Orientador: José Jurandir Fagliari / Coorientador: Ana Maria Centola Vidal Martins / Banca: Luiz Paulo Martins Filho / Banca: Raimundo Souza Lopes / Banca: Luiz Francisco Zafalon / Banca: Annelise Carla Camplesi dos Santos / Resumo: Proteínas de fase aguda (PFA) são indicadores sensíveis e precoces de focos inflamatórios. No entanto, as informações disponíveis na literatura em relação à espécie caprina são escassas. Assim, o objetivo deste estudo foi determinar o leucograma e o perfil bioquímico sérico, em especial de PFA, de cabras com mastite induzida por Staphylococcus aureus (Grupo I) e Streptococcus agalactiae (Grupo II), a fim de verificar sua importância como biomarcadores precoces da infecção mamária nesta espécie. O GI foi composto por cinco cabras da raça Saanen, inoculadas por via intramamária com cerca de 9,5 x 109 unidades formadoras de colônia (UFC) de S. aureus e o GII composto por cinco cabras da raça Alpina Francesa inoculadas com aproximadamente 4,4 x 1011 UFC de S. agalactiae. O momento experimental imediatamente anterior à inoculação foi denominado M0 e os seguintes identificados como M1, M2, M3, M4, M5, M6 e M7, nos quais eram realizadas colheitas de sangue e leite. Com as amostras de sangue foram obtidos o leucograma, mensuração da concentração plasmática de fibrinogênio, determinação do teor sérico de aspartato aminotransferase, fosfatase alcalina, gamaglutamiltransferase e creatina quinase, além das concentrações séricas de proteína total, albumina, ureia, creatinina, cálcio total, fósforo, magnésio e ferro, utilizando-se kits comerciais. As concentrações séricas de transferrina, ceruloplasmina, haptoglobina e α1-glicoproteína ácida foram obtidas por meio da técnica de eletroforese SDS-Page. Com as amostras de leite foi realizado acompanhamento da evolução da mastite por meio dos testes da caneca de fundo escuro, California Mastitis Test (CMT) e análises microbiológicas. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias ao teste de Dunnet, considerando-se 95% de significância (p<0,05). Notou-se que o modelo de infecção experimental desenvolvido para a indução de mastite ... / Abstract: Acute phase proteins (APP) are sensitive and early indicators of inflammation. However, information regarding goats APP are scarce in the literature. So the aim of this study was to determine the leukocyte count and serum biochemical profile, in particular APP, in goats with induced Staphylococcus aureus (Group I) and Streptococcus agalactiae (Group II) mastitis in order to verify its importance as early biomarkers of mammary infection in these species. GI was composed of five Saanen goats inoculated through the teat canal with about 9.5 x 109 colony forming units (CFU) of S. aureus and GII consisted of five French Alpine goats inoculated with approximately 4.4 x 1011 CFU of S. agalactiae. The experimental moment immediately prior to inoculation was designated M0 and the following identified as M1, M2, M3, M4, M5, M6 and M7 when blood and milk samples were obtained. Leucocyte count and measurement of plasma fibrinogen concentration, serum levels of aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, gamma glutamyl transferase, creatine kinase, total protein, albumin, urea, creatinine, total calcium, phosphorus, magnesium and iron, were determined with blood samples, using commercial kits. Serum transferrin, ceruloplasmin, haptoglobin and α1-acid glycoprotein were obtained by the SDS-Page Electrophoresis technique. Milk samples were used to monitor the development of clinical mastitis through the strip cup test, California Mastitis Test (CMT) and microbiological analyzes. Data were subjected to analysis of variance and the means to Dunnet test, considering a 95% significance level (p < 0.05). It was noted that the experimental infection model developed for the induction of clinical mastitis in goats was effective in both groups. Leucocyte count and serum biochemical profile, with the exception of APP, were unreliable laboratory tests to aid in the diagnosis or monitoring of experimental mastitis in goats, whether induced by S. aureus or ... / Doutor

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Banca: Maria Angélica Dias / Banca: Marcia Ferreira da Rosa Sobreira / Resumo: Tendo em vista a alta incidência das neoplasias mamárias e metástases em cadelas e objetivando contribuir com a oncologia veterinária na padronização de um teste simples, eficaz e acessível no diagnóstico precoce destas metástases, esse estudo teve como meta avaliar o marcador tumoral CA 15.3 no soro de cadelas saudáveis e investigar a viabilidade da quimioluminescência e do kit de reagentes desenvolvido para a espécie humana como ferramenta neste processo. Numa primeira etapa avaliou-se o soro de 100 cadelas saudáveis, de raças e idades variadas. Numa segunda etapa o soro de 10 cadelas saudáveis foi submetido ao processo de concentração de proteínas e posteriormente avaliado. Nas amostras não concentradas os níveis do marcador ficaram abaixo do limiar de detecção do kit. Nas amostras concentradas, o valor médio e respectivo desvio padrão observados foram 0,4140 ± 0,25 U/mL nas amostras com o dobro da concentração inicial e 0,5170 ± 0,25 U/mL nas amostras quatro vezes mais concentradas. Com base nos resultados obtidos neste estudo concluiu-se que o método empregado, ensaio imunoluminométrico por quimioluminescência e o kit de reagentes desenvolvido para a detecção do CA 15.3 na espécie humana mostram-se viáveis para utilização na espécie canina, necessitando entretanto de adequação da técnica / Abstract: Given the high incidence of mammary tumors and metastases in female dogs and trying to contribute with the veterinary oncology in standardization of a simple, effective and affordable technique in the early diagnosis of these metastases, this study was aimed to evaluate the tumor marker CA 15.3 in serum of healthy dogs and to investigate the feasibility and the chemiluminescence reagent kit designed for the human species as a tool in this process. In a first step we evaluated the serum of 100 healthy female dogs of different breeds and ages. In a second step, the serum of 10 healthy female dogs was subjected to the process of proteins concentration and subsequently evaluated. In samples not concentrated, the levels were below the detection of the kit. In concentrated samples, the average value and its standard deviation observed were 0.4140 ± 0.25 U/mL in the samples with at double the initial concentration, and 0.5170 ± 0.25 U/mL in samples four times more concentrated. Based on the results of this study it is concluded that the method employed, chemiluminescent immunoluminometric assay, and the reagents kit designed for detection of the CA 15.3 in humans appear to be viable for use in dogs, however requiring adjustment of the technique / Mestre

Orientador: Sérgio Luis Felisbino / Coorientador: Flávia Karina Delella / Banca: Luis Fernando Barbisan / Banca: Renée Laufer Amorin / Resumo: A próstata é uma glândula associada ao sistema reprodutor que, tanto para seu desenvolvimento quanto para a sua manutenção no adulto, necessita de níveis constantes de andrógenos circulantes. A manutenção e a fisiologia dessa glândula dependem de uma complexa interação entre os compartimentos epitelial e estromal. No organismo masculino, a próstata permanece num crescimento lento até a puberdade, etapa em que ocorre considerável aumento da produção de andrógenos, com consequente crescimento e maturação desta glândula. O contato com fatores exógenos durante a puberdade, tais como a exposição ambiental ao cádmio ativa ou passiva pela fumaça do cigarro, associada à ingestão de bebidas energéticas, as quais contêm relativamente alta concentração de cafeína, podem favorecer o surgimento de lesões prostáticas proliferativas na fase adulta. No Brasil, o câncer de próstata é o segundo mais comum e, no mundo, o mais incidente entre os homens. O avanço nas técnicas de detecção de lesões prostáticas benignas, pré-malignas e malignas favorecem o diagnóstico precoce dessas lesões e a sobrevida dos pacientes. Este projeto teve por objetivo avaliar os efeitos isolados e combinados do cádmio (15ppm) e da cafeína (20ppm) sobre os lobos prostáticos ventral e dorsal do rato Wistar a partir da quinta semana até a 25ª semana de idade pós-natal e o desenvolvimento de lesões proliferativas. Para isso foram empregadas análises citoquímicas, imuno-hitoquímicas (Bcl-2, p-53, Cox-2, Ki-67, AR, GSTP-1, β- catenina e AMACRacemase) e bioquímicas de western bloting (GSTP-1, β-catenina, PCNA, PAR-4, AMACRacemase e beta-actina). Os resultados sobre os efeitos da cafeína isoladamente sobre a próstata mostraram que este composto aumenta os níveis plasmáticos de testosterona e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Prostate is acessory gland of male reproductive system, in which is dependent of constant levels of androgen for correct development, growth and maintenance. Besides androgen, prostate normal physiology depends on complex interaction between epithelial and stromal compartiments via growth factors. In the humans, after birth, the prostate gland exhibits a low rate of growth until puberty, when a new pick of androgens star to induce a remarckable growth of gland. Puberty can be considered a critical window which exogenous factors, such as environemental exposure to carcinogenous as cadmium ando or dietary factors as caffeine intake, may act as risk factors to develop prostate proliferative lesions in adulthood. In Brazil, prostate cancer is the second most common and word's most incident câncer in male. Advances in diagnostic techniques favor the early detection of prostate lesions increasing the patien's life span. In this sense, the aim of this project was to investigate the isolated or combined effects of cadmium (15 ppm) and caffeine (20 ppm) on ventral and dorsal rat prostatic lobe frin fifth to twenty fifth weeks of post-natal age ando n development of prostatic proliferative lesions. For this, prostatic lobes were submitted to histophatological, immuhistochemical and biochemical analysis of proteins and enzymes relatated to prostate cells normal and anormal physiology, such as Bcl-2, p53, Cox-2, Ki-67, AR, GSTP-1, β- catenin e AMACRacemase). The results about caffeine isolated on prostate gland showed that this component increases the plasma levels of testosterone and dihydrotestosterone, ventral prostate absolute and relative weight, proliferation index and androgen receptor tissue expression, while dorsal lobe exhibited no such alterations. Furthermore the prostates from caffeine... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Noeme Sousa Rocha / Coorientador: Antonio Francisco Godinho / Banca: Júlio Lopes Sequeira / Banca: Simone Biagio Chiacchio / Banca: Cláudia Turra Pimpão / Banca: Rosa Maria Barilli / Resumo: O presente estudo teve o objetivo de avaliar os efeitos toxicológicos em ratos Wistar expostos ao fipronil no período perinatal. Os animais utilizados foram adquiridos do Biotério Central da UNESP, campus de Botucatu e os testes foram realizados em seus descendentes. Foi avaliado o desenvolvimento físico e sensório-motor e aplicados testes de comportamento, como a Arena de Campo aberto, para avaliar atividade geral; o Labirinto em Cruz Elevado, para avaliação do comportamento de ansiedade; o Hole-Board, para coordenação motora; os testes Reconhecimento de Novo Objeto e Labirinto Octogonal, para avaliar memória cognitiva e espacial, respectivamente; e o teste de agressividade, de acordo com o paradigma do animal residente/intruso. Por espectrofotometria, foram dosados os níveis de Acetilcolinesterase, de Cortisol, de Alanina Aminotransferase e de Aspartato Aminotransferase, e quantificado, através de análise cromatográfica, o fipronil e seus metabólitos nos cérebros dos ratos. Fragmentos dos órgãos cérebro e fígado foram coletados e avaliados por técnica de histopatologia. De acordo com os resultados obtidos, o fipronil alterou o desenvolvimento físico, aumentou a ansiedade e agressividade, prejudicou a memória e a coordenação motora, induziu aumento na atividade da enzima acetilcolinesterase, causou alterações histopatológicas no cérebro e fígado dos animais. O fipronil é considerado tóxico para o sistema nevoso central e fígado de ratos, jovens e adultos, expostos ao praguicida no período perinatal / Abstract: This study aimed to evaluate the toxicological effects in rats Wistar exposed to fipronil in the perinatal period. The animals used were acquired from the Biotério Central of UNESP, Botucatu and the tests were performed on their offspring. Were evaluated the physical and sensory-motor development and applied behavioral tests, such as the Open Field test, to assess general activity; the Plus Maze Elevated to assess the anxiety behavior; Hole-Board for motor coordination; tests Recognition New Object and Octagonal Labyrinth, to assess cognitive and spatial memory, respectively; and Aggressivity test, according to the resident/intruder animal paradigm. Were measured levels of Acetylcholinesterase, Cortisol, Alanine aminotransferase and Aspartate aminotransferase by spectrophotometry, and quantified fipronil and metabolites in the brains of rats, by chromatographic analysis. Fragments of organs as brain and liver were collected and evaluated by histopathology technique. According to the results, fipronil alter the physical development, increased anxiety and aggression, impaired memory and motor coordination, induced increase in the Acetylcholinesterase activity, caused histological changes in the brain and liver of these animals. Fipronil is considered toxic to the central nervous system and liver of rats, young and adults, exposed to pesticide in the perinatal period / Doutor

Orientador: Débora Cristina Damasceno / Coorientador: Tiago Rodrigues / Banca: Estela Bevilacqua / Banca: Kleber Eduardo Campos / Banca: Ana Lucia dos Anjos / Banca: Mariana Gobbo Braz / Resumo: Não disponível / Abstract: The purpose of this study was to investigate hypoxia and oxidative stress markers in the blood and liver of diabetic rats and their offspring. Mild diabetes (D) was induced in the newborn rats using streptozotocin-STZ. Non-diabetic newborns (control-C) received the buffer. The newborn were distributed randomly into groups according to their euthanasia (5, 15, 30, 60, or 90 days of life). Female rats (C and D groups) were weighed and lethally anesthetized to obtain blood samples for measurement glucose and insulin levels, and evaluate oxidative stress markers (SOD, catalase, MDA, GSH-Px, and thiol groups) in washed erythrocytes and in the liver. A group of C and D adult rats were mated, and at term pregnancy washed erythrocytes and liver were sampled from the dams and their fetuses to evaluate the same markers before pregnancy. Another group of dams was also assembled to obtain offspring (Days 5 and Day 15 of life) to study same markers. The HIF-1α and PGC-1 gene and protein expression was analyzed in all experimental groups. There was higher glycemia on Days 5, 30, 90 in the life and pregnancy and lower insulin levels on Day 15, 60 and 90 of the diabetic dams. The 5 days old-diabetic rats presented increased SOD, GSH-Px and thiol in washed erythrocytes, and increased MDA concentration in the liver, while at term pregnant animals showed higher MDA concentration, and decreased SOD and catalase activities. The 15 days old offspring from diabetic dams presented higher insulin levels and antioxidant enzymes. These results suggest that glycemic alterations at different moments in the life of rats stimulate an antioxidant defense system in these rats and in their offspring in the first days of life / Doutor

Orientador: Danísio Prado Munari / Coorientador: Mônica Corrêa Ledur / Coorientador: Lenira El Faro / Banca: João Ademir de Oliveira / Banca: Jane de Oliveira Peixoto / Banca: Fernando Sebastian Baldi Rey / Banca: Claudia Cristina Paro de Paz / Resumo: Em linhagens de frangos de corte, pesquisas têm sido realizadas para identificar marcadores moleculares responsáveis pela variação fenotípica de características de interesse econômico para auxiliar os procedimentos de seleção. Neste trabalho, o objetivo foi estudar a associação do gene ALFA ACTINA1 com 68 características de desempenho, carcaça e órgãos e estimar parâmetros genéticos para peso corporal aos 42 dias de idade (PV42), órgãos e partes da carcaça para fornecer subsídios ao programa de melhoramento genético de uma linhagem paterna de frangos de corte, selecionada principalmente para PV42. Os dados utilizados foram provenientes da Embrapa Suínos e Aves, Concórdia, SC. As análises de associação genética entre as características estudadas e a ALFA ACTINA1 foram conduzidas pelo método de máxima verossimilhança, considerando quatro modelos de análise. A análise de validação foi realizada por meio de um modelo misto que incluiu o efeito aleatório de animal (poligenes), os efeitos fixos de sexo (2 níveis), incubação (5 níveis) e do SNP (3 níveis), além do erro aleatório. A estimação de parâmetros genéticos foi realizada pelo método da máxima verossimilhança restrita, sob modelo animal multicaracterística para PV42 com características que foram significativamente (p<0,05) associadas com o marcador molecular e com um segundo conjunto de dados que incluiu pesos de carcaça resfriada, de fígado, de coração, de moela e os pesos da asa, das carnes da coxa, da sobrecoxa e do peito, peso do dorso e do filé do peito. O modelo geral utilizado para estimar os parâmetros genéticos incluiu o efeito fixo de grupo incubação-sexo e efeitos aleatórios aditivo e residual. Efeitos aditivos verificados pela substituição alélica do gene ALFA ACTINA1 estão associados com rendimentos da carne do peito (RCPT), do... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In broilers strains, research has been conducted to identify molecular markers responsible for phenotypic variation in traits of economic interest to help the selection procedures. In this work, the aim was to study the association of ALPHA ACTIN1 gene with 68 traits of performance, carcass and organs and to estimate genetic parameters for body weight at 42 days of age (BW42), organs and parts of the carcass to provide tools for the poultry breeding program of a paternal broiler strain and it has been selected mainly for BW42. The data used were from Embrapa Swine and Poultry, Concordia, SC. The analysis of genetic association between traits studied and ALPHA ACTIN1 were conducted by the method of maximum likelihood, considering four models of analysis. The validation analysis was performed using a mixed model that includes the random effect of animal (polygenes), fixed effects of sex (2 levels), incubation (5 levels) and SNP (3 levels) in addition to random errors. The estimation of genetic parameters was obtained by the method of restricted maximum likelihood under animal model multitrait for BW42 with traits significant affected (p<0.05) by the genetic marker and with a second dataset that included cold carcass weight (CW), live (LW), heart (HW), gizzard (GW) and wing (WW), thigh meat (TMW), drumstick (DW) and meat breast muscle (BMW), back (BW) and breast fillet (BFW) weights. The general model used for genetic parameters estimation included the fixed effect of group sex-incubation and effects random additive and residual. Additive effects verified by allelic replacement of ALPHA ACTIN1 gene associated with breast meat yield (BMY), liver yield (LY) and weights at 35 days of age (BW35), skin of drumstick (SDW), DW and BMW. Heritability estimates for these traits beyond BW42 ranged from 0.24 ± 0.06 (LY) to 0.45 ± 0.08... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Luciana Rossini Pinto / Coorientador: Dilermando Perecin / Banca: Antonio Augusto Franco Garcia / Banca: Antônio de Goes / Resumo: Associações entre marcadores moleculares e caracteres agronômicos importantes constituem uma ferramenta valiosa em programas de melhoramento, uma vez que podem identificar indivíduos superiores, ainda em fases juvenis, e, consequentemente, acelerar o processo de desenvolvimento de cultivares. Neste contexto, este trabalho teve por finalidade estabelecer associações entre marcadores moleculares (AFLP e SSR) e resistência e/ou suscetibilidade à ferrugem marrom (Puccinia melanocephala) da cana-de-açúcar, por meio da abordagem de mapeamento associativo. Os dados fenotípicos foram obtidos de experimentos conduzidos em Ribeirão Preto, durante março de 2010 e janeiro de 2012, em delineamento de blocos casualizados completos, DBC, com três repetições. Oitenta e três genótipos de cana-de-açúcar, incluindo cultivares comerciais e clones IAC, foram avaliados quanto a resistência à ferrugem marrom, sob condições de infecção natural. As plantas foram fenotipadas aos 10 meses após o plantio e 7 meses após o primeiro corte. A maioria dos genótipos avaliados (>71%) apresentou reação de resistência à ferrugem marrom; sendo o ciclo de cana-planta mais suscetível ao ataque do fungo do que a soqueira. A resistência à ferrugem marrom apresentou elevada herdabilidade, superior a 0,7. O painel associativo foi caracterizado com 79 pares de primer SSR e 20 combinações de AFLP, os quais detectaram 1015 marcas polimórficas. Os marcadores SCC60.8, SCA31.3, M56/E35 e M56/E37 foram correlacionados à suscetibilidade, enquanto SCB14.9 e M56/E33, ligados à resistência à ferrugem marrom. O efeito individual das marcas oscilou entre -0.37 (R2 = 0.05) e 0.24 (R2 = 0.08). Os marcadores moleculares associados à severidade à ferrugem marrom serão validados, visando explorá-los dentro do programa de melhoramento genético para identificar materiais resistentes ou mesmo eliminar alelos desfavoráveis, e, assim, acelerar os ganhos genéticos / Abstract: Associations between markers and agriculturally important traits are a valuable tool for breeding programs, since they can identify superior individuals still in the initial developmental stages, and thus accelerate the cultivars development. In this context, the work aimed to establish associations between molecular markers (AFLP and SSR) and resistance and/or susceptibility to brown rust (Puccinia melanocephala) in sugarcane, using association mapping approach. The phenotypic data were obtained from field trials in Ribeirão Preto, during March 2010 and January 2012 in a randomized complete block design, DBC, with three replications. Eighty-three sugarcane genotypes, including commercial cultivars and IAC clones, were evaluated for resistance to brown rust under natural infection. The plants were phenotyped at 10 months after planting and 7 months after the first cut. Most of the evaluated genotypes (>71%) presented rust resistance reaction, with the plant cane crop cycle more susceptible to the fungus attack than the rattoon cane. Brown rust resistance showed high heritability, greater than 0,7. The whole panel was genotyped with 79 SSR primer pairs and 20 AFLP primer combinations, resulting in 1015 polymorphic markers. Markers SCC60.8, SCA31.3, M56/E35 and M56/E37 were correlated with susceptibility, while SCB14.9 and M56/E33 were associated to brown rust resistance. The individual marker effect ranged from -0.37 (R2 = 0.05) to 0.24 (R2 = 0.08). The molecular markers associated with the severity of brown rust should be validated, to be exploited in the breeding program to identify resistant materials or even eliminate unfavorable alleles, and thus accelerate the genetic gain / Mestre

Orientador: Antonio de Goes / Banca: Rita de Cássia Panizzi / Banca: Nilvanira Donizete Tebaldi / Resumo: A podridão floral dos citros (PFC) é uma importante doença dessa cultura, responsável por elevadas perdas de produção. Normalmente, essa doença mostra-se limitante quando ocorrem prolongados períodos chuvosos durante o florescimento das plantas ou quando existe intenso molhamento foliar. Duas espécies de Colletotrichum estão associadas à doença: C. acutatum e C. gloeosporioides. Entretanto, recentemente tem-se verificado que, mesmo sob condições não tão propícias, a doença tem ocorrido com relativa frequência; suspeitando-se do envolvimento de outras espécies de Colletotrichum ou de novas condições de adaptação das espécies descritas. Esse trabalho teve como objetivo determinar se há ou não outra espécie de Colletotrichum associada a PFC e avaliar a viabilidade do emprego de marcadores moleculares ISSR na caracterização taxonômica de isolados de Colletotrichum spp. associados a sintomas de PFC em flores, assim como de tecidos foliares e frutos cítricos assintomáticos. Para tanto, foi empregada uma combinação de iniciadores específicos, levando em conta a região ITS e marcadores moleculares ISSR. Os marcadores ISSR mostraram-se eficientes na caracterização taxonômica dos isolados de Colletotrichum analisados. A população avaliada foi constituída apenas por C. acutatum e C. gloeosporioides, descartando o envolvimento de uma espécie adicional, o que converge com os registros na literatura. Foi constatada alta diversidade genética entre os isolados analisados, o que também se mostra convergente quanto às diferenças fenotípicas observadas sob condições de campo. Entretanto, não foi encontrada relação quanto à origem e as espécies de Colletotrichum spp. associadas. De modo inédito, ainda que assintomaticamente, foi detectada a presença de um isolado de C. acutatum associado a frutos cítricos / Abstract: Postbloom fruit drop of citrus (PFD) is a serious disease of this crop, accounting for high yield losses. Usually, this disease shows to be limiting when there are prolonged rainy periods during plant flowering or when there is intense leaf wetness. Two Colletotrichum species are associated with the disease: C. acutatum and C. gloeosporioides. However, recently, it has been found that, even under not so favorable conditions, the disease has occurred with some frequency; one suspects the involvement of other Colletotrichum species or new adaptation conditions of the described species. This study aimed to determine whether there is another Colletotrichum species associated with PFD and it assess the viability of using molecular markers ISSR for taxonomic characterization of Colletotrichum spp. isolates associated with PFD symptoms in flowers, as well as of leaf tissues and asymptomatic citrus fruits. For this purpose, we used a combination of specific primers, taking into account the ITS region and ISSR molecular markers. ISSR markers have proven to be effective for taxonomic characterization of the Colletotrichum isolates analyzed. The population assessed consisted only of C. acutatum and C. gloeosporioides, discarding the involvement of an additional species, something which converges with records in the literature. We found high genetic diversity among the isolates analyzed, and this also shows to converge as for the phenotypic differences observed under field conditions. However, no relation was found regarding the origin and associated Colletotrichum spp. species. In an unprecedented way, although asymptomatically, we detected the presence of a C. acutatum isolate associated with citrus fruits / Mestre

Diversas alterações de expressão proteica decorrentes do desenvolvimento canceroso cervical e dependentes do papilomavírus humano (HPV) vêm sendo apontadas na literatura, dentre elas destacam-se proteínas diretamente influenciadas pela ação de oncoproteínas do HPV, como: transglutaminase 2 (TG2) e p53 e proteínas com expressão modificada relacionada a alterações de controle de ciclo celular, como: p16INK4a, ki-67 e bcl-2. Neste estudo, objetivou-se analisar níveis expressionais de TG2, p16INK4a, p53, Ki-67 e bcl-2 em amostras de lesões escamosas intraepiteliais de baixo (LEIBG) e alto grau (LEIAG), precursoras do carcinoma escamoso de colo uterino e relacionar esta expressão a diferentes tipos virais do HPV. Foram utilizadas amostras histológicas obtidas por biópsia dirigida do colo uterino de pacientes, previamente confirmadas quanto à presença do HPV-DNA por reação em cadeia da polimerase (PCR) e tipagem viral. A quantificação da expressão ocorreu por meio da técnica de imunohistoquímica. Observou-se em LEIBG a elevada expressão de TG2 (p<0.05) e diminuída expressão de p16INK4a (p<0.05) enquanto que em LEIAG, esta proporção inverteu-se (Pearson value = -0.269). A expressão de p53 demonstrou-se variável em relação aos graus de lesão. As expressões de Ki-67 e bcl-2 variaram conforme os níveis teciduais das biópsias coletadas. A proteína p16INK4a apresentou sua expressão associada a HPV considerados de alto risco oncogênico (p<0.001), TG2 teve sua expressão associada ao HPV tipo 11 (p<0.05). Não foram evidenciadas associações significantes entre a expressão de p53, Ki-67 e bcl-2 e os tipos virais. Conclui-se que a expressão dos marcadores estudados foi influenciada pelo processo canceroso no colo uterino e pela infecção do HPV. / Universidade de Caxias do Sul, UCS. / Changes in protein expression resulting from cervical cancer development and dependent on human papillomavirus (HPV) have been indicated in the literature, among them there are proteins directly influenced by HPV oncoproteins, such as transglutaminase 2 (TG2), p53; and proteins with modified expression related to cell cycle control changes, such as p16 INK4a a, ki-67 and bcl-2. This study aimed to analyze expressionais levels of TG2, p16INK4a, p53, ki-67 and bcl-2 in High-grade (HSIL) and low-grade (LSIL) squamous intraepithelial lesion and relate this expression to different viral types of HPV. Tissue samples obtained by biopsy were used directed cervical patients, previously genotyped HPV-DNA. Expression quantification were performed by immunohistochemical technique. It was observed in LSIL the overexpression of TG2 (p<0.05) and decreased expression of p16INK4a (p<0.05) although in HSIL, the proportion was reversed (Pearson value = -0.269). P53 expression was variable in relation to the degree of injury. The expression of ki-67 and bcl-2 levels varied depending beyond the basal layer. p16INK4a presented its expression associated with high-risk types of HPV (p<0.001) and TG2 expression was associated with HPV 11 (p<0.05). No significant associations were found between the viral types and the ki-67, p53 and bcl-2 expression. In conclusion, the expression of the marker is affected by cancerous process and by HPV infection, and expression analysis of these markers may reveal new biomarkers associated with cervical cancer process.

Made available in DSpace on 2018-06-27T18:56:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Delita Vania Bock Almeida.pdf: 1328786 bytes, checksum: 2c33bf461a3b3566365bb92e30e6826b (MD5) Delita Vania Bock Almeida.pdf.jpg: 3645 bytes, checksum: 646c02170c5e61727474716ed25b1fb7 (MD5) Previous issue date: 2012-03-30 / Carbon nanotubes are among the most promising nanomaterials with special features for use both as biomedical engineering. Several studies on the toxicity and feasibility are performed to assess its application in humans for delivery of drugs. In this study, we performed the evaluation of the hepatotoxic effect of carbon nanotubes multi-wall (MWCNT) by biochemical markers (albumin (ALB), total protein (TP), transaminases (ALT / AST), alkaline phosphatase (ALP), lactate dehydrogenase (LDH)) after administration via the intraperitoneal and intragastric in female mice at a dose of 1.5 mg / kg suspended in saline. Blood samples were analyzed one day, 7 and 30 days after treatment with MWCNT. The results after intraperitoneal administration showed a rise in serum total protein after 1 and 7 days. Serum albumin showed an increase in concentration after 7 days and 30 days after reduction. The activity of ALT levels increased only after 1 day, whereas the activity of AST showed an increase after 7 and 30 days. The LDH activity also increased significantly after 7 and 30 days. The FAL showed an increase in its activity after 1 and 7 days and a reduction after 30 days. The results obtained after intragastric administration of MWCNT showed an increase in serum total protein after 7 days and 30 days after reduction. Albumin did not show significant variations. The ALT activity increased significantly after 1 day and a reduction after 30 days. AST activity showed no significant differences in this way. The activity of LDH showed an increase after 7 days, no significant difference after 1 day and 30 days. The activity of ALP showed an increase after only one day. Serum albumin and total protein indicate an acute inflammatory process by both intraperitoneal and through activities of liver enzymes intragastric. As intraperitoneally showed severe liver injury while intragastrically showed mild reversible liver damage. / Nanotubos de carbono estão entre os nanomateriais mais promissores, com características especiais tanto para uso biomédico quanto para engenharia. Vários estudos sobre a sua toxicidade e viabilidade são realizados para avaliar sua aplicação em seres humanos para entrega de fármacos. Neste estudo, realizamos a avaliação do efeito hepatotóxico de nanotubos de carbono de parede múltipla (NTCPM) através de marcadores bioquímicos albumina (ALB), proteínas totais (PT), transaminases (ALT/AST), fosfatase alcalina (FAL), lactato desidrogenase (LDH)), após administração via intraperitoneal e via intragástrica em camundongos fêmeas na dose de 1,5mg/Kg suspensos em solução salina. As amostras de sangue foram analisadas 1 dia, 7 e 30 dias após o tratamento com NTCPM. Os resultados obtidos após administração intraperitoneal demonstraram uma elevação na concentração sérica de proteínas totais após 1 e 7dias. A albumina sérica apresentou um aumento na sua concentração após 7 dias e uma redução após 30 dias. A atividade de ALT apresentou aumento somente após 1 dia, enquanto que a atividade da AST apresentou aumento após 7 e 30 dias. A atividade de LDH também apresentou um aumento significativo após 7 e 30 dias. A FAL apresentou aumento em sua atividade após 1 e 7 dias e uma redução após 30 dias. Os resultados obtidos após a administração via intragástrica de NTCPM apresentaram um aumento na concentração sérica de proteínas totais após 7dias e uma redução após 30 dias. A albumina não apresentou variações significativas. A atividade de ALT apresentou um aumento significativo após 1 dia e uma redução após 30 dias. A atividade da AST não apresentou diferenças consideráveis por esta via. A atividade de LDH apresentou um aumento após 7dias, não apresentando diferença após 1 dia e 30 dias. A atividade da FAL apenas apresentou aumento após 1 dia. Os valores séricos de albumina e proteínas totais indicam um processo inflamatório agudo tanto pela via intraperitoneal quanto pela via intragástrica.As atividades das enzimas hepáticas por via intraperitoneal indicaram lesão hepática grave enquanto que por via intragástrica indicaram lesão hepática leve reversível.