Este estudo, que envolveu todos os doadores de sangue (25.891) que compareceram pela primeira vez ao Hemocentro de Ribeirão Preto, de junho de 1996 a junho de 2001, teve os seguintes objetivos: 1) Estudar a positividade de marcadores sorológicos das hepatites B e C em testes da triagem dos doadores. 2) Analisar o fluxo dos doadores positivos para os marcadores das hepatites B e C ao Ambulatório de Hepatites (AH) do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto. 3) Estimar a prevalência de infecção atual ou pregressa pelos vírus das hepatites B e C entre os doadores, através da análise dos resultados de testes confirmatórios para essas doenças. 4) Avaliar a importância da determinação da transaminase glutâmico-pirúvica (TGP) como marcador indireto de infecção pelos vírus das hepatites B e/ou C. Foram levantados dados registrados no Hemocentro, no Núcleo de Vigilância Epidemiológica (NVE) e no AH, coletando-se informações referentes ao doador, ao tipo de doação e ao resultado de teste da triagem sorológica (HBsAg, anti-HBc, anti-HCV, TGP, anti-HIV, anti-HTLV, doença de Chagas e sífilis). Foram estudados ainda: os resultados dos testes de repetição – realizados no Hemocentro – dos doadores positivos para os marcadores das hepatites B e C na triagem sorológica; o comparecimento ao NVE; e a confirmação, no AH, dos resultados para esses marcadores. A população dos doadores foi composta majoritariamente por homens (83,6%) e indivíduos de 26 a 45 anos de idade (64,0%). Predominaram as doações vinculadas (85,4%), e as maiores motivações foram solicitação e estímulo familiar ou de amigos. Os valores da prevalência, nos testes da triagem sorológica, foram iguais a 0,63% (IC95%: 0,54 – 0,72), para o HBsAg e 1,15% (IC95%: 1,02 – 1,28), para o anti-HCV. O total de doadores positivos que deveriam ser avaliados no AH, sofreu uma perda de 55,5% entre os suspeitos de ter hepatite B e de 58,7% entre os suspeitos de ter hepatite C, totalizando 266 doadores perdidos quanto ao acompanhamento. Os valores da prevalência, nos testes confirmatórios, foram iguais a 0,22% (IC95%: 0,16 – 0,28), para a hepatite B, e 0,31% (IC95%: 0,24 – 0,38), para a hepatite C. As co-positividades entre os valores de TGP e os marcadores de hepatites, nos testes de triagem sorológica, foram de 8,8%, para o vírus C, e de 0,5%, para o vírus B, indicando que a determinação dessa enzima não auxilia na seleção de doadores em bancos de sangue. / This study, which involved all blood donors (25.891) that attended the Blood Center of Ribeirão Preto for the first time from June 1996 to June 2001 had the following objectives: 1) To study the positiveness for hepatitis B and C serologic markers in donors screening tests. 2) To analyze the flow of positive donors for hepatitis B and C markers to the Hepatitis Ambulatory (HA) in the Clinical Hospital of the Faculty of Medicine of Ribeirão Preto of the University of São Paulo. 3) To estimate the predominance of present or former infection by hepatitis B and C viruses among donors, by analyzing results of screening tests that confirm these diseases. 4) To evaluate the importance of determining the glutamic-piruvic transaminase (GTP) as an indirect marker of infection by hepatitis B and C viruses. Registered data from the Blood Center as well as from the Epidemiological Surveillance Nucleus (ESN) and HA were used with the purpose of collecting information about donors, type of donation and results in serologic screening tests (HBsAg, anti-HBc, anti-HCV, GTP, anti-HIV, anti-HTLV, Chagas disease and syphilis). In addition, a study was performed on the results in repetition tests – that took place in the Blood Center – of positive donors for hepatitis B and C markers in serologic tests as well as on their attendance at the ESN and the confirmation in the HA of the results for these markers. The population of donors was composed in its majority by men (83,6%) and individuals from 26 to 45 year-old (64,0%). Linked donations predominated (85,4%), and the greatest reasons for donation arose from solicitation and stimulus coming from family and friends. The value of prevalence in serologic screening tests was 0,63% (IC95%: 0,54 – 0,72) for HBsAg and 1,15% (IC95%: 1,02 – 1,28) for anti-HCV. The total of positive donors that should have been evaluated in the HA suffered a loss of 55,5% among the suspects of having hepatitis B and of 58,7% among the suspects of having hepatitis C, reaching a total of 266 donors lost during follow-up. The value of prevalence in confirmatory tests was 0,22% (IC95%: 0,16 – 0,28) for hepatitis B and 0,31% (IC95%: 0,24 – 0,38) for hepatitis C. The copositiveness between GPT and hepatitis markers in serologic screening tests was 8.8% for hepatitis C virus and 0.5% for hepatitis B virus, indicating that determination of this enzyme is not helpful in selection of donors in blood banks.

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-12-03T16:23:50Z No. of bitstreams: 1 camille-brandao.pdf: 2860228 bytes, checksum: 83c9dbffefc606b192592b1683efd604 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-03T16:23:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 camille-brandao.pdf: 2860228 bytes, checksum: 83c9dbffefc606b192592b1683efd604 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / O presente estudo visa à adaptação de ensaios imunoenzimáticos comerciais de diagnóstico da hepatite C para uso em amostras de sangue coletado em papel de filtro (SCPF). Foram coletadas amostras pareadas de soro e SCPF de 411 indivíduos com média de idade de 40 anos, provenientes de banco de sangue e três unidades de saúde. As amostras foram submetidas a dois ensaios imunoenzimáticos (EIEs) para detecção de anticorpos anti-HCV: HCV Ab, Radim (Itália) e ETI-AB-HCVK-4, DiaSorin (Itália); e a dois EIEs para detecção simultânea de antígeno core do HCV e anticorpos anti-HCV, Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA, Bio-Rad (França) e Murex HCV Ag/Ab Combination, Abbott (África do Sul). A detecção de anti-HCV e simultânea de antígeno e anticorpos anti-HCV em amostras de soro foi feita conforme recomendações dos fabricantes, e em SCPF foram avaliados os parâmetros, tampão de eluição, volumes de amostra, de diluente de amostra e de conjugado, tempo de incubação da amostra e valor do ponto de corte (PC). Após otimização desses parâmetros foram determinados os valores de sensibilidade (S), especificidade (E), concordância (valor de kappa), limite de detecção do teste, valores preditivos positivo (VPP) e negativo (VPN), precisão intraensaio e interensaio. A estabilidade das amostras de SCPF foi avaliada em diferentes condições ambientais (22-26ºC, 2-8°C e -20°C). Como resultado, o tampão PBS/BSA 0,5% foi selecionado para eluição das amostras de SCPF e estabelecido um aumento no volume de amostra para todos os fabricantes. Os tempos de incubação e os volumes de conjugado seguiram a recomendação dos fabricantes. Para o EIE HCV Ab os valores determinados foram S = 97,50%, E = 99,46%, kappa (k)= 0,959, VPP = 64,59% e VPN = 99,97%, para uma prevalência de doença de 1% na população. Para o EIE ETI-AB-HCVK-4, o PC foi estabelecido pela curva ROCe observou-se S = 88,89%, E = 98,89%, k= 0,875, VPP = 44,71% e VPN = 99,89%. O PC do EIE Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA foi obtido pela curva ROCe verificou-se S = 95,12%, E =100%, k= 0,959, VPP = 100% e VPN = 99,95%. O PC para o EIE Murex HCV Ag/Ab Combinationfoi determinado pela média dos valores de densidade ótica (D.O.) das amostras de SCPF correspondentes àquelas de soro negativas no teste, acrescido de três desvios padrão proporcionando S = 78,05%, E = 99,43%, k= 0,838, VPP = 58,04% e VPN = 99,78%. O limite de detecção mostrou reatividade até a diluição de 1/10.000 para EIE HCV Ab e EIE ETI-AB-HCVK-4 e até 1/1.000 com EIE Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA e EIE Murex HCV Ag/Ab Combination. Os resultados das amostras de SCPF obtiveram erro total inferior a 17% e as mesmas mantiveram-se estáveis nas diferentes condições de armazenamento por 60 dias. Os resultados obtidosnos EIE HCV ab e EIE Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA mostraram-se mais concordantes com os observados com as amostras de soro, indicando melhor desempenho desses ensaios em amostras de SCPF. / The present study aims at adaptation of commercial enzyme immunoasssays for diagnosis of hepatitis C to be used with dried blood spots (DBS). Paired serum and DBS samples from 411 individuals with mean age of 40 years, were collected at Blood Center and three out patient units. Samples were tested for the detection of anti-HCV antibodies by using two enzyme immunoassays (EIAs): HCV Ab, Radim (Italy) and ETI-AB-HCVK-4, DiaSorin (Italy); and two EIAs for the simultaneous detection of hepatites C virus (HCV) core antigen and anti-HCV antibodies: Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA, Bio-Rad (France) and Murex HCV Ag/Ab Combination, Abbott (South Africa). Anti-HCV detection and simultaneous detection of HCV core antigen and anti-HCV antibodies in serum sample were perfomed according to the manufacture’s recommendations. In DBS samples parameters such as elution buffer, sample, diluent, and conjugate volumes, incubation period, and cut off (CO) values were evaluated. After optimization of these parameters, values of sensitivity, specificity, inter-rater agreement (kappa value), detection limit, intra- and inter-assay precision were determinated. Stability of DBS samples was investigated in different conditions (22-26ºC, 2-8°C e -20°C). As results, PBS/BSA 0,5% buffer was chosen as elution buffer in DBS samples and an increased volume of the samples in all EIAs was established. Incubation duration and volume of conjugate were in accordance with manufacturer’s recommendations. With EIA HCV Ab values sensitivity of 97,50%, specificity 99,46%, inter-rate agreement 0,959, positive predictive value 64,59%, and negative predictive value (1% of disease prevalence) 99,97% were observed. For the EIA ETI-AB-HCVK-4 best cut-off values were obtained from ROC curve and observed values were sensitivity 88,89%, specificity 98,89%, inter-rate agreement 0,875, positive predictive value 44,71%, and negative predictive value 99,89%. For the EIA Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA best cut-off values were obtained from ROC curve with sensitivity of 95,12%, specificity 100%, inter-rate agreement 0,959, positive predictive value 100%, and negative predictive value 99,95%. For the EIA Murex HCV Ag/Ab Combination best cut-off values were obtained by calculating the average of optical density of DBS samples correspondent to those with negative results in serum plus three standard deviations, resulting in a sensitivity of 78,05%, specificity of 99,43%, inter-rate agreement of 0,838, positive predictive value of 58,04%, and a negative predictive value of 99,78%. The lower limit of HCV Ab and ETI-AB-HCVK-4 tests in DBS was 1/10.000, and for Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA and Murex HCV Ag/Ab Combination was 1/1.000. Total error of DBS results was below 17% and all DBS samples maintained stable in all storage conditions for 60 days. Results obtained with EIE HCV Ab and EIA Monolisa TM HCV Ag-Ab ULTRA were found to be more concordant with those observed for serum samples, indicating a better performance of theses assays inDBS samples.

Submitted by Gentil Jeorgina (jeorgina@icict.fiocruz.br) on 2013-01-15T12:43:20Z No. of bitstreams: 1 dissetacao BIANCA final-final-corrpag1.pdf: 935941 bytes, checksum: a43e303f3c10c6fe498fdbee5e020e51 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-15T12:43:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissetacao BIANCA final-final-corrpag1.pdf: 935941 bytes, checksum: a43e303f3c10c6fe498fdbee5e020e51 (MD5) Previous issue date: 2011 / Este trabalho analisa a percepção médica a respeito dos efeitos gerados pela apropriação, por parte dos pacientes, das informações em saúde disponíveis na Internet. Nosso foco analítico privilegia seu impacto na relação médico-paciente, entendida como uma relação terapêutica. Desse modo, escolhemos como objeto de estudo o cuidado médico aos portadores de hepatite C. Mais especificamente, os aspectos comunicacionais presentes na interação, necessariamente prolongada, entre o médico hepatologista - ramo da clínica que estuda e trata as patologias do fígado - e seus pacientes portadores do VHC, vírus da hepatite C. Nos filiamos às abordagens sobre a assistência aos doentes crônicos que têm valorizado o papel do doente como ator, tanto na construção negociada da definição da doença (seu diagnóstico), quanto na organização social do tratamento. Essa visão é mais sensível à existência de diferentes tipos de médicos e pacientes que estabelecem interações diversas e não um modelo único de relação. Fatores como a especialidade do médico, o status sócioeconômico do paciente e seu nível de instrução, a situação institucional da consulta, isto é, se ocorre na clínica privada, se é mediada por planos de saúde, ou se acontece no sistema público, resultam em interações muito distintas. Por isso, os impactos da Internet, como um instrumento de mediação na relação médico-paciente, precisam ser qualificados em termos de cada tipo de doença, das práticas terapêuticas disponíveis e dos contextos sociais e institucionais em que ocorre. Nossa pesquisa empírica baseou-se em estudo qualitativo, a partir de entrevistas individuais semi-estruturadas em profundidade com nove hepatologistas, sete que atuam na da rede pública e privada e dois que atuam na rede privada, mas que tiveram experiência anterior de mais de vinte anos em hospitais de referencia em Hepatologia do SUS. O caráter crônico da hepatite C, as formas de tratamento, o monitoramento dos efeitos colaterais e dos riscos letais que lhe são inerentes, formam circunstâncias que, tal como acontece com outras morbidades crônicas, permitem aos doentes portadores do VHC um envolvimento emocional e cognitivo prolongado com essa moléstia. Isso explica o aparecimento de grupos de apoio e redes sociais que se organizam em torno de pautas comuns aos enfermos, reivindicando a ampliação da assistência médica e dos recursos terapêuticos junto ao Estado. No discurso dos hepatologistas sobre os principais problemas relacionados aos usos das informações em saúde na Internet, destacamos: a) o paciente não consegue filtrar as informações genéricas e tem dificuldade de entender que os dados encontrados podem não refletir sua situação de saúde; b) eles nem sempre conseguem reconhecer as fontes de informações confiáveis, distinguindo a boa informação da ruim e/ou sem veracidade, ou distorcida; c) o paciente nem sempre consegue entender o que leu, ou extrair da informação o que lhe convém. Algumas vezes, valoriza os aspectos negativos da informação; d) O paciente nem sempre tem estrutura psicológica para lidar com o conteúdo a que teve acesso. / This paper examines the medical perspective on the effects generated by the appropriation, by patients, of health information available on the Internet. Our analytical focus emphasizes its impact on doctor-patient relationship, understood as a therapeutic relationship. Thus, we chose as object of study the medical care to patients with hepatitis C. More specifically, the communicational aspect present in the interaction necessarily prolonged, between the hepatologist – the branch of medicine specialized on the liver study and treatment - and their patients with HCV, hepatitis C virus. We join the approaches on the care for chronically ill persons who have praised the patient role as an actor, both in the negotiated construction of the disease definition (diagnosis) and in the social organization of the treatment. This vision is more sensitive to the existence of different types of physicians and patients that establish different interactions and not a single model of relationship. Factors such as the physician's specialty, the socioeconomic status of the patient and their education, as well as the institutional status of the medical consultation - meaning if it occurs in a private practice, whether it is mediated by health insurance, or if it happens in the public health system, results in very different interactions. Therefore, the impact of the Internet, as a mediation instrument in the doctor-patient relationship, must be qualified in terms of each disease, medical treatments available and the social and institutional contexts in which it occurs. Our empirical research was based on qualitative study, from in-depth semi-structured individual interviews with nine hepatologists - seven of them working in the public and private sectors and the other two only in the private sector, but with previous experience of over twenty years in Hepatology reference hospitals in the Brazilian Health System (SUS – Portuguese acronym). The chronic nature of hepatitis C, the treatment forms, the monitoring of side effects and lethal risks related sets circumstances which, such as on other chronic morbidities, allow to HCV patients an extended emotional and cognitive involvement with this disease. This explains the emergence of support groups and social networks that are organized around common agendas for the sick, claiming the expansion of medical care and therapeutical resources within the State. The hepatologists discourse on the main issues related to the uses of health information in the Internet, include: a) the patient can not filter generic information and may not understand that the findings does not necessarily reflect their state of health, b) they can not always recognize the reliable sources of information, distinguishing good information from bad and / or no truthful, or distorted information; c) the patient can not always understand what was read or extract relevant information. Sometimes, the negative information is valued; d) the patient does not always have psychological profile to deal with the content accessed.

Made available in DSpace on 2016-04-07T13:16:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 523.pdf: 12385357 bytes, checksum: 83bdf7d32305930d6101aa4695428a19 (MD5) 2011sousa-rcv.pdf: 12385357 bytes, checksum: 83bdf7d32305930d6101aa4695428a19 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A infecção pelo Vírus da Hepatite A (HAV) ainda acomete milhões de pessoas em todo o mundo, causando uma doença que pode variar desde um quadro assintomático até casos mais severos. Apesar da existência de vacinas comerciais, produzidas a partir do vírus inativado ou atenuado, elas ainda não estão disponíveis para grande parte da população mundial, em virtude do seu alto custo. Uma alternativa atraente consiste na pesquisa e desenvolvimento de vacinas de DNA, que potencialmente apresentam algumas vantagens em relação a vacinas convencionais como a maior estabilidade, maior segurança e possibilidade de serem produzidas com um menor custo final. Neste trabalho foi realizada a construção, otimização e avaliação da expressão de protótipos vacinais recombinantes, visando o desenvolvimento de uma vacina de DNA contra o HAV. O segmento traduzível do genoma do HAV é composto por: região P1, formada pelas proteínas estruturais VP1, VP2, VP3 e VP4; região P2, da qual fazem parte a proteína 2A (que funciona como primeiro sinal para a montagem do capsídeo) e as proteínas 2B e 2C (as quais participam do processo de replicação do RNA viral); região P3, onde encontram-se a protease 3C (responsável pelo processamento de todas as proteínas estruturais e não-estruturais) e a RNA polimerase 3D. A sequência vacinal foi gerada a partir dos genes das proteínas estruturais, e da protease 3C viral, sendo denominada de poliproteína truncada (HAV-PTRUNC). Esta sequência foi otimizada e também fusionada a região N-terminal da Proteína de Associação à Membrana Lisossomal (LAMP), com o objetivo de promover a secreção dos antígenos virais, gerando a construção N-LAMP_HAV-PTRUNC. Para a detecção da expressão de HAVPTRUNC e N-LAMP_HAV-PTRUNC, as proteínas individuais VP1, VP3 e 3C foram produzidas em bactérias e utilizadas para imunizar coelhos, para a obtenção de anticorpos policlonais específicos contra as mesmas. Os anticorpos obtidos foram capazes de reconhecer não só as respectivas proteínas recombinantes, como também as proteínas nativas do vírus e N-LAMP_HAV-PTRUNC. De acordo com os resultados obtidos, pretendemos dar continuidade aos nossos estudos através de ensaios clínicos, no intuito de produzir a primeira vacina de DNA contra HAV regulamentada para uso em humanos

Made available in DSpace on 2016-04-15T12:56:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 andreza_lemos_ioc_mest_2015.pdf: 1714555 bytes, checksum: a683996b02f1dbaeeafe27e913348f54 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / O vírus da hepatite E (HEV) é responsável por infecções, em geral, agudas e autolimitantes. No entanto, quando se trata de pacientes imunossuprimidos, a infecção por este vírus pode levar a quadros crônicos e persistentes. Entre os pacientes imunossuprimidos, destacam-se os pacientes HIV positivos \2013 uma população consideravelmente grande, sobre a qual há poucos estudos relacionando a coinfecção HEV/HIV. A hepatite E pode ser causada pelos genótipos 1, 2, 3 e 4 em humanos. O genótipo 3 (HEV-GT3) deve ser destacado por ser tanto o único genótipo circulante relatado no Brasil quanto por ser o que acomete pacientes HIV positivos, levando à cronicidade da doença. Portanto, devido à carência de informações e dados sobre estes pacientes coinfectados e sobre o perfil da hepatite E no Brasil, principalmente devido às dificuldades no diagnóstico, o trabalho buscou aperfeiçoar a técnica de detecção de RT-qPCR e determinar a prevalência da coinfecção HEV/HIV em pacientes do Hospital Universitário Gaffre e Guinle, no Rio de Janeiro para melhor compreensão da coinfecção nesta população Para tanto, 280 amostras de soro sabidamente positivas para HIV foram coletadas entre os anos de 2012 e 2014, extraídas e testadas por RT-qPCR aperfeiçoado com curva sintética de dsDNA e, posteriormente, com curva sintética de ssRNA, para detecção da ORF3, e controle interno (IPC) para confirmação da coinfecção. As 10 amostras positivas na PCR em tempo real foram testadas em triplicata e por PCR convencional para sequenciamento das regiões das ORFs 1 e 2 e para detecção sorológica de anticorpos anti-HEV IgM e IgG. Porém nenhuma foi positiva para detecção por PCR convencional nem por sorologia, devido a baixa carga viral e ausência de anticorpos anti=HEV IgG e IgM. Nos pacientes em que foi detectado o HEV-RNA, foi observada uma taxa de CD4 e CD8 menores que 1038 e 1254, respectivamente, porém, ainda consideradas normais para indivíduos infectados pelo HIV. A PCR em tempo real foi útil para a detecção de coinfecção HEV/HIV em pacientes com baixa carga viral / The hepatitis E virus (HEV) is generally responsible for acute self - limiting infections. However, when it comes to immunocompromised patients the HEV infecti on may lead to chronic and persistent diseases. Among immunosuppressed patients, the HIV positive patients are highlighted – a considerably large population, on which there are few studies relating to H EV/HIV coinfection. Hepatitis E can be caused by genot ypes 1, 2, 3 and 4 in humans. The genotype 3 of HEV (HEV - G T 3) must be emphasized by being both the only reported circulating genotype in Brazil and the responsible for chronic disease in HIV positive patients. Therefore, due to lack of information and data on these co - infected patients and the profile of hepatitis E in Brazil, mainly due to difficulties in diagnosis of hepatitis E, the study aimed at the optimization of RT - qPCR detection technique and the determination of HEV/HIV co - infection prevalence on patients from the Gaffrée & Guinle Hospital, in Rio de Janeiro, for a better comprehension of this coinfection in this population in Rio de Janeiro city. For that, 280 known HIV positive serum samples were collected between 2012 and 2014, the nucleic acid was purified and tested by RT - qPCR technique which was optimized with a synthetic dsDNA standard curve and, later a synthetic ssRNA standard curve, for detection of HEV - RNA ORF3, and internal positive control (IPC) for the co - infection confirmation. The 10 HEV/HIV positive samples for RT - qPCR were tested in triplicate and for qualitative PCR for ORFs 1 and 2 regions detection and to antibodies anti - HEV IgM and IgG serological detection, but none was positive for either qualitative PCR or serological tests d ue to low viral titers in serum and lack of antibodies anti - HEV IgM and IgG . In patients which were positive for HEV - RNA detection, it was observed a CD4 and CD8 rates lower than 1038 and 1254, respectively , but still considered normal foi HIV positive peo ple . The real time PCR was useful for HEV/HIV coinfection detection in patients with low viral rates. / The hepatitis E virus (HEV) is generally responsible for acute self-limiting infections. However, when it comes to immunocompromised patients the HEV infection may lead to chronic and persistent diseases. Among immunosuppressed patients, the HIV positive patients are highlighted \2013 a considerably large population, on which there are few studies relating to HEV/HIV coinfection. Hepatitis E can be caused by genotypes 1, 2, 3 and 4 in humans. The genotype 3 of HEV (HEV-GT3) must be emphasized by being both the only reported circulating genotype in Brazil and the responsible for chronic disease in HIV positive patients. Therefore, due to lack of information and data on these co-infected patients and the profile of hepatitis E in Brazil, mainly due to difficulties in diagnosis of hepatitis E, the study aimed at the optimization of RT-qPCR detection technique and the determination of HEV/HIV co-infection prevalence on patients from the Gaffrée & Guinle Hospital, in Rio de Janeiro, for a better comprehension of this coinfection in this population in Rio de Janeiro city For that, 280 known HIV positive serum samples were collected between 2012 and 2014, the nucleic acid was purified and tested by RT-qPCR technique which was optimized with a synthetic dsDNA standard curve and, later a synthetic ssRNA standard curve, for detection of HEV-RNA ORF3, and internal positive control (IPC) for the co-infection confirmation. The 10 HEV/HIV positive samples for RT-qPCR were tested in triplicate and for qualitative PCR for ORFs 1 and 2 regions detection and to antibodies anti-HEV IgM and IgG serological detection, but none was positive for either qualitative PCR or serological tests due to low viral titers in serum and lack of antibodies anti-HEV IgM and IgG. In patients which were positive for HEV-RNA detection, it was observed a CD4 and CD8 rates lower than 1038 and 1254, respectively, but still considered normal foi HIV positive people. The real time PCR was useful for HEV/HIV coinfection detection in patients with low viral rates

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-14Bitstream added on 2014-06-13T18:31:21Z : No. of bitstreams: 1 yamasaki_lht_me_sjrp.pdf: 6194517 bytes, checksum: 350d37acd1e46ef2885eecc1354a317c (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A infecção pelo vírus da Hepatite C (HCV) é considerada um grande problema de saúde pública, desde a sua descoberta em 1989. Entretanto a terapia mais utilizada atualmente, baseada no uso de Peginterferon, tem sucesso em aproximadamente 50% dos pacientes com o genótipo 1. Embora os mecanismos envolvidos nesta resistência viral ainda não sejam esclarecidos, sugere-se que fatores virais e do hospedeiro participam deste. A proteína não-estrutural 5A (NS5A) está envolvida em diversos processos celulares e é um componente essencial para o HCV. Entretanto, sua estrutura e função ainda não foram bem elucidadas. A partir destes fatos, os objetivos do presente estudo foram elaborar um modelo teórico da NS5A e investigar as propriedades estruturais e funcionais in silico. Foram analisadas 345 sequências da proteína NS5A do HCV de 23 pacientes infectados com o genótipo 1 ou 3. As composições de aminoácidos e de estrutura secundária demonstraram que há diferença entre os genótipos, podendo indicar que há diferenças nas interações proteína-proteína entre os genótipos, o que pode estar relacionado com a diferença da taxa de resistência ao tratamento. A análise funcional foi realizada com o ProtFun, que sugeriu que a NS5A estaria envolvida nas funções celulares de metabolismo intermediário central, tradução, crescimento, tranporte, ligação e hormônio. Estas funções variaram entre os domínios, suportando a hipótese de que a NS5A é uma proteína multifuncional. A análise pelo PROSITE indicou vários sítios de glicosilação, fosforilação e miristoilação, que são altamente conservados e podem ter função importante na estabilização da estrutura e função, sendo assim possíveis alvos de novos antivirais. Alguns deles estão em regiões relacionadas com a resposta ao tratamento. Outro... / Hepatitis C virus (HCV) infects almost 3% of people worldwide and it is considered the main cause of liver chronic diseases and transplants. Until today, there is no effective vaccine and the current most used therapy, based on Peginterferon, is successful only in 50% of patients infected by genotype 1. Although the outcomes of this treatment resistance are unclear, it is suggested host and virus factors may participate in this mechanism. Non-structural 5A (NS5A) protein is involved in several cellular and virus processes and it is a critical component of HCV. However, its structure and function are still uncertain. Regarding these facts, the present study attachments were to elaborate a model of the NS5A protein and to investigate NS5A structural and functional features, using in silico tools. It was analyzed 345 sequences of HCV NS5A protein from 23 patients infected by genotypes 1 or 3. Residues and secondary structure composition of all sequences demonstrated that there are differences between genotypes. It may indicate that there are differences in interactions between genotypes, which could be related with the distinct average of treatment resistance. In addition, among those that varied between genotypes, there were amino acids in regions that studies suggested as related with virus persistence. Functional analysis was performed with ProtFun. It suggested that NS5A is involved with central intermediary metabolism, translation, growth, transport, ligation and hormone functions in the cell. These functions vary between the domains, strengthening the hypothesis that NS5A is a multifunctional protein. Prosite motif search indicated that there are many glicosilation, fosforilation and myristoilation sites, which are highly conserved and may play an important role in structural stabilization and... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Maria Inês M. C. Pardini / Banca: Giovanni Faria Silva / Banca: Isabel Maria Vicente Guedes de Carvalho Mello / Resumo: A identificação dos diferentes genótipos e subtipos do VHC tem sido útil para o entendimento da evolução da doença e da epidemiologia do vírus em relação a fatores de risco. Atualmente, os métodos de genotipagem assim como a região do genoma viral a ser utilizada constituem temas de discussão. O presente trabalho teve por objetivo comparar a metodologia de hibridização reversa (kit comercial INNO-LiPAÒ v1.0) ao seqüenciamento direto das regiões 5'UTR, NS5B e core do genoma do VHC. Foram utilizadas 92 amostras de plasma de pacientes do Ambulatório de Hepatites da Disciplina de Gastroenterologia Clínica da Faculdade de Medicina de Botucatu (UNESP). Dentre as 92 amostras constituintes deste trabalho, 64 foram selecionadas aleatoriamente e 28 foram escolhidas segundo a genotipagem prévia realizada com o kit INNO-LiPAÒ v.1.0. Dentre estas 28 amostras escolhidas, 10 foram genotipadas como 1a/1b, 2 como 2, 2 como 5, 7 apenas como 1 e 7 foram inconclusivas para a genotipagem com o kit comercial. A genotipagem por seqüenciamento direto foi efetuada seguindo as etapas de: extração do RNA viral, transcrição reversa, amplificação das regiões 5'UTR, NS5B e 5'UTR-core por Nested-PCR, reação de marcação fluorescente e eletroforese em aparelho automático ABI 377 (Applied Biosystems). Todas as amostras puderam ser amplificadas para a região 5'UTR e 62 para NS5B. Para as 30 amostras que não puderam ser amplificadas para NS5B foi realizada a amplificação da região 5'UTR-core que se mostrou eficiente na amplificação de 28 (93%) das amostras. A análise de seqüência permitiu uma maior precisão na classificação viral. O seqüenciamento direto foi eficaz na solução de 100% dos resultados inconclusivos pela metodologia de hibridização reversa. Assim como já reportado na literatura o kit comercial INNO-LiPAÒ v.1.0 produziu resultados errôneos com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The HCV genotypes and subtypes identification has been useful to understand the disease evolution and viral epidemiological regarding risk factors. Recently, the genotyping methods and viral genomic region used in viral typing have been very discussed in scientific community. The goal of this study was to compare the reverse hybridization methodology and sequencing of the HCV genomic regions 5'UTR, NS5B and core. Ninety-two plasma sample with viral RNA detected from patients assisted in the Department of Internal Medicine - Gastroenterology Division, Botucatu Medical School, University of São Paulo State - UNESP were used in this study. From these 92 samples, 64 were randomly selected and 28 choose according genotyping result by reverse hybridization. The genotyping by reverse hybridization were performed with INNO-LiPAÒ v.1.0, according manufacturer's instructions. To genotyping by sequencing viral RNA isolated from plasma samples was used as a source for RT-PCR amplification and automatic sequencing in ABI 377 sequencer (Applied Biosystems). All samples were amplified to 5'UTR genomic region and 62 to NS5B. From 30 samples that showed insucess in NS5B amplification, 28 (93%) were amplified to 5'UTR-core region with efficiency. The genotyping by sequencing allowed more precision in viral classification. The sequencing showed efficient in the resolution of the 100% of cases inconclusive by reverse hybridization. The genotyping by INNOLiPA Ò v.1.0 showed wrong results in relation of viral subtyping, corroborating previous results of the scientific literature. The sequencing also demonstrated at least a change of viral genotype when compared with INNO-LiPAÒ v.1.0, result that could influence the therapeutic decision, turning questionable the INNO-LiPAÒ v.1.0 efficiency to determine the viral genotypes, too. / Mestre

Orientador: Ana Teresa de Abreu Ramos Cerqueira / Coorientador: Giovanni Faria Silva / Banca: Fernando Gomes Romeiro / Banca: Eliane Maria Fleury Seidl / Resumo: Introdução: Adesão ao tratamento refere-se a um comportamento ativo do paciente em relação à doença e ao tratamento compartilhando as decisões com o profissional de saúde. Considera-se a adesão um fenômeno resultante da interação de fatores de diferentes naturezas que afetam diretamente o comportamento do paciente: fatores relacionados ao indivíduo; fatores sociais, econômicos; fatores relacionados ao serviço de saúde e aos profissionais de saúde e ainda os fatores relacionados à doença e ao tratamento. Objetivo: Este estudo propõe-se a realizar uma revisão integrativa da literatura nacional e internacional sobre fatores associados à adesão ao tratamento da Hepatite C, com especial ênfase aos fatores psicológicos e sociais. Método: Foram estabelecidas as várias fases deste estudo, segundo o procedimento proposto: elaboração da pergunta de pesquisa, estabelecimento dos critérios para seleção da amostra, apresentação das características das pesquisas selecionadas, análise dos dados, interpretação dos resultados e a síntese da revisão. Realizou-se busca dos artigos nas bases de dados: Medline, Web of Science, Cinahl, Lilacs, Psycinfo, Scopus e Scielo. Foram incluídos artigos nos idiomas português, inglês e espanhol, publicados entre os anos 2000 a 2016 e excluídos os artigos que não foram considerados pertinentes ao objeto de estudo. Resultados: Obteve-se um corpus com 14 artigos, totalmente estrangeiro, publicado em inglês, nos anos de 2001 a 2015, majoritariamente indexados no... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The Schistosomiasis is a parasitic disease, severe, chronic waterborne and development, whose etiologic agent is Schistosoma mansoni. It occurs in 74 countries with 207 million people infected and 700 million in risky areas. In Brazil, data indicate a prevalence of eight million. The Schistosomiasis can be exacerbated when patients are carriers of the Hepatitis B Virus (HBV) and C (HCV), resulting in simultaneous evolution of both pathologies. In Brazil, the prevalence of co-infection with HBV/HCV and S. mansoni found in studies ranged from 13.6% to 40% for HBV and 0.5% to 19.66% for the HCV. On this basis, this research aimed to identify the prevalence of serological markers of HBV and HCV and risky factors in individuals carrying the S. mansoni in the Santa Maria neighborhood, Aracaju, state of Sergipe. We conducted a cross-sectional epidemiological study. Data were collected for each patient by means of a questionnaire investigation. This questionnaire included variables identifying the subject of the research participants and variables that included the epidemiological risky factors for infection with HBV or HCV. We collected serum samples of research participants and forwarded to the laboratory testing to identify serological markers of hepatitis B and C: Total Anti-HBc IgG, Anti-HBs, HBsAg and Anti-HCV. All procedures performed using the technique of chemiluminescence immunoassay using the ARCHITECT assay for each serological marker following the protocols established by the laboratory equipment manufacturer SYSTEM ARCHITECT. In addition, we carried out the analysis of spatial distribution of co-infection in the district through the program using the TerraView Kernel intensity estimation. It was found that 16 individuals had contact with HBV (9.41%), one of these was positive for HBsAg. Only Thirty-two samples (18.82%) were positive for the marker Anti-HBs. Three samples were positive for anti-HCV (1.76%), and also a positive for Anti-HBc. The main risks of HBV and HCV infection were related to parenteral interventions of health services, as well as sexual activity without condom use in the case of HBV. Spatial analysis of cases of co-infection (Schistosomiasis and Hepatitis) allowed the visualization of areas of higher concentration of these infections, as well as those that are exposed to different degrees of risk of transmission. The survey results allow to offer, the municipal health services, a tool to facilitate the understanding of the spatial distribution of schistosomiasis and hepatitis (B and C) in Santa Maria neighborhood. Although our values are above the estimated prevalence for the Brazilian population and the Northeast, we can t infer that the individuals with Schistosomiasis are more susceptible to infection with HBV or HCV, since the risky factors were the means of risky transmission of causative agents of hepatitis and not infected with S. mansoni. / A Esquistossomose Mansônica é uma doença parasitária grave, de veiculação hídrica e evolução crônica, cujo agente etiológico é o Schistosoma mansoni. Ocorre em 74 países, com 207 milhões de pessoas infectadas e 700 milhões em áreas de risco. No Brasil, dados indicam uma prevalência de oito milhões. A Esquistossomose pode ser agravada quando os pacientes são portadores dos Vírus das Hepatites B (VHB) e C (VHC), resultando na evolução simultânea de ambas as patologias. No Brasil, As prevalências da co-infecção VHB/VHC e S. mansoni encontradas nos estudos realizados variaram de 13,6% a 40% para o HBV e de 0,5% a 19,66% para o HCV. Com base nisso, esta pesquisa objetivou identificar a prevalência de marcadores sorológicos do VHB e VHC e os fatores de risco em indivíduos portadores do S. mansoni no Bairro Santa Maria, Aracaju/SE. Foi realizado um estudo epidemiológico do tipo transversal. Coletaram-se dados de cada paciente por meio de um questionário investigativo. Este questionário contemplou variáveis de identificação do sujeito participante da pesquisa e variáveis epidemiológicas que incluíram os fatores de risco para infecção pelo HBV ou HCV. Foram coletadas alíquotas de soro dos participantes da pesquisa e encaminhadas para a realização das análises laboratoriais para identificação de marcadores sorológicos dos Vírus das Hepatites B e C: Anti-HBc Total IgG, Anti-HBs, HBsAg e Anti-HCV. Todos os procedimentos realizados utilizaram a técnica de Imunoensaio Quimioluminescente através do Ensaio ARCHITECT para cada marcador sorológico seguindo os protocolos de análises laboratoriais estabelecidos pelo fabricante do equipamento ARCHITECT SYSTEM. Além disso, realizou-se a análise espacial da distribuição da co-infecção no bairro através do programa TerraView utilizando o estimador de intensidade Kernel. Constatou-se que 16 indivíduos tiveram contato com o HBV (9,41%), desses um foi positivo para HBsAg. Apenas Trinta e duas amostras (18,82%) foram positivas para o marcador Anti-HBs. Três amostras foram positivas para Anti-HCV (1,76%), sendo uma também positiva para Anti-HBc. Os principais riscos de infecção pelo HBV e HCV foram relacionados às intervenções parenterais dos serviços de saúde, assim como à atividade sexual sem uso de preservativo, no caso do HBV. A análise espacial dos casos de co-infecção (Esquistossomose e Hepatite) permitiu a visualização de áreas de maior concentração dessas infecções, assim como as que são expostas a diferentes graus de risco de transmissão. Os resultados da pesquisa possibilitam oferecer, aos serviços municipais de saúde, um instrumento que facilite a compreensão da distribuição espacial da Esquistossomose e Hepatites (B e C) no bairro Santa Maria. Embora nossos valores sejam acima da prevalência estimada para a população brasileira e da região nordeste, não podemos inferir que os indivíduos portadores da Esquistossomose são mais susceptíveis à infecção pelo HBV ou HCV, uma vez que, os fatores de risco foram as vias de risco de transmissão de agentes causadores de hepatite e não a infecção pelo S. mansoni.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2014-10-21T12:18:38Z No. of bitstreams: 3 Tese Karlla Antonieta Amorim Caetano - 2014.pdf: 3924004 bytes, checksum: d7ba7c1ee906d0c858ef16bd5981e6f6 (MD5) Anexos - Tese Karlla Antonieta Amorim Caetano - 2014.pdf: 6385883 bytes, checksum: fb90963b122614948d1d35bfe7554d6e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Rejected by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com), reason: Cássia, o nome do arquivo, segundo as instruções deve ser: : Dissertação - Maria Flores Silva - 2014”, “Tese - Maria Flores Silva - 2014. Você está esquecendo de colocar o traço após Tese ou Dissertação. Na citação está faltando a data final. ex. PIMENTEL, Tatiane Dias. Entre a televisão e a internet: o jornalismo e o exercício da cidadania. 2012. 150 f. Dissertação (Mestrado em Comunicação) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2012. on 2014-10-23T11:29:29Z (GMT) / Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2014-11-06T11:25:56Z No. of bitstreams: 3 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese Karlla Antonieta Amorim Caetano - 2014.pdf: 3924004 bytes, checksum: d7ba7c1ee906d0c858ef16bd5981e6f6 (MD5) Anexos - Tese Karlla Antonieta Amorim Caetano - 2014.pdf: 6385883 bytes, checksum: fb90963b122614948d1d35bfe7554d6e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-06T11:36:06Z (GMT) No. of bitstreams: 3 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese Karlla Antonieta Amorim Caetano - 2014.pdf: 3924004 bytes, checksum: d7ba7c1ee906d0c858ef16bd5981e6f6 (MD5) Anexos - Tese Karlla Antonieta Amorim Caetano - 2014.pdf: 6385883 bytes, checksum: fb90963b122614948d1d35bfe7554d6e (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-06T11:36:06Z (GMT). No. of bitstreams: 3 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Tese Karlla Antonieta Amorim Caetano - 2014.pdf: 3924004 bytes, checksum: d7ba7c1ee906d0c858ef16bd5981e6f6 (MD5) Anexos - Tese Karlla Antonieta Amorim Caetano - 2014.pdf: 6385883 bytes, checksum: fb90963b122614948d1d35bfe7554d6e (MD5) Previous issue date: 2014-07-22 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Estimates indicate a total of 240 million chronic hepatitis B carriers worldwide. In Brazil, rural settlements present adverse life conditions that favor the acquisition of health problems, such as the hepatitis B virus (HBV). The objective of the present study was to investigate the epidemiology of the infections caused by the hepatitis B and D viruses in people living in settlements in the southwest region of the state of Goiás. This is an observational, analytical, cross-sectional study, with a subsequent cohort of susceptible subjects for vaccination against HBV, assessment of adherence and vaccine response. In the period from May to July of 2011, 467 subjects were selected from seven settlements in the southwest of Goiás. All subjects were interviewed and tested for the detection of the serological markers HBsAg, anti-HBc and anti-HBs, by means of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Reactive HBsAg samples were tested for total anti-HDV and IgM, by means of the ELISA, submitted to the detection of the HBV DNA by semi-nested PCR and genotyped by sequencing. Chemiluminescent microparticle immunoassay was used for the quantitative determination of anti-HBs. The research proposal was approved by the Research Ethics Committee of the Federal University of Goiás. Of the total sample, 52.2% were men, 57.8% were married and 49% had less than five years of education. Most subjects were from cities in the midwest region (81.6%) and were older than 19 years of age (73.7%). Overall prevalence for infection by the HBV was 10.9% (51/467), being 0.8% (4/467) for HBsAg, 7.9% (37/467) for anti-HBc and anti- HBs, and 2.1% (10/467) for anti-HBc. Moreover, 19.3% of the people living in settlements presented isolated positivity for the anti-HBs marker, which indicates they were previously vaccinated against hepatitis B. The four reactive HBV DNA samples were classified as subgenotype A1 (3/4) and D3 (1/4). The male gender (adjusted OR: 2.65; p= 0.007), age (adjusted OR: 1.07; p= 0.000), history of transfusion (adjusted OR: 2.52; p= 0.025) and greater period of time living in the settlements (adjusted OR: 1.10; p= 0.026) were variables associated with the HBV. A total of 181 subjects susceptible to the infection started vaccine against hepatitis B, but only 106 (58.6%; 106/181) completed the vaccine scheme. Of these, it was possible to assess the vaccine response in 77 subjects, and 68.8% (53/77) presented protective titers of anti-HBs. Of those subjects living in the settlements who did not respond to the vaccine, a greater proportion was male, had more than 40 years and was smokers (p< 0.001). No subject presented positivity for the anti-HDV marker. The results of this study evidence the need for effective strategies to prevent hepatitis B in the studied settlements, emphasizing vaccine against hepatitis. In light of the low vaccine response against this infection in older subjects, more immunogenic schemes are suggested, so as to induce a protective vaccine response. / Estima-se em 240 milhões o número de portadores crônicos de hepatite B. No Brasil, as comunidades rurais de assentamentos apresentam condições de vida adversas que favorecem a aquisição de agravos, como do HBV. O objetivo do presente estudo foi investigar a epidemiologia das infecções pelos vírus das hepatites B e D em assentados do sudoeste de Goiás. Trata-se de um estudo observacional, analítico, de corte transversal, em que posteriormente foi formada uma coorte de indivíduos suscetíveis para a vacinação contra HBV, avaliação da adesão e resposta vacinal. No período de maio a julho de 2011, foram recrutados 467 indivíduos de sete assentamentos do sudoeste goiano. Todos foram entrevistados e testados para a detecção dos marcadores sorológicos HBsAg, anti- HBc e anti-HBs pelo ensaio imunoenzimático (ELISA). As amostras HBsAg reagentes foram testadas para o anti-HDV total e IgM, pelo ELISA, submetidas à detecção do HBV DNA por semi-nested PCR e genotipadas por sequenciamento. Para a determinação quantitativa do anti-HBs empregou-se o imunoensaio de micropartículas por quimioluminescência. O presente estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal de Goiás. Do total, 52,2% eram do sexo masculino, 57,8% casados e 49% possuía menos de cinco anos de estudo. A maioria era natural de municípios da Região Centro-Oeste (81,6%) e possuía mais de 19 anos de idade (73,7%). A prevalência global para a infecção pelo HBV foi de 10,9% (51/467), sendo 0,8% (4/467) para HBsAg, 7,9% (37/467) para anti-HBc e anti-HBs, e 2,1% (10/467) para anti-HBc. Também, 19,3% dos assentados apresentaram positividade isolada para o marcador anti-HBs, indicando vacinação prévia contra hepatite B. As quatro amostras HBV DNA reagentes foram classificadas como subgenótipo A1 (3/4) e D3 (1/4). Observou-se que sexo masculino (OR ajustado: 2,65; p= 0,007), idade (OR ajustado: 1,07; p= 0.000), história de transfusão (OR ajustado: 2,52; p= 0,025) e maior tempo de moradia nos assentamentos (OR ajustado: 1,10; p= 0,026) foram variáveis associadas ao HBV. Um total de 181 assentados suscetíveis à infecção iniciaram a vacinação contra hepatite B, mas apenas 106 (58,6%; 106/181) completaram o esquema vacinal. Desses, em 77 foi possível avaliar a resposta vacinal, sendo que 68,8% (53/77) apresentaram títulos protetores de anti-HBs. Verificou-se uma proporção maior de não respondedores nos assentados do sexo masculino, com mais de 40 anos e tabagistas (p< 0,001). Nenhum indivíduo apresentou positividade para o marcador anti-HDV. Os resultados evidenciam a necessidade de estratégias efetivas de prevenção da hepatite B nos assentamentos estudados, com ênfase na vacinação contra hepatite. Ainda, diante da baixa resposta vacinal contra esta infecção em indivíduos mais velhos, sugere-se esquemas mais imunogênicos, que induzam uma resposta vacinal protetora.