A pitiose é uma doença granulomatosa, tendo como agente etiológico Pythium insidiosum De Cock, 1987, que atinge eqüinos, provocando quadro infeccioso na pele e tecido subcutâneo , caninos com apresentação gastrintestinal e cutânea , bovinos com doença cutânea , felinos e humanos, com quadro clinico de arterite, queratite e celulite periorbital. Esta enfermidade é mais prevalente em áreas tropicais, subtropicais ou temperadas. Também animais silvestres podem se infectar pela doença. O gênero Pythium pertence ao Reino Stramenopila, Filo Oomycota, cujos membros caracterizam-se por produção de zoósporos biflagelados durante a reprodução assexuada. O desenvolvimento de pitiose experimental nas espécies naturalmente infectadas não foi ainda relatado, mas os coelhos são sensíveis à inoculação de zoósporos e podem ser usados como modelo experimental para estudo da pitiose. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência de 3 processos de produção de imunoterápicos contra pitiose, produzidos a partir do cultivo e posterior maceração ou sonicação, em coelhos infectados experimentalmente com 17.500 zoósporos do oomiceto Pythium insidiosum (cepa CBS 101555). Todos os coelhos foram inoculados com zoósporos 1 mês antes da aplicação dos imunoterápicos. Para avaliação dos imunoterápicos, os coelhos que desenvolveram lesões foram divididos em 4 grupos de 5 animais: Grupo 1 – Tratado com placebo; grupo 2 – tratado com o imunoterápico sonicado; grupo 3 – tratado com o imunoterápico misto e o grupo 4 - Imunoterápico macerado mecanicamente. Todos os animais receberam 8 doses do imonoterápico ou placebo com intervalos de 14 dias. Um mês após a inoculação dos zoósporos móveis, foram iniciadas as medições das áreas inoculadas. Os resultados indicaram que o imunoterápico macerado, utilizado no grupo 4, foi estatisticamente (P<0.001) mais eficiente que os demais, diminuindo em até 71,8% a área dos nódulos provocados pelo Pythium insidiosum, após 26 semanas de avaliação. Neste período 2 coelhos deste grupo foram curados. Os animais do Grupo 2 que receberam o imunoterápico sonicado, não mostraram nenhuma reação, detectando-se aumento de até 221% no tamanho das lesões. Nos coelhos do grupo 3, imunoterápico misto, houve aumento das lesões em 50%. A provável causa deste insucesso com o grupo 2, está na desnaturação dos antígenos protetores através dos processos de sonicação. Os dados gerados nesta tese podem inferir que, futuramente, novas perspectivas se abrem para o estudo da pitiose e seu controle.

Orientador: Anne Helene Fostier / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-05T10:43:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_Jamilda_M.pdf: 1013559 bytes, checksum: 995725570940ee07ede7e66602c97552 (MD5) Previous issue date: 2005 / Mestrado / Quimica Analitica / Mestre em Química

Orientadores: Paulo Maria Ferreira de Araujo, Beatriz Maria Machado de Medeiros / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T22:20:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_AdrianadeMoraes_M.pdf: 4942510 bytes, checksum: 8395cb0fcb940ba72f00fcaa6e68c3d7 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: A infecção por Yersinia enterocolitica O:3 é uma dentre várias patologias humanas causadas por bactérias gram-negativas, que pode resultar em um quadro de doenças autoimunes, entre elas a artrite reativa. A ativação policIonal de células B tem sido um dos mecanismos propostos que levaria a um aumento de produção de imunoglobulinas autoreativas e por conseguinte estaria associada à indução de uma doença auto-imune. Esta ativação de linfócitos B associada à infecção pela Yersinia enterocolitica O:3, foi pela primeira vez demonstrada em estudos realizados por MEDEIROS, em 1994, a partir de um modelo experimental desenvolvido em camundongos SWISS convencionais. Neste presente trabalho utilizando camundongos Swiss originariamente livres de patógenos específicos (SPF) foi quantificada células esplênicas secretoras de imunoglobulinas (Igs totais e isotipos) após infecção com a Yersinia enterocolitica O:3 e estimulações com seus derivados: Extrato bruto, "Released Proteins' (RP) e Lipopolissacárides, através da técnica de PFC-Reverso-Proteína A, foi utilizado animais normais como grupo controle. Nos soros desses mesmos animais foram detectados níveis de anticorpos (IgG, IgMe IgA) anti-Yersinia.e pesquisados auto-anticorpos frente a um painel de constituíntes autólogos, representados por: miosina , mielina, actina, colágeno, tireoglobulina, laminina e cardiolipina através da técnica de ELISA. Os resultados demonstraram uma elevação no número de células esplênicas secretoras de anticorpos em todas as determinações realizadas (PFC-Ig totais e PFC-isotipos) com animais infectados com Yersinia enterocolitica O:3 ou inoculados com os seus derivados a partir do terceiro dia de inoculação.Estes dados representam uma redução quantitativa do número total de PFC em cerca de 12 vezes em relação àquela observada nos animais convencionais. Anticorpos IgG e IgM específicos anti-Yersinia foram detectados em níveis elevados nos soros dos animais infectados ou estimulados com os diferentes derivados, porém não foram detectados níveis significativos de IgA. Na pesquisa de auto-anticorpos realizada nos soros de animais infectados pela Yersinia foi demonstrada reatividade apenas com a miosina, enquanto que os soros dos animais estimulados com LPS foram reativos com mielina, actina e laminina e os inoculados com RP reagiram com mielina, tiroglobulina e cardiolipina. Em conclusão os camundongos Swiss de origem SPF infectados com Yersinia enterocolitica O:3 ou estimulados com os seus derivados. apresentaram uma ativação policlonal do repertório de linfócitos B. À semelhança do que ocorre com camundongos Swiss convencionais o resultado de tal ativação policlonal é provavelmente não apenas da estimulação de LPS mas de outros componentes envolvidos na infecção. A diferença no perfil de um animal convencional e um de origem SPF reflete a influência do microambiente do hospedeiro na resposta imune. Embora não tenha sido observado sinais de artrite nos animais submetidos às diferentes estimulações, a detecção de anticorpos nos seus soros para constituíntes autólogos é sugestiva para uma possível associação entre o fenômeno de ativação policlonal e a regulação do sistema imunológico / Mestrado / Imunologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientadores: Admar Costa de Oliveira, Olavo Rusig / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-20T23:44:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sales_RonaldodeOliveira_D.pdf: 5143635 bytes, checksum: a0afd36e63943c4f088561aa42780cb0 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo estudar propriedades nutricionais da silagem de tilápia do Nilo (Oreochromis (Oreochromis)niloticus, Linnaeus), através da sua caracterização química e avaliação nutricional com ensaios biológicos em ratos. A silagem foi preparada com 100% da despesca pela trituração dos peixes inteiros, sem a retirada das escamas, barbatanas, guelras e vísceras, pela adição de 3 % do peso do triturado de ácido fórmico a 90%" até a completa liquefação da mistura. A silagem foi armazenada em temperatura ambiente por 180 dias e monitorada através de análises químicas quinzenais. Foram realizadas as seguintes determinações: a) da composição química proximal, que não mostrou diferenças significativas (p > 0,05) entre os tratamentos para as variáveis umidade, proteína, lipídios e cinzas; b) do pH da silagem, que situou-se na faixa de 3,8 durante todo período de armazenagem; c) do aumento do grau de autólise medido pela degradação protéica com o aumento dos" solúveis totais", nitrogênio não-protéico, nitrogênio alfa-amínico e da produção de NH3 durante os primeiros 90 dias de armazenagem; d) do aumento significativo do teor de malonaldeído durante todo o curso da armazenagem; e) das bases voláteis totais que demonstraram progressão lenta no processo de acordo com o período de armazenagem; t) da caracterização nutricional, que mostrou que a silagem de tilápia do Nilo contém todos os aminoácidos essenciais, vários minerais e ácidos graxos essências; g) das análises microbiológicas, mostrando que a contagem de mesófilas apresentou decréscimo significativo entre as amostras com valores inferiores a 103 UFC/g; h) da intensa diminuição da viscosidade simultânea à elevação nos valores de TBARS; i) do estudo das propriedades funcionais, que mostrou que a silagem da despesca da tilápia do Nilo, pode ser usada como complemento protéico incorporado em rações para animais, devido às suas características de solubilidade e hidratação. A maior parte da solubilização do nitrogênio, 68%, indicada pela razão nitrogênio solúvel/nitrogênio total, ocorreu na primeira semana de armazenagem, tendo asilagem se apresentado totalmente liquefeita decrescendo significativamente, entre a silagem nova (30 dias) e a antiga com 90 dias de armazenagem, como ficou demonstrado através da baixa utilização da proteína pelos ratos. Esta redução de qualidade foi devida a uma combinação de autólise e rancificação do material, indicando que o grau de autólise pode ser usado como um critério de qualidade nutricional para a silagem de tilápia do Nilo. A proteína da silagem nova com 20 a 30 dias de armazenamento apresentou escore químico de 96.3% contra 54.5% da silagem antiga com 90 dias de armazenamento, sendo que em todas as silagens nova e antiga, nenhum dos aminoácidos essências foram limitantes com a silagem nova apresentando quociente de eficiência líquida da proteína (NPR) de 2.62, contra 2.85 para a caseína. Inferiu-se desta forma, que a oxidação lipídica teve um papel determinante no comprometimento desses aminoácidos e, consequentemente, na qualidade protéica da silagem. Estudou-se também o efeito do emprego de diferentes níveis de silagens integral e parcialmente desengordurada em rações formuladas para suínos nas fases de crescimento e terminação, usando o rato como modelo experimental, em três etapas, A, B e C, sendo que no Ensaio A, determinaram-se os valores dos 4 tratamentos, Nuvilab, silagem nova, silagem antiga e controle, com a silagem nova apresentando um NPR bem superior as demais dietas a nível de 5%. No Ensaio B, os níveis de silagem adotados foram: 0%, 5%, 10% e 15% com os ratos recebendo rações com 16% de proteína bruta na fase de crescimento, e com 14% de proteína bruta na fase de terminação, com ração base composta de milho, farelo de soja, fosfato bicálcico, sal comum e suplemento vitamínico mineral, sendo que a ração (RC 2 + 5% de silagem) apresentou ratos significativamente mais pesados (p < 0,05) durante os experimentos. No Ensaio C, estudou-se o efeito da avaliação nutricional da caseína com as silagens integral e parcialmente desengorduradas nas proporções de 5%, 10% e 15% com e sem óleo, verificando-se que a combinação de caseína + 5% de silagem sem óleo melhora o valor nutricional da dieta protéica como também o quociente de eficiência protéica líquida (NPR). Utilizou-se o delineamento estatístico inteiramente casualizado, com 6 a 8 repetições, sendo o ensaio conduzido durante 10 dias, com balanço de nitrogênio nos últimos 5 dias, com pesagens a cada 5 dias, com água e dieta "ad libitum", sendo possível detectar diferenças significativas (p < 0,05) entre os tratamentos nas diversas etapas dos ensaios biológicos. Concluiu-se então, que o processo de obtenção da silagem, tecnicamente viável e sugere-se que a "silagem ácida" seja utilizada como complemento protéico para rações tradicionalmente usadas a base de milho e farelo de soja para suínos / Abstract: The objective of the present work was to study the nutritional properties of Nile's tilapia silage (Oreochromis (Oreochromis)niloticus, Linnaeus) by means of its chemical characterization and nutritional evaluation based on biological assays in rats. The silage was prepared from 100% ground whole fish without the removal of scales, fins, branchia or guts and with the additional 3% of the ground fish weight in 90% formic acid and incubation for 48 hours until the mixture was completely liquefied. The silage was stored at room temperature for 180 days and monitored every other week by chemical analysis. The following determinations were performed: a) the chemical proximate composition which did not show any significant differences (p > 0,05) between the treatment for the variables humidity, protein, lipid, and ash contents; b) silage pH, which remained in the 3.8 range throughout the storage period; c) increase in the degree of autolysis as measured by protein degradation, as monitored by increases in total soluble solids, non-protein nitrogen, alpha-amino nitrogen and production of NH3 during the first 90 days of storage, d) the significant increase in malonaldehyde content throughout storage; e) the overall volatile bases content showing a slow development of the process according to the storage period; f) the nutritional characterization which showed that Nile's tilapia silage contains all the essential amino-acids, several essential minerals and fatty acids; g) microbiological analysis which showed that the mesophyllic count was significantly reduced in those samples with initial count below 103 UFC/g; h) the significant reduction in the viscosity with a simultaneous increase in TBARS values; i) study of the functional properties which indicated that Nile's tilapia silage might be used as a protein supplement for animal feed because of its solubility and hydration characteristics. Most of the nitrogen solubilization, as reflected by the soluble nitrogen/total nitrogen ratio, occurred in the first week of storage at a rate of 68%, when the silage was completely liquified, presenting a significant decrease between the fresh silage and old silage, as evidenced by the low utilization of the proteins by the rats. Such a decrease in quality was due to a combinatipn of autolysis and rancidity of the material, thus suggesting that the degree of autolysis may be used as a nutritional quality criterion for Nile's tilapia silage. Fresh silage protein, stored for 20-30 days showed a chemical score of 96.3% as compared to 54.5% for the old silage, which had been stored for 90 days, mainly due to lipid-protein interaction, although, essential amino-acids were limiting in either the new or old silages; A net protein efficiency ratio (NPR) of2.62 was observed, compared to one of 2.85 for casein The study also included the effects of the use of different levels of whole and partially defatted silage prepared for the feeding of swine during both the growing and terminal stages, by using rats as experimental samples in three different phases, A, B and C. in assay A, the values for the four treatments (Nuvilab, fresh silage, old silage and control) were determined, the fresh silage presented a much higher NPR than those of the other diets at a level of 5%. In assay B, the following silage levels were adopted: 0%, 5%, 10% and 15% the rats food containing 16% of crude protein in the growing stage and 14% in the terminal stage; the basic food consisted of com, soybean bran, dicalcium phosphate, plain salt and a mineral vitaminic supplement. The mixture (RC 2 +5% silage) resulted in .significantly heavier rats (p < 0,05) during the experiments. ln assay C, the effect of the casein nutritional evaluation was studied using whole and partially defatted silage at the rates of 5%, 10%, and 15%, both with and without oil. It was noted that the combination of casein and 5% defatted silage improved the nutritional value of the protein diet, as \Vell as the net protein efficiency ratio (NPR). A totally casualized statistical design was used with 6-8 repetitions and the assay were carried out for 10 days with a nitrogen balance during the last 5 days of the experiment. Weighing was performed every 5 days with both water and diet" ad libitum" which allowed for the detection of significant differences (p < 0,05) between the treatments in the several phases of the biological assays. It follows that the process for obtaining silage is technically feasible and it is suggested that the "acid silage" could be used as a protein supplement in swine feed made from com and soybean bran / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Orientadores: Antonio Carlos Boschero, Maria Alice Rostom de Mello / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T05:47:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carneiro_EverardoMagalhaes_D.pdf: 4436080 bytes, checksum: 54c2f9b98b9e2e6c26d899c58986299f (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo estudar alguns dos possíveis determinantes da resposta pancreática deficiente à estimulação com diferentes substâncias insulinotrópicas, tendo os ratos submetidos à dieta hipoprotéica como modelo experimental. Os sinais de desnutrição tais como: baixo peso corporal, hipoalbuminemia, teores elevados de glicogênio e de gordura hepática bem como sódio total aumentado estiveram presentes nos animais que receberam dieta hipoprotéica. Esses animais apresentaram ainda menores níveis de insulina plasmática e conteúdo total de insulina diminuído. Através da microscopia eletrônica constatamos nas células dos animais hipoprotéicos desorganização da arquitetura, redução do volume, ausência de nucléolo, perda da polaridade, número reduzido de grânulos, grânulos imaturos, retículo endoplasmático rugoso formando cisternas curtas e ingurgitadas com conteúdo floculento e por último, degeneração e edema mitocondrial. Por outro lado, os estudos In vitro demonstraram maior oxidação da glicose por ilhotas de ratos hipoprotéicos. Os efeitos da glicose, leucina, KIC, tolbutamida e arginina (esta na presença da glicose) sobre efluxo de 86Rb foram semelhantes àqueles observados em ilhotas de ratos normoprotéicos. Contudo, o efeito da arginina (na ausência de glicose) bem como da diazoxida e do TPA sobre o efluxo do referido isótopo foi menor em relação aqueles registrado em ilhotas-controle. A captação e o efluxo do 45Ca, na presença de glicose ou arginina, também foi menor ns ilhotas provenientes de ratos hiprotéicos comparados às ilhotas de ratos normoprotéicos. Consoante com os resultados sobre o efluxo de 86Rb e 45Ca, a secreção de insulina estimulada por glicose, altas concentrações de K+, tolbutamida, OXO-m, TPA e arginina, foi menor nas ilhotas de animais hipoprotéicos quando comparado às ilhotascontrole. Diante disso o desacoplamento entre o A TP, gerado pelos nutrientes ensaiados, e a despolarização da membrana com conseqüentes alterações na permeabilidade aos íons K+ e Ca2+ parece ser uma das causas mais importantes na resposta secretária reduzida por ilhotas de ratos hipoprotéicos. Em paralelo parece haver também desacoplamento entre a via de sinalização, induzida pela interação hormônio-receptor e influxo de Ca2+, reduzindo assim a [Ca2+]i. Concluindo, a secreção reduzida de insulina frente às inúmeras substâncias utilizadas parece ter como causa preponderante a incapacidade das células B de ratos hipoprotéicos em manejar adequadamente os íons Ca2+ que, em última análise é o ativador do mecanismo secretório / Abstract: We have analyzad in this study the possible mechanisms involved in the poor secretory response to different secretagogues in islets derived from rats maintained with low protein diet. After 8 weeks, rats kept on low protein diet showed the following features: low body weight, hypoalbuminemia, high liver fatty acids and glycogen contents and increased total body Na+. In these animals plasma insulin levels and total insulin content were reduced as compared to control rats. Pancreatic B cells from hypoproteic rats showed marked morphological alterations such as: reduced cell volume, loss of cell polarity, altered endoplasmic reticulum, mitochondrial oedema, nucleolus absent and reduced number of insulin-containing granules, which frequently displayed abnormal appearance. Experiments carried out in vitro showed increased glucose oxidation by hypoproteic islets. Nevertheless, there was no significant difference concerning the 86Rb efflux rate induced by glucose, leucine, kic, tolbutamide and arginine (arginine in the presence of glucose) between islets from hypoproteic and control islets. However the effect of arginine (in the absence of glucose), diazoxide and TPA on 86Rb efflux from hypoproteic islets was as reduced compared to control islets. Alterations in 45Ca uptake and efflux, induced by glucose or arginine were reduced when compared to that observed in control islets. Insulin secretion in the presence of glucose, high concentrations of K+, tolbutamide, OXO-m, TPA, leucine and arginine was also reduced in those islets from hypoproteic rats in comparison with the control islets. These data suggest that uncoupling between A TP (produced by nutrient metabolism) and membrane depolarization associated to impairment in K+ and Ca2+ membrane permeabilities could be related to the poor secretory response observed in islets derived from rats kept on low protein diet. In addition, alterations in the hormone receptor second messenger pathway in association with alterations in Ca2+ membrane permeability and internal Ca2+ mobilization could be involved in the phenomenon. In conclusion, the reduced insulin secretion observed in hypoproteic islets in response to different stimuli, seems to be related, mainly, to defects in the ability of B cells in handling adequately the Ca2+ ions / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia

Orientador: Albetiza Lobo de Araujo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T15:07:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_Luizde_M.pdf: 4179090 bytes, checksum: 98eeb71706df15ef7df0c8cbc6aa8696 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A capacidade de venenos ofídicos induzirem efeitos locais é bem conhecida. Neste trabalho, investigamos o edema e a hemorragia, induzidos pelo veneno de Bothrops lanceolatus (VBL) "in natura" e/ou aquecido, em ratos. O edema foi induzido por injeção subplantar (12,5-100 µg/pata) e quantificado por hidropletismógrafo. A hemorragia foi induzida por injeção intramuscular (0,25-64 µg), no músculo gastrocnêmio esquerdo, e expressada como a quantidade de hemoglobina(hb) acumulada no músculo, determinada pelo método de cianometemoglobina. Com todas as doses do veneno testadas, o edema apresentou resposta máxima 15 minutos após a administração. A resposta máxima foi observada com o VBL na dose de 75 µg/pata (salina controle = 0,09 ± 0,001 ml e veneno = 1,09 ± 0,05 ml, n=7), e desapareceu dentro de 24 horas. O efeito máximo hemorrágico foi observado com 32 /µg do VBL (salina controle =1,23 ± 0,06 mghb/g de tecido e veneno = 6,77 ± 0,69 mghb/g de tecido, n=6), e desapareceu dentro de 72 horas. O VBL aquecido (97°C, 30 segundos) reduziu o edema em 70% e aboliu completamente a atividade hemorrágica. A administração concomitante do VBL (75 /µg) aquecido, com o iloprost (0,1 µg), potencializou o edema em duas vezes. Pré-tratando-se os ratos com mepiramina (6mg/kg), ciproheptadina (6mg/kg), mepiramina e ciproheptadina (6 mg/kg), 15 minutos antes; dexametasona (1 mg/kg), 2 horas antes; BW A4C (10 mg/kg) e Hoe 140 (0,6 mg/kg), 30 minutos antes; inibiram o edema induzido pelo VBL aquecido (75g), associado ao iloprost (0,1 µg), em 28%, 55%, 77%, 63%, 35% e 30%; respectivamente. A co-administração do VBL aquecido (75 µg), com o captopril (300 µg), potencializou o edema em 44%, mesmo na ausência do iloprost. A indometacina (10mg/kg) não foi efetiva. A incubação do soro antiBothrops lanceo/atus (antiVBL) com o VBL "in natura", neutralizou completamente o efeito hemorrágico mas aboliu somente parcialmente (45%) o edema. A administração intravenosa do antiVBl imediatamente após a injeção subplantar ou intramuscular do VBl, neutralizou 30% do edema e 38% da hemorragia. Quando o antiVBl foi incubado com o VBl aquecido associado ao iloprost, e administrado na pata dos ratos, a neutralização foi discreta (em torno de 30%), e foi observada somente com a menor proporção (0,125 ml antiVBLlmg VBl). Quando administrado por via intravenosa imediatamente após a injeção do veneno aquecido, foi completamente ineficaz. Estes resultados, indicam que o VBl induz edema na pata e hemorragia no músculo de ratos. O VBl aquecido induz edema livre de hemorragia. O antiVBL neutralizou completamente o efeito hemorrágico e inibiu somente parcialmente o edema, quando foi pré-incubado com o VBL. O antisoro foi pouco efetivo em neutralizar ambas as atividades quando foi administrado por via intravenosa. Estas observações indicam que histamina, serotonina, bradicinina e produtos da lipoxigenase estão envolvidos no edema causado pelo veneno de Bothrops lanceolatus / Abstract: The ability of snake venoms to induce local effects is well known. In this thesis, the oedema and hemorrhage induced in rats by heated and non-heated Bothrops lanceolatus venom (BL V) was investigated. Oedema was induced by the subplantar injection of venom (12.5-100 µg/paw) and was quantified by hydroplethysmography at various times thereafter. Hemorrhage was induced by injecting venom (0.25 - 64 µg) into the left gastrocnemius muscle and was expressed as accumulation of extravascular hemoglobin(hb) as determined by the cyanomethemoglobin method. With ali of the venom doses tested, the oedematogenic response peaked within 15 mino The maximal response was observed at a venom dose of 75 µg/paw (saline control = 0.09 ± 0.001 ml and venom = 1.09 ± 0.05 mi, n=7) and disappeared within 24h. The maximum hemorrhagic effect was observed with 32 µg of BLV (saline control = 1.23 ± 0.06 mghb/g of tissal and venom = 6.77 ± 0.69 mghb/g of tissal, n=6) and disappeared within 72h. Heating BLV (97°C, 30 sec) reduced the oedema by 70% and completely abolished the hemorrhagic activity. The combined administration of heated BL V (75 µg) With iloprost (0.1 µg) potentiated the oedema two-fold. Pre-treating the rats with mepyramine (6 mg/kg), cyproheptadine (6 mg/kg), mepyramine and cyproheptadine (6 mg/kg each, 15 min before), dexamethasone (1 mg/kg 2 h before), BW A4C (10 mg/kg) and Hoe 140 (0.6 mg/kg each 30 min before), inhibited the oedema induced by heated BL V (75 µg) plus iloprost (0.1 µg) by 28%, 55%, 77%, 63%, 35% and 30%; respectively. The co-administration of heated BL V (75 µg) with captopril (300 µg) potentiated the oedema by 44%, even in the absence of iloprost. Indomethacin (10 mg/kg) had no effect on the oedematogenic response. Pre-incubating native (non-heated) BL V with antiBL Vantiserum completely neutralized the hemorrhagic effect but only partially. abolished (45%) the oedema. The intravenous administration of antiBL V antiserum immediately after the subplantarar intramuscular injection of venom neutralized 30% of the oedema and 38% of the hemorrhage. When antiBLV antiserum was incubated with heated BLV plus iloprost and injected into rat paws, the neutralization was discrete (abaut 30%) and was observed only with the lowest proportion (0.125 ml antiBLV/mg BLV) tested. When administered intravenously immediately after the injection of heated venom, there was no neutralization whatsoever. These results indicate that non-heated BL V induces oedema in the paw and hemorrhage in the muscle of rats while heated BLV induces oedema without hemorrhage. AntiBLV antiserum completely neutralized the hemorrhagic effect and only partially inhibited the oedema when it was preincubated with BtV. The antiserum was less effective in neutralizing both activities when administered intravenously. These observations indicate that bradykinin, histamine, serotonin and lipoxygenase products are involved in the oedema caused by Bothrops lanceolatus venom / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador: Jaime Amaya Farfan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T17:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guaraldo_Elaine_M.pdf: 2087458 bytes, checksum: cbc7e73bfd4c9ed8517260d61aba41b0 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A avaliação nutricional de novos aumentos ou de novos componentes alimentares em animais experimentais é um procedimento rotineiro nos laboratórios biológicos assumindo que quaisquer condições ambientais desconhecidas ou fora de controle vão afetar, igualmente, tanto os animais experimentais como o controle. O objetivo deste trabalho foi de verificar se a estimulação sonora de alta frequência (40 kHz, 60 a 66 dB) poderia significar um estresse importante em ratos submetidos a um balanço nitrogenado de sete dias. Quatro grupos de seis ratos Wistar cada, recém desmamados, foram adaptados a dietas de alto teor protéico/boa qualidade proteica (18% de caseína - Dieta I), baixo teor proteico (5% de caseína - Dieta II), baixa qualidade proteica (18% de gelatina - Dieta III) e aprotéica (Dieta IV), e foram estimulados diariamente por uma hora, durante o período de ensaio (7 dias). Os parâmetros ganho de peso corporal, ingesta alimentar, balanço nitrogenado e concentração sérica de corticosterona dos grupos acima foram comparados com seus controles, os quais não receberam o estímulo ufírassônico. Nenhuma diferença no ganho de peso corporal foi observado entre os grupos experimentais e seus controles. No entanto, o consumo alimentar diminuiu em todos os grupos expostos ao ultrassom, mas as diferenças foram significativas apenas para as dietas H (diminuição de 26%) e III (diminuição de 33%) do grupo estressado. Com relação ao balanço de nitrogênio, foi encontrada diminuição de 13% para a dieta de alto teor protéico/boa qualidade protéica, enquanto nenhuma diferença significativa foi observada paia as dietas com quantidade deficiente de proteína e paia as dietas desbalanceadas (grupos II, IIl e IV). Este resultado foi consistente com o aumento de 134% nos níveis de corticosterona dos animais alimentados com a dieta I, e com a resposta pouco acentuada dos animais alimentados com dietas deficientes em proteína ou desbalanceadas. Os resultados sugerem que embota branda a estimulação ultrassônica como as produzidas por geradores, condicionadores e exaustores são capazes de induzir estresse, cujos efeitos poderiam ser medidos em termos de ingesta alimentar, balanço alimentar e nível de hormônios esteróides no sangue; sendo este estresse mais pronunciado nos animais que consomem as dietas de boa qualidade / Abstract: Nutritional evaluation of new foods or new food ingredients with experimental animals is routinely performed in our laboratory facilities assuming that whatever environmental conditions that are left, knowingly or otherwise, out of control will affect both experimental and control animals alike. The purpose of the present work was to verify if high frequency (40 kHz, 60 a 66 dB) sound stimulation should signify any considerable stress to rats undergoing a seven-day nitrogen-balance test. Four groups of six growing Wistar rats each, which had been adapted to either high-quality/high-protein (18% casein, diet I), low protein (5% casein, diet II), poor quality protein (18% gelatin, diet III) and no protein (diet IV) were stimulated daily for one hour, for the duration of the assay (seven days). The parameters body-weight gain, feed intake, nitrogen balance and serum concentration of corticosterone of the above were compared with those of parallel control groups, that did not receive the ultrasonic stimulation. No difference in body-weight gain was noticed between the experimental groups and their controls. Nevertheless, food consumption decreased for all groups exposed to ultrasound, but differences were significant only for diets II (26% down) and III (33% down), under stress. Regarding the nitrogen balance, a decrease of 13% was found for the high-quality, high-protein diet, while no significant differences were observed for the protein-deficient or imbalanced (groups II, III and IV) diets. This finding was consistent with the increase of 134% in the corticosterone levels of the animals feeding on diet I, and the flat response of the animals feeding on the protein deficient or imbalanced diets. The results suggest that although mild, ultrasonic stimulation, such as that produced by power generators, air conditioners and exhaust hoods, is capable of inducing stress in the Wistar rat, whose effects could be measured in terms of food intake, nitrogen balance and steroid hormone levels in the blood. The stress is more pronounced in animals consuming the high quality diets / Mestrado / Mestre em Ciência da Nutrição

Orientador: Mario Roberto Vizioli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-21T20:51:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ito_ValdirSeije_D.pdf: 3662989 bytes, checksum: b001af023d29fce3ed89294e3e1fe078 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A ciclosporina inibe a produção de IL-2, e é um potente imunossupressor na prevenção e rejeição de transplantes de órgãos humanos. Os efeitos da ciclosporina no desenvolvimento de reações inflamatórias é controverso. Inflamação periapical foram estudados em ratos normais, jovens e adultos todos tratados com ciclosporinas. Ratos tratados com ciclosporina foram injetados via subcutânea diariamente com 10 mg/kg de peso corporal durante todo período experimental ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Cyclosporin inhibits the production of IL-2, and is the most effective immunosupressor to prevent rejection of human organ transplants.The effects of cyclosporin in the development of the inflammatory process is controversial. Periapical infIammation was studied in young and adults normal and cyclosporin treated rats. Cyclosporin treated rats were injected subcutaneously daily with 10 mg/kg of body weight during the whole experimental period ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador: Konradin Metze / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T22:13:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neder_Fatima_M.pdf: 6673289 bytes, checksum: 387ff07bef49552d9e818ac22bbe569d (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: As regiões organizadoras do nucléolo (NORs) são áreas de DNA extra ou intranucleolares, contendo genes que codificam o RNA ribossomal. Estas regiões têm grande afinidade com a prata, em virtude da presença de proteínas não- histonas associadas ao RNA ribossomal e, por isso, são chamadas de AgNORs. o estudo das AgNORs tem sido utilizado predominantemente para avaliar proliferação celular, distinguir tumores malignos, de benignos, e como indicador prognóstico em neoplasias. Entretanto, a grande variedade de métodos utilizados para medir ou contar AgNORs, nos diferentes estudos, toma dificil a comparação de resultados. A escassez de trabalhos que avaliem a morfologia e a evolução das AgNORs em tecidos normais em desenvolvimento, e a falta de estudos ultra-estruturais sobre estas regiões, que poderiam contribuir para uma padronização de sua contagem, estimulou-nos a essa pesquisa.. O tecido escolhido para o estudo foi o do miocárdio de ratos em desenvolvimento intra e extra-uterino. Utilizamos o ventrículo esquerdo do coração de 95 ratos, entre o 16Q dias após a concepção e 60Q dias pós-parto, subdivididos em dois grupos: a) 16, 19 e 21 dias de vida pré-natal e b) 1,5, 8, 21 e 60 dias de vida pós-natal. Para o estudo em microscopia óptica (M. O.) utilizamos 74 animais e, para a microscopia eletrônica (M.E.), 21. O material para M. O. foi fixado em formalina tamponada 10% durante 1 hora e incluído em parafina. Os cortes de 31lm foram desparafinados e corados pela técnica de AgNOR, descrita por CROCKER & NAR (1987). Como não encontramos na literatura uma técnica para evidenciar as estruturas das AgNORs em microscopia eletrônica, desenvolvemos um procedimento novo, empiricamente, no qual não utilizamos tetróxido de ósmio, acetato de uranila e citrato de chumbo, com o intuito de assegurarmos que qualquer precipitação elétron-densa poderia ser atribuída a prata. As AgNORs foram subdivididas em "clusters" (que correspondem ao nucléolo) e pontos ("dots"). O estudo ultra-estrutural mostrou que, o "cluster" é constituído por um conjunto de precipitações de prata, interligadas entre si por faixas mais claras, dentro de uma matriz pouco elétron-densa. O "dot" é apenas uma precipitação escura, sem matriz. A partir destas observações, adotamos o critério de contar o cluster (nucléolo) como uma unidade, visto que a contagem individual de precipitações de prata, dentro dele, pareceunos pouco reproduzível e arbitrária. Os cardiomiócitos dos ratos fetais (16, 19 e 21 dias) e com 1,5 dias após o nascimento apresentaram um índice maior de "clusters" de AgNORs de grande tamanho, quando comparados com os de animais de 8, 21 e 60 dias após o nascimento. Esta diferença provavelmente está relacionada à atividade proliferativa da célula, que é maior na vida intra-uterina. O aparecimento de maior quantidade de "dots", nos animais com 60 dias de vida após o nascimento, foi interpretado como provável indicador de nova síntese protéica, necessária para o complexo miofibrilar. Qualitativamente, entre as idades de 16, 19 e 21 dias de vida intra-uterina e 1,5 dias pós-natal e entre 8, 21 e 60 dias após o nascimento, dificilmente conseguimos distinguir diferenças na estrutura morfológica dos "clusters" das AgNORs. Podemos observar diferenças em relação ao tamanho dos "clusters" das AgNORs, em todas as idades, com análise quantitativa. Em determinados núcleos dos cardiomiócitos, encontramos duas, três ou mais AgNORs alinhadas, o que chamamos de fenômeno de alinhamento. Nas idades de 1<6, 19 e 21 dias de vida intra-uterina e 1,5 pós-natal foi encontrada uma baixa porcentagem das AgNORs alinhadas, enquanto nos núcleos dos animais com 8, 21 e 60 dias ap'os o nascimento, o alinhamento das AgNORs apresentou maior freqüência e quantidade. A análise discriminante mostrou, para a separação das idades, que: a. os números dos núcleos com alinhamento das AgNORs, têm, em geral, importância maior que os números médios das AgNORs (57,3). b. dentro das variáveis que dependem do tamanho das AgNORs, as precipitações maiores que 2 J.1m são as mais importantes (36,5). Os dados morfométricos das AgNORs permitiram a determinação exata da idade do animal em 79,7% dos casos / Abstract: Nuc1eolar organizing regions (NORs) are areas of extra or intranuc1eolar DNA which harbor genes coding for ribosomal RNA. NORs have intense affinity for silver, which stains dots in the acrocentric chromosomes 13, 14, 15,20 and 21. These are called argyrophilic NORs or AgNORs. This is due to the presence of non-histone proteins associated to ribosomal RNA recently transcribed from DNA. Currently, the AgNOR technique is being employed in the evaluation of cellular proliferation, in distinguishing benign from malignant tumors and as an indicator of prognosis in malignant neoplasms. There has been considerable controversy in the criteria for measuring or counting AgNORs, making comparison of results from different authors often difficult. In an attempt to help define criteria for AgNOR measuring in light microscopy, we developed a technique for examining AgNORs in electron microscopy. A normal tissue, the rat heart left ventric1e in the fetal and postnatal periods as used. A total of95 animais were studied at the following ages: 16, 19 and 21 pre-natal days; 1, 5, 8,21 and 60 days after birth. For light microscopy 74 animais were used, and 21 for electron microscopy. For light microscopy, material was fixed in 10% buffered formalin for one hour, dehydrated and c1eared as usual and embedded in paraffin. Three f..lm sections were stained for AgNORs by the technique ofCrock~r & Nar (1987), slightly modified. As no EM technique for AgNORs was found in the literature, we developed the following procedure empirically: tissue was fixed in Karnovsky' s solution for one 110ur, followed by a quick rinse (3-5 seconds) in ethanol-acetic acid and incubated for 30 minutes in a solution containing 1 volume of 2% gelatine dissolved in 1 % formic acid and 2 volumes of 50% aqueous silver nitrate. Solution was prepared and Millipore filtered just before use. Tissue blocks were then dehydrated in ascending alcohols and embedded in Araldite. We avoided using osmium tetroxide, uranyl acetate or lead citrate to ensure that any electrondense precipitations could be reliably attributed to silver. EM revealed that an AgNOR c1uster is formed by a group of silver precipitations intermingled with lighter strands and embedded in electronlucent matrix. The clusters correspond to the nucleolus itself. An AgNOR dot is a single dark precipitation containing no matrix. Based on these observations, we adopted the criterion of counting a cluster (a nucleolus) as a single unit, since the counting of individual silver precipitations within a cluster proved unreliable and somewhat arbitrary. Exaroination of cardiomyocytes disclosed that large AgNOR clusters were more numerous in rats at 16, 19 and 21 prenatal days and 1,5 days postnatally than in animaIs at 8,21 and 60 days after birth. This difference was interpreted as probably related to a higher proliferative activity of the celIs in intrauterine life. At 60 days there was a high number of dots. This finding was thought to be a likely indicator of new protein synthesis necessary for the formation of the myofibrillary complexo On a qualitative basis, the morphological appearance of the clusters was extremely similar, if not indistinguishable, for the ages 16, 19 and 21 prenatal days and 1,5 days postnatalIy. The saroe occurred for animaIs aged 8, 21 and 60 days postnatalIy. However it was possible to distinguish clearly between these two groups on cluster morphology alone. On the other hand, inside each group quantitative analysis showed significant differences between alI ages. In some cardiomyocyte nuclei we found three or more AgNORs on a straight line, which we designated as the aIignment phenomenon. In animaIs with ages 16, 19 and 21 prenatal days and 1,5 days postnatalIy the number ofsuch lined up AgNORs was smalI, while in those of later ages the phenomenon w~ observed with higher frequency. Discriminating analysis showed that animais of different ages could be separated using morphometric data of AgNORs in 79,7 % of cases. For this effe~ the numbers of nuclei with AgNOR aIignment has a higher importance than the average AgNOR counting.IIIAmong the variables depending on the size of the AgNORs, precipitations larger than 2 I-l are most important. The high percentage of right results in age discrimination demonstrates that the technique here described is reliable and reproducible for morphometric evaluation of AgNORs / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências

Orientador: Antonio Wilson Sallum / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-22T08:01:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Duarte_PedroJose_M.pdf: 2709210 bytes, checksum: 6bd3ac198bcdf45f6313cab7f7ce189c (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Doenças periodontais são lesões que afetam os tecidos que protegem e sustentam os dentes em seus alvéolos e são as principais causas das perdas dos dentes após os 35 anos. Os achados mais antigos datam de 20.000 a 30.000 anos a.C. A patogênese total da doença ainda não é conhecida, mas um dos principais fatore s responsáveis pela destruição das estruturas periodontais de suporte é a participação do sistema imunológico, como mediador da resposta imunológica. Neste estudo foi avaliado, através de radiografias, o efeito da ciclosporina, que é um imunossupressor seletivo para linfócitos T, na evolução da doença periodontal induzida em ratos. Foram utilizados 36 ratos, machos (Rattus Norvergicus, Albinus, Wistar, SPF) com peso inicialmente variando de 200 a 240 g e com aproximadamente 2 meses de idade. as animais foram dividos em 3 grupos: GRUPO I recebeu sacarose e irritante; GRUPO 11, sacarose, irritante ,e ciclosporina; GRUPO 111, água e irritante. Ao final dos períodos experimentais, os animais foram sacrificados, suas mandíbulas retiradas, separadas na sínfese mentoniana e radiografadas. As interpretações das imagens radiográficas foram realizadas através de computador com o software AutoCAD versão 12 for MS-DOS, com o aplicativo CAD OVERLA Y versão GSX 4.1 - número de série 110-108112. Os resultados obtidos mostraram uma redução na perda óssea no GRUPO 11, quando comparado aos demais, embora, não detectada por testes estatísticos. Isto não descarta a possibilidade da ciclosporina participar, em algum grau, nos mecanismos de destruição periodontal / Abstract: Periodontal diseases are lesions which affect the protecting tissues and support the teeth in their alveoli and they are main cause of teeth loss after the age of 35. The oldest findings date from 20 to 30.000 b.C. The total pathogenesis of the disease is still unknown; however, one of the main factors responsible for the destruction of the supporting periodontal structures is the immunological system acting as the mediator of the immunological reponse. The effect of the cyclosporine, which is a selective immunosupressor for Iymphocytes T, on the evolution of the induced-periodontal disease in rats; was assessed in this study, through radiography. Thirty-six male rats (Rattus Norvegicus, Albinus, Wistar, SPF), ranging initially from 200 to 240 gr. in weight and with approximately 2 months of age, were used. The animais were devided in three groups: GROUP I received sucrose and irritating; GROUP 11 received sucrose, irritating and cyclosporine; GROUP 111 received water and irritating. In the end of the experiment periods, the animais were sacrificed, their jaws taken off, set apart in the menthonian synphesis, and then radiographed. The radiographic images were interpretated in the computer with software AutoCAD version 12 for MS-DOS with the application programer CAD OVERLA Y version GSX 4.1. The results obtained showed a reduction of bone loss in GROUP 11, when compared to the other two. Although it was not detected through statistical tests, this fact does not discard the possibility that cyclosporine may participate at some extent in the mechanisms of periodontal destruction / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências