Orientador: Antonio Celso Pezzato / Coorientador: José Roberto Sartori / Resumo: Foi realizado um experimento para avaliar o efeito dos níveis de zinco na dieta de frangos de corte, sobre o desempenho, a imunidade e saúde. O ensaio foi realizado em aviário experimental, o delineamento foi inteiramente casualisado com cinco níveis de zinco, totalizando 5 tratamentos com sete repetições, os tratamentos consistiram em 50, 75, 100, 125 e 150% da exigência de zinco segundo Rostagno et al. (2011), sendo o tratamento 100% (controle): 81,3; 71,5; 65 ppm de zinco nas fases pré- incial, inicial e crescimento, respectivamente. As aves foram divididas em boxes, sendo cada box uma unidade experimental com 33 aves cada. E aos 35 dias de idade foi realizado um desafio com LPS de E. coli. Foram avaliados os parâmetros de desempenho: conversão alimentar, consumo de ração, peso corporal, ganho de peso e viabilidade; bioquímicos: zinco no sangue, superóxido dismutase e glutationa peroxidase no soro sanguíneo; e imunológico: título de anticorpos para doença de Newcastle de 1 a 35 dias de idade. Após os 35 dias de idade foram avaliados peso relativo de órgãos, o teor de zinco na tíbia inteira, fêmur sem a medula óssea, medula óssea do fêmur e no fígado, atividade da superóxido dismutase e glutationa peroxidase no soro sanguíneo e no fígado e a produção de reativos de oxigênio e nitrogênio por macrófagos peritoniais; em todos os níveis de zinco em aves desafiadas por LPS ou não. Os dados foram avaliados pela análise de variância (ANOVA) através do procedimento General Lineal Model (GLM), com auxílio do programa estatístico SAS 9.3. O nível ótimo de zinco dietético foi determinado pela análise de regressão no modelo da Nova Compartimental (���� = ��������−�������� (1+ ����−����(����−����) ) ) utilizando-se o programa Excel (xlsx) com exceção dos dados de Peroxido de Hidrogênio e Oxido Nítrico em que o... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: An experiment was carried out to evaluate the effect of zinc levels on the broiler diet on performance, immunity and health. The experiment was carried out in experimental fowl, the design was completely randomized with five levels of zinc, totaling 5 treatments with seven replicates, treatments consisted of 50, 75, 100, 125 and 150% of the zinc requirement according to Rostagno et al. (2011), the treatment being 100% (control): 81.3; 71.5; 65 ppm of zinc in the pre-intial, initial and growth phases, respectively. The birds were divided into boxes, each box being an experimental unit with 33 birds each. And at 35 days of age a challenge was performed with E. coli LPS. Performance parameters were evaluated: feed conversion, feed intake, body weight, weight gain and viability; Biochemicals: zinc in the blood, superoxide dismutase and glutathione peroxidase in blood serum; And immunological: titer of antibodies to Newcastle disease from 1 to 35 days of age. After 35 days of age, relative body weight, zinc content in the entire tibia, femur without the bone marrow, bone marrow of the femur and liver, superoxide dismutase activity and glutathione peroxidase in blood serum and liver were evaluated. Production of oxygen and nitrogen reactives by peritoneal macrophages; At all levels of zinc in LPS challenged birds or not. Data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) using the General Linear Model (GLM) procedure, using the statistical program SAS 9.3. The optimal level of dietary zinc was determined by the Regression analysis in the New Compartmental (���� = ��������−�������� (1+ ����−����(����−����) ) ) using the program Excel (xlsx) with the exception of Hydrogen Peroxide and Nitric Oxide data in which the optimum level of dietary zinc was determined by the regression analysis, Broken Line, using the Proc Reg procedure of SAS 9.3, with the aid of... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo:A leishmaniose visceral é uma importante doença parasitária com distribuição mundial e que afeta homens e animais. Existem relatos de envolvimento encefálico durante a infecção, mas sua patogenia ainda não foi completamente elucidada. Com o presente estudo, objetivamos a avaliação de quimiocinas relacionadas com a resposta inflamatória no encéfalo e marcadores da integridade da barreira hematoencefálica em cães naturalmente infectados. Também foi estabelecido um modelo experimental murino que permite a avaliação da dinâmica da infecção, bem como localização do parasita e resposta inflamatória in vivo. Cães naturalmente infectados apresentaram um perfil específico de quimiocinas no encéfalo, altamente quimioatrativo para linfócitos T, além de evidente perda da integridade da barreira hematoencefálica, com elevado quociente de albumina e altas concentrações de anticorpos anti-Leishmania no líquido cefalorraquidiano. Utilizando inovadoras técnicas moleculares e de imagiologia in vivo, foi possível determinar a presença do parasita no encéfalo de camundongos Balb/c experimentalmente infectados, bem como sua localização intra-craniana. A inflamação no encéfalo, avaliada nos primeiros quatro meses pós-infecção, apresentou duas fases distintas, uma fase aguda nos primeiros quatorze dias, e uma fase de reinflamação após três meses de infecção. Conjuntamente, os dados desse estudo permitiram confirmar o envolvimento encefálico durante a leishmaniose visceral, e reforçam o fato de que o comprometimento encefálico tem sido negligenciado durante a leishmaniose visceral / Abstract:Visceral leishmaniasis is an important parasitic disease, with worldwide distributions that affects humans and animals. There are reports of brain involvement during the infection; however, its pathogenesis has not been completely elucidated. Therefore, with this study, we aimed the evaluation of the inflammatory response in the brain and the integrity of the blood-brain barrier in naturally infected dogs, and the establishment of an experimental mice model that could allow the evaluation of the infection dynamics, as well as the localization of the parasite and the inflammatory response in vivo. Naturally infected dogs presented a specific chemokine profile in the brain, highly attractive to T-lymphocytes, besides the evident blood-brain barrier disruption, with increased albumin quota and elevated concentrations of anti-Leishmania antibodies in the cerebrospinal fluid. Using molecular techniques and state-of-the-art in vivo imaging tools, we could determine the presence of parasites in the brain of experimentally infected Balb/c mice, as well as its intracranial localization. Brain inflammation, evaluated during four months post-infection, presented two distinct phases, one acute phase in the first fourteen days, and one phase of re-inflammation after three months of infection. Altogether, the data from this study allow us to confirm that the brain is affected during visceral leishmaniasis, and reinforce the fact that the brain involvement has been neglected during visceral leishmaniasis / Orientador:Gisele Fabrino Machado / Banca:Karen Regina Lemos / Banca:Valéria Marçal Felix de Lima / Banca:Cáris Maroni Nunes / Banca:Antonio Carlos Alessi / Doutor

O chá verde (CV) é um fitoterápico produzido a partir da planta Camellia sinensis e apresenta propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias, anticancerígenas e antiobesidade. Foi realizado um estudo para investigar se o CV seria capaz de modular alguns parâmetros funcionais de linfócitos de animais induzidos à obesidade por dieta hipercalórica. Os grupos suplementados receberam 500 mg/kg de CV durante 22 dias seguida da dieta hipercalórica por mais 44 dias acompanhada também do tratamento com o CV. O tratamento com o CV reduziu a proliferação celular, a atividade das enzimas metabólicas hexoquinase e glicose-6-fosfato desidrogenase, aumentou a atividade de enzimas antioxidantes, diminuiu a produção de espécies reativas de oxigênio, a produção de citocinas pró- inflamatórias (IL-6, IL-1β, TNF-α) e restaurou os índices de IL-10 que se encontrava diminuído no grupo obeso. Os efeitos observados pelo CV podem proporcionar um ambiente mais adequado para o bom funcionamento celular, diminuindo a produção de mediadores inflamatórios que estão presente na obesidade. / Green tea (GT) is a phytochemical produced from Camellia sinensis and it has anti-inflammatory, anti-cancer, anti-obesity and antioxidant properties. This study was conducted to investigate whether the GT was able to modulate some lymphocyte functional parameters of obesity - induced animals by hypercaloric diet. Supplemented groups received 500 mg/kg GT for 22 days followed by hypercaloric diet for additional 44 days, together with the GT treatment. Treatment with GT reduced the cell proliferation capacity, the activity of metabolic enzymes hexokinase and glucose-6-phosphate dehydrogenase, increased the activity of antioxidant enzymes, decreased the production of reactive oxygen species, production of proinflammatory cytokines (IL-6, IL-1β, TNF-α) and restored the levels of IL-10 which was reduced by obesity. The GT effects can provide a more suitable environment for proper lymphocyte function, also reducing production of inflammatory mediators in obesity.

Introdução: a resposta neuro-endócrina metabólica perioperatória está associada ao estresse, fadiga, ansiedade e dor. No entanto, poucos estudos têm investigado a interação entre os sistemas neuro-imuno-endócrino com o estresse pré-operatório e a recuperação pós-cirúrgica. Um aspecto relevante nesta questão é o envolvimento do sistema neuroimuno- endócrino na relação entre estresse e dor pós-operatória. Objetivo: o presente estudo avaliou os níveis diurnos e noturnos da melatonina, do TNF e do cortisol em mulheres submetidas a histerectomia nos períodos pré e pós-operatórios com intuito de avaliar a regulação da síntese de melatonina pela glândula pineal por meio das vias da inflamação e neuroendócrina. Métodos e resultados: avaliou-se 12 pacientes submetidas a histerectomia abdominal. As amostras de sangue foram coletadas às 10h00 e 22h00, uma semana antes da hospitalização, no dia prévio à cirurgia, 1O e o 2O dias de pós-operatório e às 22h00 do dia da cirurgia. Na noite da cirurgia não houve níveis mensuráveis de melatonina noturna. Foram utilizados questionários para avaliar os níveis de estresse e dor e a relação da intensidade destes sintomas clínicos e o perfil bioquímico. Usando um modelo de Equação de Estimativa Generalizada [Generalized Estimating Equations (GEE)], evidenciou-se que os níveis séricos aumentados do TNF e do cortisol, bem como o estado de ansiedade elevado suprime a secreção da melatonina noturna. Para analisar a relação entre a secreção da melatonina ao longo do tempo e sua relação com cada um dos seguintes fatores: TNF, cortisol sérico matinal e estado de ansiedade, em primeiro lugar, estes fatores foram categorizados tendo como referencial os quartis. De acordo com cada ponto de corte as médias e os desvios padrões da melatonina noturna foram: TNF (alto > Q75=5.2 vs. baixo Q75 < 5.2 ng/mL) 57,35 + 40,85 vs 24,17 + 11,79 (P= 0.04); cortisol sérico matinal (alto > Q50=22.4 vs. baixo Q50 < 22.4 ng/mL) 33,29 + 6,29 vs 14,41 + 2,19 (P= 0.03) e ansiedade estado (alta > Q50=24 vs. baixa Q50 < 24 pontos no escore) 43,66 + 8,55 vs 31 + 6,46 (P= 0.03), respectivamente. Além disso, maiores níveis de dor pós-operatória na escala analógica visual (VAS), bem como maior ansiedade-traço se relacionaram com menores níveis de melatonina noturna perioperatória. Conclusão: os resultados deste trabalho reforçam a hipótese de que a glândula pineal desempenha um papel expressivo na reação ao estresse cirúrgico. A elevação dos níveis de TNF na fase pró-inflamatória, e do cortisol suprimem a produção da melatonina pela pineal, desligando o braço hormonal, o que permite a montagem da resposta de defesa. Considerando tais evidências, a reação que ocorre entre o TNF, o cortisol e a glândula pineal é essencial para permitir uma recuperação completa e eficiente no período pósoperatório. / Background: Neuro-endocrine metabolic response in the perioperative period is associated with distress, fatigue, anxiety, and acute postoperative pain. However, few researches have investigated the interaction between the neuroendocrine-immune system, preoperative stress, and post-surgical recovery. A relevant aspect in this equation is the involvement of the neuroendocrine-immune interaction in the relationship between preoperative stress and post-surgical pain. Objective: The present study followed the daytime and nighttime levels of melatonin, TNF an cortisol, in women that had undergone a histerechtomy from the pre-surgical to postsurgical periods out to study the regulation of melatonin synthesis by the pineal gland by airway inflammation and neuroendocrine. Methods and results: We evaluated 12 women who underwent an abdominal hysterectomy. Blood was collected, at 10h00 and 22h00, one week and one day before surgery; at the first and second days after surgery and at 22h00 on the day of surgery. On the night of surgery there was no melatonin surge. In addition questionnaires for evaluating stress and pain levels showed a correlation between personal information and biochemical profiles. Generalized Estimating Equations (GEE) revealed that high TNF and serum cortisol, as well high state-anxiety decrease the nocturnal melatonin surge. To analyze the relationship between the melatonin surge on time and its relationship with each one of the following factors, firstly, they were classified according to cutoff points using quartiles. The mean and standard deviation of nocturnal melatonin was TNF (high > Q75=5.2 vs. low Q75 < 5.2 ng/mL) 57.35+ 40.85 vs 24.17+ 11.79, (P=0.04); morning serum cortisol (high > Q50=22.4 vs. low Q50 < 22.4 ng/mL) 33.29+ 6.69 vs. 14.41+ 2.19, (P=0.03) and state-anxiety (high > Q50=24 vs. low Q50 < 24 points], 43.66+ 8.55 vs. 31+ 6.46, (P=0.03); respectively. Also, the increase of postoperative pain on visual analogue scale (VAS), as well as higher trait-anxiety was linked with lower nocturnal melatonin surge in perioperative period. Conclusion: the results support the hypothesis that the pineal gland plays a role in the progressive reaction to surgical stress. In the proinflammatory phase, TNF shutdown melatonin production and allows for the mounting of the defense response. Also, it is observed that the cortisol is a determinant in the regulation of nocturnal melatonin surge, together with the release of high amounts of TNF in the circulation, at the start of a defense response, suppressing the melatonin surge. Taking into account these evidences, it is possible to suppose that this orchestrated reaction between TNF, cortisol, and the pineal gland should be essential in allowing for a full and efficient postoperative recovery.

Orientador: Akebo Yamakami / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e de Computação / Made available in DSpace on 2018-08-10T17:03:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FreitasFilho_LeonardoJoseRamos_M.pdf: 1138592 bytes, checksum: 76882e62668bfba4188afce0f7b35d62 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Um dos problemas mais comuns em planejamento de processos é o escalonamento. Este se resume na alocação de tarefas a serem executadas utilizando determinados recursos, sujeitas a uma ordem de prioridades, restrição de tempo e disponibilidade. O Job Shop é um dos sistemas mais conhecidos e estudados, pois reúne características de outras classes de sistemas de planejamento, além de ser necessária a elaboração de métodos de resolução mais sofisticados devido sua alta complexidade (NP-difícil). A computação natural é constituída por novas abordagens de computação caracterizadas por uma maior proximidade com a natureza. A aplicação de métodos inspirados em sistemas imunológicos demonstra, nos últimos anos, ser promissor em diversas áreas de aplicação e pesquisa, como por exemplo, otimização. Tendo em vista este cenário, é feita aqui uma abordagem imuno-inspirada para elaboração de um sistema de otimização, através de resolução do escalonamento de um Job Shop, provendo soluções diversificas e de alta qualidade / Abstract: Scheduling problems are jobs allocation using distinct sources ordered by sequence constraint and time constraint. Job Shop is one the most studied problem because it is possible to find different scheduling features. Also this problem needs sophisticated solving methods by complexity characteristics (NP-Hard). Natural Computing uses a new computation approach representing natural systems. Immune system methods approaches shows, in the last years, good results in many applications and several researches, for example, optimization. In this scenario we developed an artificial immune system to solve Job Shop system. We will show hight diversity and quality solutions / Mestrado / Telecomunicações e Telemática / Mestre em Engenharia Elétrica

Orientador: Fernando Jose Von Zuben / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e de Computação / Made available in DSpace on 2018-08-11T02:37:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinto_JoseCarlosLima_M.pdf: 2121571 bytes, checksum: 9c655f127eb2b45c71b750509a43c3a1 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Essa dissertação apresenta um algoritmo de detecção de falhas composto de múltiplos módulos interconectados e operando de acordo com o paradigma suportado pela Teoria do Perigo em imunologia. Esse algoritmo busca atingir características significativas que um sistema de detecção de falhas deve expressar ao monitorar um sistema telefônico. Essas características seriam basicamente a adaptabilidade, devido à forte variação que esse sistema pode ter em seus parâmetros ao longo do tempo, e a diminuição no número de falsos positivos que podem ser gerados ao se classificar como falha toda anormalidade encontrada. Cenários simulados foram concebidos para validar a proposta, sendo que os resultados obtidos foram analisados e comparados com propostas alternativas / Abstract: Abstract This thesis presents a fault detection algorithm composed of multiple interconnected modules, and operating according to the paradigm supported by the Danger Theory in immunology. This algorithm attempts to achieve significant features that a fault detection system is supposed to express when monitoring a telephone system. These features would basically be adaptability, due to the strong variation that operational conditions may exhibit over time, and the decrease in the number of false positives, which can be generated when any abnormal behavior is erroneously classified as being a fault. Simulated scenarios have been conceived to validate the proposal, and the obtained results are then analyzed and compared with alternative proposals / Mestrado / Engenharia de Computação / Mestre em Engenharia Elétrica

Orientador: Akebo Yamakami / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e de Computação / Made available in DSpace on 2018-08-11T03:11:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rampazzo_PriscilaCristinaBerbert_M.pdf: 1295026 bytes, checksum: ad0738bc161445ec5b9f0db0db565f09 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O objetivo desta dissertação é explorar a utilização de um Sistema Imunológico Artificial, baseado no princípio de Seleção Clonal, na resolução de problemas de Otimização Multiobjetivo. Os Sistemas Imunológicos Artificiais apresentam, em sua estrutura elementar, as principais características requeridas para a resolução de problemas de Otimização Multiobjetivo: exploração, explotação, paralelismo, elitismo, memória, diversidade, mutação e clonagem proporcionais à afinidade e população dinâmica. A abordagem proposta utiliza o conceito de Pareto dominância e factibilidade para identificar os anticorpos (soluções) que devem ser clonados. Nos experimentos, foram consideradas algumas situações importantes que podem aparecer nos problemas reais: presença de restrições (lineares e não-lineares) e formato da Fronteira de Pareto (convexa, côncava, contínua, descontínua, discreta, não-uniforme). Na maioria dos problemas, o algoritmo obteve resultados bons e competitivos quando comparados com as propostas da literatura. Palavras-chave: Otimização Multiobjetivo, Algoritmos Bio-inspirados, Sistemas Imunológicos Artificiais, Seleção Clonal / Abstract: The aim of this work is to explore an Artificial Immune System, based on the Clonal Selection principle, in the solution of Multiobjective Optimization problems. Artificial Immune Systems have, in their elementary structure, the main characteristics required to solve Multiobjective Optimization problems: exploration, exploitation, paralelism, elitism, memory, diversity, mutation and proliferation proportional to the affinity, and dynamic repertorie. The proposed algorithm uses the Pareto dominance concept and feasibility to identify the antibodies (solutions) that must to be cloned. In the experiments, some important situations that occurs in real problems were considered: the presence of constraints (linear and non-linear) and Pareto Front format (convex, concave, continuous, discontinuous, discrete, non-uniforme). In the major part of the problems, the algorithm obtains good and competitive results when compared with approaches from the literature. Keywords: Multiobjective Optimization, Bio-inspired Algorithms, Artificial Immune Systems, Clonal Selection / Mestrado / Telecomunicações e Telemática / Mestre em Engenharia Elétrica

Orientador: Fernando Jose Von Zuben / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e Computação / Made available in DSpace on 2018-08-11T19:03:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Coelho_GuilhermePalermo_M.pdf: 2968179 bytes, checksum: bbea7c9c565907f86eee09155421bfa3 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O uso da abordagem ensembles tem sido bastante explorado na última década, por se tratar de uma técnica simples e capaz de aumentar a capacidade de generalização de soluções baseadas em aprendizado de máquina. No entanto, para que um ensemble seja capaz de promover melhorias de desempenho, os seus componentes devem apresentar bons desempenhos individuais e, ao mesmo tempo, devem ter comportamentos diversos entre si. Neste trabalho, é proposta uma metodologia de criação de ensembles para problemas de classificação, onde os componentes são redes neurais artificiais do tipo perceptron multicamadas. Para que fossem gerados bons candidatos a comporem o ensemble, atendendo a critérios de desempenho e de diversidade, foi aplicada uma meta-heurística populacional imuno-inspirada, denominada opt-aiNet, a qual é caracterizada por definir automaticamente o número de indivíduos na população a cada iteração, promover diversidade e preservar ótimos locais ao longo da busca. Na etapa de seleção dos componentes que efetivamente irão compor o ensemble, foram utilizadas seis técnicas distintas e, para combinação dos componentes selecionados, foram adotadas cinco estratégias. A abordagem proposta foi aplicada a quatro problemas de classificação de padrões e os resultados obtidos indicam a validade da metodologia de criação de ensembles. Além disso, foi verificada uma dependência entre o melhor par de técnicas de seleção e combinação e a população de indivíduos candidatos a comporem o ensemble, assim como foi feita uma análise de confiabilidade dos resultados de classificação / Abstract: In the last decade, the ensemble approach has been widely explored, once it is a simple technique capable of increasing the generalization capability of machine learning based solutions. However, an ensemble can only promote performance enhancement if its components present good individual performance and, at the same time, diverse behavior among each other. This work proposes a methodology to synthesize ensembles for classification problems, where the components of the ensembles are multi-layer perceptrons. To generate good candidates to compose the ensemble, meeting the performance and diversity requirements, it was applied a populational and immune-inspired metaheuristic, named opt-aiNet, which is characterized as being capable of automatically determining the number of individuals in the population at each iteration, promoting diversity and preserving local optima through the search. In the component selection phase, six distinct techniques were applied and, to combine these selected components, five strategies were adopted. The proposed approach was applied to four pattern classification problems and the obtained results indicated the validity of the methodology to synthesize ensembles. It was also verified a dependence of the best pair of selection and combination techniques on the population of candidates to compose the ensemble, and it was made an analysis of the confidence of the classification results / Mestrado / Engenharia de Computação / Mestre em Engenharia Elétrica

Nos últimos anos houve um aumento da expectativa de vida de indivíduos com síndrome de Down, com causas de morte que diferem da população em geral. Alguns estudos mostraram que a resposta imunológica difere ao longo da vida com alterações relacionadas ao envelhecimento. O gene RCAN1 (regulador de calcineurina tipo 1), localizado na região q22.12 no cromossomo 21 é descrito como responsável pelo fenótipo da SD. O gene RCAN1 inibe a ação da calcineurina, responsável pela desfosforilação do fator nuclear de células T ativadas (NFAT), uma etapa essencial para a ativação de genes responsáveis pela expressão de citocinas. A consequência é uma possível diminuição da resposta imune efetora. Em adultos com síndrome de Down as respostas imunes humoral e celular têm sido pouco investigadas. Apesar da superexpressão do gene RCAN1 já ter sido descrita em diversos tecidos, sua expressão em células mononucleares de sangue periférico (PBMC) de adultos não foi ainda avaliada. Os objetivos deste estudo foram avaliar aspectos humorais e celulares da resposta imune, avaliar a expressão quantitativa do gene RCAN1 e relacionar os achados com a produção de citocinas. O grupo de estudo foi composto de adultos com síndrome de Down (SD) com cariótipo de trissomia livre (n=24), um grupo controle (CTR) composto de deficientes mentais com outras etiologias (n=21) e um grupo de indivíduos saudáveis (n=8), como parâmetros para alguns experimentos. Os grupos SD e CTR convivem na Associação de Pais e Amigos dos Excepcionais (APAE-SP). Foram realizados hemogramas e sorologias para detecção de hepatite B, citomegalovírus, mononucleose infecciosa, toxoplasmose, rubéola, sarampo, PCR, fração de complemento C3, C4, antiestreptolisina O e dosagem de imunoglobulinas IgG, IgM e IgA. Células mononucleares foram obtidas por gradiente de Ficoll-Hypaque e submetidas à cultura celular, análise quantitativa de expressão gênica de RCAN1 e avaliação imunofenotípica por citometria de fluxo. Os sobrenadantes da cultura foram coletados para dosagem das citocinas IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, TNF e INF. Os resultados deste estudo mostraram que a frequência de sorologias positivas para os vários agentes infecciosos e os demais parâmetros imunológicos foram comparáveis nos dois grupos de doentes mentais. A análise imunofenotípica dos indivíduos com SD mostrou aumento de células NK, de linfócitos TCD8+, alteração na relação CD4:CD8 (1:1) e diminuição de linfócitos B (CD19+) quando comparados ao grupo controle (p<0,05). A produção espontânea de INF, TNF e IL-10 foi maior no grupo SD em relação ao grupo CTR (p<0,05). Porém, quanto à expressão do gene RCAN1, não foi observada diferença entre os dois grupos analisados. O estudo do perfil imunológico humoral e celular de adultos com síndrome de Down provenientes da APAE-SP permitiu concluir que não houve diferenças quanto aos aspectos humorais avaliados nos dois grupos (SD e CTR). Quanto aos aspectos celulares, a imunofenotipagem sugere um possível sinal de envelhecimento precoce do sistema imune e a produção de citocinas um predomínio de perfil pró-inflamatório. Contudo, o perfil de citocinas não apresenta relação com o nível de expressão do gene RCAN1. / In recent years there has been an increase in life expectancy of individuals with Down´s syndrome (DS), with death causes differ from the general population. Some studies have shown that the immune response differs throughout life with changes related to aging. The RCAN1 gene (regulator of calcineurin type 1), located in the q22.12 region of chromosome 21 is described as responsible for the phenotype of DS. The gene RCAN1 inhibits the calcineurin activity, responsible for the dephosphorylation of the nuclear factor of activated T cells (NFAT), an essential step for the activation of the genes responsible for cytokines expression. The consequence is a possible reduction of the effector immune response. In adults with DS, the humoral and cellular immune responses have not been throughly investigated. Although the overexpression of the RCAN1 gene has already been described in many tissues, its expression in mononuclear cells of peripheral blood (PBMC) of adults with DS has not been evaluated. The objectives of this study were to evaluate aspects of humoral and cellular immune response, evaluate the quantitative expression of the RCAN1 gene and correlate the findings with the production of cytokines. The study group consisted of adults with Down´s syndrome (DS) with free trisomy karyotype (n = 24), a control group (CTR) composed of the mentally disabled of other etiologies (n = 21) and a group of healthy subjects (n = 8), as parameters for some experiments. The SD and CTR groups are followed in Associação de Pais e Amigos dos Excepcionais (APAE-SP). It was evaluated Hemogram and serology for detection of hepatitis B, cytomegalovirus, infectious mononucleosis, toxoplasmosis, rubella, measles, cRP, complement fraction C3, C4, antistreptolysin O and IgG, IgM and IgA immunoglobulin isotypes. The mononuclear cells were obtained by Ficoll-Hypaque gradient and the cells were cultured without stimuli, analyzed for the quantitative gene expression of RCAN1 and evaluated for immunophenotyping by flow cytometry. The culture supernatants were collected for measurement of cytokines IL-2, IL-4, IL-5, IL- 10, TNF and IFN.The results of this study showed that the frequency of positive tests for various infectious agents and other immunological parameters were comparable in both groups (DS and CTR). Immunophenotyping of individuals with DS showed an increase in NK cells, CD8 + lymphocytes, changes in CD4: CD8 ratio (1:1) and decreased B lymphocytes (CD19 +) when compared to the control group (p <0.05). The DS group had a spontaneous production of IFN, TNF and IL-10 higher than the CTR group (p<0.05). However, there was not any difference in RCAN1 gene expression (mRNA) between the two groups of the mentally disabled. The humoral and cellular immune profile in adults with Down´s syndrome from APAE-SP showed that there was no difference in the humoral aspects assessed in both groups (SD and CTR). For the cellular aspects, the immunophenotyping suggests a possible sign of premature aging of the immune system and the cytokine production show a proinflammatory profile. Nevertheless, this cytokines profile is not associated with level of expression of the RCAN1 gene.

Em países tropicais como o Brasil, as micoses superficiais (dermatofitoses) são comumente encontradas. O Dermatófito mais comum é o Trichophyton rubrum (Tr). Mananas e galactomananas na parede do Tr podem suprimir a resposta celular ao fungo. Quanto à resposta imune antifúngica, sabe-se a importância da via Th17. Algumas lectinas do tipo C (CLRs) como o receptor de manose e/ou receptores similares a Toll (TLRs) regulam o equilíbrio entre as vias Th1 e Th17. Nossos objetivos foram obter um extrato antigênico de Tr que induza resposta imune celular; quantificar e qualificar a resposta imune de indivíduos controles com lesão branda e de pacientes com dermatofitose extensa e/ou persistente causadas pelo Tr e por fim, avaliar a expressão de CLRs em monócitos do sangue periférico nos mesmos grupos. Para tanto, produzimos 11 extratos antigênicos de Tr. Pudemos observar na eletroforese em gel de poliacrilamida proteínas com pesos moleculares de aproximadamente 70 kDa e 38 kDa para os extratos fúngicos: Extrato TCA - Meta 1, Extrato tindalizado G1 e Extrato Coca 1. Avaliamos a resposta linfoproliferativa de células mononucleares por incorporação de timidina triciada em controles e pacientes ao peptídeo YIIDTGIDID do fungo Tr (Tri R2) e aos extratos antigênicos produzidos em nosso laboratório. Utilizamos como estímulos: PWM, CMA, Tri R2, PMA/Ionomicina. Para os ensaios funcionais avaliamos quatro pacientes e 6 indivíduos controles. Para a fenotipagem das células Th17, Th17MEM, Tc17 e Tc17MEM por citometria de fluxo, utilizamos a análise Booleana no software FlowJo X. A avaliação da expressão dos CLRs: CD206 (Receptor de Manose), Dectin 1 e Dectin 2 em monócitos do sangue periférico de controles e pacientes foi efetuada por citometria de fluxo. Dos 11 extratos produzidos de Tr, 7 se mostraram bons estimuladores para pelo menos um dos controles analisados, expressos como ponto máximo de índice de estimulação (p.m.I.E.). Dentre eles destacamos: Extrato TCA - Meta 1 (p.m. I.E. = 14,49 em 5 ug/mL), Extrato Tindalizado G1 (p.m.I.E. = 23,00 em 2,5 ug/mL) e Extrato Coca 1 (p.m.I.E. = 173,36 em 0,31 ug/mL). Na avaliação da expressão dos receptores das células Th17 e Tc17 (Th17R e Tc17R, respectivamente) após seis dias de estímulo por: Tri R2, extrato Coca 1 e o extrato TCA - Meta 1, o extrato Coca se mostrou o melhor estimulador para as populações Th17, com a frequência de 8,40% (controle) e 12,30% (paciente 1). Na avaliação da expressão de Th17R e Tc17R por 6 horas ao estímulo por PMA/Iono, todos os controles (n=3) se mostraram responsivos e no grupo de pacientes (n=3) pudemos observar maior frequência para o paciente 1 nas populações Th17 (1,64%) e Th17MEM (3,27%), e para as células Tc17 (10,70%) e Tc17MEM (3,58%). Observamos redução da expressão de CLRs nos pacientes: CD206: média 60,24% (controles) e 21,27% (pacientes), Dectin 1: 22,42% (controles) e 12,06% (pacientes) e Dectin 2: 20,26% (controles) e 4,99% (pacientes). Controles (n=6) e pacientes (n=3). A inovação na produção de extrato antigênico Extrato TCA - Meta 1 encoraja o estudo dos extratos fúngicos, para se obter melhores condições de avaliações imunológicas em pacientes com dermatofitose. Caracterizamos e qualificamos a resposta imune celular frente ao peptídeo TriR2 e aos extratos antigênicos, além de avaliarmos a expressão dos CLRs nesse grupo especial de pacientes / In tropical countries like Brazil, superficial fungal infections (dermatophytosis) are commonly found. The most common dermatophyte is Trichophyton rubrum (Tr). Mannans and galactomannans of Tr cell wall can suppress cellular responses to the fungus. Regarding the antifungal immune response, the importance of Th17 pathway is warranted. Some C-type lectins (CLRs) as the mannose receptor and / or Toll-like receptors (TLRs) regulate the balance between Th1 and Th17 pathways. Our objectives were to obtain an antigenic extract of Tr to induce cellular immune response; to quantify and classify the immune response of control subjects with mild injury and patients with extensive and / or persistent dermatophytosis caused by Tr, and finally evaluating the expression of CLRs in peripheral blood monocytes in the same groups. Therefore, we produced 11 antigenic extracts of Tr. Proteins with molecular weights of approximately 70 kDa and 38 kDa were evidenced in polyacrylamide gel electrophoresis for the following fungal extracts: extract TCA - Target 1, Tindalized extract G1 and extract Coca 1. We assessed the lymphoproliferative response of mononuclear cells by tritiated thymidine incorporation in the controls and patients, stimulated by YIIDTGIDID peptide fungus Tr (Tri R2) and the antigenic extracts produced in our laboratory. We used as stimuli: PWM, CMA, Tri R2, and PMA/Iono. For functional assays we evaluated four patients and 6 control individuals. For the phenotyping of Th17 cells, Th17MEM, Tc17 and Tc17MEM by flow cytometry, we used a Boolean analysis performed by FlowJo X software. Evaluation of the expression of CLRs: CD206 (mannose receptor), Dectin 1 and Dectin 2 in peripheral blood monocytes from patients and controls was performed by flow cytometry. Of the 11 extracts produced from Tr, seven proved to be able to stimulate proliferation of peripheral blood mononuclear cells of at least one of the analyzed controls, expressed as peak stimulation index (p.m.I.E.). Among them, were included: extract TCA - Target 1 (pmIE = 14.49 at 5 ug /mL), Tindalized G1 Extract (pmIE = 23,00 at 2.5 ug /mL) and extract Coca 1 (pmIE = 173.36 at 0.31 ug /mL). In the evaluation of the expression of receptors of Th17 cells and Tc17 (Th17R and Tc17R, respectively) after six days of stimulation by: Tri R2, Coca extract and the extract TCA 1 - Meta 1, Coca extract showed to be the best stimulator for Th17 populations, with the frequency of 8.40% (control) and 12.30% (patient 1). In the evaluation of the expression of Th17R and Tc17R after 6 hours of stimulation by PMA / Iono, all controls (n = 3) responded and in the group of patients (n = 3) we observed response more frequently for the patient #1, in Th17 populations (1.64%), Th17MEM (3.27%), Tc17 cells (10.70%) and Tc17MEM (3.58%). We observed a reduction of expression of CLRs in patients: CD206: average 60.24% (controls) and 21.27% (patients), Dectin 1: 22.42% (controls) and 12.06% (patients) and Dectin2: 26% (controls) and 4.99% (patients). Controls (n = 6) and patients (n = 3). Innovation in the production of antigenic extract extract TCA - Target 1 encourages the study of fungal extracts to obtain better conditions of evaluation of the immune response in patients with dermatophytosis. We characterized and qualified the cellular immune response to the TriR2 peptide, to antigen extracts, and evaluated the expression of CLRs in this special group of patients