Made available in DSpace on 2014-12-02T11:16:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-18Bitstream added on 2014-12-02T11:21:11Z : No. of bitstreams: 1 000792594.pdf: 3227993 bytes, checksum: 9f387e067c18e8091c14edcc97728e4a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia para Inovação Farmacêutica (INCT-if) / O composto 5-(4-cloro-benzilideno)-3-(4-metil-benzil)-tiazolidina-2,4-diona (GQ- 2), novo fármaco da classe das tiazolidinadionas, apresenta atividade hipoglicemiante e reduz os níveis basais de insulina, glicose e leptina, associados com o aumento da sensibilidade à insulina. Além disso, reduz o ganho de peso corporal devido à menor retenção de líquidos. Esses resultados torna o GQ-2 uma possível alternativa terapêutica para o tratamento do Diabetes Mellitus tipo 2. Nesse trabalho foi investigado o perfil farmacocinético e a toxicidade preliminar hepática e renal do composto GQ-2. Esse composto foi administrado em dose única pela via oral (12mg/Kg) e pela via intraperitoneal (12mg/Kg), e pela via intravenosa (3mg/Kg) em ratos wistar (n=25). Após a administração foram realizadas coletas seriadas de sangue pela artéria femoral. As amostras foram processadas e analisadas por método bioanalítico validado, utilizando um sistema UPLC. O sistema consistiu de um UPLC Acquity® equipado com um detector UV-Visível operando a 330 nm. A separação foi realizada com coluna BEH (2,1 x 50 mm, 1,7 μm) sob eluição da fase móvel constituída de acetonitrila: água (80:20), em modo isocrático e fluxo de 0,4 mL/min. As médias dos parâmetros farmacocinéticos foram calculadas pelas curvas de concentração plasmática versus tempo e expressos através da média, mediana e IC (95). A administração do GQ-2 em dose única (3mg/Kg) pela via intravenosa possibilitou a construção da curva de concentração plasmática versus tempo. Os parâmetros farmacocinéticos obtidos foram: Cmax (ng/mL): 786,2 (534,62-1037,76), tmax (h) 0,08, ASC0-t (ng/mL/h) 390,84 (282,28-499,41), ASC0-inf (ng/mL/h) 411,60 (296,41-526,79), Cl (L/h/Kg) 8,0 (5,45-10,55), Vd (L/Kg) 45,6 (23,9-67,3), r áreas (%) 0,95 (0,94-0,95), k ou (min-1) 5,51 (4,7-6,3), t½ (min) 0,13 (0,11-0,14), k ou (min-1) 0,24 (0,08-0,39) t½ (min) 4,44 (2,14-6,74). Para a administração do ... / The compound 5-(4-chloro-benzylidene)-3-(4-methyl-benzyl)-thiazolidine-2,4- dione (GQ-2), new thiazolidinedione drug, presents hypoglycemic activity by lowering the basal levels of insulin, glucose and leptin, associated with the increased insulin sensitivity. In addition, reduces body weight gain due to minor liquid retention. These results ratify GQ-2 as possible therapeutic alternative for the treatment of type 2 diabetes. In this work we investigated the pharmacokinetic profile and primary hepatic and renal toxicity of the compound GQ-2. This compound was administered in a single dose orally (12 mg/Kg) and intraperitoneally (12 mg/Kg) and intravenously (3 mg/Kg) in Wistar rats (n=25). After administration serial blood collections were taken through the femoral artery. The samples were processed and analyzed by a validated bioanalytical method, using UPLC system. The system consisted of an Acquity UPLC® equipped with a UV-visible detector operating at 330 nm. The separation was performed with BEH column (2.1 x 50 mm, 1,7 μm) as the eluting mobile phase consisted of a acetonitrile:water (80:20) in isocratic mode and flow of 0,4 mL/min. The mean pharmacokinetic parameters were calculated by the curves of plasma concentration versus time and expressed through the mean, median and IC (95). The administration of the GQ-2 single dose (3 mg/Kg) intravenously enables the construction of the plasma concentration versus time curve. The pharmacokinetic parameters were obtained: Cmax (ng/mL) 786,2 (534,62-1037,76), tmáx (h) 0,08, AUC0-t (ng/mL/h) 390, 84 (282,28-499,41), AUC0-inf (ng/mL/h) 411,60 (296,41-526,79), Cl (L/h/Kg) 8,0 (5,45-10,55), Vd (L/Kg) 45,6 (23,9-67,3), r areas (%) 0,95 (0,94-0,95), k or (min-1) 5,51 (4,7- 6,3), t½ (min) 0,13 (0,11-0,14), k or (min-1) 0,24 (0,08-0,39), t½ (min) 4,44 (2,14-6,74). For the administration of GQ-2 in a single dose orally (12 mg/Kg) and intraperitoneally (12 mg/Kg) was not possible to construct ...

Made available in DSpace on 2016-01-13T13:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-19. Added 1 bitstream(s) on 2016-01-13T13:33:28Z : No. of bitstreams: 1 000856429.pdf: 1307975 bytes, checksum: 34294ec81a6d27dee7b8b875a152935a (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia para inovação farmacêutica (INCT-if ) / O composto 3-(2-cloro-6-fluorobenzil)-imidazolidina-2-4-diona - PT-31 GIRSUPAN, planejado pelo grupo de pesquisa da Universidade Federal de Pernambuco, apresenta perfil analgésico resultante da ativação do 2-adrenoceptor no sistema nervoso central. Ainda, quando administrado pela via intraperitoneal (i.p.), em camundongos (15 mg/kg), o produto apresenta efeito sinérgico com a morfina. O objetivo desse estudo foi investigar características físico-químicas, aspectos de toxicidade e de farmacocinética do composto PT-31 GIRSUPAN com potencial aplicação no tratamento de dor. Os ensaios realizados para o composto foram: determinação do coeficiente de partição (logP); estudo de estabilidade química in vitro e ex vivo (plasma de rato); avaliação do perfil farmacocinético em ratos wistar após administração intraperitoneal (i.p.) e oral em dose única (10 mg/kg), isolado e em associação com a morfina; avaliação da toxicidade hepática e renal em ratos wistar; e avaliação do potencial de dependência. Ainda, para realizar o estudo de estabilidade e farmacocinético foram desenvolvidos e validados métodos analíticos e bioanalíticos por HPLC/UV e por LCMS para a determinação do PT-31 GIRSUPAN em solução e em plasma de rato. A determinação do coeficiente de partição (logP) do composto PT-31 GIRSUPAN resultou em logP de 1,6±0,1 pelo método in silico e 1,2±0,1 pelo método shake flask. Os métodos analítico e bioanalítico desenvolvidos apresentaram limites de confiança para a finalidade proposta e os resultados de estabilidade química e ex vivo demonstraram que o composto foi estável nos pHs estudados (3,0 e 7,4) e em plasma de rato por 12 horas. Na análise farmacocinética do composto administrado isoladamente foi possível observar valor de clearance (Cl) semelhante entre as vias i.p. e oral, entretanto os parâmetros volume de distribuição (Vd = 0,978 vs 0,681 L/kg) e meia vida de... / The compound 3-(2-chloro-6-fluoro-benzyl)-imidazolidine-2,4-dione - GIRSUPAN PT-31 was designed by the research group of the Federal University of Pernambuco. The PT-31 GIRSUPAN has analgesic effect from the activation of 2-adrenoceptor in central nervous system. Still, when administered by intraperitoneal (ip) route in mice (15 mg/kg), the compound has synergistic effect with morphine. The aim of this study was to investigate the physicochemical properties, toxicity aspects and pharmacokinetic profile of the compound PT-31 GIRSUPAN with potential application in the treatment of pain. The tests for the compound were: determination of the partition coefficient (logP); study chemical stability in vitro (buffer) and ex vivo (rat plasma); evaluation of pharmacokinetic profile in Wistar rats after intraperitoneal and oral administrations in a single dose. The PT-31 GIRSUPAN was administered alone and in association with morphine to assessment of liver and kidney toxicity in Wistar rats, and to assessment of the potential for addiction. Moreover, to achieve the pharmacokinetic and stability studies were developed and validated HPLC methods with UV and mass detection, for the determination of PT-31 GIRSUPAN in solution and rat plasma. The logP of PT-31 GIRSUPAN was 1.6 ± 0.1 by in silico method and 1.2 ± 0.1 by shake flask method. The analytical and bioanalytical methods developed showed confidence limits appropriate for the intended purpose and the results of chemical stability and ex vivo demonstrated that the compound was stable in the evaluated pHs (3.0 and 7.4) and in the rat plasma, both by 12 hours. In pharmacokinetic analysis of the compound administered alone was observed clearance (Cl) similar between ip and oral routes, however the volume of distribution (0.978 and 0.681 L/kg) and elimination half-life (3.7 and 2.9 h) were significantly higher in oral administration (p<0,05). The association of the compound with morphine ...

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:20:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-11-05. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:24:50Z : No. of bitstreams: 1 000859360.pdf: 1034814 bytes, checksum: c0a4def8be0c2f45d09cbd7c089d88da (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-28T13:37:51Z: 000859360.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-28T13:38:52Z : No. of bitstreams: 1 000859360.pdf: 1034815 bytes, checksum: 0e2a44e2cca5e564a6825b47d8322e41 (MD5) / O fipronil é um inseticida amplamente utilizado para controlar pragas nas plantações e em animais. Existem relatos de intoxicação devido à exposição de fipronil em mamíferos e o fígado é um alvo potencial. No presente estudo, foram avaliados os efeitos dos metabólitos do fipronil, fipronil dessulfinil e fipronil sulfona sobre a bioenergética, produção de espécies reativas de oxigênio e efluxo de cálcio em mitocôndrias isoladas de fígado de rato. O fipronil dessulfinil (5 a 25 μM) inibiu o estado 3 da respiração em mitocôndrias energizadas com glutamato mais malato, substratos do complexo I da cadeia respiratória, e diminuiu o potencial de membrana mitocondrial, resultando em inibição da síntese de adenosina trifosfato. O metabólito dessulfinil também causou desacoplamento nas mitocôndrias energizadas com succinato e estimulou o efluxo de cálcio. O metabólito sulfona também atuou como inibidor e desacoplador mitocondrial e estimulou o efluxo de cálcio, porém em menores concentrações (0,5 a 5 μM). Os efeitos dos metabólitos do fipronil na bioenergética mitocondrial e homeostase do cálcio podem estar relacionados com os efeitos tóxicos do inseticida no fígado / Fipronil is an insecticide extensively used to control pests in crops and animals. There are relates of poisoning due to exposure of fipronil in mammals and the liver is a potential target. In this study, we evaluated the effects of metabolites of fipronil, fipronildesulfinyl and fipronilsulfone on the bioenergetics, reactive oxygen species production and calcium efflux from mitochondria isolated from rat liver. Desulfinyl (5 to 25 μM) inhibited state-3 respiration in mitochondria energized with glutamate plus malate, substrates of complex I of the respiratory chain, and decreased the mitochondrial membrane potential resulting in inhibition of. Synthesis. Desulfinyl also caused uncoupling in succinate-energized mitochondria and calcium efflux. The metabolitesulfone also acted as mitochondrial inhibitors and uncouplers and caused calcium efflux, but inlower concentrations (0.5 to 5 μM). These effects of metabolites of fipronil on mitochondrial bioenergetics and calcium homeostasis may be related to toxic effects of the insecticide in the liver

Orientador : Rosângela Gonçalves Peccinini / Banca: Roberto Takashi Sudo / Banca: Thalita Pedroni Formariz Pilon / Banca: Jean Leandro dos Santos / Banca: Chung Man Chin / Resumo: O composto 3-(2-cloro-6-fluorobenzil)-imidazolidina-2-4-diona - PT-31 GIRSUPAN, planejado pelo grupo de pesquisa da Universidade Federal de Pernambuco, apresenta perfil analgésico resultante da ativação do 2-adrenoceptor no sistema nervoso central. Ainda, quando administrado pela via intraperitoneal (i.p.), em camundongos (15 mg/kg), o produto apresenta efeito sinérgico com a morfina. O objetivo desse estudo foi investigar características físico-químicas, aspectos de toxicidade e de farmacocinética do composto PT-31 GIRSUPAN com potencial aplicação no tratamento de dor. Os ensaios realizados para o composto foram: determinação do coeficiente de partição (logP); estudo de estabilidade química "in vitro" e "ex vivo" (plasma de rato); avaliação do perfil farmacocinético em ratos wistar após administração intraperitoneal (i.p.) e oral em dose única (10 mg/kg), isolado e em associação com a morfina; avaliação da toxicidade hepática e renal em ratos wistar; e avaliação do potencial de dependência. Ainda, para realizar o estudo de estabilidade e farmacocinético foram desenvolvidos e validados métodos analíticos e bioanalíticos por HPLC/UV e por LCMS para a determinação do PT-31 GIRSUPAN em solução e em plasma de rato. A determinação do coeficiente de partição (logP) do composto PT-31 GIRSUPAN resultou em logP de 1,6±0,1 pelo método in silico e 1,2±0,1 pelo método "shake flask". Os métodos analítico e bioanalítico desenvolvidos apresentaram limites de confiança para a finalidade proposta e os resultados de estabilidade química e "ex vivo" demonstraram que o composto foi estável nos pHs estudados (3,0 e 7,4) e em plasma de rato por 12 horas. Na análise farmacocinética do composto administrado isoladamente foi possível observar valor de clearance (Cl) semelhante entre as vias i.p. e oral, entretanto os parâmetros volume de distribuição (Vd = 0,978 vs 0,681 L/kg) e meia vida de... / Abstract: The compound 3-(2-chloro-6-fluoro-benzyl)-imidazolidine-2,4-dione - GIRSUPAN PT-31 was designed by the research group of the Federal University of Pernambuco. The PT-31 GIRSUPAN has analgesic effect from the activation of 2-adrenoceptor in central nervous system. Still, when administered by intraperitoneal (ip) route in mice (15 mg/kg), the compound has synergistic effect with morphine. The aim of this study was to investigate the physicochemical properties, toxicity aspects and pharmacokinetic profile of the compound PT-31 GIRSUPAN with potential application in the treatment of pain. The tests for the compound were: determination of the partition coefficient (logP); study chemical stability "in vitro" (buffer) and "ex vivo" (rat plasma); evaluation of pharmacokinetic profile in Wistar rats after intraperitoneal and oral administrations in a single dose. The PT-31 GIRSUPAN was administered alone and in association with morphine to assessment of liver and kidney toxicity in Wistar rats, and to assessment of the potential for addiction. Moreover, to achieve the pharmacokinetic and stability studies were developed and validated HPLC methods with UV and mass detection, for the determination of PT-31 GIRSUPAN in solution and rat plasma. The logP of PT-31 GIRSUPAN was 1.6 ± 0.1 by in silico method and 1.2 ± 0.1 by shake flask method. The analytical and bioanalytical methods developed showed confidence limits appropriate for the intended purpose and the results of chemical stability and "ex vivo" demonstrated that the compound was stable in the evaluated pHs (3.0 and 7.4) and in the rat plasma, both by 12 hours. In pharmacokinetic analysis of the compound administered alone was observed clearance (Cl) similar between ip and oral routes, however the volume of distribution (0.978 and 0.681 L/kg) and elimination half-life (3.7 and 2.9 h) were significantly higher in oral administration (p<0,05). The association of the compound with morphine ... / Doutor

Orientador: Fábio Erminio Mingatto / Banca: Daniel Nicodemo / Banca: Sérgio Diniz Garcia / Resumo: O fipronil é um inseticida amplamente utilizado para controlar pragas nas plantações e em animais. Existem relatos de intoxicação devido à exposição de fipronil em mamíferos e o fígado é um alvo potencial. No presente estudo, foram avaliados os efeitos dos metabólitos do fipronil, fipronil dessulfinil e fipronil sulfona sobre a bioenergética, produção de espécies reativas de oxigênio e efluxo de cálcio em mitocôndrias isoladas de fígado de rato. O fipronil dessulfinil (5 a 25 μM) inibiu o estado 3 da respiração em mitocôndrias energizadas com glutamato mais malato, substratos do complexo I da cadeia respiratória, e diminuiu o potencial de membrana mitocondrial, resultando em inibição da síntese de adenosina trifosfato. O metabólito dessulfinil também causou desacoplamento nas mitocôndrias energizadas com succinato e estimulou o efluxo de cálcio. O metabólito sulfona também atuou como inibidor e desacoplador mitocondrial e estimulou o efluxo de cálcio, porém em menores concentrações (0,5 a 5 μM). Os efeitos dos metabólitos do fipronil na bioenergética mitocondrial e homeostase do cálcio podem estar relacionados com os efeitos tóxicos do inseticida no fígado / Abstract: Fipronil is an insecticide extensively used to control pests in crops and animals. There are relates of poisoning due to exposure of fipronil in mammals and the liver is a potential target. In this study, we evaluated the effects of metabolites of fipronil, fipronildesulfinyl and fipronilsulfone on the bioenergetics, reactive oxygen species production and calcium efflux from mitochondria isolated from rat liver. Desulfinyl (5 to 25 μM) inhibited state-3 respiration in mitochondria energized with glutamate plus malate, substrates of complex I of the respiratory chain, and decreased the mitochondrial membrane potential resulting in inhibition of. Synthesis. Desulfinyl also caused uncoupling in succinate-energized mitochondria and calcium efflux. The metabolitesulfone also acted as mitochondrial inhibitors and uncouplers and caused calcium efflux, but inlower concentrations (0.5 to 5 μM). These effects of metabolites of fipronil on mitochondrial bioenergetics and calcium homeostasis may be related to toxic effects of the insecticide in the liver / Mestre

Orientador: Rosângela Gonçalves Peccinini / Banca: Jean Leandro dos Santos / Banca: Thalita Pedroni Formariz Pilon / Resumo: O composto 5-(4-cloro-benzilideno)-3-(4-metil-benzil)-tiazolidina-2,4-diona (GQ- 2), novo fármaco da classe das tiazolidinadionas, apresenta atividade hipoglicemiante e reduz os níveis basais de insulina, glicose e leptina, associados com o aumento da sensibilidade à insulina. Além disso, reduz o ganho de peso corporal devido à menor retenção de líquidos. Esses resultados torna o GQ-2 uma possível alternativa terapêutica para o tratamento do Diabetes Mellitus tipo 2. Nesse trabalho foi investigado o perfil farmacocinético e a toxicidade preliminar hepática e renal do composto GQ-2. Esse composto foi administrado em dose única pela via oral (12mg/Kg) e pela via intraperitoneal (12mg/Kg), e pela via intravenosa (3mg/Kg) em ratos wistar (n=25). Após a administração foram realizadas coletas seriadas de sangue pela artéria femoral. As amostras foram processadas e analisadas por método bioanalítico validado, utilizando um sistema UPLC. O sistema consistiu de um UPLC Acquity® equipado com um detector UV-Visível operando a 330 nm. A separação foi realizada com coluna BEH (2,1 x 50 mm, 1,7 μm) sob eluição da fase móvel constituída de acetonitrila: água (80:20), em modo isocrático e fluxo de 0,4 mL/min. As médias dos parâmetros farmacocinéticos foram calculadas pelas curvas de concentração plasmática versus tempo e expressos através da média, mediana e IC (95). A administração do GQ-2 em dose única (3mg/Kg) pela via intravenosa possibilitou a construção da curva de concentração plasmática versus tempo. Os parâmetros farmacocinéticos obtidos foram: Cmax (ng/mL): 786,2 (534,62-1037,76), tmax (h) 0,08, ASC0-t (ng/mL/h) 390,84 (282,28-499,41), ASC0-inf (ng/mL/h) 411,60 (296,41-526,79), Cl (L/h/Kg) 8,0 (5,45-10,55), Vd (L/Kg) 45,6 (23,9-67,3), r áreas (%) 0,95 (0,94-0,95), k ou (min-1) 5,51 (4,7-6,3), t½ (min) 0,13 (0,11-0,14), k ou (min-1) 0,24 (0,08-0,39) t½ (min) 4,44 (2,14-6,74). Para a administração do ... / Abstract: The compound 5-(4-chloro-benzylidene)-3-(4-methyl-benzyl)-thiazolidine-2,4- dione (GQ-2), new thiazolidinedione drug, presents hypoglycemic activity by lowering the basal levels of insulin, glucose and leptin, associated with the increased insulin sensitivity. In addition, reduces body weight gain due to minor liquid retention. These results ratify GQ-2 as possible therapeutic alternative for the treatment of type 2 diabetes. In this work we investigated the pharmacokinetic profile and primary hepatic and renal toxicity of the compound GQ-2. This compound was administered in a single dose orally (12 mg/Kg) and intraperitoneally (12 mg/Kg) and intravenously (3 mg/Kg) in Wistar rats (n=25). After administration serial blood collections were taken through the femoral artery. The samples were processed and analyzed by a validated bioanalytical method, using UPLC system. The system consisted of an Acquity UPLC® equipped with a UV-visible detector operating at 330 nm. The separation was performed with BEH column (2.1 x 50 mm, 1,7 μm) as the eluting mobile phase consisted of a acetonitrile:water (80:20) in isocratic mode and flow of 0,4 mL/min. The mean pharmacokinetic parameters were calculated by the curves of plasma concentration versus time and expressed through the mean, median and IC (95). The administration of the GQ-2 single dose (3 mg/Kg) intravenously enables the construction of the plasma concentration versus time curve. The pharmacokinetic parameters were obtained: Cmax (ng/mL) 786,2 (534,62-1037,76), tmáx (h) 0,08, AUC0-t (ng/mL/h) 390, 84 (282,28-499,41), AUC0-inf (ng/mL/h) 411,60 (296,41-526,79), Cl (L/h/Kg) 8,0 (5,45-10,55), Vd (L/Kg) 45,6 (23,9-67,3), r areas (%) 0,95 (0,94-0,95), k or (min-1) 5,51 (4,7- 6,3), t½ (min) 0,13 (0,11-0,14), k or (min-1) 0,24 (0,08-0,39), t½ (min) 4,44 (2,14-6,74). For the administration of GQ-2 in a single dose orally (12 mg/Kg) and intraperitoneally (12 mg/Kg) was not possible to construct ... / Mestre

Orientador: Marco Antonio de Andrade Belo / Banca: Claudinei da Cruz / Banca: Eduardo Makoto Onaka / Resumo: Este estudo objetivou avaliar a participação hepática e efeito glicocorticoide sobre a resposta inflamatória em tilápias do Nilo desafiadas com Aeromonas hydrophila, submetidas ou não a hepatotoxicidade induzida pelo CCl4. Para a realização desta investigação, 130 tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus), com peso médio de 150g, oriundos da mesma desova, foram distribuídas aleatoriamente em 13 tanques com capacidade de 2500L de água cada, constituindo quatro tratamentos: NN = sem CCl4 e sem glicocorticoide; CN = com CCl4 e sem glicocorticoide; NG = sem CCl4 e com glicocorticoide; CG = com CCl4 e com glicocorticoide. Um 13° tanque foi composto de peixes não submetidos a nenhum tipo de manipulação para constituir os valores de referência para o estudo (PF). Para todos os grupos foram amostrados 10 animais. A administração do CCl4 foi realizada na cavidade celomática em dose única de 0,5 mL.Kg-1 de p.v. nos grupos CN e CG, enquanto a dexametasona foi administrada via IM na região dorso-lateral esquerda na concentração de 0,2% na dose de 2mg Kg-1 de p.v. nos tratamentos NG e CG. Ambas as administrações foram realizadas no momento de inoculação da cepa de A. hidrophila. Em 6, 24 e 48 HPI (horas pós inoculação), foram colhidos: o exsudato inflamatório para quantificação e avaliação das células inflamatórias; amostras de sangue para avaliação hematológica e bioquimica; feito avaliação somática e histologica do fígado e baço. Como resultado destacamos transtorno hepático gerado pelo CCl4. Este acarretou diversas alterações no mecanismo da resposta inflamatória em tilápias do Nilo como diminuição da síntese de proteínas e formação de degeneração gordurosa hepática, bem com alteração do metabolismo energético apresentando muitas vezes efeito sinérgico quando associado ao efeito imunossupressor da dexametasona, sugerindo a ocorrência de ... / Abstract: This study evaluated the hepatic participation and the glucocorticoid effect on the inflammatory response in Nile tilapia challenged with Aeromonas hydrophila , submitted or not to by CCl4. Conducting this research, 130 Nile tilapia (Oreochromis niloticus ) hepatotoxicity with average weight 150g, from the same spawning , were randomly distributed into 13 tanks with a capacity of 2500L of water each , in four treatments: NN = no CCl4 and without glucocorticoids, CN = with CCl4 and without glucocorticoids , NG = no CCl4 and glucocorticoid, CG = with CCl4 and glucocorticoids. A 13 ° tank was composed of fish not subjected to any manipulation to provide reference values for the study (PF). For all groups 10 animals were sampled. The administration of CCl4 was performed on coelomic cavity in a single dose of 0.5 mL. kg -1 and the CG CN groups, while dexamethasone was administered intramuscularly in the left dorso lateral region in the concentration of 0.2% at a dose of 2mg Kg-1 bw in NG and CG treatments. Both administrations were performed at the time of inoculation strain of A. hidrophila. In 6, 24 and 48 HPI (hours post inoculation) were harvested: the inflammatory exudate for quantification and evaluation of inflammatory cells, blood samples for hematological and biochemical evaluation; made somatic and histological assessment of the liver and spleen was made. As a result include liver disorder generated by CCl4. This led to several harmful changes in the mechanism of the inflammatory response in Nile tilapia as decreased protein synthesis and the formation of fatty liver degeneration, and with altered energy metabolism often presenting synergistic effect when combined with the immunosuppressive effect of dexamethasone, suggesting the occurrence of decreased production of coagulation factors, chemical mediators of inflammation and inhibition of cell membrane receptors / Mestre

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-03. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:02Z : No. of bitstreams: 1 000843974.pdf: 2232932 bytes, checksum: d71102c081901322bd4ba52e2d8d373f (MD5) / O fipronil é um inseticida de amplo-espectro de ação utilizado extensivamente para o controle de pragas. Existem relatos descritos na literatura de intoxicação em animais e humanos provocada pelo composto, causando até a morte. Assim, torna-se bastante relevante elucidar os mecanismos de hepatotoxicidade do inseticida para o auxílio no tratamento em caso de intoxicação por parte dos mamíferos. O objetivo desse estudo foi caracterizar o mecanismo de toxicidade do fipronil em hepatócitos isolados de rato e o efeito da biotransformação sobre o seu potencial toxicológico. As concentração do fipronil utilizada foi de 5, 10, 15 e 25 μM em células permeabilizadas com digitonina e de 25, 50, 75 e 100 μM nas não permeabilizadas. A toxicidade do fipronil aos hepatócitos foi avaliada pelo consumo de oxigênio, potencial de membrana mitocondrial, concentração intracelular de ATP hepatócitos isolados de ratos normais ou previamente tratados com proadifen, homeostase intracelular do Ca 2+ e viabilidade celular. A viabilidade celular foi avaliada por meio da exclusão do azul de tripan em hepatócitos isolados de ratos normais e atividade das enzimas alanina transaminase (ALT) e aspartato transaminase (AST) em hepatócitos isolados de ratos normais ou previamente tratados com proadifen, um inibidor do citocromo P450. O fipronil reduziu a respiração mitocondrial em células energizadas com glutamato mais malato de maneira dose dependente, e diminuiu o potencial de membrana mitocondrial e esses efeitos foram acompanhados pela redução da concentração celular de ATP e pelo rompimento da homeostase intracelular do Ca 2+ . A viabilidade celular foi afetada pelo fipronil com maior potência nos hepatócitos isolados de ratos normais, indicando que os metabólitos do inseticida aumenta seu potencial toxicológico. Os resultados deste estudo indicam que a toxicidade do fipronil aos hepatócitos está... / Fipronil is an insecticide of broad-spectrum action used extensively for pest control. There are reports in the literature of animals and humans poisoning caused by the compound, ocacioning. Thus, it becomes quite important to elucidate the mechanisms of hepatotoxicity of the insecticide for treatment in case of intoxication by mammals. The aim of this study was to characterize the mechanism of toxicity of fipronil in isolated rat hepatocytes and the effect of biotransformation on its toxicological potential. The toxicity of fipronil was assessed by monitoring oxygen consumption and mitochondrial membrane potential, intracellular ATP concentration, Ca 2+ homeostasis and cell viability. The cell viability was evaluated by the tripan blue exclusion in hepatocytes isolated from normal rats and the activity of the enzyme alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST) in hepatocytes isolated from normal rats or rats pretreated with proadifen, a cytochrome P450 inhibitor. Fipronil reduced mitochondrial respiration in cells energized with glutamate plus malate in a dose- dependent manner, and dissipated the mitochondrial membrane potential accompanied by reductions in ATP concentration and a disruption of intracellular Ca 2+ homeostasis. Cell viability was affected by fipronil with higher potency in hepatocytes isolated from normal rats, indicating that the metabolism of insecticide increases its toxicological potential. The results of this study indicate that the toxicity of fipronil to the hepatocytes is related to the inhibition of mitochondrial activity, leading to a decreased ATP synthesis and consequent alteration in intracellular Ca 2+ homeostasis, resulting in cell death

Made available in DSpace on 2014-11-10T11:09:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-27Bitstream added on 2014-11-10T11:57:45Z : No. of bitstreams: 1 000790599.pdf: 2089633 bytes, checksum: c467c732ab903f07bf94c0c1322e8f24 (MD5) / Este estudo objetivou avaliar a participação hepática e efeito glicocorticoide sobre a resposta inflamatória em tilápias do Nilo desafiadas com Aeromonas hydrophila, submetidas ou não a hepatotoxicidade induzida pelo CCl4. Para a realização desta investigação, 130 tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus), com peso médio de 150g, oriundos da mesma desova, foram distribuídas aleatoriamente em 13 tanques com capacidade de 2500L de água cada, constituindo quatro tratamentos: NN = sem CCl4 e sem glicocorticoide; CN = com CCl4 e sem glicocorticoide; NG = sem CCl4 e com glicocorticoide; CG = com CCl4 e com glicocorticoide. Um 13° tanque foi composto de peixes não submetidos a nenhum tipo de manipulação para constituir os valores de referência para o estudo (PF). Para todos os grupos foram amostrados 10 animais. A administração do CCl4 foi realizada na cavidade celomática em dose única de 0,5 mL.Kg-1 de p.v. nos grupos CN e CG, enquanto a dexametasona foi administrada via IM na região dorso-lateral esquerda na concentração de 0,2% na dose de 2mg Kg-1 de p.v. nos tratamentos NG e CG. Ambas as administrações foram realizadas no momento de inoculação da cepa de A. hidrophila. Em 6, 24 e 48 HPI (horas pós inoculação), foram colhidos: o exsudato inflamatório para quantificação e avaliação das células inflamatórias; amostras de sangue para avaliação hematológica e bioquimica; feito avaliação somática e histologica do fígado e baço. Como resultado destacamos transtorno hepático gerado pelo CCl4. Este acarretou diversas alterações no mecanismo da resposta inflamatória em tilápias do Nilo como diminuição da síntese de proteínas e formação de degeneração gordurosa hepática, bem com alteração do metabolismo energético apresentando muitas vezes efeito sinérgico quando associado ao efeito imunossupressor da dexametasona, sugerindo a ocorrência de ... / This study evaluated the hepatic participation and the glucocorticoid effect on the inflammatory response in Nile tilapia challenged with Aeromonas hydrophila , submitted or not to by CCl4. Conducting this research, 130 Nile tilapia (Oreochromis niloticus ) hepatotoxicity with average weight 150g, from the same spawning , were randomly distributed into 13 tanks with a capacity of 2500L of water each , in four treatments: NN = no CCl4 and without glucocorticoids, CN = with CCl4 and without glucocorticoids , NG = no CCl4 and glucocorticoid, CG = with CCl4 and glucocorticoids. A 13 ° tank was composed of fish not subjected to any manipulation to provide reference values for the study (PF). For all groups 10 animals were sampled. The administration of CCl4 was performed on coelomic cavity in a single dose of 0.5 mL. kg -1 and the CG CN groups, while dexamethasone was administered intramuscularly in the left dorso lateral region in the concentration of 0.2% at a dose of 2mg Kg-1 bw in NG and CG treatments. Both administrations were performed at the time of inoculation strain of A. hidrophila. In 6, 24 and 48 HPI (hours post inoculation) were harvested: the inflammatory exudate for quantification and evaluation of inflammatory cells, blood samples for hematological and biochemical evaluation; made somatic and histological assessment of the liver and spleen was made. As a result include liver disorder generated by CCl4. This led to several harmful changes in the mechanism of the inflammatory response in Nile tilapia as decreased protein synthesis and the formation of fatty liver degeneration, and with altered energy metabolism often presenting synergistic effect when combined with the immunosuppressive effect of dexamethasone, suggesting the occurrence of decreased production of coagulation factors, chemical mediators of inflammation and inhibition of cell membrane receptors

Orientador: Fábio Erminio Mingatto / Banca: Flavia Thomas Verechia Pereira / Banca: Ana Angélica Henrique Fernandes / Resumo: O fipronil é um inseticida de amplo-espectro de ação utilizado extensivamente para o controle de pragas. Existem relatos descritos na literatura de intoxicação em animais e humanos provocada pelo composto, causando até a morte. Assim, torna-se bastante relevante elucidar os mecanismos de hepatotoxicidade do inseticida para o auxílio no tratamento em caso de intoxicação por parte dos mamíferos. O objetivo desse estudo foi caracterizar o mecanismo de toxicidade do fipronil em hepatócitos isolados de rato e o efeito da biotransformação sobre o seu potencial toxicológico. As concentração do fipronil utilizada foi de 5, 10, 15 e 25 μM em células permeabilizadas com digitonina e de 25, 50, 75 e 100 μM nas não permeabilizadas. A toxicidade do fipronil aos hepatócitos foi avaliada pelo consumo de oxigênio, potencial de membrana mitocondrial, concentração intracelular de ATP hepatócitos isolados de ratos normais ou previamente tratados com proadifen, homeostase intracelular do Ca 2+ e viabilidade celular. A viabilidade celular foi avaliada por meio da exclusão do azul de tripan em hepatócitos isolados de ratos normais e atividade das enzimas alanina transaminase (ALT) e aspartato transaminase (AST) em hepatócitos isolados de ratos normais ou previamente tratados com proadifen, um inibidor do citocromo P450. O fipronil reduziu a respiração mitocondrial em células energizadas com glutamato mais malato de maneira dose dependente, e diminuiu o potencial de membrana mitocondrial e esses efeitos foram acompanhados pela redução da concentração celular de ATP e pelo rompimento da homeostase intracelular do Ca 2+ . A viabilidade celular foi afetada pelo fipronil com maior potência nos hepatócitos isolados de ratos normais, indicando que os metabólitos do inseticida aumenta seu potencial toxicológico. Os resultados deste estudo indicam que a toxicidade do fipronil aos hepatócitos está... / Abstract: Fipronil is an insecticide of broad-spectrum action used extensively for pest control. There are reports in the literature of animals and humans poisoning caused by the compound, ocacioning. Thus, it becomes quite important to elucidate the mechanisms of hepatotoxicity of the insecticide for treatment in case of intoxication by mammals. The aim of this study was to characterize the mechanism of toxicity of fipronil in isolated rat hepatocytes and the effect of biotransformation on its toxicological potential. The toxicity of fipronil was assessed by monitoring oxygen consumption and mitochondrial membrane potential, intracellular ATP concentration, Ca 2+ homeostasis and cell viability. The cell viability was evaluated by the tripan blue exclusion in hepatocytes isolated from normal rats and the activity of the enzyme alanine transaminase (ALT) and aspartate transaminase (AST) in hepatocytes isolated from normal rats or rats pretreated with proadifen, a cytochrome P450 inhibitor. Fipronil reduced mitochondrial respiration in cells energized with glutamate plus malate in a dose- dependent manner, and dissipated the mitochondrial membrane potential accompanied by reductions in ATP concentration and a disruption of intracellular Ca 2+ homeostasis. Cell viability was affected by fipronil with higher potency in hepatocytes isolated from normal rats, indicating that the metabolism of insecticide increases its toxicological potential. The results of this study indicate that the toxicity of fipronil to the hepatocytes is related to the inhibition of mitochondrial activity, leading to a decreased ATP synthesis and consequent alteration in intracellular Ca 2+ homeostasis, resulting in cell death / Mestre