As encefalopatias espongiformes transmissíveis (EETs), ou doenças do príon, ocorrem tanto nos animais como no homem, são responsáveis por doenças transmissíveis e hereditárias e provocam lesões degenerativas no encéfalo. A presença de uma forma protéica anormal (PrPSc), ao invés da sua forma normal (PrPC), no tecido encefálico e linforreticular é característica peculiar das EETs. Essa proteína é altamente insolúvel, resistente à degradação por proteases e se deposita eventualmente sob forma de placas amiloides na substância cinzenta. Tais placas provocam a morte maciça de neurônios e células gliais, causando vacuolização intensa no tecido afetado. A partir da implantação do programa de vigilância epidemiológica da encefopatia espongiforme bovina (EEB), coordenado pelo Programa Nacional de Controle da Raiva dos Herbívoros e Outras Encefalopatias (PNCRH) do Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento (MAPA), o Setor de Patologia Veterinária da UFRGS tem sido requisitado frequentemente para realização de exames de necropsias e de materiais de animais com suspeita de scrapie. A técnica de imuno-histoquímica (IHQ) é o teste para o diagnóstico das EETs mais específico disponível até o momento, sendo cada vez mais utilizado para diagnóstico, rastreamento, estudo da patogênese e fornecimento de informações comparativas em nível molecular. Por outro lado, a genotipagem é uma ferramenta importante no auxílio da identificação da suscetibilidade genética a scrapie, tornando o diagnóstico mais seguro, além de possibilitar a identificação de casos atípicos de scrapie, como a Nor98. Este trabalho consistiu na realização da IHQ para proteína priônica no tecido nervoso e no tecido linforreticular, como método diagnóstico de scrapie em ovinos e caprinos, associado à genotipagem dos ovinos. Entre 2009 e 2012 foram realizadas colheitas de materiais para exames de IHQ e coloração por hematoxilina-eosina em amostras de tecidos de ovinos das raças Suffolk, Santa Inês, Dorper e mestiços. As amostras foram obtidas a partir de biopsias e necropsias para diagnóstico de scrapie. Foi realizada também a genotipagem nos animais para os códons 136, 154 e 171 da proteína PRP, e em alguns casos no códon 141. Foram realizadas três repetições da IHQ para cada amostra positiva para PrPSc. O diagnóstico por IHQ no tecido linforreticular foi considerado positivo quando o material apresentou um número de, no mínimo, três folículos linfoides com centros germinativos marcados pela técnica. Entre os resultados obtidos neste trabalho pode-se incluir o primeiro diagnóstico positivo para scrapie de genótipo resistente (ARR/ARR) não Nor98, na espécie ovina no Brasil, com marcação por IHQ nas tonsilas palatínicas, terceira pálpebra e mucosa reto-anal. Este animal era pertencente a um rebanho de ovinos mestiços Sufolk, no qual foram diagnosticados mais nove animais positivos para scrapie nas tonsilas palatínicas, terceira pálpebra e mucosas reto-anal. A coleta e envio de material de vários órgãos linfoides foi considerada importante por possibilitar a confirmação da presença ou não do agente em pelo menos dois deles, reduzindo o número de casos considerados suspeitos, o risco de falsos positivos, e parte, senão a totalidade, dos casos com material insuficiente para diagnóstico. Em necropsia, a coleta de tonsilas palatínicas mostrou-se eficaz pelo seu alto índice de marcação positiva. A coleta de amostras de sangue foi importante para a realização do teste de genotipagem, permitindo avaliar o grau de resistência/susceptibilidade do animal, complementando os resultados de IHQ. / Transmissible spongiform encephalopathies (TSEs), the prion diseases, occurs both in animals and in humans, are responsable for a transmissible and hereditary disease, and cause degenerative lesions in the brain tissue. The presence of an abnormal protein (PrPSc), instead of its normal form (PrPC), on the nervous and lymphoreticular tissue is characteristic of TSEs. This protein is highly insoluble and resistant to degradation by proteases and eventually settles in the gray matter in the form of amyloid plaques that causes massive death of neurons and glial cells, causing intense vacuolization in the affected tissue. After the establishment of the Bovine Spongiform Encephalopathy surveillance program, coordinated by the National Rabies and Other Encephalopathies Control Program, the Setor de Patologia Veterinária of UFRGS has been usually required to proceed necropsy and other diagnosis in suspicious animals. The immunohistochemistry (IHC) is the most specific technique actually used to TSEs identification, being increasingly used to diagnosis, traceability, pathogenesis study and providing comparative information on the molecular level. On the other hand, genotyping is an important tool on scrapie genetic susceptibility identification, making more secure the diagnosis, beyond to enable the atypical scrapie cases identification, like Nor98. This work consisted to performing IHC to prionic protein, on nervous system and lymphoreticular tissue, as scrapie diagnostic method in sheep and goat, associate to genotyping in sheep. Sheep tissues were sampled from Suffolk, Santa Inês, Dorper and crossbreed to proceed IHC and hematoxilin-eosin staining between 2009 and 2012. The samples were obtained by biopsy and necropsy to scrapie diagnose. Genotyping of codons 136, 154 and 171 of PRP protein was performed, as well as a few of codon 141. The monoclonal antibody anti-prion F98/160.1.5 and F99/97.6.1 was used at the IHC. For each positive sample three repetitions were performed. The diagnostic by IHC at lymphoreticular tissue was considered positive when it shows at minimum three follicles with germinal centers stained. Among the obteined results, could be included the first diagnostic of scrapie not Nor98 in resistant genotype (ARR/ARR) sheep in Brazil. This animal belongs to a Suffolk sheep flock in which were diagnosed more nine scrapie positive animals showing IHC staining on tonsils, third eyelid and rectal mucosa. The sampling and dispatch of many lymphoid tissues was considered important to enable the confirmation of agent presence or not in at least two of them, reducing the number of suspicious cases, the risk of false positive, and part, if not all, of cases with insufficient material for diagnosis. At necropsy, the tonsils collecting showed efficient by the it high positive staining level. Blood sampling becomes important to proceed genotyping test, allowing measure the animal resistance/susceptibility grade, complementing the IHC results.

Rhodococcus equi é um importante patógeno bacteriano em medicina veterinária, associado, sobretudo, a pneumonias piogranulomatosas em potros no primeiro semestre de vida. São descritos neste trabalho vinte casos de infecção por R. equi em potros recebidos para necropsia no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul entre janeiro de 1997 e janeiro de 2013. Os históricos clínicos obtidos com os veterinários apresentaram grande variabilidade e, mesmo os sinais clássicos de comprometimento respiratório e febre só foram vistos em metade dos casos. Os dados obtidos em uma visita a uma propriedade demonstram que a superpopulação de potros e a introdução de fêmeas no grupo de parição contribuíram para a ocorrência de um surto. Exames de necropsia e de histologia revelaram que pneumonia piogranulomatosa multifocal foi a forma de apresentação mais constante (dezenove casos), seguida por linfadenite piogranulomatosa (dez casos) e tiflocolite piogranulomatosa e ulcerativa (cinco casos). Três animais apresentaram osteomielite piogranuloamatosa, dos quais, dois em vértebras. Uveítes e polissinovites assépticas foram constatadas em três casos. Exame imuno-histoquímco anti-Rhodococcus equi revelou-se positivo em todos os pulmões com lesões, embora os linfonodos tenham sido positivos em apenas três das nove amostras testadas. O exame bacteriológico das amostras de necropsia foi positivo em quinze casos clínicos, assim como em uma amostra de solo da propriedade visitada. O exame de reação da polimerase em cadeia (PCR) revelou o gene de virulência VapA de R. equi em todos os isolados clínicos, mas não na amostra de solo. Adicionalmente os pulmões foram testados por imuno-histoquímica para Pneumocystis sp.e apresentaram marcação em treze dos vinte casos. / Rhodococcus equi is an important bacterial pathogen in veterinary medicine, especially associated with piogranulomatous pneumonia in foals under six months of age. Twenty cases of R. equi infection in foals received for necropsy at the Pathology Veterinary Sector (SPV) of the Federal University of Rio Grande do Sul (UFRGS) between January 1997 and January 2013 are described in this paper. Clinical history obtained with veterinary practitioners presented high variability, and even classical respiratory signs and fever were only observed in half of the cases. Data collected in an investigative visiting to a breeding farm showed that the foal superpopulation and the introduction of females to the parturition group contributed to the occurrence of an outbreak. Necropsy and histologic examinations revealed that multifocal piogranulomatous pneumonia was the most constant presentation (nineteen cases), followed by piogranulomatous lymphadenitis (ten cases) and piogranulomatous and ulcerative typhlocolitis (five cases). Three animals presented piogranulomatous osteomyelitis, two of them in vertebrae. Aseptic uveitis and polisynovitis were verified in three cases. Anti-Rhodococcus equi immunohistochemical examination stained positive in all lungs containing lesions, although lymphnodes have stained positive in only three of nine samples tested. Bacteriologic examination of the necropsy samples was positive in fifteen cases and in a soil sample from the visited breeding farm. Polymerase chain reaction (PCR) test revealed the VapA virulence factor of R.equi in all clinical isolates, but not in the soil sample. Additionally, the lungs were tested to the presence of Pneumocystis sp. by immunohistochemistry, and stained positive in thirteen of twenty cases.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-09-19T12:24:49Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação - Giwellington Albuquerque - AVALIAÇÃO IMUNOHISTOQUÍMICA DA ONCOPROTEÍNA E6, P16INK4a.pdf: 2878324 bytes, checksum: 0e191e85139b55d89a691fa2d3d6418f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-19T12:24:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação - Giwellington Albuquerque - AVALIAÇÃO IMUNOHISTOQUÍMICA DA ONCOPROTEÍNA E6, P16INK4a.pdf: 2878324 bytes, checksum: 0e191e85139b55d89a691fa2d3d6418f (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / CAPES / O Câncer de colo uterino é o quarto mais comum em mulheres no mundo. Sabe-se que a carcinogênese cervical precede da infecção e persistência do Papilomavírus humano (HPV), o qual tem a capacidade de se integrar ao genoma do hospedeiro introduzindo os genes E6 e E7. O produto desses genes, as oncoproteínas E6 e E7 perturbam o ciclo celular promovendo superexpressão da proteína p16INK4a e as metaloproteinases de matriz (MMP), que são moléculas capazes de promover a progressão das lesões cervicais uterinas. Nesse intuito, o presente estudo avaliou a expressão da oncoproteína E6, p16INK4a, metaloproteinase de matriz 3 (MMP-3) e inibidor tissular de metaloproteínase 2 (TIMP-2) nos diferentes graus de lesões e câncer cervical, associando com a presença do HPV e seus genótipos. Foram utilizadas 86 amostras de escovado cervical e de fragmentos de biopsias de mulheres que foram diagnosticadas citologicamente com lesões cervicais intraepiteliais e invasivas. Todas as amostras foram genotipadas e submetidas a técnica de imunohistoquímica para a identificação da oncoproteína E6-HPV16/18, p16INK4a, MMP-3 e TIMP-2. O perfil genotípico identificou o HPV16 (44,4%) como o mais prevalente, seguido por HPV31 (30,3%), HPV58 (15,1%), HPV18 (6,1%) e HPV33 (4,1%). A reação imunohistoquímica para E6 se mostrou mais intensa nos casos de invasão, assim como p16INK4a. Entretanto MMP-3 e o TIMP-2 se mostraram mais reativos em lesões pré-malignas. Portanto, este estudo mostra maior prevalência do HPV-16 em mulheres atendidas no Hospital das Clínicas – UFPE e sugere que a oncoproteína E6 e a proteína p16INK4a são biomarcadores úteis para aumentar a precisão do diagnóstico precoce de câncer de colo do útero. Contudo, em lesões pré-malignas os biomarcadores clinicamente úteis seriam MMP-3 e TIMP-2. / Cervical cancer is the fourth most common in women worldwide. Cervical carcinogenesis is known to precede the infection and persistence of human papillomavirus (HPV), which has the ability to integrate into the host genome by introducing the E6 and E7 genes. The product of these genes, E6 and E7 oncoproteins disrupt the cell cycle promoting overexpression of p16INK4a protein and matrix metalloproteinases, molecules which are able to promote the progression of cervical uterine injury. To that end, the present study aimed to evaluate the expression of the oncoprotein E6, p16INK4a, matrix metalloproteinase 3 and the tissue inhibitor of metalloproteinase 2 in varying degrees of injuries and cervical cancer, associated with the presence of HPV and its genotypes. 86 cervical brush samples were used and biopsies fragments of women who were diagnosed cytologically with intraepithelial cervical lesions and invasive. All samples were genotyped and subjected to immunohistochemistry to identify the oncoprotein E6, HPV16 / 18, p16INK4a, MMP-3 and TIMP-2. The genotype profile identified HPV16 (44.4%) was the most prevalent, followed by HPV31 (30.3%), HPV58 (15.1%), HPV18 (6.1%) and HPV33 (4.1%). The immunohistochemical reaction for E6 was more reactive in the case of invasion, as well as p16INK4a. However MMP-3 and TIMP-2 were more reactive in premalignant lesions. Therefore, this study showed a higher prevalence of HPV-16 in women treated at the Hospital - UFPE and suggests that the E6 oncoprotein and p16INK4a protein biomarkers are useful to improve the accuracy of early diagnosis of cervical cancer. However, in premalignant lesions would be clinically useful biomarkers MMP-3 and TIMP-2.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-29T22:44:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Karina Brizeno Ferreira Lopes.pdf: 26868482 bytes, checksum: 12ac82c1bdbd13a260185b7222810e89 (MD5) / Rejected by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br), reason: on 2018-09-10T19:05:56Z (GMT) / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-11T17:31:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Karina Brizeno Ferreira Lopes.pdf: 3019279 bytes, checksum: 10bac9d318bcbb0618f8a68d57520276 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-11T18:46:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Karina Brizeno Ferreira Lopes.pdf: 3019279 bytes, checksum: 10bac9d318bcbb0618f8a68d57520276 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-11T18:46:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Karina Brizeno Ferreira Lopes.pdf: 3019279 bytes, checksum: 10bac9d318bcbb0618f8a68d57520276 (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Patologias da tireoide sob a forma de nódulos são frequentes na população. Apesar da maioria ser benigno, os nódulos malignos exigem tratamento preciso, visando melhorar a sobrevida e diminuir as morbidades relacionadas a doença e a seu tratamento. Os principais métodos diagnósticos não cirúrgicos para o estudo desta patologia são a ultrassonografia e a punção aspirativa com agulha fina (PAAF), porém estes ainda apresentam limitações. Portanto, estudos moleculares podem ser uma alternativa para esta avaliação, como a análise das metaloproteinases de matriz (MMP). As MMP são enzimas degradadoras da matriz extracelular e estão fortemente relacionadas com o processo carcinogênico de vários tumores, principalmente os subtipos MMP-2 e MMP-9. Suas atividades podem ser suprimidas pelos inibidores teciduais de metaloproteinases (TIMP), pois a redução dos valores séricos destes inibidores são observadas em diversos cânceres. Com base nisso, este trabalho objetivou o estudo de 90 pacientes portadores de nódulos tireoideanos, visando demonstrar a relação entre a expressão das MMP e TIMP com os achados citológico através do método de imunocitoquímica, realizado com amostras coletadas por PAAF guiada por ultrassonografia destes nódulos. Além disso, foi realizado uma avaliação sobre o perfil epidemiológico destes pacientes e uma associação dos achados ultrassonográficos ao diagnóstico pós-punção. A análise dos dados mostrou que as proteínas MMP-2, MMP-9 e TIMP-2 estão superexpressas nas lesões malignas tireoideanas, com resultados respectivamente de 100%, 100% e 81,81%. A imunoreatividade para MMP-9 e TIMP-2 foi útil para distinguir benignidade e malignidade. Observou-se uma tendência a malignidade em pacientes do sexo masculino, com idade superior a 45 anos e submetidos ao iodo radioativo. Quanto aos achados ultrassonográficos foi evidenciado que a composição sólida, hipoecogenicidade, margens não circunscritas, eixo perpendicular e presença de microcalcificação podem ser utilizados como parâmetros para prever suspeição destes nódulos; e a classificação TIRADS deve ser aplicada na prática clínica para indicar quando realizar a PAAF destes nódulos. / Pathologies of the thyroid gland in the form of nodules are quite frequent in the population. Although most are benign, malignant nodules when present require precise treatment to improve survival and decrease disease-related morbidities and treatment. The main current non-surgical diagnostic methods for the study of this pathologist are ultrasonography and fine needle aspiration, but these still have limitations. Therefore, molecular studies may be useful as an alternative to this evaluation; among these alternatives is the analysis of matrix metalloproteinases (MMP). MMPs are extracellular matrix degrading enzymes and are strongly related to the carcinogenesis process of several tumors, mainly the MMP-2 and MMP-9 subtypes. Its activity can be suppressed by the tissue inhibitors of metalloproteinases (TIMP), and the reduction of the serum values of these inhibitors are observed in several cancers. Based on this, this project aimed at the study of 90 patients with thyroid nodules, aiming to demonstrate the relationship between MMP and TIMP expression with the cytological findings of these lesions through the immunocytochemistry method, performed with samples collected by fine-needle aspiration puncture guided by ultrasonography of these nodules. In addition, an evaluation was made on the epidemiological profile of these patients and an association of the ultrasound findings to the post-puncture diagnosis. Data analysis showed that MMP-2, MMP-9 and TIMP-2 proteins are overexpressed in thyroid malignancies. Immunoreactivity for MMP-9 and TIMP-2 was useful to distinguish benignity and malignancy in lesions of this gland. There was a tendency to malignancy in male patients, aged over 45 years and submitted to radioactive iodine. Regarding the ultrasound findings, it was evidenced that the solid composition, hypoechogenicity, noncircumscribed margins, perpendicular axis and presence of microcalcification can be used as parameters to predict thyroid nodule suspicion; and the TIRADS classification should be applied in clinical practice to indicate when to perform fine-needle aspiration.

Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T12:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barreto_IcleiaSiqueira_D.pdf: 12646702 bytes, checksum: 9cc75301ed45a05b163a8e355ac78a7e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Pólipos tonsilares são lesões não neoplásicas usualmente constituídas por quantidades variáveis de tecidos linfóide, vascular e conjuntivo. Todos são considerados como proliferações hamartomatosas, mas o perfil dos componentes vascular e conjuntivo, necessita de estudo mais aprofundado. O sistema vascular das tonsilas é complexo e inclui estruturas altamente especializadas (Vênulas do Endotélio Alto- VEA), envolvidas no tráfico dos linfócitos para os tecidos linfóides. Foram estudados 14 pólipos tonsilares e 26 tonsilas palatinas, usando CD34 (para vasos sanguíneos e VEA), CD105 (para VEA), D2-40 (para vasos linfáticos), Ki-67 (para índice proliferativo), colágenos I e III, fibronectina e tenascina-C (para proteínas da matriz extracelular). Os pólipos mostraram aumento significante da área linfática total, enquanto o número de vasos (sanguíneos e linfáticos) e a área vascular sanguínea não diferiram significativamente das tonsilas controles. Raras células endoteliais expressaram Ki-67. Nos pólipos, pela primeira vez foi demonstrada a presença de VEAs, as quais foram identificadas em meio ao tecido linfóide. A quantidade deste último correlacionou-se positivamente com a densidade destas estruturas. Os pólipos também apresentaram menor quantidade de fibronectina e colágenos I e III, os quais estavam distribuídos de forma desorganizada. A expressão de tenascina-C foi pouco frequente nos pólipos e nas tonsilas controles. Concluindo, os pólipos tonsilares são compostos por tecido conjuntivo desorganizado e canais linfáticos dilatados, que podem ser consideradas proliferações hamartomatosas. Todavia, o componente linfóide possivelmente é reacional, devido a sua relação com as VEA. O fenótipo altamente diferenciado das VEAs e sua biologia complexa não são condizentes com natureza hamartomatosa / Abstract: Tonsillar polyps are nonneoplastic lesions usually composed of a variable amounts of lymphoid, vascular and connective tissues. All are generally assumed to be hamartomatous proliferations but the profile of vascular and connective components has yet to be explored. The vascular system of the tonsils is complex and includes highly specialized structures (i.e. high endothelial venules -HEVs) involved in lymphocyte homing into lymphoid tissues. In 14 tonsillar polyps and 26 control tonsils an immunohistochemical study was performed using CD34 (for blood vessels and HEVs), CD105 (for HEVs), D2-40 (for lymphatic vessels), Ki-67 (for proliferating index), collagens I and III, fibronectin and tenascin-C (for proteins of the extracellular matrix). The polyps showed increased total lymphatic area, whereas number of vessels (sanguineous and lymphatic) and blood vascular area did not differ significantly from those of control tonsils. Rare Ki-67+ endothelial cells were found. In the polyps, HEV was encountered amid lymphoid tissue and its amount correlated positively with the HEV density. The polyps also presented lesser amounts of fibronectin and collagens I and III which were distributed in a disorganized fashion. Tenascin-C expression was uncommon in the polyps and control tonsils. In conclusion, the tonsillar polyps are composed of disorganized connective tissue and lymphatic channels which can be considered hamartomatous proliferations. However, the lymphoid component is possibly reactive due to its relationship with the HEVs. The highly differentiated phenotype of the HEVs and its complex biology are not in agreement with what would be expected for a component of hamartomatous nature / Doutorado / Anatomia Patologica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Alexandre Augusto Zaia / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T06:09:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_JoseFlavioAffonsode_D.pdf: 2803790 bytes, checksum: 523bf1872c348721161eafd32bb6f736 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Este estudo teve como objetivos identificar por técnica de imunohistoquímica linfócitos T4, linfócitos T8, linfócitos B, macrófagos e mastócitos em tecidos pulpares normais e inflamados de dentes humanos e correlacionar a presença dessas células com os sinais e sintomas apresentados pelos pacientes e aspectos clínicos dos dentes. Após a determinação do diagnóstico clínico das condições pulpares, 24 polpas normais e 18 polpas inflamadas foram coletadas de dentes extraídos clivados ou por extirpação em dentes que foram submetidos à endodontia. As polpas foram processadas histologicamente, sendo que uma secção tecidual de cada amostra foi corada por hematoxilina e eosina e as demais foram utilizadas para a imunohistoquímica. As lâminas foram analisadas em microscopia de luz. Cinco campos com maior intensidade de marcação foram capturados, tiveram suas áreas mensuradas e o número de células contado. Em polpas normais, os linfócitos T8 apresentaram maior número de células marcadas, seguidos pelos linfócitos T4, macrófagos, linfócitos B e mastócitos. Diferenças significantes foram encontradas, com maior número de linfócitos T8 quando comparados aos linfócitos B e mastócitos (Kruskal-Wallis - p< 0,05). Em polpas inflamadas, os macrófagos apresentaram maior número de células positivas seguidos dos linfócitos T8, T4, B e mastócitos. Não houve diferença estatística significante entre as densidades das células estudadas em polpas inflamadas (Kruskal-Wallis - p> 0,05). Dessa forma, concluiu-se que os linfócitos T4, T8 e B, macrófagos e mastócitos podem ser identificados em diferentes proporções nos tecidos pulpares normais e inflamados. Entretanto, não houve correlação entre a sintomatologia apresentada pelos pacientes e o aumento do número dessas células em todos os tecidos pulpares classificados clinicamente como inflamados / Abstract:The aim of this study was to identify by immunohistochemical technique T4 lymphocytes, T8 lymphocytes, B lymphocytes, macrophages and mast cells in normal and inflamed human dental pulps and to correlate the presence of these cells to the signals and symptoms presented by the patients and the teeth clinical aspects. After the clinical diagnoses, 24 normal dental pulps and 18 inflamed dental pulps were collected from extracted teeth or by extirpation during endodontic procedures. After dental pulp histological procedures, one tissue section from each specimen was stained with hematoxylin and eosin and the other sections were used to immunohistochemical analyses. The slides were analyzed by light microscopy. Five fields with more intensive immunostaining were captured, measured and the positive cells were counted. In normal pulps, T8 lymphocytes presented more positive cells followed by T4 lymphocytes, macrophages, B lymphocytes and mast cells. Statistical significance was founded with more T8 lymphocytes than B lymphocytes and mast cells (Kruskal-Wallis ¿ p< 0.05). In inflamed dental pulps, macrophages presented more positive cells, followed by T8, T4, B lymphocytes and mast cells. These data were not statistically significant (Kruskal-Wallis ¿ p> 0.05). It was concluded that T4, T8 and B lymphocytes, macrophages and mast cells could be identified with different rates in normal and inflamed dental pulps. However, no correlation was detected between the patient¿s symptomatology and these cells increase in all inflamed dental pulps / Doutorado / Endodontia / Doutor em Clínica Odontológica

Orientador: Jose Vassallo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T13:44:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Chagas_CristianoAparecido_D.pdf: 2698514 bytes, checksum: 839362fd3abba979b5a2b1472c7865a6 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Contexto: o herpesvírus humano tipo 8 (HHV8) foi recentemente associado a neoplasias humanas, como o sarcoma de Kaposi e o linfoma não Hodgkin de células B das cavidades serosas em pacientes infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV), além da doença de Castleman multicêntrica. Estudos epidemiológicos mostraram soropositividade em porcentagens variáveis da população, inclusive em crianças. Acredita-se que a forma de transmissão seja predominantemente sexual nos adultos, mas existem formas de infecção não relacionadas à atividade sexual que explicam a soropositividade em crianças e em indivíduos que não apresentaram contato sexual prévio. O vírus foi demonstrado em células epiteliais orais descamadas, mas há apenas um raro relato sobre sua presença no anel de Waldeyer em um individuo HIV positivo. Objetivos: detectar a presença do antígeno nuclear latente (LNA-1) e de RNAm do HHV8 em tecidos amidalianos e adenoideanos de indivíduos de até 20 anos de idade; em caso de reatividade, verificar quais tipos celulares albergam o vírus (linfóides, endoteliais, estromais, epiteliais); verificar se existe preferência por um dos dois órgãos estudados, amídalas ou adenóides; verificar em que idade a freqüência de positividade, se existir, se concentra (menor que 2 anos; 2 a 5; 6 a 10; maior que 10 anos); comparar a reatividade dos dois métodos. Métodos: estudo retrospectivo em amídalas e adenóides previamente fixadas em formalina e incluídas em parafina. Um total de 343 tecidos do anel de Waldeyer foi analisado (181 amídalas e 162 adenóides), de 293 pacientes (174 do sexo masculino e 119 do feminino; média de idade 6,05 anos, desvio padrão 3,80; mediana de idade 5 anos). A detecção de antígenos proteicos do vírus foi feita por imunoístoquímica (IQ), utilizando um anticorpo anti-LNAl, revelando-se a reação pelo método do LSAB+. A detecção do RNAm viral foi feita por hibridização in situ (HIS), utilizando-se um coquetel de sondas T1-1. Resultados/Conclusões: em 20 casos (6,83%) houve reatividade para o HHV8 em células morfologicamente caracterizadas como linfóides. Em 3 destes casos células epiteliais foram também positivas. Em todos os 20 casos houve reatividade à HIS, porém em apenas 2 casos houve reatividade concomitante à IQ. Em 19 casos houve reatividade nas tonsilas e em apenas um na adenóide. Houve percentual decrescente de positividade nas faixas etárias de pacientes menores de 2 anos, até 5, até 7 e maiores de 10 anos, embora sem diferenças significativas. Nossos dados reforçam a teoria da contaminação pelo HHV8 peia saliva já na faixa etária pediátrica. O método de hibridização molecular in situ mostrou-se muito superior à imunoistoquímica, provavelmente devido à pequena quantidade de material proteico nas células infectadas / Abstract: Objective: Human herpesvirus 8 (HHV8) has been associated with multicentric Castieman's disease, Kaposi's sarcoma and effusion non-Hodgkin's lymphoma. Epidemiological studies have shown seropositivity in variable proportions of populations. It seems to be sexually transmitted among adults and through oral contact among children. The virus has been demonstrated in desquamating oral epithelial cells, but there was only a rare report on its presence in the Waldeyer's ring in an HIV positive subject. The purpose of the present study is to detect HHV8 in tonsils and adenoids from children up to 20 years of age in which these organs had been surgically removed due to hypertrophy, using immunohistochemistry and in situ hybridization. Methods: Paraffin wax-embedded sections consisting of 181 tonsils and 162 adenoids from 293 patients were analyzed. HHV8 was detected by immunohistochemistry (IHC) using the anti-LNAl antibody (Novocastra) and the LSAB+ detection system (Dako). For the in situ hybridization (ISH), the Tl-1 probe for the viral mRNA and the detection system used were provided by Novocastra. Results: In 20 cases (6.83%), HHV8 was detected in cells morphologically characterized as lymphoid. In three of them epithelial cells were also positive. In 19 cases, the virus was detected in tonsils and in just 1 case in an adenoid. In all 20 cases detection was possible by ISH, whereas in only 2 of them there was a concomitant positivity by IHC. Discussion/Conclusion: Our data support the oral route of contamination by HHV8 in children, in whom tonsils and adenoids may harbor the virus. It is found especially in tonsils and only rarely in adenoids. In these organs ISH is the method of choice to detect this virus, probably due to the small amount of viral proteins / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientadores: Thais Mauad, Pablo Agustin Vargas / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-06T14:43:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_LiliaAlves_M.pdf: 978269 bytes, checksum: bfa78078389c5bf2cc8abfe5a8062e25 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O lnibidor de Protease Liberada por Leucócitos (SLPI) é um inibidor de protease endógeno, originalmente caracterizado a partir de fluído salivar proveniente da glândula parótida. Além da ação inibitória contra o Vírus da Imunodeficiência Humana (IDV), o SLPI também possui atividades anti-bacterianase anti-rungicas. Os tecidos orais são sítios comuns de infecção em pacientes com AIDS. SLPI é expresso em glândulas submandibulares (GSM), mas existem poucos trabalhos sobre a expressão desta proteína em pacientes com infecções associadas ao HIY. O objetivo deste estudo foi analisar a expressão imunohistoquímica do SLPI em GSM de pacientes que morreram de AIDS. Foram analizadas amostras de GSM de 36 pacientes que morreram de AIDS (10 pacientes não apresentavam alterações histológicas em GSM, 10 pacientes apresentavam sialodenite, 08 pacientes apresentavam infecção por micobactérias e 08 pacientes apresentavam infecção por citomegalivírus (CMV)), e 10 pacientes IDV negativos (grupo controle). A expressão do SLPI foi quantificada nos ácinos serosos através de um analisador de imagens, com os resultados expressos em porcentagem de área corada. Foi verificada uma maior expressão de SLPI nas GSM de pacientes com AIDS apresentando infecção por CMV (~ SLPI= 37,37:f:14,45) quando comparado com todos os outros grupos (p= 0,009). Não houve diferença significativa entre o grupo controle (% SLPI= 22,7O:f:9,42) e o grupo de pacientes com AIDS sem alterações histúlógicas em GSM (%SLPI= 18,1O:f:7,58), pacientes com sialodenite (%SLPI= 17, 13:f:5 ,36), ou ainda pacientes com infecção por micobactérias (%SLPI= 21,09:f:4,66). Estes resultados indicam que a infecção por CMV aumentou a expressão de SLPI em GSM de pacientes com AIDS / Abstract: Seeretory Leukoeyte Proteinase Inhibitor (SLPI) is an endogen proteinase inhibitor originalIy eharaeterized ITom parotid fluids. Besides an inhibitory aetion on human immunodefieieney virus (IllV), SLPI possess also anti-baeterial and anti-fungical activities. The oral tissues are a eommon site of infeetious eonditions in patients with AIDS. SLPI protein is expressed in the submandibular glands, but there are few data on its expression in patients with assoeiatedIllV infections. The objeetive of this study was to analyze the immunohistoehemistry expression of SLPI in the submandibular glands (SMG) of patients that died ITom the AIDS. We analyzed SMG samples of 36 patients that died ITom AIDS (10 patients with no histologieal alterations, 10 patients had ehronie non specifie sialadenitis, 8 had myeobacteriosis and 8 had eytomegalovirus infeetion (CMV), and 10 IllV negative (eontrol group). SLPI expression was in the serous aeinar eelIs, quantified with image analysis, results being expressed in pereentage of stained areas. There was a statistieally signifieant higher expression of SLPI in AIDS patients with CMV infection (0,10 SLPI = 37.371:14.45) when eompared to alI other groups (p = 0.009). There were no signifieant differenees among eontrol subjeets (%SLPI = 22.701:9.42) and AIDS patients without histologieal alterations (%SLPI = 18.101:7.58), patients with ehronie non-speeifie sialadenitis (% SLPI = 17.131:5.36) or myeobaeterial infection (% SLPI = 21.091:4.66). These results indieate that the CMV infeetion inereases SLPI expression in the submandibular glands of AIDS patients / Mestrado / Patologia / Mestre em Estomatopatologia

Orientador: Albina Messias de Almeida Milani Altemani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T08:50:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barreto_IcleiaSiqueira_M.pdf: 3099004 bytes, checksum: e7104aa2bedc2fa4b0a6e9751cf9a4d1 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Pólipos linfóides tonsilares são lesões pouco comuns que têm sido raramente estudadas. Nosso objetivo foi descrever as características clínicas, histopatológicas e imunoistoquímicas em seis pólipos tonsilares, cujo tecido linfóide representava mais que 80 % da lesão, comparando-as com as tonsilas palatinas-controles. Os sintomas apresentados foram de massa tonsilar e/ou disfagia. Não foram detectados fatores predisponentes. Microscopicamente, todos os pólipos continham folículos com centros germinativos, criptas revestidas por linfoepitélio e pequena quantidade de tecido fibroso no centro da lesão. Células B (CD 20+), células T (CD45RO+), plasmócitos (kappa+ e lambda+) e vasos (linfáticos ¿D2-40+ e sanguíneos ¿CD34+), apresentaram distribuição e padrão arquitetural como o esperado para o tecido linfóide da tonsila palatina. Pólipos linfóides tonsilares são, provavelmente, hamartomas caracterizados por um crescimento exagerado dos elementos linfóides, mantendo um padrão arquitetural e uma composição celular similar àquela da tonsila palatina / Abstract: Tonsillar lymphoid polyps are uncommon lesions which have rarely been studied. We aim to describe the clinical, histopathologic, and immunohistochemical features of six tonsillar polyps in which lymphoid tissue represented more than 80% of the lesion, comparing them with sixteen control tonsils. Presenting symptoms were tonsillar mass and/or dysphagia. No predisposing factor was detected. Microscopically all polyps contained follicles with germinal centers, crypts lined by lymphoepithelium and a small amount of fibrous tissue in the centre of the lesion. B cells (CD20+), T cells (CD45RO+), plasma cells (kappa+ and lambda+) and vessels (lymphatic - D2-40+ and blood ¿ CD34+) presented distribution and architectural patterns as expected for lymphoid tissue of a palatine tonsil. Tonsillar lymphoid polyps are possibly hamartomas characterized by overgrowth of lymphoid elements which maintain an architectural pattern and cellular composition similar to those of the palatine tonsil / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Valeria Helena Alves Cagno Quitete / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T18:35:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Favaro_WagnerJose_D.pdf: 27800825 bytes, checksum: 669ea6b4953a978438cba3bd83027afd (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Estudos clínicos e experimentais indicam que o diabetes provoca alterações no eixo hipotálamo-hipófise-gonadal, prejudicando o funcionamento prostático. Assim, os objetivos do presente estudo foram caracterizar os aspectos morfológicos, proliferativos e imunológicos dos compartimentos epitelial e estromal do lobo ventral da próstata de camundongos diabéticos após controle glicêmico prolongado e reposição hormonal. Além disso, correlacionaram-se os resultados obtidos a possíveis processos de patogênese prostática. Um total de 40 camundongos machos da linhagem Nod (diabético não-obeso) e 08 camundongos controles BALB/c/ Uni, com 18 semanas de idade, foram divididos em seis grupos, após 20 dias de diabetes: Grupo Controle recebeu injeções subcutâneas de 5mL/Kg de soro fisiológico 0,9% diariamente por 20 dias; Grupo Diabético recebeu o mesmo tratamento que o grupo controle; Grupo Diabético-Insulina recebeu injeções subcutâneas de 4-5UI de insulina NPH diariamente por 20 dias; Grupo Diabético- Testosterona recebeu injeções subcutâneas de 5mg/Kg de Cipionato de Testosterona em dias alternados por 20 dias; Grupo Diabético-Estrógeno recebeu injeções subcutâneas de 25µg/Kg de 17ß-estradiol em dias alternados por 20 dias; Grupo Diabético-Insulina- Testosterona-Estrógeno recebeu tratamento simultâneo com insulina, testosterona e estrógeno, nas mesmas concentrações que nos grupos diabético-insulina, diabéticotestosterona e diabético-estrógeno. Após 20 dias de tratamento todos os animais foram sacrificados e amostras do lobo ventral da próstata foram coletadas para análises morfológicas, morfométricas, imunohistoquímicas, Western Blotting e hormonais. Os resultados mostraram marcantes desorganizações estruturais e diminuição das proteínas de adesão, a e ß distroglicanas, as quais foram mais intensas no grupo diabético em relação aos demais grupos. O estado diabético mostrou uma taxa de proliferação e apoptose duas vezes maior em relação ao grupo controle. Ainda, os resultados mostraram diminuição dos níveis séricos de testosterona e seus receptores, sendo que o grupo diabético apresentou menor valor para essa variável seguido em ordem crescente pelos grupos diabético-insulina, diabético-testosterona, diabético-estrógeno e diabético-insulina-testosterona-estrógeno. Os níveis séricos de estradiol e seus receptores tiveram relação oposta à testosterona. O receptor de IGF-1 apresentou intensa localização no grupo diabético. Assim, pode-se concluir que o diabetes comprometeu o balanço hormonal e a interação epitélio-estroma, causando prejuízo morfológico e funcional desse órgão caracterizado pela diminuição da imunolocalização das proteínas de adesão. A associação entre insulina e reposição de hormônios sexuais esteróides foi determinante para a recuperação estrutural e hormonal. Além disso, o aumento da imunolocalização de IGF-1 sugeriu que o diabetes pode ser considerado um fator deflagrador de processo mitogênico na próstata. Contudo, a reposição hormonal não recuperou os níveis normais de IGFR-1. Por outro lado, a reposição de insulina e hormônios esteróides indicou recuperação parcial dos níveis desse receptor. Um bom entendimento da relação entre esses fatores poderá melhorar as atuais terapias para o tratamento de doenças prostáticas, bem como dos processos diagnósticos nesse órgão. / Abstract: Diabetes adversely affects prostate morphology and function through alterations in the hypothalamic-hypophyseal-gonadal axis. Thus, the aims of this study were to characterize morphological, proliferative and immunological features of the prostate of diabetic mice after long term glycemic control and hormonal replacement, and as well as to relate these parameters to prostate pathogenesis. A total of 40 mice Nod (Non-obese diabetic) and 8 control mice (BALB/c/Uni), 18 weeks old, were divided into six groups after 20 days of diabetes: the control group received a daily dose of 0.9% NaCl (5 mL/kg, s.c.) for 20 days, as did the diabetic group. The diabetic-insulin group received daily doses of NPH insulin (4-5 IU, s.c.), the diabetic-testosterone group received a supraphysiological dose of testosterone cypionate (5 mg/kg, s.c.) every other day for 20 days, the diabetic-estrogen group received a supraphysiological dose of 17ß-estradiol (25 µg/kg, s.c.) every other day for 20 days and the diabetic-insulin-testosterone-estrogen group received insulin, testosterone and estrogen, simultaneously, at the same concentrations given to the other groups. The mice were sacrificed after 20 days of treatment and samples from the prostatic ventral lobe were processed for morphological, morphometrical, immunological, western blotting and hormonal analyses. The results showed structural disorganization and diminished adhesion proteins, a and b dystroglycans, which were more intense in the diabetic group than in the other groups. The diabetic state showed a proliferation and apoptosis rate that was two times higher than that found in the control group. Also, there was a decrease in serum testosterone levels (diabetic mice and diabetic-insulin-testosteroneestrogen mice had the greatest and smallest decreases, respectively) and in the level of androgen receptor immunolocalization. The serum estrogen level and its receptor showed changes opposite to those of testosterone and its receptor. The greatest IGF receptor localization occurred in diabetic mice. Thus, it could be concluded that diabetes disturbed the prostatic hormonal balance and the stroma-epithelium interaction, leading to morphological and functional imbalance of this organ characterized by the decrease immunolocalization of the adhesion proteins. Concomitant treatment with insulin and steroid hormone therapy was determinative for glandular structural and hormonal restoration. Furthermore, the increased immunolocalization of IGF-1 suggested that diabetes may be an important factor to the mitogenic process. However, hormonal therapy did not restore the distribution of IGF-1 to normal. On the other hand, concomitant treatment with insulin and steroid hormone therapy showed partial recovery of the IGFR-1 levels. A proper understanding of the relationship between these two factors could improve the current therapies for treating prostate diseases as well as diagnostics. / Doutorado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural