side, birthweight and associated malformations. The variables: gender, color, maternal age, gestational age, birthweight and fetal presentation were analyzed in relation to SINASC, and gender (female) and pelvic presentation had a significant association with DDH. It is recommended that ultrasound should be perfomed in all NB who presented one or more of the following characteristics: positive Ortolani, family history and pelvic presentation. / A displasia do desenvolvimento do quadril (DDQ) é uma das principais causas de degeneração precoce da articulação coxo femoral, o que ocasiona dor, alteração da marcha, incapacidade funcional e laboral no adulto jovem, levando, muitas vezes, à realização de artroplastia total de quadril. Sabe-se que, com o diagnóstico precoce, nos primeiros meses de vida, consegue-se um índice de sucesso de cerca de noventa por cento com o uso do suspensório de Pavlik. O estudo estimou a prevalência de DDQ nos recém-nascidos (RN) da cidade de Pelotas. Para realização do estudo foi feita revisão dos prontuários de RN portadores de DDQ no período de janeiro de 2014 a dezembro de 2016 e utilizou os dados do Sistema de Informações Sobre Nascidos Vivos, do mesmo período. Observou-se 33 portadores de DDQ, 2,3 casos por 1000 nascidos vivos. Foram avaliadas as seguintes características: sexo, cor, idade materna, ordem de nascimento, idade gestacional, posição fetal, história familiar, lado acometido, peso ao nascer e malformações associadas. As variáveis: sexo, cor, idade materna, idade gestacional, peso do RN e tipo de apresentação fetal foram analisadas em relação ao SINASC, sendo que sexo (feminino) e apresentação pélvica apresentaram associação significativa com DDQ. Vinte e uma crianças necessitaram tratamento imediato dos quadris. Recomenda-se a realização do ultrassom em todos os RN que apresentem uma ou mais das seguintes características: Ortolani positivo, história familiar e apresentação pélvica.

As displasias corticais focais constituem um grupo de malformações do desenvolvimento cortical cerebral. São consideradas a causa mais comum de epilepsia refratária na população pediátrica. A hemimegalencefalia faz parte deste grupo de malformação do desenvolvimento cortical e clinicamente devastadora em crianças, caracterizada pelo crescimento distorcido e anormal de um hemisfério cerebral. O mTOR (Mammalian Target of Rapamycin) é uma proteína quinase, que normalmente funciona como um regulador central de importantes funções fisiológicas, incluindo o crescimento e proliferação celular, metabolismo, autofagia, e sobrevivência e morte celular. O objetivo deste estudo foi identificar o defeito genético específico da hemimegalencefalia analisando os genes das vias de sinalização do mTOR. Foram selecionados 10 pacientes diagnosticados com hemimegalencefalia com faixa etária entre 0 á 18 anos de idade. Os pacientes submetidos ao procedimento cirúrgico foram designados para a coleta do material biológico (sangue e tecido encefálico) para análise genômica. Foram encontradas variantes somáticas de três genes relacionados a via mTOR com alto índice de patogenicidade, sendo elas; mutações missense na MTOR, HME 6584 (c.7255G> A, p.Glu2419Lys), HME 4146 (c.7498A> T, p.L7105f) mutações missense do gene PIK3CA, HME 4149 E542K (c.1624G> A), HME 4143 (c.1258T> C, p.C420R). A hipótese mediante esses resultados é que a mutação somática de genes que estão presentes na via mTOR podem ser uma das causas genéticas da HME. Essas observações sugeriram que a HME representa um espectro de distúrbios do neurodesenvolvimento resultando de distintas progenitoras que são determinados pelo tempo em que a mutação ocorreu durante o desenvolvimento cerebral. Pode-se esperar que uma mutação que ocorre precocemente durante o desenvolvimento afete um grande número de células e resulte em uma malformação maior, ao passo que a mesma mutação ocorrendo mais tarde no desenvolvimento poderia causar uma menor malformação. No futuro, numerosas mutações somáticas em genes conhecidos ou novos serão, sem dúvida, reveladas em amostras de cérebros ressecados e assim, possíveis correlações entre genótipos e fenótipos podem emergir, permitindo que o diagnóstico clínico genético ajude a prever o desfecho do paciente / Focal cortical dysplasias constitute a group of malformations of cerebral cortical development. They are considered the most common cause of refractory epilepsy in the pediatric population. Hemimegalencephaly is part of this group of malformation of cortical development and clinically devastating in children, characterized by the distorted and abnormal growth of a cerebral hemisphere. MTOR (Mammalian Target of Rapamycin) is a protein kinase, which normally functions as a central regulator of important physiological functions, including cell growth and proliferation, metabolism, autophagy, and cell death and survival. The aim of this study was to identify the specific genetic defect of hemimegalencephaly by analyzing the genes of the mTOR signaling pathways. Ten patients diagnosed with hemimegalencephaly with ages ranging from 0 to 18 years of age were selected. Patients submitted to the surgical procedure were assigned to the collection of biological material (blood and brain tissue) for genomic analysis. Somatic variants of three genes related to the mTOR pathway with high pathogenicity index were found; missense mutations in the MTOR, HME 6584 (c.7255G> A, p.Glu2419Lys), HME 4146 (c.7498A> T, p.Leu7105Phe) missense mutations of the PIK3CA gene, HME 4149 (c.1624G> A Glu542Lys), HME 4143 (c.1258 -> C, p.Cys420Arg). The hypothesis by these results is that the somatic mutation of genes that are present in the mTOR pathway may be one of the genetic causes of HME. These observations have suggested that HME represent a spectrum of neurodevelopmental disorders resulting from distinct progenitors that are determined by the time the mutation occurred during brain development. A mutation that occurs early in development may be expected to affect a large number of cells and result in a larger malformation, whereas the same mutation occurring later in development could cause a minor malformation. In the future, numerous somatic mutations in known or new genes will undoubtedly be revealed in samples of resected brains and thus, possible correlations between genotypes and phenotypes may emerge, allowing genetic clinical diagnosis to help predict the outcome of the patient

A displasia do cotovelo é considerada uma disfunção ou má formação da articulação umerorradioulnar com causas multifatoriais, é a causa mais comum de claudicação de membros torácicos em cães jovens e acomete principalmente cães de raças grandes e gigantes. As alterações da displasia do cotovelo incluem não união do processo ancôneo, fragmentação do processo coronóide medial, osteocondrose da tróclea umeral, incongruência articular e doença articular degenerativa. Esse estudo teve como objetivo apresentar de forma detalhada dados morfológicos e morfométricos da articulação umerorradioulnar de cães de raça definida avaliados por meio de exames clínicos, radiográficos e tomográficos. A amostra de cães dessa pesquisa constituiu-se de 44 cotovelos de cães com idades variadas. Realizou-se a comparação do desempenho de diferentes projeções radiográficas individualmente e sua análise comparativa com o exame tomográfico, mensuração da incongruência radioulnar ao exame tomográfico e posterior comparação à análise qualitativa ao exame radiográfico, cálculo do ângulo da incisura ulnar e sua comparação entre exames radiográfico e tomográfico e verificação da concordância entre avaliadores para as diferentes mensurações realizadas nos exames radiográfico e tomográfico. Para análise dessas informações, o coeficiente kappa, correlação interclasse e testes Fischer e McNemar foram realizados. Constatou-se que o desempenho individual de cada projeção radiográfica teve pobre concordância com o exame tomográfico sugerindo-se a realização de mais de duas projeções radiográficas; não houve concordância entre os três observadores para as mensurações do ângulo da incisura ulnar ao exame radiográfico e tomográfico. Porém houve boa/moderada concordância para mensuração da incongruência radioulnar no plano sagital entre os observadores. Concluiu-se que nenhuma das cinco incidências radiográficas foi superior à outras para análise radiográfica, uma vez que cada projeção apresentou melhor identificação de um compartimento do cotovelo; medidas ao exame tomográfico para incongruência radioulnar não apresentam reprodutibilidade no corte dorsal, no corte sagital apresentaram boa e moderada concordância entre os observadores e que a mensuração do ângulo da incisura ulnar não apresentou repetibilidade ao exame radiográfico e reprodutibilidade ao exame tomográfico. / Elbow dysplasia is considered a dysfunction or malformation of the elbow joint with multifactorial causes and is the most common cause of thoracic limb lameness in young dogs and mainly affecting large and giant breeds. Elbow dysplasia disease include ununited anconeal process, fragmented medial coronoid process, osteochondrosis of humeral trochlea, articular incongruity and degenerative joint disease. The aim of this study was to present detailed morphologic and morphometric aspects of the elbow joint in Labrador retriever and Australian shepherd dog in clinical and correlate with radiographic and tomographic (CT) exam. Interobserver variation for articular incongruity measurements by CT, comparative analysis in the radiographic exam, angle in ulnar notch and its comparative analysis between radiographic and tomographic agreement examination in 44 elbow of dogs with different ages were evaluated. The statistics analyses included the kappa coefficient and interclass correlation and Fischers test and McNemars test. It was evidenced that individual performance of each radiographic incidence had poor agreement with the tomographic exam, suggesting that the accomplishment of more than two radiograph views are needed. There was no agreement between the three evaluators in the ulnar notch angle at radiographic and tomographic exams. However, there was good/moderate agreement for articular incongruity measurement in the sagittal plane between evaluators. It was possible to conclude that none of the five radiographic incidences was better than the others for radiographic analysis because each incidence had a better identification of a particular elbow compartment; measurements at the tomographic exam to evaluate radioulnar incongruity had no reproductiveness in the dorsal plane, but in sagittal plan had a good/moderate agreement between observers and the angle in ulnar notch presented no repeatability at radiographic exam and no reproductiveness at tomographic exam.