Sabe-se que a criopreservação do sêmen provoca uma perda significativa na qualidade espermática. Apesar de diversos estudos visando à melhora na qualidade do sêmen pós-descongelamento, é de consenso geral que a gema de ovo apresenta uma significante capacidade em evitar as crio-injúrias. No entanto, a grande variação na sua composição, assim como o risco potencial para a contaminação do diluidor, caso certos contaminantes estejam no produto in natura, são empecilhos para sua utilização para a exportação do sêmen, assim como sua utilização em humanos. Deste modo, estudos visando substituir a gema de ovo por produtos quimicamente definidos e de origem não-animal, são de extrema importância. Neste contexto, a lecitina da soja, por possuir uma fração de lipoproteína de baixa densidade semelhante à encontrada na gema de ovo, pode ser uma alternativa interessante. O presente estudo visa comparar diluidores a base de lecitina de soja e aqueles contendo gema de ovo utilizados rotineiramente para a refrigeração e criopreservação do sêmen canino. Para isto, foi utilizado o sêmen de 12 cães adultos, que foi refrigerado e criopreservado em diluidores a base de gema de ovo (OVO) e a base de lecitina de soja (LEC) em diferentes concentrações (0,01; 0,05 e 0,1%) e apresentações (FP40, 8160 e Solec F). O sêmen foi avaliado após refrigeração (2, 24, 48, 72, 96 e 120 horas; Experimento 1) e após criopreservação (pós refrigeração, pós glicerolização e pós descongelação; Experimento 2) através da análise convencional do sêmen (i.e., motilidade - CASA) e funcionais (i.e., integridade de membrana - eosina/nigrosina; integridade de acrossomo - Fast Green / Rosa Bengala; atividade mitocondrial - 3´3 Diaminobenzidina; fragmentação do DNA - SCSA; susceptibilidade ao estresse oxidativo - substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico). Os resultados do Experimento 1 indicaram que, semelhante ao ovo, todas as lecitinas na concentração 0,01% foram capazes de manter a motilidade em torno de 50% por até 72 horas. Após 96 horas, o diluidor Solec F apresentou melhor resultado em relação ao ovo na atividade mitocondrial, e após 120 horas a concentração 0,01%, apresentou maior motilidade do que o ovo (30,00 ± 10,69; 8,33 ± 1,84, respectivamente). No sêmen criopreservado (Experimento 2), as menores concentrações de lecitina apresentaram resultados semelhantes ao ovo tanto na motilidade quanto na atividade mitocondrial. Os resultados indicam que a lecitina pode ser uma boa alternativa à gema de ovo para a refrigeração e criopreservação do sêmen canino. / Semen cryopreservation, an essential step on biotechnologies applied to reproduction, is known to induce significant loss on sperm quality. Despite several studies aiming to improve post-thaw quality, it is generally agreed that egg yolk is the most effective in protecting sperm against cryo-injuries. However, the considerable variation on egg yolk composition as well as the potential risk of disseminating diseases when used in natura, are obstacles to semen exportation as well as the use in human. Therefore, studies aiming to substitute the egg yolk for chemically defined components or animal free products are extremely important. In this context, soy lecithin, which contains a fraction of low density lipoprotein, appears to be an interesting alternative. Thus, the present study aims to compare semen extenders containing soy lecithin or egg yolk on dog semen cryopreservation and refrigeration. Towards this aim, semen of 12 adult dogs were be refrigerated and cryopreserved in Tris-Fructose-Citric acid extenders with egg yolk (OVO) or soy lecithin (LEC; in different concentrations - 0,01; 0,05; 0,1% and presentations - FP40; 8160; Solec F). Semen was evaluated after chilling (2, 24, 48, 72, 96 and 120 hours; Experiment 1) and after cryopreservation (post refrigeration, post-glycerolization, and post-thaw; Experiment 2) for routine semen analysis (e.g., motility, CASA) and functional tests (e.g., membrane integrity - eosin/nigrosin; acrosome integrity - fast green/Bengal rose; mitochondrial activity - 3´3 diaminobenzidine; DNA fragmentation - SCSA; susceptibility to oxidative stress - thiobarbituric acid reactive substances). Results were statistically analyzed using the SAS System for Windows. Results of experiment 1 indicate that, similar to the egg yolk, all types of lecithin used in the 0.01% concentration, were able to maintain sperm motility around 50% for 72 h. After 96 h, the extender containing the lecithin Solec F showed better results regarding mitochondrial activity when compared to the egg yolk. Furthermore, after 120 h, the same extender with the 0.01% concentration, showed higher motility when compared to the egg yolk (30.00 ± 10.69 and 8.33 ± 1.84%, respectively). On the other hand, for the cryopreserved samples (Experiment 2), lower concentrations of lecithin showed similar results for mitochondrial activity and motility when compared to the egg yolk. Results found in the present study indicate that soy lecithin may be a good alternative to substitute the egg yolk for both refrigeration and cryopreservation of dog semen.

O principal propósito da enxertia óssea é estimular a osteogênese, mas é útil que o enxerto apresente outras propriedades tais como a resistência mecânica, possibilidade de estocagem e de ser usado em diferentes quantidades. Nesta pesquisa nós estudamos algumas propriedades mecânicas e o desempenho biológico de uma amostra de enxerto ósseo homógeno quimicamente processado e esterilizado em óxido de etileno. Primeiramente, amostras cilíndricas de tal enxerto, foram ensaiadas mecanicamente em compressão. Em uma segunda instância, o enxerto foi implantado em cães adultos. Trinta animais foram divididos em dois grupos. No grupo I, dez cães receberam um bloco cilíndrico de osso homógeno quimicamente preparado que foi implantado num leito cilíndrico confeccionado na epífise distal do fêmur direito. Três semanas após, o mesmo animal foi submetido à mesma cirurgia, desta vez no fêmur esquerdo. Seis semanas após a primeira operação, o cão foi sacrificado. O grupo II consistiu de vinte cães que receberam um enxerto autógeno cilíndrico que foi obtido do fêmur esquerdo e implantado no fêmur direito, da mesma forma que no grupo I. Dez animais (subgrupo A) foram sacrificados três semanas após o implante e dez animais (subgrupo B) foram sacrificados seis semanas após o implante. Os animais foram acompanhados clinicamente, e a integração do enxerto foi avaliada com raio-x obtidos seis dias após a operação e imediatamente após o sacrifício. Nossos resultados mostraram que o osso tratado mostrou menores valores para a Tensão, Deformação, e Módulo de Elasticidade, no limite elástico, quando comparado com o osso fresco. Os estudos radiográficos mostraram boa integração do enxerto tratado, entretanto, com menor desempenho quando comparado com o enxerto autógeno. O enxerto homógeno processado quimicamente e esterilizado em óxido de etileno, pode ser usado, como alternativa para o enxerto autógeno, tanto na medicina veterinária, quanto na medicina humana. / The main purpose of bone grafting is to stimulate osteogenisis but, sometimes, it is useful that the graft present other properties such as mechanical resistance, stocking, and possibility of being used in different amounts. In this investigation we studied some mechanical properties and the biological performance of a kind of a homogenous graft chemically prepared and sterilized in ethylene oxide. Previously, cylindrical samples of such graft were tested mechanically in compression. In a second instance, the graft was implanted in mature dogs. Thirty adults animals were divided into two groups. In group I, ten dogs received a cylindrical block of homogenous chemically prepared bone that was implanted in a cylindrical hollow created in distal epiphysis of the right femur. Three weeks later the same animal was operated on and the same operation was performed on the left femur. Six weeks after the first operation the dog was killed. The group II consisted of twenty dogs that received a cylindrical autologous graft that was harvested from the left femur and implanted in the right femur, as performed for group I. Ten animals (subgroup A) were killed tree weeks after the grafting operation and ten animals (subgroups B) were killed six weeks later. The animals were followed-up clinically and the graft integration was evaluated with x-ray taken six days after the operation and before the sacrifice. Ours results showed that the treated bone displayed smaller values for the tension, deformation and modulus of elasticity at yielding point, when compared with the fresh bone. The radiographic studies showed good integration of the treated graft, although with less performance when compared with the autologous graft. Homogenous graft, chemically prepared and sterilized in ethylene oxide, can be used as substitute to autologous graft both in veterinary and human medicine.

A Diabetes mellitus em cães é cada vez mais frequente, decorrente de fatores genéticos e/ou ambientais, como um distúrbio endócrino que, de forma semelhante à que ocorre em humanos, falha no controle adequado de glicose no sangue, desencadeia a hiperglicemia, glicosúria e perda de peso. A terapia celular utilizando as células beta-pancreáticas tem sido alvo de estudos, devido à grande demanda de novos casos de Diabetes mellitus e à falta de órgãos para transplantes em humanos e animais. Acredita-se que a ciência possa responder e inovar em tratamentos, encontrando a possível cura para esta doença complexa. Portanto, o objetivo deste estudo foi obter e caracterizar células derivadas do pâncreas fetal canino de animais com idades compreendidas entre 50 e 60 dias de gestação. As células pancreáticas de fetos caninos apresentam morfologia fibroblastóide e crescimento em monocamada em cultivo, apresentam células pluripotentes e proliferativas, não são tumorigênicas e apresentam expressão de PDX1, um fator de transcrição que tem papel importante na ativação do gene promotor da insulina. O pâncreas possui inervação simpática, observado por fibras nervosas TH+. Histologicamente, o pâncreas fetal canino apresenta ácinos num estágio de organização avançado, com parênquima semelhante ao encontrado no cão adulto. As ilhotas pancreáticas são distribuídas no tecido de maneira irregular, organizando-se em pequenos aglomerados de células por entre os ácinos, especialmente próximas aos vasos sanguíneos. A coloração com Ditizona permitiu inferir a presença de insulina no tecido pancreático, o que foi comprovado mediante técnica de imunofluorescência, além da presença de células que expressam o hormônio somatostatina. Os resultados desta investigação indicam que o pâncreas fetal canino demonstra características favoráveis para ser uma fonte viável de células para estudos aplicados à terapia celular em cães. Outras investigações referentes à comprovação da produção de insulina in vitro por essas células se fazem necessárias / Diabetes mellitus in dogs is increasingly common, due to genetic and/or environmental factors such as an endocrine disorder, similarly to what occurs in humans, failure to adequately control blood glucose triggers hyperglycemia, glycosuria and weight loss. Cell therapy using the pancreatic beta cells has been the subject of studies, due to the great demand of new cases of diabetes mellitus and the lack of organs for transplants in humans and animals. It is believed that science can respond and innovate treatments, finding a possible cure for this disease complex. Therefore, the objective of this study was to obtain and characterize derived cells from canine fetal pancreas, of animals aged between 50 and 60 days of gestation. The pancreatic cells of canine fetuses exhibit fibroblastoid morphology and growth in monolayer culture, exhibit pluripotent and proliferative cells, are not tumorigenic and have PDX1 expression, a transcription factor that plays an important role in the activation of the insulin gene promoter. The pancreas has sympathetic innervation observed by TH+ nerve fibers. Histologically, the fetal pancreatic acini canine presents an advanced stage organization with similar parenchyma that found in adult dog. The pancreatic islets are distributed in the fabric unevenly, organizing themselves into small clusters of cells through the acini, especially close to the blood vessels. Staining with Dithizone allowed inferring the presence of insulin in the tissue, which was confirmed by immunofluorescence, in addition to cells that express somatostatin. The results of this investigation indicate that the canine fetal pancreas shows favorable characteristics to be a feasible source of cells for cell therapy applied to studies in dogs. Further investigation regarding the evidence of in vitro production of insulin by these cells are required

O presente trabalho teve como objetivo analisar a relação entre as características comportamentais apresentadas pelos cães nos centros de controle de zoonoses (CCZs) e o escore total do questionário proposto por Archer e Ireland (2011) que mede aspectos do vínculo entre seres humanos e cães., além de verificar a relação entre as características físicas e comportamentais dos animais e o tempo de permanência nos Centros de Controle de Zoonoses. Para tal, o trabalho foi realizado junto aos Centros de Controle de Zoonoses dos municípios de São Paulo e Guarulhos, utilizando os cães disponíveis para a adoção. Foram selecionados de maneira aleatória 165 animais. Todos os parâmetros físicos (obtidos através de observação direta e consultas de prontuários) e comportamentais (obtidos através de consultas de prontuários, questionários respondidos por funcionários e testes comportamentais) foram comparados com o escore total do questionário relacionado ao vínculo, utilizado de 58 a 68 dias após a adoção e com o tempo de permanência do animal no CCZ. Nenhum dos parâmetros comportamentais ou físicos apresentaram relação com o escore total obtido através do questionário. O tempo de permanência nos CCZs não apresentou correlação com nenhum desses parâmetros. Esse resultado indica que o tanto o score total do questionário como o tempo de permanência nos CCZs podem estar relacionados à outros fatores como a experiência prévia das pessoas que adotam. / The present work aimed to analyze the relationship between dogs behavioral characteristics exhibited in zoonosis control centers (CCZs) and the attachment of the families that adopted them, 58-68 days after the adoption. In addition, we investigated the relationship of length of stay at the CCZs with physical and behavioral characteristics of dogs. The work was done at the CCZs of São Paulo and Guarulhos cities (São Paulo state, Brazil) using 165 randomly selected dogs, available for adoption. Physical and behavioral parameters were obtained through direct observation, medical records, staff questionnaires and behavioral tests. The parameters were compared with the total score of a human-dog attachment questionnaire (ARCHER and IRELAND, 2011), and with the length of stay at the CCZ. None of the physical or behavioral parameters correlate with the questionnaire total score or with the length of stay. This result indicates that both the total score of the questionnaire and the length of stay in the CCZs may be related to other factors such as previous experience of adoptants.

O colapso traqueal é uma obstrução parcial ou total da traqueia caracterizado pelo achatamento dorsoventral dos anéis cartilaginosos e pela frouxidão da membrana traqueal dorsal. Acomete principalmente cães de raças pequenas, de meia idade a idosos, embora também possa ocorrer em cães jovens. O diagnóstico é feito com base nos sinais clínicos e exames complementares. A traqueobroncoscopia permite avaliar o diâmetro da traqueia e dos segmentos brônquicos, principalmente quando as radiografias e fluoroscopia não forem conclusivas e ainda permite a coleta de amostras para citologia, histopatologia e culturas. O objetivo deste estudo foi correlacionar a infecção traqueal com a inflamação da traqueia em cães com colapso de traqueia. A pesquisa foi realizada no HOVET da FMVZ-USP e no Hospital Veterinário Clinivet em Curitiba. A amostra foi constituída por 28 cães, sendo 12 com colapso de traqueia e 16 hígidos para o grupo controle, que propiciou parâmetros de normalidade em relação ao grupo colapso traqueal. Para a coleta de dados utilizou-se a traqueobroncoscopia, com a qual visualizamos a traqueia e graduamos o colapso, colhemos material para cultura bacteriana e citologia. Após a análise dos resultados foi observado diferença estatística significativa nos cães com inflamação e colapso de traqueia. Não foi observado correlação entre a infecção bacteriana e a inflamação na traqueia. Com um teste de dissimilaridade verificou-se que a população bacteriana da orofaringe foi semelhante a da traqueia nos cães do mesmo grupo. Portanto, concluímos que cães com colapso de traqueia tendem a ter a traqueia inflamada, porém não apresentam infecção bacteriana. A composição das bactérias na traqueia pode ser devido à aspiração do conteúdo da orofaringe. / The Tracheal collapse is a partial or total obstruction of the trachea, featured by dorsoventral flattening of the cartilaginous rings and by the laxity of the dorsal tracheal membrane. It mainly affects small breeds, middle-aged and older dogs, although it can also occur in young dogs. The diagnosis is made based on clinical signs and additional exams. The trachealbronchoscopy allows evaluating the trachea diameter and bronchial segments, especially when radiographic and fluoroscopy is not conclusive and still allows the collection of samples for cytology, histopathology and cultures. The objective of this study was correlating the tracheal infection with the tracheal inflammation in dogs with tracheal collapse. The research was conducted in the HOVET FMVZ-USP and Clinivet Veterinary Hospital in Curitiba. The sample consisted of 28 dogs, including 12 with collapsing trachea and 16 healthy subjects in the control group, which allowed normal parameters in relation to the group tracheal collapse. For data collection was used the trachealbronchoscopy, in which was visualized the trachea and the grade of the tracheal collapse was recorded. We also collected samples for cytology and bacterial culture. After analyzing the results we found statistically significant difference in dogs with tracheal collapse and inflammation of the trachea. There was no correlation between bacterial infection and inflammation in the trachea. With dissimilarity test was observed that the bacterial population of the pharynx was similar to the trachea in dogs of the same group. n this study, therefore, concluded that dogs with collapsing trachea tend to have the inflamed trachea, but it does not have bacterial infection. The composition of the bacteria in the trachea may be due to aspiration of pharynx\'s contents.

Existem diversos relatos anedóticos de casos de sucesso em terapia para crianças com autismo onde foi inserido um cão como co-terapeuta. Além destes relatos algumas poucas pesquisas apoiam a eficiência da Terapia Assistida por Animais (TAA) para melhorar habilidades sociais de pessoas com autismo. No entanto quais aspectos do comportamento do cão são responsáveis por este resultado, permanecem obscuros. A presente pesquisa é parte de um estudo que visou testar os benefícios da introdução de um cão na terapia com crianças autistas. Foram observadas as interações entre crianças com autismo severo (4 meninos e 2 meninas de 8-14 anos) e cães, durante a TAA estruturada com procedimento de operante-livres, com interesse na iniciativa de início e término de contato. Realizamos 20 sessões em blocos com e sem cão. Todas as sessões foram filmadas. Foram analisadas as filmagens da primeira e da última sessão com cão (sessão 7 e sessão 20) avaliando: a frequência de aproximação, o tempo perto (ao alcance do braço), o tempo longe, o contato físico, sorrisos e vocalizações. Usamos um índice desenvolvido pelo etólogo Robert Hinde: % Aproximação devida à Criança (ApC) - % de Afastamento devida à Criança (AfC). Os cães permaneceram perto das crianças durante a maior parte do tempo (81% na primeira sessão e 99% na última). Houve mudança de tolerância por parte das crianças que não se tornaram aproximadoras, mas menos afastadoras (%ApC - %AfC: -12% na primeira sessão para -1% na última). Observações qualitativas mostraram diminuição no contato negativo com o cão e aumento no engajamento nas atividades propostas. Os cães, merecedores do título Canis empathicus, pareciam perceber pistas sobre como se comportar numa sessão, permanecendo à disposição da criança mesmo quando estas não respondiam e nem os incentivavam. A mudança de comportamento das crianças pode ter ocorrido devido a emoções positivas suscitadas pelo cachorro. Especialmente notável foi a mudança no comportamento de L.S., que nas primeiras sessões ficava de costas para a terapeuta, num canto da sala, e ao final brincava com o cão e interagia com a terapeuta. Nossos resultados podem ser uma pista para o sucesso da inserção de um cão em Terapia Assistida por Animais, para indivíduos com transtorno autista: abriu-se uma janela de oportunidades de aprendizagem / There are many anecdotal reports of successful cases in therapy for children with autism, where a dog was inserted as co-therapist. In addition to these reports a few studies support the effectiveness of Animal Assisted Therapy (AAT) to improve social skills of people with autism. However, which aspects of the dog behavior are responsible for this result remain unclear. This work is part of a study of the benefits of introducing a dog in the therapy of autistic children. We observed interactions between children with severe autism (4 boys and 2 girls from 8-14 years old) and dogs during TAA structured free-operant procedure, with interest in the start and end of contact. Twenty (20) sessions were conducted in blocks with and without the dog. All sessions were video taped. We analyzed the recordings of the first and last sessions with the dog (session 7 and session 20) evaluating: the frequency of approach and the length of time close (within arm\'s reach), length of time away from physical contact, smiles and vocalizations. We used an index developed by the ethologist Robert Hinde: % of Approach due to the Child (ApC ) - % of distancing due to the Child (AfC). The dog remained close to the children during most of the time (81% in the first session and 99% in the last one). There was a change in the tolerance of children who have not become approachable, however less distant (ApC % - % AfC: -12 % in the first session to -1% in the last one). There was also a decrease in negative contact to the dog by the child and the emergence of the behavior of engaging in proposed activities. The dogs, deserving the title Canis empathicus, seem to perceive clues on how to behave in a session, remaining available to the children even when they do not respond nor encourage them. Changes in the children\'s behavior may be due to positive emotions raised by the dog. Especially notable was the change in the behavior of L.S., who during the first sessions stood with its back to the therapist, in a corner of the room, and at the end played with the dog and the therapist. Our results may be a clue to the relative success of the inclusion of a dog in Animal Assisted Therapy for individuals with autistic disorder: a window of opportunities for learning was opened

Orientador: Julieta Rodini Engrácia de Moraes / Banca: Carlos Eduardo Ambrósio / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Maria de Jesus Veloso Soares / Resumo: A Distrofia Muscular no Golden Retriever (DMGR) é doença muscular degenerativa hereditária que representa excelente modelo para o estudo da Distrofia Muscular de Duchene de humanos. Esta pesquisa objetivou estudar as lesões do músculo gastrocnêmio (MG) e da junção músculo tendínea (JMT), na ausência de distrofina em cães afetados por distrofia muscular. Foram utilizados seis cães distróficos para distrofia muscular e três cães controle que vieram a óbito por causas variadas que não afetavam o sistema músculo esquelético. Após necrópsia completa, setenta e cinco fragmentos musculares do MG e da JMT foram colhidos em duplicata. Metade destes foi fixada em solução de formol e o restante foi congelado em nitrogênio líquido. Seguiram-se as técnicas usuais para inclusão em parafina e coloração pelo método Picrosirius, HE e TGM para análise histopatológica. Reações imuno-histoquímicas para MHCII e vimentina foram realizadas nos cortes em parafina. Os fragmentos congelados foram processados para colorações especiais para cálcio, alizarina Red S; reações enzimo-histoquímicas de fibras do tipo I (FTI) e II (FTII), mATPase (pH 9,4); e imuno-histoquímicas para CD4, CD8, MHCI e utrofina. Resultados da análise histopatológica mostraram que as lesões no MG de distróficos foram mais pronunciadas que na JMT. A análise histomorfométrica no MG de distróficos revelou maior porcentagem de FTII e menores valores de diâmetro mínimo e área para FTI e FTII. Para os parâmetros supracitados, as FTII na JMT mantiveram-se morfologicamente iguais ao controle. Não houve diferença quanto ao tipo de colágeno na JMT de distróficos e controle. Nas reações imuno-histoquímica para os anticorpos CD4, CD8, MHCI, MHCII, vimentina e utrofina, somente o antígeno MHCI apresentou diferença significativa (p< 0.07), quando comparado ao controle, sendo a imunoexpressão mais ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Muscular Dystrophy in Golden Retrievers (DMGR) is a hereditary degenerative muscle disease that represents an excellent model for the study of Duchenne Muscular Dystrophy. The aim of this study was to characterize the lesions in gastrocnemius muscle (GM) and myotendinous junction (MTJ) in absence of dystrophin in dogs affected by progressive muscular dystrophy. Six affected dogs and three control dogs, without musculoskeletal system diseases, were used. After necropsy, seventy-five myotendinous and muscle samples were cut and collected in duplicate. Half of them were fixed in formalin solution, and the other half were frozen in liquid nitrogen. After that, the samples were processed by usual techniques of paraffin embedding and stained by Picrosirius method, HE and TGM, for histopathological analysis. Immunohistochemical reactions for MHCII and vimentin were performed in paraffin samples. The frozen fragments were processed for special stains for calcium, Alizarin Red S, enzymohistochemical reactions of type I fibers (FTI) and II (FTII), mATPase (pH 9.4), and immunohistochemical for CD4, CD8, MHCI and utrophin. The results of histopathological analysis of the dystrophic dogs showed that the lesions in GM were more pronounced than MTJ. Histomorphometric analysis of the dystrophic GM showed the highest percentage of FTII, and lower values of minimum diameter and area for FTI and FTII. For the same parameters, the FTII in dystrophic MTJ remained morphologically similar to control. There was no difference in the type of collagen in MTJ of dystrophic and control. In immunohistochemical reactions to antibodies CD4, CD8, MHCI, MHCII, vimentin and utrophin, only the antigen MHCI showed a significant statistic difference (p <0.07) compared to control, being the most intense immunostaining in GM dystrophic. From these results we can conclude that the preservation of morphological MTJ can be ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Leptospirosis is a zoonotic disease of global importance caused by pathogenic Leptospira species. Dogs are reservoir hosts for pathogenic Leptospira and can act as potential transmission sources of the disease. Identification of such individuals and characterization of leptospires involved in chronic infections may promote a better understanding of the role of dogs in the epidemiology of particular leptospiral strains and the overall contribution of dogs to environmental contamination in urban and rural scenarios. The present work describes the identification of dogs presenting asymptomatic urinary shedding of different pathogenic Leptospira species among stray and sheltered dog populations, as well as the characterization of leptospiral strains isolated from chronic carriers. Blood and urine samples were taken from three different populations: (I) 92 dogs kept in a public shelter at the University of São Paulo campus; (II) seven stray dogs living inside the University of São Paulo campus; and (III) 24 dogs kept in a public shelter from the city of Mogi das Cruzes. Dogs identified as urinary shedders by PCR-based DNA detection were prospectively evaluated in order to confirm persistent renal carriage of the pathogen and to recover viable leptospires for proper characterization. Leptospiruric dogs were identified in all populations studied. Quantitative PCR targeting the lipL32 gene and the 16S rRNA detected urinary shedding in 10 dogs (10,87%) from population I: two of these dogs were recently admitted at the facility and one dog was adopted immediately after presenting large quantities of leptospires in urine. Prospective evaluation of nine leptospiruric dogs enabled the identification of two chronic carriers, allowing the recovery of leptospires from both dogs. The strains were further characterized by MLST analysis and serogrouping, thus confirming infection caused by L. interrogans serogroup Canicola and L. santarosai serogroup Sejroe. Two leptospiruric dogs (28,5%) were detected in population II by 16S and secY PCR amplification; one dog presented persistent urinary shedding of L. interrogans, but no isolates could be recovered. The other leptospiruric dog presented asymptomatic infection caused by L. santarosai and could not be reevaluated. Only one dog from population III (4,1%) presented leptospiruria detected by PCR; the dog could not be reevaluated, however sequence analysis revealed infection caused by L. santarosai. The results indicate the first report of L. santarosai infection in dogs. Asymptomatic infection caused by this leptospiral species was observed in all populations studied, thus indicating a possible role of dogs in the chain of transmission of this particular pathogen. The results also suggest a possible genetic distinction between lineages of Brazilian L. santarosai maintained by dogs and other animal hosts. Isolation and persistent chronic carriage of L. santarosai found shows that dogs can persistently harbor leptospires other than L. interrogans. This study also points out that dogs can be inadvertently admitted and adopted in dog shelters, potentially increasing the risks of occupational and zoonotic transmission by bringing infected animals closer to shelter workers, adopters and their households. / A leptospirose é uma doença zoonótica de importância global causada por espécies patogênicas do gênero Leptospira. Cães são hospedeiros de manutenção de leptospiras patogênicas e podem atuar como potenciais fontes de infecção da doença. A identificação de tais indivíduos e a caracterização de leptospiras envolvidas na infecção crônica podem ajudar a compreender o papel dos cães na epidemiologia da doença tanto em ambientes rurais quanto urbanos. O presente trabalho descreve a identificação de cães errantes e mantidos em abrigos coletivos com eliminação assintomática de leptospiras patogênicas, além de descrever também a caracterização das diferentes estirpes obtidas de cães cronicamente infectados. Amostras de sangue e urina foram coletadas de 3 populações distintas: (I) 92 cães mantidos em um abrigo coletivo localizado dentro da Universidade de São Paulo; (II) sete cães errantes capturados dentro do campus da Universidade de São Paulo; e (III) 24 cães mantidos em um abrigo coletivo localizado na cidade de Mogi das Cruzes. Cães identificados como leptospirúricos por técnicas moleculares (PCR) foram prospectivamente avaliados para confirmar a persistência da eliminação bacteriana e para obter isolamento da cepa infectante e sua subsequente caracterização. A amplificação de fragmentos dos genes 16S rRNA e lipL32 permitiu a identificação de 10 cães (10,87%) leptospirúricos na população I. Dois dos 10 cães haviam sido recentemente admitidos no local, e outro cão foi adotado logo após apresentar grandes quantidades de leptospiras na urina. A avaliação prospectiva de nove animais leptospirúricos permitiu a caracterização da infecção crônica e assintomática em dois cães, o que possibilitou o isolamento de leptospiras de ambos os animais. As cepas foram tipificadas pelas técnicas de MLST e sorogrupagem, caracterizando duas cepas distintas, sendo elas L. interrogans sorogrupo Canicola e L. santarosai sorogrupo Sejroe. Dois cães leptospirúricos (28,5%) foram identificados na população II pela amplificação por PCR dos genes 16S rRNA e secY; um deles apresentou eliminação persistente de L. interrogans, no entanto não foi possível o isolamento do patógeno. O outro cão leptospirúrico não pôde ser reavaliado, entretanto a análise filogenética permitiu identificar infecção causada por L. santarosai. Apenas um cão da população III (4,1%) apresentou eliminação de leptospiras na urina, que foi confirmada pela amplificação de fragmento dos genes 16S rRNA e secY; o cão não pôde ser reavaliado, no entanto a análise filogenética dos fragmentos amplificados confirmou infecção causada por L. santarosai. Os resultados indicam o primeiro registro de infecção causada por L. santarosai em cães. A ocorrência da infecção assintomática causada por essa espécie nas três populações avaliadas indica um possível papel dos cães na cadeia de transmissão desse patógeno em centros urbanos, além de demonstrar que cães podem se tornar portadores de diferentes espécies de leptospiras. Os resultados sugerem uma possível distinção genotípica de cepas de L. santarosai mantidas por cães quando comparadas com estirpes desta espécie isoladas de outros hospedeiros. O presente estudo também foi capaz de demonstrar que cães leptospirúricos podem ser inadvertidamente admitidos ou adotados em abrigos coletivos, aumentando potencialmente os riscos de transmissão ocupacional e zoonótica da doença.

Orientador: José Luiz Laus / Banca: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: Paula Diniz Galera / Resumo: Estudou-se a eficácia do meloxicam e do carprofeno, aplicados por diferentes vias, em uveítes experimentais em cães. Realizou paracentese de câmara anterior em dois momentos (M0 e M1), com intervalo de cinco horas entre si. Em M0 e M1, colheram-se 0,2 ml de humor aquoso e determinou-se a concentração de proteína total e de prostaglandina E2 (PGE2). Em um primeiro período, constituíram-se quatro grupos (n = 5), que receberam meloxicam ao final de M0 pelas vias subcutânea (GIm), subconjuntival (GIIm) e tópica (GIIIm). Um quarto grupo não recebeu tratamento (Controle). Decorridos sete dias, os animais foram submetidos aos mesmos procedimentos adotados previamente e receberam carprofeno. Avaliação clínica foi também realizada, assim como histopatologia da conjuntiva dos animais dos grupos GIIm e GIIc. Os resultados foram avaliados estatisticamente (p LÜ 0,05). Em todos os grupos, encontrou-se aumento significativo dos níveis protéicos e de PGE2 em M1 (p < 0,001). Não se observou diferença significativa entre os grupos para os valores de proteína total e de PGE2 em M1 (p > 0,05). Observou-se correlação positiva entre proteína total e PGE2 (p < 0,05) apenas no GIm, GIc, GIIIm, GIIIc e GIIm. Exsudado inflamatório de caráter agudo e hemorragia discreta foram vistos à histopatologia após a aplicação de ambos os fármacos (p > 0,05). O meloxicam e o carprofeno foram ineficazes em inibir a síntese de PGE2 e o influxo de proteínas para a câmara anterior, por qualquer uma das vias testadas. A redução nos níveis de 44% proteínas, quando o carprofeno foi utilizado pela via tópica, sugere que por esta via, ele pode ser utilizado como adjuvante no controle da uveíte em cães. / Abstract: Efficacy of meloxican and carprofen, administered by different routes, in experimental uveitis in dogs were studied. Anterior chamber paracenteses was accomplished at two different moments (M0 and M1), with a five hour interval among them. At M0 and M1, 0,2 ml of aqueous humor were collected and total protein and prostaglandin E2 (PGE2) concentration was determined. Four groups were formed in a first period (n = 5), which received meloxican at the end of M0, by the following routes: subcutaneous (GIm), subconjunctival (GIIm), and topical (GIIIm). A fourth group that received no treatment was instituted (Control). Seven days after, animals underwent the same procedures described previously and received carprofen. Clinical evaluation was also performed, as well as conjunctival histopathology of the conjunctiva of the animals of GIIm and GIIc. Results were evaluated statistically (p LÜ 0,05). In all groups, protein and PGE2 values enhanced significantly in M1 (p < 0,001). Protein and PGE2 values, did not change significantly between groups at M1 (p > 0,05). Positive correlation among total protein and PGE2 (p < 0,05) was only noted in GIm, GIc, GIIIm, GIIIc and GIIm. Inflammatory exudate of acute character and mild hemorrhage were seen at histopathology, after both agents were administered. Meloxican and carpofen were unable to inhibit PGE2 synthesis and the protein influx to the anterior chamber by any of the tested routes. The lowering of 44% in protein levels, when carprofen was used by the topical route, suggests that by this route, it can be used as an adjuvant to control uveitis in dogs. / Mestre

O presente projeto levantou uma discussão a respeito das condições psicológicas, fisiológicas e éticas pelas quais passam os cães de trabalho da Polícia Militar, com foco em investigar se a rotina de trabalho leva a condições de estresse e a influência desses fatores no desempenho reprodutivo e na qualidade de vida dos animais. O estudo foi realizado no Canil da Polícia Militar de Campinas, com a participação de oito cães machos de quatro diferentes raças (2 Pastor Alemão, 2 Belga Malinois, 2 Dobermann e 2 Rotwailler), sendo divididos em dois períodos: Período trabalho - animais que estavam em treinamento e trabalho e Período controle - animais que estavam no dia de descanso. Foram colhidas amostras de saliva para a dosagem de cortisol no método de eletroquimioluminescência, fez-se a observação comportamental através da elaboração e analise de um etograma de trabalho e houve a coleta e análise de sêmen. Os resultados mostraram concentrações médias de cortisol salivar no Período Controle de 0,361 à 0,438&micro;g/dl e no Período trabalho 0,312 à 0,592 &micro;g/dl, sendo os maiores valores encontrados após o retorno do trabalho. Nas avaliações de comportamento observamos que na maior parte do período, os animais apresentaram-se em repouso e poucos comportamentos estereotipados foram destacados e as raças Pastor Alemão, Belga Malinois e Dobermann apresentaram parâmetros seminais desejáveis. A raça Rotwailler apresentou cortisol elevado, comportamentos estereotipados e maior taxa de anormalidades espermáticas, portanto acreditamos que não seja a raça mais indicada para os trabalhos desenvolvidos pelas polícias Nosso estudo indica que os cães de trabalho avaliados adaptados ao ambiente desde filhote, apresentam boa capacidade de adaptação ao ambiente de confinamento rotina de trabalho e treinamento, uma vez que não sofrem distresse. / This project raised a discussion about the psychological and ethical conditions under which pass the military working dogs, on investigating whether routine work leads to stress conditions and the influence of these factors on reproductive performance and quality of animals life. The study was conducted at military police Kennel in Campinas, using 8 male dogs of 4 different races (2 German Shepherd, 2 Belgian Malinois, 2 Dobermann and 2 Rotwailler), divided into two periods: Period work - animals that were in training and work and control period - animals that were in day off. Saliva samples were collected for cortisol measurement in eletroquimioluminecence method, behavioral observation through the preparation and analysis of a ethogram and collection and analysis semen. Our results showed average concentrations of salivary cortisol in the control period of 0.361 to 0.438 and 0.312 to 0.592 working period, with the highest values found after returning from work. In behavioral assessments we observed that in most of the period, the animals showed up at rest and few stereotyped behaviors were highlighted and. The breeds German Shepherd, Belgian Malinois and Dobermann showed desirable semen parameters, which did not occur in Rotwailler. The Rotwailler breed had high cortisol, stereotyped behaviors and higher rate of sperm abnormalities, so we believe that it is not the most suitable breed for the military working dog. Our study indicates that the assessed working dogs adapted to the environment as a puppy, show good ability to adaptation to environmental containment routine work and training, since it does not suffer distress.