Euphorbiaceae é uma família com grande diversidade floral, despertando o interesse desde meados do século XVIII e que, atualmente, é composta por 218 gêneros e 6.745 espécies, distribuídas em quatro subfamílias (Cheilosoideae, Acalyphoideae, Crotonoideae e Euphorbioideae). Essas variações morfológicas, tais como a presença de pseudantos e os diferentes níveis de reduções florais, são razões para as divergências em sua classificação e motivação para diversos estudos evolutivos. Considerando a variedade de tipos de pseudantos e flores presentes nas diferentes subfamílias, quatro espécies foram selecionadas para este trabalho: Dalechampia meridionalis Müll. Arg. (Acalyphoideae), Joannesia princeps Vell. (Crotonoideae), Euphorbia sipolisii N.E. Br. (Euphorbioideae) e Pera glabrata Poepp. ex Baill. (de posição incerta). O objetivo desse estudo foi analisar os diferentes graus de redução floral, com ênfase na atividade dos meristemas (padrões de divisão, expansão e diferenciação celular) juntamente com os fatores ontogenéticos (diferenças quanto à formação de primórdios) que levaram a supressão de verticilos e culminaram no surgimento dos pseudantos. Aliado a esta diversidade e à redução dos verticilos, tem-se a importância das estruturas secretoras na manutenção da recompensa ao polinizador e, portanto, o objetivo deste trabalho é complementado com o estudo morfoanatômico destas estruturas e análise histoquímica de seus exsudatos. Botões florais e flores em diversos estágios de desenvolvimento foram analisados em microscopia de luz e em microscopia eletrônica de varredura para auxiliar na investigação da ontogênese floral. Nas fases iniciais de desenvolvimento dos pseudantos, as primeiras estruturas a se formar são os diferentes níveis de brácteas. Os primórdios florais iniciam formação concomitantemente aos invólucros, sendo a iniciação das flores estaminadas pistiladas diferenciada, ocorrendo a formação de perianto unicamente em Dalechampia e Pera, formação de constrições nas flores de Dalechampia e Euphorbia e os pseudantos consideradas protogínicos. As flores de J. princeps apresentam iniciação similar à dos pseudantos, diferindo especialmente quanto ao desenvolvimento do perianto, não havendo a formação de constrição. As flores diferem anatomicamente quanto à características do gineceu e também nos padrões de ramificação. Coléteres são encontrados nas fases iniciais de desenvolvimento do ciátio e Dalechampia e laticíferos e idioblastos fenólicos ocorrem em diversas fases de Joannesia e Pera, secretando exsudatos compostos por mucilagem, proteínas, ácidos graxos e fenólicos. A glândula de resina de Dalechampia e os nectários de Euphorbia e Joannesia atuam como glândulas nupciais e iniciam sua formação logo nos primórdios florais, apresentando secreção de exsudatos ricos em lipídios e açúcares, respectivamente. Considerando a ocorrência dos pseudantos em Acalyphoideae e Euphorbioideae e a variação floral presente em Crotonoideae, propõe-se que as características estruturais e as reduções florais observadas nos pseudantos tiveram mais de uma origem ao longo da evolução de Euphorbiaceae e assim sugerimos que os pseudantos evoluíram não apenas de um processo de redução, mas também de uma reorganização das flores ao longo do eixo da inflorescência. As estruturas secretoras estão possivelmente relacionadas a variação morfológica e à história evolutiva do grupo, importantes para o desenvolvimento completo das inflorescências e flores / Euphorbiaceae is a family with great floral diversity, arousing interest from the mid-eighteenth century, currently composed of 218 genera and 6,745 species, distributed into four subfamilies (Cheilosoideae, Acalyphoideae, Crotonoideae and Euphorbioideae). The morphological variations such as the presence of pseudanthia and different levels of floral reductions are reasons for the differences in classification and also motivation for several evolutionary studies. Considering the variety of pseudanthia and flowers present in the different subfamilies, four species were selected for this study: Dalechampia meridionalis Müll. Arg. (Acalyphoideae), Joannesia princeps Vell. (Crotonoideae), Euphorbia sipolisii N.E. Br. (Euphorbioideae) and Pera glabrata Poepp. ex Baill. (uncertain position). The aim of this study was to analyze the different degrees of floral reduction, with emphasis on the activity of meristems (patterns of division, expansion and differentiation) along with the ontogenetic factors (differences on the primordia formation) which led to the suppression of whorls and culminated into the emergence of pseudanthia. Allied to this diversity and reduction of whorls, there is the importance of secretory structures in maintaining the pollinators reward and therefore the aim of this study is complemented with the morphoanatomical study of these structures and the histochemical analysis of their exudates. Flower buds and flowers in different stages of development were analyzed in light and scanning electronic microscopy to assist the investigation of floral ontogeny. In the early stages of development of pseudanthia, the first structures to be formed are the different levels of bracts. The floral primordia begin concomitantly as the involucre, with distinct initiation of staminate and pistillate flowers, formation of perianth only in Dalechampia and Pera, constrictions in the flowers of Euphorbia and Dalechampia and pseudanthia considered protogynic. The flowers of J. princeps show similar initiation as pseudanthia, differing especially in the development of the perianth, without the formation of constriction. The flowers differ anatomically in the gynoecium characteristics and also in branching patterns. Colleters are found in early stages of development of the cyathium and in Dalechampia, and laticifers and phenolic idioblasts occur in various stages of Joannesia and Pera, secreting exudates composed of mucilage, proteins, fatty acids and phenolic compounds. The resin gland of Dalechampia and the nectaries of Euphorbia and Joannesia act as nuptial glands and begin their formation in the floral primordia, presenting secretion of exudates rich in lipids and sugars, respectively. Considering the occurrence of pseudanthia in Acalyphoideae and Euphorbioideae and the floral variations present in Crotonoideae, it is proposed that the structural characteristics and floral reductions observed in pseudanthia had more than one single origin throughout the evolution of Euphorbiaceae and so we suggest that pseudanthia evolved not only by a process of reduction, but also by a reorganization of flowers along the inflorescence axis. Secretory structures are possibly related to morphological variations and the evolutionary history of the group, being important for the complete development of inflorescences and flowers

Meningite é um grupo de doenças infecciosas que constituem um problema global sério à saúde, tendo uma grande relevância social pelas altas taxas de mortalidade que esta doença pode causar. A descrição da progressão da doença, do agente causador e dos sintomas está bem estabelecida, no entanto, as fases iniciais da doença e todo o processo de infecção ainda não é compreendido. O desenvolvimento de diagnósticos laboratoriais mais rápidos e efetivos têm sido promissores. Este trabalho aborda a utilização de anticorpos monoclonais para o diagnóstico por meio da técnica de imunohistoquímica. Os anticorpos monoclonais foram obtidos durante fusões utilizando-se células esplênicas, linfócitos B contra antígenos de N.meningitidis. Os anticorpos foram utilizados em estudo imuno-histoquímico (IHQ) utilizando amostras de tecidos fixados em formol de pacientes com suspeita de meningite ou meningococcemia, no período de 2009 a 2015. Nosso intuito com este projeto é incrementar o diagnóstico histopatológico da meningite meningocócica, sobretudo em situações em que não houve confirmação por técnicas biomoleculares, como o PCR, da presença do agente causador desta doença. Estabelecemos um protocolo para a pesquisa de antígenos de N.meningitidis, conforme padronizado para a reação de IHQ. Nosso trabalho obteve bons resultados, os dois anticorpos monoclonais quando aplicados na reação de IHQ, não apresentaram reatividade cruzada com meningite bacteriana e viral, causadas por outros agentes etiológicos quando utilizamos DAB ou Fast Red como cromógenos. Portanto o uso dos anticorpos em conjunto com a técnica de IHQ se mostrou uma ferramenta de saúde pública auxiliando a vigilância epidemiológica. / Meningitis is a group of infectious diseases that compose a serious global health problem, having a great social relevance by high mortality rates that this disease can cause. The description of the disease progression, the causative agent and the symptoms is well established, however, the early stages of the disease and the infection is not yet understood. The development of faster and effective laboratory diagnoses have been promising. This paper discusses the use of monoclonal antibodies for diagnosis by means of the technique of Immunohistochemistry. Monoclonal antibodies were obtained during mergers using splenic cells, B lymphocytes against antigens of N. meningitidis. The antibodies were used in studies immunohistochemical (IHC) using formalin-fixed tissue samples from patients with suspected meningitis or meningococcemia, during the period from 2009 to 2015. Our aim with this project was to increase the histopathological diagnosis of meningococcal meningitis, especially in situations where there has been no confirmation by biomolecular techniques, such as PCR, of the presence of the causative agent of this disease. We have established a protocol for detecting antigens of N. meningitidis, as standardized to the IHC. The result obtained was very promising, the two monoclonal antibodies obtained good results. There was no cross-reactivity with bacterial and viral meningitis, caused by other etiological agents when using DAB or Fast Red as chromogens. Therefore the use of antibodies in conjunction with IHQ technique proved to be a public health tool aiding the epidemiological surveillance.

Orientador: Filipe Giardini Pereira Bonfim / Resumo: Stachytarpheta cayennensis (Rich.) Vahl é conhecida popularmente como gervão-roxo, utilizada na medicina popular por sua ação estomáquica, antipiréticos, doenças hepáticas crônicas, e por sua utilização na indústria na composição de um fitomedicamento para o tratamento do vitiligo. A ação terapêutica das plantas medicinais muitas vezes está atrelada a produtos de seu metabolismo secundário, sendo este influenciado diretamente por diversos fatores bióticos e abióticos. Diante disso, a aplicação de ferramentas que visem compreender a dinâmica de resposta das plantas e o ambiente faz-se necessária afim de fornecer subsídio para o cultivo e domesticação destas espécies. Dentre estas ferramentas está a fenologia, que avalia a resposta da planta a mudanças climatológicas, a anatomia que descreve a estrutura interna e a histoquímica que identifica e localiza as classes de compostos produzidos. Desse modo, o estudo teve como objetivo avaliar a resposta fenológica em resposta ao ambiente e a caracterização anatômica e histoquímica em Stachytarpheta cayennensis (Rich.) Vahl. O experimento foi realizado na área experimental do Departamento de Horticultura da Fazenda Experimental Lageado na Faculdade de Ciências Agronômicas da Universidade Estadual Paulista, em Botucatu-SP. Foram avaliados 52 indivíduos mensalmente de setembro/2018 a agosto/2019 quanto a resposta fenológica da espécie em relação as variações climáticas. Além disso, as folhas e flores foram coletadas, fixadas e analisadas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Stachytarpheta cayennensis (Rich.) Vahl is popularly known as purple gervão, used in folk medicine for its stomatal action, antipyretics, chronic liver diseases, and for its use in industry in the composition of a phytomedicine for the treatment of vitiligo. The therapeutic action of medicinal plants is often linked to products of their secondary metabolism, which is directly influenced by several biotic and abiotic factors. Therefore, the application of tools that aim to understand the response dynamics of plants and the environment is necessary in order to provide support for the cultivation and domestication of these species. Among these tools is phenology, which assesses the plant's response to climatological changes, the anatomy that describes the internal structure and the histochemistry that identifies and locates the classes of compounds produced. Thus, the study aims to evaluate the phenological response in response to the environment and the anatomical and histochemical characterization in Stachytarpheta cayennensis (Rich.) Vahl. The experiment was carried out in the experimental area of the Horticulture Department of Fazenda Experimental Lageado at the Faculty of Agronomic Sciences of Universidade Estadual Paulista, in Botucatu-SP. 52 individuals were evaluated monthly from September / 2018 to August / 2019 for the phenological response of the species in relation to climatic variations. In addition, the leaves and flowers were collected, fixed and analyzed for thei... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

In order to demonstrate the influence of morphine on the developmental localization of regenerated noradrenergic fibers in rat cerebellum, a glyoxylic histofluorescent method and radiometric assay for norepinephrine (NE) were utilized. An initial reduction of NE in the cerebellum after 6-hydroxydopa [6-OHDOPA; 60 µg/g intraperitoneally (i.p.)] was followed by a return to control levels at 3 days, and an elevation above control levels at 7 days. The initial rates of recovery of NE in the cerebellum of the 6-OHDOPA group of rats and the group receiving morphine (20 µg/g i.p.) in combination with 6-OHDOPA were identical up to 7 days. However, by 14 days NE content was further elevated in the cerebellum of the morphine+6-OHDOPA group. Histofluorescent microscopic observations of the cerebellar cortex correlated with the biochemical findings. A reduction in cerebellar NE content at 3 days was associated with a reduction in the number of visible histofluorescent fibers in the cerebellar cortex. By 7 days the relative number of fibers in the 6-OHDOPA groups was similar to that seen in the control group, but by 9 days the relative number of fluorescent fibers in the cerebellar cortex was increased above control. By 13 days there was a further increase in the relative number of fluorescent fibers in the cerebellar cortex of the morphine+6-OHDOPA group, as compared to the group treated with 6-OHDOPA alone. These findings provide an anatomic correlate for recovery of noradrenergic fibers after 6-OHDOPA, and demonstrate an action of morphine in enhancing regenerative sprouting.

<p>Akrilamid (CASR No. 79-06-1) predstavlja veoma reaktivni, hidrosolubilni&nbsp;monomer za koji se smatra da ima toksične i potencijalno kancerogene efekte po&nbsp;zdravlje ljudi. &Scaron;tetne posledice akrilamida i njegovog jo&scaron; reaktivnijeg metabolita,&nbsp;glicidamida, su dokazane kod eksperimentalnih životinja i podrazumevale su&nbsp;neurotoksičnost, genotoksičnost i kancerogenost. Epidemiolo&scaron;ke studije rađene na&nbsp;ljudima pokazale su da akrilamid izaziva neurotoksične efekte, dok se genotoksičnost i&nbsp;kancerogenost jo&scaron; smatraju potencijalnim efektima, a zasnivaju se na podacima koji su&nbsp;dobijeni u okviru istraživanja na laboratorijskim životinjama. Njegove &scaron;tetne posledice&nbsp;na jetru, posebno kod mladog organizma, jo&scaron; uvek nisu dovoljno istražene.</p><p>Akrilamid se spontano formira u hrani koja je bogata ugljenim hidratima, tokom&nbsp;termičke obrade namirnica na visokim temperaturama. Ovaj monomer se formira&nbsp;tokom tzv. neenzimatske Mallard-ove reakcije, kojom se dobijaju smeđe komponente&nbsp;u hrani. U namirnicama ovaj monomer se formira reakcijom između redukujućih&nbsp;&scaron;ećera (uglavnom glukoze ili fruktoze) i aminokiseline (dominantno asparagina).</p><p>Imajući na umu da je jetra centralni organ za metabolizam akrilamida, ovo&nbsp;istraživanje &nbsp;je imalo za cilj da ispita glavne histolo&scaron;ke i biohemijske promene na jetri&nbsp;juvenilnog organizma pacova, nakon njegove subhronične ekspozicije akrilamidu.&nbsp;Istraživanje je &nbsp;rađeno na 3 eksperimentalne grupe peripubertalnih/juvenilnih mužjaka&nbsp;Wistar pacova, od kojih su dve bile tretirane vodenim rastvorom akrilamida u dozi od&nbsp;25 ili 50 &nbsp;mg/kg telesne mase, dok je treća grupa služila kao kontrola i primala&nbsp;destilovanu vodu. Životinje su bile tretirane oralno, putem gavaže, 5 dana nedeljno,&nbsp;tokom 3 nedelje. Nakon 24 h od poslednjeg tretmana, životinje su uvedene u etarsku &nbsp;anesteziju i dekapitovane, a zatim su prikupljeni krv i uzorci tkiva jetre.</p><p>Tkivo jetre je uzeto iz srednjeg lobusa, fiksirano u 10% neutralnom puferisanom &nbsp;formalinu tokom 24 h i obrađeno prema standardnom protokolu za parafinsko kalupljenje. Ukalupljeni uzorci jetre su zatim isečeni na serijske preseke tkiva debljine&nbsp;5 &micro;m, a zatim bojeni histohemijskim i imunohistohemijskim metodama. Uzorci krvi su&nbsp;pripremljeni za serolo&scaron;ku analizu.&nbsp;</p><p>Histolo&scaron;ka analiza preseka bojenih hematoksilin-eozin (H&amp;E) metodom nije &nbsp;zabeležila prisustvo značajnih razlika u op&scaron;toj arhitekturi jetre i njenoj lobularnoj &nbsp;organizaciji među eksperimentalnim grupama. Stereolo&scaron;ka analiza je ukazala na &nbsp;<br />mikrostrukturne promene kod hepatocita i jetrinih sinusoida. Rezultati sugeri&scaron;u, na&nbsp;dozno-zavisno povećanje volumena hepatocita, njihove citoplazme i nukleusa, i doznozavsino smanjenje volumena sinusoida, u odnosu na kontrolne uzorke jetre.</p><p>Analiza glikogena je rađena na presecima jetre bojenim metodom Periodic acid&ndash;<br />Schiff-a (PAS), gde se uočilo smanjenje količine glikogena u grupi tretiranoj nižom &nbsp;dozom akrilamida, dok je u grupi tretiranoj većom dozom uočena njegova&nbsp;<br />akumulacija, u odnosu na kontrolne životinje.</p><p>Imunopozitivnost hepatocita na marker proliferacije, Ki-67, bila je smanjena u&nbsp;grupi pacova tretiranoj nižom dozom, a bila povećana u grupi tretiranoj većom dozom&nbsp;akrilamida pri komparaciji sa kontrolom. Stereolo&scaron;ki nalazi su potvrdili inicijalnu&nbsp;histolo&scaron;ku analizu.</p><p>Imunopozitivnost hepatocita na marker apoptoze, Caspase 3, je bila smanjena&nbsp;<br />kod obe grupe životinja tretiranih akrilamidom u odnosu na kontrolu. Nasuprot tome,&nbsp;<br />imunopozitivnost neparenhimskih ćelija jetre, pretežno Kupffer-ovih ćelija, je bila&nbsp;<br />uvećana u obe tretirane grupe pri komparaciji sa kontrolom.</p><p>Imunopozitivnost Kupffer-ovih ćelija na marker CD68 je bila smanjena u&nbsp;uzorcima jetre kod oba tretmana akrilamidom u odnosu na kontrolu.</p><p>Populacija mastocita, prikazana toluidine-blue (TB) metodom bojenja, bila je&nbsp;uvećana &nbsp;kod obe grupe pacova tretiranih akrilamidom u poređenju sa kontrolom.&nbsp;Povećanje brojnosti ovih ćelija je bilo posebno prominentno kod njihove degranulisane &nbsp;subpopulacije. Stereolo&scaron;ka analiza je potvrdila histolo&scaron;ke nalaze.&nbsp;</p><p>Serumska analiza je pokazala uvećanu aktivnost aspartat aminotrasferaze (AST) i&nbsp;<br />smanjenu aktivnost alanin aminotrasferaze (ALT) kod obe grupe životinja tretiranih &nbsp;<br />akrilamidom u odnosu na kontrolu. Aktivnost alkalne fosfataze (ALP) je bila uvećana&nbsp;<br />u grupi tretiranoj nižom dozom, a smanjena u grupi tretiranoj većom dozom&nbsp;<br />akrilamida, u odnosu na kontrolu. Vrednosti koncentracije ukupnih serumskih proteina&nbsp;kao i koncentracije C reaktivnog proteina (CRP) nisu pokazale značajnije promene&nbsp;među eksperimentalnim grupama.</p><p>Oba akrilamidna tretmana su izazvala gubitak telesne mase kod tretiranih&nbsp;pacova, u odnosu na kontrolne životinje.&nbsp;Postojeći podaci ukazuju prominentni hepatotoksični potencijal akrilamida koji može&nbsp;poremetiti mikrostrukturne osobine i funkcionalni status hepatocita kod jetre mladog&nbsp;organizma. Akrilamid može značajno poremetiti funkcionalnost jetre, obzirom da se&nbsp;promene na celularnom nivou mogu relativno brzo odraziti na nivo tkiva, a kasnije&nbsp;ugroziti i homeostazu celog organizma.</p> / <p>Acrylamide&nbsp; (CASR No. 79-06- 1)&nbsp; is highly reactive, water-soluble monomer which is considered as toxic and potentially cancer causing chemical to humans. Adverse health effects regarding acrylamide and its more reactive metabolite,glycidamide, were detected in experimental animals, and&nbsp; included neurotoxicity, genotoxicity, and&nbsp;&nbsp; carcinogenicity.&nbsp; Human epidemiological studies claim that acrylamide has neurotoxic effects, while&nbsp; genotoxicity and carcinogenicity are considered as&nbsp; potential human health risks only on the basis of animal studies. Its harmful effects on the liver, especially in a young organism, are still to be elucidated.</p><p>Acrylamide&nbsp; is spontaneously formed in&nbsp; carbohydrate-rich food during high-temperature&nbsp; processing. It is&nbsp; formed during heat-induced non-enzymatic reaction, also known as&nbsp; the Maillard browning reaction, between reducing sugars (glucose and fructose), and free amino acids (mainly asparagine).</p><p>Having in mind&nbsp; that&nbsp; acrylamide&nbsp; metabolism takes place in a liver,&nbsp; the study aimed to investigate the main histological and&nbsp; biochemical changes in the liver of juvenile rat following subchronic acrylamide intoxication. Study was performed on peripubertal/juvenile male Wistar rats, divided in 3 experimental groups, two of which were treated with acrylamide in doses of 25 or 50 mg/kg of body weight, while the third group served as the control and received distilled water. Animals were treated orally, via gavage, 5 days a week, during 3 weeks. Animals&nbsp; were anesthetized by&nbsp;&nbsp; ether inhalation and decapitated 24 hrs after the last treatment.</p><p>Liver tissue was sampled from the middle lobe, fixed in&nbsp; 10% neutral&nbsp; buffered formalin for 24 hrs,&nbsp; routinely processed for paraffin&nbsp; embedding&nbsp; and cut into 5-&micro;m thick serial sections for subsequent histochemical and immunohistochemical staining.Blood samples were collected for subsequent biochemical analysis .</p><p>Histological examination of haematoxylin and eosin (H&amp;E) stained sections did not point to any major alteration in main in liver lobular architecture or organization among the experimental groups. Stereological analysis revealed a microstructural changes in hepatocytes and liver sinusoids. The analysis detected a dose-dependant increase in the volume of hepatocytes, their cytoplasm and nuclei, and dose-dependant decrease in the volume of liver sinusoids compared to the control, respectively.</p><p>Glycogen analysis was performed on Periodic acid&ndash;Schiff (PAS) stained sections which showed glycogen reduction in the low-dose group, and its accumulation in the high-dose group, compared to the control, respectively.</p><p>Imunopositivity in hepatocytes for Ki-67 protein, a known marker for proliferation, showed a decrease in low-dose group, while in high- dose group was detected its increase compared to the control, respectively. Stereological analysis confirmed initial histological observation.</p><p>Caspase 3 immunopositivity, a known marker for apoptosis, proved to be decreased in hepatocytes in both acrylamide-treated groups when compared to the control. One the other hand, immunopositivity was increased in non-parenchymal&nbsp; cell, predominantly in Kupffer cells, in comparison to the control. Immunopositivity for CD68, a marker for Kupffer cells, proved to be decreased in both acrylamide-treated groups when compared to the control.</p><p>Population of the mast cells, visualized on toluidine blue (TB) stained sections, showed its increase in both acrylamide-treated groups, in comparison to the control. The increase was especially prominent regarding a degranulated subpopulation of these cells. Subsequent stereological analysis confirmed histological findings.</p><p>Serum analysis showed increased&nbsp; activity of&nbsp; aspartate aminotransferase (AST), and decreased&nbsp; activity&nbsp; of alanine aminotransferase (ALT) in&nbsp; both AA-treated groups, while the&nbsp; activity&nbsp; of alkaline phosphatase (ALP)&nbsp; was increased in low-dose, but&nbsp;&nbsp; decreased in high- dose group compared to the control, respectively.&nbsp; The concentration of total serum proteins as well as concentration of C reactive protein (CRP) did not show any major changes among the experimental groups.</p><p>Body weight measurements showed that all acrylamide-treated rats lost their body weight as opposed to the control rats whose body mass increased.</p><p>Present results suggest a prominent hepatotoxic potential of acrylamide which might alter the microstructural features and functional status in hepatocytes of&nbsp; immature liver.&nbsp; Acrylamide may cause significant perturbation in liver functionality which may be reflected from cellular to the tissue level, thereby endangering the whole body&rsquo;s homeostasis.</p>

Neste estudo foi verificado que a hipófise de S. brasiliensis era composta por dois tecidos, a neuro hipófise (NH) e a adeno-hipófise (AH). Nesta última, foram distinguidos sete tipos celulares. Na RPD foram detectadas as células adrenocorticotrópicas e prolactínicas, na PPD as células gonadotrópicas, somatotrópicas e tireotrópicas, e na PI, as células melanotrópicas e somatolactínicas. Foi evidenciada única célula gonadotrópica, produtora de LH e FSH. O primórdio da hipófise foi detectado 12 horas após a eclosão (hpe), a NH com 72 hpe e o início da formação do pedúnculo com 300 hpe. Nos juvenis (600 hpe), a hipófise apresentou uma morfologia semelhante àquela observada nos adultos. As células prolactínicas foram detectadas com 12 hpe, juntamente com as células adrenocorticotrópicas e melanotrópicas, seguidas das somatotrópicas e somatolactínicas, com 36 hpe. Por outro lado, nas larvas e juvenis foram detectadas duas populações distintas de células gonadotrópicas, as células produtoras de FSH foram detectadas com 600 hpe, enquanto as produtoras de LH com 120 hpe. / This study showed that the pituitary gland of S. brasiliensis was formed by two tissues, neurohypophysis and adenohypophysis. In the latter, seven cell types were distinguished. In RPD, prolactin and adrenocorticotropic cells were present. In PPD, gonadotropic, somatotrope and thyrotropic cells were detected, and in PI, somatolactin and melanotropic cells were found. Interestingly, was detected a single gonadotropic cell responsible for producing both gonadotropins. The primordium of the pituitary gland was detected 12 hours after hatching (hah), the neurohypophysis was detected 72 hah and formation of the stalk 300 hah. In juveniles, 600 hah, the pituitary showed a similar morphology to that observed in adults of this species. Prolactin cells were detected 12 hah together with adrenocorticotropic and melanotropic cells, followed by somatotropic and somatolactin cells 36 hah. Unlike adults, larvae and juveniles have shown two distinct populations of gonadotropic cells. FSH-producing cells were detected 600 hah, while LH-producing cells were detected 120 hah.

Objetivamos o estudo quantitativo e temporal do padrão de inervação do músculo extensor longo dos dedos (edl), após transecção do nervo ciático em camundongos e reparo imediato pela técnica de tubulização. Assim, o músculo edl apresentou-se desnervado na segunda semana após a tubulização. Todas as fibras musculares do edl estavam reinervados na sexta semana após o implante da protese tubular. Entre a sexta e a quadragesima semanas pós-implante a proporção de fibras musculares do edl com mono e poli-inervação aumentou de 3:1 para 4:1. Na quadragésima semana após o implante do tubo foi atingida a porcentagem máxima (80%) de inervação troncular das placas motoras do edl mono-inervadas. Mesmo com tempos prolongados de sobrevivencia após implante, não houve estabilização do padrão de origem das fibras nervosas que convergiam para as placas poli-inervadas do edl. A mono-inervação troncular foi readquirida por 65% das fibras musculares do edl dos animais tubulizados, padrão encontrado em 100% das fibras musculares do edl dos animais não operados. Os padrões morfometricos de reinervação do músculo edl foram idênticos, a partir do terceiro mes, entre o grupo de animais com secção e tubulização do nervo ciatico e o grupo com simples esmagamento do nervo, evidenciando padrão similar de reinervação muscular a longo prazo. / We aimed to study the quantitative and temporal pattern of muscle innervation extensor digitorum longus (EDL), following transection of the sciatic nerve in mice and immediate repair technique for tubing. Thus, the EDL muscle denervation presented in the second week after the tubing. All of the EDL muscle fibers were reinnervated in the sixth week after the implantation of prosthetic tube. Between the sixth and FORTY weeks post-implantation, the proportion of muscle fibers of the EDL with mono-and poly-innervation increased from 3:1 to 4:1. The forty weeks after the implantation of the tube was reached maximum percentage (80%) of trunk innervation of motor endplates of the EDL mono-innervated. Even with prolonged survival times after implantation, there was no stabilization of the pattern of origin of nerve fibers that converged on the plates of poly-innervated EDL. The mono-innervation trunk was regained by 65% of EDL muscle fibers of animals tubularized, pattern found in 100% of EDL muscle fibers of animals not operated. The morphometric patterns of reinnervation of the EDL muscle were identical, from the third month, the group of animals with tubing and resources section of the sciatic nerve and the group with simple nerve crush, showing similar pattern of muscle reinnervation in the long term.

Un análisis de los tipos de fibras y de su distribución fue realizado en muestras de músculos de la lengua (mm. geniogloso, estilogloso, hiogloso y lingual propio), del paladar y fauces (mm. palatofaríngeo, palatino, elevador y tensor del velo palatino) y de la faringe (mm. terigofaríngeo, estilofaríngeo caudal, hiofaríngeo, tirofaríngeo y cricofaríngeo) en la especie canina. Asimismo, se procesaron muestras del músculo semitendinoso, que fue utilizado como músculo control. La tipificación fibrilar se basó en técnicas histoquímicas (mATPasa y NADH-TR) e inmunohistoquímicas (aplicación de anticuerpos monoclonales específicos frente a las cadenas pesadas de miosina tipos I, IIa y IIx). En todos los músculos estudiados se evidenciaron fibras puras (tipos I, IIA y IIX) e híbridas (tipos IIAX, IIXA y IIC). Por otra parte, en el músculo tensor del velo palatino también fueron identificadas fibras tipo IIM. / An analysis of fiber types and its distribution in canine muscles of the tongue (genioglossus, hyoglossus, styloglossus and lingualis propius muscles), soft palate (palatinus, levator veli palatini, tensor veli palatini and palatopharyngeus muscles), and pharynx (pterygopharyngeus, stylopharyngeus caudalis, hyopharyngeus, thyropharyngeus and cricopharyngeus muscles) was carried out. Additional samples were obtained from the semitendinosus muscle to be used as a control. Muscle fiber types were defined by histochemical (mATPase and NADH-TR), and immunohistochemical (monoclonal antibodies against myosin heavy chain isoforms I, IIa and IIx) techniques. In all analyzed muscles pure I, IIA and IIX fibers and hybrid IIAX, IIXA and IIC fibers were observed. Furthermore, type IIM fibers were identified in tensor veli palatini muscle

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This thesis was composed of three scientific papers. The first paper was the more comprehensive one. All necropsy and biopsy cases of mycoses and oomycosis diagnosed in domestic animals between 1990 and 2012 were analyzed. In the studied period, 29,686 exams (9,487 necropsy reports and 20,199 biopsy reports) performed at the Laboratório de Patologia Veterinária (LPV) of the Universidade Federal de Santa Maria (UFSM) were studied. Two hundred and thirty cases of mycosis or pythiosis (oomycosis) were found, being 179 cases (78%) of mycoses and 51 cases (22%) of pythiosis. The main diseases observed, in descending order of prevalence, were: pythiosis, candidiasis, aspergillosis, zygomycosis, dermatophytosis, mallasseziosis, cryptococcosis, megabacteriosis, and sporothrichosis. Pythiosis affected mainly horses and the mycosis affected mainly dogs and cats. The second article focused on the histomorphological and histochemical characteristics determinant for the histopathological diagnosis of this condition in dogs and cats. By the hematoxylin-eosin (HE) stain, the yeasts were round, with a central cell containing a nucleus, surrounded by a clear halo (usually non-stained capsule). The techniques of periodic Schiff acid (PAS), Grocott, and Fontana-Masson (FM) were utilized and demonstrated the wall of the yeast cells. The FM stain showed the melanin present in these cells. The Alcian blue and Mayer s mucicarmin stains showed mainly the yeast polysaccharide capsule. The diameter of the cells ranged from 1.67 to 10.00μm and the full diameter of the encapsulated yeasts varied between 4.17 e 34.16μm. Yeast buddings were better observed through the PAS stain and were narrow based, simple or multiple, mainly in the opposite poles of the cells, or forming chains. The third article emphasized an immunohistochemical (IHC) study of cases of aspergillosis and zygomycosis aiming to optimize the use of the IHC technique in the detection of Aspergillus spp. and zygomycetes in animal tissues. Two fungal-specific monoclonal antibodies were utilized in tissue fragments (formalin-fixed paraffin-embedded) previously diagnosed as aspergillosis or zygomycosis. Tissues were submitted to three different detection systems (two biotinilated and one nonbiotinilated). Both antibodies showed high specificity and sensitivity in the examined tissues. No cross-reactions were observed between the antibodies utilized and the agents evaluated (including cases of aspergillosis, zygomycosis, candidiasis, and pythiosis). However, nonspecific reactions were observed in hyphae of some cases, but were eliminated by mean of one of the detection systems used. The IHC technique showed to be a useful tool detecting and confirming aspergillosis and zygomycosis in this retrospective study. / Esta tese foi constituída de três partes que resultaram em três artigos científicos. O primeiro artigo foi o mais abrangente, onde todos os casos de micoses e pitiose diagnosticados em animais domésticos, provenientes de necropsias e biópsias entre 1990 e 2012, foram analisados. No período estudado foram revisados 9.487 protocolos de necropsias e 20.199 exames histopatológicos, totalizando 29.686 casos examinados no Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Santa Maria (LPV-UFSM). Do total de protocolos analisados, em 230 foram diagnosticadas micoses ou pitiose (oomicose), sendo 179 casos (78%) de micoses e 51 casos (22%) de pitiose. As principais doenças diagnosticadas, em ordem decrescente de prevalência, foram: pitiose, candidíase, aspergilose, zigomicose, dermatofitose, malasseziose, criptococose, megabacteriose e esporotricose. Os equinos foram os mais acometidos pela pitiose e os animais de companhia (cães e gatos) foram os mais acometidos pelas micoses. O segundo artigo enfocou as características histomorfológicas e histoquímicas determinantes no diagnóstico histopatológico da criptococose em cães e gatos. Pela técnica de hematoxilina-eosina (HE) as leveduras eram arredondadas, com célula central contendo um núcleo, circundada por um halo claro (cápsula geralmente não corada). As técnicas histoquímicas do ácido periódico de Schiff (PAS), Grocott e Fontana-Masson (FM) foram utilizadas e evidenciaram a parede das células das leveduras. Pelo FM observou-se a melanina presente nessas células. As técnicas do azul Alciano e da mucicarmina de Mayer evidenciaram principalmente a cápsula polissacarídica das leveduras. O diâmetro das células das leveduras variou de 1,67 a 10,00 μm e o diâmetro total das leveduras encapsuladas variou entre 4,17 e 34,16 μm. Os brotamentos foram melhor visualizados através do PAS e ocorreram em base estreita, de forma única ou múltipla, principalmente em polos opostos das células das leveduras ou formando uma cadeia. O terceiro artigo enfocou um estudo imuno-histoquímico (IHQ) em casos de aspergilose e zigomicose, visando a otimização do uso da técnica de IHQ na detecção de Aspergillus spp. e zigomicetos em tecidos de animais. Utilizaram-se dois anticorpos monoclonais fungo-específicos em fragmentos de tecidos (fixados em formol e embebidos em parafina) com diagnóstico histomorfológico prévio de aspergilose e zigomicose, os quais foram submetidos a três sistemas de detecção diferentes (dois biotinilados e um não biotinilado). Os dois anticorpos apresentaram alta especificidade e sensibilidade nos tecidos examinados. Não ocorreram reações cruzadas entre os anticorpos utilizados e os agentes etiológicos avaliados (incluindo casos de aspergilose, zigomicose, candidíase e pitiose). No entanto, reações inespecíficas foram observadas nas hifas em alguns casos, porém foram eliminadas através de um dos sistemas de detecção utilizados. A técnica de IHQ mostrou-se uma ferramenta muito útil na detecção e confirmação dos casos de aspergilose e zigomicose neste estudo retrospectivo.

A review on the peripheral nervous system (PNS) with emphasis on Schwann cells and neoplastic lesions of the system was performed. Schwann cells functions during PNS development as well as their importance during repair of nerve fibers and myelin within the nervous system were approached. Literature review points to numerous functions of Schwann cells and to new growth factors and genes that influence PNS development. A retrospective study of PNS tumors was made from the files of the Veterinary Pathology Laboratory of the Federal University of Santa Maria, Brazil, between 1964 and 2004. Peripheral nerve tumors summed up 12, 7 schwannomas and 5 neurofibromas. From those, 9 were studied from their clinical and macroscopical aspects, and histologically by histochemistry and immunohistochemistry. Histological features as neoplastic cell type, shape, cell differentiation, mitotic index, atypic cellular changes, encapsulation, eoplastic cells infiltration on surrounding tissues, edema, hemorrhage, necrosis, and inflammation were evaluated. Masson´s trichrome and Picrosírius red staining methods heightened connective tissue components that were more prevalent in neurofibromas with a characteristic deployment of collagens I and III. In AgNOR techniques both benign and malignant schwannomas and neurofibromas did not show significant statistic differences. Mast cells stained by toluidine blue were more prevalent in neurofibromas which are rich in reactive endoneurium. Schwannomas (100%) and nurofibromas (100%) were positive for vimentin and S100 protein, so they prove to be reliable for the diagnosis of PNS tumors. GFAP marked cells were randomly found within schwannomas and Schwann cells within neurofibromas, and this labelling must be used together with other techniques to reach and accurate diagnosis. / Foi realizada uma revisão sobre os nervos periféricos (NP) com ênfase nas suas neoplasias e nas células de Schwann. As funções das células de Schwann durante o desenvolvimento do SNP bem como sua importância na reparação e remielinização do sistema nervoso foram enfocadas. A literatura consultada mostra a descoberta de numerosas funções dessas células assim como novos fatores de crescimento e genes que influenciam o desenvolvimento do SNP. Foi realizado um levantamento retrospectivo das neoplasias de SNP nos arquivos do Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Santa Maria (UFSM) entre 1964 e 2004. Foram registrados 12 tumores, 7 schwannomas e 5 neurofibromas. Destes, 9 (4 schwannomas e 5 neurofibromas) foram submetidos a técnicas histoquímicas e imunoistoquímicas e avaliados sob os aspectos clínicos e morfológicos. Histologicamente, aspectos como caracterização do tipo celular neoplásico, forma, diferenciação celular, número de mitoses, atipia celular, presença de cápsula, infiltração das células neoplásicas no tecido além de outras alterações como edema, hemorragia, necrose e inflamação foram avaliados. Através da técnica do tricrômico de Masson e do Picrosírius red observou-se que o tecido conjuntivo era mais abundante nos neurofibromas e que os colágenos tipo I e tipo III foram característicos dessas neoplasias. No presente estudo, a técnica de AgNOR não foi eficiente como indicador de prognóstico já que não houve diferença estatística significativa entre os neurofibromas benignos e malignos e os schwannomas benignos e malignos. Os neurofibromas foram caracterizados, através da técnica do azul de toluidina, por uma concentração alta e difusa de mastócitos. Nos schwannomas essa população celular era restrita a poucas áreas. Essa marcada diferença entre as neoplasias deve-se ao fato de que os neurofibromas são constituídos de tecido endoneural reativo onde os mastócitos são normalmente encontrados. Imunoistoquímicamente houve forte marcação para a vimentina (100%) e S100 (100%) comprovando a eficiência desses anticorpos no diagnóstico dos tumores de SNP. O GFAP marcou aleatoriamente os schwannomas e todas as células de Schwann presentes nos fascículos nervosos dos neurofibromas. O GFAP deve ser usado junto com outros marcadores imunoistoquímicos e com outras técnicas de laboratório para promover um diagnóstico preciso.