Além do aspecto nutricional de suma importância, é notória a contribuição do leite humano para o processo de desenvolvimento da microbiota intestinal do recémnascido, um importante mecanismo de defesa do organismo contra doenças infecciosas. O papel do leite humano como fonte de bactérias probióticas, principais constituintes da microbiota intestinal, tem sido tópico de pesquisas recentes. Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de determinar e comparar a composição da microbiota de oito amostras de leite humano e verificar o potencial de utilização desse produto como fonte de bactérias probióticas. Para tanto, utilizaram-se cinco meios de cultivos seletivos para contagem presuntiva de gêneros normalmente encontrados em leite humano: lactococos, enterococos, bifidobactérias e propionibactérias. A análise quantitativa da microbiota demonstrou tendência de diminuição da contagem em função do aumento do tempo de lactação. A análise qualitativa confirmou a presença de distintos gêneros de bactérias lácticas potencialmente probióticas com algumas variações entre as amostras de leite humano. Na segunda etapa 800 colônias isoladas a partir dos cinco meios de cultivos e caracterizadas como bactérias lácticas foram selecionadas quanto às suas propriedades probióticas (produção de bacteriocina, tolerância à acidez e a sais biliares, resistência à antibióticos, capacidade de adesão a chapas de aço inoxidável) e tecnológicas (capacidade de crescimento e sobrevivência em leite). Verificou-se que apenas 15 (1,9%) linhagens produziram bacteriocinas com atividade contra Listeria innocua L11 e Micrococcus luteus ATCC®4698, linhagens utilizadas como indicadoras, por meio do método de antagonismo simultâneo em poços, usando ágar MRS. Treze dessas linhagens também apresentaram atividade contra Bacillus cereus CTC 011, Listeria monocytogenes ATCC®7644, Lactococcus lactis subsp. lactis CTC 204 e Lactobacillus helveticus ATCC®15009. As duas linhagens remanescentes demonstraram atividade principalmente contra Listeria monocytogenes ATCC®7644. Nenhuma das quinze culturas produtoras de bacteriocinas apresentou atividade contra as bactérias Gram-negativas Escherichia coli ATCC® 2074 e Salmonella thyphimuirim ATCC® 2364. Por outro lado, Staphylococcus aureus ATCC® 1602 foi resistente as quinze bacteriocinas selecionadas neste trabalho. Seis linhagens de bactérias lácticas (BALs) foram selecionadas para avaliação das demais propriedades probióticas. Observou-se que uma dessas linhagens diferenciou-se por apresentar sobrevivência a pH 2,0 e a pH 3,0, enquanto as demais mostraram tolerância apenas a pH 3,0. Todas as linhagens selecionadas apresentaram a capacidade de tolerância a 0,3% de sais biliares, de se aderir à superfície de aço inoxidável e de resistência à clindamicina, eritromicina e gentamicina. Quanto às propriedades tecnológicas, todas as seis linhagens apresentaram capacidade de crescimento em leite e não produziram odor desagradável ou pós-acidificação do leite fermentado durante a estocagem a 4ºC por 28 dias. Notou-se, entretanto, diminuição, de, aproximadamente, 2,0 Log UFC.mL-1, na contagem de células viáveis ao final do período de estocagem. Finalmente, por meio da avaliação dos perfis de fermentação de carboidratos e de outras reações bioquímicas, duas das linhagens isoladas de leite humano foram identificadas como Enterococcus durans e quatro como Enterococcus avium. Os 12 resultados permitem concluir que o leite humano é fonte potencial de bactérias com potencial probiótico para aplicação industrial. / In addition to the nutritional aspect of paramount importance, it is clear the contribution of human milk for the development process of the intestinal tract of the newborn, an important mechanism of defense against infectious diseases. The role of human milk as a source of probiotic bacteria, major constituents of the intestinal microbiota, has been the topic of recent research. This work was carried out to determine and compare the composition of the microbiota of eight human milk samples and verify the potential use of this product as a source of probiotic bacteria. For this purpose, we used five selective culture media for counts of presumptive genera commonly found in human milk: lactococcal, enterococci, bifidobacteria and propionibactérias. The quantitative analysis of microbes showed a trend of decreasing counts as a function of time increased lactation. The qualitative analysis confirmed the presence of different kinds of potentially probiotic lactic acid bacteria with some variations between samples of human milk. In the second stage 800 colonies isolated from the five culture media and characterized as lactic acid bacteria were selected for their probiotic properties (bacteriocin production, tolerance to acid and bile salts, antibiotic resistance, adhesion to stainless steel plates) and technology (ability to grow and survive in milk). It was found that only 15 (1.9%) produced bacteriocin strains with activity against Listeria innocua L11 and Micrococcus luteus ATCC 4698®, strains used as an indicator, by the method of antagonism wells simultaneously, using MRS agar. Thirteen of these strains also showed activity against Bacillus cereus CTC 011, Listeria monocytogenes ATCC® 7644, Lactococcus lactis subsp. CTC 204 lactis and Lactobacillus helveticus ATCC 15009®. The two remaining strains showed activity mainly against Listeria monocytogenes ATCC 7644®. None of the fifteen cultures producing bacteriocins active against Gram-negative Escherichia coli ATCC 2074® and Salmonella thyphimuirim ATCC 2364®. Moreover, Staphylococcus aureus ATCC 1602® was resistant the fifteen bacteriocins selected in this work. Six strains of lactic acid bacteria (BALs) were selected for analysis of other probiotic properties. It was observed that one of these strains distinguished by presenting survival at pH 2.0 and pH 3.0 while the other showed only tolerance to pH 3.0. All strains were selected for the ability tolerance of 0.3% bile salts, of adhering to stainless steel surface and resistance to clindamycin, erythromycin and gentamycin. The technological properties, all six strains were capable of growth in milk and produced no unpleasant odor or post-acidification of the fermented milk during storage at 4°C for 28 days. It was noted, however, decreased from approximately 2,0 Log UFC.mL-1 in the viable cell count at the end of storage period. Finally, by evaluating the profiles of fermentation of carbohydrates and other biochemical reactions, two of the strains isolated from human milk have been identified as Enterococcus durans and Enterococcus avium as four. The results indicate that human milk is a potential source of probiotic bacteria with potential for industrial application.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-04-12T15:05:40Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE_MEDICINA TROPICAL_IANA RAFAELA SALES.pdf: 2843724 bytes, checksum: 82befaa22a5a011cd9ceede497871d36 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-12T15:05:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE_MEDICINA TROPICAL_IANA RAFAELA SALES.pdf: 2843724 bytes, checksum: 82befaa22a5a011cd9ceede497871d36 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / CAPEs / A alta prevalência de esquistossomose crônica em gestantes, bem como em mulheres em idade fértil, tem sido amplamente relatada. Esta condição materna é capaz de alterar a resposta imune do descendente em longo prazo. O presente estudo teve o objetivo de avaliar o efeito in vitro do leite materno de mães infectadas pelo Schistosoma mansoni em esplenócitos e caracterizar os peptídeos encontrados nesse leite. Para isso, camundongos fêmeas infectadas ou não, tiveram seu leite coletado no 12º dia após o parto. Os esplenócitos jovens (15 dias) e maduros (6 semanas) foram cultivados com o Leite de Mães Infectadas (LMI) e com Leite de Mães Não Infectadas (LMNI) na presença de estimulador policlonal. Além disso, foram utilizados controles experimentais: Células pulsadas na ausência (BASAL) e apenas com estimulador policlonal (MITÓGENO) e células cultivadas com LMNI adicionado de antígenos solúveis dos ovos do S.mansoni (LMNI+SEA). Posteriormente, os ensaios de citometria de fluxo foram realizados para dupla marcação: Linfócitos T (CD3+ ou CD4+) marcados com CD28, CD154, CTLA4, IL-10 ou FoxP3. Além disso, foram analisadas a expressão de CD80, CD86 e CD40 na superfície de Macrófagos (CD14) e Linfócitos B (CD45R), e ainda a expressão de IL-10 por esse último. Para a análise dos peptídeos presentes no leite materno, um gel unidimensional foi confeccionado e as bandas obtidas no LMI, LMNI+SEA e LMNI foram processados para análise por espectometria de massa. Além disso, foram realizadas análises de antígenos parasitários: SEA e SWAP (antígeno solúvel do verme adulto). Esplenócitos jovens pulsados apenas com o mitógeno apresentaram maior frequência de células CD3+CD28+ e CD45R+IL10+. A adição de LMNI manteve aumento CD3+CD28+ e levou a menor frequência de Tregs, com aumento na expressão de células CD45R+CD40+. Ao ser introduzido o SEA (LMNI+SEA) foi identificada uma menor frequência de células CD3+CD28+ e aumento na expressão de IL-10. O LMI proporcionou menor frequência de linfócitos CTLA4+ e FoxP3+, porém com produção de IL-10 e maior frequência de CD45R+/CD80+. Para os esplenócitos maduros, o LMNI e LMI levaram à menor frequência de células CD3+/CD28+ e maior CD3+/CTLA4+, respectivamente, com aumento sustentado de Treg. Contudo, o LMI diminui a presença de células B IL-10+. A adição do SEA ao LMNI manteve a diminuição de células CD3+CD28+, mas aumentou a frequência de células CD3+/CD154+. O leite de mães esquistossomóticas apresentou peptídeos relacionados à presença do S. mansoni e com variabilidade de função. Destacamos a natureza imunomodulatória dos peptídios aqui identificados (Interleucina 17F, Glutationa s Transferase) que podem atuar na imunidade, seja para antígenos do parasita ou heterólogos, no descendente previamente amamentado. Estes achados enfatizam o caráter dicotômico do leite materno: estimulador em células jovens e tolerogênico em células maduras. Esses achados são relevantes em áreas endêmicas para esquistossomose e reiteram a importância da identificação e caracterização de antígenos parasitários, bem como, uma avaliação do seu papel na interação parasito-hospedeiro no incio da vida. / The high prevalence of chronic schistosomiasis in pregnant women and women of childbearing age has been widely reported. Breastfeeding by mothers with schistosomiasis is capable of altering the long term immune response of offspring. The aim of this study was to undertake an in vitro analysis of the effect of breast milk of mothers with schistosomiasis on young and mature splenocytes and characterize the proteomics in this milk. The milk of female mice infected with Schistosoma mansoni and non-infected female mice was collected on the 12th day postpartum. Young (15 days) and mature (6 weeks) splenocytes were cultivated (24hs) with mitogen (CONTROL), added to the Milk of Infected Mothers (MIM), Milk of Non-Infected Mothers (MNIM) or Milk of Non-Infected Mothers with the addition of soluble egg antigens of parasites (MNIM+SEA), as well as those without in vitro stimulus (BASAL). Double cell labeling was performed for flow cytometry: T Lymphocytes (CD3+ or CD4+) marked with CD28, CD154, CTLA4, IL-10 or FoxP3; Macrophages (CD14) and B Lymphocytes (CD45R) marked with CD80, CD86 or CD40 on the surface and the expression of IL-10 by CD45R+ cells. For analysis of proteomics a one-dimensional gel was made and the bands obtained from MIM, MNIM, MNIM + SEA, were processed for analysis by mass spectrometry. Additionally, the parasite antigens SEA and SWAP (soluble adult worm antigen preparation) were included in the analysis. Young splenocytes pulsed only with mitogen had the greatest CD3+CD28+ and CD45R+IL10+ cell frequency. The addition of MNIM maintained an increase of CD3+CD28+ and produced the lowest frequency of Tregs, with an increase in the expression of CD45R+CD40+ cells. The introduction of SEA (MNIM+SEA) resulted in reduced CD3+CD28+ cell frequency and increased IL-10 expression. MIM resulted in reduced CTLA4+ and FoxP3+ lymphocyte frequency, although there was some IL-10 production and greater CD45R+/CD80+ frequency. MNIM and MIM resulted in the lowest frequency of CD3+/CD28+ and CD3+/CTLA4+ cell frequency, respectively, for mature splenocytes, with a sustained increase of Treg. However, MIM reduced the presence of B IL-10+ cells. The addition of SEA to MNIM maintained a reduction in CD3+CD28+ cells, but increased the frequency of CD3+/CD154+ cells. The breast milk of mothers with schistosomiasis presented peptides related to the presence of S. mansoni and variability of function. The immunomodulatory nature of the peptides identified in the present study (Interleukin 17F, Glutathione-S-Transferase) should be noted, as these can act in the immune process of breastfed offspring, whether for parasite antigens or heterologous antigens. These findings emphasized the dichotomous character of breast milk, which functions as a stimulator in young cells and is tolerogenic in mature cells, yet is capable of improving LB activation. These findings are relevant for areas in which schistosomiasis is endemic and emphasize the importance of the identification and characterization of parasite antigens and the evaluation of their role in parasite-host interaction in the early stages of life, in order to obtain a better understanding of immunoregulatory events.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-07-13T13:03:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertação Desirré versão CD.pdf: 1453622 bytes, checksum: 2158dbbaaefcb134f3cde4599b120f6e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-13T13:03:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertação Desirré versão CD.pdf: 1453622 bytes, checksum: 2158dbbaaefcb134f3cde4599b120f6e (MD5) Previous issue date: 2016-06-22 / O leite materno é um alimento completo, além de ser a única e mais importante fonte de vitamina A durante o período neonatal para o lactente alimentado exclusivamente ao seio.Por fornecer informações relacionadas ao estado nutricional materno-infantil, a concentração de vitamina A no leite humano é um importante indicador do status orgânico dessa vitamina nesse grupo etário.Foi desenvolvido um estudo observacional, do tipo série de casos, cujo objetivo de avaliar o status de vitamina A e a sua associação com algumas variáveis materno-infantis, bem como, determinar o efeito da pasteurização e do armazenamento em condições ambientais sobre a concentração de retinol no leite humano. Participaram do estudo 43 puérperas, idade entre 18 e 39 anos,cadastradas como doadoras do Banco de Leite Humano do Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira. Recife, Nordeste do BrasilAs concentrações de retinol foram avaliadas no leite cru, leite pasteurizado e no leite armazenado em condições ambientais, usando-se a cromatografia líquida de alta resolução. O percentual de deficiência de vitamina A(<1,05 μmol/L), foi de 41,9% e 83,7% das nutrizes apresentaram consumo de vitamina A abaixo da ingestão dietética recomendada para a lactação (1300µg/dia). As concentrações de retinol foram mais elevadas em nutrizes multíparas (p= 0,021). A pasteurização não interferiu nas concentrações de retinol (p= 0,313). No entanto, elas foram menores no leite armazenado em condições ambientais, quando comparadas com àquelas observadas no leite cru (p=0,023). Os resultados sugerem um baixo consumo de vitamina A, bem como uma elevadaproporção de deficiência dessa vitamina no leite materno. A pasteurização não compromete o teor de vitamina A, embora o armazenamento do leite em condições ambientais reduzasuas concentrações. / Breast milk is a complete food, as well as being the single most important source of vitamin A during the neonatal period to infants exclusively fed fromthe breast. For providing information related to maternal and child nutritional status, vitamin A concentration in human milk is an important indicator of the organic status of this vitamin in this age group. an observational study, the case series was developed, aimed to assess vitamin A status and its association with some maternal and child variables and determine the effect of pasteurization and storage under ambient conditions on the concentration of retinol in human milk. The study included 43 mothers, aged between 18 and 39 years, registered as donors of the Human Milk Bank of Integrative Medicine Institute Prof. Fernando Figueira. Recife, northeastern Brazil The retinol concentrations were evaluated in raw milk, pasteurized milk and milk stored in ambient conditions using the high performance liquid chromatography resolution. The vitamin deficiency percentage A (<1.05 mmol / L) was 41.9% and 83.7% of the mothers had vitamin A intake below the recommended dietary intake for lactation (1300μg / day). Retinol concentrations were higher in multiparous lactating women (p = 0.021). Pasteurization did not interfere with retinol concentrations (p = 0.313). However, they were lower in milk stored at ambient conditions, as compared to those observed in raw milk (p = 0.023). The results suggest a low intake of vitamin A, as well as a high proportion of vitamin deficiency in human milk. Pasteurization does not compromise the level of vitamin A, although the milk storage environmental conditions to reduce their concentrations.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-09-25T14:09:46Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 735824 bytes, checksum: 042a70a766432ca19d10cbe44e334600 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-25T14:09:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 735824 bytes, checksum: 042a70a766432ca19d10cbe44e334600 (MD5) Previous issue date: 2018-07-20 / O Brasil tem um sistema consolidado de rede de Banco de Leite Humano, sendo referência para outros países. A atuação conjunta com as Unidades de Terapia Intensiva Neonatal é uma de suas funções, fornecendo apoio às famílias, ao recém-nascido e em especial às mães que se encontram nesse momento de angustia em não poder ou, não conseguir, oferecer seu próprio leite para seu bebê. A recuperação do recém-nascido, em especial, do prematuro, acontece em decorrência da maturação dos seus órgãos e melhora do seu sistema imunológico e um dos principais componentes dessas recuperação é o leite materno com todas as suas propriedades. A falta de informação ainda é um empecilho para a aceitação do leite materno proveniente do banco de leite, evidenciando uma falta de comunicação na rede. Este estudo inclui uma pesquisa bibliográfica para identificar os conhecimentos acumulados mais recentes sobre a relação do banco de leite humano com os receptores de leite materno doado internados nas Unidades de Terapia Intensiva. Para o artigo de revisão optou-se pelo tipo de revisão integrativa onde consiste em uma abordagem mais ampla do fenômeno analisado e propicia embasamento científico sobre uma determinada temática contribuindo para uma prática assistencial mais segura. Após a realização da leitura e da análise dos estudos selecionados, a avaliação e a descrição da temática foram organizadas e apresentadas em três categorias: Conhecimentos sobre os efeitos e a importância do leite materno doado; Perfil dos receptores de leite humano doador internados na Unidade de Terapia Intensiva; Conhecimentos das mães doadoras e mães de receptores quanto ao tipo de nutrição ofertada pelo banco de leite humano para o recém-nascido internado na Unidade de Terapia Intensiva. Esse artigo permitiu caracterizar o perfil de receptores, como também levantar questionamentos no déficit de informações em relação ao tema referido, o que implica na atuação direta do banco de leite. Além disso, um assunto ainda pouco estudado foi o sentimento das mães e familiares que passam por esse processo. O segundo momento dessa pesquisa inclui a coleta de dados realizada na unidade de Banco de Leite Humano situado no Hospital São Sebastião na cidade de Viçosa- Minas Gerais, à partir colhidas dos livros de registro das unidades da instituição. As informações coletadas abrangem aspetos materno-infantil e do período de internação de recém-nascidos que fizeram uso de leite humano doado. Os dados foram organizados e analisados por meio de técnicas estatísticas, evidenciando o perfil das crianças receptoras acompanhadas pelo banco de leite humano em Viçosa. Pontos importantes levantados foram: a quantidade de prematuros tardio e a prevalência dos diagnósticos de origem respiratória e infecções oriundas da imaturidade dessa população. Além da maioria dos atendimentos realizados serem para a população da microrregião de saúde e oriundas do sistema público de saúde. O tempo de internação mostrou maior para recém-nascidos extremo e muito baixo peso, como também para os prematuros extremo e muito prematuro, evidenciando uma necessidade maior de cuidados com esses bebês que estão mais propensos ao óbito. É necessário que novos estudos sejam realizados, em novos pontos da rede, relacionando variáveis relacionadas, como: a idade materna, tipo e quantidade de parto e número de consultas de pré-natal. Além de, analisar qual o acesso à informação que elas tem em relação ao apoio que o banco de leite humano oferece. / Brazil has a consolidated network system of Human Milk Bank, being a reference for other countries. Working together with the Neonatal Intensive Care Units is one of their functions, providing support to the families, the newborn and especially to the mothers who are in this moment of anguish in not being able or not being able to offer their own milk to your baby. The recovery of the newborn, especially of the premature, happens due to the maturation of its organs and improvement of its immune system and one of the main components of this recovery is the breast milk with all its properties. The lack of information is still an obstacle to the acceptance of milk from the milk bank, evidencing a lack of communication in the network. This study includes a literature review to identify the latest accumulated knowledge on the relationship of the human milk bank with donated breast milk recipients hospitalized in the Intensive Care Units. For the review article we opted for the type of integrative review where it consists of a broader approach of the phenomenon analyzed and provides scientific basis on a certain theme contributing to a safer care practice. After reading and analyzing the selected studies, the evaluation and description of the theme were organized and presented in three categories: Knowledge about the effects and importance of donated breast milk; Profile of donor human milk recipients admitted to the Intensive Care Unit; Knowledge of donor mothers and recipients' mothers regarding the type of nutrition offered by the human milk bank for the newborn hospitalized in the Intensive Care Unit. This article allowed us to characterize the profile of recipients, as well as questioning the information deficit in relation to the aforementioned topic, which implies the direct action of the milk bank. In addition, a subject that has not yet been studied is the feeling of mothers and family members who go through this process. The second moment of this research includes the data collection performed at the Human Milk Bank unit located at Hospital São Sebastião in the city of Viçosa -Minas Gerais, from the collection records of the institution's units. The information collected covers maternal-infant aspects and the period of hospitalization of newborns who have used donated human milk. The data were organized and analyzed by means of statistical techniques, showing the profile of the receiving children accompanied by the human milk bank in Viçosa. Important points raised were: the number of premature infants and the prevalence of diagnoses of respiratory origin and infections due to the immaturity of this population. In addition to the majority of the consultations carried out are for the population of the micro-region of health and come from the public health system. The length of hospital stay was higher for extremely low and very low birth weight infants, as well as for the extremely premature and very premature infants, evidencing a greater need for care with these infants who are more prone to death. It is necessary that new studies be carried out, in new points of the network, relating related variables, such as: maternal age, type and quantity of childbirth and number of prenatal consultations. In addition, analyze what access to information they have in relation to the support that the human milk bank offers.

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Orientadores: Berenice Cunha Wilke, Jaime Amaya-Farfan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-18T18:35:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Passos_PaulaAndreaLiboni_M.pdf: 3738601 bytes, checksum: bbf4fbca81f80dc927e149d200a623fa (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: A vitamina A é essencial ao adequado crescimento e desenvolvimento fetal e infantil atuando na diferenciação e manutenção epitelial, em mecanismos de resposta imune e em várias outras funções sistêmicas. Os carotenóides, além de atuarem como pró-vitamina A, também atuam na resposta imune e são importantes antioxidantes naturais. Apesar da importância desses nutrientes para o neonato, particularmente para o prematuro, há poucos estudos na caracterização do leite materno com relação aos carotenóides, que possam auxiliar na elucidação dos mecanismos de transferência de vitamina A e de carotenóides do sangue para o leite materno, assim como dos fatores intervenientes neste processo. Esse estudo tem como objetivos a avaliação do estado nutricional em vitamina A de mães de recém nascidos pretermo e a composição do colostro destas mães com relação ao conteúdo de vitamina A e de carotenóides. O estado nutricional foi avaliado através de : 1- dosagem dó retinol sérico por cromatografia líquida de alta ,eficiência (CLAE), 2- estimativa do consumo de vitamina A através de aplicação de inquérito seletivo de freqüência alimentar, 3- exame citológico pelo teste de impressão cito lógica da conjuntiva ocular (ICCO). O teor sérico médio de retinol das 10 mães estudadas foi de 23 +/- 8 ugfdL. O consumo estimado de vitamina A foi de (781 +/- 247 ERfdia) e não foram registrados exames positivos para o teste de ICCO. Não foi portanto, caracterizada carência de vitamina A no grupo pelos critérios do International vitamin A Consultative Group (IVACG).Foram identificados e quantificados, através de CLAE, os principais carotenóides do colostro quais sejam: B-criptoxantina, a e B-caroteno (carotenóides precursores de vitamina A) e licopeno (antioxidante importante). Os teores médios obtidos foram de 8 +/- 14 ug/dL. para B-criptoxantina, 12 +/- 12 ug/dL para licopeno e 6 +/- 4 ug/dL para B-caroteno. O a-caroteno apresentou-se em menor quantidade em todos os colostros, tendo sido quantificado apenas em duas amostras com concentração de 3 ug/dL. O retinol, também determinado por CLAE, apresentou teor médio de 71 +/- 43 ug/dL. Nas condições deste estudo, não foi encontrada correlação (p < 0,05) entre as taxas de retinol no soro ou no colostro, assim como entre o consumo estimado vitamina A e os mesmos teores / Abstract: Vitamin A is essential for the growth and development of both the fetus and the neonate with regard to cell differentiation, tissue maintenance, immune response and various other systemic functions. Carotenoids, in turn, have a critical role as provitamin A sourcep antioxidants and enhancers of the immune system o In spite of the recognized importance of these nutrients for the neonate and the premature, in particular, there are few studies caracterizing human milk in terms of carotenoids and which could serve in the elucidation of the mechanisms of both vitamin A and carotenoids transfer from the blood stream to the milk, as well as other phenomena underlying this process. The present study is an evaluation of the vitamin A nutritional status of ten Brazilian mothers of preterm neonate and assessment of colostra in terms of vitamin A and selected carotenoids. The nutritional status was ascertained though 1. serum retinol determinafion by high performance liquid chromatography (HPLC) 2. estimative of vitamin A intake by a selective nutrient questionnaire and 3 citology by the conjunctival impression cytology technique (CIC). The average serum retinol leveI observed was 23 +/- 8 ug/dL. The average daily intake of vitamin A among the mothers was 781~ 247 RE and no positive cases were found by eIe test, thus no deficiency could be detected according to the criteria of the International vitamin A e onsultative Group (IVACG). The principal carotenoids. B-cryptoxanthin; a and B -carotene(vitamin A precursors) and lycopene (chief antioxidant) p were identified and quantitified by HPLC in the colostra (mean values 8 +/- 14; 12 +/- 12, 6 +/- 4 ug/dL for B-cryptoxanthin, lycopene and B-carotene, respectively). A-carotene was present in measurable levels in only two of the samples (average of 3 ug/dL). Average retinol in the colostra was 71 +/- 43 ug/dL. Under the conditions of the study, no significant correlation (P < 0,05) was found between vitamin A intake and levels of this nutrient in either the serum or colostrum / Mestrado / Mestre em Ciência da Nutrição

As aflatoxinas são substâncias naturais que apresentam efeitos tóxicos aos humanos e são reconhecidamente carcinogênicas. Estas substâncias podem estar presentes na dieta humana ou, em casos específicos, no ar respirado. Desta maneira, a exposição humana às aflatoxinas é objeto de muita preocupação. Uma das maneiras mais eficazes de avaliar a exposição humana as aflatoxinas é através da mensuração da presença de biomarcadores da exposição a estas substâncias em fluidos biológicos. Dentre as possibilidades de biomarcadores de exposição às aflatoxinas tem-se que aflatoxina M1 (AFM1), presente na urina e leite humano, é considerada um biomarcador válido. Assim sendo, o objetivo deste trabalho de pesquisa foi avaliar a presença de AFM1 em amostras de urina provenientes de indivíduos residentes na região urbana e rural da cidade de Piracicaba-SP, assim como, de leite de gestantes de Piracicaba e cidades da região. Nos indivíduos doadores de amostras de urina foi levantado também o padrão de ingestão de alimentos com alto risco de conter aflatoxinas, através da aplicação de inquéritos de freqüência alimentar e recordatórios 24 horas. A análise de AFM1 em urina e leite foi realizada por cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por fluorescência. A extração e purificação do extrato foram realizadas com auxílio de colunas de imunoafinidade. No total 69 amostras de urina e 18 de leite foram analisadas. Entre as amostras de urina detectou-se a presença de AFM1 em 54 (78%) das amostras, com concentrações variando de 1,8 até 39,9 pg/mL. Não foi observada diferença estatística entre as concentrações médias detectadas entre urinas de indivíduos da zona urbana e rural, bem como no nível de consumo de produtos de risco. Apesar das concentrações de AFM1 detectadas serem inferiores as concentrações médias reportadas em outros países a freqüência de amostras positivas foi bastante elevada mostrando que as populações estudadas estão sendo expostas às aflatoxinas. Assim, melhores avaliações dos níveis de exposição necessitam ser realizados considerando que a amostragem utilizada foi pontual, pode existir variação de contaminação sazonal com aflatoxinas na dieta e a contaminação é heterogênea dentro no alimento. Não foi observada uma correlação entre o nível do consumo de produtos de risco e as concentrações detectadas em amostras de urina. Apenas uma amostra de leite apresentou contaminação detectada; entretanto, o nível de contaminação estava entre o limite de detecção (LD) e o limite de quantificação (LQ). / Aflatoxins are natural substances that present toxic and carcinogenic effects to humans. These substances may be present in human diet or, in specific cases, in the breathing air. Thus, the human exposition to aflatoxins is object of concern. One of the most effective ways to evaluate human exposition to aflatoxins is to measure the presence of biomarkers in biological fluids. Among the possibilities of aflatoxin presence biomarkers, the aflatoxin M1 (AFM1), present in human urine and milk, is considered a valid biomarker. The objective of this work was to evaluate the presence of AFM1 in urine samples from individuals who live in urban and rural areas in the county of Piracicaba, state of São Paulo, Brazil, and in milk of pregnant women from Piracicaba and neighbor cities. Urine-donor individuals were researched in relation to the ingestion of food with high risk of containing aflatoxins through the application of a food frequency questionnaire and 24-hour recall. The analysis of AFM1 in urine and milk was performed through high-performance liquid chromatography (HPLC) with fluorescence detection. The extract purification and extraction were performed with the aid of immunoaffinity columns. Overall, 69 urine and 18 human breast milk samples were analyzed. Among urine samples, the presence of AFM1 was detected in 54 (78%), with concentrations ranging from 1.8 to 39.9 pg/mL. No statistical difference was observed between average concentrations detected in the urine of individuals from urban and rural areas, as well as the consumption of aflatoxin risky food. Although the AFM1 concentrations detected are lower than those reported for other countries, the frequency of positive samples was quite high, showing that the populations studied are exposed to aflatoxins. Thus, further evaluations on the exposition levels should be performed, and considering that the sampling used in this work was punctual, there may be seasonal contamination variations in diet and the contamination level is heterogeneous within a food. No correlation between the consumption of risky food and concentrations detected in urine samples was observed. Only one milk sample presented detected contamination; however, the contamination level was between the limit of detection (LOD) and the limit of quantification (LOQ).

INTRODUÇÃO: A Doença Metabólica Óssea é uma patologia caracterizada por alterações da mineralização esquelética decorrente do acréscimo deficiente do conteúdo mineral ósseo do recém-nascido pré-termo (RNPT). A densitometria óssea tem sido o método de escolha para avaliar o conteúdo mineral ósseo, particularmente no RNPT alimentado ou não com leite humano. OBJETIVOS: 1. Comparar os resultados do conteúdo e densidade minerais ósseos obtidos do corpo inteiro através da densitometria óssea em RNPT adequados para a idade gestacional (AIG) com os valores obtidos em recém-nascidos de termo (RNT), alimentados com leite humano exclusivo; 2. Comparar os parâmetros bioquímicos ósseos sanguíneos (cálcio, fósforo e fosfatase alcalina) entre os RNPT e RNTAIG; 3. Analisar a excreção urinária de cálcio e fósforo no RNPTAIG, alimentado com leite humano exclusivo. MÉTODOS: Estudo coorte prospectivo realizado na Unidade Neonatal da Divisão de Clínica Pediátrica do Hospital Universitário da Universidade de São Paulo (USP). Durante o período de julho de 2006 a setembro de 2008 foram estudados 28 RN sendo 14 RNPT com idade gestacional inferior a 34 semanas e 14 RNT, em 3 momentos: 40 semanas de idade pósconcepcional corrigida, 3 e 6 meses de idade pós-natal corrigida, alimentados com leite humano exclusivo da própria mãe ou procedente do banco de leite. Foi realizada a densitometria óssea através da técnica de dupla emissão de fonte de Raio-X (DXA) em um aparelho da marca Hologic, modelo Discovery A, no laboratório de metabolismo ósseo da Faculdade de Medicina da USP, sendo avaliados: conteúdo mineral ósseo (BMC), densidade mineral óssea (BMD) e massa magra. Foram também realizados: cálcio, fósforo e fosfatase alcalina séricos nas idades de 40 semanas pósconcepcionais (RNPT e RNT) e com 6 meses de idade pós-natal corrigida (RNPT). Além disso, analisou-se a concentração de cálcio e fósforo na urina de 6 horas dos RNPT entre a 3ª e a 4ª semanas de vida. RESULTADOS: O BMC do RNPT foi inferior ao obtido no RNT na mesma idade de 40 semanas pós-concepcionais (p<0,001), o mesmo ocorreu com o BMD (p<0,001) e com a massa magra (p=0,047). Destacamos que houve uma importante aceleração para que os pré-termos atingissem os valores normais encontrados nos recém-nascidos de termo aos 6 meses de idade corrigida, ie, BMC (137,1422,46 vs. 152,8620,92 g, p=0,054), BMD (0,220,02 vs. 0,230,02 g/cm2, p=0,618) e massa magra (5.750,13765,11 vs. 5.745,88726,52g, p=1,00) que foram comparáveis nos dois grupos. Os parâmetros bioquímicos séricos foram semelhantes entre os RNPT e os RNT. Entre os RNPT, três (21,4%) apresentaram exames urinários sugestivos de Síndrome da Deficiência de Fósforo sendo indicado o uso da solução oral de cálcio e fósforo. CONCLUSÕES: A avaliação da mineralização óssea através da DXA do corpo inteiro pode ser utilizada em RNPT constituindo exame de excelência, com precisão elevada e exposição baixa à radiação para detecção de alterações ósseas quando há risco de Doença Metabólica Óssea. Neste estudo, a alimentação com leite humano seja da própria mãe ou do banco de leite pode proporcionar um crescimento ósseo adequado, no RNPT, semelhante ao do RNT nos primeiros 6 meses de vida. Os parâmetros bioquímicos urinários (cálcio e fósforo) foram de utilidade para detecção precoce de hipofosfatúria e risco de deficiência mineral nos RNPT, entretanto requerem coleta de urina de 6 horas, tornando difícil a investigação após a alta hospitalar. Mesmo os RNPT, com exames urinários normais, apresentaram na densitometria óssea um BMC inferior aos valores encontrados nos RNT mostrando que a DXA se constitui em um método sensível e que poderá ser utilizada para o seguimento destes RNPT. / BACKGROUND: Metabolic Bone Disease is a pathology characterized by skeletal mineralization changes resulting from insufficient increase of the bone mineral content in preterm newborns (PTNB). Bone densitometry has been the method of choice to evaluate the bone mineral content, particularly in the PTNB that is or is not fed with human milk. OBJECTIVES: 1. To compare the bone mineral content and density results obtained from the whole body using bone densitometry in appropriate-for-gestational-age (AGA) PTNB with the values obtained from full-term newborns (FTNB), exclusively fed with human milk; 2. To compare blood bone biochemical parameters (calcium, phosphorus, and alkaline phosphatase) obtained from PTNB and AGA FTNB; 3. To analyze calcium and phosphorus urinary excretion in AGA PTNB exclusively fed with human milk. METHODS: Prospective cohort study conducted at the University of Sao Paulo (USP) University Hospital Pediatric Clinic Neonatal Unit. From July 2006 to September 2008, 28 NB were studied, with 14 of them being PTNB of gestational age inferior to 34 weeks and 14 being FTNB, in 3 timepoints: 40 weeks of corrected post-conception age, and 3 and 6 months of corrected postnatal age, exclusively fed with human milk from their own mothers or from a human milk bank. Bone densitometry was performed by using the dual-energy X-ray absorption (DXA) technique in a Hologic device, Discovery A model, at USP Medical School bone metabolism laboratory, and the following were evaluated: bone mineral content (BMC), bone mineral density (BMD), and lean mass. Also, the following were performed: serum calcium, phosphorus, and alkaline phosphatase at 40 weeks post-conception (PTNB and FTNB) and 6 months of corrected postnatal age (PTNB). In addition, calcium and phosphorus concentrations in PTNBs 6-hour urine were analyzed at 3 and 4 weeks of life. RESULTS: The BMC of preterm newborn was lower than in fullterm at the same 40 weeks postconceptional age (p<0.001), the same occurred with the BMD (p<0.001) and the lean mass (p=0.047). Interestingly, there was an important acceleration to achieve the normal values seen in fullterm at six months age, ie, BMC (137.14+-22.46 vs. 152.86+-20.92 g, p=0.054), BMD (0.22+-0.02 vs. 0.23+-0.02 g/cm2, p=0.618) and lean mass (5,750.13+-765.11 vs. 5,745.88726.52g, p=1.00) were comparable in both groups. PTNB and FTNBs serum biochemical parameters were similar. Among PTNBs, three (21.4%) had urinary exams suggesting Phosphorus Deficiency Syndrome, with the use of oral calcium and phosphorus solution being indicated. CONCLUSIONS: The bone mineralization evaluation using whole-body DXA may be used in PTNBs, being an optimal exam of high precision and low radiation exposure to detect bone changes when there is a risk for MBD. In this study, being fed with human milk, either from the own mothers or from a human milk bank is able to provide appropriate bone growth in PTNBs, similar to that seen in FTNBs in the first 6 months of life. Urinary biochemical parameters (calcium and phosphorus) were useful for the early detection of hypophosphaturia and mineral deficiency risk in PTNBs; however, the collection of 6-hour urine is required, as the investigation becomes difficult after hospital discharge. Even PTNBs with normal urinary exams showed, upon bone densitometry, a BMC inferior to the values found in FTNBs, which supports that DXA presents a sensitive method that can be used to follow up these PTNBs.

O objetivo geral deste estudo foi investigar o efeito do leite humano na redução de respostas biocomportamentais de dor em RNPTs submetidos ao exame de fundo de olho para diagnóstico precoce da retinopatia da prematuridade, em comparação com a sacarose 25%. Trata-se de ensaio clínico randomizado, realizado na unidade neonatal de um hospital universitário de Ribeirão Preto-SP, com 48 prematuros distribuídos randomicamente em dois grupos: leite humano e sacarose, administrados por via oral 2 minutos antes do procedimento doloroso. As variáveis dimensionadas foram mímica facial da escala de dor NFCS, choro, frequência cardíaca e cortisol salivar. A coleta de dados foi realizada em cinco períodos para a mímica facial e o NFCS: basal (05 minutos), olho direito e olho esquerdo, recuperação imediata (05 minutos após o procedimento) e recuperação tardia (05 minutos após a recuperação imediata); quatro períodos para a frequência cardíaca e o choro: basal (05 minutos), procedimento, recuperação imediata e tardia. O cortisol salivar foi coletado antes do início do exame de fundo de olho (basal), após 30 (cortisol resposta) e 60 (cortisol recuperação) minutos do término do exame. O projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da instituição e foi registrado no Australian and New Zeland Clinical Trials. O Teste de Kolmogorov-Smirnov e o Teste t-student mostraram que os grupos são comparáveis. Para análise das variáveis de desfecho, utilizou-se a Análise de Variância com Medidas Repetidas (RM-ANOVA). Após testar a homogeneidade das variáveis (teste de Levene), foi avaliado o pressuposto da esfericidade das matrizes de variância (teste de Mauchly). Assumindo-se a esfericidade, adotaram-se a análise multivariada, com valor de épsilon < 0,75, e a estatística de Wilk´s Lambda. Para valores de épsilon > 0,75, adotaram-se a análise univariada e a estatística de Hunh-Feldt (HF) ou Greenhouse-Geisser. Para as variáveis categóricas, foi utilizado o teste Qui-quadrado ou Teste exato Fisher. O efeito do leite humano no alívio da dor, decorrente do exame de fundo de olho, não diferiu estatisticamente da sacarose 25%, ao avaliarmos a duração da presença de fronte saliente [Wilk\'s Lamba=0,918, F=0,960, p=0,241], do sulco nasolabial [Wilk\'s Lambda=0,883; F=1,43; p=0,241] e do choro [Wilk\'s Lambda=0,964; F=3,44; p=0,656], e o escore médio do NFCS adaptado ao considerarmos essas duas ações da mímica facial [Wilk\'s Lambda=0,924; F=0,884; p=0,481], a FC [Wilk\'s Lambda=0,977; F=3,44; p=0,792] e a concentração de cortisol salivar [Wilk\'s Lambda=0,978; F=2,45; p=0,612]. A comparação intrasujeitos mostrou diferença significativa nos períodos de coleta dos dados, com aumento nos escores do NFCS, na duração da fronte saliente e do sulco nasolabial, durante o exame do fundo de olho direito e esquerdo, como também no aumento do choro, durante o procedimento doloroso, em comparação com os períodos basal, recuperação inicial e tardia. A concentração do cortisol salivar aumentou significativamente aos 30 e 60 minutos após o procedimento, em comparação com os valores do cortisol basal; não houve diferença entre o cortisol resposta (30 minutos) e recuperação (60 minutos). A duração do sulco nasolabial, do choro e os escores do NFCS no basal não diferiram significativamente dos valores encontrados na recuperação inicial e tardia. Na FC, houve diferença no basal em relação à recuperação imediata, e na duração da fronte saliente houve diferença nas duas recuperações. Concluímos que o efeito do leite humano, na redução das respostas biocomportamentais de dor em prematuros submetidos ao exame de fundo de olho para diagnóstico da retinopatia da prematuridade, não é superior ao efeito obtido com a sacarose 25%, rejeitando-se a hipótese alternativa. / The general aim of this study was to investigate the effect of human milk on reducing biobehavioral pain responses in PN\'s undergoing the ocular fundus examination for the early diagnosis of retinopathy of prematurity, compared with 25% sucrose. This is a randomized clinical trial conducted in the neonatal unit of a university hospital of Ribeirão Preto-SP, with 48 premature newborns randomly distributed into two groups: human milk and sucrose, orally administered 2 minutes before the painful procedure. The variables investigated were the facial movements of the NFCS pain scale, crying, heart rate (HR) and salivary cortisol levels. Data collection was conducted in five periods for the facial movements and NFCS: baseline (05 minutes), right eye and left eye, immediate recovery (05 minutes after the procedure) and delayed recovery (05 minutes after immediate recovery); and in four periods for heart rate and crying: baseline (05 minutes), procedure, immediate and delayed recovery. Salivary cortisol was collected before the start of the fundus examination (baseline), and at 30 minutes (cortisol response) and 60 minutes (cortisol recovery) after the end of the examination. The project was approved by the Research Ethics Committee and was registered in the Australian and New Zealand Clinical Trials. The Kolmogorov-Smirnov test and Student\'s t-test showed that the groups were comparable. For the analysis of the outcome variables, the Analysis of Variance with Repeated Measures (RM-ANOVA) was used. After testing the homogeneity of the variables (Levene\'s test) the assumption of sphericity of the variance matrices was evaluated (Mauchly\'s test). Assuming sphericity, multivariate analysis was adopted, with a < 0.75 value of epsilon and Wilk\'s Lambda statistic. For values of epsilon > 0.75, univariate analysis and the Hunh-Feldt (HF) or Greenhouse-Geisser statistic were adopted. For the categorical variables, the chi-square test or Fisher exact test was used. The effect of human milk on pain relief, arising from the ocular fundus examination, did not differ statistically from 25% sucrose, when the duration of the presence of brow lowering [Wilk\'s Lambda=0.918; F=0.960; p=0.241], of deepening of the naso-labial furrow [Wilk\'s Lambda=0.883; F=1.43; p=0.241] and of crying [Wilk\'s Lambda=0.964; F=3.44; p=0.656] were evaluated, as well as the mean score of the NFCS adapted to consider these two facial movement actions [Wilk\'s Lambda=0.924; F=0.884; p=0.481], the HR [Wilk\'s Lambda=0.977; F=3.44; p=0.792] and the salivary cortisol concentration [Wilk\'s Lambda=0.978; F=2.45; p=0.612]. The intra-subject comparison showed a significant difference in the data collection periods, with an increase in the NFCS scores, in the duration of brow lowering and naso-labial furrow deepening, during the examination fundus of the right and left eyes, as well as increased crying during the painful procedure, compared with the baseline period, immediate and delayed recovery. The concentration of salivary cortisol increased significantly at 30 and 60 minutes after the procedure, compared with the baseline cortisol values; there was no difference between cortisol response (30 minutes) and recovery (60 minutes). The duration of naso-labial furrow deepening, of crying and the NFCS scores at the baseline did not differ significantly from the values found in the immediate and delayed recovery. In the HR, there was no difference between the baseline and the immediate recovery, and in the duration of brow lowering there was no difference in the two recoveries. We conclude that the effect of human milk, on the reduction of biobehavioral responses to pain in preterm infants undergoing the ocular fundus examination for the diagnosis of retinopathy of prematurity, is not greater than the effect obtained with 25% sucrose, rejecting the alternative hypothesis.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:32:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 431001.pdf: 1016980 bytes, checksum: 9deb0aea0f4febd49e279573945ce6b6 (MD5) Previous issue date: 2011-03-28 / INTRODU??O: A Dual-energy X-ray absorptiometry (DEXA) ? considerada o m?todo mais acurado para avalia??o da composi??o corporal. Com o aumento progressivo da sobrevida em prematuros tem ocorrido um interesse crescente em rela??o a avalia??o nutricional, uma vez que uma alimenta??o adequada nas primeiras semanas de vida influencia o desenvolvimento a longo prazo. Portanto a avalia??o da composi??o corporal ? de fundamental import?ncia nos cuidados nutricionais dos prematuros. OBJETIVO: Avaliar a composi??o corporal atrav?s da Dual-energy X-ray absorptiometry em rec?m-nascidos prematuros alimentados com leite humano suplementado (FM85? .Nestl? Nutrition) ou leite humano. M?TODOS: Foram estudados 26 rec?m-nascidos prematuros com menos de 1500g de peso ao nascimento, durante a interna??o na UTI Neonatal do Hospital S?o Lucas da PUCRS, entre julho de 2006 e janeiro de 2010. Os rec?m-nascidos foram randomizados em dois grupos: o grupo 1 recebeu leite humano acrescido de FM85? e o grupo 2 que recebeu leite humano sem FM85?. Foram registrados as medidas antopom?tricas. A composi??o corporal foi avaliada atrav?s da Dual-energy X-ray absorptiometry. RESULTADOS: Foram comparados 15 rec?m-nascidos prematuros que utilizaram leite humano com FM85? e 11 que ingeriram apenas leite humano. Os dois grupos n?o apresentaram diferen?as significativas tanto na entrada como no final do estudo em rela??o a idade gestacional (m?dia 30,2 sem ? 2,38 versus 30 sem ? 1,62; p = 0,76), peso (1232,7 g ? 166,82 versus 1161,4 g ? 228,43; p = 0,37), comprimento (37,4 cm ? 1,9 versus 36,6 cm ? 2,65; p = 0,25) e per?metro cef?lico (26,5 cm ? 2,91 versus 25,9 cm ? 1,51; p = 0,5). As percentagens no in?cio e ao final do estudo n?o apresentaram diferen?a significativa de massa magra (80 ? 1,89 versus 80,3 ? 1,22; p = 0,63), massa gorda (19,6 ? 1,81 versus 19,4 ? 1,2; p = 0,72) e conte?do mineral ?sseo (0,4 ? 0,18 versus 0,3 ? 0,09; p = 0,18), O volume percentual de leite humano ingerido, e tempo de interna??o tamb?m foram semelhantes entre os dois grupos no momento da alta. A concentra??o mineral ?ssea/Kg do grupo FM85? foi maior no grupo do leite humano suplementado (5,46 ? 2,63 g/Kg versus 3,55 ? 1,54 g/Kg; p =0,04) ao final do estudo. CONCLUS?ES: N?o houve diferen?a entre os grupos em rela??o a massa magra, massa gorda e massa mineral ?ssea