Orientador: Ladaslav Sodek / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T20:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Justino_GilbertoCosta_D.pdf: 606492 bytes, checksum: 35435d72746a933ca3e5638239810593 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Muitos solos, principalmente aqueles com baixa capacidade de drenagem, ficam sujeitos ao alagamento após pequenos ou grandes períodos de chuva. Nestas condições, o sistema radicular das plantas sofre estresse por deficiência de O2 em função da baixa taxa de difusão deste gás na água. Quando o teor de O2 no meio fica abaixo do necessário para manter a taxa normal de respiração das raízes ocorre a hipoxia. O sistema radicular das leguminosas que possuem nódulos formados pela associação simbiótica com bactérias do gênero Rhizobium, responsáveis pela fixação de N2 atmosférico, é também adversamente afetado por hipoxia. Muitos estudos sobre alterações metabólicas em raízes, em resposta a hipoxia, têm sido feitos, porém, no caso dos nódulos e da fixação simbiótica de N2 os estudos são escassos. Há evidências de que plantas noduladas sob condições de alagamento apresentam baixas taxas de fixação, o que é atribuído principalmente à baixa disponibilidade de O2, necessário para a produção do ATP usado na fixação de N2, catalisada pela enzima nitrogenase. As técnicas disponíveis para medir a atividade da nitrogenase são inviáveis com os nódulos mantidos submersos na água, pois envolvem a passagem de substratos da enzima pelo sistema radicular, em forma gasosa. Por outro lado, estudos recentes indicam a possibilidade de usar o teor de GLN do xilema como indicador da eficiência da fixação de N2. A vantagem desta técnica é que a seiva pode ser coletada enquanto o sistema radicular permanece submerso. O objetivo do presente estudo foi verificar se o teor de GLN, na seiva do xilema, poderia ser utilizado como indicador da eficiência da fixação de N2 em condições de alagamento. Para alcançar este objetivo foi realizado um estudo da dinâmica da resposta de GLN ao estresse durante e após alagamento (recuperação). Estudou-se, também, uma possível relação da resposta da GLN do xilema com a atividade da nitrogenase nos nódulos e a com incorporação de 15N2 na GLN transportada pela seiva do xilema. A resposta da GLN da seiva do xilema ao estresse de alagamento e à recuperação do estresse foi bastante nítida. O transporte de GLN foi reduzido imediatamente após a inundação do sistema radicular e a intensidade do efeito foi dependente do tempo em que as plantas permaneceram nesta condição. Este efeito foi verificado minutos após o alagamento, o que demonstra alta sensibilidade do nódulo à disponibilidade de O2. GLN foi o único aminoácido que respondeu desta maneira. Outros aminoácidos como ALA, GABA, ASN e SER respondem mais tardiamente ao efeito provocado pelo alagamento, pois estão relacionados a respostas associadas à hipoxia da raíz, uma condição mais demorada para ser alcançada após o alagamento. Da mesma forma, a GLN responde rapidamente à supressão do estresse, pois o transporte começou a recuperar-se rapidamente após a drenagem da solução nutritiva. No entanto, esta recuperação foi fortemente dependente da duração do estresse, pois estresses longos parecem ter alterado acentuadamente o metabolismo do nódulo. Contudo, após a retirada do estresse, uma recuperação parcial ou total foi verificada em todos os tratamentos. Nos tecidos como nódulos e raízes, os teores de GLN e ASN diminuíram bastante uma hora após a inundação. No caso dos nódulos, os teores de ASN chegaram próximo de zero embora, na seiva do xilema, o transporte deste aminoácido tenha sido mantido mesmo durante 48 horas de inundação. Neste caso, ocorreu redução de metade do valor transportado, sendo que, provavelmente, o transporte foi sustentado pelo sistema radicular. A atividade da nitrogenase comprovou os dados verificados para GLN obtidos pela análise da seiva. A atividade foi afetada pelo alagamento e a recuperação ocorreu, na maioria dos tratamentos, após a interrupção do estresse, com exceção das plantas inundadas por 48 horas. A incorporação do gás 15N2 ocorreu tanto em plantas controle como em inundadas e comprovou que a GLN sintetizada nos nódulos é imediatamente transportada para a parte aérea. Estes dados foram obtidos pelo acompanhamento de GLN na seiva do xilema, mas a incorporação em ASN ocorreu apenas em plantas controle. Isto reforça a teoria de que a GLN seja um produto direto da fixação biológica e que o seu transporte para a parte aérea seja suprido diretamente pelos nódulos, imediatamente após a fixação. Como a redução de GLN nas raízes foi de 50%, chegou-se à conclusão de que o transporte deste aminoácido para a parte aérea não é abastecido pelo sistema radicular. O retorno às condições de aeração re-estabeleceram os níveis de GLN da seiva do xilema, imediatamente após estresses relativamente curtos, sendo que a recuperação foi mais lenta a partir de 12 horas de inundação. Os níveis de ASN, um produto da fixação biológica que depende de GLN como doador do grupo amida, não responderam imediatamente ao estresse conforme verificado pela coleta da seiva do xilema, mesmo quando os seus valores foram reduzidos a valores próximos de zero que, no caso dos nódulos, ocorreu uma hora após a inundação. Concluiu-se que a GLN encontrada na seiva do xilema é produto direto da fixação de nitrogênio e que variações no transporte pelo xilema estão estreitamente relacionadas à atividade da nitrogenase e, portanto, é um ótimo indicador da eficiência da fixação de N2. O alagamento do sistema radicular nodulado de plantas de soja tem um efeito adverso e imediato sobre a fixação de nitrogênio, conforme verificado pela redução rápida no teor de GLN no xilema. A drenagem do sistema radicular alagado permite uma recuperação da fixação de N2, embora a resposta seja mais lenta em função da duração do estresse de alagamento. / Abstract: Many soils, especially those with a low drainage capacity, are subject to flooding after short or long periods of rain. Under such conditions, the root system of plants suffers a stress condition due to O2 deficiency because of the low diffusion rate of O2 in water. When the level of O2 in the medium drops below that required to maintain the normal rate of respiration in the roots, hypoxia occurs. The nodulated root system of legumes, where nodules are the result of the symbiotic association with bacteria of the genus Rhizobium, responsible for nitrogen fixation, is also adversely affected by flooding. Many studies have been made showing metabolic changes in roots due to hypoxia, but with regard to nodules and N2 fixation information is scarce. There is evidence that nodulated plants show low levels of fixation under flooding conditions, attributed mainly to low levels of O2 which is required for the production of ATP consumed during N2 fixation catalized by the enzyme nitrogenase. The techniques available for the assay of nitrogenase are inviable for nodules submersed in water, since the methods require that the gaseous substrates of the enzyme flow around the root system. On the other hand, recent studies have opened the possibility of measuring the level of GLN in the xylem sap as an indicator of the efficiency of N2 fixation. The advantage of this technique is that the xylem sap can be collected while the root system remains waterlogged. The objective of the present study was to verify whether the level of xylem sap GLN might be used as an indicator of N2 fixation under flooding conditions. In order to reach this objective, a study was made of the dynamics of the GLN response to the stress both during and following (recovery) flooding. A study was also made of the xylem GLN response in relation to nitrogenase activity of the nodules as well as a study of the incorporation of 15N2 in GLN transported in the xylem sap. The response of xylem sap GLN to the stress caused by flooding as well as recovery post-stress was very clear. Transport of GLN in the xylem was immediately reduced after flooding of the root system and the intensity of the effect was dependent on the length of time that plants remained in this condition. The response was verified minutes after flooding, which indicates the high sensitivity of the nodule to O2 availability. GLN was the only amino acid to respond in this way. Other amino acids such as ALA, GABA, ASN, and SER only showed changes later on, consistent with these amino acids being associated with the response given by the roots to hypoxia, a condition that takes much longer to be reached after flooding. Similarly, GLN responded rapidly to the suppression of the stress, since its transport began to recover after the root system was drained. Nevertheless, this recovery was strongly dependent on the duration of the stress, since prolonged periods of flooding appeared to have a more profound effect of nodule metabolism. After removal of the stress, a total or partial recovery was recorded in all treatments. In tissues such as nodules and roots, the levels of GLN and ASN declined markedly 1 hour after flooding. In nodules, the levels of ASN fell close to zero, in contrast to the xylem sap where they still remained high even after 48 hours of flooding. In the latter case, ASN declined to about half its normal level and probably this transport was sustained by the roots. Variations in the activity of nitrogenase closely followed those of GLN in the xylem sap. Activity was affected by flooding and recovery was observed, in the majority of cases, after the interruption of the stress, with the exception of plants flooded for 48 hours. The incorporation of 15N2 gas in GLN was found both for control and flooded plants which proves that GLN is an immediate product of nitrogen fixation that is transported to the shoot. Incorporation of the label in ASN, on the other hand, was only seen in the control plants. This reforces the idea that GLN is a direct product of nitrogen fixation and that the nodule is the source of its transport via the xylem. Since in roots GLN was reduced by only about 50%, it was concluded that the roots were not an important source of the amino acid in the xylem. The return to normoxia reestablished the high levels of GLN in the xylem, where recovery occurred immediately after relatively short stress periods and more slowly after flooding for 12 hours or more. The levels of ASN, a product of biological nitrogen fixation that depends on GLN as the donor of the amide group, did not respond immediately to the stress when measured in the xylem sap, even though its level was reduced to near zero in the nodules 1 hour after flooding. It is concluded that GLN of the xylem sap arises directly from nitrogen fixation and that the changes found were closely related to the activity of nitrogenase. It may be considered, therefore, a good indicator of nitrogen fixation. Flooding of the nodulated soybean root system has an immediate adverse effect on nitrogen fixation, as revealed by the rapid decline in GLN levels in the xylem. Draining the flooded root system permits the recovery of nitrogen fixation, though this response becomes slower the longer the period of flooding. / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Os objetivos desse trabalho foram avaliar se provas de enduro de diferentes distâncias causam estresse em equinos treinados, avaliar os efeitos das provas de enduro de diferentes distâncias sobre a atividade dos linfócitos e a relação com a imunocompetência dos equinos atletas e investigar a suplementação alimentar com glutamina como possível atenuante desse efeito depressivo do estresse sobre o sistema imunológico. Foram utilizados 33 cavalos treinados para enduro, 13 em 80 km, 14 em 120 km e 6 em 160 km, avaliados em 4 provas. Metade dos cavalos de cada categoria recebeu suplementação com glutamina via oral 30 dias antes e 14 dias após as provas. Amostras de sangue venoso foram colhidas antes (M0), imediatamente após a última inspeção veterinária (M1), 3 horas depois (M2) e nos haras 3 (M3), 7 (M4), e 14 dias (M5). Houve aumento dos níveis de cortisol, amônia, neutrófilos, aumento da relação neutrófilos/linfócitos e diminuição da contagem de linfócitos em M1 e M2 em todos os cavalos. Houve diminuição da relação CD4/CD8 nos animais de 120 (M2, M3 e M4) e 160 km (M3) que não receberam suplementação e diminuição de IFN em todos os cavalos. Nos suplementados, houve diminuição da relação CD4/CD8 em 80 (M2), 120 (M2 e M3) e 160 km (M3 e M4) e aumento tardio de IFN (M4 e M5) nos cavalos de 80 e 120 km. As concentrações de IL-2, IL-4 e IL-10 aumentaram após a prova em todos os cavalos, porém, nos suplementados o aumento foi maior ou mais prolongado. Com base nesses resultados, não foi possível observar estresse nos animais, nem imunodepressão, embora a suplementação tenha exercido efeito sobre os linfócitos. / The objectives of this study were to assess whether a different distances endurance races cause stress in trained horses, assess the effects of different distances an endurance races on the lymphocytes and relationship with the immune competence of equine athletes and investigate dietary supplementation with glutamine as possible mitigating this depressive effect of stress on the immune system . 33 well trained endurance horses were used, 13 at 80 km, 14 and 120 km and 6 in 160 km in 4 endurance rides . Half of the horses in each category received oral supplementation with glutamine to 30 days before and 14 days after the race. Venous blood samples were collected before (M0), immediately after the last veterinary inspection (M1), 3 hours after (M2) and in their farms 3 (M3), 7 (M4) and 14 days (M5) after. There was an increase in cortisol levels, ammonia and neutrophils, increase in neutrophils / lymphocytes ratio and reduction in lymphocyte counts at M1 and M2 in all horses. There was a decrease in LT CD4/CD8 ratio in 120 (M2, M3 and M4) and 160 km (M3) without supplementation and either a decreased in IFN in all animals. Horses that had received glutamine supplementation showed a decreased in CD4/CD8 ratio in 80 (M2), 120 (M2 and M3) and 160 km (M3 and M4) and late increase of IFN (M4 and M5) in 80 and 120 km. INF production was increased later (7 and 14 days) in 80 and 120 km horses that received supplementation and decreased in all 160 km. The concentrations of IL-2 , IL-4 and IL-10 increased after the race on all horses , but the increase was greater or more prolonged in supplemented ones. Based on these results, it was not possible to observe stress in these animals, or immunosuppression either, although supplementation has exerted effects on lymphocytes.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Estudos jà demonstraram que a resposta metabÃlica ao trauma cirÃrgico, queimaduras, infecÃÃo, trauma mÃsculo-esquelÃtico e sepse apresenta caracterÃsticas similares. A duraÃÃo e magnitude dessa resposta sÃo proporcionais à gravidade do trauma, estado nutricional e hormonal, sexo e idade do indivÃduo e à temperatura ambiente. A formaÃÃo de radicais livres à intensificada nestas situaÃÃes. O desequilÃbrio relacionado Ãs defesas antioxidantes em favor dos radicais livres cria uma situaÃÃo de agressividade ao organismo denominada de estresse oxidativo. O objetivo deste trabalho foi estudar os efeitos da L-alanil-glutamina (L-ala-gln) e dos Ãcidos graxos poliinsaturados Ãmega-6 e Ãmega-3 sobre a resposta metabÃlica e o estresse oxidativo em ratos Wistar submetidos ao trauma operatÃrio e à sepse. Trata-se de um estudo prospectivo, controlado e comparativo em 150 ratos divididos em 9 grupos, submetidos ao estado de sepse. O trauma operatÃrio foi desencadeado por laparotomia e ligadura do mesoceco. A sepse foi induzida a partir da ligadura e punÃÃo do ceco, que produziu infecÃÃo peritonial, peritonite e sepse. Os grupos testes sofreram intervenÃÃo atravÃs da infusÃo EV de L-ala-gln e dos Ãleos poliinsaturados Ãmega-6 e Ãmega-3 que foram administrados nos 4 dias antes do ato operatÃrio, 1 vez a cada dia. Doze, 24 e 48 horas apÃs a intervenÃÃo operatÃria os grupos do estudo foram reoperados para coleta de sangue e de tecidos hepÃtico e muscular. As concentraÃÃes de piruvato, lactato, glicose, acetoacetado, 3-OH-butirato avaliaram a resposta metabÃlica e de glutationa (GSH) e TBARS, o estresse oxidativo. A anÃlise estatÃstica foi feita a partir dos resultados obtidos e expressos como mÃdia  E.P.M. (Erro PadrÃo da MÃdia) acompanhada pelo nÃmero n de observaÃÃes. A significÃncia estatÃstica foi calculada usando testes nÃo paramÃtricos. O nÃvel de significÃncia foi de 95% (p<0,05). O trauma induziu aumentos significantes nas concentraÃÃes sangÃÃneas de piruvato, lactato e glicose nas 12h e 24h e hipercetonemia 48h pÃs-trauma. A sepse induziu alteraÃÃes similares e falha da hipercetonemia adaptativa ao jejum. A oferta exÃgena de L-ala-gln no grupo trauma aumentou a gliconeogÃnese e a cetogÃnese 12, 24 e 48h pÃs-trauma com aumento da atividade dos ciclo de Cori e de glicose-alanina. A peroxidaÃÃo lipÃdica aumentou no fÃgado e houve reduÃÃo da glutationa hepÃtica e musculare em ratos sÃpticos tratados com L-ala-gln. O prÃ-tratamento utilizando soluÃÃes lipÃdicas enriquecidas com Ãmega-3 promoveu reduÃÃo nas concentraÃÃes de GSH e aumento das concentraÃÃes hepÃticas e musculares de TBARS em ratos sÃpticos. Conclui-se assim que o trauma induziu aumento no "turnover" da glicose associado ao aumento da cetonemia adaptativa do jejum. A sepse induziu alteraÃÃes semelhantes no metabolismo da glicose e falha adaptativa da cetonemia do jejum. A administraÃÃo intravenosa de L-ala-gln induziu maior glicÃlise nos tecidos perifÃricos e aumento da neoglicogÃnese e cetogÃnese hepÃticas. NÃo houve efeitos protetores efetivos e consistentes, dos nutracÃuticos estudados, contra o estresse oxidativo ou a peroxidaÃÃo lipÃdica na vigÃncia de trauma ou sepse / It has been demonstrated that metabolic response to surgical and musculoskeletal trauma, burns, infection, and sepsis share common characteristics. The duration and intensity of the response are proportional to the severity of the trauma, nutrition and hormone status, sex, age and local temperature. Generation of free radicals is more intense under these circumstances. The study was aimed at studying the effects of l-alanyl-glutamine (L-Ala-Gln) and polyunsaturated fatty acids omega-6 and omega-3 on the metabolic response and the oxidative stress in Wistar rats subjected to surgical trauma and sepsis. It is a prospective and controlled study of 150 rats distributed in 9 groups and exposed to sepsis. Surgical trauma resulted from laparotomy and mesocecal ligation. Cecal puncture and ligation induced peritoneal infection, peritonitis and sepsis. Experimental groups received daily i.v. infusions of L-Ala-Gln and omega-6 and omega-3 during four days prior to laparotomy. Arterial blood, liver and muscle samples were collected 12, 24 and 48h after laparotomy for enzymatic analyses (pyruvate, lactate, acetoacetate, 3-hydroxybutyirate, GSH and TBARS) for evaluation of metabolic response and oxidative stress. Parametric and non-parametric were used for statistical analyses. Results were expressed as meanÂSEM (standard error) accompanied by the number of observations (n). P<0.05 was accepted as significant. Trauma induced significant increase in blood concentrations of pyruvate, lactate and glucose 12 and 24h post-trauma and ketonemia. Sepsis induced similar alterations but failed to induce increased ketogenesis. L-ala-gln exogenous offer resulted in increased gluconeogenesis and ketogenesis 12, 24 and 48h pos-trauma, along with enhancement of Cori cycle and glucose-alanine cycle. Lipid peroxidation in liver increased and GSH concentrations were reduced in liver and muscle in septic rats pretreated with L-ala-gln. Omega-3 lipid emulsion pretreatment induced reduction of liver and muscle GSH and increased TBARS concentrations in septic rats. It is concluded that trauma model induced increased glucose turnover associated with fast adapting hyperketonemia. The septic model promoted similar alterations in glucose and a flaw of the fast adapting hyperketonemia. L-ala-gln intravenous administration induced increased glycolysis in peripheral tissues and increased hepatic neoglucogenesis and ketogenesis. Similar alterations were observed with omega-3 enriched lipid emulsion intravenous administration. Nutraceuticals used in this study did not promote compatible protection against oxidative stress or lipid peroxidation in trauma and sepsis models.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / AlteraÃÃes patolÃgicas nos teciduais podem ser ocasionadas por doenÃas e antimetabÃlitos como o 5-Fluorouracil (5-FU), acometendo o sistema digestÃrio. Para que o processo absortivo ocorra normalmente, a barreira epitelial do intestino deve estar Ãntegra e com taxa de renovaÃÃo celular adequada. A aÃÃo antiproliferativa do 5-FU resulta, principalmente, de apoptose, consequente à lesÃo do DNA. Propomos neste estudo que glutamina (Gln), alanil-glutamina (Ala-Gln), Hyprol 4107 e Hyfoama 77 possam agir como fatores trÃficos para o epitÃlio intestinal. A depleÃÃo do pool de Gln conduz à atrofia de vilos no intestino delgado, a qual parece estar associada a uma interrupÃÃo na barreira intestinal. Objetivamos investigar a mucosite intestinal induzida por 5-FU, e a eficÃcia da suplementaÃÃo com glutamina (Gln), alanil-glutamina (Ala-Gln), Hyprol 4107 (HYP) e hyfoama (HYFO) nesta condiÃÃo clÃnica. Foram utilizadas as avaliaÃÃes morfomÃtricas, metabÃlicas e a de permeabilidade intestinal [(teste lactulose/manitol (L/M)] em camundongos (n=180)). A mucosite intestinal foi induzida por 5-FU (100 mg/kg/24h s.c., durante 3 dias) validada em camundongos, observando-se diarrÃia e prejuÃzo no estado nutricional (-1,88 Â0,537 g) estabelecido apÃs o 3o dia de tratamento. A anÃlise morfomÃtrica demonstrou achatamento de vilos (251Â6,07 Âm) e hiperplasia de criptas (128,3Â4,98 Âm) intestinais com aumento do nÃmero de apoptoses (13,5Â1,89/cripta), no duodeno e no jejuno. A taxa L/M no grupo 5-FU foi maior que no controle (0,27Â0,05). A suplementaÃÃo de Gln, Ala-Gln e peptÃdeos melhoraram o ganho ponderal e a ingestÃo de raÃÃo, as alteraÃÃes morfolÃgicas e a apoptose (2,25Â0,63), no modelo de mucosite intestinal. Nenhuma alteraÃÃo foi observada no padrÃo de mitoses nas criptas intestinais. A suplementaÃÃo nutricional reduziu na mucosite, a elevaÃÃo das taxas de L/M [de 0,86 para 0,45 (Gln)] nas vias paracelular e transcelular. Nossos resultados sugerem que, o restabelecimento da barreira morfofuncional, induzido pela suplementaÃÃo, foi obtido atravÃs do fornecimento de substrato energÃtico para o enterÃcito, inibiÃÃo de apoptose. EntÃo sugerimos que o uso de suplementos ricos em Gln e peptÃdeos pode prevenir a desnutriÃÃo e reduzir as doenÃas diarrÃicas melhorando a morfo fisiologia da barreira intestinal / Pathological disturbances and antineoplasic drugs like 5-Fluorouracyl (5-FU) cause consequences of diarrheal diseases. Intestinal barrier must be preserved to absortive functions. Antiproliferative action of 5-FU results of apoptosis upon DNA lesion. In order to investigate the intestinal mucositis 5-FU-induced and the efficacy of glutamine (Gln), alanyl-glutamine (Ala-Gln), hyprol 4107 (HYP), hyfoama 77 (HYFO) supplementation, on this clinical condition, we used intestinal perfusion approach in mice (n=344) and rabbits (n=72). To evaluate Gln, Ala-Gln, Hyprol 4107 and Hyfoama 77, we used morphometric, metabolic techniques and intestinal permeability test (lactulose/mannitol, L/M). Intestinal mucositis induced by 5-FU in mice was validate by diarrhea occurence and impaired nutritional status (-1,88  0,537 g) establishments, after 3 thd day of 5-FU treatment. Morphometric analysis of duodenum and jejunum, demonstrated a flattening villous (251Â6,07 Âm) and hyperplasic crypts (128,3Â4,98 Âm), as well as a increase in apoptosis (13,5Â1,89/crypt). L/M rate was greater in 5-FU group than control group (0,27Â0,05). Gln, Ala-Gln and peptides improved weight gain and a food intake in mucositis model. Nutrients supplementation reduces morphologic alteration and the increased apoptosis (0,25Â0.05). No changes were observed at intestinal mitosis profile, upon 3 thd day of 5-FU treatment. This supplementation improved transcellular and paracellular routs by establishment of intestinal permeability (0.35 to 0.73) in mucositis. Our results suggest that the improvement of intestinal barrier function was induced by an increase energy substrate to enterocyte, inhibition of apoptosis in crypts. So we suggest that gln and peptides supplementation could prevent the malnutrition, reduce diarrheal diseases and ameliorate intestinal barrier function.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / IntroduÃÃo: Apesar do reconhecimento das alteraÃÃes intestinais associadas à desnutriÃÃo e dos efeitos trÃficos da alanil-glutamina (AG) na funÃÃo de barreira intestinal, medida pela taxa de excreÃÃo urinÃria de Lactulose: Manitol, ainda sÃo escassos os estudos para determinar o efeito de suplementaÃÃo oral da AG em crianÃas desnutridas. Objetivos: Examinar o efeito de suplementaÃÃo oral de AG ou placebo glicina (G) na funÃÃo de barreira intestinal e crescimento em crianÃas sob risco nutricional residentes na comunidade do Parque UniversitÃrio do Pici. MÃtodos: Ensaio clÃnico randomizado controlado em crianÃas maiores de 6 meses e menores de 8 anos de idade, com pelo menos um dos escores z para os indicadores antropomÃtricos (IAs) (peso-para-idade, estatura-para-idade e peso-para-estatura) < -1. Cento e sete crianÃas foram randomizadas, entre julho de 2003 a novembro de 2004, para receberem AG (24g/dia) ou G (25g/dia) em quantidades isonitrogÃnicas por 10 dias. A excreÃÃo urinÃria de Lactulose:Manitol foi utilizada como medida da permeabilidade intestinal e realizada nos 1 e 10 dias do protocolo de estudo. O peso e estatura das crianÃas foram coletados nos 1Â, 10Â, 30 e 120 dias do protocolo de estudo para cÃlculo dos IAs. Resultados: O percentual da excreÃÃo urinÃria de lactulose diminuiu significantemente no grupo que recebeu AG, mas nÃo no grupo que recebeu G ( p < 0,05 teste t de Student). A melhora cumulativa nos indicadores antropomÃtricos, peso-para-estatura e peso-para-idade, no 120 dia do protocolo de estudo foi significante quando realizado a anÃlise de covariÃncia no grupo que recebeu AG versus o grupo que recebeu glicina (respectivamente, p <0,04 e <0,029). Durante o perÃodo de estudo foram observados um total de vinte (19%) Eventos Adversos (EAs) na seguinte ordem de freqÃÃncia: vÃmitos (8,4%), diarrÃia (2,8%), nÃuseas (1,9%), infecÃÃo respiratÃria (1,9%), escabiose (1,9%), asma (0,9%), epistaxe (0,9%). Os EAs nÃo foram diferentes na anÃlise estatÃstica entre os grupos estudados e somente trÃs dos EAs foram considerados como SÃrios Eventos Adversos (SEAs ), dois no grupo da alanil-glutamina (1 asma e 1 diarrÃia) e um no grupo da glicina (1 diarrÃia). ConclusÃes: A suplementaÃÃo oral de AG por 10 dias melhorou a permeabilidade intestinal e o estado nutricional em crianÃas sob risco nutricional residentes em uma comunidade de Fortaleza / Introduction: In spite of the recognition of alterations in intestinal barrier function associated with malnutrition and the trophic effects of alanyl-glutamine (AG) on intestinal barrier function, measured by the rate of urinary excretion of Lactulose:Manitol, there are still few studies determining the effect of oral supplementation of AG in malnourished children. Objectives: Examine the effect of oral AG supplementation or the placebo Glycine (G) on intestinal barrier function and growth in children who are at risk for malnutrition and are residents of the University Park of Pici community. Methods: Double blind randomized study in children between 6 months and 8 years of age, with at least one of the z scores for the anthropometrical indicators (AIs) (weight-for-age, height-for-age, and weight-for-height) less than minus one. One hundred and seven children were randomized between July 2003 and November 2004, to receive AG (24 g/day) or G (25 g/day) in iso-nitrogenic quantities for 10 days. The urinary excretion of Lactulose:Mannitol was used as a measure of intestinal permeability, and was performed on the first and tenth days of the study protocol. The weight and height of the children were collected on the 1, 10, 30, and 120 days of the study protocol to calculate the AIs. Results: The percentage of urinary excretion of Lactulose decreased significantly in the group that received AG (p < 0.05 Student T test), but not in the group that received G. The cumulative improvement in the Anthropometrical Indicators, weight-for-height and weight-for-age on the 120 day of the study protocol were significant when covariant analysis was performed in the group which received AG versus the control group G (p < 0.04 and < 0.029, respectively). During the study period a total of 20 (19%) Adverse Events (AEs) were observed in the following order of frequency: vomiting (8.4%), diarrhea (2.8%), nausea (1.9%), respiratory infection (1.9%), scabies (1.9%), asthma (0.9%), epistaxis (0.9%). The AEs were not statistical different between the study groups, and only three of the AEs were considered Serious Adverse Events (SEAs), two in the AG group (1 asthma and 1 diarrhea) and one in the G group (1 diarrhea). Conclusions: The oral supplementation of AG for 10 days improved intestinal permeability and nutritional status in children at risk for malnutrition in a Fortaleza community

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / In this study we aimed to validate a model of acute lung injury (ALI) induced by surgical muscle trauma, which attempts to reproduce the conditions of a skeletal muscle trauma that occurs in humans and, therefore, to provide a better understanding of this disease and its treatmentsâ alternatives. In the first step we evaluated the effect of the experimental model. Thirty-six male Wistar rats with average weight of 250g, were divided into 6 groups. In the first step we evaluated the effect of the experimental model. Saline Group (n = 6): animals received 2 ml of saline (i.v) at the same times of the Saline and trauma group; Saline and Trauma Group (n = 6): animals received saline 30 minutes before the induction of muscle trauma and again at 6 and 12 hours after the trauma; Dexamethasone Group (n = 6): animals received 2 doses of dexamethasone 2 mg / kg (i.p) at the same times of Dexamethasone and Trauma Group; Dexamethasone and Trauma Group (n = 6): animals received 2 doses, 2 hours before the occurrence of trauma and 10 hours after the trauma - this group was used as positive control. Surgical procedures were performed under anesthesia of tribromethanol 2.5% (1 ml/100g body weight). The induced trauma surgery was performed in the thigh of the animal and every muscle was detached from the knee to the hip joint. After 24 h of injury, the lungs were retreated to evaluate myeloperoxidase (MPO), glutathione (GSH), neutrophil infiltration, congestion, edema, necrosis and hemorrhage. In plasma only GSH was measured. It was observed that the muscle trauma was shown to induce ALI by promoting a significant reduction in GSH (8.53  1.22 versus 18.87  7.35 p <0.01) and a significant increasing activity of MPO (23.96  4.86 versus 24.50  7.45 p <0.001), neutrophil infiltration (71.00 versus 19.64  28.50  7.63 p <0.001), degree of congestion, edema, necrosis and hemorrhage (p <0.01), when compared with Saline Group without trauma. In Dexamethasone and Trauma Group, when compared to Saline and Trauma Group, Dexamethasone, by being an inhibitor of inflammatory gene, was able to modulate the inflammatory response in almost all parameters. Subsequently we evaluated the effect of L-alanyl-glutamine (L-Ala-Gln) on acute lung injury induced by muscle trauma surgery. 24 h after trauma it was made a comparison between the group treated with L-Ala-Gln and trauma (n = 6) and the saline and trauma group, and it was found that L-Ala-Gln promoted a statistically significant reduction in neutrophil infiltration ( 19.64  71.00 versus 28.50  7.63 p <0.001), in MPO activity (23.96  4.86 versus 12.90  2.01, p <0.001) and a significant increase in concentration of GSH (36.79  7.31 versus 8.53  1.22 p <0.001) in the lung. In histopathological evaluation it was also observed a significant decrease (p <0.01) in the degree of edema, hemorrhage and necrosis in lung tissue of the evaluated groups above. The possible mechanism to justify the observed effects could be that glutamine enhanced glutathione levels, the energy substrate for immune cells, and, additionally, increased the expression of heat shock proteins (HSP) and, as such, prevented the infiltration of neutrophils in tissues. These results suggest that the Ala-Gln treatment has the potential to reduce the inflammatory reaction that was installed in lungs after skeletal muscle trauma. / Nesse estudo procurou-se validar um modelo de lesÃo aguda pulmonar (LAP) induzida por um trauma muscular cirÃrgico que tenta reproduzir as condiÃÃes de um trauma muscular esquelÃtico que ocorre em seres humanos e com isso proporcionar um melhor entendimento da doenÃa e das suas alternativas de tratamento. Na primeira etapa foi avaliado o efeito do modelo experimental. Trinta e seis ratos machos Wistar, com peso mÃdio de 250g, foram distribuÃdos em 6 grupos. Grupo Salina (n=6): os animais receberam apenas 2 ml de salina (i.v.) nos mesmos tempos do grupo salina e trauma; Grupo Salina e trauma (n=6): os animais receberam salina 30 minutos antes do trauma muscular e novamente Ãs 6 e 12 horas depois do trauma. Grupo Dexametasona (n=6): os animais receberam 2 doses de Dexametasona 2mg/kg i.p. nos mesmos tempos do grupo Dexametasona e trauma; Grupo Dexametasona e trauma (n=6): os animais receberam 2 doses, 2 horas antes da ocorrÃncia do trauma e 10 horas depois do trauma, esse grupo foi utilizado como controle positivo. Os procedimentos cirÃrgicos foram realizados sob anestesia tribromethanol 2,5% (1 ml/100g de peso do animal). A operaÃÃo de induÃÃo do trauma foi realizada na coxa do animal e toda musculatura foi descolada desde o joelho atà a articulaÃÃo do quadril. ApÃs 24 h do trauma, retiraram-se os pulmÃes para avaliar mieloperoxidase (MPO), glutationa (GSH), infiltraÃÃo neutrofÃlica, congestÃo, edema, necrose e hemorragia. No plasma foi dosado apenas GSH. Observou-se que o trauma muscular mostrou ser capaz de induzir LAP por promover uma reduÃÃo significante GSH (8,53  1,22 versus 18,87  7,35 p <0,01), aumento significante na atividade de MPO (23,96  4,86 versus 24,50  7,45 p<0,001), do infiltrado neutrofÃlico (71,00 versus 19,64  28,50  7,63 p <0.001), no grau de congestÃo, edema, necrose, hemorragia (p<0,01), quando comparamos com grupo salina sem trauma. No grupo Dexametasona e trauma quando comparado ao grupo salina e trauma, a Dexametasona um inibidor do gene inflamatÃrio, foi capaz de modular a resposta inflamatÃria em quase todos os parÃmetros avaliados. Posteriormente avaliou-se o efeito da L-alanil-glutamina (L-Ala-Gln) sobre a lesÃo aguda pulmonar induzida por trauma muscular cirÃrgico. 24 h apÃs o trauma comparou-se o grupo tratado com L-Ala-Gln e trauma (n=6) com o grupo salina e trauma e verificou-se que a L-Ala-Gln promoveu uma reduÃÃo estatisticamente significante na infiltraÃÃo neutrofÃlica (71,00 versus 19,64  28,50  7,63 p <0.001), na atividade de MPO (23,96  4,86 versus 12,90  2,01, p <0,001), e um aumento significante na concentraÃÃo de GSH (36,79  7,31 versus 8,53  1,22 p <0,001) no pulmÃo. Na avaliaÃÃo histopatolÃgica tambÃm foi observada uma reduÃÃo significante (p< 0,01) no grau de edema, hemorragia e necrose no tecido pulmonar nos grupos acima avaliados. Os possÃveis mecanismos para justificar os efeitos da L-Ala-Gln em modular a resposta inflamatÃria no pulmÃo deve-se ao fato da glutamina ser precursora de glutationa, funciona como substrato energÃtico para cÃlulas do sistema imune, aumenta as expressÃes de proteÃnas de choque tÃrmico (HSP) e impede a infiltraÃÃo neutrofÃlica. Esses resultados sugerem que o tratamento com L-Ala-Gln tem potencial para reduzir o processo inflamatÃrio agudo no pulmÃo induzido por trauma muscular esquelÃtico cirÃrgico.

No presente trabalho, estudaram-se os efeitos da l-alanil glutamina (Ala-Gln), do precondicionamento isquÃmico (PCI) e das duas tÃcnicas concomitantemente sobre a lesÃo pulmonar provocada por isquemia e reperfusÃo (I/R) causada por pinÃamento da aorta infra-renal em ratos. Foram utilizados 60 ratos machos Wistar, randomizados em cinco grupos (n = 12) divididos em dois tempos (n = 6): Grupo Simulado, Grupo I/R, Grupo PCI + I/R, Grupo Ala-Gln + I/R, Grupo Ala-Gln + PCI + I/R. Tempos: T1 (4h de isquemia) e T2 (4 horas de isquemia e 1h de reperfusÃo). Todos os grupos receberam soluÃÃo salina previamente, menos os grupos prÃ-tratados com Ala-Gln que receberam o dipeptÃdeo e soluÃÃo salina em igual volume. Foi utilizado o modelo de pinÃamento da aorta infra-renal com 4 horas de isquemia e 1 hora de reperfusÃo. Determinaram-se as concentraÃÃes de mieloperoxidase (MPO) pulmonar, substÃncias reativas ao Ãcido tiobarbitÃrico (TBARS) e glutationa reduzida (GSH) no sangue e pulmÃo para avaliar os grupos em estudo. O teste de Kolmogorov-Smirnoff mostrou distribuiÃÃo normal dos dados. Dados expressos como mÃdia acompanhada pelo seu desvio padrÃo (MÃdia  DPM) sendo realizado teste t de Student. Para anÃlise comparativa simultÃnea de trÃs grupos utilizou-se o teste Anova com pÃs-teste de Tukey. Em todos os casos foi adotado o nÃvel de significÃncia de p<0,05. Houve elevaÃÃo das concentraÃÃes de MPO pulmonar tanto no grupo submetido à isquemia quanto no grupo que realizou a I/R. Ocorreu reduÃÃo significante das concentraÃÃes de MPO pulmonar nos grupos submetidos à isquemia prÃ-tratados com Ala-Gln e com PCI. Na avaliaÃÃo dos grupos que sofreram I/R nÃo foi observada alteraÃÃo nas concentraÃÃes de MPO nos grupos prÃ-tratados Ala-Gln ou PCI. O grupo prÃ-tratado com as duas tÃcnicas apresentou aumento significante da MPO nos tempos estudados. A Ala-Gln como prÃ-tratamento isolado reduziu TBARS plasmÃtico na isquemia e o aumentou no pulmÃo na I/R. Jà no pulmÃo durante isquemia e no plasma na I/R houve reduÃÃo da GSH. O PCI como prÃ-tratamento isolado elevou o TBARS pulmonar na I/R e reduziu a GSH pulmonar na I/R. A associaÃÃo da Ala-Gln e PCI acresceu o TBARS plasmÃtico na isquemia, tambÃm o elevando no pulmÃo e mÃsculo na I/R. Jà a GSH, com os dois prÃ-tratamentos, sofre reduÃÃo plasmÃtica na isquemia e pulmonar na I/R, com elevaÃÃo plasmÃtica na I/R. O presente estudo demonstra que tanto o prÃ-tratamento com Ala-Gln como o PCI protegem contra a lesÃo isquÃmica à distÃncia, em modelo murino de pinÃamento da aorta infra-renal quando avaliado MPO pulmonar. O mesmo nÃo ocorre na lesÃo por I/R. NÃo hà benefÃcio, e sim agravamento de lesÃo à distÃncia pulmonar, na associaÃÃo dos dois prÃ-tratamentos ao mensurar a MPO pulmonar. / The present work determined the effects of pre-treatment with L-alanyl glutamine (Ala-Gln) and ischemic preconditioning (IPC), alone and in combination, against lesions caused by I/R by clamping the infrarenal aorta in rats. Sixty Wistar rats were distributed into five groups (n = 12) divided into two times (n = 6): Control, Group I/R, Group IPC + I/R, Group Ala-Gln + I/R, Group Ala-Gln + IPC + I/R. Times: T1 (infrarenal-aorta clamping ischemia-4h); T2 (ischemia-4h plus reperfusion-1h). Pulmonary myeloperoxidase (MPO) and plasma TBARS concentrations were measured. Data expressed as mean  standard-deviation, analyzed by Studentâs t-test and ANOVA/Tukeyâs post-test. P-values < 0,05 were considered significant. Increased MPO concentrations in ischemic group and in I/R group occurred as compared to control. Reduction in MPO concentrations happened in ischemic groups pre-treated with either Ala-Gln or IPC. I/R induced no change in MPO concentrations in groups pre-treated with either Ala-Gln or IPC. Pre-treating with the two procedures showed increased MPO at both times studied. Reduction in TBARS concentrations occurred in Ala-Gln pre-treated group, whereas significant elevation was observed when Ala-Gln and IPC were associated in ischemic animals. Ischemia/reperfusion induced elevation of plasma TBARS. Pre-treatment with either Ala-Gln or IPC protects against distant pulmonary lesion due to ischemia. The same did not occur in I/R lesion. Combining the two procedures aggravated inflammation indicated by increased MPO concentrations. Elevated TBARS concentrations in ischemic animals pre-treated with the two procedures indicate increased lipid peroxidation, whereas pre-treatment with Ala-Gln induced decreased TBARS concentrations.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Foram investigados os efeitos da L-alanil-glutamina (L-ALN-GLN) sobre as concentraÃÃes sanguÃneas e teciduais de metabÃlitos (lactato, piruvato, glicose e corpos cetÃnicos), substÃncias reagentes ao Ãcido tiobarbitÃrico (TBARS), glutationa (GSH), mieloperoxidase (MPO) e avaliaÃÃo histopatolÃgica em gerbils. Tratou-se de um estudo experimental, controlado. Utilizaram-se 54 gerbils, machos, com peso mÃdio de 150g, distribuÃdos aleatoriamente em 3 grupos: salina com isquemia e reperfusÃo (SIR), salina sem isquemia e reperfusÃo (SSI), L-alanil-glutamina com isquemia e reperfusÃo (GIR), redistribuÃdos em 3 subgrupos: T0 (tempo mÃximo de isquemia), T30 (30 min de reperfusÃo) e T60 (60 min de reperfusÃo), com 6 animais cada. Foram prÃ-tratados com soluÃÃo salina 2,0 mL 0,9% endovenoso (e.v.) ou L-ALNGLN 0,75g/Kg (e.v.), 30 min antes do inÃcio dos experimentos. A isquemia cerebral foi induzida pela oclusÃo bilateral das artÃrias carÃtidas comuns (ACCs), por um perÃodo de 15 minutos. ApÃs todos os procedimentos cirÃrgicos as amostras (sangue e tecido) foram coletadas ao final dos trÃs tempos. Nas comparaÃÃes entre os grupos (SSI) e (SIR) houve um aumento significante nas concentraÃÃes de lactato no sangue no grupo SIR em T0 (0,756Â0,091 versus 3,596Â1,546); p=0,0122, T30 (0,869Â0,254 versus 3,316Â1,356); p=0,0015 e em T60 (0,858Â0,460 versus 2,409Â0,801); p=0,0021. No tecido cerebral houve um aumento significante do lactato em T0 (1,374Â0,172 versus 2,530Â0,850); p=0,0085, T30 (0,891Â0,697 versus 1,840Â0,530); p=0,0243 e em T60 (1,182Â0,136 versus 1,744Â0,463); p=0,0173 no grupo SIR. Para as concentraÃÃes de piruvato no sangue observou-se um aumento significante em T0 (p=0,0424); T30 (p=0,0271) e em T60 (p=0,0175) e no tecido cerebral em T0 (p=0,0369) no grupo SIR. Para as concentraÃÃes de glicose no sangue houve um aumento significante em T0 (0,493Â0,393 versus 1,116Â0,364); p=0,0174, T30 (0,617Â0,356 versus 1,502Â0,314); p=0,0010 e em T60 (0,998Â0,411 versus 1,718 Â 0,477); p=0,0190 e no tecido cerebral em T0 (0,292Â0,081 versus 0,952Â0,7140); p=0,0484, T30 (0,264Â0,080 versus 1,038Â0,609); p=0,0116 e em T60 (0,234Â0,089 versus 0,985Â0,533); p=0,0067, no grupo SIR. Verificou-se um aumento significante nos nÃveis enzimÃticos de MPO em T0 (p<0,0001), T30 (p=0,0269) e em T60 (p=0,0005) no grupo SIR. Na avaliaÃÃo histopatolÃgica no grupo SIR nas camadas piramidal interna e granular interna foram observados aumento significante de picnose, neurÃnios vermelhos, congestÃo e edema, em T0, T30 e T60. Nas comparaÃÃes entre grupos (SIR) e (GIR) houve diminuiÃÃo significante no grupo GIR no sangue de lactato em T0 (3,596Â1,546 versus 1,960Â0,450); p=0,0321, T30 (3,316Â1,356 versus 1,971Â 0,568); p=0,0490 e em T60 (2,409Â0,801 versus 1,516Â0,307); p=0,0290 e no tecido cerebral em T0 (2,530Â0,850 versus 1,540Â0,302); p=0,0228. No tecido cerebral no grupo GIR houve diminuiÃÃo significante de TBARS em T30 (0,110Â0,006 versus 0,057Â0,040); p=0,0102 e um aumento significante de GSH em T0 (3,454Â1,584 versus 10,054Â2,880); p=0,0006, T30 (10,949Â1,579 versus 81,767Â9,060); p<0,0001 e em T60 (101,83Â2,631versus 114,924Â6,311); p=0,0011. Na avaliaÃÃo histopatolÃgica no grupo GIR na camada piramidal interna foram observados diminuiÃÃo significante de picnose nos tempos T30 (3,00 (2,75 a 4,25) versus 1,50 (0,75 a 2,00); p=0,0086 e em T60 (4,00 (3,75 a 5,55) versus 2,00 (1,75 a 4,00); p=0,0379 e nos neurÃnios vermelhos em T30 (3,00 (2,00 a 4,25) versus 1,50 (0,75 a 2,00); p=0,0159 e em T60 (4,00 (3,75 a 4,75) versus 2,00 (1,75 a 4,00); p=0,0493. Na camada granular interna no grupo GIR houve diminuiÃÃo significante de picnose em T30 (2,00 (1,00 a 3,25) versus 1,00 (0,00 a 1,00); p=0,0208 e em T60 1,50 (0,00 a 1,00) versus 0,00 (1,00 a 3,50); p= 0,0412, neurÃnios vermelhos em T30 (2,00 (1,00 a 3,25) versus 1,00 (0,00 a 1,00); p=0,0208 e em T60 1,50 (0,00 a 1,00) versus 0,00 (1,00 a 3,50); p=0,0412 e no grau de edema em T30 (2,00 (1,00 a 2,00) versus 1,00 (0,75 a 1,00); p=0,0225. Portanto, o prÃ-condicionamento com L-ALN-GLN foi capaz de induzir glicÃlise cerebral e de promover um efeito protetor na lesÃo de isquÃmia e reperfusÃo em gerbils, uma vez que elevou a sÃntese de glutationa tanto na isquemia quanto na reperfusÃo, reduziu a peroxidaÃÃo lipÃdica durante a fase de reperfusÃo e diminuiu o grau de edema intracerebral, a quantidade de picnose e neurÃnios vermelhos no tecido cerebral. / We investigated the metabolic effects of L-alanyl-Glutamine (L-ALN-GLN) on blood and tissue concentrations of metabolites (lactate, pyruvate, glucose and ketone bodies), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), glutathione (GSH), myeloperoxidase (MPO) and histopathologic evaluation of gerbils. This was an experimental and controlled study. Fifty-four male gerbils with a mean weight of 150gwere used, and were divided randomly and equally into 3 groups: saline with ischemia and reperfusion (SIR), saline without ischemia and reperfusion (SSI), L-alanyl-glutamine ischemia and reperfusion (GIR). They were then redistributed into three subgroups: T0 (maximum time of ischemia), T30 (30 min of reperfusion) and T60 (60 min of reperfusion), containing 6 animals each. They were pretreated with saline 2.0 mL 0.9% intra-venous (iv) or ALN-L-GLN 0.75 g / kg (iv) 30 min before the start of the experiments. Cerebral ischemia was induced by bilateral occlusion of the common carotid arteries (CCAs) for a period of 15 minutes. After all surgical procedures, the samples (blood and tissue) were collected at the end of the three periods. When comparing SSI and SIR groups, a significant increase of lactate was found in SIR group in T0 (0.756Â0.091 versus 3.596Â1.546; p=0.0122, T30 (0.869Â0.254 versus 3.316Â1.356); p=0.0015, and T60 (0.858Â0.460 versus 2.409Â0.801); (p=0.0122). In brain tissue there was significant lactate increase in TO (1.374Â0.172 versus 2.530Â0.850); p=0.0085, T30 (0.891Â0.697 versus 1.840Â0.530); p=0.0243 and T60 (1.182Â0.136 versus 1.744Â0.463); p=0.0173, in SIR group. In blood and tissue concentrations of pyruvate was found a significant increase in T0 (p=0.424), T30 (p=0.0271) and T60 (p=0.0175), and in brain tissue in T0 (p=0.0369) in the SIR group. In glucose blood concentrations there was a significant increase in T0 (0.493Â0.393 versus 1.116Â0.364); p=0.0174, T30 (0.617Â0.356 versus 1.502Â0.314); p=0.0010 and T60 (0.998Â0.411 versus 1.718Â0.477); p=0.0190, and in brain tissue in T0 (0.292Â0.081 versus 0.952Â0.7140); p=0.0484, T30 (0.264Â0.080 versus 1.038Â0.609); p=0.0116 and T60 (0.234Â0.089 versus 0.985Â0.533); p=0.0067, in the SIR group. On blood ketone bodies there was a significant increase in T0 (p=0.0006) and T60 (p=0.0455), and in brain tissue in T0 (p=0.0428) in SIR group. There was a significant increase in MPO enzyme levels at T0 (p<0.0001), T30 (p=0.0269) and T60 (p=0.0005). In the histopathological evaluation in the internal pyramidal and granular layers in group CRS observed a significant increase of pyknosis, red neurons, congestion and edema, at T0, T30 and T60. In the comparison between the (SIR) and (GIR) groups, there was a significant decrease in T0 (3.596Â1.546 versus 1.960Â0.450); p=0.0321, T30 (3.316Â1.356 versus 1.971Â0.568); p=0.0490 and T60 (2.409Â0.801 versus 1.516Â0.307); p=0.0290, and in brain tissue there was significant decrease in T0 (2,530Â0,850 versus 1.540Â0,302); p=0.0228. In brain tissue was found significant decrease in TBARS concentrations in T30 (0.110Â0.006 versus 0.057Â0.040); p=0.0102, and a significant increase of GSH in T0 (3.454Â1.584 versus 10.054Â2.880), p=0.0006, T30 (10.949Â1.579 versus 81.767Â9.060); p<0.0001 and T60 (101.83Â2.631 versus 114.924Â6.311); p=0.0011 in GIR group. Regarding the histological examination, a significant decrease of pyknosis was found at T30 (3.00 (2.75 to 4.25) versus 1.50 (0.75 to 2.00); p= 0.0086 and T60 (4.00 (3.75 to 5.55) versus 2.00 (1.75 to 4.00); p=0.0379 and red neurons at T30 (3,00 (2,00 to 4.25) versus 1.50 (0.75 to 2.00); p=0.0159 and T60 (4.00 (3.75 to 4.75) versus 2,00 (1.75 to 4.00); p= 0.0493. in the internal pyramidal layer. In the Internal granular layer in GIR group there was a significant reduction of pyknosis at T30 (2.00 (1.00 to 3.25) versus 1.00 (0.00 to 1.00); p=0.0208 and T60 1.50 (0.00 to 1.00) versus 0.00 (1.00 to 3.50); p=0.0412, red neurons in T30 (2.00 (1.00 to 3.25) versus 1.00 (0.00 to 1.00); p=0.0208 and T60 1.50 (0.00 to 1.00) versus 0.00 (1.00 to 3.50); p=0.0412 and on the intracerebral edema level at T30 (2.00 (1.00 to 2.00) versus 1.00 (0.75 to 1.00); p=0.0225. Therefore, the preconditioning with L-GLN-ALN is able to induce brain glicolise and promote a protective effect on ischemic brain injury and reperfusion in gerbils, since it increased the glutathione synthesis both on ischemia and reperfusion, as well as decreasing lipid peroxidation during the reperfusion phase and decreased the intercerebral edema level, and the number of pyknosys and red neurons in brain tissue.

O estudo investigou o efeito de diferentes competições de ciclismo de estrada e de um período de descanso na Creatina Kinase (CK), Lactato Desidrogenase (LDH), Interleucina-1 (IL-1), Interleucina-6 (IL-6), Fator de necrose tumoral (TNF-<font face=\"symbol\">a), prostaglandina E2 (PGE2) e na razão Glutamina/Glutamato (Gln/Glu). Para isso, 12 ciclistas profissionais que completaram 3 diferentes competições. A primeira e a terceira (C1 e C3) competições foram de uma 1 etapa e a segunda foi uma volta ciclística (C2) de 7 dias. A C3 foi realizada após um período de 20 dias de descanso. Foram coletadas amostras de sangue 24 horas antes do início e 24 horas após o término de cada competição. Não houve diferenças significativas para nenhum dos mediadores inflamatórios (p<0,05). Aumentos (p<0,05) foram encontrados após o término da C2 e da C3 para CK e LDH e diminuição (p<0,05) na razão Gln/Glu C3. A conclusão foi a de que lesões musculares são diagnosticadas em ciclistas profissionais de estrada após o término de uma volta ciclística e de uma competição precedida de um período de descanso. / The objective of this research was to observe the effect of different road cycling competitions and a 20 days break period in Creatine Kinase (CK), Lactate Dehydrogenase (LDH), Interleukin-1(IL-1), Interleukin-6 (IL-6), Factor necrosis tumoral-alpha (TNF-<font face=\"symbol\">a), prostaglandin E2 (PGE2) and in the ratio of Glutamine/Glutamate (Gln/Glu). The hypothesis tests were conducted with a sample of 12 professional cyclists which have completed 3 different road cycling races. The first and third ones (C1 and C3) were mass start races. The second one was a stage racing (C2). One analysis was made after a 20 days break period (C3). Blood samples were collected 24 hours before and 24 hours after each competition. There were no significant differences for none of the inflammatory mediators (p<0,05). Increases (p<0,05) were detected after the end of C2 and C3 for CK and LDH and low (p<0,05) in the ratio of Gln/Glu at C3. The conclusion of the research was that muscular damages are diagnostified in professional road cyclists 24 hours after the end of the stage racing and after mass start competition preceded by 20 days a break period.

O desenvolvimento de uma resposta imune adequada é um processo extremamente importante para a manutenção da homeostase do organismo. Uma série de processos são desencadeados a partir do primeiro contato com micro-organismos patógenos até a efetivação da resposta imune de memória. Todos esses processos envolvem a participação e a complexa atuação de mediadores como as citocinas inflamatórias e também citocinas regulatórias, que exercerão efeitos controlando o processo inflamatório. Diversos mecanismos moleculares, subjacentes à resposta inflamatória, ainda não estão totalmente compreendidos, como por exemplo o controle da expressão de genes inflamatórios exercido pela IL-10. Os processos envolvidos na resposta inflamatória são mantidos às custas do consumo de nutrientes, dentre eles podemos destacar o aminoácido glutamina, que atua em nível molecular, fornecendo nitrogênio para a formação do material genético e fonte energética para determinadas células do sistema imunológico como os macrófagos. Portanto, neste trabalho, investigamos os efeitos da IL-10 na modificação de nucleossomos, evidenciando o papel dessa citocina em regular a expressão de genes inflamatórios em macrófagos. Avaliamos também a função da glutamina, modulando a expressão de RNAm de citocinas inflamatórias e regulatórias dessas células. E por último, desenvolvemos um modelo de restrição alimentar em camundongos, nos quais avaliamos os efeitos desse modelo considerando-se alguns aspectos hematológicos e estudamos as alterações na resposta inflamatória em células esplênicas e do peritônio, bem como avaliamos a suplementação de glutamina in vitro na produção das citocinas (IL-12, TNF-alfa, IL-10) e a expressão do fator de transcrição NFkB. Os resultados compilados mostraram que a IL-10 leva a uma rápida redução da acetilação de nucleossomos, modulando a arquitetura da cromatina de genes inflamatórios como a IL-12. A glutamina modula a expressão de citocinas inflamatórias, regulando positivamente a expressão de IL-10 e Interferon beta. E a restrição alimentar induz a redução de citocinas proinflamatórias (IL-12 e TNF-&#945;), influenciadas pelo aumento da produção de IL-10 e finalmente a suplementação com glutamina não interfere nesses parâmetros nas células peritoneiais e esplênicas do grupo submetido à restrição alimentar. Conclusão: a IL-10 modula a expressão gênica através da modificação de nucleossomos em macrófagos derivados da medula; a glutamina modula a expressão de IL-10 inibindo a resposta inflamatória, e a restrição alimentar modula alguns aspectos hematológicos e possui propriedades anti-inflamatórias. / The development of an appropriate immune response is an important process to the organism\'s homeostatic maintenance. A series of processes are triggered upon the very first contact with pathogens, up to the immunological memory establishment. These processes implicate in the participation of complex mediators, such as inflammatory and regulatory cytokines that will control the inflammatory process. Some mechanisms underlying the inflammatory response are not totally understood, the control of inflammatory genes exerted by IL-10 is an example. The processes involved in the inflammatory response are kept with nutrients expense, among these nutrients we can highlight the amino acid glutamine. It acts in a molecular level, supplying nitrogen to genetic material formation and as an energy supply for immune cells such as macrophages. Thus, we investigated the IL-10 effects on nucleosome modifications evidencing this cytokine role regulating inflammatory genes expression in macrophages. We also evaluated glutamine functions modulating inflammatory and regulatory cytokines mRNA expression on these cells. Ultimately, we developed a dietary restriction animal model where we evaluated it\'s effects on selected haematological aspects, analyzing the alteration in the inflammatory response of splenic and peritoneal cells. We also evaluated in vitro glutamine supplementation assessing cytokines production (IL-12, TNF-&#945;, and IL-10) and the expression of NFkB transcription factor. The compiled results a expressive reduction in nucleosome acetylation modifying the chromatin architecture of inflammatory genes such as IL-12 and IL-6. Glutamine modulates inflammatory cytokines gene expression upregulating the expression of IL-10 and interferon beta. The dietary restriction reduces proinflammatory cytokines production (IL-12 and TNF-&#945;), these results are influenced by the upregulated IL-10 production, glutamine supplementation have no effect on these parameters in the dietary restriction group. In conclusion, we can infer that IL-10 modulates gene expression trough nucleosome modification in bone marrow derived macrophages, glutamine has a potential effect on IL-10 expression, inhibiting the inflammatory response and dietary restriction modifies hematological parameters, presenting anti-inflammatory properties.