Actualmente en la mayoría de las bodegas, los vinos se elaboran a partir de mostos inoculados con cultivos de levaduras vínicas seleccionadas, cultivos iniciadores que suelen comercializarse en forma deshidratada denominada Levadura Seca Activa (LSA). La producción de LSA conlleva el procesado y deshidratación de la biomasa de levadura hasta obtener un producto final con un porcentaje de humedad residual por debajo de 8 %. Este procesamiento produce cierta pérdida de viabilidad y vitalidad en las células de levadura que puede reflejarse en su eficiencia para desarrollar el proceso posterior de vinificación. Los análisis comparativos realizados en nuestro grupo de investigación entre células de levadura frescas y células deshidratadas, incluido este trabajo, muestran que se produce una importante pérdida de capacidad fermentativa durante la deshidratación indicando la necesidad de conocer a nivel molecular el efecto de este proceso sobre las células de levadura con el fin de diseñar estrategias de mejora biotecnológicas.En este trabajo se ha abordado el estudio del estado fisiológico de la levadura vínica T73 durante la etapa de procesamiento y deshidratación. Por un lado, se ha caracterizado la respuesta a estrés desencadenada en la célula de levadura vínica durante el proceso de deshidratación a partir de muestras obtenidas en simulaciones de la producción industrial de LSA a escala de laboratorio, para las cuales fue necesario el diseño previo de dicha simulación, y su contrastación con muestras obtenidas en simulaciones a escala de planta piloto y lotes industriales de LSA. Este análisis comparativo de simulaciones del proceso industrial a diferentes escalas muestra diferencias evidentes en las propiedades tecnológicas de las levaduras, dependientes de la modalidad del cultivo empleado para la propagación de la biomasa y de los protocolos de deshidratación aplicados, aunque sin invalidar el uso de aproximaciones a escala de laboratorio como herramienta inicial para el abordaje de los puntos críticos del proceso industrial. La respuesta molecular observada en las células de levadura a nivel de expresión génica y parámetros bioquímicos de estado redox y la evaluación del daño oxidativo celular en las diferentes simulaciones presentaron ciertas similitudes que condujeron a destacar la existencia de estrés oxidativo durante la deshidratación y la respuesta a este estrés como una de las más relevantes.Por otro lado, se ha estudiado el efecto de la acumulación de trehalosa en el estado fisiológico de la levadura durante el secado. Esta molécula se ha descrito como metabolito de protección frente a diversos estreses, entre ellos la deshidratación, por lo que se han construido mediante técnicas de ingeniería genética cepas vínicas sobreacumuladoras de trehalosa en las que han sido eliminadas sus actividades degradativas por deleción de los genes correspondientes. El estudio previo realizado en cepas de laboratorio en condiciones de deshidratación osmótica por adición de NaCl, y posteriormente el estudio en la cepa vínica T73 en condiciones de simulación de la deshidratación industrial, indicaron que la actividad trehalasa ácida Ath1p participa en la movilización de trehalosa intracelular y que, junto con la trehalasa neutra Nth1p y la trehalasa Nth2p, de la que se desconocía su participación en la hidrólisis de este metabolito, constituyen una maquinaria degradativa de trehalosa que compatibiliza la acumulación de este disacárido durante la respuesta a estrés con su rápida eliminación para la adecuada recuperación del crecimiento. Además la deleción del gen ATH1 en la cepa vínica T73 se perfiló como una estrategia de modificación genética adecuada para la mejora de la resistencia a la deshidratación. / Nowdays, the use of yeast starter cultures for grape must inoculation is an extended practice in wineries. They are mainly in the form of Active Dry Yeast (ADY) with less than 8 % residual moisture. The wine yeast dehydration can produce viability and vitality lost affecting negatively to the subsequent vinification process. This study includes a molecular and physiological characterization of the stress response in the wine yeast strain T73 during handling and drying processes to obtain ADY under laboratory simulation and in pilot plant scales, and results have been compared to industrial stocks. Similars results at different ADY production scales were observed in the analysis of the stress gene markers expression, and also in redox biochemical parameters and oxidative cell damage evaluations, indicating that the oxidative stress was predominant during the wine yeast drying process. Furthermore, the trehalose protective effect in wine yeast during dehydration was analyzed. Trehalose overaccumulating wine yeast strains were obtained by deletion of the genes coding for trehalose degradative activities. Previous studies with laboratory yeast strains and the subsequent study with T73 industrial strain showed the relevance of neutral trehalase activity Nth1p, but also acid trehalase activity Ath1p and a novel trehalase activity coding for Nth2p that also participates in intracellular trehalose movilization. This trehalose degradative machinery is necesary for yeast cells to recover growth after stress. In addition, the ATH1 gene deletion in T73 wine yeast was a suitable genetic modification strategy to improve drying resistance in yeast.

Los virus de plantas para extender la infección necesitan, en su movimiento célula-célula, atravesar la barrera que supone la pared celular, para lo cual aprovechan los plasmodésmos (PD). Éstos son aperturas en la pared celular atravesadas por un canal membranoso (desmotúbulo) que permiten el intercambio de agua, nutrientes y moléculas de señalización. En el caso de los virus de RNA de polaridad positiva la entrada de la partícula viral en la planta provoca el desensamblaje de la cubierta. Proceso ligado al inicio de la transcripción de las primeras proteínas virales, implicadas en la replicación del genoma viral. A continuación se sintetizan el resto de proteínas del virus entre ellas las encargadas de transportar el RNA viral de una célula a la célula adyacente, conocidas como proteínas de movimiento (MP). Estas proteínas son imprescindibles para el transporte del genoma del virus, en un primer lugar al PD (empleando la red de membranas derivadas del retículo endoplasmático (ER)) y a continuación a través de éstos; en este caso necesariamente en intensa interacción con el desmotúbulo. Los virus de plantas se agrupan en tres grandes categorías según el número de MP que presenten, así encontramos aquellos que presentan una única MP de gran tamaño (la superfamilia 30k), otro gran grupo conocido como DGB (double gene block) con dos pequeñas MP y por último el TGB (triple gene block) con tres MP. La relación entre las membranas de la planta y las MP es imprescindible para el transporte del genoma viral pero únicamente ha sido estudiada en profundidad en el caso del TGB. Es por esto que en la presente tesis se planteó el estudio del tipo de interacción establecida entre la membrana y las MP del los virus MNSV y TCV ambos del DGB y PNRSV y TMV (pertenecientes a la superfamilia 30k). Para lo cual se emplearon métodos bioquímicos de transcripción y traducción in vitro en presencia de microsomas y diferentes técnicas biofísicas como dicroísmo circular o la balanza de Langmuir así como ensayos in vivo tanto en E.coli como en N.bentamiana. El MNSV tiene dos MP, una soluble y capaz de unir RNA (p7A), la otra p7B presenta una única región hidrofóbica (RH) entre los aminoácidos 13 y 32 identificada por los programas de predicción empleados como un fragmento transmembrana (fTM). Dicha región es capaz de insertarse en membranas del ER. Es además capaz de dirigir e insertar la proteína en la membrana de manera cotraduccional. p7B adopta tanto en membranas del ER como en E.coli una topología N-t citosólico/C-t extracelular. La MP p9 del TCV al igual que p7B se inserta de manera cotraduccional en membranas del ER, donde adopta una topología N-t citosólico/C-t luminal determinada por su único fTM (residuos 3-20).La MP del PNRSV, p30 presenta una RH incapaz de insertarse en la membrana. La proteína si se asocia a las membranas aunque de manera periférica no de manera integral. Su dominio hidrofóbico (aa 89-110) es probablemente responsable de esta interacción y juega un papel fundamental en la capacidad de la proteína para transportar el RNA viral de una célula a otra. La prolina 96 (en la RH) además de determinar la estructura de este dominio es imprescindible para la correcta función de la proteína. La MP del TMV p30, ha sido considerada hasta la fecha como una proteína integral de membrana. Los estudios realizados en esta tesis demuestran que si bien si se asocia a la bicapa lipídica no lo hace de manera integral sino más bien periféricamente, análogamente a p32. / The cell-to-cell movement of RNA plant virus require the function of the so-called movement proteins (MP). These proteins interact with the plasmodesmata, an aperture in the plant cell wall crossed by a membranous channel formed by prolongations of the Endoplasmatic Reticulum (ER), to facilitate the passage of the viral RNA from one cell to the next one. The interaction of the MP with the ER has been reported for several MP in different stages of the infectious process, but the nature of this association has only been fully studied in few cases. To gain further knowledge of the infection process we have examined the type of association of three different MP, p7B (MNSV), p9 (TCV), p30 (TMV) and p32 (PNRSV) with membranes derived from the ER. In this study we have use a broad range of biochemical techniques, from in vitro transcription and translation to circular dichroism, monolayer studies and membrane isolation from plant tissue. The experimental approach was supplemented with a computer-assisted analysis of the MP sequences. In this work we have found that p7B inserts into the membrane in a co-translational manner using its hydrophobic region (aminoacids 13-32) as a signal sequence and as a stop transfer sequence. The N-t of the protein faces the cytosol while the C-t its located within the lumen of the ER. p9 from TCV is also a Type II integral membrane protein with just one transmembrane region (aminoacids 3-20). The MP from PNRSV has one hydrophobic region (aminoacids 89-110), which it is not capable of being inserted into microsomal membranes by the translocon machinery. In despite of not being transmembrane this segment seems to be essential for the membrane association of the MP and for the cell-to-cell RNA transport shown by p32. Our results indicate that p30 is not integral membrane proteins but a membrane associated protein.It seems that the association of MP to membranes it is necessary for the infectious process, although plant virus have evolve different strategies to accomplish this task.

En este trabajo se ha realizado un estudio exhaustivo sobre el recambio de los mRNAs a escala genómica en la levadura Saccharomyces cerevisiae.Se ha confirmado que la asunción de estado estacionario para la expresión génica en condiciones de crecimiento exponencial, y por lo tanto la validez del cálculo indirecto de valores de estabilidad de mRNAs a partir de datos de cantidad y tasa de transcripción. También se han caracterizado ligeras desviaciones del estado estacionario específicas de grupos funcionales y se ha calculado la contribución a estas variaciones de mRNA dependientes de cambios en la transcripción o en la estabilidad de mRNAs.Una vez comprobada la validez del estado estacionario para la expresión génica en las condiciones estudiadas, se ha realizado un cálculo alternativo de estabilidades de mRNAs usando un método directo. Concretamente se ha realizado una parada general de la transcripción usando tiolutina y se ha cuantificado la desaparición de los mRNAs. Durante este experimento se detectó un efecto inhibitorio de la tiolutina sobre la degradación de los mRNAs. Los datos obtenidos por cada procedimiento, directo e indirecto, se han comparado.Por otra parte, se ha desarrollado un método para medir la tasa de transcripción a escala genómica basado en la inmunoprecipitación de cromatina (RPCC). Este método ha permitido descubrir y corregir alguno de los sesgos técnicos presentes en el GRO contribuyendo a generar unos datos genómicos de transcripción en levadura más robustos y fiables. Además, la comparación de estas dos técnicas también ha permitido descubrir diferencias biológicas en la forma que tiene la célula de transcribir los genes pertenecientes a diferentes grupos funcionales. Se ha profundizado en el estudio de la regulación de estas diferencias y se ha descrito un posible mecanismo de acción para el caso de los genes de las proteínas ribosómicas.Finalmente se ha puesto a punto una variante del GRO basada en la purificación selectiva de mRNAs nacientes. Esta alternativa permitirá en un futuro el estudio de la transcripción a una mayor resolución usando chips de DNA de embaldosado u otras técnicas genómicas de nueva generación. / We have confirmed the assumption of a steady state for gene expression during exponential growth in the yeast Saccharomyces cerevisiae. Therefore, we also have confirmed that it is possible to compute the mRNA stability for all yeast genes in an indirect way using mRNA amounts and transcription rates data. We also have studied minor gene group-specific deviations from the steady state, and have determined witch part of the mRNA amount variation is due to changes in the transcription rate or in the mRNA stability.The mRNA stabilities have also been studied genome wide by using a direct method: inhibition the mRNA transcription with thiolutin and measurement of the mRNA decay. During this study we have been able to characterize a secondary effect of the thiolutin inhibiting the mRNA degradation. We also have done a comparison between the different genomic methods used to study the mRNA decay.On the other hand, we have implemented a new method for measuring the transcription at genomic level using chromatin immunoprecipitation (RNA Pol ChIP-on-chip, RPCC). This method has allowed us to improve the quality of the transcription rate data obtained by GRO. Moreover, using the comparison between the GRO and RPCC methods we have been able to discover transcription elongation differences specific for gene groups. The case of the ribosomal proteins genes has been studied with more detail and we have postulated a model for its transcription based in the repressive effect of Rap1 protein.Finally, we have developed a new version of the GRO technique using a selective purification of the nascent mRNAs that allows fluorescent labeling. This variation will allow high resolution studies of the transcription using tiling arrays or massive parallel DNA sequencing.

La deficiencia de vitamina A (VAD) es un problema importante de salud pública, que afectaclínicamente a más de 5 millones de personas al año. En países en vías de desarrollo afectagravemente a niños aumentando la morbilidad y mortalidad de diferentes infecciones yenfermedades del tracto respiratorio.Los retinoides, metabolitos activos de la vitamina A, son necesarios en mamíferos para eldesarrollo pulmonar y la diferenciación de células pulmonares, y su deficiencia altera la estructuray función de los pulmones. Las membranas basales (MBs), que están asociadas al epitelio yendotelio alveolar y forman parte de la pared alveolar, también están implicadas en estos procesos,y el ácido retinoico, principal forma biológicamente activa de la vitamina A, modula la expresiónde macromoléculas de la matriz extracelular.Por este motivo, el propósito de nuestro trabajo ha sido analizar los efectos de la deficienciacrónica de vitamina A en la estructura y composición de la MB pulmonar durante el desarrollopostnatal de los pulmones, y el del tratamiento posterior con ácido all-trans-retinoico sobre lasalteraciones encontradas. Crías macho, recién destetadas, fueron alimentadas con dieta completa odeficiente en vitamina A hasta que cumplieron 60 días de vida. Y un grupo de crías VAD fueronrecuperadas con inyecciones intraperitoneales de ácido all-trans-retinoico durante 10 días. Elanálisis concreto de la MB alveolar, cuya integridad es de gran importancia para el intercambio degases durante la función respiratoria, mostró en la deficiencia un engrosamiento de la misma,deposiciones ectópicas de fibrillas de colágeno I en su interior, un aumento del contenido total delos colágenos I y IV, y cambios en su composición en cadenas α. Además, la deficiencia de vitaminaA produjo una disminución en el contenido de las cadenas de laminina mayoritarias en las MBspulmonares, y modificó la actividad proteolítica de la MMP2 y MMP9, encargadas de ladegradación y renovación de las MBs, disminuyéndola. También observamos que la privación devitamina A durante este periodo del desarrollo provocó un aumento del factor fibrogénico TGF-β1, un incremento del estrés oxidativo y una respuesta inflamatoria leve en los pulmones. Por otrolado, también demostramos que la mayoría de estas alteraciones, al menos parcialmente,revirtieron al estado control tras tratar con ácido all-trans-retinoico. Interesantemente, lacapacidad de recuperación por parte del ácido retinoico ocurre aún existiendo un estrés oxidativoaumentado. En conclusión, la deficiencia de vitamina A ocasiona alteraciones en la estructura ycomposición de la MB alveolar que probablemente estén mediadas por el TGF-β1 y el ácidoretinoico es capaz de revertirlas. Estas alteraciones podrían contribuir a un mal funcionamientopulmonar y predisponer a diferentes enfermedades pulmonares. / Vitamin A deficiency (VAD) is an important public health problem, affecting clinically more than 5millions of persons per year. Particularly, VAD affects children of developing countries, increasingthe morbidity and mortality of several respiratory tract infections and illnesses.Retinoids, active metabolites of Vitamin A, are essential for lung development and pulmonary celldifferentiation and its deficiency results in alterations of lung structure and function. Basementmembranes (BMs), that are associated with the alveolar epithelium and endothelium andconstitutes part of the air-blood barrier, are also involved in those processes, and retinoic acid, themain biologically active form of vitamin A, influences the expression of extracellular matrixmacromolecules.Therefore, the aims of our work have been to analyze the ultrastructure and collagen content oflung alveolar BM in growing rats deficient in vitamin A and the recovering effect of all-transretinoic acid. Alveolar BM, which is very important for the gas exchange and lung function, wasenlarged in VAD rats (doubled its thickness) and contained irregularly scattered collagen fibrils.Immunocytochemistry revealed that these fibrils were composed of collagen I. Total content ofboth collagen I protein and its mRNA was greater in vitamin-deficient lungs. In agreement withthe greater size of the BM the amount of collagen IV was also increased. VAD altered the α chaincomposition of collagen I and IV, and also reduced the content of the main laminin chains of lungBMs. Moreover proteolitic activity of MMP2 and MMP9 were decreased in VAD animals.Proinflammatory cytokines, IL-1α, IL-1β and TNF-α, did not change, but myeloperoxidase andTGF-β1 were increased. Treatment of VAD rats with retinoic acid reversed to the control statenearly all the alterations, at least partially. Interestingly, retinoic acid recovering activity occurredin the presence of increasing oxidative stress. In conclusion, vitamin A deficiency results inalterations of the structure and composition of the alveolar BM which are probably mediated byTGF-β1 and reverted by retinoic acid. These alterations could contribute to the impairment oflung function and predispose to pulmonary disease.

OBJETIVO: El objetivo de este trabajo es estudiar el impacto de diferentes factores sobre el pronóstico y evolución de pacientes con fractura de cadera y considerar si estos parámetros son modificables.MATERIAL Y METODO: Se realizó un estudio observacional prospectivo de todos los pacientes diagnosticados de fractura de cadera en el Hospital "Vega Baja" (Alicante, España), durante el periodo 1994 a 1997. Fueron 331 pacientes mayores de 50 años hospitalizados procedentes del área de salud nº 20 de la Comunidad Valenciana diagnosticados con el código 820-821 del ICD (Internacional Classification of Diseases) y con un seguimiento de un año posterior a haber sufrido la fractura de cadera.. Se calcularon la media y la desviación estándar de las variables cuantitativas junto con los porcentajes relativos de las variables cualitativas. En el análisis del efecto de las diferentes variables independientes (factores) sobre las variables dependientes (mortalidad, morbilidad y recuperación funcional) se utilizó el test de t-student, chi-cuadrado y análisis multivariante. Las variables independientes estudiadas fueron: 1.- En el momento del ingreso (previo a producirse la fractura): edad, sexo, demográficos, residencia, ambiente familiar, deambulación (habilidad y movilidad funcional) independencia social, estado mental, factores biológicos (estado de salud, patologías previas, medicaciones, grado ASA, analítica sanguínea, etc.) y tipo de fractura. 2.- Durante la estancia hospitalaria: tiempo de estancia, tiempo preoperatorio, tipo de anestesia, tiempo bajo anestesia, tiempo intra-operatorio, tipo de implantes quirúrgicos, perdida de sangre y transfusiones. 3.- Posterior al alta hospitalaria: lugar de destino, ambiente familiar, resultados funcionales, capacidad de marcha a las dos semanas tras la fractura y complicaciones.RESULTADOS: La tasa de mortalidad obtenida al año fue del 20,8% y la tasa de complicaciones fue del 40,2% (11,4% reingresos). El análisis multivariante de mortalidad (Regresión de Cox) identifica como factores significativos predictivos (p<0,01) de mortalidad la edad avanzada, la insuficiencia cardiaca, no ser capaz de realizar ni siquiera actividades básicas (ADL), niveles séricos de urea >60 gr/dl y no haber recibido tratamiento quirúrgico. En cuanto al resultado funcional solo el 50,8% de los pacientes recuperaron su capacidad ambulatoria y de marcha previa a haber sufrido la fractura de cadera tras un año de seguimiento. El análisis de regresión logística (linear binaria) identifica como factores significativos (p<0,01) predictivos de recuperación funcional la menor edad, la capacidad de marcha dependiente, nivel mental elevado, hematocrito >29%, niveles séricos de urea <60 gr/dl, el recibir tratamiento quirúrgico y la capacidad de marcha a las dos semanas. / OBJECTIVE: The objective of this work is to study the impact of the several factors on the prognosis and evolution of patient with hip fracture and to consider if this parameters are sensitive to modification.PATIENTS AND METHODS: A prospective observational study was undertaken of all patients diagnosed with a hip fracture at the "Vega Baja" Hospital in Alicante (Spain), during the period 1994 to 1997. Patients more than 50 years old hospitalized in this area (331 medicals records) with a first diagnosis of hip fracture were identified through the specific disease code (820-821) of the International Classification of Diseases-ICD followed up for one year. The mean and the standard deviation of quantitative values together with the relative percentages of the qualitative variables were calculated. In order to study the effect of the different independent variables on dependent variables (survival, morbidity and functional recovery), t-test, the chi-squared test and a multivariate analysis were undertaken. The independent variables relevant to prognosis include:1. At the moment of hospital admission (before the fracture event)): age, sex, demographic, residence, family involvement, ambulatory status (functional ability and mobility), social independence, mental status, biological factors (medicals state, medications, ASA grade, blood analyses) and fracture type.2. During hospital stance: length of hospital stay, preoperative time, type of anaesthesia, time under anaesthesia, type of implants, blood loos and transfusion3. Posterior the hospital discharge: discharge destination, family involvement, functional results, ability to walk two weeks after hip fracture and complications. RESULTS: The mortality rate one year follow-up was 20.8 % and complications rate was 40,2% (11,4% hospital readmission). About survival outcome multivariate regression analysis (Cox´s model) identified significant (p<0.01) advanced age, congestive heart failure, not be able to do basic activities (ADL), urea serum levels > 60 gr/dl and non operative treatment. About functional outcome only 50.8 % patients maintained their pre-fracture ambulatory and walking ability at one year follow-up. Multiple logistic regression analysis identified significant (p<0.01) contributions of age, dependent walking ability, high score mental test, hematocrit >29%, urea serum levels <60 gr/dl, surgical treatment and to be able to walk at two weeks.

INTRODUCCIÓNLa rotura del ligamento cruzado anterior en individuos con fisis abiertas, aparece en edades cada vez más tempranas, con frecuencia creciente. Una reparación anatómica, con un riesgo mínimo de lesión fisaria, sería la técnica ideal. OBJETIVOSPrincipal: 1ª Parte: estudiar el efecto de la perforación transfisaria femoral distal en individuos con alto potencial de crecimiento y el posible efecto protector del injerto tendinoso. 2ª Parte: investigar las variaciones de magnitud de la lesión fisaria que pueden producirse aleatoriamente debido a la configuración tridimensional de la fisis, en relación con la localización e inclinación del túnel .Secundario: probar que el modelo experimental propuesto es válido y la rata Sprague-Dawley es útil.HIPÓTESIS1ª Parte: en individuos muy inmaduros esqueléticamente, la perforación transfisaria constituye una agresión cuyos efectos pueden aminorarse mediante injerto tendinoso del túnel. 2ª Parte: la relación tridimensional entre túnel y fisis en el fémur sería capaz de provocar una variación inconstante del tamaño del área de lesión fisaria de suficiente entidad como para producir resultados impredecibles.FASE DE ESTUDIO PREVIO SOBRE EL DESARROLLO DEL FÉMUR. DISEÑO DEL MODELO EXPERIMENTAL Ambos fémures de la rata tienen longitudes muy similares; presentan un crecimiento continuado a lo largo de toda su vida, lo que las convierte en animales especialmente interesantes para el estudio del crecimiento óseo y de las circunstancias que pueden alterarlo. Se diseña el modelo experimental. MATERIAL Y MÉTODOSe intervinieron 108 ratas Sprague-Dawley. Cuatro grupos. I: ARTROTOMIA. Se realizó la artrotomía; no se lesionó el hueso. II: FRENADO FISARIO. Artrotomía, perforación del túnel femoral de dos milímetros de diámetro, relleno con tornillos de 2,5 mm. III: TUNELIZACIÓN. Túnel, sin relleno. IV: INJERTO TENDINOSO. Relleno del túnel con tendón autólogo de la cola de la rata.DESARROLLO DEL CÁLCULO MATEMÁTICO SOBRE LAS POSIBILIDADES EXTREMAS DE VARIACIÓN DEL ÁREA DE INTERSECCIÓN DEL TÚNEL FEMORAL CON LA FISISRESULTADOSEl grupo Artrotomía y el grupo injerto tendinoso muestran diferencias significativas respecto de los otros tres respectivamente (p<0.05), pero no la hay entre los grupos tunelización y frenado fisario. Según el lugar donde se realice la perforación y su inclinación, el área de fisis lesionada puede variar aumentando hasta más de ocho veces.DISCUSIÓNLa rata Sprague-Dawley es un animal de características adecuadas. La artrotomía de la rodilla provoca dismetrías por hipercrecimiento del fémur. El frenado fisario ha resultado efectivo en el 100% de los individuos. La tunelización es capaz de provocar detenciones del crecimiento muy considerables. Rellenar el túnel con tendón ejerce un efecto protector, pero no siempre: es imprevisible. La estructura tridimensional de la fisis tiene implicaciones muy importantes y supone variaciones severas en el tamaño del área lesionada al realizar perforaciones, dependiendo del lugar y la inclinación del túnel.CONCLUSIONESLa tunelización en sí misma es capaz de provocar detenciones del crecimiento muy considerables en individuos con elevado potencial de crecimiento residual. El hecho de rellenar el túnel labrado a través de la fisis con tendón autólogo ejerce un efecto protector sobre el crecimiento, aunque no asegura que no se afecte. La configuración tridimensional de la fisis, junto con la orientación y localización del túnel femoral tienen implicaciones de gran trascendencia en el tamaño del área de la fisis que se lesione. La localización y orientación del túnel deberán buscar, en caso de intersectar la fisis, hacerlo produciendo un área de lesión lo menor posible y para ello se deberán diseñar persiguiendo dos objetivos: perpendicularidad y seguridad.APLICACIÓN CLÍNICAEn pacientes muy inmaduros debemos ser cautos al indicar un tratamiento quirúrgico. Debemos estudiar y tener en cuenta las relaciones tridimensionales de la fisis femoral con las tunelizaciones. / INTRODUCTIONThe incidence of anterior cruciate ligament injuries in immature patients is increasing. PURPOSE To correlate variations in the injured physeal area that can be produced because of the relationship between tunnel placement and tilt and physeal 3-D configuration. To investigate the potential protector effect of filling that tunnel with a tendon graft.To validate the proposed experimental model and the Sprague-Dawley rat choice.HYPOTHESYS1st part: Transphyseal drilling in skeletically very immature individuals is an aggression whose effects can be limited by filling the tunnel with a tendon graft. 2nd part: the relationship between both tunnel and femoral physis varies so much as to rend the estimation of the physeal injury area ant the arresting results very unpredictable.FEMUR GROWING PREVIOUS STUDY. EXPERIMENTAL MODEL DESIGN.MATERIAL AND METHODS108 Sprague-Dawley male rats were operated on. Four groups: I: ARTHROTOMY, II: PHYSEAL ARREST, III: FEMUR DRILLING, IV: TENDON GRAFTING.DEVELOPMENT OF THE MATHEMATICAL CALCULUS ON THE EXTREME POSSIBILITIES OF VARIATION OF THE INTERSECTIONAL AREA BETWEEN THE FEMORAL TUNNEL AND THE PHYSIS.RESULTSThere is statistical significant difference between the arthrotomy group and the other ones (p<0.05); so it is between the tendon grafting group and the rest; but there is no significant difference between the physeal arrest and femoral drilling groups. Size variation in the area of the physeal injury will depend on femur tunnel placement and tilting; its rate can range as high as 1:8.DISCUSSIONThe Sprague-Dawley rat has shown to be adequate. Arthrotomy alone causes femoral overgrowth. Physeal arrest has been effective in the whole series. Femur drilling can produce growth stop. Tendon grafting protects growing, but not in all the cases.Three-dimensional physeal structure has very important implications and can produce huge variations in the size of the physeal injury area depending on placement and tilting of the femoral tunnel.CONCLUSSIONSFemur drilling alone can produce important growth arrest in skeletally very immature individuals. Tendon autograft protects growth, but not in all the cases. Placement and tilting of femur tunnel should be designed, in case of transphyseal techniques to cause the smallest physeal injury area.

El trabajo analiza los determinantes de la estructura de vencimiento de la deuda empresarial de las pymes españolas. Aplicando la metodología propia de los datos de panel, se contrastan las predicciones que se desprenden de los principales modelos teóricos sobre una muestra de 14,748 pymes, cuyos datos han sido extraídos de la base de datos SABI (Sistema de Análisis de Balances Ibéricos) para el periodo 1997-2004. La variable dependiente ha sido definida como el cociente entre la deuda a largo plazo y la deuda total. Los resultados indican que las empresas sometidas a altos niveles de información asimétrica cuentan con plazos de endeudamiento menores. Además, se confirma la relación no monótona que postula Diamond (1991a) entre el riesgo de insolvencia y el plazo de la deuda. Adicionalmente, de acuerdo con las hipótesis formuladas, obtenemos una relación positiva entre la proporción de deuda a largo plazo y (i) el plazo de permanencia de los activos, (ii) el tamaño de la empresa y (iii) su nivel de endeudamiento. Asimismo, se obtiene una relación negativa entre la proporción de deuda a largo plazo y la volatilidad del valor de la empresa. Sin embargo, en contra de nuestras expectativas, el free cash flow se relaciona negativamente con el plazo de la deuda. Por otro lado, las empresas de calidad acortan el plazo de vencimiento de sus deudas en línea con el modelo de Flannery (1986). La relación negativa esperada entre la existencia de oportunidades de crecimiento y el plazo de vencimiento de la deuda que se desprende de Myers (1977) sólo se observa en las empresas más endeudadas de la muestra. También, se obtiene evidencia a favor de las hipótesis de Brick y Ravid (1985, 1991) relativas a la relación positiva esperada entre la estructura temporal de los tipos de interés y la volatilidad de los tipos de interés a corto plazo con el plazo de vencimiento de la deuda, en aquellos ejercicios del periodo muestral en los que estas variables toman valores significativamente elevados. La tasa impositiva efectiva no influye, aparentemente, en el plazo de vencimiento de la deuda. / This study provides empirical evidence on the determinants of Spanish SME debt maturity structure. Using a sample from the data base SABI (Sistema de Análisis de Balances Ibéricos) comprising 14,748 firms which spans over the period 1997-2004 and applying data panel methodology, the main hypotheses derived from different theoretical models have been tested. The dependent variable is defined as the quotient between long term debt and total debt. Our results show that enterprises with a large amount of asymmetric information have short debt maturity. Furthermore, Diamond´s (1991) hypothesis of a non-monotonic relationship between default risk and debt maturity is also confirmed. We have also confirmed a positive relationship between long term debt and (i) asset maturity, (ii) size and (iii) level of debt. Furthermore, a negative relationship between long term debt and firm volatility has also been obtained. However, contrary to what was expected, free cash flow is negatively related to debt maturity. Additionally, our results show that high quality enterprises reduce debt maturity according to Flannery's (1986) model. Myers's (1977) expected negative relationship between growth opportunities and debt maturity is only observed in the most indebted enterprises. Finally, according to Brick and Ravid's (1985, 1991) hypotheses our results show a positive relationship between (i) the term structure of interest rates and debt maturity and (ii) the volatility of short term interest rates and debt maturity, but only in those years when the mentioned variables (term structure of interest rates and volatility of short term interest rates) take relevant values. The effective tax rate does not apparently influence maturity debt.

L'aprenentatge de l'escriptura per part del conjunt de la població continua essent un repte en tant que molts alumnes, en finalitzar l'escolaritat obligatòria, no arriben als llindars que les comunitats actuals exigeixen per tal que les persones s'hi integren socialment i laboralment. Aquest fet es troba en l'origen de la nostra investigació. A més, intuíem i observàvem que, a les aules d'Educació Infantil, l'abordatge de la llengua escrita, entesa en un sentit ampli, en general no rep l'atenció que en la nostra opinió el tema mereix. És una apreciació que naixia, d'altra banda, del contrast amb les possibilitats oferides per les aportacions teòriques. El conjunt dels treballs que s'inclouen en la línia de l'interaccionisme social ens ha proporcionat el marc general en què hem ubicat el nostre treball. Ens interessava aprofundir en una perspectiva que subratlla l'origen historicocultural del llenguatge, la necessitat que aquest siga adquirit a través dels intercanvis socials i la importància de la mediació dels membres de la societat per a fer partícips dels sabers els infants que han d'accedir-hi: en la institució escolar i des d'aquesta perspectiva, el paper de l'ensenyant emergeix com a mediador entre els sabers culturals i l'aprenentatge dels alumnes. En aquesta mateixa línia, en què la comunicació esdevé central per a explicar els aprenentatges lingüístics, sobreïx el concepte de gèneres discursius per a referir-se a les formes d'ús de la llengua oral i escrita creades i utilitzades per les comunitats socials i que, en conseqüència, han d'esdevenir el punt de partida per a l'ensenyament de la llengua.Essent conscients del fet que, en la bibliografia sobre l'ensenyament de la producció de textos amb alumnes d'Educació Infantil, s'hi troben propostes intuïdes o derivades de la pràctica i que, en canvi, s'ha dut a terme molt poca investigació sobre el tema, l'objectiu de la investigació se centra en les possibilitats de la producció de gèneres textuals escrits amb alumnes del final de l'Educació Infantil, i açò especialment des de la perspectiva de l'ensenyament, de la intervenció del mestre. Amb vuit mestres elegides a l'atzar, hem indagat (1) la pràctica habitual a l'aula en relació a l'ús de textos i a les representacions de les mestres sobre el tema i (2) les possibilitats d'una sessió pràctica duta a terme a partir d'una proposta nostra. Tot, amb l'objectiu de contrastar ambdós aspectes i d'observar els canvis que s'hi podien produir en disposar d'unes propostes determinades. En aquest sentit, (1) hem dut a terme entrevistes amb les mestres mitjançant un qüestionari semiobert i (2) hem gravat sessions portades a terme per les mestres en què els alumnes havien d'inventar i produir un text (a elegir entre tres gèneres textuals distints), a partir d'un conjunt de propostes entre les quals destaquem el dictat a l'adult.Hem optat per una metodologia de tipus qualitatiu, tot utilitzant un procediment de microanàlisi recolzat en tres elements per a l'obtenció i l'anàlisi de les dades: a) les gravacions en àudio i/o en vídeo; b) la transcripció de les gravacions; c) la recerca detallada, rastrejant en el discurs, d'allò que poguera ser indici del que preteníem comprendre.L'anàlisi dels resultats ha posat de manifest, entre altres, les possibilitats de la invenció de textos amplis independentment del coneixement que els infants tinguen del sistema d'escriptura i, igualment, que els habitus de les mestres sobre l'ensenyament inicial de la llengua escrita poden canviar quan aquestes disposen de les propostes i de la informació oportunes. El fet de partir d'una necessitat comunicativa i d'un projecte, i el paper de tutela de l'ensenyant, permeten que els infants s'introduïsquen en la complexitat de l'escriptura. / The aim of this research is to explore the production of textual genres written between children and teacher at the end of the nursery education. Our starting point is the existence of many intuitive or practice-derived proposals but little research on the topic in the available bibliography.Our work is located within the general framework of the contributions of the social interaction field. The historical and cultural origins of language, social exchanges, mediation between cultural knowledge and children's learning, the teacher's role, communication and discursive genres are keywords in our work.Through eight teachers chosen at random we investigated (1) the usual practices inside the classroom with regard to text usage and the teachers' representation of the topic and (2) the possibilities in a practical session developed from a proposal of ours, from which we would like to highlight the "dictation to an adult". Our objective was to contrast both aspects and observe the changes occurred when applying different proposals. We chose a qualitative methodology, following a microanalysis supported on three elements to obtain and examine the data: a) audio and video recordings; b) transcripts of the recordings; c) a detailed search for any sign of what we were trying to find in the discourse.Through the analysis of the results we found proof of the possibility, among others, of creating wide texts, whatever the children's knowledge of the writing system. It was also shown how the teachers' usual way of early teaching of written language can change when they have appropriate proposals and information at their disposal. Children are easily introduced to the complexity of writing on the basis of a communicative need and a project, and the tutelary role of the teacher.

L'objectiu general d'aquesta tesi ha estat d'esbrinar la càrrega ideològica que subjau enl'ús d'un o d'un altre model de llengua formal per part dels membres de la comunitat deparla valenciana. Amb aquesta finalitat s'han analitzat les intervencions de 106 participantsen la sèrie documental Entre els nostres, que va emetre el segon canal de RTVV, Punt 2,en la temporada 2001-2002. En la selecció del corpus es va tenir ben present el criteri de larepresentativitat, fonamental en una recerca de tipus qualitatiu com aquesta: elsparticipants configuren un ventall de les més diverses procedències geogràfiques i socials,incloent-hi l'edat o el nivell de formació.L'anàlisi s'ha dut a terme a partir d'una metodologia clarament interdisciplinària,que tot partint de la base de la sociolingüística, pren elements de la pragmàtica, de l'anàlisicrítica del discurs i de la mateixa sociologia, com en la revisió del concepte fugisser icabdal d'ideologia. En definitiva, s'assumeix un enfocament del treball sociolingüístic quemira de centralitzar en el mateix parlant, com a membre d'un grup social, l'anàlisi delcomportament lingüístic en tant que comportament social.Es tracta, al capdavall, de superar l'esquema de regust conductista que situa lasituació comunicativa en el lloc de l'estímul i la parla en el de la resposta. Això es pot dura terme prenent en consideració la representació que es fa el parlant d'aquella situació,com a factor determinant de la seua manera d'actuar, més determinant que la situaciómateixa. Aquesta representació només pot tenir una base ideològica, des del moment queés possible observar diverses opcions segons el grup social.La perspectiva adduïda també implica la voluntat de passar pel sedàs analític latasca mateixa de la investigació sociolingüística. En aquest treball, s'han revisat conceptestan cabdals com el de comunitat lingüística o el d'estàndard lingüístic de la llenguacatalana, imprescindibles per a una anàlisi de les implicacions ideològiques de l'úslingüístic com la que plantegem ací.Entre els resultats de l'anàlisi, s'actualitza la descripció dels grups ideològics ques'associen generalment a aquests models, grups que se solen descriure a partir de la seuasituació en l'esquema identitari i de dreta-esquerra. En aquest sentit, també cal destacarque s'observa que la lleialtat formal dels valencians no sempre es correlaciona amb lainstrumental, cosa que posa en entredit l'aplicació abusiva del terme diglòssia i ensuggereix un altre: el valor d'autenticitat aplicat a la praxi lingüística. Caldria entendreaquest valor com l'adhesió a les variants lingüístiques de la tradició oral enfront de lespropostes formals, institucionals o ideològiques, sense que això implique necessàriamentuna devaluació de la percepció de la llengua pròpia enfront d'altres llengües. / The key issue of this doctoral thesis is to examine the ideological charge whichunderlies the use of the different formal language models existing in the Valencianspeakingcommunity within the Catalan linguistic community. To this aim, theinterventions of several participants in a documentary series broadcasted by RTVV in theseason 2001-2002 are studied. Representativeness, a crucial issue in a qualitative researchhas been taken into account in the selection of the corpus: the participants belong to themost diverse geographical and social origins.The methodology used is necessarily interdisciplinary: it starts from thesociolinguistics, and then some pragmatic elements as well as sociology and CriticalDiscourse Analysis have been considered. As a result, the analysis of the linguisticbehaviour considered as a social behaviour is focalised on the speaker himself/herself.All in all, the aim is to overcome the behaviourist scheme which locates thecommunicative situation in the place of the stimulus and the speech in the place of theresponse. This can be completed by taking into account the representation made by thespeaker of this situation, as a decisive factor of his or her way of acting, and even moreimportant, than the situation itself. This representation can only have an ideological basis,from the moment in which it is possible to observe different options depending on thesocial group.The perspective used also implies the determination to analyse the sociolinguisticresearch task from an ideological point of view. For instance, in this study have beenreviewed such crucial concepts as linguistic community or language standard, applied tothe Catalan language.Among the results of the analysis the following can be pointed out: formal loyaltyis not always correlated to use. This questions the excessive employment of the termdiglossia and suggests another: the value of authenticity as applied to linguistic praxis.This term aims to describe the occurrence in which the speaker shows a preference by theoral linguistic variants instead of the formal, institutional or ideological proposals, notnecessarily implying despise of the vernacular.

En este trabajo se presenta una investigación, en el mundo de la resolución deproblemas, de los problemas escolares de probabilidad que en ella se definen comoproblemas ternarios de probabilidad condicional.Las preguntas que inicialmente se plantean y se quieren resolver con lainvestigación, tienen que ver con los problemas: ¿cómo son los problemas ternariosde probabilidad condicional de enunciado verbal (PTPCEV) en cuanto a la estructurade cantidades y relaciones entre éstas?; ¿cómo pueden ser clasificados?; y con laenseñanza: ¿puede adelantarse su enseñanza a la secundaria obligatoria? En casoafirmativo, ¿qué tipología de problemas de probabilidad condicional pueden serresueltos en las secuencias didácticas?, ¿qué características deberán tener estosproblemas?Estas preguntas responden a tres objetivos generales de este trabajo:1. Estudiar los problemas ternarios de probabilidad condicional de enunciadoverbal2. Estudiar la resolución de una clase de estos problemas3. Proponer un proceso de enseñanza de los problemas de probabilidadcondicionalEn la investigación desarrollada se estudian los problemas ternarios de probabilidadcondicional de enunciado verbal teniendo en cuenta dos de los mundos posibles enlos que estos estudios pueden realizarse: el mundo de las matemáticas, es decir laestructura formal de los PTPCEV, y el mundo de las matemáticas escolares, en el quela información nos la proporciona los currículos oficiales y los libros de texto.Un resultado del estudio inicial sobre los problemas ternarios de probabilidadcondicional de enunciado verbal permite mostrar una clasificación de éstosatendiendo a tres características definidas para ellos: Niveles, Categorías y Tipos.Esta clasificación tiene en cuenta los datos y la pregunta del problema. Atendiendo aestas tres características los problemas se han clasificado en tres niveles y dentro decada nivel en tres categorías y tres tipos.El producto de la clasificación en Niveles, Categorías y Tipos, permite como se haceen esta, seleccionar una determinada tipología de problemas con el fin de poderabordar el estudio de los modos de resolver por los estudiantes. También se dacuenta del uso que pueden darse a esos componentes de clasificación para elanálisis de textos escolares, tanto si se piensa en la investigación sobre la resoluciónde esos problemas como para la su enseñanza.En el proceso de resolución de los problemas de probabilidad condicional, existendiferentes factores que influyen en las conductas de los estudiantes a la hora deestablecer una correcta correlación entre los datos y los sucesos. En estainvestigación nos ocupamos de identificar esos factores y determinar qué influenciatienen en el proceso de resolución del problema, desarrollando para ello un sistemade análisis de las respuestas de los estudiantes.Se analiza la resolución de problemas ternarios escolares de probabilidad condicionalde enunciado verbal por estudiantes de Secundaria Obligatoria, Bachillerato yFacultad de Matemáticas. En este análisis se describen procesos de resolución,modos de resolución y estrategias de resolución de los problemas, identificandodificultades y describiendo y clasificando errores.Finalmente, fruto de este análisis mostramos la influencia, tanto en el éxito como enel proceso de resolución de estos problemas, de los factores que hemos identificado.Estos factores tienen que ver con la naturaleza de las cantidades presentes en elenunciado del problema, con la expresión gramatical con la que se expresa lacondicionalidad en el texto del problema, con la utilización de términos que producenambigüedad sobre la probabilidad condicional en el texto del problema y con elorden en la expresión de los datos en el texto del problema. / This word introduces a research, within the world of problem solving, onproblems of probability in school education, defined as ternary problems ofconditional probability.The three general goals of this work are:1- To study word ternary problems of conditional probability.2- To study students' resolutions of one type of these problems.3- To propose a learning process of the conditional probability via problemsolving.In the developed research, we study the word ternary problems of conditionalprobability taking into account both of the possible worlds in which thesestudies could be carried out: maths Mathematics world, that is to say the formalstructure of the PTPCEV, and the school world, where information is providedby official curricula and textbooks.A result of the initial study on the word ternary problems of conditionalprobability shows their classification regarding three of their features: Levels,Categories and Types. This classification takes into account the data and thequestion of the problem.This classification allows selecting a specific typology of problems for thestudents to be capable of solving them. At the same time, it shows the use ofthese classifying components for the analysis of textbooks, both for researchingmatters as well as for educational purpose.During the process of solving problems of conditional probability, there areseveral issues that influence the way students correlate properly the data andthe events. In this research, we want to identify these factors and state whatinfluence they have in the process of solving a problem, developing for that ananalysis system for the students' answers.It is studied the resolution of word ternary problems of conditional probabilityby students of different school levels. In this research we describe solvingmethods, ways and strategies of solving those problems, identifying obstaclesand describing and classifying mistakes.Finally, as a result of this analysis we show the influence, both in the success aswell as in the process of resolution of these problems, of these factors that wehave identified. These factors are related to the nature of the quantities presentin the text of problem, to the grammar expression with which it is stated thecondition, to the use of terms that make us students confused about theconditional probability in the problem text and to the order in which the data isexpressed.