Neospora caninum is a tissue-cyst forming parasite that belongs to the phylum Apicomplexa. Dogs and other canids are the definitive hosts of N. caninum and they are responsible to excrete oocysts, the environmentally resistant stage of the parasite. Viable parasites have been isolated from a variety of species, especially herbivorous, confirming their role as intermediate hosts. The importance of birds in the life cycle of N. caninum is not clear. Several experiments, using tachyzoites as inoculum, were conducted in domestic and wild birds and the results were not conclusive. In nature, the possible mode of transmission in chickens is the ingestion of oocysts. This work aimed to evaluate the infection by N. caninum in chickens orally inoculated with oocysts obtained from a new isolate of N. caninum. For that, approximately 400 g of brain from a naturally infected adult cattle, showing anti-N. caninum antibodies by means of the immunfluorescent antibody test - IFAT (titre = 200), were fed to a 2-month-old dog. Neospora-like oocysts were observed on day 7 post-inoculation (p.i.). The DNA obtained from oocysts was molecularly characterized using the ITS-1 marker and the final sequence was 99% identical to homologous sequences of N. caninum. Gerbils (Meriones unguiculatus) were orally inoculated with different doses of oocysts (10, 100 and 1000 oocysts), and all of them remained clinically normal and developed N. caninum antibodies 14 days p.i. (titre ≥ 50 by IFAT). Brain homogenate from an infected gerbil was seeded into a monolayer of Vero cells and tachyzoites were visualized at 24 days p.i.. Microsatellite genotyping using DNA from the tachyzoites revealed a unique genetic profile for this new reference isolate, named NC-SP1. Thirty White Leghorn chickens (Gallus gallus domesticus) were orally inoculated with viable N. caninum oocysts from the NC-SP1 isolate (200 oocysts per bird) via the crop at 21 days of age. Groups of three birds were euthanized at intervals of 7 days during 9 weeks; one group was challenged with the same oocysts dose at 37 days p.i. and observed for 11 weeks. Blood samples were collected weekly, and sera were tested by IFAT. Chicken tissues were analyzed using PCR, quantitative PCR and immunohistochemistry (IHC). Two mongrel dogs, approximately 45 days of age were fed with tissues from chickens euthanized at 138 and 159 days p.i.. The chickens did not seroconvert (titre < 5), and neither DNA (PCR and qPCR) nor antigen (IHC) of N. caninum was detected in inoculated chicken tissues. In addition, no oocyst excretion by the dogs was observed. In these experimental conditions, the chickens were resistant to N. caninum infection. / Neospora caninum é um parasita formador de cistos teciduais que pertence ao filo Apicomplexa. O cão doméstico e outros canídeos são os hospedeiros definitivos de N. caninum, pois podem excretar nas fezes os oocistos, o estágio ambientalmente resistente do parasita. Parasitas viáveis foram isolados de diversas espécies, principalmente herbívoros, confirmando seu papel como hospedeiros intermediários. A importância das aves no ciclo biológico de N. caninum ainda não está bem definida. Vários experimentos, utilizando taquizoítas como inóculo, foram realizados em aves domésticas e silvestres e os resultados não foram conclusivos. Na natureza, a via de transmissão mais provável para as galinhas é a ingestão de oocistos. Este trabalho teve como objetivo avaliar a infecção por N. caninum em galináceos infectados por via oral com oocistos de um novo isolado de referência de N. caninum. Inicialmente, 400g de cérebro de um bovino adulto naturalmente infectado, apresentando anticorpos anti-N. caninum por meio da reação de imunofluorescência indireta - RIFI (título = 200), foram oferecidos para um cão de 2 meses de idade. Oocistos Neospora-like foram visualizados 7 dias pós inoculação (p.i.). A sequência final obtida a partir do DNA extraído dos oocistos, baseada no marcador ITS-1, teve 99% de similaridade com sequências homólogas de N. caninum. Gerbilos (Meriones unguiculatus) foram inoculados com diferentes doses de oocistos (10, 100 e 1000 oocistos) por via oral, e todos eles permaneceram clinicamente normais e anticorpos contra N. caninum foram detectados 14 dias p.i. por meio da RIFI (título ≥ 50). O homogenado do cérebro de um gerbilo infectado foi inoculado em uma monocamada de células da linhagem celular Vero e taquizoítas foram observados no cultivo celular 24 dias p.i.. A genotipagem por microssatélites do DNA extraído desses taquizoítas revelou um perfil genético único ao novo isolado de referência, designado NC-SP1. Trinta galináceos (Gallus gallus domesticus) da linhagem White Leghorn foram então inoculados via papo aos 21 dias de idade com oocistos de NC-SP1 (200 oocistos por ave). As eutanásias foram realizadas em intervalos de 7 dias para cada grupo de três aves, durante 9 semanas, e um grupo foi desafiado com a mesma dose de oocistos aos 37 dias p.i. e acompanhado por 11 semanas. Amostras de sangue foram colhidas semanalmente, e os soros testados por meio da RIFI. Os tecidos das aves foram analisados por meio da PCR, PCR quantitativa (qPCR) e imunohistoquímica (IHQ). Dois grupos de aves foram eutanasiados aos 138 e 159 dias p.i. e os tecidos foram oferecidos para dois cães sem raça definida com aproximadamente 45 dias de idade. Os galináceos não soroconverteram (título < 5), e o DNA (PCR e qPCR) e o antígeno (IHQ) de N. caninum não foram detectados nos tecidos das aves. Oocistos de N. caninum não foram excretados pelos cães. Nestas condições experimentais, os galináceos foram resistentes à infecção por N. caninum.

[pt] Em aplicações Web, sessões cliente são organizadas em transações, envolvendo requisições que leem e atualizam dados compartilhados. Executando concorrentemente, estas sessões podem invalidar os dados umas das outras. O advento do movimento Linked Data vem estimulando sobremaneira a criação de aplicações que empregam o modelo de dados RDF em sua camada de informação. Além de consultas aos dados RDF, também se faz presente o requisito de atualizações online, com adequado controle de concorrência. Este trabalho apresenta um modelo de bloqueio, inspirado no protocolo de bloqueio multigranular, voltado para isolamento entre transações que manipulam dados RDF, considerando quatro problemas de concorrência, a saber: lost updates, dirty reads, non-repeatable read e phantoms reads. São oferecidos quatro grânulos hierarquicamente relacionados, bem como novos tipos de bloqueio de escrita e leitura, especificamente criados para o modelo RDF. Por fim, o desempenho do modelo de bloqueio proposto é avaliado por meio de simulação. / [en] Client sessions in Web applications are organized as transactions involving requests that read and write shared data. Executing concurrently, these sessions may invalidate each other s data. The advent of Linked Data is spurring the deployment of applications that use the RDF data model at the information tier. In addition to querying RDF data, there is also the requirement for online updates with suitable concurrency control. This work presents a locking model, inspired by the multigranularity locking protocol, to address isolation between transactions that manipulate RDF data, considering four concurrency-related issues, namely: lost updates, dirty reads, non-repeatable reads and phantom reads. Four hierarchically related granules are offered, as well as new read and write lock modes, specifically created for the RDF data model. Finally, the performance assessment of the proposed locking model is done through simulation.

As infecções causadas por bactérias e fungos são muito comuns e a resistência adquirida aos antibióticos disponíveis tem se tornado frequente, mostrando a necessidade de constantes pesquisas e investimentos em novos fármacos antimicrobianos eficazes. Dentre as alternativas de prospecção de novos fármacos, os produtos naturais se destacam como fontes de substâncias ativas, novos modelos moleculares e matérias-primas com padrões moleculares singulares e inovadores. Como parte de um projeto de bioprospecção e planejamento de novas substâncias bioativas, o gênero Rheedia foi eleito como fonte de benzofenonas polipreniladas a serem utilizadas como substratos para obtenção de novos derivados com perfil antibacteriano otimizado e estudos de relação estrutura-atividade (REA). O objetivo deste trabalho foi sintetizar novos derivados da guttiferona-A (LFQM-78), uma benzofenona natural, realizando modificações das características de hidro/lipofilicidade através da inserção de grupos substituintes nas hidroxilas fenólicas visando à otimização do perfil de atividade antimicrobiana desta substância. Os derivados sintetizados foram avaliados quanto a sua ação contra um amplo espectro de bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e fungos. As espécies microbianas mais sensíveis a os compostos testados foram as bactérias Gram-positivas Staphylococcus aureus (ATCC 6538) e Bacillus cereus (ATCC 11778), sendo que alguns dos compostos foram mais ativos do que o cloranfenicol, antibiótico utilizado como referência. Os resultados obtidos evidenciaram que a variação da lipofilicidade da molécula é um ponto importante para a modulação da atividade, e que as modificações estruturais realizadas na guttiferona-A, levaram a derivados mais potentes, seletivos e pouco tóxicos contra diferentes tipos de microrganismos patogênicos. / Infections caused by bacteria and fungi are very common and acquired resistance to available antibiotics has become common, showing the need for constant research and investments in new effective antimicrobial drugs. Among the alternatives to the prospection for new drugs, natural products stand out as sources of active ingredients, new molecular models and raw materials with innovative molecular patterns. As part of a project aiming the bioprospection and the design of new bioactive substances, the gender Rheedia was elected as a source of poliprenylated benzophenones to be used as starting materials for new semi-synthetic derivatives with optimized antibacterial profile and structure-activity relationship studies (SAR). The central objective was to synthesize new derivatives of guttiferone-A (LFQM-78), a natural benzophenone, carrying out modifications of their hydro/lipophilic properties by the insertion of substituents on the phenolic hydroxyl groups to optimize the profile of antimicrobial activity of this compound. Semi-synthetic derivatives were evaluated for their effects s against a broad spectrum of Gram-positive and Gram-negative bacteria and fungi. The most sensitive microbial species to the target compounds were Gram-positive (ATCC 6538) and Bacillus cereus (ATCC 11778), and some of the derivatives were more active than chloramphenicol, used as standard. Our results were indicative that a variation in lipophilicity of the molecules was an important requisite for antimicrobial activity modulation, and that the structural modifications made on guttiferone-A led to more potent and selective derivatives, with lower toxicity for different types of pathogens.

Este trabalho teve como objetivo o estudo fitoquímico do extrato acetato de etila do epicarpo (EAEE) de Garcinia brasiliensis, modificação estrutural no biflavonoide natural fukugetina (LFQM-109) e ensaios de atividade antioxidante, leishmanicida e enzimático do composto natural LFQM-109 e de seus análogos semissintéticos. A espécie G. brasiliensis pertence à família Guttifereae e é cultivada em todo o território brasileiro. É conhecida popularmente como bacuri, bacupari, porocó e bacuripari, no Brasil. É uma espécie nativa do Brasil, Paraguai e norte da Argentina. O fracionamento do EAEE levou ao isolamento dos compostos LFQM-105, LFQM-106, LFQM-107, LFQM-108 e da Fukugetina (LFQM-109). Os compostos isolados foram identificados por comparação com padrões autênticos e por técnicas espectrométricas e espectroscópicas usuais. A partir do composto natural fukugetina, reações de acilação e alquilação foram realizadas com o objetivo de obter derivados semissintéticos mais lipofílicos. Para avaliar a atividade antioxidante (Poder Redutor e Sequestrante de radicais DPPH) utilizaram-se concentrações de 400-12,5 μmol.L-1 e como padrões ácido ascórbico e BHT. Para a avaliação antiparasitária (formas promastigotas e amastigotas) utilizou-se concentrações entre 100-50 μmol.L-1 e como padrão pentamidina. Os resultados apresentados nos testes demonstraram uma redução do potencial antioxidante dos derivados semissintéticos comparado com o composto natural LFQM-109, provavelmente por possuir menor numero de grupo hidroxilas fenólicas livres. Nos ensaios de atividade antiparasitária (formas promastigota e amastigota) foi observada uma potencialização da atividade dos derivados semissintéticos, possivelmente por serem mais lipofílicos que o composto de origem LFQM-109. Os ensaios enzimáticos foram realizados em cisteíno e serino proteases, observando-se uma atividade inibitória significativa dos derivados semissintéticos quando comparado ao precursor LFQM-109, indicando que o aumento da lipofilia favoreceu a ação nestas enzimas. O presente trabalho contribuiu desta forma, para o conhecimento da química e das atividades antioxidante, antiparasitária e enzimática dos compostos naturais obtidos de G. brasiliensis e semissintéticos da fukugetina. / This study aimed to the phytochemical study of ethyl acetate extract epicarp (EAEE) from Garcinia brasiliensis, structural change in the natural biflavonoids fukugetina (LFQM-109) and antioxidant activity assays, and enzymatic leishmanicidal of the natural compound and LFQM-109 its semisynthetic analogues. The species G. brasiliensis belongs to the family Guttifereae and is cultivated throughout the Brazilian territory. It is popularly known as bacuri, bacupari, and Poroca bacuripari species in Brazil and Bolivia as guapomo. It is a native of Brazil, Paraguay and northern Argentina. Fractionation of EAEE led to the isolation of compounds LFQM-105, LFQM-106, LFQM-107, LFQM-108 and Fukugetina (LFQM-109). The compounds were identified by comparison with authentic standards and by spectral and spectroscopic usual. From the natural compound fukugetina, alkylation and acylation reactions were performed in order to obtain more lipophilic semisynthetic derivatives. To evaluate the antioxidant activity (reducing power and DPPH radical scavenger) used concentrations of 400-12.5 μM and standards as ascorbic acid and BHT. For evaluating antiparasitic (promastigote and amastigote form) used concentrations between 100-50 μM as standard and pentamidine. The results showed a reduction in testing the antioxidant potential of semisynthetic derivatives compared with the natural compound LFQM-109, probably because reducing the number of phenolic hydroxyl in the structure with structural changes. In tests of antiparasitic activity (promastigote and amastigote forms) was observed an enhancement of the activity of semisynthetic derivatives, possibly by being more lipophilic than the parent compound LFQM-109. Assays were performed on cysteine and serine proteases, observing a significant inhibitory activity of semisynthetic derivatives compared to the precursor LFQM-109, indicating that the increased lipophilicity enhanced the action on these enzymes. This study has thus contributed to the knowledge of chemistry and the antioxidant, antiparasitic and natural compounds of enzyme obtained from G. brasiliensis and the semisynthetic fukugetin. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Made available in DSpace on 2016-04-04T18:29:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carla Maria Lima Braga.pdf: 611138 bytes, checksum: 8c136df793882d02cd6738e04598bfb2 (MD5) Previous issue date: 2009-12-09 / In the present research relative questions to the communication and the isolation between adolescents had been analyzed, having as object of study a diary and blogs. We accomplished a lecture of a diary of a youth, that were written among 1893 to 1895, and of blogs, written by adolescents and that are available in the Internet. The analysis and the interpretation were made through the, supported in the theory of maturing of D.W. Winnicott. In both the forms of expression - diary and blogs - we could verify some characteristic paradoxes of the adolescence, which are: 1) although the necessity of familiar removal of the adolescent, he needs the shelter of your family; 2) have a search for an immediate cure for your anguishes, but at the same time he rejects all the cures that he finds, therefore consider them false because it are not your own solutions; 3) the adolescent has the urgent necessity to communicate and more urgent necessity still of not being deciphered; 4) the adolescent has a fear of not being found, of not being seen at the same time that he needs to hide of the people; 5) the adolescent has an incapacity to be alone, for the fact to be much alone time, that is, the capacity to be alone is on to that always he had people gifts. Starting from such considerations, we shimmer that the isolation favors the individual development, mainly in this period of the life e; however, the solitude and the retraction can be considered as an affective abandonment, what can be lived deeply by adolescents that possess only virtual friends. We also understood that a homelike and reliable environment contributes to the construction of a healthy adult's identity, and that a potential presence, implicated and reserved to the adolescent's anguishes, favors the overcoming of the difficulties for him faced. Thus, the environment where the adolescent lives must be capable to be open to your communication as well as to your silence. Already the virtual environment, when well used, can be seen as a potential space for ludic experiences and the creativity, favoring the discovery, on the part of the adolescent, of being somebody in some place. / Na presente pesquisa foram analisadas quest?es relativas ? comunica??o e ao isolamento entre adolescentes, tendo como objeto de estudo um di?rio e blogs. Foi realizada a leitura de um di?rio de uma jovem, que foi escrito entre 1893 a 1895, e de blogs, escritos por adolescentes e que est?o dispon?veis na rede Internet. A an?lise e a interpreta??o foram feitas por a partir da teoria do amadurecimento de D. W. Winnicott. Em ambas as formas de express?o di?rio e blogs podemos verificar alguns paradoxos caracter?sticos da adolesc?ncia, quais sejam: 1) apesar da necessidade de afastamento familiar do adolescente, ele necessita do acolhimento de sua fam?lia; 2) h? uma busca por uma cura imediata para as suas ang?stias, mas ao mesmo tempo rejeita todas as curas que encontra, pois as consideram falsas porque n?o s?o suas pr?prias solu??es; 3) o adolescente tem a necessidade urgente de se comunicar e necessidade mais urgente ainda de n?o ser decifrado; 4) o adolescente tem um medo de n?o ser encontrado, de n?o ser visto ao mesmo tempo que necessita se esconder das pessoas; 5) o adolescente tem uma incapacidade de ficar s?, e esta capacidade ? conquistada como fruto do amadurecimento que pressup?e ? distin??o de si mesmo na rela??o com os outros, e este ficar s? do adolescente contribui para chegar a si mesmo. A partir de tais considera??es, vislumbramos que o isolamento pode favorecer o desenvolvimento individual, principalmente neste per?odo da vida; entretanto, a solid?o e o retraimento tamb?m podem ser considerados como um abandono afetivo, o que pode ser reconhecido nos adolescentes que possuem apenas amigos virtuais. Entendemos tamb?m que um ambiente acolhedor e confi?vel contribui para a constru??o da identidade de um adulto saud?vel, e que uma presen?a potencial, implicada e reservada para acolher as ang?stias do adolescente, favorece a supera??o das dificuldades por ele enfrentadas. Assim, o ambiente em que os adolescentes vivem deve ser capaz de estar aberto ? sua comunica??o assim como ao seu sil?ncio. J? o ambiente virtual, quando bem utilizado, pode ser visto como um espa?o potencial para a experi?ncia l?dica e a criatividade, favorecendo a descoberta, por parte do adolescente, de ser algu?m em algum lugar.

No presente trabalho foi estudada a influência do tipo e da quantidade de cargas nas propriedades mecânicas de elastômeros usados como isolantes térmicos em motores-foguetes. Foram selecionados seis tipos de cargas: sílica, caulim, talco, óxido de ferro, asbestos e negro de fumo. A quantidade de carga adicionada foi variada de acordo com a carga utilizada, quantidades estas que possibilitaram fácil processamento e confecção de corpos de prova. Os corpos de prova foram cortados conforme com as normas para medidas de dureza, resistências à tração e alongamento. Verificou-se que algumas cargas, como a sílica, o talco e o caulim não influenciam as propriedades mecânicas do Polibutadieno Hidroxilado. Estes tipos de cargas, não são considerados cargas reforçantes, mas são usados para baratear o custo do composto, pois não alteram as propriedades mecânicas do Polibutaieno Hidroxilado. Com relação aos Asbestos, Negro de Fumo e Óxido de Ferro, foi verificado que os mesmos melhoram a resistência à tração do Polibutadieno Hidroxilado sem alterar o alongamento do mesmo. Das três cargas, o Negro de Fumo é a mais utilizada nos "liners" à base de PBLH de motores-foguetes de pequeno, médio e grande porte, pois apresenta fácil processamento e melhores propriedades mecânicas. No caso de elastômeros sólido tipo NBR, só a sílica e o negro de fumo têm influência na propriedade mecânica deste polímero.

Os vidros utilizados para isolação de semicondutores possuem em sua composição concentrações elevadas de óxido de chumbo. Ele é usado para abaixar a temperatura de fusão, diminuir a viscosidade do fundido, diminuir a tensão superficial, resultando numa superfície homogênea e brilhante. Possui alta resistividade elétrica. Outra importante propriedade dos vidros de chumbo é o coeficiente de dilatação térmica que se aproxima do coeficiente de dilatação da lâmina de silício, tornando-se ideal a sua aplicação em semi-condutores. A busca por tecnologias mais limpas tem levado muitos pesquisadores à alternativas para redução ou eliminação de produtos potencialmente tóxicos, entre eles, o óxido de chumbo. Neste trabalho procurou-se uma alternativa ao uso do óxido de chumbo para aplicação na isolação de semi-condutores através de vidros do sistema Zn-B-Si. Os vidros A e B, à base de zinco (Zn-B-Si), foram preparados a partir da mistura de pós de óxidos e produzidos à partir da fusão em um forno elétrico seguido de um resfriamento rápido. Estes vidros foram moídos e analisados pelas técnicas de difração de raios-X, difração à laser, microscopia eletrônica de varredura, microscopia óptica e medições elétricas. Avaliou-se os mecanismos de refusão dos vidros de chumbo e de zinco sobre as lâminas de silício e em seguida determinou-se tensão de ruptura elétrica nas lâminas de silício. Nos testes de tensão de ruptura elétrica, o vidro de chumbo apresenta valores superiores aos vidros à base de zinco. Os valores de tensão de ruptura elétrica do vidro B foram inferiores ao vidro A devido a uma maior quantidade de microbolhas presentes na interface vidro-silício.

Os motores instalados nos foguetes desenvolvidos atualmente no Brasil utilizam o propelente sólido como o principal componente gerador de empuxo. Durante a fase de fabricação desses motores é utilizado um revestimento interno de material isolante térmico, a fim de proteger o invólucro do motor das altas temperaturas produzidas pelos gases gerados na combustão. A adesão entre o bloco de propelente sólido e o isolante térmico é realizada por uma fina camada aderente, denominada por "liner". Essa adesão deve assegurar que todo o conjunto se mantenha adequadamente unido durante as etapas de estocagem, transporte, montagem e lançamento. A utilização de motor com irregularidades de continuidade nessa adesão pode provocar a geração descontrolada de gases, sendo que essa situação tem potencial para causar a explosão do motor-foguete. No processo adotado pelo Instituto de Aeronáutica e Espaço, após a aplicação da aludida camada, um especialista realiza a tarefa de inspeção visual minuciosa em busca de áreas irregulares, na superfície da camada aderente, capazes de comprometer a adesão do propelente. Decorrente da natureza da mencionada tarefa, a adoção da visão computacional como recurso para auxiliar a inspeção de superfícies de camada aderente se mostrou favorável como contribuição para esse processo. Nesse contexto, este trabalho propõe a utilização de algoritmo baseado em visão computacional para auxiliar o especialista na detecção de áreas com superfícies irregulares. Estão previstos, basicamente, nesse algoritmo recursos para parametrização, tratamento de reflexos, e análises de intensidade de cor. A validação dos recursos do algoritmo foi obtida por meio de testes práticos executados em protótipo dedicado para esse fim. Os resultados positivos obtidos nos testes sugerem que o algoritmo, quando for integrado em arquitetura física afim, será capaz de auxiliar a tarefa de identificar áreas irregulares, na superfície da camada aderente, capazes de comprometer a adesão do propelente.

Apesar de o protozoário Toxoplasma gondii ser considerado a única espécie válida para o gênero, são reconhecidas três linhagens clonais, denominadas Tipo I, Tipo II e Tipo III, predominantes em países da Europa ocidental e Estados Unidos. Com a pesquisa de amostras deste parasito provenientes de outras regiões do mundo, como no caso do Brasil, várias outras configurações genotípicas diferentes das dos arquétipos mencionados acima vêm sendo encontradas. Neste trabalho, quarenta galinhas/galos (Gallus domesticus) de criação livre de oito propriedades rurais de áreas limítrofes ao Pantanal da Nhecolândia no estado do Mato Grosso do Sul foram eutanasiadas e amostras de sangue, cérebro e coração foram coletadas. O sorodiagnóstico foi realizado através do Teste de Aglutinação Modificado (MAT) e, com um pool de órgãos dos animais positivos, foi realizado bioensaio em camundongos. Foram obtidos, após o bioensaio, 11 isolados de T. gondii. O DNA foi extraído dos tecidos dos camundongos infectados e a tipificação dos isolados foi realizada utilizando 12 marcadores PCR-RFLP, genericamente denominados SAG1, 5´3´SAG2, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, c29-2, L358, PK1, Apico e CS3. Vinte e sete galinhas (67,5%) foram sorologicamente positivas para T. gondii e 13 (32,5%) foram negativas. Das amostras soropositivas, 7 (25,9%) foram positivas na diluição 1:5, 3 (11,1%) em 1:10, 2 (7,4%) em 1:20, 3 (11,1%) em 1:320, 1 (3,7%) em 1:640, 3 (11,1%) em 1:1280, 2 (7,4%) em 1:2560, 4 (14,8%) em 1:5120 e 2 (7,4%) em 1:10240. Quanto à genotipagem, cinco genótipos foram revelados nos 11 isolados de galinhas de cinco propriedades do município de Aquidauana e uma propriedade do município de Rio Verde do Mato Grosso, incluindo um genótipo misto encontrado em um isolado (TgCkBr198) que demonstrou um complexo cujos padrões são uma combinação de 2 alelos observados em oito loci. Dois genótipos foram descritos pela primeira vez, considerando os 140 isolados de galinhas de diferentes regiões brasileiras avaliadas em estudos anteriores. Os resultados corroboram com estudos anteriores sobre os isolados de T. gondii no Brasil, confirmando sua diversidade e atipicidade. / Despite the protozoan Toxoplasma gondii is considered the only valid species for the genus, three clonal lineages are recognized, known as the Type I, Type II and Type III, which predominate in Western European countries and the USA. The search for samples of this parasite from other regions of the world, as in the case of Brazil, has revealed different genotypes other than the archetypes above mentioned. In this study, forty free range chickens (Gallus domesticus) of eight farms from areas belonging to the Pantanal Nhecolândia in the state of Mato Grosso do Sul were euthanized and samples of blood, brain and heart were collected. The serodiagnosis was performed using the technique of modified agglutination test (MAT) and a pool of organs of seropositive animals was used to perform the bioassay in mice. It was obtained 11 isolates of T. gondii. DNA was extracted from tissues of infected mice and characterization of isolates was performed using 12 PCR-RFLP markers, known generically SAG1, 5\'3\'SAG2, SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, c22-8, C29-2, L358, PK1, Apico and CS3. Twenty-seven chickens (67.5%) were serologically positive for T. gondii and 13 (32.5%) were negative. Among the seropositive samples, 7 (25.9%) were positive at 1:5 dilution, 3 (11.1%) in 1:10, 2 (7.4%) in 1:20, 3 (11.1%) at 1:320, 1 (3.7%) at 1:640, 3 (11.1%) in 1:1280, 2 (7.4%) in 1:2560, 4 (14.8%) on 1:5120 and 2 (7.4%) at 1:10240. With regard to genotyping, five genotypes were found within 11 isolates from chickens from five properties in the municipality of Aquidauana and one property of the municipality of Rio Verde of Mato Grosso, including a mixed genotype found in one isolate (TgCkBr198) that showed a complex pattern which is a combination of 2 alleles observed at eight loci. Two genotypes have been described for the first time, considering the 140 isolates from chickens in different Brazilian regions evaluated in previous studies. The results corroborate with previous studies on the isolates of T. gondii in Brazil, confirming their diversity and atypicality.

Espécies em anel se formam quando uma população se expande em volta de uma barreira geográfica, de modo que as duas frentes de expansão que se reencontram no outro lado da barreira estejam isoladas reprodutivamente. Esse complexos são considerados um exemplo emblemático de especiação por distância, processo no qual a aquisição do isolamento reprodutivo depende da atenuação do fluxo gênico pela distância. Barreiras geográficas que limitam a dispersão dos organismos têm tido um papel central no estudo da especiação, já que a sua presença tem o potencial de facilitar este processo. Além disso, a dispersão também é limitada por fatores endógenos, de modo que, frequentemente, a área acessível a cada indivíduo é menor do que a área total da distribuição da espécies. Na especiação por distância, esta limitação é o principal mecanismo promovendo a redução do fluxo gênico. Usando modelos baseados em agentes, simulamos a expansão e divergência de uma população em volta de uma barreira central com presença contínua de fluxo gênico. Nossos resultados mostram que espécies em anel são instáveis e resultam em especiação completa ou homogeneização da divergência adquirida durante o processo de expansão, porém podem persistir por períodos prolongados de tempo, mesmo na ausência de seleção ambiental. Esta persistência é afetada pela configuração da paisagem, e sugerimos que a forma da área de distribuição de Phylloscopus trochiloides, um dos casos mais bem documentados deste fenômeno, pode ser importante para a sua existência. Com este exemplo, mostramos que modelos baseados em agentes podem ajudar a entender padrões de distribuição espacial da variação genética e discriminar o efeito de atributos geográficos em casos particulares. Dada a demonstração da ocorrência de espécies em anel nas simulações, investigamos em mais detalhe as suas condições de formação. Concluímos que, na ausência de seleção ambiental, estes complexos são raros e se formam apenas em condições muito restritas que dependem conjuntamente de atributos da paisagem, da população e dos organismos. No entanto, a aquisição do isolamento reprodutivo é melhor explicada pela estruturação populacional gerada pela configuração da paisagem, do que pela reprodução local. Discutimos que a especiação por distância pode ser particularmente favorecida no caso de espécies em anel devido à ocorrência de expansão populacional, cenário no qual a deriva genética pode potencializar a fixação diferencial de alelos. As condições de formação de espécies em anel por especiação por distância são muito restritas e, só por isso, já seria esperado que elas fossem raras. Como as espécies estão sujeitas à variação ambiental, há grandes chances de que surjam lacunas em suas distribuições ao longo do tempo. Espécies em anel podem estar especialmente sujeitas ao surgimento de lacunas, pois a sua formação é favorecida por áreas particularmente estreitas. Além disso, na ausência de seleção ambiental, o fluxo gênico as torna intrinsecamente instáveis, e espera-se que estes complexos se separem ou se misturem completamente com o tempo. Esta transitoriedade é mais um fator a contribuir para a raridade de espécies em anel / Ring species are circular chains of gradually changing taxa which are formed when a population expands around a geographic barrier in such a way that the two expanding fronts, which meet after many generations, are reproductively isolated. These structures are considered a prime example of speciation by distance, a process in which the acquisition of reproductive isolation depends on the attenuation of gene flow with distance. Geographical barriers that limit dispersal have played a central role in the study of speciation, since their presence has the potential of facilitating divergence. In addition, dispersal is also limited by endogenous factors, so that the area accessible to each individual is less than total area of the species distribution. In speciation by distance, this limitation is the main mechanism promoting the reduction of gene flow. Using agent-based models, we simulated the expansion and divergence of a population around a central barrier with ongoing gene flow. Our results show that ring species are unstable to speciation or mixing, but can persist for extended times, even in the absence of environmental selection. This persistence is affected by landscape configuration and we suggest that the shape of the distribution area of the greenish warbler ring species, one of the best documented examples of this phenomenon, may be important for its existence. These results imply that agent-based models can aid the understanding of patterns of spatial distribution of genetic diversity and the effect of spatial attributes in particular cases. Given the demonstration of ring species in the simulations, we investigated the conditions for their formation in more detail. We conclude that, in the absence of environmental selection, these complexes are rare and form only under very restricted conditions which depend on landscape, population and individual features. However, population structuring leading to the acquisition of reproductive isolation is better explained by landscape configuration than by local mating. We suggest that speciation by distance can be particularly favored in the case of ring species due to population expansion, since under these circumstances genetic drift can enhance differential allele fixation. The conditions for ring species formation by speciation by distance are very limited, which by itself could explain their rarity. Since species are subject to environmental variation, gaps in their distributions may appear over time. Ring species may be especially susceptible to the emergence of gaps, since their formation is favored by particularly narrow areas. Furthermore, in the absence of environmental selection, these complexes are intrinsically unstable due to the presence of gene flow, and are expected to completely speciate or mix. This transience in time is another factor contributing to the rarity of ring species