Orientador: Mariana Gobbo Braz / Coorientador: José Reinaldo Cerqueira Braz / Banca: Yara Marcondes Machado Castiglia / Banca: Maria Angela Tardelli / Banca: João Paulo Marcondes / Banca: Clarissa Scolastici / Resumo: Apesar da eficácia e segurança demonstradas no uso clínico dos anestésicos inalatórios, existem ainda algumas questões a serem respondidas sobre genotoxicidade e efeitos no equilíbrio redox celular. Poucos estudos têm avaliado os danos no material genético ou o estresse oxidativo em pacientes submetidos a procedimento cirúrgico sob uso do anestésico sevoflurano. Para melhor entender os possíveis efeitos tóxicos deste agente, o presente estudo objetivou avaliar os danos oxidativo no DNA, a peroxidação lipídica e a defesa antioxidante plasmática durante e após a anestesia geral balanceada mantida com sevoflurano, em 15 pacientes adultos sem comorbidades, os quais foram submetidos a cirurgias eletivas de pequeno porte. As amostras de sangue venoso foram coletadas antes da anestesia; após a indução anestésica e imediatamente antes da cirurgia; 2 horas após o início da anestesia e no dia seguinte a cirurgia. Os danos no DNA foram avaliados em linfócitos periféricos utilizando o teste do cometa com as enzimas formamidopirimidina-DNA glicosilase (fpg) e endonuclease III (endo III) para detecção de lesões em purinas e pirimidinas oxidadas, respectivamente. O malonaldeído (MDA) e a defesa antioxidante plasmática foram detectados por fluorescência. Os resultados mostraram que não houve aumento nos danos do DNA ou oxidação de bases entre os momentos avaliados. A anestesia balanceada com sevoflurano não alterou os níveis de MDA e a defesa antioxidante do plasma manteve-se inalterada durante e após a anestesia. Em conclusão, o presente estudo demonstrou, pela primeira vez, que o sevoflurano não leva à oxidação de material genético ou de lipídios e não altera a capacidade antioxidante do plasma durante e após a anestesia balanceada em pacientes sem comorbidades submetidos a cirurgias minimamente invasivas / Abstract: Despite of the anesthetics effectiveness and safety in clinical use, there are some questions to be answered concerning their genotoxicity and effects on cellular redox balance. Only a few studies have evaluated DNA damage or oxidative stress in patients during surgical procedure with the volatile anesthetic sevoflurane. To further understand the possible toxic effects of this agent, the current study aimed to evaluate oxidative DNA damage, lipid peroxidation and plasma antioxidant defense during and after general balanced anesthesia maintained with sevoflurane in 15 adult patients without comorbidities who underwent elective minor surgery. The venous blood samples were collected at baseline-before anesthesia; after anesthesia induction and immediately before surgery; 2 h after the beginning of anesthesia; and on the day following surgery. DNA damage was detected in peripheral lymphocytes using the comet assay, and the enzymes formamidopyrimidine-DNA glycosylase (fpg) and endonuclease III (endo III) were used to recognize oxidized purine and pyrimidine lesions, respectively. Plasma malondialdehyde (MDA) and antioxidant defense were detected by fluorescence. The results showed no increase in DNA damage or base oxidation among the time points evaluated. Balanced anesthesia with sevoflurane did not alter MDA levels, and plasma antioxidant defense was unchanged during or after anesthesia. In conclusion, this study showed, for the first time, that sevoflurane does not lead to oxidation in genetic material or lipids, and does not alter the antioxidant status during or after balanced anesthesia in patients without comorbidities undergoing minimally invasive surgeries / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-27Bitstream added on 2014-06-13T20:39:42Z : No. of bitstreams: 1 sa_mpa_me_botfm.pdf: 980372 bytes, checksum: 2090db5706ac452cd119ce84e81f519c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A pré-eclâmpsia é uma das complicações gestacionais mais freqüentes e o radical livre óxido nítrico (NO) pode estar envolvido na fisiopatologia desta doença. O excesso de radicais livres pode gerar estresse oxidativo que contribui para a ocorrência de várias doenças neonatais, porém, a relação pré-eclâmpsia / estresse oxidativo /óxido nítrico/ doenças neonatais não está bem definida. Investigar se os níveis de NO na placenta e no recém-nascido caracterizam o estresse oxidativo na pré-eclâmpsia e relacionam-se com a morbidade e prognóstico neonatal. Estudo observacional de prematuros menores que 34 semanas de mães com pré-eclâmpsia, pareados pela idade gestacional com prematuros de mães normotensas, nascidos na Maternidade do HC da Faculdade de Medicina de Botucatu – UNESP, entre julho de 2008 e dezembro de 2009. Óxido nítrico foi dosado em placenta, sangue de cordão umbilical, urina do primeiro dia de vida, sangue e urina do recém-nascido no 4º dia. As variáveis bioquímicas e clínicas, de nascimento e neonatais foram comparadas nos 2 grupos: Pré-eclâmpsia e Normotensas. Foram estudados 30 prematuros de mães com pré-eclâmpsia e 30 de mães normotensas, com idade gestacional de 30 ± 2 semanas. Não houve diferença nas condições de nascimento e na morbimortalidade dos prematuros, mas os filhos de mães com pré-eclâmpsia tiveram maior necessidade de surfactante e ventilação mecânica. Os níveis séricos e urinários de NO não diferiram nos 2 grupos, sendo significativamente mais baixos na placenta do que no sangue de cordão e dos recém-nascidos. A pré-eclâmpsia foi grave em 40% dos casos, mas mesmo nestes os níveis de NO não diferiram. Na pré-eclâmpsia os níveis placentários e neonatais de NO não diferiram e não se relacionaram com a morbidade e o prognóstico neonatal / Pre-eclampsia is one of commost complication of preganacy and the free radical nitric oxide (NO) may be enrolled in the pathophysiology of the disease. Excessive levels of free radicals can produce oxidative stress contributing to the development of several neonatal diseases. However the pre-eclampsia/oxidative stress/NO/neonatal diseases relationship has not been well established. To investigate whether NO levels in the placenta and in newborns characterize oxidative stress in pre-eclampsia and whether they are related to morbidity and neonatal prognosis.Observational study on preterm newborns, younger than 34 week, of mothers with pre-eclampsia, paired by gestational age with preterm newborns from normotensive mothers and born at the University Maternity Hospital of the Botucatu School of Medicine - UNESP from July 2008 to December 2009. Nitric oxide was dosed in the placenta, umbilical-cord blood, first-day-of-life urine and the newborn’s fourth-day urine and blood. Biochemical and clinical variables from birth and the newborn, were compared in the 2 groups: Pre-eclampsia and Normotensive. Thirty preterm newborns of mothers with pre-eclampsia and 30 newborns of normotensive mothers with gestational age of 30 ± 2 weeks were studied. There was no difference in birth conditions or morbidity and mortality of preterm newborns, but the offspring of mothers with pre-eclampsia required more surfactant and mechanical ventilation. Serum and urine NO levels did not differ in the two groups and were significantly lower in the placenta than in umbilical-cord blood and in newborns. Preeclampsia was severe in 40% of cases, but even in those, NO levels did not differ. In pre-eclampsia, placental and neonatal NO levels did not differ and were not related to neonatal morbidity or prognosis

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-12-16Bitstream added on 2014-06-13T20:20:52Z : No. of bitstreams: 1 suarez_oax_dr_botfm.pdf: 3610400 bytes, checksum: f6259d8ab7145b655f41789a5a923ab3 (MD5) / Evidências histopatológicas em pulmões de homens e animais sugerem que o sistema respiratório é igualmente afetado pelo diabetes mellitus (DM). Todavia, a julgar pela defasagem nos conhecimentos em relação às outras lesões diabéticas crônicas, observa-se que os pulmões têm sido negligenciados, principalmente no que se refere aos estudos que visam à melhor caracterização das alterações diabéticas que afetam estes órgãos, bem como os mecanismos possivelmente implicados em sua gênese e evolução. Este estudo foi realizado com os seguintes objetivos: 1- Caracterizar as alterações morfológicas, morfométricas e ultraestruturais determinadas pelo DM, nos pulmões de ratos diabéticos induzidos pela aloxana, tendo como parâmetro de comparação ratos normais não-diabéticos, de mesmo período de seguimento; 2- Estabelecer uma possível correlação entre a evolução dessas alterações com a intensidade do estresse oxidativo pulmonar. Cento e vinte ratos Lewis, machos, pesando entre 250 – 280g, foram distribuídos em 2 lotes de animais, com 60 ratos cada um. Cada um destes lotes foi dividido, por sorteio, em 2 grupos experimentais: GN – 30 ratos não-diabéticos controles; GD – 30 ratos diabéticos sem qualquer tratamento da doença. Cada grupo experimental, dentro dos seus respectivos lotes, foi posteriormente dividido em 3 subgrupos de animais, com 10 ratos cada, para serem sacrificados após 1, 3 e 6 meses de seguimento, respectivamente. O diabetes foi induzido pela administração endovenosa de aloxana a 2%, na dose única de 42mg/kg de peso corporal, tendo sido utilizados no experimento somente animais diabéticos com sinais clínicos evidentes de diabetes grave, associados a níveis glicêmicos >250mg/dl. Parâmetros clínicos, tais como: peso corporal, ingestão hídrica, ingestão alimentar e diurese foram obtidos de todos os animais de um dos lotes... / Histopathological evidences in human and animal lungs suggest that the respiratory system is equally affected by diabetes mellitus (DM). However, judging from the gap in the knowledge of other chronic diabetic lesions, it is observed that the lungs have been neglected, particularly as regards studies aiming at a better characterization of diabetic alterations that affect such organs as well as of mechanisms possibly implicated in their genesis and development.This study was conducted with the following objectives: 1- To characterize morphological, morphometric and ultrastructural alterations determined by DM in the lungs of alloxan-induced diabetic rats using normal non-diabetic rats followed during the same period of time as a comparison parameter; 2- To establish a possible correlation between the development of such alterations with the intensity of pulmonary oxidative stress. One hundred and twenty male Lewis rats weighing 250 – 280g were distributed into 2 animal lots with 60 rats each. Also, each of such lots was randomly divided into 2 experimental groups: GN – 30 non-diabetic control rats; GD – 30 diabetic rats without any treatment for the disease. Each experimental group, within each respective lot, was later divided into 3 subgroups of animals, each comprising 10 rats, to be sacrificed after 1, 3 and 6 months of follow-up, respectively. Diabetes was induced by intravenous administration of 2% alloxan at a single dose of 42mg/kg of body weight. Only diabetic animals with evident clinical signs of severe diabetes associated with glycemic levels > 250mg/dl were used. Clinical parameters, such as body weight, water intake, food intake and urine output, were obtained from all animals from the one of animal lots in all follow-up periods by using metabolic cages. Blood glucose, urinary glucose, glycosilated hemoglobin and plasma insulin were also determined in these... (Complete abstract click electronic access below)

Quitossomas são lipossomas revestidos por quitosana que representam uma alternativa aos lipossomas convencionais, no sentido de apresentarem uma melhor estabilidade e bioadesividade, características interessantes para formulações destinadas à via cutânea. Este trabalho teve como objetivo preparar e caracterizar suspensões de quitossomas contendo diferentes concentrações de melatonina (MEL) e avaliar in vivo a capacidade antioxidante da MEL associada aos quitossomas a partir da incorporação destes em hidrogéis. As suspensões de lipossomas e quitossomas apresentaram diâmetros médios entre 150 nm e 254 nm, índices de polidispersão em torno de 0,4, valores de potencial zeta entre -38 mV e -28 mV, pH em torno de 4,0, teor médio de MEL próximo a 100 % e eficiência de encapsulação entre 31,4 % e 60,8 %. Os resultados obtidos por raios- X a baixo ângulo revelaram a presença de estruturas unilamelares, também observadas nas fotomicrografias de microscopia eletrônica de transmissão. O estudo de estabilidade indicou que, no período de 90 dias, as suspensões de lipossomas apresentaram redução nos valores de diâmetro médio e de polidispersão, mas os valores de potencial zeta e do teor de MEL não sofreram alterações. As suspensões de quitossomas permaneceram estáveis em relação a estes parâmetros. Os resultados obtidos por Turbiscan LAb® foram semelhantes aos resultados demonstrados no estudo de estabilidade. As suspensões de lipossomas, de quitossomas e a solução hidroalcoólica da MEL foram incorporadas em hidrogéis de Natrosol® e apresentaram comportamento reológico pseudoplástico. Os gráficos de Turbiscan LAb® mostraram que os hidrogéis não apresentaram tendência à instabilidade. Os ensaios de estresse oxidativo revelaram uma maior proteção da pele dos camundongos que receberam tratamento tópico com hidrogéis contendo MEL frente aos efeitos deletérios gerados pela radiação UVA, apresentando menores níveis de formação de radicais livres e maiores níveis de tióis totais, comparados ao grupo submetido somente à radiação UV. As peles que receberam tratamento tópico com o hidrogel contendo MEL associada aos quitossomas apresentaram uma maior atividade da superóxido desmutase em relação aos demais tratamentos, indicando uma maior proteção cutânea. / Chitosomes are chitosan coated liposomes that represent an alternative to conventional liposomes since they present a better stability and bioadhesivity, characteristics which are interesting for formulations intented to cutaneous administration. The aim of this work was to prepare and characterize different concentrations of melatonin (MEL) loaded in chitosome suspensions and to evaluate, in vivo, the antioxidant capacity of MEL associated to chitosomes and incorporated in hydrogels. The liposome and chitosome suspensions presented mean diameters between 150 nm and 254 nm, polidispersity indexes around 0.4, zeta potential values between -38 mV and -28 mV, pH values close to 4.0, MEL content close to 100 % and encapsulation efficiency between 34.4 % and 60.8 %. The small angle X-rays analysis revealed the presence of unilamelar structures, also observed by transmission electronic microscopy. The stability studies indicated that, within 90 days, the liposome suspensions had a decrease in mean diameter values and in polydispersity indexes, but no alterations were detected in zeta potentials and MEL content. The chitosome suspensions remained stable in relation to these parameters during 90 days. The Turbiscan LAb® results were similar to those found in the stability studies. The liposome and chitosome suspensions and the hydroalchoholic melatonin solution were incorporated into Natrosol® hydrogels and presented pseudoplastic rheological profiles. The Turbiscan LAb® results showed that the hydrogels did not present instability tendency. The oxidative stress assays revealed an increase in mouse skin protection of those that were treated with hydrogels containing MEL, presenting free radical lower levels and total thiols higher levels compared to the group only submitted to UVA radiation. The skin that received hydrogels containing MEL associated to chitosomes presented higher superoxide dismutase activities compared to the other treatments, indicating a better cutaneous protection.

Os óleos essenciais de três espécies de Schinus foram avaliados quanto à sua atividade fitotóxica na planta alvo Arabidopsis thaliana. Para esse fim, utilizou-se a abordagem convencional, que avalia o efeito dos aleloquímicos sobre a germinação e o crescimento de plântulas, mas também buscaram-se novas técnicas para compreender o modo de ação dos voláteis, a saber o efeito sobre o enraizamento adventício e a análise da expressão de genes por PCR em tempo real. Adicionalmente, foi realizada a caracterização química dos óleos essenciais por cromatografia gasosa bidimensional, demonstrando que o óleo de S. lentiscifolius é principalmente constituído por sesquiterpenos, enquanto que os de S. molle e S. terebinthifolius apresentam maior quantidade de monoterpenos. Os três óleos essenciais afetaram a porcentagem de germinação, o índice de velocidade de germinação, o crescimento da raiz primária e o crescimento da parte aérea de A. thaliana, mas não apresentaram efeito sobre a expressão dos genes ANP1 e CDKB1;1. Os voláteis também afetaram o processo de enraizamento adventício da planta alvo de uma maneira dose-dependente, afetando o tempo médio de enraizamento e o crescimento da maior raiz adventícia, mas não afetou a porcentagem de enraizamento nem o número de raízes por microestaca. A adição de uma auxina não reverteu os efeitos fitotóxicos induzidos pelos voláteis, mas a adição de uma citocina contribuiu na recuperação do atraso do processo de enraizamento quando os óleos essenciais de S. lentiscifolius e S. molle foram utilizados. Além disso, o Trolox®, um potente antioxidante, contribuiu na recuperação parcial dos efeitos inibitórios causados pelos óleos essenciais, indicando que eles induzem estresse oxidativo. Adicionalmente, foi realizada a detecção histoquímica de peróxido de hidrogênio nas microestacas expostas aos óleos essenciais. Os resultados demonstram que os efeitos fitotóxicos dos voláteis ocorrem por diversos mecanismos, incluindo estresse oxidativo e efeito sobre fitormônios. Esse estudo demonstrou que, devido às diversas técnicas que podem ser aplicadas, A. thaliana é uma espécie útil para ser utilizada em experimentos que avaliem o potencial alelopático de produtos naturais. / The essential oils of three Schinus species were evaluated for phytotoxic activity using Arabidopsis thaliana as target species. It was used the conventional approach, evaluating allelochemical effects on seed germination and seedling growth. Additionally, it was also employed new techniques in allelopathic potential area to understand the modes of action of volatiles, as the phytotoxic effects on adventitious rooting and the analysis of expression of genes by RT-qPCR. Furthermore, chemical characterization of essential oils using two-dimensional gas chromatography was carried out. S. lentiscifolius essential oil is mainly composed by sesquiterpenes, whereas S. molle and S. terebinthifolius presented high amounts of monoterpenes. Essential oils affected the germination rate (%), speed of accumulated germination, primary root length and shoot length of A. thaliana. However, the expression of the genes ANP1 and CDKB1; 1 was not affected. Volatiles also interfere on A. thaliana adventitious rooting in a dosedependent manner. Inhibitory effects were observed on mean rooting time and root length. Rooting percentage and number of roots per microcuttings were not affected by volatiles. Addition of an auxin not reversed phytotoxic effects induced by volatiles, but the addition of a cytokinin contributed to A. thaiana recover from the effects on mean rooting time caused by S. lentiscifolius and S. molle essential oils. Furthermore, Trolox®, a potent antioxidant, contributes to the partial recovery of the inhibitory effects caused by essential oils, indicating that volatiles induce oxidative stress. Histochemical detection of hydrogen peroxide after essential oil exposure was also carried out. Results demonstrated that the phytotoxic activity of volatiles may occur by several mechanisms, including oxidative stress and effects on phytohormones. This study also demonstrated A. thaliana is a useful species to be used in allelopathic potential evaluations due to the different techniques that can be applied.

A ovariectomia bilateral em ratas é um dos modelos experimentais utilizados para se analisar a menopausa e as possíveis estratégias para amenizar os efeitos deletérios desta condição. A suplementação da dieta com antioxidantes vem sendo utilizada para diminuir o risco de estresse oxidativo, que está aumentado na menopausa. Nesse estudo, foram analisados os efeitos do ácido lipoico (AL) e dos ômegas-3 (ácido docosahexaenóico (DHA) e ácido eicosapentaenóico (EPA)) no fígado, através da suplementação da dieta de ratas ovariectomizadas. O ácido lipoico foi escolhido em virtude da sua capacidade antioxidante, pela conhecida característica de ser cofator de enzimas chave no metabolismo celular e por inibir alguns mecanismos pró- inflamatórios. Essas características são importantes em virtude da disfunção mitocondrial e do aumento dos níveis de citocinas inflamatórias, que estão presentes após a menopausa. Os demais ácidos graxos poli-insaturados foram utilizados por possuírem alta capacidade antioxidante e estarem bem estabelecidos como protetores endoteliais. Além disso, também exercem efeitos anti-inflamatórios e são capazes de normalizar os níveis de lipídios na circulação sanguínea. Os resultados demonstram que o ácido lipoico é capaz de atuar no fígado e recuperar a atividade da enzima fumarase e a atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase mitocondrial (MnSOD) e glutationa peroxidase (GPx), além de diminuir o dano oxidativo em proteínas e manter os níveis de malondialdeído (MDA) semelhantes ao grupo controle. No entanto, não exerceu influência na atividade da superóxido dismutase citosólica (CuZnSOD). A suplementação com DHA e EPA restaurou os níveis das duas classes de superóxidos dismutase, mas, não conseguiu restaurar a atividade da GPx e da fumarase. Os níveis de proteínas danificadas foram menores em todos os animais suplementados com ômega-3 em relação ao grupo controle e ao grupo ovariectomizado sem suplementação. Além disso, os suplementos também atuaram na redução dos níveis de nitritos e nitratos pois possuem propriedades anti-inflamatórias, sobretudo o ácido lipoico, que inibe a oxido nítrico sintase induzível (ONi) de macrófagos. Os níveis de vitamina C não apresentaram diferença entre os grupos SHAM, OVX, AL e DHA. Mas, o grupo EPA apresentou níveis de vitamina C inferiores aos dos grupos SHAM e OVX. Além disso, os níveis de vitamina E se mostraram inferiores nos grupos suplementados com os ácidos graxos poli-insaturados de cadeia longa. Neste trabalho, os antioxidantes assumiram um papel importante na diminuição do dano oxidativo e na recuperação da atividade de enzimas importantes na homeostase celular, alterações essas, causadas pela diminuição drástica dos níveis de estrogênio no modelo de menopausa. / The bilateral ovariectomy in rats is one of the experimental models used to analyze the menopause and possible strategies to mitigate the deleterious effects of this condition. Dietary supplementation with antioxidants has been used to decrease the risk of oxidative stress, which is increased in menopause. In this study, it was analyzed the effects of lipoic acid (LA) and the omega -3 (docosahexaenoic acid (DHA) and eicosapentaenoic acid (EPA)) in the liver, through dietary supplementation of ovariectomized rats. The lipoic acid was chosen because of its antioxidant capacity, its known characteristic of being cofactor for key enzymes in cellular metabolism, and inhibition of some proinflammatory mechanisms. These characteristics are important because of mitochondrial dysfunction and increased levels of inflammatory cytokines, that are present after menopause. The other polyunsaturated fatty acids were used due to their high antioxidant capacity and well established endothelial protective role. Furthermore, they also exert anti-inflammatory effects and are able to normalize the lipid levels in the bloodstream. The results showed that lipoic acid is capable of acting in the liver and recover the activities of the fumarase enzyme and the antioxidant enzymes mitochondrial superoxide dismutase (MnSOD) and glutathione peroxidase (GPx), and reducing oxidative damage of proteins and maintaining the levels of malondialdehyde (MDA) similar to the control group. However, lipoic acid had no influence on the activity of cytosolic superoxide dismutase (CuZnSOD). Supplementation with DHA and EPA restored the levels of both classes of superoxide dismutase, but was unable to restore the activity of GPx and fumarase. The levels of damaged proteins were lower in all animals supplemented with omega -3 when compared to the sham and ovariectomized groups without supplementation. Also, the supplements were active in reducing levels of nitrites and nitrates, since they have anti -inflammatory properties, especially lipoic acid, which inhibits nitric oxide synthase inducible (iNOS) of macrophages. Vitamin C levels did not differ between the SHAM, LA, OVX and DHA groups. But the EPA group presented lower levels of vitamin C than those of SHAM and OVX groups. Nonetheless, levels of vitamin E was inferior in the groups supplemented with long chain polyunsaturated fatty acids. In this work, antioxidants played an important role in reducing oxidative damage and assists recovery of the activity of important enzymes in cellular homeostasis, changes caused by the drastic decrease in estrogen levels in menopausal model.

Orientador: Durvalina Maria Mathias dos Santos / Banca: Fábio Luís Ferreira Dias / Banca: Priscila Lupino Gratão / Resumo: Aiming to evaluate if Silicon (Si) ameliorates Aluminum (Al) toxicity in young sugarcane plants, at this work were assessed physiological parameters of biomass accumulation, lipid peroxidation through evaluation of hydrogen peroxide (H2O2) and malondialdehyde (MDA), contents of the non-enzymatic compounds proline (Pro) and glycine betaine (GB), and chlorophyll pigments (chl a and b). Furthermore, to determine if there was Si attenuated deleterious effects caused by Al, an anatomical study of roots was carried out. The experimental design was a 2x4x4 layout, with two sugarcane cultivars (CTC9002 and CTC9003), four Al sulfate concentrations (0.0; 10.0; 15.0; and 20.0 mg L-1) and two potassium silicate concentrations, absence (0.0 mg L-1) and presence (2.0 mmol L-1). There were three replicates in triplicate for each evaluation, except for growth. For obtaining young plants, micro seed pieces were sown and grown in sterilized sand for 30 days. After this period, the plants were acclimated in nutrient solution for 30 days. Then, the plants were submitted to the Al treatments, and grown in hydroponics for 15 days. Only then Si treatments were applied, with plants growing under Al toxicity and in the presence or absence of Si for additional 20 days. All the biological evaluations were performed 35 days after the plants were exposed to Al and Si treatments. Comparing the results obtained from young plants under Al toxicity and without Si, it was verified that Si supply improved grow... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Visando constatar se o silício (Si) atenua a toxidez do alumínio (Al) em plantas jovens de cana-de-açúcar, neste trabalho foram estudados em plantas jovens de cana-de-açúcar, os parâmetros fisiológicos de acúmulo de biomassa, peroxidação lipídica com a avaliação do peróxido de hidrogênio (H2O2) e ácido malondialdeído (MDA), teores de compostos não-enzimáticos antioxidantes, prolina (Pro) e glicina betaína (GB), pigmentos clorofilianos (chl a e b) e anatômia das raízes. O delineamento experimental foi em esquema fatorial 2x4x2, com duas cultivares (CTC9002 e CTC9003), quatro concentrações de sulfato de Al (0,0; 10,0; 15,0 e 20,0 mg L-1) e duas concentrações de silicato de potássio, ausência (0,0 mg L-1) e presença (2,0 mmol L-1). Foram realizadas três repetições em triplicata em todas as avaliações, exceto para crescimento, onde foram realizadas apenas as repetições. Para a obtenção de plantas jovens, os minitoletes de ambas cultivares foram cultivados em areia esterilizada por 30 dias. Após este período, as plantas foram aclimatadas por 10 dias em solução nutritiva. A seguir, procedeu-se aos tratamentos de Al nas plantas jovens, as quais foram cultivadas hidroponicamente por 15 dias. Os tratamentos com Si foram realizados ao término deste período, permanecendo as plantas sob toxidez de Al e tratadas na ausência ou presença de Si por mais 20 dias. Todas as avaliações biológicas foram realizadas aos 35 dias dos tratamentos de Al e Si. Comparando-se os resultados obtidos nas plantas jovens de cana-de-açúcar sob toxidez de Al e com ausência de Si, verificou-se que em plantas com suplementação de Si houve significativa melhora do crescimento, que pode ser atribuída pela redução da peroxidação lipídica devido à diminuição de H2O2 e MDA, pelo maior acúmulo d... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Autism spectrum disorder (ASD) affects about 1 in 45 individuals in the United States, yet effective treatments are yet to be defined. There is growing evidence that ASD is associated with abnormalities in several metabolic pathways, including the inter-connected folate, methylation and glutathione pathways. Several treatments that can therapeutically target these pathways have been tested in preliminary clinical trials. The combination of methylcobalamin (mB12) with low-dose folinic acid (LDFA) and sapropterin, a synthetic form of tetrahydrobiopterin (BH4) have been studied in open label trials while high-dose folinic acid has been studied in a double-blind placebo controlled trial. All of these treatments have the potential to positively affect folate, methylation and glutathione pathways. Although the effect of mB12/LDFA and BH4 on methylation and glutathione metabolism have been examined in the open-label studies, these changes have not been compared to controls who received a placebo in order to account for the natural variation in the changes in these pathways. Furthermore, the recent study using high-dose folinic acid (HDFA) did not analyze the change in metabolism resulting from the treatment. Thus, we compared changes in methylation and glutathione metabolism and biomarkers of chronic oxidative stress as a result of these three treatments to individuals receiving placebo. In general, mB12/LDFA treatment had a significant effect on glutathione and cysteine metabolism with a medium effect size while BH4 had a significant effect on methylation and markers of chronic oxidative stress with a large effect size. HDFA treatment did not significantly influence biomarkers of methylation, glutathione or chronic oxidative stress. One caveat was that participants in the mB12/LDFA and BH4 studies had significantly worse markers of glutathione metabolism and chronic oxidative stress at baseline, respectively. Thus, the participants selected in these two clinical trials may have been those with the most severe metabolic abnormalities and most expected to respond to these treatments. Overall this study supports the notion that metabolic abnormalities in individuals with ASD may be amenable to targeted treatments and provide some insight into the mechanism of action of these treatments.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Este trabalho teve como objetivo investigar os efeitos comportamentais e neuroquÃmicos do Ãcido α-lipÃico sozinho ou associado com LDOPA no modelo animal de doenÃa de Parkinson induzido pela injeÃÃo estereotÃxica da neurotoxina 6-hidroxidopmina (6-OHDA) em corpo estriado de rato. Os animais (ratos Wistar machos, 250-300g) foram tratados com Ãcido lipÃico nas doses de 100mg/Kg ou 200mg/Kg sozinho ou associado com LDOPA na dose de 50mg/Kg 1h antes da injeÃÃo estereotÃxica com 6-OHDA e diariamente por 14 dias apÃs a lesÃo. O comportamento motor foi testado atravÃs da avaliaÃÃo rotacional induzida pela apomorfina, da atividade exploratÃria horizontal no teste de campo aberto e da assimetria no uso das patas dianteiras no teste do cilindro. Os testes neuroquÃmicos visaram avaliar o efeito antioxidante e neuroprotetor do Ãcido α-lipÃico atravÃs da determinaÃÃo da peroxidaÃÃo lipÃdica no TBARS, determinaÃÃo da concentraÃÃo de nitrito/nitrato e avaliaÃÃo da atividade da catalase. O Ãcido α-lipÃico promoveu uma diminuiÃÃo significativa no nÃmero de rotaÃÃes contralaterais induzidas pela apomorfina, bem como promoveu uma melhora do desempenho motor, aumentando a atividade exploratÃria horizontal no teste de campo aberto e a utilizaÃÃo da pata contralateral à lesÃo produzida pela 6-OHDA no teste do cilindro. Quanto ao efeito antioxidante, o Ãcido α-lipÃico promoveu uma reduÃÃo da peroxidaÃÃo lipÃdica ao reduzir o TBARS, reduziu a produÃÃo de nitrito/nitrato, bem como interagiu com o sistema antioxidante endÃgeno promovendo uma reduÃÃo na atividade da enzima catalase. Portanto, o Ãcido α-lipÃico preveniu a lesÃo produzida nos neurÃnios dopaminÃrgicos pela 6-OHDA e pelo uso prolongado da LDOPA, demonstrando que este antioxidante teve efeito neuroprotetor, sendo um importante alvo terapÃutico para a doenÃa de Parkinson. / This study aimed to investigate the behavioral and neurochemical effects of α-lipoic acid alone or in combination with LDOPA in an animal model of Parkinson Disease induced by stereotactic injection of the neurotoxin 6-hydroxydopamine (6 -OHDA) in rat striatum. The animals (male Wistar rats, 250-300g) were treated with doses of lipoic acid or 100mg/kg 200mg/Kg alone or in combination with a dose of 50mg/Kg LDOPA 1h before stereotactic injection of 6-OHDA and daily for 14 days after injury. Motor behavior was tested by evaluating apomorphine-induced rotational, horizontal exploratory activity in open field test and asymmetry in the use of the forelegs in the cylinder test. The neurochemical tests were intended to evaluate the antioxidant and neuroprotective effect of α-lipoic acid by determining the lipid peroxidation in the TBARS and determining the concentration of nitrite/nitrate and evaluation of catalase activity. α-Lipoic acid promoted a significant decrease in the number of rotations induced by apomorphine, as well as promoted an improvement in motor performance by increasing the horizontal exploratory activity in open field test and use the paw of the opposite side of the lesion produced by 6-OHDA in the test cylinder. The antioxidant effect of the α-lipoic acid promoted reduction of lipid peroxidation by reducing the TBARS reduced the production of nitrite / nitrate and interacted with the antioxidant system promoting a reduction in endogenous catalase activity. Therefore, α-lipoic acid prevented the damage produced in the dopaminergic neurons by 6-OHDA and the chronic use of LDOPA, indicating that this antioxidant had a neuroprotective effect, being an important therapeutic target for Parkinson disease.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / As cordiaquinonas sÃo naftoquinonas meroterpenÃides isolados de plantas pertencentes ao gÃnero Cordia com vÃrias atividades biolÃgicas descritas, incluindo atividades antifÃngica, larvicida e citotÃxica. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial anticÃncer de uma cordiaquinona isolada das raÃzes da planta Cordia leucocephala. O presente estudo avaliou o potencial citotÃxico da cordiaquinona J em vÃrias linhagens de cÃlulas tumorais e normais pelo teste do MTT e seu possÃvel mecanismo de aÃÃo. A cordiaquinona J mostrou valores de CI50 variando de 4,6 a 6,8 μM em cÃlulas leucÃmicas e 33,6 a 37 μM em cÃlulas normais, apÃs 24 horas de incubaÃÃo. Nas cÃlulas HL-60 foi observado induÃÃo de apoptose preferencialmente pela via extrÃnseca. A induÃÃo do dano ao DNA observado pelo tratamento com a cordiaquinona J atravÃs do ensaio do cometa foi associado com a ativaÃÃo de proteÃnas quinases da via ATM/ATR. O dano ao DNA, assim como a ativaÃÃo das proteÃnas quinases da via ATM/ATR foi visualizado em cÃlulas HL-60, mas nÃo em cÃlulas normais. Estes efeitos em HL-60 podem estar relacionados com a depleÃÃo da expressÃo proteica de glutationa e de c-myc observados. O potencial anticÃncer foi confirmado in vivo atravÃs da inibiÃÃo do tumor sarcoma-180 em 72,5% apÃs o tratamento com 50 mg/kg de cordiaquinona J. O prÃ-tratamento tanto das cÃlulas quanto dos animais com N-acetil-L-cisteina inibiu todos os efeitos observados in vitro e in vivo reforÃando o papel da geraÃÃo das espÃcies reativas de oxigÃnio na atividade antitumoral da cordiaquinona J. / Cordiaquinones are meroterpenoid naphtoquinones from plants belonging to the genus Cordia with several described biological activities, including antifungal, larvicidal and cytotoxic effects. The aim of this study was to evaluate the anticancer potential of a cordiaquinone isolated from the roots of Cordia leucocephala plant. The present study evaluated the cytotoxic potential of cordiaquinone J in several tumor and normal cell lines by MTT assay and its possible mechanism of action. The study of the mechanism of action of cordiaquinones L and M, in human leukemia cells (HL-60) showed induction of cell death by apoptosis, and these effects were related to the induction of oxidative stress. Then the study was continued only with the cordiaquinone J. The cordiaquinone J showed IC50 values ranging from 4.6 to 6.8μM in leukemia cells and 33.6 to 37 μM in normal cells, after 24 hours of incubation. In HL-60 cells was observed apoptosis induction preferentially by extrinsic pathway. The induction of DNA damage by cordiaquinone J observed by comet assay was associated with activation of protein kinases of ATM/ATR pathway. The DNA damage, as well as activation of protein kinases via the ATM / ATR was observed in HL-60 cells but not in normal cells. These effects in HL-60 cells may be related to the depletion of protein expression of glutathione and c-myc observed. The anticancer potential was confirmed in vivo through inhibition of sarcoma-180 tumor by 72.5% after the treatment with 50 mg/kg of cordiaquinone J. The pre-treatment of cells or animals with N-acetyl-L-cysteine abolished most of the in vitro and in vivo observed effects, reinforcing the role of reactive oxygen species generation in cordiaquinone J activity.