Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariliza.pdf: 910731 bytes, checksum: 21aa8bdaf81f9c020e8cdee92ae30dcb (MD5) Previous issue date: 2013-03-26 / Studies with some local anesthetics showed that these can cause genetic damage. But local anesthetics has not been tested against the genotoxicity of repeated use. Objective: The aim of this study was to evaluate the genotoxic potential of local anesthetics with single dose and repeated, through the micronucleus test. Methods: We used 80 Wistar rats, male, 12 weeks old, divided into 6 groups: A - 16 rats received lidocaine hydrochloride intraperitoneally (4.4 mg / kg), B - 16 rats received 3% mepivacaine intraperitoneally (4.4 mg / kg), C - 16 rats received 4% articaine intraperitoneally (7.0 mg / kg) D - 16 rats received prilocaine 3% intraperitoneally (6.0 mg / kg) E - 08 rats received cyclophosphamide in single subcutaneous dose (50mg/kg) (positive control group) F - 08 rats received 0.5 ml of saline intraperitoneally (negative control group). Eight rats from Group A, B, C and D received the dose of anesthetic only once at the first day of the experiment and the remainder were dosed daily for five days. The Kruskal-Wallis test followed by a multiple comparisons Student-Newman-Keuls test was used for statistical analysis. Results: The median of micronuclei in the lidocaine group exposed for 1 day was 1.00 and by 5 days was 0.50, mepivacaine for 1 day and for 5 days was 1.00, articaine for 1 day was 1.00 and for 5 days 0.00, prilocaine for 1 day and 5 days was 0.00, cyclophosphamide was 10.00 and the negative control group exposed for 1 day was 1.00 and exposed for 5 days was 0.00 (p<0.0001). There was a statistical difference between the number of micronuclei in relation to the positive control group and all local anesthetics studied (related to the anesthetic type and duration of exposure) (p=0.0001) but not for the negative control group (p>0.05). Conclusion: There was no increase in micronuclei frequency in relation to exposure to 1 or 5 days in all local anesthetics evaluated. / Estudos com alguns anestésicos locais mostraram que estes podem causar dano genético. Porém ainda não foi testada a genotoxicidade frente ao uso repetido destes. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar o potencial genotóxico de anestésicos locais em dose única e repetida, por meio do teste de micronúcleo em ratos Wistar. Material e métodos: Foram utilizados 80 ratos Wistar, machos, com 12 semanas, divididos em 6 grupos: A 16 ratos receberam cloridrato de lidocaína via intraperitoneal (4,4 mg/kg); B 16 ratos receberam mepivacaína a 3% via intraperitoneal (4,4 mg/kg); C 16 ratos receberam articaína a 4% via intraperitoneal (7,0 mg/kg); D 16 ratos receberam prilocaína a 3% via intraperitoneal (6,0 mg/kg); E 08 ratos receberam ciclofosfamida em dose única subcutânea (50mg/kg) (grupo controle positivo); F 08 ratos receberam 0,5ml de soro fisiológico via intraperitoneal (grupo controle negativo). Oito ratos do grupo A, B, C e D receberam a dose do anestésico apenas uma vez no primeiro dia do experimento e os demais receberam doses diárias durante cinco dias. O teste de Kruskal-Wallis, seguido das comparações múltiplas de Student-Newman-Keuls, foi utilizado para análise estatística. Resultados: A mediana de micronúcleos no grupo exposto a Lidocaína por 1 dia foi de 1.00 e por 5 dias foi de 0.50, a Mepivacaína por 1 dia e por 5 dias foi de 1.00, a Articaína por 1 dia 1.00 e por 5 dias 0.00, a Prilocaína por 1 dia e por 5 dias 0.00, a ciclofosfamida foi 10.00 e no grupo de controle negativo exposto por 1 dia foi 1,00 e no exposto por 5 dias foi de 0,00 (p<0,0001). Houve diferença estatística entre o número de micronúcleos em relação ao grupo controle positivo e todos os anestésicos locais estudados (quanto ao tipo e tempo de exposição) (p=0,0001), porém não em relação ao grupo controle negativo (p>0,05). Conclusão: Não foi observado aumento da frequência de micronúcleos com relação à exposição de 1 ou 5 dias em todos os anestésicos locais avaliados.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gustavo Logar.pdf: 371330 bytes, checksum: 461b03ba76909955dcf6db3c8b004b60 (MD5) Previous issue date: 2014-05-23 / The Biodentine is a new material suitable for various clinical situations in dentistry. Despite being a promising material, there are few studies evaluating the characteristics of this material, especially its genotoxicity and mutagenicity. Objective: This study aims to evaluate the genotoxic and mutagenic potential of Biodentine "in vivo". Methods: We used 24 Wistar albino rats, males were divided into 3 groups: A - 8 rats where specimens of Biodentine measuring 2 mm in diameter x 10mm length on the dorsum were placed, B - 8 rats, which received cyclophosphamide in single subcutaneous dose (50mg/kg) on the first day of the experiment (positive control group), C - 8 rats where specimens measuring 2 mm in diameter x 10mm long without Biodentine on the dorsum were placed (negative control group). After 24 hours, all animals were euthanized and material from bone marrow of femurs was collected to perform the Comet assay and micronucleus test. Results: Biodentine showed levels of DNA damage (tail intensity %) in bone marrow cells of 23.57 ± 7.70, cyclophosphamide of 27,43 ± 7,40 and negative control of 24.75 ± 5 55 (p < 0.05). The average number of micronuclei in the exposed Biodentine group was 6.25 (standard deviation - SD = 3.53), in the group exposed to cyclophosphamide was 9.75 (SD = 2.49) and negative control group was 0.75 (SD = 1.03) (p < 0.0001). Conclusion: The Biodentine showed an increase in the frequency of micronuclei, but no genotoxicity effect by the Comet assay. / O Biodentine é um novo material indicado para diversas situações clínicas na odontologia. Apesar de ser um material promissor, ainda há poucos trabalhos avaliando as características deste material, em especial sua genotoxicidade e mutagenicidade. Objetivo: Este estudo visa avaliar o potencial genotóxico e mutagênico do Biodentine in vivo . Material e métodos: Foram utilizados 24 ratos Wistar albinos, machos, distribuídos em 3 grupos: A 8 ratos onde foram colocados corpos de prova medindo 2mm de diâmetro x 10mm de comprimento com Biodentine no subcutâneo do dorso; B 8 ratos, que receberam ciclofosfamida em dose única subcutânea (50mg/kg) no primeiro dia do experimento (grupo controle positivo); C 8 ratos onde foram colocados corpos de prova medindo 2mm de diâmetro x 10mm de comprimento sem Biodentine no subcutâneo do dorso (grupo controle negativo). Após 24 horas, todos os animais foram eutanasiados e material da medula óssea dos fêmures foi coletado para realização do Teste do Cometa e do Teste do micronúcleo. Resultados: O Biodentine apresentou níveis de danos no DNA (tail intensity %) em células da medula óssea de 23,57 ± 7,70, a ciclofosfamida de 27,43 ± 7,40 e o controle negativo de 24,75 ± 5,55 (p<0,05). A média de micronúcleos no grupo exposto ao Biodentine foi de 6,25 (desvio padrão DP= 3,53), no grupo exposto a ciclofosfamida foi de 9,75 (DP= 2,49) e no grupo de controle negativo foi 0,75 (DP= 1,03) (p<0,0001). Conclusão: O Biodentine apresentou aumento na frequência de micronúcleos, mas não apresentou efeito genotóxico observado pelo teste do Cometa.

Submitted by Adriana Martinez (amartinez@unoeste.br) on 2017-08-03T20:13:27Z No. of bitstreams: 1 Jamile Tomiazzi.pdf: 1140169 bytes, checksum: 85ab1353f7aab9dbdd62efcda0bc0e0c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-03T20:13:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jamile Tomiazzi.pdf: 1140169 bytes, checksum: 85ab1353f7aab9dbdd62efcda0bc0e0c (MD5) Previous issue date: 2017-03-27 / The growing increase in the use of agrochemicals by small and large rural producers has generated environmental impacts and in the health of the exposed population. Another relevant public health problem, whose adverse effects have been widely documented, is smoking. Studies have indicated that isolate exposure to these xenobiotics can lead to ototoxicity and genotoxicity. Thus, the objective of this study was to evaluate the possible auditory and cytogenetic alterations in rural workers exposed to smoking and agrochemicals in isolation or in combination and to identify possible classification patterns of exposure groups. Were evaluated 127 workers of both sexes, with ages ranging from 18 to 39 years, divided into four groups: Control Group - CG; Group exposed to smoking - GT; Group exposed to agrochemicals - GA and Group exposed to the association between smoking and agrochemicals - GTA. Initially, a questionnaire was used to measure the exposure to the study compounds and general and auditory health. Auditory examinations (meatoscopy, conventional and high-frequency audiometry, logoaudiometry and imitanciometry) and cytogenetic evaluation (from cells of the bucal mucosa, stained by Giemsa method) were performed. The data were evaluated by the following pattern recognition algorithms Artificial Neural Network (ANN), Bayes Classifier (BAY) and Support Vector Machine (SVM). The results of the audiological evaluation demonstrated a lowering of high frequency thresholds, a higher incidence of descending type, type A tympanometry and absence of reflex of the stapedic muscle in the three exposed groups (GT, GA and GTA). In addition, these groups showed an increase in the total number of nuclear alterations and in the number of micronuclei, binucleate cells, karyotype, karynx, pycnotic cells and nuclear bud. The computational analysis did not recognize the GTA group as a real value, as with GT and GA in relation to GC, in which the data were distributed with standard and correctly classified. Therefore, it was concluded that exposure to agrochemicals and cigarettes, in isolation or in combination, has been shown to be potentially ototoxic and genotoxic. However, the concomitant use of xenobiotics did not lead to additive or potentiating effect. / O crescente aumento do uso de agroquímicos por pequenos e grandes produtores rurais tem gerado impactos ambientais e à saúde da população exposta. Outro problema relevante de saúde pública, cujos efeitos adversos têm sido amplamente documentados, é o tabagismo. Estudos têm indicado que a exposição isolada a estes xenobióticos pode levar a ototoxicidade e genotoxicidade. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar as possíveis alterações auditivas e citogenéticas de trabalhadores rurais expostos ao tabagismo e aos agroquímicos de maneira isolada ou em combinação e identificar possíveis padrões de classificação dos grupos de exposição. Foram avaliados 127 trabalhadores de ambos os sexos, com faixa etária de 18 a 39 anos, divididos em quatro grupos: Grupo Controle – GC; Grupo exposto ao tabagismo – GT; Grupo exposto a agroquímicos – GA e Grupo exposto à associação entre tabagismo e agroquímicos - GTA. Inicialmente foi aplicado um questionário, para coleta de dados sobre a exposição aos compostos de estudo e saúde geral e auditiva. Em seguida, foram realizados exames auditivos (meatoscopia, audiometria convencional e de alta frequência, logoaudiometria e imitânciometria) e avaliação citogenética (a partir de células da mucosa bucal, coradas pelo método Giemsa). Os dados foram avaliados pelos seguintes algoritmos de reconhecimento de padrões: Artificial Neural Network (ANN), Bayes Classifier (BAY) e Support Vector Machine (SVM). Os resultados da avaliação audiológica demonstraram rebaixamento de limiares auditivos em alta frequência, maior incidência de curva do tipo descendente, timpanometria tipo A e ausência de reflexo do músculo estapédico nos três grupos expostos (GT, GA e GTA). Além disso, nestes grupos foi observado aumento do número total de alterações nucleares e no número de micronúcleos, células binucleadas, cariólise, cariorréxis, células picnóticas e broto nuclear. A análise computacional não reconheceu o grupo GTA como um valor real, como ocorreu com GT e GA em relação ao GC, onde os dados foram distribuídos com padrão e classificadas corretamente. Diante disso, concluiu-se que a exposição a agroquímicos e cigarro, de maneira isolada ou em combinação, demonstrou ser potencialmente ototóxica e genotóxica. No entanto, o uso concomitante dos xenobióticos não levou a efeito aditivo ou de potencialização.

DA CASTANHA DE CAJU Apesar da importância social e econômica do beneficiamento da castanha de caju para o Rio Grande do Norte, a produção ainda é realizada de forma artesanal. Para a coleta da amêndoa da castanha é necessário assá-la. A fumaça gerada durante a queima da castanha possui altas concentrações de Material Particulado (MP) e esse MP produzido é inalado diariamente por grupos familiares por um período que pode exceder a 10 horas diárias. Em geral, os poluentes atmosféricos oriundos da queima de biomassa são potencialmente nocivos a saúde, relacionando-se com eventos de genotoxicidade, aumento no número de internações hospitalares e ambulatoriais, e mortalidade por doenças cardiovasculares e respiratórias. O presente trabalho teve três objetivos principais: 1° Realizar medições na concentração de O3, NO2, MP, Black Carbon (BC) e composição elementar do MP 2,5 provenientes da queima da castanha. 2° Identificar o potencial mutagênico associado ao beneficiamento artesanal da castanha de caju durante a estação seca, chuvosa e intermediária no RN (Brasil) com o auxílio do teste de micronúcleo (MN) em Tradescantia pallida. 3° Verificar o efeito mutagênico da atividade em MN de células esfoliadas de mucosa oral de trabalhadores envolvidos no beneficiamento. Para isso, três locais distintos foram definidos como pontos testes: Ponto 1. Comunidade do Amarelão, situada no perímetro rural do município de João Câmara-RN (local onde ocorre a queima da castanha de caju); Ponto 2. Fazenda Santa Luzia, situada próxima à região de queima da castanha de caju (local com as mesma condições ambientais do Ponto 1, porém sem a influência da atividade); Ponto 3. Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN), zona urbana de Natal-RN. Os resultados obtidos para o O3 e NO2 não excederam os limites estabelecidos pela legislação brasileira. No entanto, os resultados da medição de MP obtidos com o medidor portátil \"DUSTTRAK (TM)Aerossol Monitor \" indicou que entre as 8 medições de MP realizadas no Ponto 1, 7 excederam o nível de exposição definido como \"estado de emergência \"descrito na legislação brasileira (500µg/m 3 ), diferindo significativamente dos resultados obtidos nos Pontos 2 e 3 (6µg/m 3 ). As avaliações realizadas nos meses de Janeiro, Maio e Setembro de 2009, com o Mini-sampler confirmaram os resultados previamente obtidos com o \"DUSTTRAK (TM)Aerossol Monitor \".O valor médio de MP 2,5 (Jan - 548,412 µg/m 3 ; Mai - 1022,232 µg/m 3 ; Set - 1291,946 µg/m 3 ) e BC (Jan - 46,798 µg/m 3 ; Mai 70,068- µg/m 3 ; Set - 69,432 µg/m 3 ) obtido nas três campanhas para o Ponto 1 foram significativamente maiores que o Ponto 2 e 3. Para o Ponto 1 os elementos Si, S, Cl, K, Ni, Cu e Zn quando presentes estiveram em concentrações superiores aos Pontos 2 e 3. Os testes de genotoxicidade com T. pallida indicou aumento significativo no número de MN em todas as campanhas. Os resultados com células de mucosa oral humana corroboraram com o biomonitor vegetal, sendo verificado aumento significativo na freqüência de MN. Os resultados obtidos caracterizaram um dos piores níveis de exposição humana ao MP já relatado na literatura, excedendo amplamente os limites da legislação brasileira assim como os da OMS. Os resultados obtidos apresentaram um problema ocupacional grave, sendo necessária intervenção imediata dos gestores públicos na tentativa de minimizar os efeitos lesivos da atividade. / x Despite the social and economic importance of the processing of cashew nuts to Rio Grande do Norte, the production is still carried out artisanally. To collect the almond nut is necessary to roasting. The smoke generated during the burning of the nut has high concentrations of particulate matter (PM) and the PM produced is inhaled daily by families for a period which can exceed 10 hours a day. In general, air pollutants come from burning biomass are potentially harmful to health, relating to genotoxicity events, increase in the number of hospitalizations and outpatient, and mortality from cardiovascular and respiratory diseases. This project had three main objectives: 1 Make measurements in the concentration of O3, NO2, MP, Black Carbon (BC) and elemental composition of the PM 2.5 from the combustion of the cashew nut. 2 Identify the mutagenic potential associated with artisanally processing of cashew nut during the dry season, wet and intermediate in RN (Brazil) by using a micronucleus (MN) bioassay of T. pallida tetrads. 3 To investigate the effect of mutagenic activity in exfoliated cells of oral mucosa of workers involved in processing. For this, three test sites were chosen for this purpose: Site 1. the Amarelão community - where the roasting occurs, Site 2. the Santa Luzia farm - an area near the roasting site, though without direct influence on the process and Site 3. the Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN) - an urban area of Natal, Brazil. The results obtained for the O3 and NO2 do not exceed the limits established by Brazilian legislation. However, the results of the measurement of PM obtained with the portable meter \"DUSTTRAK (TM) Aerosol Monitor\" has indicated that between 8 PM measurements made at Site 1, 7 exceeded the level of exposure defined as \"emergency rule\" described in the Brazilian legislation (500 ? g/m 3 ), differing significantly from the results obtained in Sites 2 and 3 (6 ? g/m 3 ). Evaluations in January, May and September 2009, with the Mini-sampler confirmed the results previously obtained with the \"DUSTTRAK (TM)Aerosol Monitor.The average value of 2.5 MP (Jan - 548.412 mg/m 3 ; May - 1022.232 mg/m 3 ; Set - 1291.946 mg/m 3 ) and BC (Jan - 46.798 mg/m 3 ; May 70.068 - mg/m 3 ; Set - 69.432 mg/m 3 ) obtained in the three campaigns for Site 1 were significantly higher than the Site 2 and 3. To the Site 1 the elements Si, S, Cl, K, Ni, Cu and Zn when present were at concentrations higher than the Sites 2 and 3. Genotoxicity tests with T. pallida showed a significant increase in the number of MN in all campaigns. The results with cells of human oral mucosa have confirmed the biomonitoring, and found significant increase in the frequency of MN. The results marked one of the worst levels of human exposure to PM has been reported in the literature and greatly exceeded the limits of the Brazilian legislation as well as the WHO. The results showed a serious occupational problem, requiring immediate intervention of public officials in an attempt to minimize the harmful effects of the activity.

A exposição dos peixes a poluentes provoca danos nos organismos que podem ser identificados precocemente através de respostas biológicas. O presente estudo visou avaliar os efeitos do naftaleno e benzo(a)pireno em pampos da espécie Trachinotus carolinus. Foram avaliados os efeitos citogenotóxicos, histopatológicos e bioquímicos após exposições às concentrações de 0,9 M; 2,7 M e 8,1 M de NAP e BAP por períodos de 12, 24, 48 e 96 horas. O NAP causa quebra no DNA de eritrócitos de pampos em concentrações de 8,1 M e a partir de 12 horas de exposição. O BAP revelou ser genotóxico a partir da menor concentração e de 24 horas. A mutagenicidade de ambos os poluentes, avaliada através da indução de formação de micronúcleos e anormalidades nucleares eritrocitárias, também ocorre a partir de curtos períodos de exposição e freqüências de MN e ANE estão relacionadas com a duração da exposição. O período de exposição aos HPAs foi determinante na intensidade e severidade das lesões observadas nos tecidos dos peixes. A especificidade de CYP1A, observada segundo análise imunohistoquímica, ocorreu de maneira dose-dependente e evidenciada principalmente nos maiores períodos experimentais. Os poluentes orgânicos, nas condições experimentais utilizadas, não provocaram alteração significativa na atividade das enzimas catalase e GST da espécie. Os biomarcadores, citogenotóxicos e histopatológicos utilizados neste estudo, demonstraram ser ferramentas eficientes para aferir a toxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade de NAP e BAP como também sua relação dose-resposta na espécie T. carolinus. / Effects of exposure of fish to pollutants can be identified through stress responses. The present study aims to evaluate the effects of naphthalene and benzo(a)pyrene in Florida pompanos, Trachinotus carolinus. Evidences from citogenotoxical, histopathological and biochemical studies showed that alterations caused by exposures to 0.9 M, 2.7 M and 8.1 M of NAP and BAP occurred within 12 to 96 hours. NAP at 8.1 M induced erythrocyte DNA strand breaks in pompanos since early periods of exposure. Genotoxic effects of BAP at the lowest concentration were documented soon after 24 hours of exposure. Mutagenotoxicity of both pollutants, as seen by the induction of MN and ENA, was revealed since early periods and their frequencies are related to the duration of exposure. Exposures to these PAHs, for longer periods, resulted in increased frequency and severity of lesions observed in fish tissues. Specificity of CYP1A, observed through immunohistochemical analyses, was related to the dose of the pollutants and mainly at longer periods of exposure. These organic pollutants, under the experimental conditions, did not interfere with the activity of liver catalase and GST of the species. The citogenotoxic and histopathologic biomarkers used in this study proved to be efficient tools to ascertain the toxicity, genotoxicity and mutagenesis of NAP and BAP, as well as their dose related response, in the species T. carolinus.

O estudo do processo da peroxidação de lipídios tem aumentado nos últimos anos, principalmente devido à implicação dos hidroperóxidos de lipídios (LOOH) em diversos processos patológicos. A decomposição destes LOOH é capaz de gerar subprodutos capazes de promover danos em biomoléculas, incluindo proteínas e DNA. No presente trabalho, utilizando hidroperóxidos de ácido linoléico isotopicamente marcado com átomo de oxigênio-18 (LA18O18OH), fomos capazes de demonstrar que estas moléculas gerararam oxigênio singlete marcado [18(1O2)] em células em cultura. A detecção de tal espécie foi possível através da utilização de uma nova metodologia utilizando um derivado antracenico. Para este propósito foi utilizado o derivado de antraceno 3,3\'-(9,10-antracenodiil) bisacrilato (DADB), cujo produto especifico da reação com o 1O2 (o endoperóxido do DADB DADBO2) do pode ser facilmente detectado por HPLC-MS/MS. De forma a expandir a compreensão dos efeitos tóxicos desses LOOH, investigamos o efeito destes compostos gerados intracelularmente. Para tal, foi utilizado o Rosa bengala (RB), um fotosensibilizador que tem afinidade por espaços apolares como membranas e lisossomos. A fotosenssibilização deste composto foi capaz de induzir a morte celular, e esta morte estaria relacionada a uma maior formação de 1O2 e a um maior acumulo de peróxidos. Nestes estudos foi possível demonstrar que carotenóides e sistemas antioxidantes dependentes de glutationa foram capazes de proteger contra os efeitos tóxicos da fotosensibilização na presença de RB. Adicionalmente foram avaliados os efeitos da hemoglobina (Hb) e do hidroperóxido do ácido linoléico (LAOOH) em uma série de parâmetros toxicológicos, como citotoxicidade, estado redox, a peroxidação lipídica e dano ao DNA. Nós demonstramos que a pré-incubação das células com Hb e sua posterior exposição à LAOOH (Hb + LAOOH) levou a um aumento na morte celular, a oxidação do DCFH, formação de malonaldeído e fragmentação do DNA e que esses efeitos estavam relacionados com o grupo peróxido e ao heme presentes na Hb. Foi demonstrado que as células incubadas com LAOOH e Hb apresentaram um nível maior das lesões de DNA; 8-oxo-7,8-diidro-2 \'desoxiguanosina e 1,N2-etheno-2\'-desoxiguanosina. Além disso, as incubações com Hb levaram a um aumento nos níveis de ferro intracelular, e este alto nível de ferro correlacionada com a oxidação do DNA, avaliadas através da medida de sitios EndoIII e Fpg sensíveis. Nossos resultados comprovam que os LAOOHs apresentaram efeito citotóxico e genotóxico, mesmo em concentrações muito baixas, podendo contribuir para o desencadeamento de processos patologicos como o câncer e doenças cardiovasculares e neurodegenerativas. / The study of the process of lipid peroxidation has increased in recent years, mainly due to the involvement of lipid hydroperoxide (LOOH) in a series of pathological processes. The decomposition of LOOH is able to generate products that can promote damage to biomolecules, including proteins and DNA. In the present work, using linoleic acid hydroperoxide isotopically labeled with 18O2 (LA18O18OH), we demonstrate that these molecules were able to generate labeled singlet oxygen [18(1O2)] in cultured cells. The detection of such species was possible using a new methodology using an anthracene derivative .For this purpose we used the anthracene derivative of 3,3\'-(9,10-antracendiil) bisacrilate (DADB), whose specific reaction product with 1O2 (DADB endoperoxide DADBO2) can be easily detected by HPLC-MS/MS. In order to expand the understanding of the toxic effects of LOOH, we investigated the effect of these compounds generated intracellularly. For this porpoise, we used Rose Bengal (RB), a photosensitizer that has affinity for apolar spaces such as membranes and lysosomes. The photosensitization of this compound was able to induce cell death, and this death was related to increased formation of 1O2 and a higher accumulation of peroxides. In these studies we have shown that carotenoids and glutathione-dependent antioxidant systems were capable of protecting against the toxic effects of photosensitization in the presence of RB. Additionally, we evaluated the effects of hemoglobin (Hb) and linoleic acid hydroperoxide (LAOOH) in a series of toxicological endpoints such as cytotoxicity, redox status, lipid peroxidation and DNA damage. We demonstrated that preincubation of cells with Hb and its subsequent exposure to LAOOH (Hb + LAOOH) led to an increase in cell death, DCFH oxidation, formation of malonaldehyde and DNA fragmentation, and that these effects were related to the peroxide and the heme group. It was demonstrated that cells incubated with LAOOH and Hb showed a higher level of the DNA lesions, 8-oxo-7,8-dihydro-2\'deoxyguanosine and 1,N2-etheno-2\'-deoxyguanosine. Furthermore, incubations with Hb led to an increase in intracellular iron levels, and this high level of iron correlates with the oxidation of DNA, measured as EndoIII and Fpg-sensitive sites. Our results show that the LOOHs showed cytotoxic and genotoxic, even at very low concentrations and may contribute to the onset of chronic malignancies like cancer, cardiovascular and neurodegenerative diseases.

O lodo de esgoto gerado em estações de tratamento de esgoto pode conter substancias tóxicas ainda não regulamentadas nas legislações nacionais e internacionais. Dentre elas as genotóxicas tem recebido especial atenção. Este trabalho teve como objetivos avaliar a genotoxicidade de amostras de lodo de esgoto tratado de diferentes Estações de Tratamento de Esgoto (ETE) do Estado de São Paulo com o teste de micronúcleo em Tradescantia e ampliar os conhecimentos sobre o potencial de utilização da Tradescantia pallida em substituição ao clone 4430. Todas as ETEs estudadas apresentaram pelo menos uma amostra positiva para o teste de micronúcleo em Tradescantia sendo necessários mais estudos para elucidar quais os compostos são responsáveis pelo efeito observado. Os resultados sugerem que a Tradescantia pallida pode substituir o clone 4430 no teste de micronúcleo, porém esse ensaio tem aplicabilidade limitada em programas de monitoramento. / The sludge produced in sewage treatment plants can contain toxic substances which are not yet regulated by national and international legislation. Among these, the genotoxic substances are of great concern. The present paper aimed at evaluating the genotoxicity of treated sludge samples collected in different Sewage Treatment Plants (STP) located in the State of São Paul, Brazil. The micronucleus assay in Tradescantia was the test chosen for this evaluation. Another objective of the study was to verify it Tradescantia pallida could replace the clone 4430 in the Trad-MN assay. All the STPs studied have presented at least one positive sample for the micronucleus assay in the Tradescantia. Further studies are required in order to determine which compounds are responsible for the observed effect. The results obtained suggest that T. pallida can replace clone 4430 in the micronucleus assay, however, this assay presents limited applicability in monitoring programs.

Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-05-23T17:36:08Z No. of bitstreams: 1 TES_EDIO_GIACOMELLI_PARCIAL.pdf: 198707 bytes, checksum: 700e5dcbdc3f86f944c5b7b7bfc87e7f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-23T17:36:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_EDIO_GIACOMELLI_PARCIAL.pdf: 198707 bytes, checksum: 700e5dcbdc3f86f944c5b7b7bfc87e7f (MD5) Previous issue date: 2017-01-05 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The aim of this study was to evaluate the biocompatibility of conventional glass ionomer cement (GIC) modified by calcium carbonate by means of cytotoxicity and genotoxicity tests. The calcium carbonate (CC), in proportions of 1%, 5% and 10%, was added to the GIC powder. A polytetrafluoroethylene matrix (10 mm diameter and 3 mm height) was used to make the samples, and four groups were obtained (n = 4): G1 ? only GIC (control); G2 ? GIC with 1% CC; G3 ? GIC with 5% CC; G4 ? GIC with 10% CC. The preparation of the samples was carried out in accordance with ISO 10993-12. The MTT test was used to evaluate the cell cytotoxicity, and the micronucleus and comet tests were performed to evaluate the genotoxicity, by using a mouse fibroblast cell culture of the NIH/3T3 lineage. According to MTT test, the samples with 1% and 5% CC showed a higher cytotoxic potential, and the samples with 10% CC presented a cellular viability index comparable to the GIC. The micronucleus test showed that GIC with 10% CC produced an improvement in cell proliferative potential (IPBC).CIV with 5% CC had a reduction in IPBC that did not compromise the material from the genotoxic point of view. In the comet test, groups with the addition of CC had a small increase in genotoxic potential compared with GIC. It was concluded that the addition of 10% CC to the GIC had a low cytotoxic potential and it is feasible for use in the cellular environment, and the addition of 1%, 5% and 10% CC to the GIC did not induce genetic damage. / Este estudo teve o objetivo de avaliar a biocompatibilidade do cimento de ion?mero de vidro (CIV) convencional modificado por carbonato de c?lcio de conchas marinhas por meio dos testes de citotoxicidade e genotoxicidade celular. O carbonato de c?lcio (CC), nas propor??es de 1%, 5% e 10%, foi adicionado ao p? do CIV. Utilizando uma matriz de politetrafluoretileno (10 mm de di?metro e 3 mm de altura), foram confeccionadas as amostras, sendo obtidos quatro grupos (n=4): G1 ? apenas CIV (controle); G2 ? CIV com 1% de CC; G3 ? CIV com 5% de CC; G4 ? CIV com 10% de CC. A prepara??o das amostras foi realizada de acordo com a norma ISO 10993-12. O ensaio MTT foi utilizado para avaliar a citotoxicidade celular, e os ensaios de micron?cleo e cometa foram realizados para avaliar a genotoxicidade, por meio da utiliza??o de uma cultura celular de fibroblastos de camundongo da linhagem NIH/3T3. De acordo com o ensaio MTT, as amostras contendo a adi??o de 1% e 5% de CC apresentaram um maior potencial citot?xico, e as amostras com 10% de CC apresentaram um ?ndice de viabilidade celular compar?vel ao do CIV. O ensaio do micron?cleo evidenciou que o CIV com 10% de CC produziu uma melhora no potencial proliferativo celular (IPBC). CIV com 5% de CC apresentou uma redu??o no IPBC que n?o compromete o material do ponto de vista genot?xico. No ensaio cometa, os grupos com adi??o de CC mostraram um pequeno aumento do potencial genot?xico em compara??o ao CIV. Concluiu-se que a adi??o de 10% de CC ao CIV apresentou um baixo potencial citot?xico, sendo vi?vel para utiliza??o em ambiente celular, e a adi??o de 1%, 5% e 10% de CC ao CIV n?o induziu a um dano gen?tico.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2017-06-28T13:06:00Z No. of bitstreams: 1 LUCAS RODRIGUES SAMPAIO.pdf: 955041 bytes, checksum: 35594b1f525d8647d04413aaa06e3730 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-28T13:06:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LUCAS RODRIGUES SAMPAIO.pdf: 955041 bytes, checksum: 35594b1f525d8647d04413aaa06e3730 (MD5) Previous issue date: 2017-03-09 / The study of traditional uses of plants and their products has gradually increased during the last years, which has resulted in a significant number of publications in this area. Phytotherapics correspond to a significant principle of biologically ative natural products, many of which constituted models for the synthesis of a large number of drugs. Therefore, inserts it the Carthamus tinctorius, a plant that is part of the family Asteraceae, presenting themselves as a crop adapted to adverse conditions, being cultivated worldwide due to its medicinal properties. The Carthamus tinctorius contains a high quality oil rich in polyunsaturated fatty acids (PUFAs). The herb has potential for improvement through molecular breeding programs due to the availability of significant genetic and phenotypic diversity. In order to evaluate the angiogenic and genotoxic activities of safflower oil, angiogenesis tests were carried out on the chorioallantoid membrane (MCA) of embryonated chicken egg and micronucleus test on hematopoietic bone marrow of mice, where the results of the test in MCA Indicated that the oil caused a significant increase of the vascular network (p <0.05) in relation to the neutral and inhibitory controls. In the micronucleus test, the doses of 500, 1,000 and 1,500 mg.kg-1 were used. No genotoxic activity was observed at doses of 500 and 1,000, since the number of micronuclei in relation positive control doxorubicin (DXR) towas lower (p <0.05). However at the dose of 1,500, the genotoxic effect was observed, since the micronucleus values detected were similar to those of the positive control. In view of the techniques and conditions employed, the conclusions of this study reinforce that safflower oil presents therapeutic potential, with angiogenic activity and absence of genotoxicity in doses of 500 and 1,000 mg.kg-1. However, it should be consumed moderately because of the mutagenic activity found in high doses. / O estudo dos usos tradicionais de plantas e seus produtos têm aumentado gradualmente durante os últimos anos, o que resultou em um conjunto significativo de publicações nesta área. Os fitoterápicos correspondem a um princípio significativo de produtos naturais biologicamente ativos, muitos dos quais constituíram modelos para a síntese de um grande número de fármacos. Portanto, inclui-se o Carthamus tinctorius, planta que faz parte da família Asteraceae, apresentando-se como uma cultura adaptada a condições adversas, sendo cultivada em todo o mundo devido às suas propriedades medicinais. O Carthamus tinctorius, contém um óleo de alta qualidade rico em ácidos graxos poliinsaturados (PUFAs). A cultura da erva tem um potencial de melhoria através de programas de melhoramento molecular devido à disponibilidade da diversidade genética e fenotípica significativa. Com o intuito de avaliar as atividades angiogênica e genotóxica do óleo de cártamo, foram realizados os testes de angiogênese na membrana corioalantoide (MCA) do ovo embrionado de galinha e o teste de micronúcleo em medula óssea hematopoiética de camundongos, onde os resultados do ensaio na MCA indicaram que o óleo provocou aumento significativo da rede vascular (p<0,05) em relação aos controles neutro e inibidor. No teste do micronúcleo, foram utilizadas doses de, 500, 1.000 e 1.500 mg.kg-1. Não foi observada atividade genotóxica nas doses de 500 e 1.000, uma vez que o número de micronúcleos foi menor (p<0,05) em relação ao controle positivo doxorrubicina (DXR). Entretanto, na dose de 1.500 foi observado o efeito genotóxico, pois os valores de micronúcleos detectados foram semelhantes aos do controle positivo. Diante das técnicas e condições empregadas, as conclusões deste estudo reforçam que o óleo de cártamo apresenta potencial terapêutico, com atividade angiogênica e ausência de genotoxicidade nas doses de 500 e 1.000 mg.kg-1. No entanto, deve ser consumido moderadamente por conta da atividade genotóxica encontrada em doses elevadas.

O processo de tratamento da madeira utiliza substâncias que geram compostos perigosos que podem contaminar os compartimentos ambientais. O presente estudo avaliou uma área sob influência da contaminação de solo proveniente das atividades de uma usina de tratamento de madeira desativada. A presença e o efeito de compostos mutagênicos em amostras ambientais foram utilizados como marcadores de exposição associada à avaliação de marcadores genéticos de efeito precoce em humanos, com foco em crianças como grupo sensível. Uma área 1750 m distante da usina, fora do quadrante dispersão preferencial atmosférica e em oposição à drenagem do local, foi utilizada como local de referência para a coleta de amostras e comparação. Extratos orgânicos de água de abastecimento, poeira de sótão e material particulado atmosférico fino (PM2,5) foram avaliados para mutagenicidade por meio do ensaio Salmonella/microssoma. Cobre (Cu), cromo (Cr), arsênio (As) e pentaclorofenol (PCP) foram quantificados em amostras de poeira do sótão. Os 16 Hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos (HPAs) prioritários foram avaliados nos extratos de PM2,5 e poeira do sótão. Crianças residentes no entorno da usina e na área de referência foram avaliadas quanto à presença de micronúcleos em amostras de sangue e mucosa oral, e danos primários no DNA, pelo ensaio cometa em linfócitos de sangue periférico. De acordo com a análise de metais, as residências perto da entrada da usina foram as mais afetadas. PCP foi identificado em amostras de poeira de sótão (0,49 mg/kg) e a concentração total de HPAs nesta matriz variou 0,40-13,31 mg/g, com maior dispersão. Todas as amostras de poeira do sótão em que a concentração total de HPAs estava acima de 2μg/g apresentaram resposta positiva para a atividade mutagênica. A contribuição dos HPAs para a mutagênese na poeira de sótão representou 10%, indicando que outros compostos podem contribuir para o efeito mutagênico. A atividade mutagênica e a concentração de HPAs nas amostras de PM2,5foram, de maneira geral, mais elevadas na área de risco, embora em alguns períodos de amostragem a área de referência atingiu valores semelhantes ou mesmo superiores. O efeito mutagênico e as concentrações de HPAs observados nas amostras de PM2,5 foram semelhantes aos valores encontrados em estudos que avaliaram áreas urbanas e com influência industrial. Extratos orgânicos de água de abastecimento não apresentaram mutagenicidade. As frequências de MN em linfócitos de sangue periférico e de células binucleadas na mucosa oral foram significativamente maiores no grupo de risco. Nos demais biomarcadores avaliados não foram observadas diferenças significativas entre os grupos. O conjunto de resultados indica a necessidade de novas avaliações utilizando grupo de referência menos suscetível às influências da área contaminada. O conjunto de dados coletados neste estudo indica a necessidade de uma avaliação mais cuidadosa dos biomarcadores individualmente e de um grupo de referência menos suscetível a influências da área contaminada. Apesar da ausência de diferenças significativas entre os grupos de risco e de referência em biomarcadores de danos no DNA avaliados em crianças, os resultados observados nas amostras de poeira de sótão e PM2,5 sugerem que a população esteve ou ainda está potencialmente exposta a substâncias capazes de causar efeitos adversos à saúde humana. / The mutagenic activity and the concentration of PAHs in PM2.5 samples were generally higher in the risk area, although in some periods the reference area has reached similar or even higher values. The mutagenic effect and the concentrations of PAHs recorded in the PM2.5 samples were similar to those found in studies that assessed areas of intense urban occupation and industrial influence. Organic extracts from supply water showed no mutagenicity. The MN frequencies in peripheral blood lymphocytes and binucleated cells of the oral mucosa were significantly higher in the risk group. No significant differences between children from the reference and risk area were observed in others genetic biomarkers assessed. The result set indicates the need for further evaluations using reference group less susceptible to the influences of the contaminated area. The set of data collected in this study indicates the need for a more cautious assessment of biomarkers individually, and a reference group less susceptible to influences from the contaminated area is necessary. Despite the absence of significant differences between the risk and reference groups in biomarkers of DNA damage assessed in children, the results in attic and PM2.5 samples suggest that the population was or is still potentially exposed to substances with strong negatives effects on human health.