<p>UVOD:&nbsp; Citopenija je jedna od glavnih&nbsp; karakteristika mnogih hematolo&scaron;kih bolesti. U&nbsp; rutinskoj transfuziolo&scaron;koj upotrebi su metode&nbsp; detekcije prisustva antitela u serumu ili na&nbsp; eritrocitima bolesnika. Primena direktnog testa utro&scaron;ka antihumanog globulina predstavlja&nbsp; efikasan način da se stekne kompletan uvid u imunolo&scaron;ka zbivanja na svim krvnim lozama, prati dinamika razvoja antitela i toka bolesti. MATERIJAL I METODE: Svim pacijentima su se iz uzoraka periferne&nbsp; krvi vr&scaron;ile sledeće analize krvi: 1) direktni antiglobulinski test mikrometodom&nbsp; aglutinacije u gel karticama (LISS)/ Coombs ID. Dobijeni rezultat aglutinacije mikrometodom na gelu moţe biti negativan ili pozitivan i 2) direktni test utro&scaron;ka antihumanog globulina metodom aglutinacije u epruveti. Očitavanje se vr&scaron;ilo određivanjem razlike u titru antihumanog globuli na i očitavanjem postojeće reakcije aglutinacije dobijene u uzorcima pacijenta u odnosu na rezultate reakcije aglutinacije dobijene sa uzorcima zdrave kontrolne osobe. Test se smatra o pozitivnim ukoliko se dobijala razlika u titru AHG - a za bar dva razređen ja sa pacijentovim ćelijama u odnosu na ćelije zdrave kontrolne osobe. Statistička značajnost&nbsp; je analizirana t - testom, Spirmanovim&nbsp; koeficijentom korelacije REZULTATI: Analizirano je 100 pacijenata sa dijagnozom anemije, leukopenije,&nbsp; limfoproliferativnih bolesti,&nbsp; trombocitopenije, trombotične trombocitopenijske purpure, idiopatske trombocitopenične purpure, mijelodisplastičnog sindroma, miastenije gravis i sistemskog eritematoznog lupusa pre i nakon primljene terapije. Direktni antiglobulinski test je biopozitivan u 20% slučajeva dok je direktni test utro&scaron;ka antihumanog globulina bio u 51%, odnosno za 31% vi&scaron;e. Nakon primljene terapije direktni antiglobulinski test je ostao pozitivan u 18% slučajeva a direktni test utro&scaron;ka antihumanog globulina u 46% &scaron;to je za 28% vi&scaron;e. Utvrđivanjem povezanosti između citopenije i stepena utro&scaron;ka antihumanog globulina dokazano je da svi praćeni parametri utiču na stepen utro&scaron;ka AHG-a: hemoglobin (&beta;=-0,579, p=0,000), hematokrit (&beta;=-0,568, p=0,000), eritrociti (&beta;=-0,519, p=0,000), trombociti (&beta;=-0,617, p=0,000) i leukociti(&beta;=-0,119, p=0,237). Takođe je dokazano da &scaron;to su vrednosti posmatranih parametara veće, razlika u titru direktnog testa utro&scaron;ka antihumanog globulina je manja &scaron;to bi i&scaron;lo u prilog boljoj prognozi posmatranog oboljenja. ZAKLJUČAK: Direktni test utro&scaron;ka antihumanog globulina je značajno osetljiviji test u odnosu na direktni antihumani globulinski test. Postoji pozitivna korelacija između citopenije i stepena konzumacije antihumanog globulina. Smanjenje titra antitela direktnog testa utro&scaron;ka antihumanog globulina je jedan od pokazatelja bolje prognoze bolesti.</p> / <p>INTRODUCTION: Cytopenia is one of the main characteristics of many hematologic diseases. In routine use are methods of detecting the presence of antibodies in the serum or on red blood cells of patients. The application of direct consumption test of antihuman globulin is an efficient way to gain complete insight into the immunological events at all bloodlines, monitor the dynamics of the development of antibodies and disease progression. MATERIALS AND METHODS: All patients samples were tested for: 1) direct antiglobulin test by micro agglutination method in the gel card (LISS) / Coombs ID. The result obtained by micro agglutination gel can be negative or positive, 2) direct consumption test of antihuman globulin in a test tube. Interpretation is performed by determining differences in titer of antihuman globulin by reading existing reactions of agglutination in samples of the patient and compare it to the results obtained with the samples of the healthy control persons. The test is considered positive if the difference in titres obtained AHG differs for at least two dilutions of a patient&#39;s cells compared to cells of healthy control persons. Statistical significance was analyzed by t-test, Spearman correlation coefficient. RESULTS: A total of 100 patients diagnosed withanemia, leukopenia, lymphoproliferative disease, thrombocytopenia, thrombotic thrombocytopenic purpura, idiopathic thrombocytopenic purpura, myelodysplastic syndrome, myasthenia gravis and systemic lupus erythematosus were analyzed before and after receiving treatment. Direct antiglobulin test was positive in 20% cases, while the direct consumption test of anti-human globulin was 51%, that is the difference of 31%. After treatment direct antiglobulin test remained<br />positive in 18% of cases and direct consumption test of antihuman globulin was in 46%, which is 28% higher. Determining the relationship between the degree of cytopenia and consumption of anti-human globulin showed that all monitored parameters affect the level of consumption: hemoglobin (&beta; = -0.579, p = 0.000), hematocrit (&beta; = -0.568, p = 0.000), erythrocytes (&beta; = -0.519 , p = 0.000), platelets (&beta; = -0.617, p = 0.000) and leukocytes (&beta; = -0.119, p = 0.237). It was also proved that if the values of observed parameters are higher, difference in titer of direct consumption test of antihuman globulin is lower, which can indicate better prognosis of disease. CONCLUSION: Direct consumption test of antihuman globulin was significantly more&nbsp; sensitive test than the direct anti-human globulin test. There is a positive correlation between the degree of cytopenia and consumption of anti-human globulin. Decrease in antibody titer in direct consumption test of antihuman globulinis an indicator of a better prognosis of the disease.</p>

A avicultura brasileira é atualmente uma atividade de grande sucesso. A utilização de sistemas de planejamento associados a novas tecnologias, reflete-se no extraordinário crescimento da atividade. A produção brasileira de frango ultrapassou a marca anual de 11 milhões de toneladas, em 2009. O Brasil está entre os três maiores produtores de frango no ranking mundial, junto com Estados Unidos e China. Haja vista a importância que a avicultura representa para o país, pela geração de benefícios sociais e econômicos, o risco que a Influenza aviaria constitui para a avicultura brasileira é enorme. Um surto desta doença em um centro de produção avícola representaria um risco à economia e incidiria de forma negativa nos níveis de consumo de proteína de qualidade e economicamente acessível à população. A fim de estabelecermos um monitoramento do vírus da Influenza A em aves domésticas não vacinadas, residentes em regiões de elevada confluência migratória aviária no Brasil a região amazônica, para a realização deste trabalho se fez necessário a colheita de sangue para o teste sorológico indicado como padrão em todo o mundo para detectar anticorpos contra o vírus da influenza, tendo como objetivos maiores, contribuir para o fortalecimento dos serviços de defesa sanitária animal, aumentar a capacidade de investigação, e finalmente, atualizar e harmonizar normas e procedimentos para a prevenção e controle da Influenza A, referenciando-se nas recomendações da Organização Mundial de Sanidade Animal (Office International des Epizooties - OIE). Das 1051 aves amostradas em diferentes localidades da região norte do Brasil, 1010 soros foram testados para seis diferentes subtipos virais: H2;H3;H5;H6;H7 e H9, pela técnica sorológica da Inibição da Hemaglutinação (HI). Destas, MAIS DE 50% apresentaram positividade para um subtipo viral testado, no entanto todos os soros apresentaram negatividade no centro de referência mundial em sorologia de Influenza, St. Jude Childrens Research Hospital localizado em Memphis, EUA. O antagonismo dos resultados levantam a discussão da metodologia adotada como padrão em todo mundo, o que nos levou a otimizar a técnica, vislumbramos a diferença ao compararmos os resultados do ano de 2005 e do ano de 2006, o primeiro ano obtivemos 50% de positividade nas amostras, já no ano seguinte esta positividade cai para aproximadamente 0,2%. Com este resultado podemos inferir que a técnica foi adequadamente otimizada, corroborando as informações de que o Brasil é livre de Influenza aviaria em patos domésticos na região amazônica. / The Brazilian poultry industry is currently a very successful activity. The use of planning systems associated with new technologies, reflected in the extraordinary growth in activity. The Brazilian production of chicken surpassed the annual 11 million tonnes in 2009. Brazil is among the three largest poultry producers in the world ranking, along with the United States and China. Given the importance of poultry production for the country, the generation of social and economic benefits, the risk that avian influenza poses to the Brazilian poultry industry is huge. An outbreak of this disease in a poultry-production pose a risk to the economy and impinge negatively on levels of consumption of protein quality and affordable to the population. In order to establish a monitoring of influenza A viruses in poultry unvaccinated residents in regions of high avian migratory confluence in Brazil the Amazon region, for this work was required the collection of blood for serological testing indicated as standard worldwide to detect antibodies against influenza viruses, with the larger goals, contribute to the strengthening of animal health protection services, increase research capacity, and finally, update and harmonize standards and procedures for the prevention and control Influenza A, referencing the recommendations of the World Organization for Animal Health (Office International des Epizooties - OIE). From 1051 birds sampled in different localities of northern Brazil, 1010 sera were tested for six different viral subtypes: H2, H3, H5, H6, H7 and H9, the serological technique the hemagglutination inhibition (HI). Of these, over 50% were positive for one viral strain tested, but all sera were negative in the center of world reference serology Influenza, St. Jude Children\'s Research Hospital located in Memphis, USA. The antagonism of the results raise the discussion of the methodology adopted as standard throughout the world, which has led us to optimize the technique, we can see the difference when comparing the results of 2005 and 2006, the first year we had 50% positivity in the samples, in the following year this positive drops to about 0.2%. With this result we infer that the technique was properly optimized, corroborating the information that Brazil is free from avian influenza in domestic ducks in the Amazon region.

A serinoprotease Pic é uma proteína autotransportadora que apresenta papel importante na colonização da mucosa intestinal por E. coli enteroagregativa (EAEC). Uma cepa de E. coli enteropatogênica atípicas (aEPEC) albergando o gene pic foi detectada em um estudo prévio. O presente estudo teve como objetivo caracterizar a proteína Pic produzida por essa cepa de aEPEC (BA589). O gene pic em BA589 está presente em um plasmídeo de alto peso molecular (~98 kb) e o sequenciamento desse gene mostrou identidade de 99% com pic de EAEC 042. Pic da cepa BA589 (Pic589) foi capaz de clivar mucina bovina, hemaglutinar eritrócitos de coelho e clivar moléculas das três vias sistema complemento. O mutante BA589Dpic todas essas atividades in vitro. A cepa selvagem foi capaz de colonizar o intestino de camundongos tratados com estreptomicina, o que não foi observado com o mutante BA589Dpic. Desta forma, a serinoprotease Pic representa um fator de virulência adicional na cepa de aEPEC BA589, relacionada às etapas de adesão, colonização e evasão do sistema imune inato. / The serine protease Pic is an autotransporter protein that plays an important role in the colonization of the intestinal mucosa by enteroaggregative E. coli (EAEC). An atypical enteropathogenic E. coli (aEPEC) strain harboring the pic gene has been detected in a previous study. The present study aimed to characterize the protein Pic produced by that aEPEC strain (BA589). In BA589 pic is located in a high molecular weight plasmid (~98 kb), and sequencing of this gene showed 99% identity with pic from EAEC 042. Pic from BA589 (Pic589) was able to cleave bovine mucin, hemagglutinate rabbit erythrocytes and cleave molecules of the three complement system pathways. The mutant BA589Dpic lost all these capacities. The wild type strain was able to colonize the intestine of streptomycin treated mice, which was not observed with the mutant BA589Dpic. Thus, the serine protease Pic represents an additional virulence factor in aEPEC strain BA589, associated with adherence, colonization and evasion of innate immune system.

Orientador: Lucilene Delazari Santos / Resumo: O veneno de serpente tem sido utilizado para diversas finalidades terapêuticas; portanto, desde o início do século XX, a criação de serpentes em cativeiro tornou-se uma atividade cada vez mais relevante. Os principais motivos da existência e permanência destes cativeiros se atribuem à produção dos soros antiofídicos, e o uso de seus venenos e seus componentes isolados com potenciais aplicações à saúde animal e humana. Porém, a vida em cativeiro pode resultar na síndrome da má adaptação, a qual o animal sob estresse desenvolve inapetência e, consequentemente há o acometimento da imunidade, podendo desenvolver infecções por micro-organismos como fungos, bactérias e vírus. Desta forma, o controle e prevenção de infecções em serpentes mantidas em cativeiro tornaram-se assuntos muito importantes. Dentre as doenças infecciosas virais, têm-se a infecção pelo Paramixovírus ofídico, atualmente, denominado Ferlavirus reptiliano. Este vírus é altamente devastador em serpentes, pois atua no sistema nervoso central e respiratório, podendo levar à morte e/ou morbidade na fase aguda da doença, sendo que na fase crônica, o animal pode atuar como reservatório do vírus, e disseminar a doença no plantel. Atualmente, não há tratamento específico nem vacinas disponíveis para esta virose. Porém, testes sorológicos estão emergindo para a detecção de anticorpos. Dentre estes testes, encontram-se o ensaio de Inibição de Hemaglutinação (HI) e o ensaio de ELISA de Bloqueio de Fase Líquida (BFL-ELISA), ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Snake venom has been used for several therapeutic purposes. Therefore, breeding snakes in captivity has become an increasingly relevant activity since early20th century. The main reasons for the existence and permanence of these captivities are the production of snake antivenom and the use of venom and its isolate compounds with potential applications in human and animal health. However, living in captivity may result in the maladaptation syndrome, in which the animal under stress develops inappetence and, consequently, a decrease in immunity, becoming more likely to develop infections caused by microorganisms as fungi, bacteria and viruses. Thus, the control and prevention of infections in snakes kept in captivity became very important subjects. The infection by the ophidian paramyxovirus named reptilian ferlavirus is among the viral infectious diseases. This virus is highly devastating in snakes because its action in central and respiratory nervous system and may lead to death and/or morbidity in the acute stage of the disease, consideringthat the animal may act as a reservoir of the virus in the chronic stage and spread the disease in the breeding stock. Nowadays, there isn’t a specific treatment or vaccines available for strike this viral infection, however, serological tests are emerging for antibodies detection. Hemagglutination Inhibition (HI) and Liquid Phase Blocking ELISA (LPB-ELISA) are among these tests, which differs from each other in sensitivity and analytical ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Antonio Carlos Paulillo / Banca: Ruben Pablo Schoken-Iturrino / Banca: Laura Satiko Okada Nakaghi / Banca: Luciano Doretto Júnior / Banca: Maria Estela Gaglianone Moro / Resumo: Parâmetros imunológicos, clínicos, epidemiológicos e patológicos da vacinação em marrecos de Pequim foram avaliados por 3 experimentos. Para tanto, foram utilizadas amostras vacinais Ulster 2C, B1 e LaSota do vírus da doença de Newcastle (VDN). No experimento 1, foram utilizados 120 marrecos de Pequim de 1 dia de idade, distribuídos em 4 tratamentos de 30 animais cada, submetidos a diferentes programas imunoprofiláticos. A resposta imune foi avaliada pelo teste de HI, com posterior desafio frente a estirpe patogênica do VDN, aos 60 dias de vida das aves. Após o desafio, em todos os grupos, procedeu-se o reisolamento de vírus patogênico em embriões SPF. Independente do grupo experimental, sinais clínicos da reação vacinal não foram observados. Os resultados dos títulos de anticorpos (HI) mostraram que os programas imunoprofiláticos ensaiados foram igualmente eficientes no estímulo da resposta imune humoral. Os marrecos de Pequim desafiados mostraram-se refratários à enfermidade clínica com o VDN. Entretanto, ficou caracterizado o estado de portador de VDN nesta espécie decorridos até 30 dias da infecção experimental com este patógeno. Nos grupos vacinados, o reisolamento de vírus patogênico foi nulo, evidenciando -se assim a importância da imunoprofilaxia na supressão do estado de portador de VDN dos marrecos de Pequim. No experimento 2, aves SPF foram colocadas em contato íntimo com marrecos de Pequim inoculados com uma estirpe patogênica do VDN, decorridos cinco e 14 dias...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The clinical, epidemiological, immunological and pathological parameters of vaccination in white Pekin ducks were investigated using 3 experiments. Ulster 2C, B1 and LaSota vaccines strains of the Newcastle disease virus (NDV) were used. In experiment 1, 120 one-day-old white Pekin ducks were used, and divided into 4 different groups with 30 birds per group. They were submitted to different vaccination programs. The immunological responses in these birds were measured by HI test. These birds were also challenged with a pathogenic VDN strain at 60 days of age. After challenge, in all the groups, tracheal and cloacal swabs were collected for re-isolation of the virus in SPF embrionated eggs. Independent of the group, clinical signs of reaction to the vaccine were not observed. The antibody titers (HI) results showed that the immune vaccine programs adopted were equally efficient in stimulating protective levels of humoral immune responses. Challenged white Pekin ducks were refractory to the NDV clinical disease. However, a NDV carrier state was shown in this species until 30 days after experimental infection. The vaccinated groups of white Pekin ducks did not present any virus in the re-isolation of the pathogenic virus. Therefore, these results show the relevance of vaccination in suppressing a NDV carrier state in the white Pekin ducks. In experiment 2, SPF chickens housed with white Pekin ducks which were previously inoculated with a pathogenic NDV strain, developed severe and characteristic NDV lesions and died, after five and 14 days...(Complete abstract, acess undermentioned eletronic address) / Doutor

Submitted by Vasti Diniz (vastijpa@hotmail.com) on 2017-09-04T12:47:50Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3356476 bytes, checksum: 04bc24e3e4cfbdf2557866eb0f6e7739 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-04T12:47:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 3356476 bytes, checksum: 04bc24e3e4cfbdf2557866eb0f6e7739 (MD5) Previous issue date: 2017-04-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Snake venoms are complex mixtures of components that act upon the disturbance of various physiological mechanisms. The composition and biological activities of the venom may vary in snakes according to age, sex and geographic region. The present work aimed to evaluate the protein composition and biological activities triggered, in vitro, by male and female venoms of the Bothrops leucurus snake. The protein profile was obtained by high performance liquid chromatography (HPLC) and one-dimensional electrophoresis under denaturing conditions (SDS-PAGE). The biological effects evaluated were oxidative stress, antioxidant, coagulant and hemolytic (direct and indirect) activities. A chromatographic and electrophoretic analysis presented similarities between the protein profiles of males and females venoms. The evaluated venoms did not present hemolytic effect (direct or indirect) on erythrocytes. Significant erythrocyte haemagglutination was observed, it was caused by all the measurements of the venoms evaluated. B. leucurus venoms did not present oxidative effect on hemoglobin. In the presence of both venoms studied, were observed a reduction of the oxidative effect on hemoglobin caused by phenylhydrazine; suggesting the presence of antioxidant components in the composition of the venoms. The evaluation of coagulating effect of B. leucurus venoms were performed on citrated human plasma and clotting times were shorter in the presence of female venom and, both venoms presented clot formation time inversely proportional to the quantities evaluated. However, both protein profile and hemolytic (direct and indirect), oxidant and antioxidant effects observed in B. leucurus venom were similar for male and female venoms. Otherwise, the sexual variation linked to the coagulant effect may justify the differences in type and/or intensity of symptoms observed in ophidian accidents. / As peçonhas ofídicas são complexas misturas de componentes que atuam na perturbação de diversos mecanismos fisiológicos. A composição e atividades biológicas das peçonhas podem variar entre serpentes da mesma espécie de acordo com fatores como idade, sexo e região geográfica. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a composição proteica e atividades biológicas desencadeadas, in vitro, pelas peçonhas de machos e fêmeas da serpente Bothrops leucurus. O perfil proteico foi obtido por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) e eletroforese unidimensional em condições desnaturantes (SDS-PAGE). Os efeitos biológicos avaliados foram o estresse oxidativo, atividades antioxidante, coagulante e hemolíticas direta e indireta. A análise cromatográfica e eletroforética apresentaram semelhanças entre os perfis proteicos das peçonhas de machos e fêmeas. As peçonhas avaliadas não apresentaram efeito hemolítico (direto ou indireto) sobre eritrócitos. Foi observada uma expressiva hemaglutinação eritrocitária causada por todas as quantidades das peçonhas avaliadas. As peçonhas de machos e fêmeas de B. leucurus não apresentaram efeito oxidativo sobre hemoglobinas. Na presença de ambas as peçonhas estudadas, observou-se redução do efeito oxidativo sobre hemoglobinas provocado pela fenilhidrazina, sugerindo a presença de componentes antioxidantes na composição das peçonhas. A avaliação do efeito coagulante das peçonhas de B. leucurus foi realizada sobre o plasma humano citratado e os tempos de obtenção dos coágulos foram menores na presença da peçonha de fêmeas e, ambas as peçonhas apresentaram o tempo de formação dos coágulos inversamente proporcional às quantidades avaliadas. Contudo, tanto o perfil proteico como os efeitos hemolíticos (direto e indireto), oxidantes e antioxidantes observados nas peçonhas de machos e fêmeas de B. leucurus foram semelhantes. No entanto, a variação sexual obtida pela análise do efeito coagulante pode justificar as diferenças no tipo e/ou intensidade dos sintomas observados nos acidentes ofídicos.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao FINAL RICARDO.pdf: 485243 bytes, checksum: 1906f1911ad5edaec8d73c8546aaca3e (MD5) Previous issue date: 2010-07-02 / The arboviruses are diseases that affect humans, horses and other animal species causing in the majority of cases an asymptomatic infection to neurological disorders. The Flaviviruses are important arbovirus found in Brazil. A descriptive study was conducted from serological surveys in 1775 horses for detection of anti-Flavivirus antibodies in the State of Paraná (Foz do Iguaçú, Maringá and Barracão), Santa Catarina (São Miguel do Oeste, Guaraciaba, Iraceminha, Dionisio Cerqueira, Guarujá do Sul and São José do Cedro) and Rio Grande do Sul (Uruguaiana, São Borja, Itaqui Alegrete and Porto Alegre) in the years of 2007 and 2008. By testing hemagglutination inhibition (HI) were detected HI antibodies of Saint Louis and Ilhéus and other Flaviviruses included in the tests, as well as cross-reactivity for Flaviviruses. By HI test, 14.3% (254/1775) of animals were positive for Flavivirus, monospecific reactions were observed in 42.9% (109/254) serum samples, being that 78.9% (86/109) for St. Louis, 17.4% (19/109) for Ilhéus and 3.7% (4 / 109) for Rocio and cross-reactions were detected in 57.1% (145/254). Among the positives, there was no difference between the sexes. The age group &#8805; 10 years old was the most affected with 35.4% (73/206). The animals used for the practice of sport were positive in 34.3% (87/254). The state of Paraná showed 16.3% (107/657) of reacting animals, followed by Rio Grande do Sul with 15.1% (142/939) and Santa Catarina with 2.8% (5/179). This study brings new data regarding the immunity of horses against Flaviviruses in Brazil, and confirms the wide distribution of St. Louis and Ilhéus and the diversity of Flavivirus in the country, as well as the apparent absence of clinical disease in horses infected with the virus studied. / As arboviroses são enfermidades que acometem o homem, equinos e outras espécies animais causando na sua maioria das vezes infecções que vão desde assintomáticas até neurológicas. Os Flavivirus são importantes arbovírus encontrados no Brasil. Foi realizado um estudo descritivo a partir de inquéritos sorológicos em 1775 equinos para detecção de anticorpos anti-Flavivirus no Estado do Paraná (Foz do Iguaçu, Maringá e Barracão), Santa Catarina (São Miguel do Oeste, Guaraciaba, Iraceminha, Dionísio Cerqueira, Guarujá do Sul e São Jose do Cedro) e Rio Grande do Sul (Uruguaiana, São Borja, Itaqui, Alegrete e Porto Alegre) nos anos de 2007 e 2008. Por meio de testes de inibição da hemaglutinação (IH) foram detectados anticorpos IH de Saint Louis e Ilhéus e outros Flavivirus incluídos nos testes, assim como reações cruzadas para Flavivirus. Pelo teste de IH, 14,3% (254/1775) dos animais foram reagentes para Flavivirus, reações monoespecíficas foram observadas em 42,9% (109/254) amostras de soro, sendo que 78,9% (86/109) para Saint Louis, 17,4% (19/109) para Ilhéus e 3,7% (4/109) para Rocio e reações cruzadas foram detectadas em 57,1% (145/254). Dentre os animais reagentes, não foi observada diferença entre os sexos. A faixa etária &#8805; 10 anos foi a mais acometida com 35,4% (73/206). Os animais utilizados para a prática do esporte foram reagentes em 34,3% (87/254). O Paraná apresentou 16,3% (107/657) dos animais reagentes, seguido do Rio Grande do Sul com 15,1% (142/939) e Santa Catarina com 2,8% (5/179). Este estudo traz novos dados a respeito da imunidade de equinos contra Flavivirus no Brasil, e confirma a ampla distribuição de Saint Louis e Ilhéus e a diversidade de Flavivirus no País, bem como a aparente ausência de doenças em equinos infectados pelos vírus estudados.

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-01-14T16:38:41Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rebeka Cristine de Bastos Costa - 2015.pdf: 2127820 bytes, checksum: 8789b51096d386c4def09d0d1ee4da0d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-01-15T09:55:51Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rebeka Cristine de Bastos Costa - 2015.pdf: 2127820 bytes, checksum: 8789b51096d386c4def09d0d1ee4da0d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-15T09:55:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rebeka Cristine de Bastos Costa - 2015.pdf: 2127820 bytes, checksum: 8789b51096d386c4def09d0d1ee4da0d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-08-25 / Toxoplasmosis is a zoonotic disease in which mammals and birds can join the cycle as intermediate hosts, and felids as definitive hosts. Felis catus is recognized as the main responsible for the environmental contamination by Toxoplasma gondii oocysts. Serological diagnosis reveals little about the elimination of oocysts of T. gondii into the environment, principally by F. catus, which plays an important role in Public Health. There are few data on the frequency of feline toxoplasmosis in the State of Goiás. Therefore, the aim of this research was to evaluate the frequency of toxoplasmosis infection in domestic cats and their potential role in its transmission through the oocyst elimination into the environment and the respective factors associated with the infection. For this, we collected 102 blood samples and 98 fecal samples from 102 cats from Goiânia, State of Goiás. The animals were divided into groups according to age, gender and free access to the street or not. Indirect hemagglutination test was performed to determine the level of anti-T. gondii and indirect ELISA for the detection of infection by feline immunodeficiency virus (FIV). For search and detection of T. gondii oocysts elimination in the feces of cats we performed a centrifugal-flotation with Sheather's solution, subsequently we extracted DNA and used conventional PCR. The results showed that 18.63% (19/102) of the cats were positive for T. gondii, with titers ranging from 1:32 to 1: 8.192, while none of the fecal samples were positive in the PCR. The frequency of positive animals for FIV was 55.91% (52/93), and 18.28% (17/93) presented coinfection. By multivariate logistic regression we found the associated factors were the same for both infections, but one did not interfere with another. The factors associated with infection by T. gondii and feline immunodeficiency virus were free life and age under six months, since the sex was not statistically related to any of the illnesses. / A toxoplasmose é uma zoonose na qual, mamíferos e aves podem participar do seu ciclo como hospedeiros intermediários e os felídeos como hospedeiros definitivos. O Felis catus é reconhecido como o principal responsável pela contaminação ambiental por oocistos de Toxoplasma gondii. O diagnóstico sorológico pouco revela sobre a eliminação de tal fase no ambiente, o que representa o real impacto daquela espécie na Saúde Pública frente à toxoplasmose. São escassos os dados da frequência da toxoplasmose felina no Estado de Goiás. Assim sendo, objetivou-se com esta pesquisa avaliar a frequência da infecção da toxoplasmose em gatos domésticos e o seu potencial papel na sua transmissão, através da eliminação de oocistos no ambiente e dos respectivos fatores associados à infecção. Para isto, foram coletadas 102 amostras de sangue e 98 amostras fecais, de 102 gatos provenientes de Goiânia-Goiás. Os animais foram divididos em grupos de acordo com a faixa etária, gênero e livre acesso à rua ou não. Foi realizada a hemaglutinção indireta para a determinação do nível de anticorpos anti-T. gondii e o ELISA indireto para a detecção da infecção pelo vírus da imunodeficiência felina (FIV). Para a pesquisa e detecção da eliminação de oocistos de T. gondii nas fezes dos gatos foi feita a centrifugo-flutuação em solução de Sheather, posterior extração de DNA e realização da PCR convencional. Os resultados revelaram que 18,63% (19/102) dos gatos foram positivos para o T. gondii, com títulos variando entre 1:32 a 1:8.192, sendo que nenhuma das amostras fecais foi positiva na PCR. A frequência de positivos para o FIV foi de 55,91% (52/93), com coinfecção de 18,28% (17/93). Com a regressão logística multivariada verificou-se que os fatores associados foram os mesmos para as duas infecções, porém uma não interferiu diretamente na outra. Os fatores associados para a infecção pelo T. gondii e pelo vírus da imunodeficiência felina foram a vida livre e a idade igual ou superior a seis meses, já o gênero não apresentou relação estatística com nenhuma das enfermidades.

A serinoprotease Pic é uma proteína autotransportadora que apresenta papel importante na colonização da mucosa intestinal por E. coli enteroagregativa (EAEC). Uma cepa de E. coli enteropatogênica atípicas (aEPEC) albergando o gene pic foi detectada em um estudo prévio. O presente estudo teve como objetivo caracterizar a proteína Pic produzida por essa cepa de aEPEC (BA589). O gene pic em BA589 está presente em um plasmídeo de alto peso molecular (~98 kb) e o sequenciamento desse gene mostrou identidade de 99% com pic de EAEC 042. Pic da cepa BA589 (Pic589) foi capaz de clivar mucina bovina, hemaglutinar eritrócitos de coelho e clivar moléculas das três vias sistema complemento. O mutante BA589Dpic todas essas atividades in vitro. A cepa selvagem foi capaz de colonizar o intestino de camundongos tratados com estreptomicina, o que não foi observado com o mutante BA589Dpic. Desta forma, a serinoprotease Pic representa um fator de virulência adicional na cepa de aEPEC BA589, relacionada às etapas de adesão, colonização e evasão do sistema imune inato. / The serine protease Pic is an autotransporter protein that plays an important role in the colonization of the intestinal mucosa by enteroaggregative E. coli (EAEC). An atypical enteropathogenic E. coli (aEPEC) strain harboring the pic gene has been detected in a previous study. The present study aimed to characterize the protein Pic produced by that aEPEC strain (BA589). In BA589 pic is located in a high molecular weight plasmid (~98 kb), and sequencing of this gene showed 99% identity with pic from EAEC 042. Pic from BA589 (Pic589) was able to cleave bovine mucin, hemagglutinate rabbit erythrocytes and cleave molecules of the three complement system pathways. The mutant BA589Dpic lost all these capacities. The wild type strain was able to colonize the intestine of streptomycin treated mice, which was not observed with the mutant BA589Dpic. Thus, the serine protease Pic represents an additional virulence factor in aEPEC strain BA589, associated with adherence, colonization and evasion of innate immune system.

Neste trabalho foi feito uma investigação sorológica em moradores na região amazônica e moradores rurais do sudeste brasileiro, através do teste de inibição da hemaglutinação (HI) para a cepa vacinal da Febre Amarela mais 17 sorotipos diferentes de arbovírus, sendo quatro do gênero Alphavirus (ALP), nove do gênero Flavivirus (FLA) e cinco do gênero Orthobunyavirus (ORT), para verificar qual desses vírus estão circulando nessas regiões. Os resultados do HI foram divididos em quatro áreas: na cidade Machadinho dOeste (Rondônia) (N=285) tivemos para ALP=50 (17,54%), FLA=270 (94,74%), ORT=58 (20,35%) e negativos (NEG)=12 (4,20%). Nas pessoas que moram ao longo do Rio Machado (Rondônia) (N=343) tivemos ALP=99 (28,86%), FLA=229 (66,76%), ORT=41 (11,95%) e NEG=93 (27,10%). Na cidade Teodoro Sampaio (São Paulo) (N=78) tivemos FLA=55 (70,51%) e NEG=23 (29,5%). Na cidade Jacupiranga (São Paulo) (N=149) tivemos ALP=7 (4,7%), FLA=50 (33,56%), ORT=20 (13,42%) e NEG=84 (56,4%). Concluímos que os resultados obtidos sugerem a circulação desses vírus nas regiões estudadas. / In this work we performed a serological investigation in residents of Amazon region and country people who lives in Southeastern of Brazil, by hemagglutination inhibition (HI) for Yellow fever vaccine and 17 different serotype of arboviruses: four from the genus Alphavirus (ALP), nine from the genus Flavivirus (FLA), and five from the genus Orthobunyavirus (ORT), to try to ascertain which of these arboviruses are circulating in these areas. The results of HI were divided into four areas: In Machadinho dOeste city (Rondônia) (N=285) we had to ALP=50 (17,54%), FLA=270 (94,74%), ORT=58 (20,35%) and negatives (NEG)=12 (4,20%). In people who live along the Machado River (Rondônia) (N=343) we had to ALP=99 (28,86%), FLA=229 (66,76%), ORT=41 (11,95%) and NEG=93 (27,10%). In Teodoro Sampaio City (São Paulo) (N=78) we had to FLA=55 (70,51%) and NEG=23 (29,5%). In Jacupiranga City (São Paulo) (N=149) we had to ALP=7 (4,70%), FLA=50 (33,56%), ORT=20 (13,42%) and NEG=84 (56,4%). In conclusion, the obtained data suggest the circulation of these viruses in these regions.