Orientador: Marcelo Libânio / Banca: Tsunao Matsumoto / Banca: Sergio Francisco de Aquino / Resumo: O objetivo do presente trabalho foi avaliar a remoção de sulfametoxazol, diclofenaco e 17β- estradiol em águas destilada e natural através da oxidação com cloro. Os resultados indicaram que as concentrações iniciais dos microcontaminantes, bem como os tempos iniciais, apresentaram diferenças significativas na remoção dos fármacos em ambas às águas de estudo. Para os ensaios em água destilada, valores de remoção elevados foram encontrados. As águas naturais foram submetidas ao tratamento por clarificação seguido da pós-cloração e os resultados revelaram que a melhor eficiência de remoção deu-se para o diclofenaco, seguido do 17β-estradiol e do sulfametoxazol. De acordo com o estabelecido pela Portaria 2914/11, na qual estipula valores de pH, temperatura e tempos de contato em função do residual de cloro, o tempo correspondente seria até 10 minutos para a pós-cloração, assim, os melhores valores de remoção foram na ordem de 61% para o DCF, 36% para o E2 e 33% para o SMX em água destilada e para água natural esses valores foram de 34% para o DCF, 24% para o E2 e 11% para o SMX. As doses de cloro foram comparadas e para água destilada apenas o DCF apresentou diferenças significativas na eficiência de remoção com o aumento da dose aplicada (3,0 mg.L -1 ), porém para o SMX e E2 não foram observadas diferenças significativas. Observou-se formação de subprodutos já descritos por outros pesquisadores com esses microcontaminantes em água natural, para o SMX e E2 em concentrações de 20 a 90 μg.L -1, não apresentando formação de subprodutos para o DCF, o qual apresentou um dos maiores valores de remoção encontrados neste trabalho. Para cinética de oxidação dos fármacos o tempo de equilíbrio em 30 minutos foi observado para a maioria dos microcontaminantes estudados e todos se adequaram ao modelo cinético de pseudo-segunda ordem, com valores de K 2 na ordem de 0,0133(DCF), 0,0168(SMX) e 0,0326... / Abstract: This study aimed to evaluate removing of sulphamethoxazole, diclofenac and 17β-estradiol on distilled and natural waters by oxidation with chlorine. The results indicated that the initial concentrations of microcontaminants as the inicial time, had a significant differences in both waters of study. For the tests in distilled water, high values of removing were found. The natural water was treated by clarification followed by post-chlorination and the results revealed that the best removal efficiency occurred for diclofenac then 17β-estradiol and sulphamethoxazole. In accordance with the Decree 2914/11, which establishes values of pH, temperature and contact time basis on the residual chlorine, the corresponding time would be up to 10 minutes for post-chlorination, so the best values were on the order of 61% for the DCF, 36% to E2 and 33% for SMX in distilled water, in addition, for natural waters, these values were 34% for the DCF to 24% to E2 and 11% for SMX. The doses of chlorine were compared and in distilled water only the DCF had a significant differences in the removal efficiency with the increase of the applied dose (3.0 mg l -1 ), but in the SMX and E2 no significant differences were observed. It was observed the formation of the sub products of chlorination described by other researchers with these microcontaminants in natural water for SMX and E2 in concentrations from 20 to 90 μg.L-1. However was not found the formation of sub products to DCF, which presented a major removal values found in this study. For the oxidation kinetics of the studied drugs, the ideal contact time was observed in 30 minutes for most studies and all microcontaminants has better adjustment to the kinetic model of the pseudo-second order, with K2 values in the order of 0.0133 (DCF), 0.0168 (SMX) and 0.0326 (E2) in distilled water and 0.0092 (DCF), 0.0025 (SMX) and 0.0479 (E2) in natural water / Mestre

Orientador: Mary Rosa Rodrigues de Marchi / Co-orientador: / Banca: Maria Lúcia Ribeiro / Banca: Eduardo Bessa Azevedo / Banca: Mario Sergio Galhiane / Banca: Ednei Gilberto Primel / Resumo: Substâncias orgânicas capazes de absorver radiações ultravioletas A e B (UVA e UVB) são utilizadas em protetores solares e, cada vez mais, têm sido empregadas na formulação de diversos cosméticos e produtos de higiene pessoal em virtude da crescente preocupação com os danos causados pela radiação solar, em especial os cânceres de pele. Diante dessa ampla utilização, tais substâncias acabam por aportar em ambientes aquáticos por meio de atividades recreacionais ou lançamento de esgoto doméstico. Estudos realizados em países europeus apontaram a presença de filtros UV em águas superficiais, sedimentos e peixes. A preocupação quanto à presença deste tipo de substância no ambiente e à exposição de organismos aquáticos reside na potencialidade de bioacumulação e capacidade de atuarem como interferentes endócrinos. Diversos bioensaios in vitro e in vivo mostram que as substâncias benzofenona-3 (BP-3), etilhexil salicilato (ES), etilhexil metoxinamato (EHMC) e octocrileno (OC), alvos deste estudo, apresentam atividade estrogênica. Apesar de tais evidências, existem poucos estudos sobre a ocorrência e destino deste tipo de substância no ambiente e nenhum se refere ao Brasil. Com isso, o presente estudo descreve o desenvolvimento, otimização e validação de método além do estudo de ocorrência dos filtros UV em matrizes ambientais. O metodo desenvolvido baseou-se em extração em fase sólida (SPE) e cromatografia a gás acoplada à espectrometria de massas em tandem. A otimização utilizada foi a multivariada onde as variáveis que podiam afetar a eficiência da extração foram estudadas simultaneamente utilizando um planejamento experimental, um planejamento fatorial fracionário (PFF) 25-1. O uso do PFF proporcionou um desenvolvimento de método de extração rápido eficiente e econômico. Os parâmetros de validação avaliados foram seletividade, curva analítica... / Abstract: Organic substances capable of absorbing ultraviolet radiation A and B (UVA and UVB) are used in sunscreens and, increasingly, have been employed in the formulation of various cosmetics and personal care products (PCPs) due to the increasing concern about the damage caused by radiation solar, especially skin cancers. Because of their widespread use, these substances eventually contribute in aquatic environments through recreational activities or release of wastewater. Studies in European countries indicated the presence of UV filters in surface water, sediments and fish. The concern about the presence of these substance in the environment and exposure of aquatic organisms is the potential for bioaccumulation and ability to act as endocrine disruptors. Bioassays in vitro and in vivo show that substances benzophenone-3 (BP-3), ethylhexyl salicylate (ES), ethylhexyl metoxinamato (EHMC) and octocrylene (OC), targets of this study, have estrogenic activity. Despite the evidence, there are few studies on the occurrence and fate of this type of substance in the environment and none refers to Brazil. Thus, this work describes the development, optimization, validation of the method and the occurrence of UV filters in environmental matrices. The developed method is based on solid phase extraction (SPE) and gas chromatography-tandem mass spectrometry. The multivariate optimization was used where the variables affecting the extraction efficiency were studied simultaneously using an experimental design. A fractional factorial design (FFD) 25-1. The use of FFD provided a development method of extraction fast efficient and economical. The validation parameters evaluated were selectivity, calibration curve, precision, trueness, limit of detection and quantification. The selectivity, particularly the matrix effect, is a very important aspect of the validation study and this parameter was not been overlooked. In the... / Doutor

Orientador: Arielle Cristina Arena / Banca: Daniela Cristina Ceccatto Gerardin / Banca: Carla Dal Bianco Fernandez / Banca: Luis Antonio Justulin Junior / Banca: Luis Gustavo de Almeida Chuffa / Banca: Cândida Aparecida Leite Kassuya / Banca: Patrícia Fernanda Felipe Pinheiro / Resumo: Fipronil é um inseticida amplamente utilizado na agricultura, medicina veterinária e saúde pública, e recentemente tem sido listado como um provável desregulador endócrino. Estudos demonstram que este composto pode afetar a função da tireoide, parâmetros reprodutivos e o sistema nervoso central. No entanto, a maioria dos estudos realizados com o fipronil avaliou sua toxicidade aguda, e poucos se referem aos seus possíveis efeitos reprodutivos, especialmente se a exposição ocorrer durante a gestação e lactação. Este estudo objetivou avaliar os efeitos resultantes da exposição perinatal ao fipronil e suas possíveis repercussões tardias sobre parâmetros reprodutivos masculinos e femininos, em ratos. Ratas prenhes foram expostas a três doses de fipronil (0,03; 0,3 ou 3 mg/kg) do dia gestacional 15 até o dia pós-natal 7, por gavage. Durante o tratamento, foram monitorados o consumo de água e ração e o peso corporal das ratas expostas. Após o desmame, foram coletados o sangue das mães para análises bioquímicas e órgãos para registro do peso. A prole masculina foi avaliada através dos seguintes parâmetros: peso corporal, distância anogenital e idades da separação prepucial e da descida testicular. Na vida adulta, peso de órgãos reprodutores, contagens, morfologia e motilidade espermática, histo-morfometria do testículo e epidídimo, contagem de células de Sertoli, comportamento e preferência sexual, fertilidade e expressão de receptores de andrógenos no testículo foram investigados. Nos filhotes do sexo feminino foram avaliados a distância anogenital, idade de instalação de puberdade, ciclo estral, dosagem hormonal, fertilidade, comportamento sexual e histologia de útero e ovário. O tratamento não alterou os parâmetros bioquímicos e os pesos da maioria dos órgãos analisados das mães expostas ao fipronil, com exceção do peso da hipófise, que apresentou uma redução no grupo exposto a menor dose... / Abstract: Fipronil is an insecticide widely used in agriculture, veterinary medicine and public health, and recently has been listed as a possible endocrine disruptor. Studies demonstrate that this compound can affect the thyroid function, reproductive parameters and central nervous system. However, most of studies performed with fipronil evaluated the acute toxicity, and a few of them refer to its reproductive effects, especially if the exposure occurs during gestation and lactation. This study aimed to evaluate the effects resulting from perinatal exposure to fipronil and its possible late repercussion on male and female reproductive parameters, in rats. Pregnant rats received three doses of fipronil (0.03; 0.3 or 3 mg/kg) from gestational day 15 to postnatal day 7, by gavage. During the treatment, water and food consumptions as well as the body weight of females exposed were investigated. After weaning, we collected the blood of mothers for biochemical analysis and the organs to verify the weight. The male offspring was evaluated for body weight, anogenital distance and ages of preputial separation and testicular descent. At adult life, weight of reproductive organs, sperm counts, morphology and motility, testicular and epididymal histomorphometry, sertoli cells count, sexual behavior and preference, fertility and patterns of expression of androgen receptor in the testis were evaluated. On female offspring was investigated anogenital distance, puberty onset, estrous cycle, hormonal levels, fertility, sexual behavior and histology of uterus and ovaries. The treatment did not alter the biochemical parameters and the weight of most of analyzed organs of mothers exposed to fipronil, however the weight of pituitary gland presented a reduction in the group exposed to a lower dose. On males, the perinatal exposure to fipronil did not affect the body weight, anogenital distance and puberty onset. Similarly, at adult life, fipronil did not alter the organ... / Doutor

Orientador: Wellerson Rodrigo Scarano / Resumo: The mono-n-butyl phthalate (MBP) is the active metabolite of di-n-butyl phthalate (DBP), a plasticizer commonly used for industrial products, including medical devices, flexible plastics and cosmetics, has been described as an endocrine disruptor with estrogenic and anti-androgenic function, depending on the dose and the exposure period, particularly by interfering with the development of the male reproductive system. It is believed that some of the effects of endocrine disruptors are mediated by the non-classical estrogen G protein-coupled receptor - GPER1 (GPR30). In view of the worldwide problems regarding to degradation of plastics and their dispersion in the environment, and earlier evidences showed that phthalates have effects on the development and maturation of the prostate increasing the incidence of inflammatory and dysplastic lesions in rodents, this study aimed to evaluate the effect of MBP on androgen dependent prostate cancer cells (LNCaP) by modulating the activity of GPER1 (through its antagonist, G15). The LNCaP cells, maintained in RPMI culture, were expanded and treated in an incubator with 5% CO2 humid atmosphere at 37 ° C. The MBP dose to be used was 10 uM, selected from the following MTT cytotoxicity test (3- [4.5-dimethylthiazol-2yl] -2,5-diphenyl tetrazolina bromide). Thus were established the following treatment protocols: control: RPMI + 0.03% DMSO; MBP: 10 uM of MBP diluted in DMSO (0.03%) + RPMI; G15: 8 uM of G15 diluted in DMSO (0.03%) + RPMI; M+G... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: O mono-n-butil-ftalato (MBP), metabólito ativo do di-n-butil-ftalato (DBP), plastificante usualmente utilizado em produtos industrializados, incluindo dispositivos médicos, plásticos flexíveis e cosméticos, tem sido descrito como um desregulador endócrino com função estrogênica e anti-androgênica dependendo da dose e do período de exposição, interferindo principalmente com o desenvolvimento do sistema genital masculino. Acredita-se que os efeitos de alguns desreguladores endócrinos sejam mediados pelo receptor estrogênico não clássico acoplado à proteína G - GPER1 (GPR30). Tendo em vista a problemática mundial com relação à degradação dos materiais plásticos e sua dispersão no meio ambiente e diante de evidências que mostraram que os ftalatos exercem efeitos sobre o desenvolvimento e maturação da próstata aumentando a incidência de lesões inflamatórias e displásicas em roedores, este estudo teve por objetivo avaliar a ação do MBP sobre células cancerígenas prostáticas dependentes de andrógeno (LNCaP), modulando a atividade do GPER1 (através de seu antagonista, G15). As células da linhagem LNCaP, mantidas em meio de cultura RPMI, foram expandidas e tratadas em estufa com 5% de CO2 e atmosfera úmida a 37ºC. A dose de MBP a ser utilizada foi de 10 µM, selecionada após o teste de citotoxicidade do MTT (3-[4,5-dimetiltiazol-2yl]-2,5-difenil brometo de tetrazolina). Dessa forma foram constituídos os seguintes protocolos de tratamento: Controle: RPMI + DMSO 0,03%; MBP: 10 µM de M... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2018-04-26T10:56:51Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreia Cristina Fonseca Alves - 2018.pdf: 2077715 bytes, checksum: 014c09b110640921afd1122a8c288520 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-04-26T11:17:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreia Cristina Fonseca Alves - 2018.pdf: 2077715 bytes, checksum: 014c09b110640921afd1122a8c288520 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-26T11:17:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Andreia Cristina Fonseca Alves - 2018.pdf: 2077715 bytes, checksum: 014c09b110640921afd1122a8c288520 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Bisphenol-A (BPA) is an emerging pollutant potentially capable of interfering with the endocrine system of living things. Employed mainly in the industry, in the production of resins, packaging and polycarbonate monomers, its main sources in the environment are effluent discharges. Since the conventional treatment systems used in Brazil can’t remove a series of pollutants, the use of activated carbon is one of the alternatives fairly used for this purpose. Its production from alternative materials is becoming more and more frequent, as agroindustrial wastes, object of numerous studies of the production of activated carbon. The coffee grounds are one of these residues that has been used generating good carbonaceous adsorbents. Thus, the objective of this work was to evaluate the efficiency of the activated carbon produced from the coffee grounds, in the adsorption of BPA in aqueous medium. Water vapor (CAH), KOH (CAK), K2CO3 (CAKC) and ZnCl2 (CAZn) were used as the activating agente characterized by analysis of X-ray diffraction (XRD), Fourier transform infrared (FTIR), N2 adsorption and desorption, elemental composition (CHNS-O) and determination of zero charge potential. For the selection of the best coal, a preliminary adsorption test was carried out with the adsorbents produced, with the coffee grounds and a commercial coal for comparative purposes. The effect of the initial pH of the solution was also evaluated. The kinetic adsorption studies at the concentrations of 5, 20 and 30 mg/L of BPA were adjusted to the pseudo-firstorder and pseudo-second order models. The nature of the process was studied by the Langmuir and Freundlich isotherm models. Among the developed coals, the CAK and CAKC presented low production yield and were not submitted to the adsorption tests. The CHNS-O, XRD, FTIR and N2 adsorption/desorption analyzes of CAH and CAZn generated results close to those reported in the literature. In terms of specific surface area, the CAH proved to be out of the expected. The CAZn had an area of 1,038.51 m²/g. Of the materials tested, the CAH didn’t present adsorptive capacity, while the CAZn was the one with the best performance, with little variation in efficiency when the pH of the medium changed. The use of coffee grounds as bioadsorbent wasn’t promising, being 86 percentage points below the efficiency of CAZn. Adsorption kinetics revealed a relatively slow process at the concentrations studied, reaching equilibrium after 720 minutes. The kinetic data for the three systems presented a fractional order close to 2, thus indicating a better fit for the pseudo-second order model. The equilibrium data were better adjusted to the Langmuir model, assuming that the CAZn has a homogeneous surface with adsorption occurring in monolayer. The maximum adsorption capacity of BPA according to the same model was 123.22 mg/g. The results showed that CAZn can be considered a promising promoter in the removal of BPA, indicating coffee grounds as an alternative raw material for the production of activated carbon with the potential to remove emerging pollutants such as BPA in water. / O Bisfenol-A (BPA) é um poluente emergente potencialmente capaz de interferir no sistema endócrino dos seres vivos. Empregado principalmente na indústria, na produção de resinas, embalagens e monômeros de policarbonato, suas principais fontes no meio ambiente são as descargas de efluentes. Uma vez que os sistemas de tratamento convencionais empregados no Brasil não conseguem remover uma série de poluentes, o uso de carvão ativado é uma das alternativas bastante empregada para esta finalidade. Sua produção a partir de materiais alternativos vem-se tornando cada vez mais frequente, como resíduos agroindustriais, objeto de inúmeros estudos de produção de carvão ativado. A borra de café é um destes resíduos que vem sendo utilizado gerando adsorventes carbonáceos de bons desempenhos. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência do carvão ativado produzido da borra de café, na adsorção de BPA em meio aquoso. Foram utilizados como agente ativante vapor d’água (CAH), KOH (CAK), K2CO3 (CAKC) e ZnCl2 (CAZn), caracterizados por análises de difratometria de raios X (DRX) e de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), adsorção e dessorção de N2, composição elementar (CHNS-O) e determinação do potencial de carga zero. Para seleção do melhor carvão, um ensaio preliminar de adsorção foi realizado com os adsorventes produzidos, com a borra de café e um carvão comercial para fins comparativos. O efeito do pH inicial da solução também foi avaliado. Os estudos cinéticos de adsorção nas concentrações de 5, 20 e 30 mg/L de BPA foram ajustados os modelos de pseudo-primeira ordem e pseudo-segunda ordem. A natureza do processo foi estudada pelos modelos de isoterma de Langmuir e Freundlich. Dentre os carvões desenvolvidos, o CAK e CAKC apresentaram baixo rendimento de produção, não sendo então submetidos aos ensaios de adsorção. As análises CHNS-O, DRX, FTIR e adsorção/desorção de N2 do CAH e CAZn geraram resultados próximos aos relatados na literatura. Em termos de área superficial específica, o CAH mostrou-se fora do esperado. Já o CAZn apresentou uma área de 1.038,51 m²/g. Dos materiais testados, o CAH não apresentou capacidade adsortiva enquanto que o CAZn foi o de melhor desempenho, com pouca variação na eficiência quando alterado o pH do meio. O emprego da borra de café como bioadsorvente não foi promissor, ficando 86 pontos percentuais abaixo da eficiência do CAZn. A cinética de adsorção revelou um processo relativamente lento para as concentrações estudadas, atingindo o equilíbrio após 720 minutos. Os dados cinéticos, para os três sistemas, apresentaram ordem fracionária próxima de 2, indicando assim um melhor ajuste pelo modelo de pseudo-segunda ordem. Os dados de equilíbrio foram melhores ajustados ao modelo de Langmuir, pressupondo que o CAZn possui uma superfície homogênea com a adsorção ocorrendo em monocamada. A capacidade máxima de adsorção de BPA segundo o mesmo modelo foi de 123,22 mg/g. Os resultados mostraram que o CAZn pode ser considerado um adorvente promissor na remoção de BPA, indicando a borra de café como uma matéria-prima alternativa para produção de carvão ativado com potencial de remoção de poluentes emergentes, como o BPA, em água.

Orientadores: Hernandes Faustino de Carvalho, Oduvaldo Camara Marques Pereira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T13:15:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GarciaFlorez_Manuel_D.pdf: 7016016 bytes, checksum: c1238bbbfa558ad219cb4214f4b454fd (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O controle do crescimento e da função prostática é baseado, numa complexa rede de interações de hormônios esteróides e seus receptores e num intrincado mecanismo de interconversão entre eles. A fisiologia e o crescimento prostático são dependentes também de hormônios peptídicos e fatores de crescimento, além de interações epitélio-estroma. O desenvolvimento prostático é caracterizado por ma etapa de indução pré-natal, uma janela de ramificação e citodiferenciação pós-natal, e um período de crescimento iniciado na puberdade, dada a produção testicular de testosterona (T). A conversão da testosterona para diidrotestosterona (DHT), pela enzima 5-a-redutase, é importante na origem embrionária da glândula. Esta dependência androgênica é também demonstrada no adulto, onde a privação androgênica leva à marcante regressão prostática. Ações importantes na fisiologia prostática de outros hormônios diferentes dos andrógenos como a progesterona e estrógeno vêm sendo esclarecidas recentemente. Particularmente revelou-se a ação do estrógeno como um fator regulador durante o desenvolvimento normal da glândula, mas também, fator associado com a alta incidência de patologias durante envelhecimento, período no qual a alteração da relação estrógeno-testosterona surge como conseqüência da queda da concentração de andrógenos. Complicando esta situação, tem-se a ação de enzimas como a aromatase, e de outras envolvidas com a transformação da T e da DHT em compostos sem atividade androgênica, como a 3ß-hidroxi-esteróide desidrogenase (3ß-HSD) e a 3ß-adiol-hidroxilase (CYP7B1) que junto com a coordenada expressão temporal-espacial dos receptores de hormônios esteróides fornecem o equilíbrio necessário para o normal desenvolvimento prostático. Este trabalho reúne importantes resultados sobre a ação de desreguladores endócrinos em diferentes etapas do desenvolvimento prostático. Utilizando um modelo in vivo foram reproduzidos vários eventos de exposição a desreguladores endócrinos em diferentes idades. Dos resultados, pode-se concluir que:1. as substâncias químicas podem ter efeitos totalmente diferentes se aplicadas na idade perinatal, no período pré e pós-púbere ou no adulto; 2. o momento de exposição às substâncias exógenas no organismo em desenvolvimento é decisivo para determinar seu caráter e seu potencial futuro e, 3 . ainda que as exposições sejam durante as etapas iniciais do desenvolvimento, as manifestações podem somente ser observadas na maturidade / Abstract: Prostatic growth control and function are based on complex interactions between steroid hormones and their receptors and on intricate map of interconversion among them. Prostatic physiology and growth are also dependent of peptide hormones and growth factors, besides epithelium-estroma interactions. Prostatic development is characterized by a stage of fetal induction, a branching window and one phase of differentiation and growth period during the puberty, which is stimulated by the increasing testosterone (T) levels. Conversion of T to dihydrotestosterone (DHT), catalyzed by the 5a-reductase enzyme, is important for the embryonic origin of the gland. This androg e nic dependence is also demonstrated in the adult, as androgen deprivation promotes prostatic regression. Important roles of nonandrogenic hormones have been described more recently. In particular, estrogen was revealed as an important regulator of the normal development of the gland, which is also associated with the high incidence of pathologies in the elderly. Other factors, such as the existence of enzymes like aromatase, involved in the conversion of T in its inactive metabolites, as the 3-hidroxi-steroid dehydrogenase (3-HSD) and to 3-adiol-hidroxilase (CYP7B1) that supply the necessary balance for the normal prostatic development with the coordinate temporal-space expression of the receptors. This work presents important results about the action of endocrine disruptors in different stages of prostatic development under different hormonal environments using the endocrine disruptors. The main results are: 1. Endocrine disrupt ors produce different effects depending on the period of administration; 2. the time of exposition to the exogenous drugs is decisive to determine its effects and, 3. exposure during initial stages of the development may cause effects observed only during sexual maturity / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-12-29T19:05:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação-Fernando Santiago Pires-2013.pdf: 1915773 bytes, checksum: 124080395d9b5ba7bc8951e1ec35c371 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-12-29T19:06:19Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação-Fernando Santiago Pires-2013.pdf: 1915773 bytes, checksum: 124080395d9b5ba7bc8951e1ec35c371 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-12-29T19:06:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação-Fernando Santiago Pires-2013.pdf: 1915773 bytes, checksum: 124080395d9b5ba7bc8951e1ec35c371 (MD5) Previous issue date: 2013-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Xenobiotics pesticides are widely used in crops or even gardening throughout the world with purpose of a broad spectrum pest control, herbicides with glyphosate (N- phosphonomethyl glycine) as an active ingredient stands out amongst that group. The glyphosate (GLI) participates in a unique metabolic pathway during the synthesis of amino acids in plants, although, in animals it was thought to be harmless. However, literature indicates toxicity from commercial solutions, but few studies done with pure GLI. Moreover, to verify toxic potential of GLI, experiments done using Nuclear Magnetic Resonance (NMR). Furthermore, the test tanks were examined the presence of GLI for a period of 96 hours. It is because the GLI, during the metabolism of prokaryotes, converts to Aminomethylphosphonic acid (AMPA). The results showed the absence of AMPA at 96 hours of exposure, whereas, any changes were attributed to GLI in these animals. Primarily, the dose of CL50-96h for the experimental animal, Poecilia reticulata (guppy), was determined. It estimated at 68.51 ± 2.2 mg/L for males and at 70.56 ± 2.96 mg/L for females. The lethal dose calculated according to the recommended guidelines from the Organisation for Economic Co-operation and Development (OECD). During these tests the animals in the experimental group (EG) exposed at concentrations of 50, 55, 60.5, 66.5 and 73.2 mg/L showed swimming changes (17.5% - lethargy, 11.1 % - irregular swimming and 45.9% - hypoxia). Respiratory changes (8.3% - swam to the tank surface, 1.8% - hypo oxygenated) and changes in color pattern, such as loss of intensity of the hues orange, red, blue, and assuming a dull coloration (14.3%) in all EG. Subsequently, male’s guppy treated with sublethal doses of pure GLI in concentrations of 17.13 mg/L (25% CL50), 34.26 mg/L (50% CL50) and 51.39 mg/L (75% CL50) as per 203 guidelines of the OECD. After euthanasia, by descerebration, the male animals were dissected and the testicles fixed in buffered paraformaldehyde, sectioned in 2.0 μm slices by an ultramicrotome and placed in histoResin®. The sections stained with hematoxylin and toluidine blue/Floxine B, then photographed under light microscope. The program Image-Pro Plus provided the images, which analyzed by the program Statistica 7.0. Consequently, the data reviewed that GLI has toxic potential. It has the potential to: cause testicular regression - morphometric measures decrease, reduce the number of the spermatic compartments, reduce the gonad index (Igs) and promote histopathology which may lead to reduction or loss of function. Thus, characterizing a process of demasculinization, which indicates endocrine disruption. / Agrotóxicos são xenobióticos utilizados largamente nos lavouras ou mesmo em jardinagem em todo mundo para o controle de pragas agrícolas, e entre eles destacam-se os herbicidas a base de Glifosato (N-fosfonometil-glicina). O Glifosato (GLI) participa de uma rota metabólica exclusiva na síntese de aminoácidos nas plantas e foi considerado inofensivo aos animais. Contudo, há relatos na literatura que indicam a toxicidade das soluções comerciais à base de GLI, mas poucos abordam a atividade do GLI puro. Dessa maneira, para se verificar o potencial toxico do GLI, primeiramente, experimentos com Ressonância Magnética Nuclear (RMN) foram realizados para verificar a presença de GLI nos aquários testes pelo tempo de 96h. Isso foi feito porque o GLI pode ser convertido a ácido aminometil fosfônico (AMPA) pelo metabolismo de procariotos. Os resultados demonstraram ausência de AMPA até 96h de exposição e dessa forma foi atribuído ao GLI qualquer alteração presente nos animais testes. Depois foi determinado o valor da CL50-96h para o animal experimental Poecilia reticulata (guarú). Essa foi estimada em 68,51 ± 2,2 mg/L para machos e 70,56 ± 2,96 mg/L para fêmeas. Os testes de toxicidade letal para o cálculo da CL50-96h foram feitos de acordo com as recomendações do guia 203 da Organização para cooperação e desenvolvimento do comércio (OECD). Durante esses testes os animais do grupo experimental (GE) expostos nas concentrações de 50; 55; 60,5; 66,5 e 73,2 mg/L apresentaram alterações comportamentais como distúrbios natatórios (17,5% – letargia; 11,1% – natação irregular e 45,9% – hipoatividade), respiratórios (8,3% – nado na superfície do aquário; 1,8% – hipóxia) e alterações no padrão da coloração (14,3%) como perda da intensidade das matizes laranja, vermelha e azul e dos tons acetinados em todos os GE. Posteriormente guarús machos foram tratados com doses subletais do GLI puro nas concentrações de 17,13 mg/L (25% da CL50), 34,26 mg/L (50% da CL50) e de 51,39 mg/L (75% da CL50) conforme o guia 203 da OECD. Após a eutanásia por descerebração, os animais foram dissecados e os testículos foram fixados em paraformaldeído tamponado, inclusos em historresina e seccionados a 2,0 μm em ultramicrótomo. Os cortes foram corados com Azul de toluidina e hematoxilina/floxina e posteriormente fotografados em fotomicroscópio. As imagens forneceram dados obtidos pelo programa Image Pro-Plus que foram analisados pelo programa Statistica 7.0. Foi demonstrado que o GLI apresenta potencial tóxico para o guarú por causar regressão testicular pela redução das medidas morfométricas, redução do número de compartimentos espermáticos, redução do Índice gonadossomático (Igs) e por promover histopatologias que podem levar a diminuição ou a perda da funcionalidade do testículo. Tal processo caracteriza a desmasculinização, um indicativo de disrupção endócrina.

Uma questão ambiental preocupante é a contaminação do meio ambiente por substâncias que interagem com os sistemas endócrinos de seres humanos e animais. Tais substâncias são denominadas desreguladores endócrinos e, como outros poluentes ambientais, apresentam uma variedade de fontes e grande potencial agressor à saúde humana. Neste trabalho, buscamos a aplicação de técnicas de espectroscopia vibracional e técnicas eletroquímicas ao estudo de desreguladores endócrinos, em termos de sua detecção, caracterização, estudo de sua reatividade, desenvolvimento de métodos para sua degradação fotoquímica, estudo dos mecanismos envolvidos e características dos produtos de degradação. O enfoque é voltado ao uso de técnicas espectroscópicas, com especial destaque para o desenvolvimento de metodologias de espectroscopia vibracional intensificadas, associadas ou não a sistemas eletroquímicos. Dentre os compostos considerados desreguladores endócrinos, o nosso trabalho é dedicado ao estudo fotoquímico e espectroeletroquímico das seguintes substâncias: o difenilalcano bisfenol A (BPA), os herbicidas triazínicos ametrina e atrazina, e os compostos organoclorados ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) e 2,4-diclorofenol (2,4-DCF). O estudo de processos de fotólise e degradação fotocatalítica mediada por TiO2 foram realizados para o BPA e para a ametrina. Tais processos mostram-se importantes para a remoção destes compostos do meio ambiente. Os estudos fotocatalíticos foram estendidos ainda para o uso de compósitos TiO2-Pr como catalisadores. Foi observado que a dopagem do TiO2 pelo íon terra rara praseodímio resulta em alterações nas propriedades físico-químicas do material semicondutor, sendo um método valioso para o aumento da atividade fotocatalítica do TiO2. Conclui-se ainda pela necessidade do controle da porcentagem de modificação química para a otimização do processo fotocatalítico, sendo a proporção de 1% praseodímio considerada ótima. O estudo de processos de fotólise e degradação fotocatalítica do BPA mediado por TiO2 mostra diferenças significativas entre o processo de degradação e mineralização, relacionadas à formação de intermediários orgânicos recalcitrantes. Para a ametrina observa-se que a fotólise e a fotocatálise envolvem mecanismos de degradação distintos. Estudos espectroeletroquímicos dos desreguladores endócrinos (DEC) foram conduzidos através de espectroscopia Raman intensificada (efeito SERS) visando a compreensão da natureza da interação química entre os adsorbatos e superfícies metálicas nanoestruturadas, bem como a caracterização vibracional dos produtos de processos faradáicos desses compostos sobre eletrodos. Produtos de reações químicas de oxidação e redução dos DEC foram identificados através de modificações espectrais em função de potenciais eletroquímicos anódicos e catódicos. / An environmental issue of concern is contamination of the environment by substances which interact with the endocrine systems of humans and animals. Such substances are called endocrine disruptors (ED) and, like other environmental pollutants, may produce adverse effects in human health. In this work, we explore the application of vibrational spectroscopy and electrochemical techniques in the study of ED, in terms of their detection, characterization, study of their reactivity, development of methods for their photochemical degradation, study of the involved mechanisms and characteristic of degradation products. The approach employs the use of advanced spectroscopic techniques, with special attention for the development of methodology of surface-enhanced vibrational spectroscopy, associated or not with electrochemical systems. Among the compounds thought to cause endocrine disruption, the present study is dedicated to the photochemical and electrochemical study of the following substances: the plasticizer bisphenol A (BPA), the triazinic pesticides ametrine and atrazine, and the organochlorine compounds 2,4-dichlorophenoxyacetic acid and 2,4-dichlorophenol. The study of photolytic and TiO2-mediated photocatalytic degradation was carried out for BPA and ametrine. Such processes are important for the removal of such substances from the environment. The photocatalytic studies were extended to include the use of TiO2-Pr composite as catalysts. The doping of TiO2 by the rare earth ion praseodymium results in changes in the physicochemical properties of semiconducting material, being a valuable method for enhancing the photocatalytic activity of TiO2. Our results showed the need of percentage control of the chemical modification for the optimization of the photocatalytic process, with the 1% praseodymium/titanium ration the optimal composition. The study of photolysis and TiO2-mediated photocatalytic degradation processes of BPA shows significant differences between the degradation and mineralization, suggesting the production of recalcitrant organic compounds. For ametrine, photolysis and photocatalytic degradation processes were found to occur via different mechanisms. Spectroelectrochemical studies of endocrine disruptors (ED) were carried out through surface-enhanced Raman spectroscopy (SERS effect) aiming at the understanding of the nature of the chemical interaction between these molecules and nanostructured metallic surfaces, and at the vibrational characterization of the products formed by faradaic charge transfer processes. Products of oxidation and reduction chemical reactions were identified through spectral changes observed in the SERS spectra as a function of cathodic and anodic potentials.

Interferentes endócrinos são substâncias que podem causar efeitos deletérios na saúde, crescimento e capacidade reprodutiva dos organismos, e colocam em risco a continuidade de várias espécies. Suas fontes são as mais variadas possíveis, sendo possível detectá-los em alguns alimentos, produtos farmacêuticos, produtos químicos e seus respectivos subprodutos de degradação. Também vêm sendo detectados em várias matrizes ambientais, tais como o ar, solo, água e sedimentos. Devido as suas capacidades de ação sinérgica, aditiva e antagônica é extremamente complexa a determinação da relação dose-resposta, informação esta necessária para a definição de limites de padrões de qualidade e medidas de controle e monitoramento. A partir da avaliação do estado da arte relativa ao tema foram apresentados os mais atuais instrumentos de gestão ambiental e suas respectivas aplicações. Finalmente, foi realizado teste visando detectar a eventual presença de efeito estrogênico em amostras de dois sistemas de grande importância para a Região Metropolitana de São Paulo: a água da Represa Guarapiranga e o efluente da Estação de Tratamento de Esgotos Barueri. Os testes realizados foram do tipo in vivo, onde peixes machos da espécie Cyprinus carpio foram expostos a amostras destes dois sistemas e foi investigada a presença da proteína vitelogenina no plasma sanguíneo em concentrações anômalas. Verifica-se a necessidade premente de maiores estudos que foquem o efeito dos interferentes endócrinos na saúde e no meio ambiente, através de ensaios biológicos, de forma a municiar a sociedade de informações que permitam definir medidas estratégicas de atuação para minimização do impacto desta poluição. / Endocrine disrupters are substances that can play a role of deleterious efects in organisms health, growth and reproductive capability. They can be found in food, pharmaceuticals, chemical products and by-products and in diverse environmental matrixes, as air, soil, water and sediments. Because their ability to sinergistic, additive and antagonistic action, it is difficulty to determine the dose-response relationship, which is necessary for establishment of quality standards and monitoring measures. From the assessment of state-of-art about endocrine disrupters were present the most current environmental tools and applications. Finally, one test was performed to detect the possible presence of estrogenic effect in samples of two systems located in Metropolitan Region of São Paulo, from Guarapiranga Reservoir and the effluent from Wastewater Treatment Plant in Barueri. The tests in vivo were with male fish of the species Cyprinus Carpio, and investigated the presence of protein vitellogenin in blood plasma and in anomalous concentrations. There is a need for more studies that focus on the effect of endocrine disrupters on human health and the environment, by means of biological tests, in order to arm the society with informations to set strategic measures of performance for minimizing the impact of this kind of pollution.

Há evidências crescentes de que os desreguladores endócrinos (DE) podem afetar negativamente os seres humanos. Águas superficiais e subterrâneas são as principais fontes de obter a sua potabilidade, no entanto, podem ser contaminadas por DE, que não são totalmente removidos pelos processos convencionais de tratamento de água e esgoto. Alguns problemas de saúde estão relacionados à exposição dos seres humanos aos DE, sendo a obesidade um deles. Atualmente vive-se um aumento da prevalência da obesidade em todo o mundo, fato considerado preocupante, considerando-se seu potencial impacto no sistema de saúde, pois, as principais doenças crônicas como diabetes e doenças cardiovasculares, tem a obesidade como grande fator de risco. Por meio de revisão de literatura, este artigo buscou reunir publicações científicas relacionando a exposição aos DE com a obesidade, com o objetivo de verificar a importância de sua remoção dos corpos hídricos, preservando a saúde da população e da biota aquática. A maioria dos estudos selecionados sugere associação entre DE e obesidade em humanos. / There is growing evidence that endocrine disrupters (ED) may adversely affect humans. Surface and ground water are the main sources to get their potability however, can be contaminated by ED, which are not completely removed by conventional processes of water and sewage treatment. Some health problems are related to the exposure of humans to ED, obesity being one of them. Currently lives an increase in obesity prevalence worldwide, a fact considered worrying, considering its potential impact on the health care system, for major chronic diseases like diabetes and cardiovascular diseases have obesity as a major risk factor. Through literature review, this paper aims to gather scientific publications relating to exposure to ED with obesity, in order to verify the importance of their removal from water bodies, preserving the population\'s health and aquatic biota. Most of the selected studies suggest an association between ED and obesity in humans.