Made available in DSpace on 2015-04-14T13:56:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 402612.pdf: 2135404 bytes, checksum: 1527ce17a59e224199f1a3aa6908a00b (MD5) Previous issue date: 2008-03-31 / O objetivo principal dessa disserta??o ? estudar e implementar um sistema de alimenta??o eletr?nico, tendo como gerador de energia el?trica o m?dulo comercial de c?lulas de combust?vel INDEPENDENCE 1000, para compatibilizar os n?veis de tens?o, entre o m?dulo gerador com um inversor trif?sico comercial modelo CFW-07 da WEG S.A., foi desenvolvido um conversor elevador realimentado, os interruptores utilizados no circuito de pot?ncia s?o IGBT s operando em freq??ncia de 20 KHz. Foi realizada uma revis?o bibliogr?fica sobre c?lulas de combust?vel, um estudo sobre o m?dulo INDEPENDENCE 1000 para a correta instala??o e opera??o. Foi pesquisado sobre as caracter?sticas do inversor comercial para determinar os valores nominais do conversor elevador, determinado os par?metros partiu-se para o estudo e projeto do controlador e em seguida a implementa??o f?sica do conversor elevador realimentado e ensaios para valida??o do projeto. O trabalho faz parte dos produtos esperados no projeto Estudo e Aplica??es de C?lulas de Combust?vel na Gera??o de Energia patrocinado pela ANEEL e CEEE no ciclo de 2004.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:59:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 384224.pdf: 10046460 bytes, checksum: 1e0f6b329140d03ad3c7c7a4f67be55e (MD5) Previous issue date: 2006-08-22 / A convers?o direta de energia solar em eletricidade utilizando c?lulas solares vem se destacando como uma das alternativas para solucionar os problemas atuais e futuros da demanda energ?tica. C?lulas solares industriais de alta efici?ncia fabricadas sobre l?minas de sil?cio com a estrutura n+pp+ podem ser bifaciais quando o tempo de vida dos portadores minorit?rios no volume ? elevado. Desta forma, com a mesma quantidade de material, a c?lula pode produzir mais pot?ncia el?trica, principalmente quando associadas a concentradores fotovoltaicos. O objetivo deste trabalho foi implementar e otimizar um processo para fabrica??o de c?lulas solares bifaciais utilizando fornos de processamento t?rmico r?pido e metaliza??o serigr?fica. Foram otimizados, por meio de simula??o, dispositivos de 4 cm? com diferentes concentra??es de dopante em superf?cie e profundidades de jun??o, levando em considera??o a velocidade de recombina??o em superf?cie e a resist?ncia s?rie. Foram obtidas efici?ncias de 15,6% e 15,5% para ilumina??o nas faces n+ e p+, respectivamente. O f?sforo e o boro foram difundidos em um ?nico passo t?rmico. Os melhores par?metros t?rmicos (tempo, temperatura e gases) foram investigados por meio da medida da resist?ncia de folha e do tempo de vida dos portadores minorit?rios. O passo t?rmico ?timo deve ser realizado ? temperatura de 850?C durante 1 minuto, resultando na resist?ncia de folha de 35 ohms/quadrado; e tempo de vida dos portadores minorit?rios de 80 microsegundos. A serigrafia foi implementada e os par?metros de recozimento das pastas foram otimizados. As melhores efici?ncias foram alcan?adas quando as pastas foram secas a 150?C durante um minuto de VIII processamento e recozidas a 950?C tamb?m durante um minuto. Embora a deposi??o do metal tenha sido otimizada, altas resist?ncias s?rie foram observadas nas caracter?sticas I-V das c?lulas solares, que s?o atribu?das ? resist?ncia de contato. O melhor dispositivo apresentou a efici?ncia de 10,2 % (JSC de 30,3 mA/cm2) para ilumina??o pela face n+ e de 2,4% pela face p+.

Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-29T15:00:54Z No. of bitstreams: 1 TES_DANIEL_GONCALVES_BOECKEL_PARCIAL.pdf: 676511 bytes, checksum: cb9dde990f100982c7eac5a144973b47 (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-06-29T15:01:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TES_DANIEL_GONCALVES_BOECKEL_PARCIAL.pdf: 676511 bytes, checksum: cb9dde990f100982c7eac5a144973b47 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-29T15:01:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_DANIEL_GONCALVES_BOECKEL_PARCIAL.pdf: 676511 bytes, checksum: cb9dde990f100982c7eac5a144973b47 (MD5) Previous issue date: 2016-12-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The present research aims to characterize the mesenchymal stem cells of adipose origin (MSCAs) and to evaluate its use on the scaffold of hyaluronic acid (HA) as a cellular compound for bone tissue engineering. Firstly, cell characterization was performed through the collection of epididymal adipose tissue, isolation, culture and in vitro expansion. Through the morphological analysis of MSCAs culture it was possible to confirm elongated fusiform characteristic, centralized nucleus, extensions and adhesion to the plastic bottle. Expansion analysis also demonstrated a high cell proliferative index during the 26 days of in vitro culture. The Flow Cytometry test allowed the identification of the main surface markers that characterize the mesenchymal stem cells (CD29 and CD90) and negative for hematopoietic markers (CD31 and CD45). Moreover, MSCAs when induced to adipogenic and osteogenic media showed plasticity, since they were able to differentiate into adipocytes and osteoblasts respectively. The cell viability test was also performed in vitro, through the M.T.T (mitochondrial activity) of MSCAs on the HA scaffold. Concentrations of 100%, 75%, 50%, 25% and 15% were evaluated on the HA scaffold at times of 24, 48 and 72 hours. The results have shown cellular viability above 60% in almost all times and concentrations. Then, 50 critical bone defects were performed in the femoral region with 2 mm in diameter (one defect per femur) in 25 Lewis rats. The grafting treatments were divided as follows: I-negative control / only the defect (C); II-HA Scaffold; III- MSCAs; IV- MSCAs + HA and V- MSCAs previously osteoinduced + HA. After 23 days the rats were euthanized and had 5 femurs used for the microtomographic (?-CT) and histomorphometric analysis and 5 femurs used for the RT-PCR (Real-Time Polymerase Chain Reaction) analysis. The results for the ?-CT tests in the volume of osseous tissue parameter (VOT) and the percentage of osseous tissue (POT) did not present statistical differences among all groups. However, on the osseous contact surface (SCO) and osseous surface density (DSO) parameters, we had groups IV, III and V with higher indexes and differing statistically from the negative control groups I and group II. In histomorphometry we also had groups IV, V and III with greater area of regenerated bone tissue and differing with significance from groups I and II. The results were analyzed statistically by Analysis of Variance one way (ANOVA) and the level of significance was 5% (p <0.05). Regarding RT-PCR, a statistically significant difference was observed only when we evaluated osteonectin (ON) in which group II and V were more expressive in relation to groups III and IV. Regarding osteopontin (OP) and Type I collagen (Col1A), no differences were identified among the treated groups. The results were analyzed using Kruskal-Wallis non-parametric test and the significance level set was 5% (p <0.05). / A presente pesquisa tem por objetivo caracterizar as c?lulas-tronco mesenquimais de origem adiposa (CTMAs) e avaliar seu uso sobre a matriz de ?cido hialur?nico (AH) como composto celular para engenharia tecidual ?ssea. Primeiramente, foi realizada a caracteriza??o celular atrav?s da coleta do tecido adiposo epididimal, isolamento, cultivo e expans?o in vitro. Atrav?s da an?lise morfol?gica da cultura das CTMAs foi poss?vel confirmar caracter?stica fusiforme alongada, n?cleo centralizado, prolongamentos e ades?o ? garrafa pl?stica. A an?lise de expans?o tamb?m comprovou um alto ?ndice proliferativo celular, durante os 26 dias de cultura in vitro. J? o teste de citometria de fluxo permitiu a identifica??o dos principais marcadores de superf?cie que caracterizam as c?lulas-tronco mesenquimais (CD29 e CD90) e sendo negativo para marcadores hematopoi?ticos (CD31 e CD45). As CTMAS tamb?m quando induzidas aos meios adipog?nico e osteog?nico mostraram plasticidade, j? que foram capazes de diferenciarem-se em adip?citos e osteoblastos, respectivamente. Ainda in vitro, foi realizado o teste de viabilidade celular atrav?s do MTT (atividade mitocondrial), ap?s o contato das CTMAs sobre a matriz de AH. As concentra??es de 100%, 75%, 50%, 25% e 15% foram avaliadas sobre a matriz de AH nos tempos de 24, 48 e 72 horas. Os resultados comprovaram uma viabilidade celular acima de 60% em quase todos os tempos e concentra??es. Em seguida, foram realizados 50 defeitos ?sseos cr?ticos (DOC) na regi?o femoral com 2 mm de di?metro (um defeito por f?mur) em 25 ratos Lewis. Os tratamentos de enxertia realizados foram divididos da seguinte forma: I-controle negativo / apenas o defeito (C); II- matriz AH; III-CTMAs; IV-CTMAs + AH e V- CTMAs osteoinduzida + AH. Ap?s 23 dias os ratos sofreram eutan?sia e tiveram 5 f?mures utilizados para as an?lises microtomogr?ficas (?-CT) e histomorfom?trica e 5 f?mures utilizados para a an?lise por RT-PCR (Rea??o em cadeia da Polimerase em tempo Real). Os resultados para os testes por ?-CT no par?metro volume de tecido ?sseo (VTO) e porcentagem de tecido ?sseo (PTO) n?o apresentaram diferen?as estat?sticas entre todos os grupos. J?, nos par?metros superf?cie de contato (SCO) e densidade de superf?cie ?ssea (DSO) tivemos o grupo IV, III e V com maiores ?ndices e diferindo estatisticamente dos grupos controle negativo I e do grupo II. Na histomorfometria tamb?m tivemos os grupos IV, V e III com maiores ?reas de tecido ?sseo regenerado e diferindo com signific?ncia dos grupos I e II. Os resultados foram analisados estatisticamente pela An?lise de Vari?ncia de uma via (ANOVA) o n?vel de signific?ncia estabelecido foi de 5% (p < 0,05). Em rela??o ao RT-PCR, observou-se diferen?a estatisticamente significante apenas quando foi avaliada osteonectina (ON), sendo que o grupo II e V apresentaram maior express?o em rela??o aos grupos III e IV. Em rela??o ? osteopontina (OP) e ao col?geno Tipo I (Col1A) n?o foram identificadas diferen?as entres os grupos tratados. Os resultados foram analisados atrav?s do teste n?o param?trico de Kruskal-Wallis e o n?vel de signific?ncia estabelecido foi de 5% (p < 0,05).

Submitted by PPG Biologia Celular e Molecular (bcm@pucrs.br) on 2017-08-15T12:27:16Z No. of bitstreams: 1 BRUNO_DE_SOUZA_BASSO_DIS.pdf: 1709254 bytes, checksum: 167b84b794ff4ea4955b2ef79229ab4e (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-08-16T13:04:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 BRUNO_DE_SOUZA_BASSO_DIS.pdf: 1709254 bytes, checksum: 167b84b794ff4ea4955b2ef79229ab4e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-16T13:39:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BRUNO_DE_SOUZA_BASSO_DIS.pdf: 1709254 bytes, checksum: 167b84b794ff4ea4955b2ef79229ab4e (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The genus Baccharis belongs to the family Asteraceae and has several species widely used in folk medicine and own many compounds of pharmaceutical interest. The aim of this work was to evaluate the cytotoxic, antiproliferative effect and phenotypic reversion of Baccharis anomala extract on activated hepatic stellate cells (HSCs) and identify the compounds present in the extract. In order to evaluate the cytotoxic and antiproliferative effect of the fractionated extract, lactate dehydrogenase (LDH) release and the trypan blue exclusion method were used. The phenotype reversion was evaluated by staining with Oil Red and PPAR-? expression by RT-PCR. The fractions obtained from the methanolic extract were characterized for their phenolic composition by HPLC. The results showed that two fractions of methanolic extract decreased cell proliferation without increasing LDH release levels. Cell cycle arrest was evaluated using 7-AAD and DAPI staining was used to evaluate indications of apoptosis. Fractions of B.anomala induced cell cycle arrest in G1 phase, while DAPI staining did not reveal cell death by apoptosis. Oil-Red (ORO) staining showed the ability of fractions to induce phenotypic reversion and the evaluation of PPAR-? mRNA expression was not altered, suggesting that there is an independent PPAR-? pathway involved. The main components identified in the fractions that presented biological activity were hydroxybenzoic, chlorogenic and coumaric acid. Our study was able to show the antiproliferative effect of methanolic extract fractions of B.anomala, its potential to reverse the activated phenotype of hepatic stellate cells and showed its potential for the treatment of liver fibrosis. / O g?nero Baccharis pertence ? fam?lia Asteraceae e tem v?rias esp?cies amplamente utilizadas na medicina popular, possuindo muitos compostos de interesse farmac?utico. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito citot?xico, antiproliferativo e a revers?o fenot?pica do extrato de Baccharis anomala em c?lulas estreladas hep?ticas ativadas (HSCs) e identificar os compostos presentes no extrato. Para avaliar o efeito citot?xico e antiproliferativo do extrato fracionado, foram utilizadas a libera??o de lactato desidrogenase (LDH) e o m?todo de exclus?o de azul de Tripan. A revers?o do fen?tipo foi avaliada por colora??o com Oil Red e pela express?o de PPAR-? por RT-PCR. As fra??es obtidas a partir do extrato metan?lico foram caracterizadas pela sua composi??o fen?lica por HPLC. Os resultados mostraram que duas fra??es do extrato metan?lico diminu?ram a prolifera??o celular sem aumentar os n?veis de libera??o de LDH. A parada do ciclo celular foi avaliada usando 7-AAD e colora??o por DAPI foi utilizada para avaliar a apoptose celular. As fra??es de B.anomala induziram a parada do ciclo celular em fase G1, a colora??o por DAPI n?o revelou morte celular por apoptose. Colora??o por Oil-RedO (ORO) mostrou a capacidade de indu??o da revers?o fenot?pica, a avalia??o da express?o mRNA de PPAR-y por RT-PCR n?o foi alterada, sugerindo que exista uma via independente de PPAR-y envolvida. Os principais componentes identificados nas fra??es que apresentaram atividade biol?gica foram os ?cidos hidroxibenz?ico, clorog?nico e cum?rico. Nosso estudo foi capaz de mostrar o efeito antiproliferativo das fra??es de extrato metan?lico de B.anomala, seu potencial para reverter o fen?tipo ativado das c?lulas estreladas hep?ticas e mostrou seu potencial para o tratamento da fibrose hep?tica.

Submitted by PPG Biologia Celular e Molecular (bcm@pucrs.br) on 2018-04-17T11:55:36Z No. of bitstreams: 1 LAURA_ESTEVES_PETERSEN_TES.pdf: 11032751 bytes, checksum: 519545881a34767f1600d5189b0ddc8e (MD5) / Approved for entry into archive by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2018-05-04T17:09:09Z (GMT) No. of bitstreams: 1 LAURA_ESTEVES_PETERSEN_TES.pdf: 11032751 bytes, checksum: 519545881a34767f1600d5189b0ddc8e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-04T17:15:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LAURA_ESTEVES_PETERSEN_TES.pdf: 11032751 bytes, checksum: 519545881a34767f1600d5189b0ddc8e (MD5) Previous issue date: 2018-03-14 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Rheumatoid Arthritis (RA) is an autoimmune and inflammatory disease which leads to premature immunosenescence and the development of articular and extra-articular manifestations, including joint damage and cognitive dysfunction, respectively. Peripheral immune system cells and the chronic inflammation, both of great importance for RA, are potentials mechanisms involved in cognitive dysfunction. In contrast, experimental studies have shown the beneficial contribution of immune cells, mainly T cells reactive to central nervous system (CNS) antigens, to neurogenesis and neuroplasticity. Previous data have shown that RA patients besides to have worse performance in cognitive tests, have significantly lower levels of B cells and higher levels of senescent T cells (CD8+CD28-). However, is not known yet which B cells subpopulations are related to poor cognitive performance, if clinical severity of disease (active and controlled disease) impacts on cognition and which factor is responsible for remodeling of peripheral immunity (immunosenescence). Hypotheses about the contribution of latent infections (Cytomegalovirus; CMV), for the development of immunosenescence (observed by telomere shortening and increase of CD28- cells) have been raised. However, it remains in discussion the CMV soroprevalence and its relation with the development of premature immunological senesce in RA. Based on this findings, in this work we have broadly assessment the cognition of RA patients with active and controlled disease, peripheral levels of lymphocytes subsets (T and B cells), neurotrophic factors, cytokines besides that CMV soroprevalence and immunosenescence profile (telomere length and CD28- cells). This work also proposed to explore the relationship between immune mediators, neurotrophic factors and cognitive performance, besides the association between CMV and immunosenescence. For this purpose, 102 RA patients (67 active and 35 controlled disease) and 30 healthy controls adjusted for age, gender and schooling were recruited. The cognitive function, levels of stress and depression were assessment by means of neurocognitive tests (Mini Mental State Examination, Logical memory, digit span, Trail Making Test, N-back, Stroop word-colors) and specific questionnaires (Beck Depression Inventory ?II for depression and Perceived Stress Scale for stress). Twenty ml of blood were collected and, after plasma separation, the peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were isolated by centrifugation gradient. PBMCs were immunophenotyped by flow cytometry to investigate the frequency of T and B cells subsets. The genomic DNA was isolated from PBMCs and the telomere length was evaluated by real time PCR. Neurotrophic factors, cytokines, IgM and IgG anti-CMV were measured in plasma by means of ELISA (NF and CMV) and Citometric Bead Array (CBA; cytokines). In general, patients with active disease had worse cognitive performance, followed by patients with controlled disease producing cells, in addition to high levels of cytokines, with the exception of IL-17A. Higher levels of BDNF were found in patients with active RA followed by controlled disease and control group. The peripheral levels of GDNF were lower in patients with active RA than control group. The IL-6 was predictor of the performance in Trail Making test. IgM and IgG anti-CMV antibody titers did not differ between patients and controls. Only IgG anti-CMV was positively associated with age and senescent cells. In conclusion, RA patients with active disease had worse performance in cognitive tasks that were related to peripheral immune mediators (cells and cytokines). Besides that, we found that late infection (IgG) by CMV were associated only with CD4+CD27-CD28- and haven?t correlated with other immunosenescence characteristics. However, understand in which sense e how the relationship between the peripheral environment and the CNS is established, may contribute to development of preventive interventions to cognitive impairments and premature immunosenescence, since both factors are associated to health and well-being of individuals. / A artrite reumatoide (AR) ? uma doen?a autoimune inflamat?ria que leva ? imunossenesc?ncia prematura e ao desenvolvimento de manifesta??es articulares e extraarticulares, entre elas a destrui??o da articula??o e o decl?nio cognitivo, respectivamente. C?lulas do sistema imune perif?rico e a inflama??o cr?nica, ambos de grande import?ncia para a AR, s?o potenciais mecanismos envolvidos na disfun??o cognitiva. Em contrapartida, estudos experimentais tem revelado a contribui??o ben?fica das c?lulas imunol?gicas, principalmente c?lulas T reativas a ant?genos do sistema nervoso central (SNC), para a neurog?nese e neuroplasticidade. Dados pr?vios apontam que pacientes com AR al?m de apresentarem piores desempenhos nos testes cognitivos, tem significativamente menos c?lulas B e mais c?lulas T com perfil senescente (CD8+CD28-). Entretanto ainda n?o se sabe quais subpopula??es de c?lulas B est?o relacionadas ao pior desempenho cognitivo, se a severidade cl?nica da doen?a (doen?a ativa e controlada) impacta sobre a cogni??o e qual fator seria respons?vel pelo remodelamento da imunidade perif?rica (imunossenesc?ncia). Hip?teses sobre a contribui??o de infec??es latentes, como a causada pelo citomegalov?rus (CMV), para o desenvolvimento da imunossenesc?ncia, observada pelo encurtamento telom?rico e aumento na frequ?ncia de c?lulas CD28-, tem sido levantadas. Por?m, permanece em discuss?o a soropreval?ncia da infec??o pelo CMV e sua real rela??o com o desenvolvimento da senesc?ncia imunol?gica prematura na AR. Com base nestas constata??es, nesta tese n?s avaliamos amplamente a cogni??o de pacientes com AR ativa e controlada, n?veis perif?ricos de subtipos linfocit?rios (c?lulas T e B), fatores neurotr?ficos (FN), citocinas, al?m da soropositividade para CMV e perfil de imunossenesc?ncia prematura (encurtamento telom?rico e aumento de c?lulas CD28-). Esta tese tamb?m se prop?s explorar a rela??o entre mediadores imunes, FN e desempenho cognitivo, e a associa??o entre CMV e caracter?sticas de imunossenesc?ncia. Para esta finalidade, 102 pacientes com AR (67 com doen?a ativa e 35 com doen?a controlada) e 30 controles saud?veis ajustados para idade, g?nero e escolaridade foram recrutados. A fun??o cognitiva, n?veis de estresse e depress?o foram avaliados por meio de testes neurocognitivos (Mini Exame do Estado Mental, Mem?ria L?gica, Subteste de D?gitos, Trail Making Test, N-back, Stroop palavras-cores) e question?rios espec?ficos (Beck Depression Inventory ?II e Escala de Estresse Percebido). Foram coletados 20 ml de sangue e, ap?s a separa??o do plasma, as c?lulas mononucleares do sangue perif?rico (PBMCs) foram isoladas por gradiente de centrifuga??o. PBMCs foram imunofenotipadas por citometria de fluxo para investigar a frequ?ncia de subpopula??es de c?lulas T e B. FN, citocinas, IgM e IgG anti-CMV foram dosados no plasma atrav?s da t?cnica de ELISA (FN e CMV) e Citometric Bead Array (CBA; citocinas). De forma geral, pacientes com doen?a ativa tiveram o pior desempenho nos testes cognitivos, seguido pelos indiv?duos com doen?a controlada e grupo controle. Pacientes com AR tiveram elevados n?veis perif?ricos de c?lulas B imaturas e produtoras de anticorpos, al?m de elevados n?veis das citocinas, com exce??o da IL-17. Maiores concentra??es de BDNF foram observadas nos indiv?duos com AR ativa, seguido pelo grupo controlado e controle. Os n?veis perif?ricos de GDNF foram menores em pacientes com AR ativa do que em indiv?duos controle. A IL-6 apresentou-se como preditora do desempenho do Trail Making Test. T?tulos dos anticorpos IgM e IgG anti-CMV n?o diferiram entre pacientes e controles. Somente o IgG anti-CMV foi relacionado positivamente com idade e c?lulas senescentes. Concluindo, pacientes com AR ativa apresentam pior desempenho em tarefas cognitivas as quais est?o relacionadas a mediadores imunes perif?ricos. Al?m disso, observou-se que infec??es tardias pelo CMV (t?tulos de anticorpos IgG anti-CMV) foram somente associadas a c?lulas T senescentes e n?o se correlacionaram com outras caracter?sticas da imunossenesc?ncia. Portanto, compreender em qual sentido e como a rela??o entre o ambiente perif?rico e do SNC se estabelece, pode contribuir para o desenvolvimento de interven??es preventivas ao d?ficit cognitivo e senesc?ncia prematura, uma vez que ambos fatores est?o associados a sa?de e o bem ? estar dos indiv?duos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 425543.pdf: 747447 bytes, checksum: 25a6005ed4d57ac7cb87a5a7d22ed8de (MD5) Previous issue date: 2010-03-31 / O envelhecimento est? associado com o decl?nio progressivo nas fun??es do sistema imunol?gico (imunosenesc?ncia), tanto na imunidade humoral quanto na imunidade mediada por c?lulas, resultando em maior suscetibilidade a infec??es e c?ncer, al?m da diminui??o na capacidade de responder a vacinas. As c?lulas dendr?ticas (DCs) s?o as mais poderosas e eficientes apresentadoras de ant?genos (APC), desempenhando um papel primordial na apresenta??o e conseq?ente resposta imune mediada por c?lulas T. Poucos estudos enfocam a atividade das c?lulas dendr?ticas no envelhecimento, sendo que a maioria dos dados s?o relativos ?s fun??es das c?lulas T. As intera??es entre as c?lulas dendr?ticas e as c?lulas T afetam o processamento e consequente apresenta??o de ant?genos, influenciando a efetividade das respostas imunes mediadas por c?lulas T. Este trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade estimulat?ria de c?lulas dendr?ticas de camundongos velhos em uma resposta espec?fica T CD4+ comparada ? resposta imune de camundongos jovens. Para isso, c?lulas T de camundongos transg?nicos TEa, espec?ficas para o complexo Ea:IAb foram transferidas para camundongos normais C57Bl/6, c?lulas T de camundongos jovens para animais velhos e jovens, e c?lulas T de camundongos velhos para animais velhos e jovens. Os resultados demonstram que, ap?s imuniza??o com o ant?geno EaRFP, tanto as c?lulas T jovens quanto as c?lulas T velhas foram estimuladas de modo semelhante por c?lulas dendr?ticas jovens. Contudo, c?lulas dendr?ticas de animais velhos n?o foram capazes de estimular suficientemente as c?lulas T de animais velhos nem mesmo as c?lulas T de animais jovens. Enquanto ambas as c?lulas T, jovens e velhas, adquiriram o fen?tipo CD44+ quando transferidas para os animais jovens, c?lulas T jovens transferidas para animais velhos n?o adquiriram o mesmo fen?tipo. Esse fato sugeriu que c?lulas dendr?ticas de animais velhos possuem baixa capacidade de estimular c?lulas T, mesmo que essas c?lulas venham de um animal jovem. N?s hipotetizamos que esse resultado poderia estar ligado a um n?mero extremamente diminu?do de c?lulas dendr?ticas nos animais velhos, ou ainda em uma defici?ncia em um dos sinais fornecidos pelas c?lulas dendr?ticas no priming de linf?citos T (apresenta??o de ant?geno ou sinais coestimulat?rios). O n?mero total de c?lulas dendr?ticas foi significativamente menor em camundongos velhos comparado a camundongos jovens. Al?m disso, o n?mero de c?lulas apresentando ant?geno foi menor no linfonodo drenante de animais velhos, e a express?o de CD86 por c?lulas dendr?ticas de animais velhos n?o foi diferente da dos animais jovens. Os resultados sugerem que a diminui??o da capacidade de apresenta??o de ant?geno apresentada no envelhecimento ? cr?tica para a perda do potencial estimulat?rio de c?lulas T CD4+ por c?lulas dendr?ticas.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-09-16T22:49:16Z No. of bitstreams: 1 474864 - Texto Completo.pdf: 4783570 bytes, checksum: 1da454a8aaea971c62e4fff0a6d841a2 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-09-16T22:49:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 474864 - Texto Completo.pdf: 4783570 bytes, checksum: 1da454a8aaea971c62e4fff0a6d841a2 (MD5) Previous issue date: 2015-08-03 / Introduction : The cellular and physiological changes that accompany the aging process has pronounced effects in neurodegenerative diseases. Factors that produce neurodegeneration do so through different processes that culminate in a common signaling pathway cascade. Stem cells communicate via cellular signaling mechanisms, which is part of a complex system which governs and coordinates activities and cell functions. Understanding the mechanisms and forms of intercellular communication and their relationship in the activation of signaling cascades from the surface receptor to the cell nucleus during neurogenesis, will answer some pertinent questions to the mechanisms of action of stem cells in repair central nervous system. Objective : This study aimed to determine which RTKs being activated during neurogenesis of adult stem cells from human umbilical cord tissue. Methods : Adult stem cells were obtained from human umbilical cord tissue (n = 3) and subjected to specific inducers in neurodifferentiation means. The kit Human Phospho-RTK Array was used for evaluating the phosphorylation of the RTK and the expression determined by realtime PCR. Results : The mesenchymal stem cells obtained from umbilical cord tissue were confirmed by differentiation induction in adipocytes and osteocytes cells. The neurodifferentiation was confirmed by expression of genes that are expressed during neurogenesis in cells and neural cells, as well as immunocytochemistry technique markings which showed nuclear (DAPI) and cell processes (Fluoropan). During the neuroinduction processes and neurodifferentiation the phosphorylation levels of RTKs were variable, with no clear pattern. The Ryk receptor showed no significant changes in their levels of phosphorylation of the three samples studied and the different stages of differentiation, ie, mesenchymal, neuroinductions and neurodifferentiates cells. Conclusions : The tyrosine kinases are actively being phosphorylated during neuroinduction and neurogenesis, with varying standards between the different stages and between different samples, reflecting the variability of human adult stem cells. / Introdu??o : As altera??es celulares e fisiol?gicas que acompanham o processo de envelhecimento tem efeitos pronunciados nas doen?as neurodegenerativas. Os fatores que produzem neurodegenera??o o fazem atrav?s de diferentes processos, que culminam em uma via comum de cascata de sinaliza??o. As c?lulas-tronco se comunicam por mecanismos de sinaliza??o celular, que faz parte de um complexo sistema que governa e coordena as atividades e fun??es celulares. Compreender os mecanismos e as formas de comunica??o intercelular e a sua rela??o na ativa??o das cascatas de sinaliza??o, desde o receptor de superf?cie at? o n?cleo celular, durante a neurog?nese, permitir? responder algumas quest?es pertinentes aos mecanismos de a??o das c?lulas-tronco no reparo do sistema nervoso central. Objetivo : Este estudo teve como objetivo determinar quais os RTKs que est?o sendo ativados durante a neurog?nese de c?lulas-tronco adultas de tecido de cord?o umbilical humano. Metodologia : C?lulas-tronco adultas foram obtidas de tecido de cord?o umbilical humano (n=3) e submetidas a neurodiferencia??o em meios indutores espec?ficos. O kit Human Phospho-RTK Array foi utilizado para avalia??o da fosforila??o dos RTKs e a express?o determinada por PCR em tempo real. Resultados : As c?lulas-tronco mesenquimais obtidas do tecido do cord?o umbilical foram confirmadas atrav?s da indu??o de diferencia??o em c?lulas adip?citas e oste?citas. A neurodiferencia??o foi confirmada atrav?s da express?o de genes que s?o expressos nas c?lulas durante a neurog?nese e em c?lulas neurais, como tamb?m a t?cnica de imunocitoqu?mica que mostrou marca??es nucleares (DAPI) e prolongamentos celulares (Fluoropan). Durante os processos de neuroindu??o e neurodiferencia??o os n?veis de fosforila??o dos RTKs foram vari?veis, sem um padr?o definido. O receptor Ryk n?o apresentou altera??es significativas nos seus n?veis de fosforila??o entre as tr?s amostras estudadas e nas diferentes etapas de diferencia??o, isto ?, c?lulas-tronco mesenquimais, c?lulas neuroinduzidas e c?lulas neurodiferenciadas. Conclus?es : Os receptores tirosina quinases est?o sendo ativamente fosforilados durante a neuroindu??o e neurog?nese, com padr?es vari?veis entre as diferentes etapas e entre diferentes amostras, refletindo a variabilidade das c?lulas-tronco adultas humanas.

Submitted by Natalie Mendes (nataliermendes@gmail.com) on 2015-07-24T01:11:42Z No. of bitstreams: 1 marcus_vinicius_pinheiro_mendonca_tese.pdf: 8890182 bytes, checksum: 8c3486b869dff02251529c805a28b23c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-24T01:11:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marcus_vinicius_pinheiro_mendonca_tese.pdf: 8890182 bytes, checksum: 8c3486b869dff02251529c805a28b23c (MD5) Previous issue date: 2014-10-10 / Despite the advancement in the care of patients with spinal cord injury, currently there is no specific treatment for neurological lesion. Therapy with mesenchymal stem cells from bone marrow (BMMC) has shown to be a safe and promising technique in various medical fields. The objective of this study is to evaluate the safety of autologous BMMC transplantation for the treatment of chronic spinal cord injury of traumatic origin.Fourteen paraplegic patients (classified as A in ASIA scale) with at least 6-month thoracic or thoracolumbar spinal cord injurywere selected. They underwent aspiration of bone marrow tissue from the iliac crest with further expansion and in vitro characterization; by means of microsurgical procedure, the BMMC suspension was introduced at the level of the spinal cord injury. A 6-month clinical follow-up was performed after surgery, including functional and imaging tests. There was a change in ASIA scale in 7 patients, increased bladder capacity in 5 patients and appearance of the SSEP waveform in one patient. Throughout the observation period, no major complications were observed. The present protocol proved to be safe and, due to significant improvements in neurological symptoms in many patients, also a potentially promising therapeutic method for patients with spinal cord injury. / A despeito do avan?o na assist?ncia do paciente com trauma raquimedular, atualmente n?o h? tratamento espec?fico para a les?o neurol?gica. A terapia com c?lulas-tronco mesenquimais da medula ?ssea (CMMO) tem-se mostrado uma t?cnica segura e promissora em diversas ?reas m?dicas. O objetivo deste estudo ? avaliar a seguran?a do transplante aut?logo de CMMO para o tratamento de les?o medular cr?nica de origem traum?tica. Foram selecionados 14 pacientes parapl?gicos (classificados como A na escala ASIA) com les?o medular tor?cica ou t?raco-lombar h? mais de 6 meses. Eles foram inicialmente submetidos ? aspira??o de tecido da medula ?ssea da crista il?aca, com posterior expans?o e caracteriza??o in vitro de CMMO e, por meio de procedimento microcir?rgico, introduziu-se a suspens?o de CMMO na medula espinhal no n?vel da les?o. Os pacientes foram acompanhados clinicamente, com realiza??o de exames funcionais e de imagem por um per?odo de 6 meses ap?s o procedimento cir?rgico. Houve mudan?a na escala ASIA em 7 pacientes, aumento da capacidade vesical em 5 pacientes e aparecimento de onda ao SSEP em 1 paciente. Durante todo o tempo de observa??o, n?o foram identificadas complica??es potencialmente graves. O presente protocolo se mostrou seguro e, ainda, devido a melhoras significativas no quadro neurol?gico em boa parte dos pacientes, um m?todo terap?utico potencialmente promissor para pacientes com trauma raquimedular.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 419163.pdf: 7573936 bytes, checksum: cf99bdb6eeb8892e65fd4e0a5c3a15e2 (MD5) Previous issue date: 2009-11-13 / Objetivos: Neste estudo foi investigada a express?o das enzimas DNA metiltransferases (DNMTs) 1, 3a e 3b em carcinomas escamocelulares (CEC) e leucoplasias bucais, relacionando-a com a gradua??o histopatol?gica e presen?a de displasia epitelial, respectivamente, bem como com os par?metros cl?nicos dos pacientes. Metodologia: A t?cnica de imunoistoqu?mica utilizando anticorpos anti-DNMT1, anti-DNMT3a e anti-DNMT3b (dilui??o de 1:700) foi realizada para detectar a express?o das tr?s DNMTs em 21 amostras de leucoplasias com diagn?stico histopatol?gico de acantose e/ou hiperceratose (leucoplasia sem displasia), 16 leucoplasias com diagn?stico histopatol?gico de displasia epitelial, 20 CEC bem diferenciados (grau I), 20 CEC moderadamente diferenciados (grau II) e 20 CEC pobremente diferenciados (grau III). Vinte amostras de tecidos orais n?o tumorais foram utilizadas como controles. O material, inclu?do em parafina, foi obtido do arquivo do Laborat?rio de Patologia do Servi?o de Estomatologia e Preven??o do C?ncer Bucomaxilofacial do Hospital S?o Lucas da PUCRS. A an?lise estat?stica foi realizada por meio da An?lise de Vari?ncia (ANOVA), teste Student-Newman-Keuls, correla??o de Pearson e teste t. Resultados: A incid?ncia da imunorreatividade nuclear para DNMT3a nos grupos de CEC (39,9%) foi significativamente superior a do grupo-controle (22,6%) (p<0,05), mas n?o diferiu dos grupos de leucoplasias (28,2%). Para a DNMT1 e DNMT3b n?o houve diferen?a estatisticamente significativa entre os grupos de CEC (65% e 74,7%), de leucoplasias (68,3% e 70,9%) e controle (65,4% e 76,5%). A express?o imunoistoqu?mica das enzimas DNMTs n?o exibiu correla??o com a idade dos pacientes nem associa??o com g?nero e consumo de chimarr?o. Houve uma significativa associa??o entre DNMT3a e uso de ?lcool (p = 0,01) e uma associa??o inversa entre DNMT1 e tabagismo (p = 0,048). Conclus?es: Apesar do aumento do n?vel de imunorreatividade ? enzima DNMT3a nos grupos de CEC, as tr?s enzimas estudadas n?o possuem capacidade preditora de susceptibilidade ao CEC em pacientes com leucoplasia bucal, nem exibem associa??o com as caracter?sticas histopatol?gicas ou com os par?metros cl?nicos idade, g?nero e uso de chimarr?o. O consumo de bebidas alco?licas foi associado com uma maior express?o de DNMT3a e o uso de cigarro com uma menor express?o de DNMT1.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:34:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 399864.pdf: 2357842 bytes, checksum: 33aacb0348512c8221c086f9eb4b8def (MD5) Previous issue date: 2008-01-25 / A presen?a de met?stase cervical ? o fator progn?stico mais relevante no carcinoma epiderm?ide de boca. Fatores cl?nicos e histol?gicos est?o associados com o desenvolvimento da met?stase cervical, por?m a pesquisa de fatores moleculares est? sendo amplamente realizada nos ?ltimos anos. O objetivo deste estudo ? avaliar a associa??o da express?o do fator tecidual e da densidade microvascular como fatores de risco para a presen?a de met?stase cervical nestas neoplasias. A express?o do fator tecidual e a densidade microvascular foram aferidas pela t?cnica de imunoistoqu?mica e suas associa??es com a presen?a de met?stase cervical foram estudadas em 53 pacientes com diagn?stico de carcinoma epiderm?ide de boca tratados cirurgicamente pelo autor. Caracter?sticas cl?nicas e histol?gicas tamb?m foram pesquisadas e associadas com a presen?a de met?stase cervical. Somente tr?s casos n?o expressaram o fator tecidual. A alta express?o do fator tecidual, mais de 50% das c?lulas tumorais intensamente coradas, foi encontrada em 13 pacientes (24,5%). A densidade microvascular por paciente variou entre 4 e 47,8 vasos, com uma m?dia de 18,47 vasos. A alta densidade microvascular (mais de 20 vasos por paciente) ocorreu em 21 pacientes (39,6%). O estadiamento cl?nico, a infiltra??o neuronal e as emboliza??es vasculares foram os fatores preditivos de met?stase de maior relev?ncia. Este estudo descreve pela primeira vez a express?o do fator tecidual como fator progn?stico de met?stase e de ?bito no carcinoma epiderm?ide de boca. Os resultados indicam que a express?o do fator tecidual e a densidade microvascular n?o est?o associados com a presen?a de met?stase cervical. Estudos adicionais s?o necess?rios para determinar novos marcadores moleculares capazes de melhorar a acur?cia do progn?stico, comparados aos fatores cl?nicos e histol?gicos de progn?stico do carcinoma epiderm?ide de boca j? estabelecidos.