Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2018-08-14T14:20:32Z No. of bitstreams: 1 nataliacunhamuniz.pdf: 1125755 bytes, checksum: efe31dd995cd852cbe9d452697e12f67 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-09-03T16:32:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 nataliacunhamuniz.pdf: 1125755 bytes, checksum: efe31dd995cd852cbe9d452697e12f67 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-03T16:32:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 nataliacunhamuniz.pdf: 1125755 bytes, checksum: efe31dd995cd852cbe9d452697e12f67 (MD5) Previous issue date: 2018-05-04 / O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade carrapaticida do carvacrol sobre larvas de Rhipicephalus microplus em lâminas foliares de Brachiaria ruziziensis, bem como a genotoxicidade desta solução sobre esta espécie de gramínea . Soluções de carvacrol em concentrações de 1,25; 2,50; 5,00; 10,00 e 20,00 mg/mL foram aspergidas em vasos que haviam recebido larvas não alimentadas de R. microplus. Após um período de 24h da aplicação, foram contabilizados os sobreviventes e calculada a eficiência de cada tratamento. Nas menores concentrações, os percentuais de eficiência foram semelhantes ao grupo controle, enquanto nas maiores concentrações, 10,00 e 20,00 mg/ml, a eficiência do tratamento foi de 89,84% e 94.66%, respectivamente. Na avaliação de genotoxicidade de B. ruziziensis , feita por análise de citometria de fluxo, foram observados danos celulares de até 100%. Portanto, é possível concluir que o carvacrol é uma alternativa no controle de carrapatos, visando a redução da utilização de produtos químicos. / The aim of this study was to evaluate an acaricide activity of carvacrol on larvae of Rhipicephalus microplus in leaf blades of Brachiaria ruziziensis and the genotoxicity of this solution on this species of grass. Carvacrol solutions in concentrations of 1,25; 2,50; 5,00; 10,00 e 20,00 mg/mL were sprayed on vessels that had previously received non-fed R. microplus larvae. After a 24-hour application period, the survivors were accounted for and the efficiency of each treatment was calculated. At the lowest concentrations, the efficiency percentages were similar to those of the control, while at the highest concentrations, 10.00 and 20.00 mg/mL, the treatment efficiency was 89.84% and 94.66%, respectively. In the evaluation of genotoxicity of B. ruziziensis , made by flow cytometric analysis, cellular damage up to 100% was observed. Therefore, it is possible to conclude that carvacrol is an alternative in the control of ticks, aiming to reduce the use of chemicals.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Eliana_do_Nascimento_Torre.pdf: 1908566 bytes, checksum: 7f4e5292cab07c5cd5840870b92b0df1 (MD5) Previous issue date: 2011-07-19 / Adhesive fillings are satisfactory on short-term evaluation. However, when the evaluation period of longevity of these fillings is longer, problems with the stability of the polymer formed by the adhesive system and the degradation of collagen forming the hybrid layer provoke a large decrease in the durability of this type of filling. The extracellular matrix metalloproteinases (MMPs) are enzymes, which have been associated with the degradation of collagen present at the hybrid layer. Therefore, the possibility of inhibiting the activity of these enzymes has been considered an important strategy to maintain and increase the longevity of adhesive fillings. Hence, the aim of this work is to evaluate the inhibitory potential of MMPs through the addiction of the monomers with promising characteristics reported in previous studies. These monomers have molecules known as ―kidnappers‖ of bivalent cations. This characteristic is important because the catalytic place of MMPs has zinc and calcium in its constitution. Therefore, the coordination of molecules with the catalytic place of the enzyme would be able to inhibit the activity of the MMPs. Dentine from teeth recently pulled will be used to obtain and purify the MMPs of dentine.. The analysis of MMPs inhibition will be carried out through a zymography. In case of positive results for the inhibition of MMPs, cytotoxicity and genotoxicity tests will be carried out in cellular lineages of human pulp fibroblasts apart from an immortalized lineage of fibroblasts of 3T3/NIH mice. The MTT (bromide 3-(4.5-dimethylthiazol-2-ilo)-2.5-diphenyltetrazolium) colorimetric test will be used to measure the cytotoxicity of the products tested and the test of micronucleus will be used to measure genotoxicity. In all groups the 10mM concentration induced 100% cell death. There was no difference in sensitivity in both strains. Statistically, in relation to the control group/untreated, the monomers were more cytotoxic in HPFs of groups 4 and 5. Similar results were found for the 3T3 lineage, except for group 2, which also showed statistical significance for all concentrations. There was a higher number of micronucleated cells in the groups where the two monomers of intermediate chains longer (PEG200 and PEG400 DMA) were used when compared to control. The results suggest that these two monomers are more cytotoxic and genotoxic. Most of the methacrylate monomers showed considerable but not total inhibition of MMP-2 by zymography. The exception was the PEG200 DMA, which only the concentration of 5 mM inhibited the activity of this gelatinolitic MMP / Restaurações adesivas apresentam desempenho satisfatório em avaliações de curto prazo, porém quando o período de avaliação da longevidade dessas restaurações é maior, problemas com a estabilidade do polímero formado pelo sistema adesivo e com a degradação do colágeno formador da camada híbrida, provocam uma queda expressiva na durabilidade desse tipo de restauração. As metaloproteinases da matriz extracelular (MMPs) são enzimas que têm sido associadas com a degradação do colágeno formador da camada híbrida e, por isso, a possibilidade de inibir a atividade dessas enzimas tem sido considerada uma estratégia importante para a manutenção e aumento da longevidade das restaurações adesivas. O objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial inibitório da MMP-2 por monômeros com características promissoras relatadas na literatura relacionadas ao seu potencial inibidor de MMPs, sendo estes, EGDMA (1), TEGDMA (2), T4GDMA (3), PEG200 DMA (4) e PEG400 DMA (5). Dentina humana derivada de dentes recentemente extraídos foi utilizada para a obtenção e purificação das MMPs. O ensaio de inibição da MMP-2 foi realizado por zimografia. Testes de citotoxicidade e genotoxicidade foram realizados com uma linhagem primária de fibroblastos pulpares humanos (FPH), além de uma linhagem imortalizada de fibroblastos de camundongos 3T3/NIH. O teste colorimétrico MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazólio) foi usado para medir a citotoxicidade dos produtos testados, enquanto que o teste de formação de micronúcleos foi usado para avaliar a genotoxicidade. Em todos os grupos a concentração de 10mM induziu a 100% de morte celular. Não houve diferença de sensibilidade nas duas linhagens estudadas. Estatisticamente, em relação ao grupo controle/não tratado, os monômeros foram mais citotóxicos nos FPHs nos grupos 4 e 5. Resultados semelhantes foram encontrados na linhagem 3T3, à exceção do grupo 2, que apresentou diferença estatística em todas as suas concentrações, nesta célula. Houve maior número de células micronucleadas nos grupos onde foram utilizados os dois monômeros de cadeias intermediárias mais longas (PEG200 DMA e PEG400 DMA) quando comparados ao controle, sugerindo os resultados, que estes monômeros são mais citotóxicos e genotóxicos. A maioria dos monômeros metacrilatos apresentou considerável, mas não total inibição da MMP-2 em todas as concentrações através dos ensaios de zimografia. A exceção foi o PEG200DMA, o qual somente a concentração de 5mM inibiu a atividade gelatinolítica da referida MMP

O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos genotóxicos/citotóxicos ocasionados por disjuntores de Haas em células epiteliais esfoliadas da mucosa bucal de pacientes submetidos a tratamento ortodôntico, por meio do ensaio de micronúcleos. Participaram do estudo 22 pacientes entre 06 a 12 anos de idade, de ambos os gêneros, que necessitaram de disjuntores de Haas para correção de mordida cruzada posterior. Foi efetuada a coleta de células epiteliais da mucosa da bochecha, por meio de raspagem suave com escova científica. As células foram coletadas antes (T0), um mês após a instalação do aparelho (T1) e 3 meses após o travamento dos disjuntores (T2). As células foram processadas para obtenção de lâminas, as quais foram coradas com o método de Feulgen/Fast Green para quantificação do número de células normais, cariolíticas, picnóticas, brotos nucleares, bi/trinucleadas e com a presença de micronúcleos, em microscospia de luz. Os resultados foram submetidos à analise estatistica por meio do teste ANOVA, seguido do pós-teste de Tukey. O nível de significância adotado foi de 5%. Os resultados demonstraram que não houve diferença estatisticamente significante com relação à preença de micronúcleos, nos períodos avaliados (p>0,05). Os brotos nucleares sofreram aumento em T1 (p>0,05), com retorno aos níveis baseline em T2. Em relação às outras anormalidades (células cariolíticas, picnóticas e bi/trinucleadas), houve aumento significante em T1 e T2 (p<0,0001). Concluindo, este estudo demonstrou que os disjuntores de Haas não ocasionaram aumento de micronúcleos em células da mucosa bucal. Entretanto, foram observadas aumento estatisticamente significante das células cariolíticas, picnóticas e bi/trinucleadas durante o tratamento, sugerindo possíveis efeitos citotóxicos. / The aim of the present study was to evaluate the genotoxic and cytotoxic effects caused by Haas appliance through micronuclei assay in buccal mucosa epithelial cells of patients submitted to orthodontic treatment. The study included 22 patients between 06 and 12 years of age, both genders, who required Haas appliance for correction of posterior crossbite. Epithelial cells from the cheek mucosa were collected performed by gentle scraping scientific toothbrush. The cells were collected before (T0), one month after the device was installed (T1) and 3 months after the appliance immobilization (T2). The cells were processed to obtain slides and Feulgen/Fast Green was used as staining method for counting the number of normal, karyolytic, pyknotic, nuclear buds, binucleated and micronucleus cells under light microscopy. The cellular abnormalities were evaluated with the parametric tests for comparison of the means by ANOVA test followed by the Tukey post-test. The significance level was 5%. The results of this study showed that there were no statistically significant results for the micronuclei in the evaluated periods (p>0,05). Nuclear buds increased in T1 (p<0,05), returning to baseline levels in T2. In relation to the other abnormalities (cariolytic, pyknotic and bi/trinucleated cells), there were a significant increase in T1 and T2 (p<0.0001). In conclusion, this study demonstrated that Haas appliance did not cause micronuclei increase in cells of buccal mucosa. However, a statistically significant increase in cariolytic, pyknotic and bi/trinucleated cells were observed during treatment, suggesting possible cytotoxic effects.

Made available in DSpace on 2011-05-04T12:36:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / A pneumoconiose é uma das mais recorrentes doenças pulmonares ocupacionais em todo mundo, estando a asbestose, uma das doenças relacionadas ao asbesto, em crescente número. O asbesto corresponde a um conjunto heterogêneo de fibras natural minerais, muito utilizado desde a antiguidade, e seus efeitos nocivos sobre a saúde humana constatados em diversos países. A inalação destas fibras causa o desenvolvimento de fibrose intersticial pulmonar intensa, envolvendo reação inflamatória, produção de colágeno e formação de granuloma. Além disso, também, está associada com a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO) no trato respiratório inferior, resultando em estresse oxidativo. A produção elevada e contínua de ERO ou sua inadequada remoção pode suprimir o sistema de defesa antioxidante e ocasionar danos em moléculas celulares importantes, como proteínas e DNA, que futuramente podem resultar em câncer. Esteestudo teve como objetivo avaliar alterações de parâmetros enzimáticos do estresse oxidativo e os danos genotóxicos decorrentes de exposição ao asbesto, em trabalhadores expostos e não-expostos, sendo os trabalhadores expostos, advindos de empresas que utilizam asbesto nos seus processos produtivos, localizadas na cidade do Rio de Janeiro, e os trabalhadores não expostos compostos de técnicos laboratoriais do Laboratório de Toxicologias do CESTEH / ENSP / FIOCRUZ. Para tanto, foram realizados exames físicos, radiográficos de tórax, espirometria e entrevista, com a finalidade de avaliar o grau de acometimento dos indivíduos e a evolução clínica dos sintomas. O teste de Ensaio Cometa e a determinação das atividades das enzimas Catalase (CAT) e Glutationa S-Transferase (GST) foram utilizados na avaliação dos danos genotóxicos e dos parâmetros enzimáticos do estresse oxidativo. Sendo assim, trabalhadores expostos apresentaram 79,8 por cento de alterações de função pulmonar e broncodilatação e 32,7 por cento foram diagnosticados com asbestose. A população exposta ao amianto apresentou diferença bastante significativa dos resultados de ensaio cometa (p<0,000) e da atividade da GST (p<0,01), em comparação com a população não exposta. Estes resultados demonstram a relação entre a exposição ao asbesto e alterações enzimáticas do estresse oxidativo e danos no DNA, caracterizando um risco para as populações expostas ao amianto e contribuindo com evidências toxicológicas na luta do banimento do asbesto no Brasil. / The pneumoconiosis is one of the most recurrent occupational lung disease worldwide, with asbestosis, a disease related to asbestos, in increasing numbers. The asbestos is a heterogeneous set of natural mineral fibers, widely used since antiquity, and its harmful effects on human health were found in many countries. The inhalation of these fibers causes the development of interstitial pulmonary fibrosis intense, involving inflammation, production of collagen and formation of granuloma. It is also associated with the formation of reactive oxygen species (ROS) in the lower respiratory tract, resulting in oxidative stress. The high and continuous production of ROS or their improper removal can remove the antioxidant defense system and cause damage to important cellular molecules such as proteins and DNA, which in future may result in cancer. This study aimed to evaluate changes in enzymatic parameters of oxidative stress and genotoxic damage caused by exposure to asbestos in exposed workers and non-exposed, and the exposed workers are from companies that use asbestos in their production processes, located in the city of Rio de Janeiro, and the workers not exposed to compound laboratory technicians of the Laboratory of Toxicology of CESTEH / ENSP / FIOCRUZ. Therefore, we performed physical examinations, chest radiography, spirometry and interview, in order to evaluate the degree of involvement of individuals and the clinical evolution of the symptoms. The Comet test and the determination of the activities of enzymes Catalase (CAT) and Glutathione S-Transferase (GST) were used to assess the genotoxic damage and enzymatic parameters of oxidative stress. Thus, workers exposed showed 79.8% of changes in lung function and bronchodilation and 32.7% were diagnosed with asbestosis. The population exposed to asbestos showed significant difference of the results of comet assay (p <0.000) and GST activity (p <0.01), comparing with the non exposed population. These results demonstrate the relationship between exposure to asbestos and enzymatic changes of oxidative stress and DNA damage, showing a risk for people exposed to asbestos and contributing with toxicological evidences into the fight against the use of asbestos in Brazil.

Os hidrocarbonetos policíclicos aromáticos são tóxicos e/ou genotóxicos para diversos organismos marinhos e a toxicidade de muitos deles aumenta consideravelmente quando expostos à radiação ultravioleta artificial ou natural. O presente estudo visou avaliar a fototoxicidade do antraceno sobre a mortalidade e o dano ao DNA, segundo o ensaio cometa, de juvenis de pampos da espécie Trachinotus carolinus. Os peixes foram previamente expostos ao antraceno por 24 horas no escuro nas concentrações de 8, 16 e 32µg/L. e então transferidos para a água limpa e expostos à luz de lâmpadas fluorescentes ou à radiação ultravioleta B artificial (RUVB-35µW/cm2). Grupos controle (água e solvente) foram submetidos às mesmas condições experimentais. As exposições na ausência da radiação ultravioleta foram realizadas por períodos cumulativos de 10, 20 e 30h (5h/dia). Para as exposições à RUVB foram utilizados períodos desde 2 até 10h. Na ausência de radiação ultravioleta o antraceno não revelou ser tóxico, mas sua genotoxicidade, medida como danos ao DNA, apresenta resposta dose-dependente. A RUVB é letal para pampos. A exposição ao antraceno seguida de 2h de incidência de RUVB acelera a morte dos peixes em relação à mortalidade dos animais não contaminados. Este resultado revelou a fototoxicidade do antraceno para a espécie. O ensaio cometa pode ser considerado uma ferramenta sensível e útil para avaliar o efeito genotóxico de HPAs em peixes marinhos costeiros. / Polycyclic aromatic hydrocarbons are toxic and/or genotoxic to a variety of marine organisms and under solar or artificial ultraviolet radiation acute toxicity of many of them can be substantially enhanced. The aim of the present study was to examine the effect of the phototoxicity of anthracene on the mortality and damage to the DNA, assessed by the comet assay, of juveniles of Florida pompanos, Trachinotus carolinus. The fish were pre-contaminated in the dark by three concentrations of 8, 16 and 32 µg/L of anthracene for 24 hours then transferred to clean seawater to be exposed to fluorescent light or to artificial ultraviolet B radiation (UVB - 35µW/cm2). Control groups (water and ethanol) were carried out in the same experimental conditions. The exposures to fluorescent light were carried out in cumulative periods of 10, 20 and 30 hours (5h/day). The exposures to UVB were conducted during periods of 2 to 10 hours. In the absence of ultraviolet radiation, the anthracene did not prove to be toxic, but its genotoxicity, evaluated as damage caused to the DNA, proved to be dose dependent. The UVB is lethal to Florida pompanos. The exposure of fish to the anthracene following UVB exposure for 2 hours resulted in earlier and higher mortality when compared to uncontaminated fish. These results indicated that anthracene is phototoxic to the pompanos. The comet assay can be considered a sensitive tool to evaluate the genotoxic effect of PAHs in coastal marine fish.

O Ensaio Cometa (Eletroforese em Gel de Célula Única) foi aplicado ao estudo do potencial genotóxico da &#946;-naftoflavona (BNF) em exposição in vivo a eritrócitos de robalos, Centropomus parallelus. Condições específicas para o ensaio cometa de células de sangue de robalos foram estabelecidas com base em informações obtidas em literatura; e através de experimentos com exposição in vitro a diferentes concentrações de peróxido de hidrogênio, e com desenrolamento e eletroforese em diferentes alcalinidades e voltagens. Para avaliar o potencial genotóxico da BNF, os peixes foram expostos a 1ppm e 5ppm de BNF por 24, 48 e 72 horas. Controles foram mantidos em água do mar e em água do mar com DMSO, utilizado com solvente. Células de sangue foram coletadas, submetidas a ensaio cometa em versão alcalina de pH>13 e coradas por prata. Os cometas foram analisados por métodos visuais, incluindo Índice de Danos, Porcentagem de Danos e Freqüência de Danos, e através do sistema de análise de imagem ScionImage. Exposições in vitro de eritrócitos a H2O2 resultaram em relação dose-resposta em pH 12,6 e pH>13, indicando aplicabilidade do ensaio a células de sangue de robalos. Exposições in vivo a BNF indicaram tendência a maior Índice de Danos em grupos expostos comparados a controles, porém não ocorreu diferença significativa estatisticamente. A grande amplitude de variação dos dados, em controles e nos demais grupos experimentais, dificultou sua análise e interpretação. / Single Cell Gel Electrophoresis or Comet Assay was applied to study the genotoxic potential of exposure in vivo to &#946;-naphthoflavone (BNF) on erythrocytes of fat snook, Centropomus parallelus. Specific conditions for the comet assay on fat snook blood cells were established based on information obtained from literature together with results of experiments in which slides were exposed in vitro to different concentrations of hydrogen peroxide, submitted to unwinding and electrophoresis at different alkalinity and different voltages. To assess the genotoxic potential of BNF, fish were exposed in vivo to 1ppm and 5ppm of BNF for 24, 48 and 72 hours. Controls were exposed to sea water only and sea water plus DMSO, used as carrier. Blood cells were collected, submitted to alkaline version of comet assay at pH>13 and silver stained. Comets were analyzed by visual methods including Damage Index, Percentage of Damage and Frequency of Damage, and by ScionImage image analysis system. In vitro expositions of erythrocytes to H2O2 resulted in dose-response relationship, at pH 12,6 and pH>13, indicating applicability of the assay to blood cells of fat snook. In vivo exposure to BNF showed a slight tendency towards a higher Damage Index, though not statistically significant, in exposed groups as compared to controls. Wide amplitude of variations of data, in the controls as well as in other experimental groups, made their analysis and interpretation difficult.

O processo de coloração de cabelos é um dos métodos de tintura mais antigos. No século XIX, iniciou-se a produção de corantes sintéticos, a partir do desenvolvimento da pfenilenodiamina (PPD). Os corantes de cabelo são classificados de acordo com seu mecanismo de ação. Os corantes permanentes são classificados por mecanismos oxidativos, enquanto os corantes diretos colorem a fibra capilar por mecanismos não oxidativos. A investigação sobre os possíveis danos á saúde humana, que podem ser resultantes da exposição de corantes de cabelos, têm sido um tema de enorme desafio para a comunidade cientifica. Particularmente, devido à enorme discrepância dos estudos epidemiológicos e estudos que empregam metodologias in vitro. Neste trabalho, foram investigadas a capacidade citotóxica de um composto representante de cada classe de tinturas de cabelo, um corante temporário (Basic Yellow 57 (BY57), um semi-temporário (Basic Red 51(BR51) e um ingrediente permanente p-fenilinodiamina (PPD) em linhagens de células de pele humana. As linhagens normais da pele humana estudadas foram os queratinócitos imortalizados humanos (HaCaT) e fibroblastos primários, utilizou-se também melanoma SK-Mel-103. Posteriormente, após caracterização do corante mais tóxico, foi investigado o tipo de morte celular, as possíveis alterações destes compostos no ciclo celular, a capacidade de geração de espécies reativas de oxigênio (EROs) e aplicação em cultura tridimensional de pele artificial. Posteriormente, foi avaliada a capacidade de cada corante em induzir estresse oxidativo em queratinócitos humanos (HaCaT), que são a primeira via de exposição de corantes de cabelos. Em seguida, o corante elegido mais tóxico foi aplicado em pele humana provenientes de cirurgia. Finalmente, o potencial de mutagenicidade dos corantes BY57 e BR51 foram avaliados. / The process involving hair dyes is one of the oldest methods of coloring. The use of synthetic hair dyes started in the nineteenth century, after the development of p-phenylenodiamine (PPD). The hair dyes are classified according to their mechanism of action. The permanent hair dyes are classified by oxidative mechanisms, while direct dyes color the hair fiber by non-oxidative mechanisms. Research regarding the potential damage of hair dyes to human health has been an enormous challenge for the scientific community. Particularly due to the large discrepancy of epidemiological studies involving in vitro methodologies. In this study, we evaluated the cytotoxic potential of a compound representative from each of the class of hair dyes, a temporary dye (Basic Yellow 57 (BY57), a semi temporary (Basic Red 51 (BR51) and a permanent hair dyes p-phenylenodiamine (PPD) in human skin cells. The studied skin cell lines where, immortalized human keratinocytes (HaCaT) primary fibroblasts, we also used melanoma SK-Mel-103. Subsequently, after characterization of the most toxic dye, we investigated specific mechanisms of cell death, changes in cell cycle and the ability to generate reactive oxygen species (ROS) followed by the evaluation of three-dimensional artificial skin. In addition, we assessed the ability of each dye in inducing oxidative stress in immortalized human keratinocytes (HaCaT) this is the primary route of exposure of hair dyes. Then, the most toxic compound was tested in human skin explants. Finally the mutagenic potential of the dyes BY57 and BR51 were evaluated.

Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T14:39:33Z No. of bitstreams: 1 TES_MARIANA_ROENNAU_LEMOS_RINALDI_COMPLETO.pdf: 2232512 bytes, checksum: 72ea5572f7e50b32cdf95dc1dbfe7366 (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-30T14:39:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TES_MARIANA_ROENNAU_LEMOS_RINALDI_COMPLETO.pdf: 2232512 bytes, checksum: 72ea5572f7e50b32cdf95dc1dbfe7366 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-30T14:39:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_MARIANA_ROENNAU_LEMOS_RINALDI_COMPLETO.pdf: 2232512 bytes, checksum: 72ea5572f7e50b32cdf95dc1dbfe7366 (MD5) Previous issue date: 2017-01-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Soldered appliances are widely used in orthodontics and pediatric dentistry. The cytotoxicity and genotoxicity of silver solder and laser welding has already been tested in dentistry. However, little is known about the Tungsten Inert Gas (TIG) welding technique, which uses an electric arc between an electrode and the part to be welded. The aims of this study were to evaluate the cytotoxicity and genotoxicity of silver soldered (silver soldered bands - SSB), laser welded (laser welded bands - LWB), TIG welded (TIG welded bands ? TWB) joints and no soldered/welded bands (NS /WB) in vitro and in vivo. For that, MTT reduction assay was performed in HGF, HaCat, Vero and MRC-5 cell lines. The genotoxicity of the metallic eluates of the joints was determined by comet assay in HGF cells after 3-h treatment. The quantification of Ni, Fe, Cr, Cu, Ag, Zn Cd and Sn in the metallic eluates was performed with inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). Cu, Zn and Ag were the most detected ions in SSB medium samples, and Fe, Cr and Ni in the samples of LWB and TWB. The SSB group induced strong cytotoxicity in all cell lines. NS/WB, LWB and TWB presented a weak cytotoxic induction. In comet assay, SSB group showed a higher damage index and more comets with damage class 3 and 4, compared to the other groups. In the in vivo study, the genotoxic effects on the buccal mucosa cells of children with lingual arches containing silver soldered joints, laser welded joints and without any appliance were accessed by buccal comet assay (BCA) and the buccal micronucleus cytome (BMCyt) assay. The urinary levels of Ni, Cr, Fe, Zn, Cu, Ag, Cd and Sn were investigated through urine samples analyzed by ICP-MS. The results of the study indicate that silver solder and laser welding did not cause genotoxicity in buccal mucosa cell during the period evaluated. The changes of the ions in the urinary contents cannot only be attributed to the appliances. TIG welding may be a promising technique to be applied in orthodontics and deserve be further investigated, as it presented in the in vitro and in vivo tests a low cytotoxic and genotoxic potential. / Aparelhos soldados s?o utilizados amplamente em Ortodontia e Odontopediatria. A citotoxicidade e a genotoxicidade da solda a prata e da soldagem a laser j? foram testadas em Odontologia. No entanto, pouco se sabe sobre a t?cnica de soldagem Tungsten Inert Gas (TIG), que utiliza um arco el?trico entre um eletrodo e a pe?a a ser soldada. Os objetivos deste estudo foram avaliar a citotoxicidade e a genotoxicidade de uni?es soldadas a prata (silver soldered band - SSB), soldadas a laser (laser welded band - LWB), soldadas a TIG (TIG welded band ? TWB) e de an?is n?o soldados (no soldered or welded bands ? NS / WB) in vitro e in vivo. Para isso, o ensaio de redu??o de MTT foi realizado nas linhagens celulares HGF, HaCat, Vero e MRC-5. A genotoxicidade dos eluatos met?licos das ?reas soldadas foi determinada atrav?s do ensaio de cometas em c?lulas HGF ap?s tratamento de 3 horas. A quantifica??o de Ni, Fe, Cr, Cu, Ag, Zn, Cd e Sn nos elu?dos met?licos foi realizada com espectrometria de massa por plasma indutivamente acoplado (ICP-MS). Cu, Zn e Ag foram os ?ons mais detectados nas amostras de meio de bandas soldadas a prata, e Fe, Cr e Ni, nas amostras soldadas a laser e nas soldadas a TIG. O grupo SSB induziu forte citotoxicidade em todas as linhagens celulares. NS / WB, LWB e TWB apresentaram indu??o citot?xica fraca. No ensaio Cometa, o grupo SSB apresentou maior ?ndice de danos e mais cometas com classes de dano 3 e 4, em rela??o aos outros grupos. As uni?es soldadas a TIG, bem como uni?es soldadas a laser mostraram melhor biocompatibilidade. No estudo in vivo, genotoxicidade sobre as c?lulas da mucosa bucal dessas crian?as com arcos linguais contendo uni?es soldadas a prata, uni?es soldadas a laser, e sem qualquer aparelho foram avaliadas pelo ensaio de cometa bucal (BCA) e pelo ensaio de citometria bucal do micron?cleo (BMCyt). Os n?veis urin?rios de Ni, Cr, Fe, Zn, Cu, Ag, Cd e Sn foram investigados atrav?s de amostras de urina analisadas por ICP-MS. Os resultados do estudo indicam que a solda a prata e a soldagem a laser n?o causaram genotoxicidade na mucosa bucal durante o per?odo avaliado. As altera??es dos ?ons no conte?do urin?rio n?o puderam ser unicamente atribu?das aos aparelhos. A soldagem TIG parece ser t?cnica promissora a ser aplicada em ortodontia e merece ser mais investigada, uma vez que apresentou nos testes in vitro e in vivo um baixo potencial citot?xico e genot?xico.

Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-06-20T18:20:05Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TAIS FERNANDA ANDRZEJEWSKI KAMINSKI.pdf: 736237 bytes, checksum: 7739abe4dcd9ebf1aa4595b41498419a (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2017-06-20T18:20:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TAIS FERNANDA ANDRZEJEWSKI KAMINSKI.pdf: 736237 bytes, checksum: 7739abe4dcd9ebf1aa4595b41498419a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-20T18:20:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TAIS FERNANDA ANDRZEJEWSKI KAMINSKI.pdf: 736237 bytes, checksum: 7739abe4dcd9ebf1aa4595b41498419a (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Os fungos produzem vários metabólitos secundários, onde muitos destes têm sido associados com a indução de efeitos tóxicos em animais e seres humanos. O efeito toxicológico, incluindo o carcinogênico, tem sido observado em mais de 300 micotoxinas estruturalmente conhecidas. As Fumonisinas são micotoxinas produzidas principalmente por Fusarium verticillioides e Fusarium proliferatum, as quais frequentemente contaminam vários alimentos, especialmente milho e seus derivados, induzindo ao aparecimento de quadros patológicos em humanos. A Fumonisina B1 (FB1) é a mais prevalente, respondendo por aproximadamente 70% do total das micotoxicoses. Esta micotoxina está associada com leucoencefalomalácia (LEM) em cavalos, edema pulmonar em suínos e hepatocarcinoma em ratos, além de estar relacionada à inibição da biossíntese de esfingolípideos e ao aumento do risco de cancro esofágico em seres humanos. O presente estudo teve como objetivo investigar os efeitos citotóxico e genotóxico da fumonisina B1 através do teste de viabilidade celular e do teste de proliferação celular em cultura de leucócitos humanos. As concentrações testadas foram de 200; 100; 50; 5; 0,5; 0,05; 0,005 μg/mL e 300; 30; 3; 1; 0,1; 0,01 fg/mL. Todos os ensaios foram realizados em triplicatas sendo que, como controle positivo foi utilizado H2O2 4mM e, como controle negativo, tampão PBS 7,4. Com exceção das concentrações de 3fg/mL, 0,1fg/mL e 0,01fg/mL, todas as concentrações testadas demonstraram ser citotóxicas (p<0,05). Em relação ao teste de genotoxicidade, exceto as concentrações de 0,1fg/mL e 0,01fg/mL, demonstraram interferir significativamente na proliferação celular. Podemos concluir, de forma inédita, que somente em concentrações extremamente baixas, na ordem de fentogramas por mililitro, a Fumonisina B1 diminuiu os danos induzidos em leucócitos humanos. / Fungi produce several secondary metabolites, where many of these have been associated with the induction of toxic effects in animals and humans. The toxicological effect, including the carcinogenic, has been observed in more than 300 structurally known mycotoxins. Fumonisins are mycotoxins produced mainly by Fusarium verticillioides and Fusarium proliferatum, which often contaminate various foods, especially corn and its derivatives, leading to the appearance of pathological conditions in humans. Fumonisin B1 (FB1) is the most prevalent, accounting for approximately 70% of the total mycotoxicosis. This mycotoxin is associated with leukoencephalomalacia (LEM) in horses, pulmonary edema in pigs and hepatocarcinoma in rats, besides being related to the inhibition of sphingolipid biosynthesis and to the increasing risk of esophageal cancer in humans.The present study aimed to investigate the cytotoxic and genotoxic effects of fumonisin B1 through the cell viability and the cell proliferation test in human leukocyte culture. The tested concentrations tested were 200; 100; 50; 5; 0,5; 0,05; 0,005 μg/mL e 300; 30; 3; 1; 0,1; 0,01 fg/mL. All the tests were performed in triplicates,and it was used H2O2 4mM as a positive control, and PBS 7.4 bufferas a negative control. All concentrations tested were cytotoxic (p <0.05), except the 3fg/mL, 0,1fg/mL and 0,01fg/mL concentrations. Regarding to the genotoxicity test, except the 0.1fg/mL and 0.01fg/mL concentrations of, they demonstrated to significantly interfere in the cell proliferation. In an unprecedented way , it can be concludedthat only in extremely low concentrations, in the order of phentograms per milliliter, the Fumonisin B1 decreased the induced damage in human leukocytes.

Submitted by JACIARA CRISTINA ALMEIDA DO AMARAL (jaciaramaral@ufpa.br) on 2019-01-30T14:12:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese capa ficha e artigo 10 12 18.pdf: 3164292 bytes, checksum: ead5dec19de419da533838099f689015 (MD5) / Approved for entry into archive by JACIARA CRISTINA ALMEIDA DO AMARAL (jaciaramaral@ufpa.br) on 2019-01-30T14:13:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese capa ficha e artigo 10 12 18.pdf: 3164292 bytes, checksum: ead5dec19de419da533838099f689015 (MD5) / Made available in DSpace on 2019-01-30T14:13:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese capa ficha e artigo 10 12 18.pdf: 3164292 bytes, checksum: ead5dec19de419da533838099f689015 (MD5) Previous issue date: 2018-11-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Fluconazol é um antifúngico triazólico de amplo espectro que é bem estabelecido como tratamento de primeira linha para infecções por Candida albicans. Apesar de seu uso extensivo, os relatos sobre seus efeitos genotóxicos / mutagênicos são controversos, portanto, mais estudos serão necessários para melhor esclarecimento de tais efeitos. Células de rim de macaco verde africano (Vero) foram expostas in vitro a diferentes concentrações de Fluconazol e foram avaliadas quanto a diferentes parâmetros, tais como: citotoxicidade (ensaio MTT e morte celular por corantes fluorescentes), genotoxicidade / mutagenicidade (teste do cometa e teste do micronúcleo) e indução de estresse oxidativo (ensaio do DCFH-DA). O Fluconazol foi utilizado nas concentrações de 81,6; 163,2; 326,5; 653; 1.306 e 2.612,1μM para o ensaio do MTT e 81,6; 326,5 e 1.306μM para os demais ensaios. Os resultados do MTT mostraram que a viabilidade celular diminuiu à partir da concentração de Fluconazol de 1.306μM (85,93%), sendo estatisticamente significativa (P <0,05) na concentração de Fluconazol de 2.612,1μM (35,25%), em comparação com o controle (100%). O Fluconazol também induziu necrose (P <0,05) quando as células foram expostas às concentrações de 81,6; 3.26,5 e 1.306μM para ambos os tempos de tratamento testados (24 e 48h) em comparação com o controle negativo. Com relação à genotoxicidade / mutagenicidade, os resultados mostraram que o Fluconazol aumentou significativamente (P <0,05) o índice de dano ao DNA, avaliado pelo ensaio do cometa, à 1.306μM (ID = 1,17) em comparação ao controle negativo (ID = 0,28). A frequência de micronúcleos também aumentou até atingir signficância estatística (P <0,05) em 1.306μM de Fluconazol (com 42MN / 1000 células binucleadas) em relação ao controle negativo (13MN / 1000 células binucleadas). Finalmente, a formação significativa (P <0,05) de espécies reativas de oxigênio foi observada em 1.306μM de Fluconazol (DO = 40,9), em comparação ao controle negativo (DO = 32,3). Nossos resultados mostraram que o Fluconazol foi citotóxico e genotóxico nas condições avaliadas. É provável que tais efeitos possam ser devidos às propriedades oxidativas do Fluconazol e / ou à presença de FMO (Flavina monoxigenase) em células Vero. / Fluconazole is a broad-spectrum triazole antifungal that is well-established as the first-line treatment for Candida albicans infections. Despite its extensive use, reports on its genotoxic/mutagenic effects are controversial; therefore, further studies are needed to better clarify such effects. African green monkey kidney (Vero) cell line were exposed in vitro to different concentrations of Fluconazole and were then evaluated for different parameters, such as cytotoxicity (MTT/cell death by fluorescent dyes), genotoxicity/mutagenicity (comet assay/micronucleus test), and induction of oxidative stress (DCFH-DA assay). Fluconazole was used at concentrations of 81.6, 163.2, 326.5, 653, 1306, and 2612.1μM for the MTT assay and 81.6, 326.5, and 1306μM for the remaining assays. MTT results showed that cell viability reduced upon exposure to Fluconazole concentration of 1306μM (85.93%), being statistically significant (P<0.05) at Fluconazole concentration of 2612.1μM (35.25%), as compared with the control (100%). Fluconazole also induced necrosis (P<0.05) in Vero cell line when cells were exposed to all concentrations (81.6, 326.5, and 1306μM) for both tested harvest times (24 and 48 h) as compared with the negative control. Regarding genotoxicity/mutagenicity, results showed Fluconazole to increase significantly (P<0.05) DNA damage index, as assessed by comet assay, at 1306μM versus the negative control (DI=1.17 vs DI=0.28, respectively). Micronucleus frequency also increased until reaching statistical significance (P<0.05) at 1306μM Fluconazole (with 42MN/1000 binucleated cells) as compared to the negative control (13MN/1000 binucleated cells). Finally, significant formation of reactive oxygen species (P<0.05) was observed at 1306μM Fluconazole vs the negative control (OD=40.9 vs OD=32.3, respectively). Our experiments showed that Fluconazole is cytotoxic and genotoxic in the assessed conditions. It is likely that such effects may be due to the oxidative properties of Fluconazole and/or the presence of FMO (flavin-containing monooxygenase) in Vero cells. / FAPAN - Faculdade Pan Amazônica