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Síntese e caracterização de novos complexos binucleares como ligante H2BPBPMP nitro substituído

Righez, Rosane Claumann 16 July 2013 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:47:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 275447.pdf: 1306263 bytes, checksum: d84b6cd5ee3af7a9bcf499eeb82713dd (MD5) / Por exercerem papéis de fundamental importância na manutenção da vida, por seu alto poder catalítico, e por sua alta especificidade e seletividade, a obtenção de informações sobre as propriedades e o modo de ação das enzimas, tem sido de grande interesse para químicos e bioquímicos de todo o mundo. As Fosfatases Ácidas Púrpuras constituem uma classe de metaloenzimas hidrolíticas que contém um sítio ativo dinuclear do tipo FeIIIMII (MII = Fe, Mn ou Zn) capaz de promover a hidrólise de uma variedade de ésteres de fosfato e anidridos numa faixa de pH de 4-7. Essas enzimas são isoladas a partir de plantas, animais e fungos. Recentemente, as estruturas cristalinas da kbPAP, ratTRA, rbPAP e ufPAP foram determinadas, indicando grandes similaridades entre elas e um mecanismo comum para a hidrólise de ésteres de fosfato. A síntese de novos complexos com ligantes cada vez mais elaborados, tem levado os químicos a obter modelos sintéticos que mimetizam cada vez melhor as propriedades verificadas no sítio ativo das PAP's. Neste trabalho, foi sintetizado um novo ligante não simétrico baseado no ligante H2BPBPMP, com o grupo substituinte -NO2 na posição cinco do anel fenólico e, a partir do ligante, os complexos binucleares di- -acetato do tipo (FeIII)2, FeIIIFeII , FeIIIMnII e FeIIICuII.
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Modificação do método de Scharer para determinação da atividade de fosfatase alcalina em leite / Modification of the Sharer method for determination of the alkaline phosphatase activity in milk

Castro, Paula Rosa Schetino de 03 August 2005 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-11-09T18:18:43Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 274220 bytes, checksum: 0552df07b6c5c225da7a07c4fd1105be (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-09T18:18:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 274220 bytes, checksum: 0552df07b6c5c225da7a07c4fd1105be (MD5) Previous issue date: 2005-08-03 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A análise da atividade de fosfatase alcalina (ALP) é utilizada para verificar se leite e produtos lácteos foram corretamente pasteurizados. De acordo com o FDA (Food and Drug Administration), o valor máximo permitido de atividade residual de ALP em leite pelo método Fluorophos® é de 350 mU/L, o que corresponde a adição de 0,025% de leite cru ao leite tratado termicamente. O método Oficial Brasileiro, o método de Scharer Rápido Visual e Espectrofotométrico, o método Fluorophos® e o método desenvolvido da Camada Visual e Espectrofotométrico foram avaliados quanto a sua sensitividade na determinação da atividade residual de ALP em leite. As amostras de leite analisadas, contendo diferentes valores de atividade de ALP, foram obtidas a partir da adição de leite cru em diferentes proporções a leite tratado termicamente (95oC/1 minuto). O método Oficial Brasileiro, do Ministério da Agricultura, foi capaz de detectar como positivas somente amostras contendo de 1% a 2% de leite cru adicionado ao leite tratado termicamente. A determinação da atividade enzimática pelo método de Scharer Rápido Visual detectou a presença de 0,8% de leite cru nas amostras. Os resultados evidenciaram que ambos os métodos, o Oficial Brasileiro e o Scharer Rápido Visual, apresentam limite de detecção muito elevados, tornando-os insatisfatórios para analisar níveis residuais de fosfatase alcalina em leite. O método de Scharer Rápido Espectrofotométrico detectou a presença de 0,1% de leite cru adicionado ao leite tratado termicamente, concordando com o limite reconhecido para o método. No entanto, sua sensitividade não é adequada para o novo limite do FDA de 350 mU/L. Os métodos desenvolvidos da Camada Visual e Espectrofotométrico foram testados quanto a sua sensitividade para o limite de 350 mU/L. Todos os dois métodos desenvolvidos apresentaram sensitividade suficiente para atender ao novo limite internacional de atividade residual de ALP em leite pasteurizado. O método da Camada apresentou boa correlação com o método Fluorophos® (r = 0,9921) sendo uma nova alternativa com menor custo para detecção de ALP em leite. / The analysis of alkaline phosphatase (ALP) is used to determine if milk and milk products were correctly pasteurized. According to FDA (Food and Drug Administration), the maximum residual activity of ALP in pasteurized milk by the Fluorophos® method must be below 350 mU/L, what correspond to the addition of 0,025% of raw milk to heat treated milk. The Brazilian Official method, Scharer’s Rapid Visual and Spectrophotometric method, the Fluorophos® method, and a new developed Layer’s Visual and Spectrophotometric method, were assayed for their sensitivity to determine residual ALP in milk. Milk samples, containing different ALP activity, were obtained by addition in different proportions of raw milk to heat treated milk (95oC/1 minute). The Official Brazilian method, established by Agriculture Department, was capable to detect only samples containing 1% to 2% of raw milk added to heat treated milk. The determination of the enzymatic activity by the Scharer’s Rapid visual method was able to detect 0,8% of raw milk in the samples. The results showed that both the Official Brazilian method and Scharer’s Rapid Visual method presented very high detection limit, what make unsatisfactory to residual alkaline phosphatase activity in milk. The Scharer’s Rapid Spectrophotometric method detected 0,1% of raw milk added to the heated treated milk, as already recognized for the method. However, its sensitivity is not adequate for the new FDA limit of 350 mU/L. The new developed Layer’s Visual and Spectrophotometric method were assayed for their sensitivity of 350 mU/L limit. Both developed methods presented enough sensitivity to attend the new international limit for residual ALP activity in pasteurized milk. The layer’ method presented good correlation with the Fluorophos® method (r = 0,9921) so it is a new alternative with lower costs for detection of ALP in milk. / Não foi localizado o cpf do autor.
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Baixas concentrações séricas de 25-hidroxivitamina D em pacientes com artrite idiopática juvenil / Low serum concentrations of 25-hydroxyvitamin D in patients with juvenile idiopathic arthritis

Munekata, Regina Viviane [UNIFESP] 27 April 2011 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-27 / Objetivo: Determinar as concentrações séricas de 25-hidroxicolecalciferol (25(OH)D), cálcio sérico total, fósforo sérico, fosfatase alcalina e paratormônio (PTH) em pacientes com artrite idiopática juvenil (AIJ) poliarticular e associá-las com a atividade e duração da doença, com a densidade mineral óssea e com o uso de medicamentos. Método: Por meio de um estudo transversal e controlado, foram avaliados 30 pacientes com AIJ poliarticular, pareados por sexo e idade com 30 controles saudáveis. Realizou-se avaliação clínica, antropométrica e laboratorial nos pacientes e controles e densitometria óssea nos pacientes. Resultados: Dos 30 pacientes incluídos no estudo, 23 (76,7%) eram meninas, 16 (53,3%) não caucasóides e com média de idade de 14 anos (4 a 20 anos). O tempo médio de doença foi 5 anos. Concentrações médias de cálcio sérico total e fosfatase alcalina foram significantemente mais baixas nos pacientes com AIJ comparativamente aos controles (p< 0,0001 e p= 0,001, respectivamente). Em relação a 25(OH)D, PTH e fósforo sérico não se observaram diferenças entre os grupos AIJ e controle. Quanto às concentrações séricas de 25(OH)D, 8 pacientes (26,7%) e 5 controles (16,7%) apresentaram valores compatíveis com deficiência (inferiores a 20 ng/ml) e 14 pacientes (46,7%) e 18 controles (60%) apresentaram valores compatíveis com insuficiência (entre 20–32 ng/ml). Estes valores não se associaram com a atividade de doença, com o uso de medicamentos ou densidade mineral óssea. Conclusão: Observamos elevada frequência de insuficiência e deficiência de 25(OH)D nas amostras estudadas. O comprometimento do metabolismo ósseo enfatiza a importância do acompanhamento evolutivo dos pacientes com AIJ. / Objective: To determine serum concentrations of 25-hydroxycholecalciferol (25(OH)D) and biochemical markers of bone turnover in patients with polyarticular juvenile idiopathic arthritis (JIA) and to associate them with disease activity and duration, with bone mineral density and with use of medications. Methods: In a cross-sectional and controlled study, 30 patients with polyarticular JIA were assessed, compared with 30 age and sex-matched healthy subjects. We evaluated clinical, anthropometric, laboratory parameters and dual-energy x-ray absorptiometry (DEXA). Results: Out of 30 patients included in the study, 23 (76.7%) were girls, 16 (53.3%) no caucasian and the mean age was 14 years old (4 to 20 years). The mean time of disease was 5 years. The mean serum calcium and phosphatase alkaline were significantly lower in patients with JIA compared to controls (p<0.0001 and p=0.001, respectively). There was no difference between the serum concentrations of 25(OH)D, PTH and phosphorus between patients and controls. Based on serum 25(OH)D concentrations, 8 patients (26.7%) and 5 controls (16.7%) were vitamin D deficient (< 20 ng/ml) and 14 patients (46.7%) and 18 controls (60%) were vitamin D insufficient (between 20 and 32 ng/ml). These values were not associated with disease activity, use of medications or bone mineral density. Conclusions: A high frequency of 25(OH)D insufficiency and defficiency was observed in the study population. The involvement of biochemical bone markers emphasizes the importance of the bone metabolism follow-up in patients with JIA. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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A medida da atividade da fosfatase alcalina na deteccao da doenca ossea-metabolica da prematuridade e sua relacao com a dieta do recem-nascido prematuro de muito baixo peso

Goncalves, Sandra Helena Machado January 1995 (has links)
A observação de que os RNPMBPN alimentados com leite materno ou fórmula láctea não específica para prematuros estão em risco de desenvolvimento de deficiência osteomineral estimulou-nos ao desenvolvimento desse estudo. Nosso objetivo~ foi o de verificar se a adição de Cálcio e Fósforo a dieta oferecida aos RNPMBPN interfere na concentração da F A, levando em conta seu envolvimento no metabolismo ósseo. Foram selecionados 71 neonatos prematuros com PN inferior a 1500g de IO de inferior a 35 semanas divididos em 2 grupos. No OI os neonatos (n 37) receberam leite-matemo ou fórmula para lactentes a termo acrescido de sais de Ca e P; e no 02 (n 34)~ os neonatos receberam apenas leite matemo ou a mesma fórmula. Paralelamente~ selecionou-se um terceiro grupo de neonatos a termo AIO alimentados com LM ou fórmula. Ao ingressar no estudo não houve diferenças significativas entre os grupos G I e 02 com relação ao PN, PCN~ CN~ Sexo e IG. Os dois grupos receberam o mesmo volume de alimentação e taxas calóricoprotéicas semelhantes. Os RNPMBPN foram acompanhados com dosagens séricas quinzenais de Ca., P e FA ate atingirem 2000g. Não houve diferença significativa na média do Ca sérico nos G I e G2, mas em relação ao grupo 3 - a média do Ca sérico foi significativamente mmor do que nos outros 2 grupos. Encontrou-se resultados semelhantes com relação ao P sérico. A média da. concentração da. FA entre Gl e G2 diferiu significativamente a partir da. quarta semana de vida. A comparação das médias da concentração da. F~ nas diversas idades, entre Gl e G3 não mostra diferença significativa; no entanto, há significância. entre as médias de G2 e G3. Em sete neonatos de G2 - que alcançaram a concentração da F A 5 vezes o limite superior considerado como normal iniciou-se a. suplementação de Ca e P. Em todos houve a. diminuição da. concentração da. F A, com diferença estatisticamente significativa considerando-se o grupo. Concluímos que a medida da concentração da FA é um método útil e eficiente para a monitorização da. DOMP nos neonatos. Podemos concluir també~ que o leite humano eJou as fórmulas lácteas não especificas para RNPMBPN são inadequadas para. a sua alimentação, tendo em vista. o deficiente aporte de Ca e P, sendo necessária., a suplementação desses sais na. tentativa. de prevenir a DOMP. / The observation 1hat 1he VLBW infants fed wi1h breast-milk or with a not specified cow milk-based formula for prematures suffer any risk of developping osteomineral deficiency encouraged us to work on this subject Our aim was to prove whether the addition of Calcium and Phosphor to the diet offered,to VLBW infants interferes in the concentration o f AP (phosphatase Alkaline ), taking into accowtt its envolvement in 1he bone metabolism. Seventy one (71) premature newbom with BW ~ 1500 gr and GA ~ 35 weeks were selected and divided into two groups. In G 1 the fullterm newbom (n ± 37) received breast miik or a cow milk-based formula enriched by CA (calcium) and P (phosphorus) salts; and in G2 (n=34) the newbom received only breast milk or the same formula At 1he same time a third group of newborn was selected and fed, apropriate for the gesta:tional age, wi1h breast milk or formula In 1he begirming of this study there were no significant di:fferences between Gl and G2 with relation to PN, PCN, CN, sex and gestational age. The two groups received same volume of nourishment and with similar caloric-proteic rates. The VLBW infants were accompanied by weekly serial doses of CA, P and AP tmtil reaching 2. 000 gr. No significa.tive difference in the average of CA serial in G 1 and G2 appeared, but in rela.tion to G3 the seral CA average was considerably higher than in the other 2 groups. Similar results were found with relation to P (phosphorus) serial. The concentration average o f AP between G 1 and G2 differed considerably from the fourth week of life on. The comparison o f the AP concentration-average does not show significative difference; however, there is a sigficance between the average of G2 and 03. To seven newbom of G2, who reached a FA concentration 5 times higher than the superior Iimit considered normal, an addition of CA and P was given. In ali of them there was a descresse of the FA concentration with a significant statistically proved di.fference considering the group. W e concluded that the FA concentration rate is a useful and efficient method for the monitorization of the MBDP (Metabolic Bone Disease) of newbom. We may also conclude that human milk andlor non specific milk formula for VLBW infants are inadequate for their nourishment, due to the defficient amount of CA and P, a suplementation of these salts being therefore necessary in order to prevent Metabolic Bone Disease of Prematurity (MBDP).
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Mecanismos moleculares implicados na fisiopatogenese do tumor de córtex adrenal de crianças

Pereira, Giovanna Assis 03 November 2009 (has links)
No description available.
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Nutrição e produção da cana planta em argissolo e latossolo fertilizado com fontes de fósforo e torta de filtro

Caione, Gustavo [UNESP] 19 September 2013 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-19Bitstream added on 2014-06-13T18:45:37Z : No. of bitstreams: 1 000740033.pdf: 1372910 bytes, checksum: 6a08312b779cfdefd59b787ad4b6c7ed (MD5) / A adubação fosfatada no sulco de plantio da cana-de-açúcar, com fertilizante mineral associado a resíduo orgânico, apresenta-se como alternativa para aumentar a taxa de recuperação do fósforo (P) pelas plantas. Objetivou-se avaliar os efeitos de doses e fontes de P, na ausência e na presença de torta de filtro, sobre o P no solo, estado nutricional e a produtividade da cana planta cultivada em Argissolo e em Latossolo. Foram realizados dois ensaios durante o ano agrícola 2012/2013 no estado de São Paulo, em áreas com baixos teores de P. Utilizaram-se três fontes (fosfato de Araxá, fosfato Bayóvar e superfosfato triplo) e quatro doses de P (zero; 90; 180 e 360 kg ha-1 de P2O5), na ausência e na presença de 7,5 t ha-1 de torta de filtro (base seca). Os tratamentos foram aplicados no sulco de plantio da cana-deaçúcar. Avaliaram-se as variáveis de crescimento aos quatro e aos seis meses após a brotação, a disponibilidade de P no solo aos seis meses após o plantio, o teor foliar de macro e micronutrientes aos quatro e aos oito meses após a brotação, a atividade da fosfatase ácida foliar aos oito meses após a brotação, a produtividade de palhada e de colmos e o acúmulo de fósforo pelas plantas aos 12 meses após a brotação, assim como a qualidade tecnológica da cana-de-açúcar. A aplicação de doses de P, independentemente da fonte, aumentou a disponibilidade do nutriente no solo, o crescimento da cana-de-açúcar, melhorou a nutrição fosfatada da cana planta e resultou em aumento de produtividade, no entanto, não influenciou a qualidade tecnológica. A determinação do teor de P no solo pelo método resina mostrou-se mais adequado que o remanescente. A diagnose foliar em P pode ser realizada seguindo ambos os critérios de recomendação. A atividade da fosfatase ácida não demonstrou eficiência no diagnóstico nutricional em P. Em ambos os solos os efeitos... / Phosphorus fertilization in sugarcane planting furrow with mineral fertilizer combined with organic waste is presented as an alternative to increase the rate of recovery of phosphorus by plants. The aim of the study was to evaluate the effects of different phosphorus rates and sources, in the absence or presence of filter cake on phosphorus in soil, nutritional status and productivity of sugarcane crop grown in Ultisol and Oxisol. Two experiments were conducted during the agricultural year 2012/2013 in the state of São Paulo, in areas with low levels of phosphorus. Three phosphorus sources were used (triple superphosphate, Araxa rock phosphate and Bayovar rock phosphate) and four application rates (0, 90, 180 and 360 kg ha-1 of P2O5) in the presence or absence of filter cake (7.5 t ha-1, dry basis). Treatments were applied in sugarcane planting furrow. The growth variables were evaluated at four and six months after sprouting, the availability of phosphorus in soil at six months after planting, the leaf content of macro and micronutrients at four and eight months after sprouting, the activity of leaf acid phosphatase at eight months after sprouting, the productivity of straw and stalks and phosphorus accumulation by plants at 12 months after planting, as well as the sugarcane technological quality. The application rates of phosphorus, regardless of source, increased this nutrient availability in soil, the growth of the sugarcane, improved phosphorus nutrition of sugarcane plant and resulted in increased productivity, although, it did not influence the technological quality. The determination of phosphorus in soil by the resin method was more suitable than the remaining. Leaf phosphorus analysis can be performed following both criteria of sampling recommendation. The acid phosphatase activity showed no efficiency in diagnosing nutritional phosphorus. In both soil treatment effects were ...
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Avaliação da produção de citocinas, expressão gênica e análise funcional de células SHED expostas ao LTA bacteriano

Leal, Flávia Martins [UNESP] 10 April 2015 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:18Z : No. of bitstreams: 1 000843662.pdf: 3263526 bytes, checksum: 3834c7b8c2dd7d42cbcbd22ff55f8632 (MD5) / Células-tronco da polpa dentária humana são promissoras no tratamento endodôntico, porém antes de utilizá-las clinicamente, deve-se entender suas propriedades biológicas em resposta a estímulos, como o ácido lipoteicóico (LTA) bacteriano. O objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento de células SHED (Stem cells from Human Exfoliated Deciduous teeth) após exposição ao LTA bacteriano, verificando os efeitos na proliferação e metabolismo celular, atividade da fosfatase alcalina, deposição de cálcio, expressão de genes associados à mineralização, e liberação de citocinas. Foram utilizadas células SHED tratadas com LTA em diferentes concentrações, sem e com indutores da mineralização (IM). O metabolismo e a proliferação celular foram avaliados pelos ensaios de XTT e SRB. As células foram submetidas a um ensaio enzimático da atividade de fosfatase alcalina, para observação da ativação de processos de mineralização. E foi analisada qualitativamente a presença de deposição de cálcio pelas células pelo ensaio de alizarin vermelho (ARS). A expressão dos genes DSPP (Dentin Sialophosphoprotein) e DMP-1 (Dentin Matrix Protein-1) foi avaliada pela técnica do PCR (Polymerase Chain Reaction). O teste ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) foi realizado para detectar e quantificar as citocinas IL-1ß (Interleucina-1ß), IL-6 (Interleucina-6), TNF-α (Fator de Necrose Tumoral-α). Os dados obtidos nos ensaios quantitativos foram analisados estatisticamente por ANOVA complementada pelo teste de Tukey (p<0,05). Foi observado um aumento no metabolismo e proliferação celular com o tempo, não havendo diferenças entre os grupos testados em cada período. Nos grupos sem IM, observou-se um aumento da atividade da fosfatase alcalina das células expostas ao LTA comparados ao controle. Os grupos com indutores de mineralização apresentaram maiores quantidades... / Dental pulp stem cells are promising in endodontics, but before clinical treatment it should be studied to understand its biological properties in response to stimuli such as lipoteichoic acid (LTA). The aim of this study was to evaluate the behavior of Stem cells from Human Exfoliated Deciduous teeth (SHED) exposed to LTA, analyzing cell proliferation and metabolism, alkaline phosphatase activity, calcium deposition, gene expression, cytokines production. SHED cells were treated with LTA, in different concentrations, without and with mineralization induction (MI). Cell metabolism and proliferation were evaluated by XTT and SRB. Alkaline phosphatase activity was performed to indicate mineralization process. Also, calcium deposition was observed qualitatively by alizarin red. Gene expression of DSPP (Dentin Sialophosphoprotein) and DMP-1 (Dentin Matrix Protein-1) was evaluated by PCR (Polymerase Chain Reaction). Cytokines IL-1ß (Interleukin-1ß), IL-6 (Interleukin-6), TNF-α (Tumor Necrosis Factor-α) were detected and quantified by ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Statistical analysis of quantitative tests were performed by ANOVA and Tukey test (p<0,05). Metabolism and cell proliferation increased with time and no differences were observed between groups in each period. In groups without MI, there was an increase in alkaline phosphatase activity of cells exposed to LTA compared to control. Groups with mineralization induction showed more calcium deposition, compared to the groups without MI. After 3 days, cells treated with LTA showed more areas of calcification compared to control, and after periods of 7 and 14 days were similar. All groups tested expressed genes DSPP and DMP-1, being slightly higher in groups with MI. The expression of IL-1ß and TNF-α by cells of the tested groups were similar, and IL-6 concentration was expressive, with differences between groups and time periods. According to the methodology and analysis ...l
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Comportamento bioquímico e ultraestrutural de trichoderma harzianum em resposta a presença de cádmio / Ultrastructural and biochemical behavior of Trichoderma harzianum in response to cadmium

Adriana de Freitas Lima 28 February 2008 (has links)
Considerando o potencial biotecnológico do fungo Trichoderma harzianum no processo de metabolização de compostos xenobióticos e sua resistência a metais pesados, o presente trabalho teve como finalidade estabelecer conhecimentos bioquímicos e ultraestruturais associados ao processo de remoção de cádmio. O microrganismo foi cultivado em meio contendo diferentes concentrações de cádmio: 1mM, 2mM e 3mM. O perfil de crescimento foi estabelecido em função da biomassa produzida, do consumo de glicose e fosfato, conteúdo intracelular de polifosfato, atividade das enzimas fosfatases ácida e alcalina, perfil de proteínas totais e remoção do metal. Os resultados obtidos sugerem efeitos do metal sobre o crescimento do organismo em diferentes meios de cultura. O crescimento em meio padrão revela a tolerância do organismo frente a altas concentrações de cádmio, e que tal cultivo induz variações no consumo de glicose e atividade das fosfatases. A utilização da microscopia óptica revelou variação na morfologia do organismo como resposta a variação do meio de cultivo e da presença e ausência do metal. Modificações relativas a processo de ramificação, textura e espessura das hifas foram visualizadas. Os aspectos ultraestruturais através de varredura demonstraram que T. harzianum cultivado na presença de cádmio apresentou variações associadas a eletrondensidade, densidade micelial, maior ramificação e menor número de clamidósporos. A análise do perfil de proteínas totais revelou que o cultivo em cádmio induziu a diminuição do conteúdo de proteínas dependendo da concentração. O isolado foi capaz de acumular polifosfato, e a presença do metal induziu a degradação do polímero em função da concentração. A remoção de cádmio do meio foi avaliada, revelando variação em função da concentração. Os resultados demonstram o efeito do cádmio sobre T. harzianum, pela primeira vez, e demonstram o potencial do microrganismo em acumular polifosfato e sua possível aplicação na remediação de metais pesados / Considering the biotechnological potential of Trichoderma harzianum in the xenobiotic metabolization and its resistance to heavy metals, the aim of this work was to evaluate the utrastructural and biochemical behavior related to cadmium tolerance and removal. The microorganism was grown in different media, containing 1mM, 2mM and 3mM of cadmium. Aspects of the growth profile was obtained by biomass production, glucose consumption, acid and alkaline phosphatase activities, morphology by optical microscopy, ultrastructure by scanning electron microscopy, total protein profile, polyphosphate acumulation and metal removal were evaluated. The results obtained revealed the inhibitory effects of the heavy metal on the microbial growth and the aspects of the tolerance to cadmium. The glucose consumption and the enzymes activities were also affected by cadmium and its different concentrations. The morphological analysis revealed variations related to hyphae thickness, branching pattern, texture and homogenity, electrondensity, and presence of granular structures. The ultrastructural aspects revealed alterations related to cell electrondensity, mycelia density, branching pattern and reduced chlamidospores number. The grown in presence of the metal induced a reduction in the total protein content related to cadmium concentration. The isolate was able to accumulate polyphosphate, and its grown in cadmium induced the polymer degradation. The cadmium removal was observed and revealed variations related to metal concentrations. The results for the first time revealed the effects of cadmium on T. harzianum polyphosphate accumulation and its potential application in the metal remediation
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Qualidade microbiológica do solo sob citrus em comparação com outros ecossistemas e sob adubação verde /

Buzinaro, Thais Nucci. January 2006 (has links)
Orientador: Ely Nahas / Banca: Eliana Gertrudes Macedo Lemos / Banca: Eleonora Cano Carmona / Resumo: A expansão da citricultura tem sido feita em áreas de florestas e de pastagens. O efeito desta conversão de uma área de floresta tropical e de pastagem em laranjal (Citrus sinensis L. Osbeck) constitui uma oportunidade para avaliar mudanças nas variáveis microbiológicas e químicas do solo. As amostras de solo foram coletadas nas áreas de floresta, de pastagem e da parte alta (LA, laranjal do alto) e da baixada (LB, laranjal da baixada) de laranjal. As menores contagens de bactérias foram encontradas no solo sob pastagem e as maiores no solo sob floresta. O número de fungos foi significativamente (P < 0,05) maior no solo de laranjal do que nos demais solos. A atividade respiratória encontrada nos solos sob floresta e LB decresceu (P < 0,05) nos demais solos. Nenhuma variação foi observada na atividade nitrificante entre os solos estudados. As enzimas fosfatase e urease decresceram na seguinte ordem: floresta > pasto > LB > LA e diferença significativa apenas foi observada na atividade do solo sob floresta e LB. Diferenças (P < 0,05) foram constatadas no conteúdo da matéria orgânica entre o solo sob LA e o sob floresta e no da umidade do solo entre o solo sob LA e o sob LB. Em geral, os resultados encontrados sugerem que não houve mudança nas características microbiológicas e químicas entre o solo da floresta e do laranjal, porém estas variáveis foram diminuídas no solo sob pastagem em relação ao sob floresta. A adubação verde é a prática de cultivo e incorporação de plantas, produzidas no local ou adicionadas, com a finalidade de preservar e ou restaurar os teores de matéria orgânica e nutrientes dos solos, indo ao encontro da tendência mundial da busca de alimentos mais saudáveis, provenientes da agricultura orgânica ou produzidos com a mínima utilização de insumos químicos e degradação do meio ambiente...(Resumo completo, clicar no acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The expansion of the citriculture has been made in forests and pasture areas. The effect of this conversion constitutes an opportunity to evaluate changes of tropical forest and pasture areas in orange grove (Citrus sinensis L.Osbeck) on the study of the soil microbiological and chemical variables. The samples had been collected in the areas of tropical forest, pasture and in the top (TOG) and bottom (BOG) of the orange grove. The lowest bacteria count was found in the pasture soil and the highest in the forest soil. The fungi number was significantly (P < 0.05) higher in the orange grove soil than in the other soils. Respiratory activity found in the forest and LB soils decreased (P <0.05) in the other soils. No change was observed in the nitrification activity among the studied soils. Phosphatase and urease activities decreased in the following order: forest > pasture > BOG > TOG and significant difference was only found in the activity of the forest and TOG soils. Differences (P <0.05) were found in the organic matter content among the TOG and the forest soils and in the moisture among of TOG and BOG soils. In general, the results found suggest that there was not change in the microbiological and chemical characteristic among forest and orange grove soils however these variables were decreased in the pasture soil in relation to the forest soil. The green fertilization is practical culture and the incorporation of plants that was produced in the place or added with the purpose to preserve and or to restore texts of organic matter and nutrients, going into worldwide trend of the food cultivation with more healthful, resulted from organic agricultura with the minimum use of chemical insumos and degradation of the environment. The objective of this study was to check the effect of to use three species plants cover, Crotalaria spectabilis (crotalária)...(Complete abstract, acess undermentioned eletronic) / Mestre
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Avaliação da produção de citocinas, expressão gênica e análise funcional de células SHED expostas ao LTA bacteriano /

Leal, Flávia Martins. January 2015 (has links)
Orientador: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Co-orientador: Bruno das Neves Cavalcanti / Banca: Marcia Carneiro Valera Garakis / Banca: João Eduardo Gomes Filho / Resumo: Células-tronco da polpa dentária humana são promissoras no tratamento endodôntico, porém antes de utilizá-las clinicamente, deve-se entender suas propriedades biológicas em resposta a estímulos, como o ácido lipoteicóico (LTA) bacteriano. O objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento de células SHED (Stem cells from Human Exfoliated Deciduous teeth) após exposição ao LTA bacteriano, verificando os efeitos na proliferação e metabolismo celular, atividade da fosfatase alcalina, deposição de cálcio, expressão de genes associados à mineralização, e liberação de citocinas. Foram utilizadas células SHED tratadas com LTA em diferentes concentrações, sem e com indutores da mineralização (IM). O metabolismo e a proliferação celular foram avaliados pelos ensaios de XTT e SRB. As células foram submetidas a um ensaio enzimático da atividade de fosfatase alcalina, para observação da ativação de processos de mineralização. E foi analisada qualitativamente a presença de deposição de cálcio pelas células pelo ensaio de alizarin vermelho (ARS). A expressão dos genes DSPP (Dentin Sialophosphoprotein) e DMP-1 (Dentin Matrix Protein-1) foi avaliada pela técnica do PCR (Polymerase Chain Reaction). O teste ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) foi realizado para detectar e quantificar as citocinas IL-1ß (Interleucina-1ß), IL-6 (Interleucina-6), TNF-α (Fator de Necrose Tumoral-α). Os dados obtidos nos ensaios quantitativos foram analisados estatisticamente por ANOVA complementada pelo teste de Tukey (p<0,05). Foi observado um aumento no metabolismo e proliferação celular com o tempo, não havendo diferenças entre os grupos testados em cada período. Nos grupos sem IM, observou-se um aumento da atividade da fosfatase alcalina das células expostas ao LTA comparados ao controle. Os grupos com indutores de mineralização apresentaram maiores quantidades... / Abstract: Dental pulp stem cells are promising in endodontics, but before clinical treatment it should be studied to understand its biological properties in response to stimuli such as lipoteichoic acid (LTA). The aim of this study was to evaluate the behavior of Stem cells from Human Exfoliated Deciduous teeth (SHED) exposed to LTA, analyzing cell proliferation and metabolism, alkaline phosphatase activity, calcium deposition, gene expression, cytokines production. SHED cells were treated with LTA, in different concentrations, without and with mineralization induction (MI). Cell metabolism and proliferation were evaluated by XTT and SRB. Alkaline phosphatase activity was performed to indicate mineralization process. Also, calcium deposition was observed qualitatively by alizarin red. Gene expression of DSPP (Dentin Sialophosphoprotein) and DMP-1 (Dentin Matrix Protein-1) was evaluated by PCR (Polymerase Chain Reaction). Cytokines IL-1ß (Interleukin-1ß), IL-6 (Interleukin-6), TNF-α (Tumor Necrosis Factor-α) were detected and quantified by ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay). Statistical analysis of quantitative tests were performed by ANOVA and Tukey test (p<0,05). Metabolism and cell proliferation increased with time and no differences were observed between groups in each period. In groups without MI, there was an increase in alkaline phosphatase activity of cells exposed to LTA compared to control. Groups with mineralization induction showed more calcium deposition, compared to the groups without MI. After 3 days, cells treated with LTA showed more areas of calcification compared to control, and after periods of 7 and 14 days were similar. All groups tested expressed genes DSPP and DMP-1, being slightly higher in groups with MI. The expression of IL-1ß and TNF-α by cells of the tested groups were similar, and IL-6 concentration was expressive, with differences between groups and time periods. According to the methodology and analysis ...l / Mestre

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