Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-01-18T13:42:59Z No. of bitstreams: 3 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Geórgia Leal.pdf: 846991 bytes, checksum: e4ce6f697fb752743fbdc68058dbd779 (MD5) Geórgia Leal.pdf: 846991 bytes, checksum: e4ce6f697fb752743fbdc68058dbd779 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-18T13:42:59Z (GMT). No. of bitstreams: 3 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Geórgia Leal.pdf: 846991 bytes, checksum: e4ce6f697fb752743fbdc68058dbd779 (MD5) Geórgia Leal.pdf: 846991 bytes, checksum: e4ce6f697fb752743fbdc68058dbd779 (MD5) Previous issue date: 2015-07-28 / O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos de uma suplementação crônica com ácido fólico sobre a função vascular (mecanismos contráteis e de relaxamento) de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e os possíveis mecanismos envolvidos. Os procedimentos foram aprovados pela Comissão de Ética em Experimentação Animal da UFPE. SHR machos com 4 meses de vida receberam ácido fólico na dose de 8mg/Kg, por dia, através de gavagem durante um período de 2 meses. Após o tratamento, estes animais foram submetidos a experimentos de reatividade vascular em anéis isolados de aorta e artérias mesentéricas de resistência (relaxamento à acetilcolina e ao nitroprussiato de sódio; contração à fenilefrina e noradrenalina), a experimentos de medida direta da pressão arterial e avaliação dos níveis plasmáticos de homocisteína. O relaxamento vascular dependente do endotélio mostrou-se aumentado em ambas às artérias dos animais tratados com ácido fólico quando comparado ao dos animais não-tratados. Incubação com tempol e apocinina em anéis de aorta e mesentérica de resistência aumentou o relaxamento vascular à acetilcolina no grupo não-tratado. No entanto, não houve alteração desse relaxamento no grupo tratado. Quanto ao relaxamento vascular ao nitroprussiato de sódio, não houve diferença significativa entre os grupos. Uma diminuição da hiper-reatividade vascular à fenilefrina e noradrenalina foi observada no grupo tratado com ácido fólico quando comparado com o grupo não-tratado. A pressão arterial e os níveis de homocisteína foram similares entre os grupos estudados. Dessa forma, estes resultados indicam que a suplementação crônica de ácido fólico foi capaz de melhorar a função vascular em SHR, ainda que a pressão arterial não tenha sido alterada. Nesse contexto, o nutriente parece aumentar a liberação de fatores vasorrelaxantes possivelmente por mecanismos que envolvem diminuição do estresse oxidativo. / Thus, the present work was designed to evaluate the effect of folic acid supplementation on vascular function (contractile and relaxation mechanisms) of spontaneously hypertensive rats and the possible mechanisms involved. The procedures were approved by the ethics committee in animal experimentation of UFPE. Male spontaneously hypertensive rats (SHR) at 4 months of age received supplementation with folic acid by 2 months at a dose of 8mg/kg by oral gavage. The animals were subjected to experiments of arterial blood pressure measurement in conscious rats, vascular reactivity study and evaluation of homocysteine levels. The endothelium-dependent vascular relaxation was increased in resistance mesenteric and aorta arteries from folic acid treated animals compared to untreated animals. Incubation with tempol and apocynin in aortic rings and mesenteric resistance artery increased vascular relaxation to acetylcholine in the untreated group. However, there was no change in this relaxation in the treated group. The vascular relaxation to the sodium nitroprussiate, there was no significant difference between groups. A decrease of the vascular hyper-reactivity to norepinephrine and phenylephrine was observed in the group treated with folic acid as compared with the untreated group. Blood pressure and homocysteine levels were not significantly different between groups. The present study suggests that folic acid supplementation improve vascular function in SHR. From this perspective, folic acid appears to increase vasodilator factors release possibly through mechanisms involving oxidative stress reduced.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:24:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1334_1.pdf: 2233146 bytes, checksum: 44ea069ca199552779b8f3fb08d87782 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Objetivo: Avaliar o efeito do cross-linking corneal (CCL) nos portadores de ceratopatia bolhosa sintomática, e seu impacto na acuidade visual, espessura corneal e sintomatologia dolorosa. Métodos: Doze pacientes com ceratopatia bolhosa sintomática foram incluídos. Exame clínico com questionário específico para a pesquisa com escala de dor (escala visual analógica numérica), acuidade visual e mensuração da espessura corneal foi realizada pré CCL, 7, 30, 60, 180 e 365 dias após. Em todos os pacientes o tratamento com UVA-crosslinking foi realizado após abrasão do epitélio corneal em lâmpada de fenda e instilação de solução de riboflavina 0,1% a cada cinco minutos por 30 minutos. Após esse período, o paciente foi submetido à exposição à luz UVA, utilizando riboflavina e anestesia tópica a cada cinco minutos por 30 minutos. Os pacientes utilizaram colírios de ofloxacina 0,3% e lágrima artificial até completa reepitelização. O teste de Friedman foi usado para comparar as médias das freqüências da acuidade visual, sintomatologia dolorosa e espessura central da córnea. p <0.05 foi utilizado para rejeitar a hipótese nula. Resultados: Doze olhos de 12 pacientes com erosões epiteliais recorrentes foram tratados. O tempo de seguimento foi de um ano. Foi observada redução significante da dor (p<0,001). As medidas de espessura corneal e da acuidade visual não sofreram alterações estatisticamente significantes. Conclusâo: Foi constatado o potencial de aplicação do cross-linking corneal no tratamento de pacientes com dor causada por ceratopatia bolhosa

O endotélio é a camada celular interna dos vasos sanguíneos, responsável pela homeostase vascular. Além disso, é a porta de entrada para as células de defesa frente a um quadro de inflamação. A camada endotelial é alvo de diversos estudos devido ao seu caráter de fácil expansão em cultura, porém sua biologia ainda não é completamente compreendida. Devido à sua localização privilegiada, o endotélio está susceptível a alterações da composição da corrente sanguínea. A melatonina, hormônio produzido ritmicamente pela glândula pineal e de forma não rítmica em diversos outros tecidos, tem propriedade citoprotetora. Diversos estudos já demonstraram que ela atua, por diferentes mecanismos de ação e faixas de concentração, como um mediador anti-inflamatório sobre o endotélio. Segundo a hipótese de trabalho de nosso grupo, o eixo imune-pineal, a glândula pineal e o sistema imunológico se interligam em uma comunicação bidirecional, na qual a produção rítmica de melatonina é inibida frente a um quadro de inflamação para que ocorra a montagem da resposta inflamatória independente da hora do dia. Assim sendo, esta dissertação se baseou na hipótese de que as células endoteliais apresentam um ritmo em sua maquinaria que altere a intensidade de resposta frente a um estímulo inflamatório, e propôs avaliar como a melatonina agiria na regulação desse ritmo. Dessa forma, avaliamos como o tratamento sistêmico com LPS afetaria a produção noturna de melatonina, modulando a reatividade de células endoteliais da microcirculação. Demonstramos que o tratamento com LPS diminui os níveis circulantes deste hormônio e inibe a transcrição gênica da enzima chave, AA-NAT. Na periferia, o tratamento com LPS aumenta a reatividade de células endoteliais independente da hora do dia de administração mesmo após 18 dias em cultura. Este efeito é transiente, pois quando o tratamento é realizado seis horas antes da morte, os parâmetros analisados retornam aos níveis basais. A melatonina, administrada juntamente com LPS, reverte o efeito do LPS sobre as células endoteliais, além de reduzir a concentração plasmática de TNF. Além disso, células endoteliais obtidas de animais mortos à noite possuem menor estado de ativação que células provenientes de animais mortos de dia. De maneira geral, o efeito observado sobre as células endoteliais é inversamente correlacionado com a concentração plasmática de melatonina. Esses dados sugerem que as células endoteliais possuem uma espécie de \"memória celular\", pois armazenam as informações do estado do animal doador mesmo após todos os procedimentos em cultura. Adicionalmente, demonstramos a dinâmica do eixo imune-pineal in vivo. Juntamente, nossos dados permitem concluir que a melatonina prima as células endoteliais, modulando sua reatividade de acordo com a hora do dia e o estado de saúde do animal. / The endothelium is the vascular internal cellular layer, responsible for vascular homeostasis. Additionally, it regulates immune cells entrance during an inflammatory response. The endothelial layer is the focus of many studies due to its facility of culture expansion, but its biology is not yet totally understood. Because of its privileged localization, the endothelium is susceptible to plasma compounds changes. Melatonin, rhythmically produced by pineal gland and in a non rhythm way in others tissues, has citoprotector properties. Many studies have already shown that melatonin acts on endothelium as an anti-inflammatory mediator, through different mechanisms of action and concentrations ranges. Considering our work hypothesis, the immune-pineal axis, that suggests that the pineal gland and immune system are integrated through a bidirectional communication, melatonin rhythm production is inhibited during an injury, permitting the mounting of immune response independently of the hour of the day. This dissertation is based on the hypothesis that endothelial cells presents a rhythm in its machinery that alters the response intensity due to an inflammatory stimuli. We analyzed how LPS systemic treatment affects the melatonin nocturnal production, modulating the endothelial cells reactivity of microcirculation. We demonstrated that LPS treatment reduced plasma melatonin level and inhibited gene transcription of key enzyme, AA-NAT. On the periphery, LPS treatment increased endothelial cells reactivity independently of the hour of the day even after 18 days in culture. This effect was transient, once the parameters analyzed returned to basal levels when the treatment was done six hours before the death. Melatonin administrated together with LPS, reverted LPS effects on the endothelial cells, and also reduced plasma TNF concentration. Endothelial cells obtained from animal killed at nighttime are more activated than cells obtained from animals killed at daytime. Generally, the endothelial cells effects are inversely correlated with plasma melatonin level. These data suggests that endothelial cells have a \"cellular memory\", because they are capable to retain the information of donor animal state even after all culture proceedings. Additionally, we demonstrated the immune-pineal axis dynamics in vivo. All together, our results permit to conclude that melatonin primes the endothelial cells, modulating their reactivity according to the hour of the day and donor animal health.

Doctor en Bioquímica / La angiogénesis es la formación de nuevos capilares a partir de vasos preexistentes. La utilización de agentes capaces de inhibir este proceso podría ofrecer opciones terapéuticas para patologías dependientes del abastecimiento de nutrientes a través de la sangre, como el cáncer, obesidad, o desórdenes inflamatorios. Calreticulina (CRT) es una proteína multifuncional, altamente conservada, expresada en todas las células nucleadas. Se ha reportado que calreticulina humana (HuCRT) y su dominio N-terminal, vasostatina, interfieren con la angiogénesis inhibiendo la proliferación de células endoteliales y la interacción de éstas con laminina, una proteína de la membrana basal. Previamente, hemos descrito que CRT de T. cruzi (TcCRT), es antiangiogénica en el ensayo in vivo de membrana corioalantoídea de pollo. Este efecto se correlaciona con propiedades antineoplásicas reportadas para la infección tripanosómica con varias cepas del parásito. El objetivo de la presente Tesis fue contribuir al conocimiento de los mecanismos celulares que median el efecto antitumoral de la infección chagásica, centrándose en el posible papel de TcCRT, en virtud de posibles efectos antiangiogénicos expresados en modelos in vitro y ex vivo. Para ello se propusieron tres Hipótesis: 1. TcCRT manifiesta efectos antiangiogénicos in vitro y ex vivo en modelos de vertebrados, 2. El efecto antiangiogénico de TcCRT se explica, al menos en parte, por su interacción directa con células endoteliales, inhibiendo su proliferación, y 3. La actividad antiangiogénica de TcCRT se localiza en su dominio N-terminal (N-TcCRT), y su unión a laminina inhibe la adhesividad de células endoteliales a ésta. Los objetivos específicos propuestos para dar cuenta de estas hipótesis fueron: 1. Determinar si TcCRT y su dominio N-terminal inhiben la angiogénesis en ensayos in vitro y ex vivo, a partir de células endoteliales de cordón umbilical humano (HUVECs) y de anillos de aorta de rata, 2. Determinar si TcCRT se une a células endoteliales, 3. Estudiar el efecto comparativo equimolar de HuCRT, TcCRT y N-TcCRT sobre la proliferación de HUVECs, 4. Estudiar el efecto de TcCRT sobre la quimiotaxis de células endoteliales, 5. Determinar si TcCRT se une a laminina 6. Determinar si la interacción TcCRT/laminina inhibe la adhesión de HUVECs a esta última proteína y 7. Determinar el efecto de TcCRT sobre la expresión de genes reguladores del proceso angiogénico en HUVECs. Los ensayos ex vivo mostraron que TcCRT inhibe el crecimiento capilar en anillos aórticos de rata en forma dosis-dependiente. N-TcCRT (aa 20-191) también inhibió completamente el crecimiento capilar. TcCRT tuvo un efecto inhibitorio dosis-respuesta en experimentos de morfogénesis capilar in vitro, utilizando HUVECs. Comparaciones equimolares de TcCRT con su contraparte humana, mostraron que la molécula parasitaria y el dominio N-terminal, tienen un efecto inhibitorio claramente superior. Los dominios R (R-TcCRT) y S (S-TcCRT) de la proteína parasitaria (aa 136-281 y 159-281 respectivamente) no afectaron la morfogénesis capilar de HUVECs. Mediante experimentos de fluorescencia, demostramos que TcCRT se une y es internalizada por HUVECs y células de la línea endotelial EAhy926. La internalización es inhibida por fucoidina. TcCRT inhibió la proliferación de HUVECs en forma dosis y tiempo-dependiente. Este efecto es independiente de apoptosis. Cuando comparamos la acción de la molécula parasitaria y de su dominio N-terminal con la de la humana, sobre la proliferación de HUVECs, no encontramos diferencias significativas en condiciones equimolares. R-TcCRT no tuvo efecto en la proliferación de HUVECs. Mediante experimentos de migración, determinamos que TcCRT inhibe la migración de HUVECs y células EAhy926 en forma dosis-dependiente. En ELISA TcCRT, R-TcCRT y S-TcCRT, se unen a laminina en forma dosis-dependiente, pero en contraste con los resultados obtenidos con la molécula humana, esta interacción no afecta la adhesión de las células endoteliales a esta proteína. Finalmente, mediante experimentos de RT-PCR en tiempo real, determinamos que la incubación de HUVECs con TcCRT por 24 h, no activa la expresión de genes antiangiogénicos. En síntesis, en este trabajo demostramos un efecto antiangiogénico de TcCRT y su dominio Nterminal en células endoteliales arteriales y venosas de dos especies, Rattus rattus y Homo sapiens, en ensayos ex vivo e in vitro. Este efecto se correlaciona con la inhibición de la morfogénesis capilar, proliferación y migración de las células endoteliales, y también con la internalización de TcCRT en células endoteliales. Estas propiedades de TcCRT podrían explicar, al menos en parte, la resistencia relativa a ciertas agresiones por tumores sólidos inducida por infecciones tripanosómicas / Angiogenesis is the growth of new blood vessels from the pre-existing ones. The use of agents capable of inhibit this process would offer therapeutic options for pathologies dependent on blood supplied nutrients, such as cancer, obesity and inflammatory disorders. Calreticulin (CRT) is a multifunctional, highly conserved protein, expressed in every nucleated cell. It has been reported that human calreticulin (HuCRT), and its N-terminal domain, vasostatin, interferes with angiogenesis by inhibiting endothelial cell proliferation and their attachment to laminin, a basement membrane protein, by binding to it. Previously, we have described that T. cruzi calreticulin (TcCRT) is antiangiogenic in the in vivo chorioalantoid membrane chicken assay, which correlates with the reported anti-neoplasic properties for trypanosomic infection with several strains of the parasite. The aim of the present Thesis was to contribute furthermore to the knowledge of the cellular mechanisms that mediate the antitumoral effect of chagasic infection, focusing on the possible role of TcCRT, expressed in in vitro and ex vivo models. We proposed three Hypotheses: 1. TcCRT shows antiangiogenic effects in in vitro and ex vivo vertebrate models, 2. The TcCRT antiangiogenic effect is explained, at least partly, by its direct interaction with endothelial cells, inhibiting their proliferation, and 3. the antiangiogenic TcCRT activity is located on its N-terminal domain (NTcCRT), and its binding to laminin inhibits endothelial cell attachment. The proposed specific objectives were: 1. To determine if TcCRT and its N-terminal domain inhibits angiogenesis in in vitro and ex vivo assays, on human vein endothelial cells (HUVECs) and rat aortic rings, 2. To determine if TcCRT binds to endothelial cells, 3. To study the equimolar comparative effect of HuCRT, TcCRT and N-TcCRT on HUVECs proliferation, 4. To study the TcCRT effect on endothelial cell chemotaxis, 5. To determine if TcCRT binds to laminin, 6. To determine if TcCRT/laminin interaction inhibits endothelial cell attachment to laminin and 7. To determine the TcCRT effect on the expression of angiogenic genes in HUVECs. The ex vivo assays showed that TcCRT inhibits capillary growth on rat aortic rings, in a dosedependent manner. Complete capillary growth abrogation was also observed with N-TcCRT (aa 20- 191) incubation. TcCRT had a dose-response inhibitory effect in in vitro capillary morphogenesis experiments on HUVECs. When TcCRT and N-TcCRT were compared at equal molarities with HuCRT, the effects of the parasite derived molecules were clearly stronger than those of the human counterpart. The R (R-TcCRT) and S (S-TcCRT) domains of the parasite protein (aa 136-281 and 159-281 respectively) did not affect capillary morphogenesis. By fluorescence experiments we demonstrated that TcCRT binds and is internalized by HUVECs and EAhy926 endothelial cell line. The internalization was competed by fucoidan. TcCRT inhibited HUVECs proliferation in a dose and time-dependent manner. This effect is apoptosis independent. Non significant differences were observed in the proliferation inhibition capacity at TcCRT, N-TcCRT and HuCRT equimolar concentrations. R-TcCRT had no significant effect on HUVECs proliferation. HUVECs and EAhy cells migration was inhibited by TcCRT in a dose-response manner. TcCRT and its R and S domains bind to laminin in ELISA assays, but in contrast to the observed effects of the human molecule, this interaction does not impedes cell attachment to this protein. Finally by carrying out real time RTPCR experiments, we determined that HUVECs incubation with TcCRT for 24 h, does not activate the antiangiogenic gene expression. In synthesis, in this work we demonstrated an antiangiogenic effect of TcCRT and N-TcCRT on arterial and venous endothelial cells from two species, Rattus rattus and Homo sapiens, in ex vivo and in vitro assays. This effect correlates to capillary morphogenesis, proliferation and migration inhibition of endothelial cells, and also with TcCRT internalization to endothelial cells. These properties could explain, at least partly, the relative resistance to certain solid tumor aggressions induced by trypanosomic infections

A destruição crônica do aparato periodontal devido a resposta inflamatória a bactérias, leva a um quadro clínico conhecido como doença periodontal. Patógenos periodontais podem ser translocados e liberados do sulco gengival à circulação sanguínea e apresentar efeitos periféricos. A bolsa periodontal também é importante reservatório de mediadores inflamatórios. A periodontite pode apresentar efeitos em órgãos distantes. Estudos passaram a documentar a relação entre doença periodontal e disfunção endotelial, reversível pelo tratamento odontológico. Nosso laboratório estudou a resposta vasomotora in vitro de anéis de aorta de ratos com periodontite, e os resultados preliminares mostram um aumento da resposta contrátil destes anéis à norepinefrina, quando comparado aos animais controle. O presente estudo objetiva avaliar a influência da periodontite induzida por ligadura em ratos sobre a resposta vasomotora in vitro de anéis de artéria mesentérica. Ainda, caracterizar os mediadores envolvidos, com ênfase nas enzimas ciclooxigenase e óxido nítrico sintase. / Chronic destruction of periodontal apparatus due to an intense inflammatory response to bacteria leads to a clinical condition known as periodontal disease. Periodontal pathogens can then translocate to the gingival sulcus and reach the bloodstream, and thus have peripheral effects. The periodontal pocket is also an important reservoir of inflammatory mediators. The periodontitis may have effects on organs distant. Studies have also documented the relationship between periodontal disease and endothelial dysfunction, which was reversible by dental treatment. In our laboratory we are studying the vasomotor response \"in vitro\" of aortic rings from rats with periodontitis, and the preliminary results show an increase in the contractile response of the rings to norepinephrine, when compared with control animals. This project aims to evaluate the influence of ligature-induced periodontitis in rats on the \"in vitro\" vascular reactivity of mesenteric artery vessels. Also, the characterization of the mediators involved, with emphasis on the enzyme of cyclooxygenase and nitric oxide synthase.

Diversos estudos, in vivo e in vitro, demonstraram a atividade antitumoral da Crotoxina (CTX), toxina majoritária do veneno de serpente Crotalus durissus terrificus, porém, não foi demonstrada, até o momento, a ação desta toxina sobre eventos envolvidos com a neovascularização, essenciais para o crescimento e sobrevivência do tumor. Assim, neste estudo foi investigado o efeito in vitro da CTX sobre os eventos envolvidos com a angiogênese. A CTX inibiu, principalmente na concentração de 1,2µg/mL, a proliferação, adesão e a morfologia das células endoteliais murinas derivados do hemangioma do timo (t.End.1) sobre as matrizes de laminina, colágeno tipo I e fibronectina, bem como a migração por meio dos modelos de cicatrização (Wound Healing), quimiotaxia (transwell) e a formação de tubos no matrigel 3-D, tanto na presença de meio de cultura como no meio condicionado de célula tumoral. Ainda, a CTX inibiu a distribuição das subunidades v e 2 de integrinas e a polimerização do citoesqueleto de actina, evidenciados em microscopia confocal. Os resultados demonstram, pela primeira vez, que a CTX inibe os principais eventos envolvidos com a angiogênese, podendo contribuir de forma importante para o efeito inibitório da toxina sobre a progressão tumoral. / Several studies, in vivo and in vitro have demonstrated antitumor activity of Crotoxin (CTX), the major toxin of Crotalus durissus terrificus venom. Despite evidence of antitumor action of CTX, was not demonstrated yet the action of this toxin on basic parameters for neovascularization, essential for the growth and survival of the tumor. The formation of new blood vessels is the principal process of angiogenesis and involves adhesion, proliferation and migration of endothelial cells to reach remote targets, assembly of endothelial cells into new capillary tubes. CTX (1.2 µg/mL, for 1 hour incubation), inhibited cell proliferation, adhesion, migration, scratch wound healing and capillary-like tube formation on 3-D matrix of endothelial cells line derived from thymus (t.End.1) evaluated in vitro assay at culture medium or conditioned medium obtained from tumour cells culture. Also, this toxin interfered with the distribution of the integrin subunits 2 and v and with the cytoskeleton rearrangement these cells, evidenced in confocal microscope. Taken together, these results demonstrated for the first time, that CTX inhibits key events involved in the angiogenesis process, and may contribute for inhibitory effect of the toxin on tumor progression.

Introdução: As doenças cardiovasculares representam a principal causa de morte no mundo, sendo o aumento da concentração de colesterol sanguíneo um dos seus principais fatores de risco. O processo aterosclerótico envolve não apenas a deposição de colesterol nas artérias, mas a inflamação tem papel central em todas as fases do processo aterosclerótico. Estudo em animais mostrou, por sua vez, que a proteína de feijão caupi é um potente redutor na concentração de colesterol sangüíneo. Objetivo: Avaliar a influência da proteína de feijão caupi sobre o perfil lipídico, apolipoproteínas, glicose, insulina, HOMA-IR, marcadores de inflamação e de disfunção endotelial em pacientes hipercolesterolêmicos. Métodos: A proteína de feijão caupi foi isolada por precipitação isoelétrica da farinha de feijão caupi desengordurada. O isolado protéico de caupi (IPC) foi utilizado no desenvolvimento do shake à base de proteína de caupi, caseinato de cálcio foi utilizado para desenvolvimento do shake controle. Realizou-se um ensaio clínico do tipo crossover, aleatorizado, cego e controlado. Uma amostra de 44 indivíduos hipercolesterolêmicos foi dividida em 2 grupos (Grupo Controle e Grupo IPC), cada grupo recebeu shake caseína e shake IPC, respectivamente, por 6 semanas cada. Depois do washout de 4 semanas, os indivíduos receberam o shake oposto por mais 6 semanas. Foram quantificadas as variáveis bioquímicas: colesterol total, LDL-c, HDL-c, triglicerídeos, colesterol não-HDL, apo A1, apo B, razão LDL/HDL, razão TG/HDL, razão apo B/apo A1, glicose de jejum, insulina de jejum, HOMA-IR (modelo de avaliação da homeostase), proteína C reativa (PCR), molécula de adesão intercelular solúvel-1 (sICAM-1) e molécula de adesão vascular solúvel-1 (sVCAM- 1) antes e após cada período experimental. A diferença entre os shakes foi analisada com ANOVA para medidas repetidas ao nível de significância de 5 por cento . Resultados: A amostra final foi composta por 38 indivíduos com idade média de 57 anos. A redução em cadeia (delta após consumo de proteína de feijão caupi menos delta após consumo de caseína) no colesterol total foi de 21,0 mg.dL-1 (p < 0,001), CT( por cento ) foi de 8,4 por cento (p < 0,001), LDL( por cento ) foi de 14,4 por cento (p < 0,001), colesterol não-HDL foi de 24,3 mg.dL-1 (p < 0,001) e apo B foi de 15,5 mg.dL-1 (p < 0,001). A ingestão de proteína de caupi afetou significativamente o HDL-c e a mudança em cadeia observada foi um aumento de 3,2 mg.dL-1 (p =0,044). Os marcadores de metabolismo glicídico (glicose de jejum, insulina de jejum e HOMA-IR), bem como os marcadores de inflamação (PCR) e de disfunção endotelial (sVCAM-1 e sICAM- 1) não sofreram modificações significativas após consumo de proteína de feijão caupi (p > 0,05). Conclusão: O presente estudo mostra que a ingestão diária de 25 g de proteína de feijão caupi durante 6 semanas é capaz de reduz os níveis de colesterol sanguíneo, em especial a fração LDL-c; no entanto, não parece exercer influência sobre os marcadores de inflamação subclínica e de disfunção endotelial. Portanto, o aumento do consumo de feijão caupi pode representar uma alternativa eficaz, barata e viável na melhora dos níveis lipídicos em indivíduos hipercolesterolêmicos / Introduction: Cardiovascular diseases are the leading cause of death worldwide, and the increase of cholesterol in blood is one of their main risk factors. The atherosclerotic process involves not only the deposition of cholesterol in the arteries, inflammation plays a central role in all stages of atherosclerosis. Animal study showed that the protein of cowpea is a potent reducer of blood cholesterol. Objective: To evaluate the influence of cowpea protein on blood lipids, apolipoproteins, glucose, insulin, HOMA-IR, markers of inflammation and endothelial dysfunction in hypercholesterolemic patients. Methods: The protein of cowpea was isolated by isoelectric precipitation of defatted flour of cowpea. Cowpea protein isolate (CPI) was used to develop the cowpea protein shake, and calcium caseinate was used for development of the control shake. A cross-over, randomized, blinded and controlled clinical trial was conducted with a sample of 44 hypercholesterolemic subjects, which was divided into two groups (control group and CPI group). Each group received casein shake and CPI shake, respectively, for taken for 6 weeks. After this period and a 4-week washout, subjects received the opposite shake for taken for 6 weeks. Biochemical variables were measured: total cholesterol, LDL-C, HDL-C, triglycerides, non-HDL cholesterol, apo A1, apo B, LDL/HDL ratio, TG/HDL ratio, apo B/apo A1 ration, fasting glucose, fasting insulin, HOMA-IR (homeostasis model assessment), C-reactive protein (CRP), soluble intercellular adhesion molecule-1 (sICAM-1) and soluble vascular adhesion molecule-1 (sVCAM-1) before and after each experimental period. The difference between the shakes was analyzed with repeated measures analysis of variance (ANOVA) at a significance level of 5 per cent . Results: The final sample consisted of 38 subjects with mean age of 57 years. The net changes in serum total cholesterol concentrations was a decrease of -21.05 mg.dL-1 (p < 0.001), in total cholesterol was -8.42 per cent (p < 0.001), in LDL-c was -14.36 per cent (p < 0.001), in non-HDL cholesterol was -24.29 mg.dL-1 (p < 0.001) and apoB was -15.55 mg.dL-1 (p < 0.001). Cowpea protein intake significantly affected serum HDL-c concentrations, the net change was a increase of 3.24 mg.dL-1 (p= 0,044). Markers of glycemic control (fasting glucose, fasting insulin and HOMA-IR) and inflammation markers (CRP) and endothelial dysfunction (sICAM-1 and sVCAM-1) have not changed significantly after consumption of cowpea protein (p > 0.05). Conclusion: This study shows that daily intake of 25 g of cowpea protein for 6 weeks can reduce levels of blood cholesterol, especially LDL-c, however did not exhibit influence on markers of subclinical inflammation and endothelial dysfunction. Therefore, the consumption of cowpea can be an effective, inexpensive and feasible way to control blood lipids of hypercholesterolemic subjects

A CTX estimula, in vivo e in vitro, a capacidade secretória de macrófagos na presença de tumor, acompanhado por significativa diminuição da massa tumoral ou proliferação de células tumorais, respectivamente. Considerando a ação imunomodulatória da CTX, a importância central do macrófago na gênese e progressão tumoral e a participação desta célula no microambiente estromal, a atividade secretória de macrófagos tratados com CTX sobre a angiogênese in vitro foi investigada. Células endoteliais tímicas (t.End.1), quando incubadas na presença de macrófagos tratados com CTX (0,3µg/mL) ou sobrenadantes desses macrófagos apresentaram significativa inibição da proliferação, da adesão aos seus ligantes naturais (colágeno I-10µg/mL; fibronectina-3µg/mL e laminina-10 µg/mL) e do número de células migradas, em modelo de Wound healing, bem como a velocidade de migração, avaliada em Time Lapse. Consequentemente, houve inibição da formação de tubos no matrigel-3D, acompanhada pela diminuição da concentração de VEGF e TNF-. Ainda, o bloqueio dos receptores peptídeo formil (FPRs) aboliu as atividades inibitórias dos macrófagos tratados com a toxina, evidenciando a importância destes receptores para a ação da CTX sobre a atividade antiangiogênica de macrófagos. / CTX stimulates, in vivo and in vitro, the macrophages secretory capacity in the presence of tumor, accompanied by a significant tumor mass reduction and tumor cells or inhibition of the proliferation, respectively. Considering the immunomodulatory action of CTX, the pivotal importance of macrophages in the genesis, tumor progression and in the stromal microenvironment, the macrophages secretory activity treated with CTX on angiogenesis was investigated in vitro. Thymic endothelial cells (t.End.1), when incubated in the presence of macrophages treated with CTX (0.3g/ml) or supernatants of these macrophages showed significant inhibition of proliferation, adhesion to its natural ligands (Type I collagen-10mg/ml ; fibronectin-3g/ml and laminin-10/mL), and of the cell number migrated in Wound healing model as well as the cell migration velocity, evaluated in Time Lapse. Consequently, there was inhibition of the cappilary-like tube formation on matrigel-3D matrix, accompanied by VEGF and TNF- secretion decrease. Further, the formyl peptide receptor (FPRs) blockade abolished the inhibitory activity of the macrophages treated with the toxin, suggesting the importance of these receptors to the action of CTX on the macrophages antiangiogenic activity.

A privação do sono é um problema sério nos tempos atuais e pode ter graves conseqüências para a fisiologia humana. De fato, a redução no tempo de sono tem sido associada a um notável aumento na incidência de hipertensão arterial, diabetes mellitus, infarto do miocárdio, acidente vascular cerebral e estresse, porém os mecanismos envolvidos são pobremente compreendidos. Objetivos: Avaliar o impacto da privação parcial do sono na função endotelial venosa e no controle autonômico cardiovascular em homens saudáveis. Métodos: Treze voluntários do sexo masculino, saudáveis e com idade média de 31±2 anos, tiveram o sono monitorado por diário de sono e actigrafia de pulso durante 12 noites consecutivas, nas quais foram divididas em 2 dois períodos. Um período de 5 noites denominado de privação parcial do sono (dormir<5h por noite) e outro de 5 noites denominado de sono controle (dormir>7h por noite). Entre estes períodos, foi interposto por 2 noites de sono irrestrito (com pelo menos de 7 horas de sono por noite). A escolha do período inicial de sono foi randomizada. Ao término de cada período de 5 dias, foi analisada a reatividade vascular venosa (com a técnica da veia do dorso da mão, Dorsal Hand Vein), a sonolência diurna excessiva (através da Escala de Sonolência de Epworth), realizada avaliação hemodinâmica e autonômica (no momento em repouso e mediante o teste de inclinação postural tilt test), exames de sangue e dosagem de norepinefrina plasmática. A freqüência cardíaca e pressão arterial de batimento a batimento na posição supina e com a manobra de \"tilt test\" foi monitorado com intervalo (RR) e variabilidade de pressão arterial. Resultados: Os indivíduos dormiram em média 8.0 h durante o período de sono controle e 4.5 h no período de privação parcial do sono, sendo a diferença significativa entre os mesmos (p<0.01). O período privação de sono não mudou a frequência cardíaca e a pressão arterial basal significativamente, mas promoveu um aumento significante em baixas freqüências cardíacas e variabilidade da pressão arterial, como também na norepinefrina plasmática. O \"tilt test\" promoveu uma queda em PA sistólica depois da privação parcial do sono, que foi significativamente maior depois do período de sono controle (p<0.05). A privação parcial do sono causou uma redução significantiva na venodilatação endotélio-dependente e não mudou venodilatação endotélio-independente. Conclusão: Privação parcial do sono durante só 5 noites já é o suficiente para causar disfunção endotelial venosa, um aumento significantivo na atividade simpática e no prejuízo do controle da pressão arterial / Background: Sleep curtailment is a serious and common problem in western societies and can have significant consequences in the human physiology. In fact epidemiological studies showed that sleep deprivation (reduction in sleeping time) is associated with increased blood pressure, higher incidence of diabetes mellitus, myocardial heart attack, strokes in the brain, and stress, however the mechanisms are poorly understood. Objectives: Evaluate the impact of partial sleep deprivation in the venous endothelial function and the autonomic cardiovascular autonomic control in healthy men. Methods: Thirteen healthy male volunteers (average age: 31±2 years) had their sleep monitored by sleep diary and wrist actigraphy during 12 consecutive nights, these were divided into two periods. The subjects were randomized and crossed over to 5 nights of control sleep (> 7hs) and 5 nights of partial sleep deprivation (<5hs), interposed by 2 nights of unrestricted sleep (at least 7 hours sleep per night). The choice of the initial sleeping period was randomized. At the end of each period of 5 days heart rate and beat-to-beat blood pressure in the supine position and head up tilt test maneuver were monitored with off line determination of RR-interval and blood pressure variability. In addition, serum norepinephrine and venous endothelial functions were measured by dorsal hand vein technique; also we performed the evaluation of excessive day sleepiness (evaluated through the Epworth Sleepiness Scale), hemodynamic and autonomous evaluation (during sleep and through the tilt test). Results: The subjects slept 8.0 and 4.5 hs during control and partial sleep deprivation periods, respectively (p<0.01). Sleep deprivation did not change significantly the resting heart rate and blood pressure but promoted a significant increase in the low frequency bands of heart rate and blood pressure variability as well as serum norepinephrine. Tilt test promoted a significantly greater drop in systolic BP after partial sleep deprivation than after control sleep (p<0.05). Partial sleep deprivation caused a considerable reduction of acetylcholine induced venodilatation (endothelium dependent) and did not change sodium nitroprusside venodilatation (independent from the endothelium). Conclusion: Partial sleep deprivation for only 5 nights is sufficient to cause significant increase in sympathetic activity, impairment of blood pressure control and endothelial dysfunction

Made available in DSpace on 2017-07-21T14:13:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Willian Moreira Machado.pdf: 833860 bytes, checksum: b7acc75cbcbeaee87101553fc891d9af (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Fundação Araucária de Apoio ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Paraná / Periodontitis is a chronic inflammatory disease initiated and perpetuated by Gram-negative anaerobic bacteria that colonize the subgingival area. This disease is characterized by destruction of periodontal tissue insertion, bone resorption, leukocyte infiltration and formation of periodontal pockets. Studies show a significantly increased risk of cardiovascular disease, especially atherosclerosis and hypertension, among people with periodontitis. It is believed that systemic inflammation induced by periodontal disease and decreased nitric oxide bioavailability would cause endothelial dysfunction, which consequently leads to cardiovascular disease. Interestingly, studies show that statins that has been providing consistent and satisfactory results in reversal of endothelial dysfunction. Thus, the purpose of this study was to evaluate the effect of systemic administration of simvastatin on inflammatory parameters induced periodontitis and correlate their possible actions in the cardiovascular system and in alveolar bone loss. Wistar rats were subjected to induction of periodontitis by placement of ligatures or were subjected to false-surgery (the ligatures were immediately placed and removed). On day 8, the animals were randomized to treatment with simvastatin (10 mg/kg/day p.o.) or vehicle.During the experiment, on days 1, 7 and 14 the rats were prepared for analysis of systolic blood pressure and heart rate. And on day 14, the rats were prepared for analysis of cardiovascular parameters, lipid profile, systemic inflammatory markers and tissue injury. The maxilla and mandible were removed for analysis of bone loss. Our data show that animals with untreated periodontitis showed an endothelium-dependent vasodilator response (acetylcholine) reduced a characteristic of endothelial dysfunction in animals with periodontal disease. In contrast, we found an increased vasodilatory response in animals with periodontitis treated with simvastatin. The vascular changes induced by treatment with simvastatin were associated with a decrease in lipid profile, and lymphocytic inflammatory markers such as IL-6 and C-reactive protein, which are traditionally associated with cardiovascular risk. And interestingly, simvastatin decreased alveolar bone loss in animals with periodontitis. Our data show that simvastatin reduces alveolar bone loss, systemic inflammation and damage to the endothelium induced periodontitis. Thus, simvastatin can be considered a promising drug for the treatment of periodontal disease and prevention of cardiovascular complications. / A periodontite é uma doença inflamatória crônica iniciada e perpetuada por bactérias anaeróbicas Gram-negativas que colonizam a área subgengival. Esta doença é caracterizada pela destruição do tecido periodontal de inserção, reabsorção óssea, infiltração de leucócitos e formação de bolsa periodontal. Estudos mostram um aumento significativo do risco de doenças cardiovasculares, principalmente aterosclerose e hipertensão, entre pessoas com periodontite. Acredita-se que a inflamação sistêmica induzida pela doença periodontal e a diminuição da biodisponibilidade de óxido nítrico seriam a causa da disfunção endotelial, que consequentemente leva a doenças cardiovasculares. Interessantemente, estudos mostram que as estatinas vêm proporcionando resultados consistentes e satisfatórios na reversão da disfunção endotelial. Assim, a proposta deste trabalho foi avaliar o efeito da administração sistêmica da sinvastatina sobre parâmetros inflamatórios de periodontite induzida e correlacionar suas possíveis ações no sistema cardiovascular e na perda óssea alveolar. Ratos Wistar foram submetidos a indução da periodontite através da colocação de ligaduras ou eram submetidos a falsa-cirurgia (as ligaduras eram colocadas e imediatamente removidas). No dia 8, os animais foram novamente randomizados para receber o tratamento com a sinvastatina (10 mg/kg/dia v.o.) ou veículo. Durante o experimento, nos dias 1, 7 e 14 os ratos eram preparados para análise da pressão arterial sistólica e frequência cardíaca. E no dia 14, os ratos foram preparados para análise de parâmetros cardiovasculares, perfil lipídico, marcadores inflamatórios sistêmicos e de lesão tecidual. A maxila e a mandíbula eram retiradas para a análise da perda óssea. Nossos dados mostram que os animais com periodontite não tratados apresentaram uma resposta vasodilatadora endotélio-dependente (acetilcolina) reduzida, uma característica da disfunção endotelial em animais com doença periodontal. Em contrapartida, foi encontrada uma resposta vasodilatadora aumentada em animais com periodontite tratados com sinvastatina. As alterações vasculares induzidas pelo tratamento com sinvastatina foram associadas com uma diminuição do perfil lipídico, linfocitário e marcadores inflamatórios como IL-6 e proteína C-reativa, que são tradicionalmente associados com o risco cardiovascular. E interessantemente, a sinvastatina diminuiu a perda óssea alveolar nos animais com periodontite. Nossos dados mostram que a sinvastatina reduz a perda óssea alveolar, inflamação sistêmica e o dano ao endotélio induzidos pela periodontite. Desta forma, a sinvastatina pode ser considerada uma droga promissora para o tratamento da doença periodontal e prevenção de complicações cardiovasculares.