Made available in DSpace on 2015-05-27T13:34:58Z (GMT). No. of bitstreams: 2 795.pdf: 2208162 bytes, checksum: f21fbaf3566432ace16b2268d19103cd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / As manifestações clínicas da doença de Chagas humana estão associadas com as distintas e complexas relações parasito-hospedeiro que envolvem diretamente o sistema imune. Nesse contexto, nos propomos analisar a relação entre a produção de citocinas intracitoplasmáticas após estímulo in vitro com os antígenos recombinantes CRA (Cytoplasmatic Repetitive Antigen) ou FRA (Flagellar Repetitive Antigen) de Trypanosoma cruzi e as formas clínicas crônicas cardíaca e indeterminada da doença de Chagas. O grupo de pacientes chagásicos consistiu de 39 indivíduos portadores: forma cardíaca sem dilatação cardíaca (FC1) (n=15); forma cardíaca com dilatação cardíaca (FC2) (n=15) e forma indeterminada (FI), selecionados no Ambulatório de Doença de Chagas do Hospital Universitário Oswaldo Cruz da Universidade de Pernambuco. O sangue total destes indivíduos foram submetidos à cultura na presença de CRA ou FRA por 1 dia e citocinas intracitoplasmáticas produzidas por linfócitos e monócitos foram analisadas através da citometria de fluxo. Nossos resultados mostraram que IFN-? e TNF-? produzidas por linfócitos T CD8+ após estímulo in vitro com o CRA foi capaz de diferenciar os pacientes chagásicos portadores da FC2 dos pacientes portadores da FC1 e da FI, podendo ser consideradas marcadores imunológicos da forma clínica cardíaca da doença de Chagas. Após estudo prospectivo de indivíduos portadores da FI e FC1, essa ferramenta poderia ser utilizada no seguimento das intervenções terapêuticas, melhorando a qualidade de vida do paciente

Made available in DSpace on 2015-11-04T13:29:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 tamiris_barros_ioc_mest_2015.pdf: 3974773 bytes, checksum: 582ff742d19972a2ff51fc3e5895c17f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015-04-14 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Plaquetas são fragmentos celulares derivados dos megacariócitos, que desempenham papel na hemostasia, coagulação, angiogênese, inflamação e resposta imune. Na infecção humana pelo Vírus Dengue (DENV), plaquetas constituem uma das populações celulares mais afetadas devido à plaquetopenia e disfunção plaquetária. O objetivo deste trabalho foi investigar a influência de citocinas, quimiocina e fatores de crescimento séricos e de proteínas intraplaquetárias relacionadas à angiogênese, coagulação, regulação da matriz extracelular e inflamação na plaquetopenia de pacientes infectados pelo DENV. Para tal, realizamos: (i) estudo populacional de pacientes e obtenção de soro e plaquetas em 2013, (ii) ensaios multiplex de micrarranjo líquido para quantificação dos níveis séricos de citocinas, quimiocina e fatores de crescimento e (iii) ensaio de determinação do perfil de expressão 55 proteínas intraplaquetárias. Quarenta e três pacientes DENV foram confirmados, com predominância do DENV-4. Independente da forma clínica, pacientes DENV apresentaram níveis séricos elevados de IL-10, TNF-\03B1, CXCL8/IL-8, mas não de IL-1\03B2 e IFN-\03B3 quando comparados aos controles sadios. Análises estatísticas demonstraram que níveis de IL-10 e IFN-\03B3 apresentaram correlação, respectivamente inversa e direta com a contagem de plaquetas. Ainda, IL-10 diretamente com leucócitos e linfócitos e TNF-\03B1 com linfócitos Vinte e cinco proteínas intraplaquetárias foram quantificadas, mas apenas cinco delas, PDGF-AA, TGF-\03B21, HGF, IGFBP-1 e Angiopoetina-1, apresentaram correlação direta com a contagem de plaquetas nos pacientes DENV. A quantificação sérica de PDGF e VEGF demostrou que ambos estavam diminuídos no grupo DENV mais trombocitopênico. Análise entre proteínas intraplaquetárias com funções biológicas antagônicas demonstraram que a razão anti- versus pró-inflamatórios TGF-\03B21/MIP-1\03B1 foi diminuída em pacientes DENV trombocitopênicos e as razões anti versus pró-angiogênica serpina F1/angiopoetina-1 e serpina F1/ PDGF-AB/BB apresentaram níveis aumentados em pacientes DENV trombocipênicos. Concluímos brevemente que a reintrodução do DENV-4 não resultou numa maior ocorrência de gravidade. Contudo esta reintrodução, induziu aumento dos níveis de TNF-\03B1 e CXCL8/IL-8 e da IL-10, influenciando de maneira direta ou indireta contagens de plaquetas e/ou demais células em resposta à infecção. Níveis IX intraplaquetários de PDGF, TGF-\03B21, IGFPB-1, Angiopoetina e HGF em pacientes mais trombocitopênicos poderiam prejudicar a ativação de mecanismos relacionados à angiogênese, coagulação, integridade do endotélio vascular e produção de mediadores inflamatórios. Assim, plaquetas poderiam ser consideradas células atuantes da resposta imunológica anti-DENV e, portanto, plaquetopenia é um fator prognóstico chave da imunopatogênese da dengue / Platelets are cell fragments derived from megakaryo cytes, which play a role in hemostasis, coagulation, angiogenesis, inflammation and immune response. In human infection with dengue virus (DENV), platelets are one of the most affecte d cell populations due to thrombocytopenia and platelet dysfunction. The objective of this stu dy was to investigate the influence of serum cytokines, chemokines, intraplatelet growth factors and proteins related to angiogenesis, coagulation, regulation of extracellular matrix and inflammation in thrombocytopenia of patients infected with DENV. For this purpose, we conducted: (i) population study of patients and obtaining their serum and platelets in 2013, (ii) l iquid microarray multiplex assays for quantitation of serum levels of cytokines, chemokine, and growth factors, and (iii) assay for determining expression profile of 55 intraplapletelet proteins. Forty-three DENV patients were confirmed, with a predominance of DENV-4. Regardless of type o f DENV, levels of IL-10, TNF- α , CXCL8 / IL-8, but not IL-1 β and IFN- γ were higher on serum of patients compared to healt hy individuals. Statistical analyses showed that levels of IL-10 an d IFN- γ presented correlation, respectively, inverse and direct with platelet count. Furthermore , IL-10 was directly correlated with leukocytes, lymphocytes, TNF- α and with lymphocytes. Twenty-five intraplatelet pr oteins were quantified, but only five of them, PDGF-AA, TGF- β 1, HGF, angiopoietin-1 and IGFBP-1 were directly correlated with platelet count in DENV pat ients. Both levels of PDGF and VEGF were decreased in group of DENV thrombocytopenic. Analys es between intraplatelet proteins with antagonic biological functions have shown that rati os anti- versus pro-inflammatory TGF- β 1 / MIP-1 α were decreased in thrombocytopenic DENV patients a nd the ratios anti-versus pro- angiogenic serpin-F1 / angiopoietin-1 and serpin-F1 / PDGF-AB / BB showed increased levels in thrombocytopenic DENV patients. Briefly been con cluded that the reintroduction of the DENV- 4 did not result in a higher incidence of gravity. However, levels of TNF- α and CXCL8 / IL-8 and IL-10 were increased, influencing directly or indir ectly platelet counts and/or other cells in response to infection. Levels of PDGF, TGF- β 1, IGFPB-1, angiopoietin and HGF intraplatelet of patients high thrombocytopenic may impair activatio n of mechanisms related to angiogenesis, coagulation, vascular endothelial integrity and pro duction of inflammatory mediators. Thus, platelets might be considered active anti-DENV immu ne response cells and hence thrombocytopenia is a key prognostic fator in the i mmunopathogenesis of dengue.

DUARTE, Daniella Bezerra. Avaliação da função renal em pacientes com esquistossomose hepatoesplênica compensada. 2014. 84 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) – Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-05-18T11:40:36Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_dbduarte.pdf: 12579403 bytes, checksum: 157535684c4db70f2b2ddce8fe923130 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-05-18T11:43:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_dbduarte.pdf: 12579403 bytes, checksum: 157535684c4db70f2b2ddce8fe923130 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-18T11:43:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_dbduarte.pdf: 12579403 bytes, checksum: 157535684c4db70f2b2ddce8fe923130 (MD5) Previous issue date: 2014 / Background - The glomerular involvementin schistosomiasis is well documented, especially in patients with hepatosplenic disease. The aim of this study is to investigate the occurrence of renal abnormalities among patients with HSS, especially tubular disorders. Methods - This is a cross-sectional study with 20 consecutive patients with HSSfollowed in a medical center in Maceió, Alagoas, Brazil. Urinary acidification and concentration tests were performed using calcium chloride (CaCl2) and DDAVP, respectively, and after a 12h period of water and food deprivation. The biomarker MCP-1 was quantified in urine. Fractional excretion of sodium (FENa+), fractional excretion of magnesium (FEMg++) and fractional excretion of potassium (FEK+), transtubular potassium gradient (TTKG) and solute free water reabsorption (TcH2O) were calculated by standard formulae. The HSS group was compared to a group of 17 healthy volunteers (control group). Results - Patient`s average age and gender were similar to controls. Urinary acidification deficit was found in 9 HSS patients (45%), who presented urinary pH > 5.5 after CaCl2 test. Urinary osmolality was significantly lower in HSS patients (588 ± 112 vs. 764 ± 165 mOsm/kg, P =0,001) after 12h period water deprivation. Urinary concentration deficit was found in 85% of HSS patients. The values of MCP-1 were higher in HSS group than control group (122 ± 134 vs. 40 ± 28 pg/mg-Cr, P = 0.01) and positively correlated with the values of microalbuminuria and proteinuria in the HSS group. TcH2O was lower in HSS patients (0.72 ± 0.5 vs. 1.1 ± 0.3, P = 0.04). Conclusions - HSS is associated with important kidney disorders. The main abnormalities found were urinary acidification and concentration defect, indicating the occurrence of tubular dysfunction. There was also an increase in urinary MCP-1, which appears to be a more sensitive marker of renal injury that microalbuminuria. / Introdução - O envolvimento glomerular na esquistossomose mansônica está bem documentado, sobretudo naqueles pacientes com a forma hepatoesplênica da doença. O objetivo deste estudo é investigar a ocorrência de alterações renais em pacientes com EHE, em especial, as alterações tubulares. Métodos - Foi realizado estudo transversal com 20 pacientes com EHE, acompanhados em um ambulatório de Maceió, Alagoas, Brasil. Testes de acidificação e concentração urinárias foram realizados usando cloreto de cálcio (CaCl2) e DDAVP, respectivamente, e após período de 12h de jejum e privação hídrica. Foi quantificado na urina o biomarcador MCP-1. Foram calculados fração de excreção de sódio (FENa), fração de excreção de potássio (FEK), fração de excreção de magnésio (FEMg), gradiente de transporte transtubular de potássio (TTKG) e transporte de água livre de solutos (TcH2O). O grupo de pacientes com EHE foi comparado com um grupo de 17 voluntários sadios (grupo-controle). Resultados - A média de idade e a distribuição de gênero foram similares entre os dois grupos. Défice de acidificação urinária foi encontrado em nove pacientes com EHE (45%), que apresentaram pH urinário > 5,5 após o teste com CaCl2. A osmolaridade urinária foi significativamente menor entre os pacientes com EHE (588 ± 112 vs. 764 ± 165 mOsm/kg, P = 0,001), após período de 12h de jejum e privação hídrica. Défice de concentração urinária foi encontrado em 85% dos casos de EHE. Os valores de MCP-1 foram mais elevados no grupo com EHE do que no grupo-controle (122 ± 134 vs. 40 ± 28 pg/mg-Cr, P = 0,01) e correlacionaram-se positivamente com os valores de microalbuminúria e proteinúria no grupo com EHE. Os valores de TcH2O foram menores nos pacientes com EHE (0,72 ± 0,5 vs. 1,1 ± 0,3, P =0,04). Conclusão - A EHE é associada a importantes alterações renais. As principais alterações encontradas foram défice de concentração e acidificação urinária, evidenciando a ocorrência da disfunção tubular. Houve também um aumento do MCP-1 urinário, que parece ser um marcador de lesão renal mais sensível do que a microalbuminúria.

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2016-04-29T14:21:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Nut_ Marlu Oliveira Costa de Rezende.pdf: 765988 bytes, checksum: 9ce1a749a205f00c9e5bacf231cfd8ff (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2016-05-04T14:44:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação_Nut_ Marlu Oliveira Costa de Rezende.pdf: 765988 bytes, checksum: 9ce1a749a205f00c9e5bacf231cfd8ff (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-04T14:44:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_Nut_ Marlu Oliveira Costa de Rezende.pdf: 765988 bytes, checksum: 9ce1a749a205f00c9e5bacf231cfd8ff (MD5) / CAPES / Fundamento: Marcadores laboratoriais de sobrecarga férrica e inflamação tais como: ferro, ferritina, transferrina, ácido úrico e proteína C reativa são essenciais para a completa avaliação e acompanhamento de Doenças Hepáticas Crônicas. Objetivo: Identificar diferenças nas variáveis socioeconômicas, nos marcadores bioquímicos de inflamação e de sobrecarga férrica entre pacientes com ou sem diagnóstico de Doença Alcoólica do Fígado (DAF). Métodos: Estudo transversal parte do projeto intitulado “Associação entre variáveis clínicas nutricionais e o maior risco para evolução da Doença Alcoólica do Fígado em indivíduos com alcoolismo”, realizado no Centro de Atendimento e Tratamento de Alcoolistas (CATA) com uma amostra de 38 pacientes que foram avaliados com questionário estruturado e análise bioquímica de marcadores de sobrecarga férrica e de infamação, de acordo com a presença ou ausência de DAF. Resultados: Alcoolistas com doença hepática apresentaram porcentagem maior (p<0,05) para dependência alcoólica grave, uso de outras drogas, e níveis de ferritina quando comparados com alcoolistas sem presença de doença hepática. Conclusão: As evidências apresentadas neste estudo demonstram alterações em variáveis socioeconômicas e em marcador de inflamação e sobrecarga férrica entre pacientes alcoolistas com e sem doença hepática. Entretanto, fazem-se necessários mais estudos que corroborem com estes achados.

Orientador : Nilce Correa Meirelles / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T04:08:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_MariaEleonoraFeracinda_M.pdf: 11412891 bytes, checksum: 69a8041bc4aae23eb63e9d7b723e9903 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Citocromos P450 formam uma superfamília de proteínas que metabolizam um grande número de substratos endógenos e xenobióticos. O metabolismo de xenobióticos pelo citocromo P450 é uma importante área da farmacologia molecular e da toxicologia que vem sendo usada nas últimas décadas como ferramenta de biomonitoramento contra os danos causados por poluentes. O objetivo deste trabalho foi estudar o sistema P450 (fase I da biotransformação), Glutationa-S-Transferase (GST - fase 11 da biotranformação) e enzimas antioxidantes (SOO, CATe GPx) no fígado de Curimbatá, um peixe brasileiro, frente à ação de três xenobióticos (Trifluoperazine, Triton X-100 e Tween 80), viabilizando o uso do citocromo P450 como biomarcador de poluição ambienta!. A caracterização espectral do sistema mostrou que Curimbatás têm um componente extra no sistema microssomal que se caracteriza por apresentar um máximo de absorção em 418-420nm e na presença de xenobióticos têm suas concentrações diminuídas sugerindo que seja uma hemeproteína de características espectrais semelhantes ao do P450. A purificação do citocromo P450 através de uma coluna de hidrofobicidade acoplada em HPLC se mostrou eficaz, mas não foi possível identificar as isoformas presentes no sistema. O método enzimático detectou apenas a presença da CYP1A. Todos os xenobióticos levaram à diminuição do conteúdo dos citocromos b5 e P450 dependente do tempo de incubação e da concentração do xenobiótico. As enzimas NAOPH citocromo P450 redutase e EROO (CYP1A) foram ativadas pela TFP e marcadamente inibidas pelo Triton X-100 e Tween 80, sugerindo que os xenobióticos interagem com os componentes da membrana microssomal. A TFP foi o único xenobiótico a ser parcialmente metabolizado e, além das alterações da membrana, também leva à inibição seletiva de algumas isoformas do P450, pois foi possível detectar a ativação da EROO (CYP1A). A causa desta inibição seria a interação de metabólitos da TFP com o citocromo P450. O Triton X-100 também destrói o P450 por alquilação do grupamento heme, sugerindo um efeito inibitório do surfactante ainda que na forma de monômeros. A GST foi induzida pelos três xenobióticos indicando a capacidade de Curimbatá em detoxificar tais compostos. A análise das enzimas antioxidantes e dos níveis de peroxidação lipídica mostraram que seu uso como ferramenta de bíomarcação deve ser sempre associado à atividade de outras enzimas. Portanto, embora o P450 seja um biomarcador em potencial, deve ser analisado conjuntamente com outras enzimas, pois os xenobióticos interagem diferentemente com cada componente do sistema levando à indução de algumas proteínas concomitantemente à inibição de outras / Abstract: Cytochromes P450 constitute a superfamily of hemeproteins that play a vital role in the metabolism of a wide variety of compounds such as steroids, fatty acids, drugs and environmental pollutants. Xenobiotic metabolism and role of cytochrome P450 are important areas of molecular pharmacology and toxicology, and of great interest mainly in the studies on prevention of the damage caused by chemical pollutants. In this work we investigated the interaction of Trifluoperazine, Triton X-100 and Tween 80 with cytochrome P450, phase I and 11 enzymes and antioxidants defenses in Curimbatá, a brazilian teleost fish. Spectral characterization indicated a possible presence of a hemeprotein, with similar characteristics of cytochrome P450, in liver of Curimbatá; a peak at 418-420nm ("P420") decreased in the presence of xenobiotics. Purification of cytochrome P450 had been succeded by HPLC on hydrophobic column (Il-Boundapak - C18). Only one isoform of P450 - CYP1A - could be detected in Curimbatá hepatic microsomes. EROD and NADPH cytochrome P450 redutase were strongly inhibited by Triton X-100 and Tween 80 in a time- and concentration-dependent way. Triton X-100 and Tween 80 inactivated the system by interacting with the membrane. In the case of Triton X-100, that cause the alkylation in the hememoiety, P450 inactivation occurred even in monomers. However these enzymes were activated by Trifluoperazine (TFP) suggesting that only TFP was being metabolized by P450 system and that its metabolites could interact with P450 and inativeted it. Glutathione-S-Transferase, a phase 11 enzyme, was activated by the xenobiotics, suggesting that Curimbatá could metabolize these compounds. Analyses of antioxidant enzymes activities, lipoperoxidation levels and P450 contents showed a non-significative correlation between antioxidant effects and P450 system. Our results suggested that P450 is a potential biomarker of xenobiotic exposure, but its use need to be associated with other enzymes because xenobiotics can distinctly interact with each component of the system leading to the activation of some enzymes and inhibition of others / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Luzia Koike / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:04:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Borin_JoaoEduardo_M.pdf: 3191490 bytes, checksum: 2a1fdbccf07ddbc7a9b40918628ea639 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Este trabalho compreende o estudo de três amostras de óleos: PCM1, PCM2 e PCM3, todas pertencentes ao Campo de Marlim localizado na Bacia de Campos no Rio de Janeiro, cujas geradoras são de origem lacustre salina. Esse estudo dos óleos foi realizado utilizando-se a técnica de Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrometria de Massas (GC/MS), incluindo padrões sintetizados no próprio laboratório, bem como padrões fornecidos pelo CENPES-Petrobrás. Os óleos estudados foram divididos em duas frações principais: a fração neutra (hidrocarbonetos) e a fração ácida (ácidos carboxílicos). Na fração neutra foram identificadas importantes classes de biomarcadores até então nunca estudadas nesses óleos como: esteranos monoarómaticos, alquil esteranos monoaromáticos e carotenóides. A fração ácida destas amostras de óleos também nunca tinha sido objeto de estudo, esta fração foi derivatizada a hidrocarbonetos e estes então foram analisados. As principais classes de biomarcadores ácidos identificados foram: n-alcanóicos, terpanóicos, alquil esteranóicos e alquil esteranóicos monoaromáticos. Uma outra etapa do trabalho correspondeu à síntese do 12-metil-18--norergosta-8, 11, 13, 22-tetraen- 3?-ol, um precursor de biomarcadores derivado do ergosterol, um intermediário chave para preparação de varias classes de biomarcadores inéditos / Abstract: This thesis presents the geochemical study of three oil samples: PCM1, PCM2 e PCM3, all pertaining to the Marlin Field located in the Campos Basin, Rio de Janeiro and were generated by saline lacustrine source rocks. The crude oils were studied by the gas chromatography coupled whith mass spectrometry (GC/MS technique), and standards were used in this research synthesized in our laboratory or supplied by CENPES-Petrobrás. The oils were separated into two main fractions, the neutral (hydrocarbon) and acidic fraction (carboxylic acids). In the neutral fraction important classes of biomarkers, which have not been studied, were identified in these oils such as monoaromatized steroids, monoaromatized alkyl steroids and carotenoids The acid fraction of these oil samples has not been studied. The acids were derivatized into hydrocarbons, and then analyzed. The classes of biomarkers identified were: n-alkanoic, terpanoic, alkil steranoic and alkil monoaromatic steranoic acids. One other stage of the work corresponded to the synthesis of 12-methyl-18--norergosta-8, 11, 13, 22-tetraen-3b-ol, which is a precursor of biomarkers derived from ergosterol, an intermediate for preparation of some classes of biomarkers / Mestrado / Mestre em Química

A esquistossomose é uma doença parasitária crônica causada por parasitos do gênero Schistosoma e apresenta um significativo impacto social e econômico. Atualmente, o praziquantel (PZQ) é o medicamento utilizado para o tratamento da doença, indicado pela Organização Mundial da Saúde. No entanto, a dependência de um único fármaco é preocupante, pois com reinfecções constantes e repetição de tratamento pode ocorrer a seleção de cepas resistentes. Sendo assim, a busca por novas substâncias com atividade esquistossomicida é essencial. O gênero Senna é alvo de muitos estudos devido ao reconhecimento de sua grande diversidade biológica e propriedades farmacológicas. No presente trabalho foi avaliada a atividade esquistossomicida in vitro do extrato etanólico (EEt), frações do extrato (FAE e FDm), e de alcaloides majoritários obtidos das flores de Senna spectabilis. Dos alcaloides piperidínicos também foi avaliada a atividade cercaricida e seu efeito em interação com PZQ. Os vermes adultos de S. mansoni foram expostos a diferentes concentrações do EEt, FAE e FDm, e mistura de substância cassina/ espectalina para avaliação de viabilidade dos parasitos e cálculo de concentração inibitória de 50%. Foi avaliada a atividade excretora e lesões de tegumento dos vermes adultos de S. mansoni expostos à mistura de alcaloides cassina/espectalina por meio de marcação com sondas fluorescentes. A viabilidade celular foi avaliada utilizando células mononucleares do sangue periférico humano (PBMC) por ensaio de redução de MTT. O extrato etanólico e a fração acetato de etila de S. spectabilis, em concentrações elevadas provocam diminuição da ovoposição, paralisação de sistema excretor e lesões de tegumento. A fração diclorometano exerce atividade significativa quando comparada ao controle, visto que tal atividade é resultado da maior concentração de alcaloides nesta fração. A mistura (cassina/ espectalina) causou paralisia total dos vermes adultos de S. mansoni além de inibir a atividade excretora e provocar lesões de tegumento consideráveis no parasito na concentração de 50,0 µg/mL. Em relação à atividade cercaricida, os alcaloides supracitados provocaram paralisação e perda de cauda a partir da concentração de 50,0 µg/mL, e exibiram resultados relevantes em sinergismo com PZQ. A mistura de alcaloides também exibiu baixo valor de DL50 34,7 µg/mL; e apresentou potencial citotóxico moderado CC50 132,1 µg/mL. Estes resultados são promissores quanto à atividade esquistossomicida, portanto requerem estudos mais aprofundados. / Schistosomiasis is a chronic parasitic disease caused by parasites of the genus Schistosoma and presents a significant social and economic impact. Currently, praziquantel (PZQ) is the drug used for the treatment of the disease, indicated by the World Health Organization. However, the dependence on a single drug is concerning, since with constant reinfections and retreatment the emergence of resistant strains can occur. Therefore, the search for new compounds with schistosomicidal activity is essential. The genus Senna is the subject of many studies due to the recognition of its great biological diversity and pharmacological properties. In the present study, in vitro schistosomicidal activity was evaluated of the ethanolic extract, fractions from the extract and majoritarian alkaloids obtained from Senna spectabilis flowers. From the last two compounds, the cercaricidal activity and its effect in interaction with PZQ were also evaluated. The adult worms of S. mansoni were exposed to different concentrations of ethanolic extract (EEt), ethyl acetate (FAE) and dichloromethane (FDm) fractions, and mixtures of compounds cassina/espectalina for the assessment of parasites viability and calculation of the inhibitory concentration of 50%. The excretory activity and tegument lesions of adult worms of S. mansoni exposed to the mixture of alkaloids cassina/espectalina were evaluated through staining with fluorescent probes. Cell viability was assessed using human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) by MTT reduction assay. The (EEt) and (FAE) of S. spectabilis, in high concentrations, cause decrease in oviposition, excretory system shutdown and tegument lesions. FDm fraction has significant activity when compared to the control, as this activity is result of higher concentration of alkaloids in this fraction. The mixture (cassina/espectalina) caused complete paralysis of adult worms of S. mansoni, in addition to inhibit the excretory activity and lead to considerable tegument lesions in the concentration of 50.0µg/mL. Regarding cercaricidal activity, the above-mentioned alkaloids caused paralysis and tail loss starting at a concentration of 50.0 µg/mL, and relevant results were obtained in the synergism with PZQ. The alkaloids mixture also showed low DL50 value 34.7µg/mL; and presented potential moderate cytotoxic CC50 132.1µg/mL. These results are promising regarding the schistosomicidal activity, therefore require further study. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Avaliou-se a influência da exposição ao flúor (F) através da água de beber, da velocidade de crescimento das unhas, da idade e do gênero na concentração deste elemento nas unhas das mãos e dos pés. Em adição, verificou-se a correlação entre as concentrações de F na saliva total, saliva do ducto da parótida e unhas das mãos e dos pés. Participaram do estudo 300 indivíduos, das faixas etárias de 3-7,14-20, 30-40 e 50-60 anos, residentes de cinco comunidades brasileiras, sendo duas no Estado de São Paulo (Pirajuí e Bauru, com água não fluoretada e 0,7 mgF/L na água de abastecimento, respectivamente) e três no Estado da Paraíba (Cajazeirinhas, Brejo dos Santos e Brejo das Freiras, com 0,2, 0,7 e 1,7 mgF/L na água de consumo, respectivamente). Foram coletadas duas ou três (apenas em Bauru) amostras de água de beber, além de duas amostras de: unhas dos pés, unhas das mãos, saliva total e saliva do ducto da parótida de cada indivíduo. O F nas amostras foi analisado com eletrodo íon-específico. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente através de análise de variância e regressão linear (p<0,05). A exposição ao F através da água de beber, a velocidade de crescimento das unhas, a idade e o gênero influenciaram a concentração de F nas unhas das mãos e dos pés, sendo que o fator de exposição ao F através da água foi o que exerceu maior influência pelo modelo de regressão linear adotado. As unhas dos pés (R2=0,46) se mostraram melhores indicadoras de exposição ao F do que as das mãos (R2=0,24). Foi encontrada uma correlação negativa significativa entre velocidade de crescimento das unhas e concentração de F nas mesmas. Houve correlação positiva significativa entre concentração de F nas unhas das mãos e dos pés com: saliva total (r=0,36 e r=0,41) e saliva do ducto da parótida (r=0,25 e r=0,53), respectivamente. Também se observou correlação positiva entre saliva total e do ducto da parótida (r=0,24), bem como entre concentração de F na água e saliva total (r=0,41) e saliva do ducto (r=0,65). Todos os fatores testados influenciaram os níveis de F nas unhas e, portanto, devem ser levados em consideração quando se utiliza este marcador biológico. / The influence of fluoride (F) concentration in the drinking water, nails growth rate, age and gender upon the F content in fingernail and toenail were evaluated. In addition, the correlations among the F concentrations in whole saliva, parotid ductal saliva and finger/toenails were verified. Three hundred volunteers of 3-7, 14-20, 30-40, 50-60 years participated. They were residents of five Brazilian communities, two in Sao Paulo State (Pirajuí and Bauru, non-fluoridated and 0.7 mgF/L artificially fluoridated drinking water, respectively) and three in Paraiba State (Cajazeirinhas, Brejo dos Santos and Brejo das Freiras, 0.2, 0.7 and 1.73 mgF/L naturally fluoridated drinking water, respectively). Two or three samples of drinking water, and two samples of fingernails, toenails, whole saliva and ductal saliva were collected from each volunteer, with one-week interval period between the collections. F in water, whole saliva, ductal saliva and nails was determined using the ion-sensitive electrode. Data were analyzed by ANOVA and linear regression (p<0.05). The F exposure from the drinking water, nails growth rate, age and gender influenced the levels of F in fingernails and toenails. Considering the model of multivariate linear regression adopted, F exposure from the water influenced the most. Toenails (R2=0.46) seemed to be better indicators of F than fingernails (R2=0.24). It was found a significant negative correlation between nails growth rate and their content of F. Positive correlations were found between F concentration in fingernails and toenails and: F concentration in whole saliva (r=0.36 and r=0.41) and in parotid ductal saliva (r=0.25 and r=0.53), respectively. Moreover, it was observed a positive correlation between whole and parotid saliva (r=0.24), as well as between F concentration in the drinking water and whole (r=0.41) and parotid saliva (r=0.65). All factors that influenced nails F concentration must be taken into account when using them as biological markers.

Orientadores: Sophie Françoise Mauricette Derchain, Luis Otávio Zanatta Sarian / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-11-07T13:25:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moraes_DenisedaRochaPittaLimade_D.pdf: 1846599 bytes, checksum: 5c83c44db1103b63041e2ceb928d48d4 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Objetivo: Avaliar a acurácia da mesotelina, CA125, HE4 e índice ROMA na diferenciação de mulheres brasileiras com tumores malignos de ovário daquelas com tumores benignos e ou mulheres saudáveis, e avaliar se os sintomas específicos relatados pelas mulheres podem ser usados em associação à expressão desses marcadores séricos, na diferenciação pré-operatória de neoplasia maligna de ovário. Sujeitos e Métodos: Neste estudo de corte transversal foram incluídas 199 mulheres com massa anexial (67 com tumores malignos e 132 com tumores benignos) e 150 mulheres saudáveis. Todas as mulheres com massa anexial, atendidas no hospital do Departamento de Obstetrícia e Ginecologia da Faculdade de Medicina da UNICAMP, foram convidadas a participar do estudo. Um grupo-controle, de mulheres saudáveis atendidas nos ambulatórios de menopausa e planejamento familiar no mesmo hospital, foi selecionado. Após uma explicação sobre os métodos e objetivo da pesquisa, todas as mulheres responderam o questionário com relação aos sintomas específicos. Foram coletados dados sobre a idade e índice de massa corpórea e sangue periférico para quantificação da mesotelina, o CA125 e a HE4. Foi usado o algoritmo de particionamento recursivo baseado no modelo de regressão linear para verificar a contribuição da idade e de cada marcador sérico no diagnóstico de tumores malignos. Foram comparadas as áreas sob as curvas (AUCs) obtidas através das curvas ROC (Receiver Operator Characteristics) de cada marcador sérico e índice ROMA, para diferenciar mulheres com tumores malignos. Foi calculada a proporção de mulheres com cada um dos 22 sintomas específicos nos grupos com tumores malignos de ovário, tumores benignos e mulheres saudáveis. O sintoma foi considerado positivo quando ocorria mais que 12 vezes ao mês e por até um ano. A proporção de sintomas foi comparada utilizando teste de qui-quadrado ou teste exato de Fischer, quando apropriado. Os 16 sintomas específicos aplicáveis a toda a coorte e para o qual a periodicidade foi verificada foram submetidos à análise pelo Método de Ward para agrupamento hierárquico. Os agrupamentos de sintomas e sintomas isolados identificados foram: abdômen (abdômen inchado e/ou aumento do volume abdominal); dor (dor pélvica, costas e/ou abdominal); pernas inchadas; digestão (estômago cheio e/ou náusea /vômito); alimentação (dificuldade para comer e/ou empachada); sente alguma massa abdominal; diversos (fadiga e/ou dificuldade para respirar); bexiga (urgência em urinar e/ou urinar frequentemente). Foi avaliada a proporção de mulheres com cada agrupamento de sintomas ou sintomas isolados em mulheres com tumores malignos, tumores benignos e saudáveis, através do teste qui-quadrado para tendências. Utilizou-se um algoritmo de particionamento recursivo para verificar a contribuição da idade da mulher, de cada agrupamento de sintomas ou sintomas isolados, estado menopausal, perda de peso e marcadores séricos no diagnóstico de tumores malignos. Resultados: O CA125 foi o marcador sérico com maior capacidade para discriminar mulheres com tumores malignos (p<0,001). Entre as mulheres com tumores benignos e CA125 positivo, a HE4 foi positiva em apenas um caso e a mesotelina foi positiva em outro. Em mulheres com CA125 negativo, a idade, a mesotelina e a HE4 não contribuíram para a diferenciação entre mulheres com tumores malignos, tumores benignos e saudáveis. Em contrapartida, em mulheres com CA125 positivo, a HE4 contribuiu significantemente para detecção de mulheres com tumores malignos (p<0,01). A AUC da mesotelina foi menor que das AUC dos outros marcadores. O ROMA e o CA125 apresentarm melhores AUCs do que o HE4. A proporção de mulheres com cada um dos agrupamentos de sintomas ou sintomas isolados foi significativamente maior em mulheres com tumores malignos, quando comparadas àquelas com tumores benignos e, destas, comparadas com as mulheres saudáveis (p tendência em todas as comparações <0,01). Após a análise multivarida, as associações mais significativas para detecção de tumores malignos de ovário foram as do agrupamento abdômen (p<0,001), expressão do CA125 (p<0,001), agrupamento dor (p=0,01) e perda de peso (p=0,03). Conclusões: Em mulheres com CA125 negativo, a mesotelina e HE4 não contribuíram para detecção do carcinoma de ovário. Entretanto, em mulheres com CA125 positivo, a HE4 contribuiu para diferenciar aquelas com tumores malignos. Em mulheres com tumores malignos de ovário, os sintomas específicos, abdômen e dor foram significantemente mais frequentes. Podem ser utilizados em associação ao CA125 na diferenciação de tumores malignos em mulheres com massa anexial / Abstract: Objective: To evaluate the accuracy of mesothelin, CA125, HE4 and ROMA index in the differentiation of Brazilian women with ovarian malignant tumors from those with benign tumors or healthy women; and to evaluate whether the prevalence of specific self-reported symptoms can be used in association to the expression of serum markers for the preoperative differentiation of ovarian malignant tumors. Study Design: For this cross sectional study, 199 women with adnexal mass (67 with malignant tumors and 132 with benign tumors) and 150 healthy women were included. All women with adnexal masses, attending the hospital of the Department of Obstetrics and Gynecology of the Unicamp School of Medicine were invited to participate in the study. A control group of healthy women attending menopause and family planning clinics at the same hospital were selected. After an explanation about the study research methods and purpose all women answered a survey regarding specific symptoms. There were also collected data on age and body mass index. Peripheral blood was collected for serum measurements of mesotelina, CA125 and HE4. A recursive partitioning algorithm, based on a linear regression model was used to confirm the contribution of age and each of the serum markers to the diagnosis of malignant tumors. Comparison of Area Under the Curve (AUC) obtained through Receiver Operator Characteristics (ROC) curves for each of the serum markers and ROMA index were used to differentiating women with malignant tumors. We next calculated the proportion of women with each of the 22 specific symptoms in the groups of women with ovarian malignant tumors, benign tumors and healthy women. We considered a symptom positive if it occurred more than 12 times per month and for less than one year. The proportions were pairwise compared using chi-square or the Fisher exact test where appropriate. The 16 specific symptoms which applied to the entire cohort and for which the periodicity had been ascertained were further subjected to the Ward's Hierarchical Clustering Method. Clusters of symptoms and isolated symptoms were: abdomen (abdominal bloating and/or increased abdomen size); pain (pelvic, back and/or abdominal pain); leg swelling; digestion (indigestion and/or nauseas /vomiting); eating (unable to eat normally and/or feeling full quickly); able to feel abdominal mass; miscellaneous (fatigue and/or difficulty breathing); bladder (urinary urgency and/or frequent urination). We evaluated the trend in proportion of women with each cluster of symptoms in the groups of women with malignant tumors, benign tumors and healthy women using the chi-squared test for trend in proportions. Another recursive partitioning algorithm was used to confirm the contribution of patient age, clusters of symptoms, menopausal status, weight loss and the serum markers to the diagnosis of malignant tumors Results: CA125 was the serum marker that had the greatest capacity to discriminate women with malignant tumors (p<0.001). Among the women with benign tumors and positive CA125, HE4 was positive in only one case and mesothelin in another case. In women with negative CA125 neither age nor mesothelin nor HE4 contributed any further to the differentiation between women with malignant, tumors benign tumors and healthy women. In contrast, for women with positive CA125, HE4 contributed significantly to the detection of women with malignant tumors (p<0.01). The AUC for mesothelin was smaller than that for all the other curves, and ROMA and CA125 had better AUC than HE4. The proportion of women with each of the clusters of symptoms and isolated symptoms decreased significantly from the group of women with malignant tumors to that with benign tumors and from this group to the healthy women (p for trends in all comparisons= <0.01). After a multivariate analysis the association that contributed the most to the detection of malignant ovarian tumors was that of the abdomen cluster (p<0.001), CA125 expression (p<0.001), pain cluster (p=0.01) and weight loss (p=0.03). Conclusion: In women with negative CA125 neither mesothelin nor HE4 contributed to detect ovarian carcinoma. HE4 was helpful to differentiate malignant tumors when CA125 is positive. Specific symptoms, abdomen and pain were significantly higher in women with malignant ovarian tumors and may be used along with the CA125 to select women with ovarian malignancy among those with adnexal masses / Doutorado / Oncologia Ginecológica e Mamária / Doutora em Ciências da Saúde

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:03:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000396198-Texto+Completo-0.pdf: 1234420 bytes, checksum: 2569dfc6da636a910e7080bcc69999f5 (MD5) Previous issue date: 2007 / Background: Gastrointestinal stromal tumors are the most common mesenchymal tumors of the gastrointestinal tract. The well-described prognostic factors are tumor size, digestive tract localization and mitotic index. Survivin is an apoptosis inhibitor involved in cell cycle regulation normally expressed in the nucleus of embryogenic and pluripotent stem cells, but is usually absent in normal tissues. Survivin is aberrantly expressed in epithelial neoplasms. The expression profile of survivin in GIST is unknown. Methods: Tissue samples of 43 gastrointestinal stromal tumors specimens were analyzed by immunohistochemistry using TMA method and monoclonal antibodies for survivin with the avidin-biotin-peroxidades technique. The purpose was to determine the prevalence of survivin expression and to define its association with clinical and pathologic features and the clinical outcome. Expression of survivin was considered positive when more than 10% of observed tumor cells in the microscopic field demostrated immunostaining. Results:Survivin was expressed in 31 ( 72%) of 43 samples. Immunostaining ocurred in cytoplasm and no nuclear expression was seen. The correlation between survivin expression and clinical or pathologic features was not demonstrated. There is a trend in favor of survivin expression and time to progression in our data. Conclusions: The prevalence of survivin in GIST is similar to others studies previously related. The results of present study suggest that the apoptosis inhibition mediated by survivin has the potential to become an independent prognostic factor in GIST. / Base Teórica:Os GIST são as neoplasias mesenquimais mais freqüentes do trato gastrointestinal. Os fatores de prognóstico relevantes dos GIST são: o tamanho do tumor, topografia e índice mitótico. Survivina é uma proteína inibidora da apoptose envolvida na regulação do ciclo celular, normalmente expressa no núcleo de células pluripotenciais e geralmente inexistente em tecido normais. Survivina possui alta expressividade em neoplasias epiteliais. A expressão de survivina em GIST é desconhecida. Métodos: Amostras teciduais de 43 GIST foram analisadas através de estudo imunoistoquímico com método TMA e utilizando anticorpo monoclonal para survivina com a técnica de avidina-biotina-peroxidase. O objetivo primário foi determinar a prevalência da expressão de survivina nos GIST e definir sua associação com achados patológicos e evolução clínica. A expressão de survivina foi considerada positiva quando mais de 10% das células tumorais observadas em cinco campos de grande aumento apresentavam imunoreatividade. Resultados: Survivina foi expressa em 31 (72%) das 43 amostras. A predominância da expressão ocorreu no citoplasma enquanto que nenhuma reatividade nuclear foi encontrada. Não houve associação entre a expressão de survivina e achados clínico-patológicos. Houve uma tendência em favor da expressão de survivina e diminuição para tempo para progressão. Conclusões:A prevalência de survivina em GIST é semelhante ao anteriormente demonstrado em neoplasias epiteliais e mesenquimais. Os resultados do presente estudo sugerem que a inibição da apoptose mediada por survivina pode se tornar um fator de prognóstico em GIST.