CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / O desempenho fisiolÃgico da atividade celular requer um equilÃbrio entre a produÃÃo de espÃcies de radicais livres e a sua desativaÃÃo por agentes reguladores e protetores. Quando esse equilÃbrio à quebrado, surge o estresse oxidativo. Diversos estudos experimentais utilizando estrÃgenos para a induÃÃo de distÃrbios ovarianos e metabÃlicos, com destaque para a SÃndrome dos OvÃrios PolicÃsticos (SOP), estÃo disponÃveis na literatura cientÃfica. A Metformina (MTF) à um anti-hiperglicemiante, frequentemente utilizado para tratamento da SOP, permitindo a restauraÃÃo da ciclicidade menstrual, induÃÃo da ovulaÃÃo e o aumento da ocorrÃncia de gestaÃÃo. Na Medicina Tradicional Chinesa, a Acupuntura (Ac) e a Eletroacupuntura (EAc) sÃo utilizadas na promoÃÃo do equilÃbrio orgÃnico, mediante estÃmulo de vias nervosas produtoras de neurotransmissores especÃficos, resultando em uma resposta anti-inflamatÃria, analgÃsica e reguladora autonÃmica. Neste estudo, objetivou-se avaliar os efeitos da MTF, da Ac e da EAc aplicadas nos acupontos Zusanli (E36) e Sanyjiao (BP6), sobre o estresse oxidativo sistÃmico e local, inflamaÃÃo e glicemia em ratas sadias submetidas a estÃmulo estrogÃnico. No experimento, 42 ratas foram distribuÃdas aleatoriamente em sete grupos. Em 30 ratas (grupos G1C+, G2M, G3Ac, G4EAc2, G5EAc100) administrou-se estrogÃnio (valerato de estradiol, 4mg, dose Ãnica). Os dois grupos restantes serviram como controles negativos (G6M, G7) e nÃo receberam estÃmulo estrogÃnico. ApÃs 60 dias, iniciou-se a segunda fase do estudo, compreendendo um perÃodo de dez dias. A Ac e EAc (2/100Hz), foram aplicadas, sob anestesia, em dias alternados, por 20 minutos, durante nove dias nos grupos G3Ac, G4EAc2, G5EAc100; MTF foi administrada diariamente, por gavagem, durante nove dias aos grupos G2M e G6M. No 10 dia desta fase, todas as ratas foram submetidas ao teste de tolerÃncia oral a glicose,e avaliadas em trÃs ocasiÃes: antes do inicio do teste e apÃs 60/120 minutos; seguiu-se a laparotomia, sob anestesia, para coleta de sangue na artÃria aorta abdominal e exÃrese do Ãtero e ovÃrios para exames a seguir: dosagem de SubstÃncias Reativas ao Ãcido TiobarbitÃrico (TBARs), da Glutationa (GSH) reduzida, da Mieloperoxidase (MPO) e da histopatologia ovariana. Os resultados mostraram um aumento significativo das concentraÃÃes plasmÃticas de GSH nos grupos G3Ac, G4EAc2 e G5EAc100 comparados ao G1 (24,50Â1,59 vs 20,30Â0,43, p<0,05; 30,80Â3,22 e 40,30Â3,48 vs 20,30Â0,43, p<0,0001), respectivamente. Houve aumento significante das concentraÃÃes de GSH no tecido ovariano das ratas tratadas com EAc2/100 (47,00Â17,60 vs 25,70Â2,33, p<0,05 e 63,00Â12,40 vs 25,70Â2,33, p<0,0001). A EAc2/100 promoveu aumento significante nas concentraÃÃes plasmÃticas de TBARS (0,231 0,09 vs 0,054Â0,07, p<0,05 e 0,296Â0,09 vs 0,054Â0,07, p<0,001). Houve reduÃÃo significante na atividade da MPO ovariana nos grupos G4EAc2 e G5EAc100 (0,59Â0,21 vs 1,76Â0,31, p<0,05 e 0,65Â0,05 vs 1,76Â0,31, p<0,0001). A administraÃÃo de MTF nÃo promoveu alteraÃÃes nos marcadores oxidativos ou inflamatÃrios. NÃo mostrou alteraÃÃo da glicemia em nenhum dos grupos estudados. No estudo do nÃmero de folÃculos, corpos lÃteos e cistos foliculares nÃo houve diferenÃa significativa entre todos os grupos estudados, ao exame histopatolÃgico. Conclui-se que a aplicaÃÃo de EAc2/100Hz promove proteÃÃo local e sistÃmica sobre o estresse oxidativo por aumento das concentraÃÃes de GSH, alÃm de reduzir o estado inflamatÃrio no ovÃrio de ratas sadias submetidas a estimulo estrogÃnico. / O desempenho fisiolÃgico da atividade celular requer um equilÃbrio entre a produÃÃo de espÃcies de radicais livres e a sua desativaÃÃo por agentes reguladores e protetores. Quando esse equilÃbrio à quebrado, surge o estresse oxidativo. Diversos estudos experimentais utilizando estrÃgenos para a induÃÃo de distÃrbios ovarianos e metabÃlicos, com destaque para a SÃndrome dos OvÃrios PolicÃsticos (SOP), estÃo disponÃveis na literatura cientÃfica. A Metformina (MTF) à um anti-hiperglicemiante, frequentemente utilizado para tratamento da SOP, permitindo a restauraÃÃo da ciclicidade menstrual, induÃÃo da ovulaÃÃo e o aumento da ocorrÃncia de gestaÃÃo. Na Medicina Tradicional Chinesa, a Acupuntura (Ac) e a Eletroacupuntura (EAc) sÃo utilizadas na promoÃÃo do equilÃbrio orgÃnico, mediante estÃmulo de vias nervosas produtoras de neurotransmissores especÃficos, resultando em uma resposta anti-inflamatÃria, analgÃsica e reguladora autonÃmica. Neste estudo, objetivou-se avaliar os efeitos da MTF, da Ac e da EAc aplicadas nos acupontos Zusanli (E36) e Sanyjiao (BP6), sobre o estresse oxidativo sistÃmico e local, inflamaÃÃo e glicemia em ratas sadias submetidas a estÃmulo estrogÃnico. No experimento, 42 ratas foram distribuÃdas aleatoriamente em sete grupos. Em 30 ratas (grupos G1C+, G2M, G3Ac, G4EAc2, G5EAc100) administrou-se estrogÃnio (valerato de estradiol, 4mg, dose Ãnica). Os dois grupos restantes serviram como controles negativos (G6M, G7) e nÃo receberam estÃmulo estrogÃnico. ApÃs 60 dias, iniciou-se a segunda fase do estudo, compreendendo um perÃodo de dez dias. A Ac e EAc (2/100Hz), foram aplicadas, sob anestesia, em dias alternados, por 20 minutos, durante nove dias nos grupos G3Ac, G4EAc2, G5EAc100; MTF foi administrada diariamente, por gavagem, durante nove dias aos grupos G2M e G6M. No 10 dia desta fase, todas as ratas foram submetidas ao teste de tolerÃncia oral a glicose,e avaliadas em trÃs ocasiÃes: antes do inicio do teste e apÃs 60/120 minutos; seguiu-se a laparotomia, sob anestesia, para coleta de sangue na artÃria aorta abdominal e exÃrese do Ãtero e ovÃrios para exames a seguir: dosagem de SubstÃncias Reativas ao Ãcido TiobarbitÃrico (TBARs), da Glutationa (GSH) reduzida, da Mieloperoxidase (MPO) e da histopatologia ovariana. Os resultados mostraram um aumento significativo das concentraÃÃes plasmÃticas de GSH nos grupos G3Ac, G4EAc2 e G5EAc100 comparados ao G1 (24,50Â1,59 vs 20,30Â0,43, p<0,05; 30,80Â3,22 e 40,30Â3,48 vs 20,30Â0,43, p<0,0001), respectivamente. Houve aumento significante das concentraÃÃes de GSH no tecido ovariano das ratas tratadas com EAc2/100 (47,00Â17,60 vs 25,70Â2,33, p<0,05 e 63,00Â12,40 vs 25,70Â2,33, p<0,0001). A EAc2/100 promoveu aumento significante nas concentraÃÃes plasmÃticas de TBARS (0,231 0,09 vs 0,054Â0,07, p<0,05 e 0,296Â0,09 vs 0,054Â0,07, p<0,001). Houve reduÃÃo significante na atividade da MPO ovariana nos grupos G4EAc2 e G5EAc100 (0,59Â0,21 vs 1,76Â0,31, p<0,05 e 0,65Â0,05 vs 1,76Â0,31, p<0,0001). A administraÃÃo de MTF nÃo promoveu alteraÃÃes nos marcadores oxidativos ou inflamatÃrios. NÃo mostrou alteraÃÃo da glicemia em nenhum dos grupos estudados. No estudo do nÃmero de folÃculos, corpos lÃteos e cistos foliculares nÃo houve diferenÃa significativa entre todos os grupos estudados, ao exame histopatolÃgico. Conclui-se que a aplicaÃÃo de EAc2/100Hz promove proteÃÃo local e sistÃmica sobre o estresse oxidativo por aumento das concentraÃÃes de GSH, alÃm de reduzir o estado inflamatÃrio no ovÃrio de ratas sadias submetidas a estimulo estrogÃnico. / The physiological performance of cellular activity requires a balance between the production of free radicals and their deactivation by regulators and surge protectors. When this balance is broken, the oxidative stress takes place. Several experimental studies using estrogens to induction of ovarian and metabolic disorders, with emphasis on the polycystic ovary syndrome (PCOS), are available in the scientific literature.The Metformin (MTF) is a medication used for diabetic patients, and is often used for treatment of Polycystic Ovary Syndrome (PCOS), allowing restoration of cyclicality, induction of ovulation and menstruation. Acupuncture (Ac) and Electroacupuncture (EAc) are used in Traditional Chinese Medicine for the promotion of organic equilibrium, through stimulation of nerve pathways producing specific neurotransmitters, resulting in an antinflammatory, analgesic and autonomic regulatory response.This study aimed at evaluating the effects of MTF and Ac and EAc, applied on Zusanli (E36) and Sanyjiao (BP6) acupoints on the local and systemic oxidative stress, inflammation and blood glucose levels in healthy rats submitted to estrogenic stimulation. In the experiment, 42 rats were distributed randomly assigned into seven groups. In the experiment, 42 rats were randomly assigned into seven groups. Thirty rats (groups G1C , G2M, G3Ac, G4EAc2, G5EAc100) were administered estrogen (estradiol valerate, 4mg, single dose). The two remaining groups served as negative controls (G6M, G7) and received no estrogenic stimulation. After 60 days, began the second phase of the study, comprising a ten-day period. Ac and EAc (2/100Hz), were applied for 20 minutes, under anesthesia, in alternated days during nine days, to groups G3Ac, G4EAc2, and G5EAc100. MTF was given daily during nine days by gavage to G2M and G6M groups. On the 10th day, all rats were subjected to the oral glucose tolerance test, and evaluated on three occasions: before the beginning of the test and after 60/120 minutes. Next, followed laparotomy, under anesthesia, for collection of blood from the abdominal aorta artery and harvesting of uterus and ovary for examination. Parameters analysed included the Thiobarbituric Acid Reactive Substances (TBARS), reduced Glutathione (GSH), Myeloperoxidase (MPO), and ovarian histopathology. At the end of the experiment plasma concentrations of GSH increased significantly in G3Ac, G4EAc2 and G5EAc100 groups compared to G1 (24.50Â1.59 vs 20.30Â0.43, p<0.05; 30.80Â3.22 and 40.30Â3.48 vs 20.30Â0.43, p<0.0001) respectively. There has been a significant increase in concentrations of GSH in ovarian tissue of rats treated with EAc2/100 (47.00Â17.60 vs 25.70Â2.33, p<.005 and 63.00Â12,40 vs 25,70Â2.33, p<0.0001). There was a significant reduction in ovarian MPO activity in groups G4EAc2 and G5EAc100 (0.59Â0.21 vs 1.76Â0.31, p<0.05 and 0.65Â0.05 vs 1.76Â0.31p<0.001). MTF did not promote changes in oxidative or inflammatory markers. There was no change in blood glucose levels in any of the groups studied. Corpus luteum and follicular cysts number were not different in all groups. It is concluded that EAc2/100Hz treatments promote systemic and local protection on oxidative stress by increasing GSH concentrations and by reducing the inflammatory status in the ovary of healthy rats submitted to estrogenic stimulation. / The physiological performance of cellular activity requires a balance between the production of free radicals and their deactivation by regulators and surge protectors. When this balance is broken, the oxidative stress takes place. Several experimental studies using estrogens to induction of ovarian and metabolic disorders, with emphasis on the polycystic ovary syndrome (PCOS), are available in the scientific literature.The Metformin (MTF) is a medication used for diabetic patients, and is often used for treatment of Polycystic Ovary Syndrome (PCOS), allowing restoration of cyclicality, induction of ovulation and menstruation. Acupuncture (Ac) and Electroacupuncture (EAc) are used in Traditional Chinese Medicine for the promotion of organic equilibrium, through stimulation of nerve pathways producing specific neurotransmitters, resulting in an antinflammatory, analgesic and autonomic regulatory response.This study aimed at evaluating the effects of MTF and Ac and EAc, applied on Zusanli (E36) and Sanyjiao (BP6) acupoints on the local and systemic oxidative stress, inflammation and blood glucose levels in healthy rats submitted to estrogenic stimulation. In the experiment, 42 rats were distributed randomly assigned into seven groups. In the experiment, 42 rats were randomly assigned into seven groups. Thirty rats (groups G1C , G2M, G3Ac, G4EAc2, G5EAc100) were administered estrogen (estradiol valerate, 4mg, single dose). The two remaining groups served as negative controls (G6M, G7) and received no estrogenic stimulation. After 60 days, began the second phase of the study, comprising a ten-day period. Ac and EAc (2/100Hz), were applied for 20 minutes, under anesthesia, in alternated days during nine days, to groups G3Ac, G4EAc2, and G5EAc100. MTF was given daily during nine days by gavage to G2M and G6M groups. On the 10th day, all rats were subjected to the oral glucose tolerance test, and evaluated on three occasions: before the beginning of the test and after 60/120 minutes. Next, followed laparotomy, under anesthesia, for collection of blood from the abdominal aorta artery and harvesting of uterus and ovary for examination. Parameters analysed included the Thiobarbituric Acid Reactive Substances (TBARS), reduced Glutathione (GSH), Myeloperoxidase (MPO), and ovarian histopathology. At the end of the experiment plasma concentrations of GSH increased significantly in G3Ac, G4EAc2 and G5EAc100 groups compared to G1 (24.50Â1.59 vs 20.30Â0.43, p<0.05; 30.80Â3.22 and 40.30Â3.48 vs 20.30Â0.43, p<0.0001) respectively. There has been a significant increase in concentrations of GSH in ovarian tissue of rats treated with EAc2/100 (47.00Â17.60 vs 25.70Â2.33, p<.005 and 63.00Â12,40 vs 25,70Â2.33, p<0.0001). There was a significant reduction in ovarian MPO activity in groups G4EAc2 and G5EAc100 (0.59Â0.21 vs 1.76Â0.31, p<0.05 and 0.65Â0.05 vs 1.76Â0.31p<0.001). MTF did not promote changes in oxidative or inflammatory markers. There was no change in blood glucose levels in any of the groups studied. Corpus luteum and follicular cysts number were not different in all groups. It is concluded that EAc2/100Hz treatments promote systemic and local protection on oxidative stress by increasing GSH concentrations and by reducing the inflammatory status in the ovary of healthy rats submitted to estrogenic stimulation.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A anemia falciforme (AF) Ã uma das alteraÃÃes genÃticas mais comuns em nosso paÃs. Os haplÃtipos da &#61538;s-globina estÃo associados com a heterogeneidade clÃnica apresentada pela doenÃa. Os portadores de AF sÃo submetidos a elevados nÃveis de estresse oxidativo. A hidroxiurÃia (HU) tem sido utilizada no tratamento por sua aÃÃo de elevar os nÃveis de hemoglobina fetal e aÃÃo antioxidante. O estudo teve como objetivo investigar o impacto do uso da HU e dos haplÃtipos no perfil oxidativo nos pacientes com AF. Foram analisadas amostras de 64 pacientes acompanhados no Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio - HUWC e do grupo controle de 20 indivÃduos sem hemoglobinopatias. Os pacientes foram estratificados em grupos: uso de HU > 1 ano, uso de HU &#8804; 1 ano e sem uso de HU (SHU). A confirmaÃÃo do diagnÃstico e a anÃlise dos haplÃtipos foram realizadas atravÃs de estudo molecular. As dosagens do nitrito (NO2-), malonaldeÃdo (MDA), glutationa peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT), glutationas total (GSSG+GSH), oxidada (GSSG) e reduzida (GSH) e da relaÃÃo GSSG/GSH (glutationas oxidada/reduzida) foram realizadas por espectrofotometria. Os nÃveis mÃdios de NO2-, e MDA mostraram-se mais elevados no grupo SHU, sendo significante apenas para o MDA (p < 0,05). O grupo SHU apresentou atividade mÃdia das enzimas CAT (p = 0,031) e GSH-Px (p = 0,036) inferiores aos demais grupos e maior relaÃÃo GSSG/GSH (p < 0,05). A avaliaÃÃo do estresse oxidativo em relaÃÃo aos haplÃtipos demonstrou que na populaÃÃo sem uso de HU os nÃveis de NO2- e de MDA foram semelhantes entre os grupos, com um aumento nÃo significante da GSH-Px no grupo Bantu/n em relaÃÃo ao Benin/n e do Ãndice GSSG/GSH no grupo Benin/n em relaÃÃo ao Bantu/n. Na populaÃÃo em uso de HU verificou-se um aumento nÃo significante dos nÃveis de NO2- no grupo Bantu/n em relaÃÃo ao Benin/n com resultados semelhantes de MDA entre os grupos e um aumento significante da GSH-Px (p<0,03) no grupo Benin/n em relaÃÃo ao Bantu/n. Os resultados da CAT foram semelhantes entre os grupos. A relaÃÃo GSSG/GSH foi maior, porÃm nÃo significante no grupo Bantu/n em relaÃÃo ao Benin/n. Os resultados do presente estudo reforÃam a hipÃtese de que os pacientes com AF apresentam um estado hiperoxidativo com nÃveis elevados dos produtos do estresse oxidativo e diminuÃdos do perfil antioxidante e que a hidroxiurÃia teve um impacto sobre o perfil oxidativo. No entanto, em relaÃÃo ao impacto dos haplÃtipos no estresse oxidativo, estudos posteriores com uma maior amostragem devem ser recomendados para confirmar nossos resultados, considerando que o grupo de pacientes nÃo tratados com HU foi menor que o grupo de pacientes em uso de HU, o que pode ter interferido na anÃlise estatÃstica dos resultados. / The sickle cell anemia is one of the most common genetic disorders in our country. The &#61538;-globin haplotypes are associated with the clinical heterogeneity of the disease. Individuals with sickle cell disease are subjected to high levels of oxidative stress. Hydroxyurea (HU) has been used as treatment and it increases the levels of fetal hemoglobin having an action antioxidant. The study aimed to investigate the impact of the use of HU and haplotypes in the oxidative status in patients with sickle cell anemia. Samples from 64 patients treated at the University Hospital Walter CantÃdio - HUWC and the control group of 20 individuals without hemoglobinopathies. Patients were stratified into groups: the first one using HU > 1 year, the second using HU &#8804; 1 year and the third using of HU (SHU). Confirmation of the diagnosis and analysis of haplotypes were performed by molecular study. The measurements of nitrite (NO2-), malonaldehyde (MDA), glutathione peroxidase (GSH-Px), catalase (CAT), glutathione total (GSSG+GSH), oxidized (GSSG) and reduced (GSH) and the ratio GSSG/GSH (glutathione oxidized/reduced) were performed by spectrophotometry. Mean levels of NO2- and MDA were shown to be higher in SHU group, being significant only for MDA (p < 0,05). The assessment of oxidative stress in relation to haplotypes showed that the population without the use of HU levels of NO2- and MDA were similar between groups, with an insignificant increase of GSH-Px in the Bantu/n compared with Benin/n and index GSSG/GSH in the Benin/n compared with Bantu/n. In the population using the HU there was a nonsignificant increase in the levels of NO2- in the Bantu/n compared with Benin/n with similar results between groups of MDA and a significant increase in GSH-Px (p <0.03) in the Benin/n compared with Bantu/n. The results of CAT were similar between groups. The ratio of GSSG/GSH was higher but not significant in the Bantu/n compared to Benin/n. The results of this study support the hypothesis that patients with the sickle cell anemia have a state hiperoxidativo products with high levels of oxidative stress and decreased antioxidant status and that of hydroxyurea had an impact on oxidative stress. However, regarding the impact of the haplotypes in oxidative stress, further studies with a larger sample should be recommended to confirm our results, considering that the group of patients not treated with HU was lower than the group of patients using HU, the which may have interfered in the statistical analysis of results.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A Gentamicina (GM) à um aminoglicosÃdeo amplamente utilizado contra infecÃÃes por microrganismos gram-negativos. LesÃo renal aguda (LRA) à a principal limitaÃÃo para a sua eficÃcia terapÃutica, ocorrendo em 10-20% dos pacientes. O evento capital à produÃÃo de espÃcies reativa de oxigÃnio (EROs) e alteraÃÃo na dinÃmica intra-renal e glomerular. O gengibre à fonte de substÃncias bioativas que podem ter efeito satisfatÃrio na renoproteÃÃo por aÃÃo antioxidante. A fraÃÃo ZOEB4 à enriquecida com os compostos com [6]-, [8]- e [10]- gingerol, isolada a partir do extrato do Zingiber officinale Roscoe, parece ser promissora diante desta nefrotoxidade, podendo auxiliar o rim na resposta antioxidante endÃgena, diminuindo o dano oxidativo e atenuando a resposta prÃ-inflamatÃria. O presente estudo visou investigar os possÃveis efeitos protetores da fraÃÃo ZOEB4 em um quadro de LRA pela administraÃÃo de GM 100 mg/kg i.p. Foram utilizados ratos Wistar, adultos machos, divididos em 6 grupos. Os grupos controles foram induzidos com NaCl 0,9% por 7dias e tratados oralmente com tween-80 2%, ou com a fraÃÃo ZOEB4 25 mg/kg; grupos induzidos a nefrotoxicidade com GM 100mg/kg por 7dias acrescido do tratamento oral com a fraÃÃo ZOEB4(6,25, 12,5 ou 25mg/kg) ou com tween 80 2%. O tratamento oral ocorreu durante 5 dias a partir do 5 dia de induÃÃo. Ao termino de cada tratamento foram coletados plasma, urina e rins para as anÃlises. Foram avaliados os parÃmetros bioquÃmicos indicativos de funÃÃo renal, funÃÃo tubular, perfil oxidativo, atividade das enzimas antioxidantes, a transcriÃÃo gÃnica de mediadores prÃ-inflamatÃrios atravÃs da reaÃÃo da polimerase em cadeia em tempo real (qPCR), alÃm da anÃlise histopatolÃgica. A GM alterou consideravelmente quase que todos os parÃmetros investigados: Clcr (0,7Â0,1 mL/min), ureia (73,1Â7,5 mg/dL) proteÃna urinÃria (93,5Â9,2 mg/dL), FENa (3,3Â0,5 %) e FEK (78,76 11,7 %), MDA renal(1,7Â0,3 nM/mg de prot.), GSH (101,6 23,4Âg/mg prot.), SOD (52,47Â7,7 U/mg prot.) e TNF-&#945; (3,2 Â0,7) estabelecendo assim, dano renal nos animais. O tratamento com a fraÃÃo ZOEB4 na dose de 25mg/kg desencadeou proteÃÃo diante desta nefrotoxicidade, revertendo a diminuiÃÃo do Clcr (1,3 0,2 mL/min), diminuindo os nÃveis sÃrico de ureia (41,7Â0,03 mg/dL), de proteÃna urinÃria (51,36Â3,2 mg/dL), da FENa (1,82  0,21 %) e FEK (48,8Â4,6 %), MDA (0,67Â0,2 nM/mg de prot.), alÃm de aumentar os nÃveis de GSH (250,2Â27,7 ug/mg prot.) e a atividade da SOD (112,2Â6,4 U/mg prot.) e, inibiÃÃo da transcriÃÃo de TNF-&#945; (1,5Â0,2). Desta forma, proporcionando proteÃÃo a funÃÃo renal. Estes resultados, acrescentado aos relatos de estudos prÃvios realizados com os compostos desta planta, indicam um futuro promissor para a utilizaÃÃo dos gingerois como um coadjuvante no tratamento diante de LRAs induzidas por aminoglicosÃdeos.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / IntroduÃÃo: As lesÃes renais na hansenÃase tem grande importÃncia, pois podem evoluir para uma doenÃa renal de etiologia glomerular (glomerulonefrites, amiloidose) ou tubulointersticial. Objetivo: Investigar disfunÃÃes renais em pacientes com hansenÃase utilizando marcadores tradicionais de funÃÃo renal e a ProteÃna QuimiotÃtica de MonÃcitos-1 (MCP-1) urinÃria. PopulaÃÃo e Metodologia: Foi realizado estudo transversal e prospectivo de 44 pacientes com hansenÃase em todas as formas clÃnicas, antes do inÃcio do tratamento, sem estado reacional e sem outras nefropatias. Os pacientes foram acompanhados em centros pÃblicos de saÃde em Fortaleza, CearÃ, Brasil entre agosto de 2012 e agosto de 2013. O estudo foi aprovado pelo Comità de Ãtica em Pesquisa do Hospital UniversitÃrio Walter CantÃdio da Universidade Federal do Cearà (No: 267.426). Os pacientes foram comparados com um grupo controle composto por 15 indivÃduos sadios. Foi calculada a fraÃÃo de excreÃÃo de eletrÃlitos, estimada a taxa de filtraÃÃo glomerular (TFG), proteinÃria e microalbuminÃria. O estresse oxidativo urinÃrio foi quantificado pelo MalonaldeÃdo (MDA) urinÃrio e o MCP-1 urinÃrio foi quantificado atravÃs da tÃcnica do ELISA sanduÃche. Os valores foram normalizados pela creatinina urinÃria. Resultados: NÃo houve diferenÃa significativa entre a idade, sexo, peso corporal e pressÃo arterial entre os grupos. A idade mÃdia dos pacientes foi de 36Â10 anos, sendo 61 % do gÃnero masculino. O tempo de doenÃa variou de um mÃs a 8 anos, com mÃdia de 17 meses. A baciloscopia foi positiva em 26 pacientes (59,1%) e negativa em 18 (40,9%). Quanto à classificaÃÃo: 14 pacientes (31,8%) eram do pÃlo tuberculÃide (TT/DT), 19 (43,2%) eram dimorfos (DD) e 11 (25%) eram do pÃlo virchowiano (DV/VV). As provas de funÃÃo renal nÃo diferiram (p>0,05), com exceÃÃo da proteinÃria. Os pacientes com hansenÃase tiveram nÃveis elevados de proteinÃria (97,6Â69,2 vs 6,5Â4,3 mg/g-Cr, p<0,001) do MDA urinÃrio (1,77Â1,31 vs 1,27Â0,66 mmol/g-Cr, p=0,0372) e do MCP-1 urinÃrio (101Â79,8 vs 34,5Â14,9 mg/g-Cr, p=0,006) em relaÃÃo ao grupo controle respectivamente. O MCP-1 urinÃrio esteve maior nos pacientes multibacilares em relaÃÃo aos paucibacilares (122,1Â91,9 vs 72Â46,1 mg/g-Cr, p=0,023), respectivamente e se correlacionou positivamente com a baciloscopia (r=0,104; p=0,035), com a albuminÃria (r=0,171; p=0,006) e com o MDA urinÃrio (r=0,205; p=0,002). ConclusÃo: Em pacientes com hansenÃase sem doenÃa renal clÃnica, o MCP-1 urinÃrio esteve aumentado sobretudo no pÃlo virchowiano, e se associou com marcadores de progressÃo de lesÃo renal, apresentando grande utilidade como preditor de disfunÃÃo renal. / Introduction: Leprosy patients can present with kidney disease from glomerular (glomerulonephritis, amyloidosis) or tubule-intertitial etiology. Aims: To evaluate renal abnormalities in leprosy patients through traditional markers of renal disease and Monocyte Chemotactic Protein-1 (MCP-1). Methods: This is a cross-sectional study of 44 patients with clinical and laboratory diagnosis of leprosy and with no previous anti-mycobacterium treatment and reaction episode. Patients were recruited in public health centres in Fortaleza, Ceara, Brazil between August 2012 and August 2013. The protocol of this study was approved by the Ethical Comitee of the Walter Cantidio University Hospital, Federal University of Ceara, Brazil (N 267.426). Also, a group of 15 healthy subjects were included as a control group. Glomerular filtration rate (GFR), protein excretion, microalbuminuria and Urinary oxidative stress (malondialdehyde-MDA) were estimated. Urinary MCP-1 was determined by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay. All urine measurements were normalized by urinary creatinine concentration. Results: Age and gender were similar between leprosy patients and control groups. Patientsâ average age was 36Â10 years, and 61% were male. Time from symptoms to leprosy diagnosis varied from one month to 8 years, with a median time of 17 months. Twenty-six patients had skin smear-positive test (59,1%) and 18 were negative (40,1%). Clinically, there were 14 (31,8%) tuberculoid polar form (TT/BT), 19 (43,2%) boderline (BB) and 11 (25%) lepromatous polar form (LL/BL). Regarding renal function, no patient had chronic kidney disease. Leprosy patients had a higher urine protein excretion (97,6Â69,2 vs 6,5Â4,3 mg/g-Cr, p<0,001), urinary MDA (1,77Â1,31 vs 1,27Â0,66 mmol/g-Cr, p=0,0372) and urinary MCP-1 (101Â79,8 vs 34,5Â14,9 mg/g-Cr, p=0,006) than healthy controls. Urinary MCP-1 was higher in multibacillary than in paucibacillary patients (122,1Â91,9 vs 72Â46,1 mg/g-Cr, p=0,023). There was a positive correlation between urinary MCP-1 and bacteriological index in skin smear (r=0,104; p=0,035), urinary MCP-1 and albumin excretion rate (r=0,171; p=0,006) and urinary MCP1 and urinary MDA (r=0,205; p=0,002). Conclusion: Leprosy patients with no clinical kidney disease have increased urinary MCP-1 and its levels are even higher according patients approximates to lepromatous polar form. Moreover, urinary MCP-1 was associated with urinary oxidative stress and urine albumin excretion, suggesting these patients are at increased risk of developing clinical kidney disease in the future.

FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / The present study was carried out to elucidate the relationship between seed ageing and oxidative damage in two cowpea (Vigna unguiculata (L.) Walp.) cultivars, namely PitiÃba and PÃrola.The seeds were articially aged at 45 ÂC and 99% relative humidity until 72 h and daily harvested. Seed germination, electrolyte leakage, lipid and protein oxidation were evaluated. Moreover, changes in superoxide dismutase (SOD), ascorbate peroxidase (APX) and catalase (CAT) activity as their isoform pattern and CAT and APX mRNA expression were also investigated. Only in PÃrola seeds germinability was decreased whereas electrolyte leakage was increased with artificial ageing, indicating membrane damage. Moreover, PÃrola seeds presented higher lipid and protein oxidative damage than the PitiÃba ones. Total SOD activity was not altered by the treatment in both cultivars. Zymogram analysis reveled five different isoforms, designated SOD1 to SOD5 according to the eletrophoretic migration. No significant difference in the SOD isoenzyme pattern up to 72 h were detected. Specific inhibition with peroxide and cyanide showed SOD1 and SOD2 as SOD-Mn and SOD3, SOD4 and SOD5 as SOD-Cu/Zn isoforms. It was verified a cross-talk between CAT and APX activities through artificial ageing. At 72 h of treatment, CAT mRNA expression and activity increased in PitiÃba seeds and decreased in the PÃrola ones. Conversely, APX mRNA expression and activity showed an opposite pattern in the studied cultivars. Imunoblot analysis demostrated that no significant changes in CAT content were verified in PÃrola and PitiÃba seeds during induced aging. Thus, the CAT turnover did not necessarily involve coordinated mRNA synthesis, protein synthesis and protein degradation. In conclusion, lipid and protein oxidative damage were narrowly involved in seed aging in cowpea. PitiÃba seeds were more resistant to age-induced oxidative damage than that of PÃrola. PitiÃba seed resistance against aging were related to induced CAT expression and its activity, suggesting that this enzime play a role in oxidative damage protection. / O presente estudo foi desenvolvido na intenÃÃo de elucidar a relaÃÃo entre o envelhecimento de sementes e danos oxidativos em duas cultivares contrastantes de caupi (Vigna unguiculata (L.) Walp.), denominadas PitiÃba e PÃrola. As sementes foram artificialmente envelhecidas a 45 ÂC e 99% de umidade relativa atà 72 h e coletadas diariamente. GerminaÃÃo de sementes, vazamento de eletrÃlitos, oxidaÃÃo de lipÃdios e proteÃnas foram avaliados. AlÃm disso, alteraÃÃes em atividade de enzimas como dismutase de superÃxido (SOD), peroxidase de ascorbato (APX) e catalase (CAT) assim como o padrÃo de suas isoformas e expressÃo de RNAm de CAT e APX tambÃm foram investigados. Somente em sementes de PÃrola decresceu a germinabilidade enquanto que aumentou significativamente o vazamento de eletrÃlitos com o envelhecimento artificial, indicando danos de membrana. AlÃm disso, sementes de PÃrola apresentaram maiores danos oxidativos em lipÃdios e proteÃnas do que sementes de PitiÃba. A atividade total da SOD nÃo foi alterada durante o tratamento de sementes em ambas cultivares. AnÃlise de zimograma revelou cinco diferentes isoformas, designadas SOD1 a SOD5 de acordo com a migraÃÃo eletroforÃtica. NÃo houve diferenÃa significativa no padrÃo isoenzimÃtico de SOD durante as 72 h de tratamento. InibiÃÃo especÃfica com perÃxido de hidrogÃnio e cianeto revelou as isoformas SOD1 e SOD2 como SOD-Mn e SOD3, SOD4 e SOD5 com SOD Cu/Zn. Foi verificado um âcross-talkâ entre as atividades de CAT e APX durante o envelhecimento artificial. As 72 h de tratamento, a expressÃo de RNAm de CAT e sua atividade aumentaram em PitiÃba e diminuÃram em sementes de PÃrola. A expressÃo e a atividade de APX demonstrou um padrÃo oposto nas cultivares estudadas. AnÃlise de imunoblot demonstrou que nÃo houve alteraÃÃes significativas no conteÃdo de CAT em ambas as cultivares durante a induÃÃo do envelhecimento. Desse modo, o turnover de CAT nÃo envolve necessariamente a sÃntese coordenada de RNAm, sÃntese de proteÃna e degradaÃÃo de proteÃna. Em conclusÃo, danos oxidativos em lipÃdios e proteÃnas estÃo estreitamente envolvidos no envelhecimento de sementes de caupi. Sementes de PitiÃba sÃo mais resistentes aos danos oxidativos induzidos por envelhecimento do que sementes de PÃrola. A resistÃncia de sementes de PitiÃba contra o envelhecimento parece estar relacionada à induÃÃo da expressÃo e atividade de CAT, sugerindo que esta enzima realiza uma funÃÃo protetora contra danos oxidativos.

Evidências sugerem que as células da glia desempenham um papel importante na sinalização neuronal e na resposta inflamatória no Sistema Nervoso Central (SNC). Respostas inflamatórias crônicas, bem como a ativação da glia estão associadas com doenças neurodegenerativas, como Parkinson e Alzheimer. A inflamação crônica pode ser modulada por altas concentrações de espécies reativas de oxigênio (ERO) que potencializam esse quadro. O estrógeno (E2) é bem conhecido por suas ações neuroprotetoras que podem ser exercidas via receptores clássicos (ESR1, ESR2), não-classicos (GPER-1) ou ainda por sua ação antioxidante, proveniente da alta semelhança com as moléculas dos flavonóides. A ação do E2 no SNC é relevante uma vez que este hormônio está relacionado com a modulação da memória, neurogênese e plasticidade. Este trabalho tem como objetivo investigar o papel protetor do E2 em linhagem de células C6 de glioma de ratos em um modelo de estresse oxidativo que induz morte celular pela exposição a concentrações tóxicas de peróxido de hidrogênio (H2O2). Ensaios de PCR, Western Blot e de imunofluorescência confirmaram a presença e funcionalidade dos receptores ESR1, enquanto ensaios de PCR mostraram a presença do RNAm para o GPER-1 em células C6. Nossos resultados confirmaram que a H2O2 induz morte nas células C6 e o pré-tratamento com E2 (por 24 horas) e G1 (por 20 minutos) diminuiu a toxicidade da H2O2 de maneira dose-dependente, gerando aumento de viabilidade celular. Estes resultados destacam o envolvimento do E2 e seus receptores na prevenção do dano celular em células da glia. Além disso, eles também sugerem que o rápido efeito protetor do E2 parece estar associado com a sinalização rápida do E2 via GPER-1. Por Western blot e RT-PCR avaliamos a participação da via AKT-CREBBDNF frente aos tratamentos com E2, moduladores seletivos de estrógeno (SERMs) e G1, onde observamos que estes são capazes de modular a expressão da proteína AKT e os níveis de RNAm para BDNF. / Evidence suggests that glial cells play an important role in neuronal signaling and inflammatory responses in the central nervous system (CNS). Chronic inflammatory responses, as well as activation of glia, are associated with neurodegenerative disorders such as Parkinson´s and Alzheimer´s diseases. Chronic inflammation can be modulated by high concentrations of reactive oxygen species (ROS) that enhance this process. Estrogen (E2) is well known for its neuroprotective actions that can be performed via classical (ESR1, ESR2) and non-classical receptors (GPER-1) or by its antioxidant action due to its high similarity to flavonoids molecules. E2 action in the CNS is relevant as this hormone is associated to memory modulation, neurogenesis and plasticity. This work has as purpose to investigate the protective role of E2 in rat C6 glioma cell lines in a model of oxidative stress that induces cell death by exposure to toxic concentrations of hydrogen peroxide (H2O2). PCR, Western blot and immunofluorescence assays have confirmed the presence and functionality of the ESR1 receptor, while PCR assay has showed the presence of GPER-1 receptor mRNA in C6 cells. Our results confirmed that H2O2 induces cell death and pre-treatment with E2 (24 hours) and G1 (20 minutes) reduces H2O2 toxicity in a dose-dependent way, leading to increased cell viability. These results highlight the involvement of E2 and its receptors in preventing cell damage in glial cells. Moreover, they also suggest that the prompt E2 protective effect seems to be associated to the fast E2 signaling via GPER-1. We also evaluated the involvement of AKT-CREB-BDNF pathway when C6 cells were treated with E2, selective estrogen modulators (SERMs) and G1 by Western blot and RT-PCR assays, and we could notice that they can modulate the expression of AKT protein and BDNF RNAm levels.

Os óleos essenciais de três espécies de Schinus foram avaliados quanto à sua atividade fitotóxica na planta alvo Arabidopsis thaliana. Para esse fim, utilizou-se a abordagem convencional, que avalia o efeito dos aleloquímicos sobre a germinação e o crescimento de plântulas, mas também buscaram-se novas técnicas para compreender o modo de ação dos voláteis, a saber o efeito sobre o enraizamento adventício e a análise da expressão de genes por PCR em tempo real. Adicionalmente, foi realizada a caracterização química dos óleos essenciais por cromatografia gasosa bidimensional, demonstrando que o óleo de S. lentiscifolius é principalmente constituído por sesquiterpenos, enquanto que os de S. molle e S. terebinthifolius apresentam maior quantidade de monoterpenos. Os três óleos essenciais afetaram a porcentagem de germinação, o índice de velocidade de germinação, o crescimento da raiz primária e o crescimento da parte aérea de A. thaliana, mas não apresentaram efeito sobre a expressão dos genes ANP1 e CDKB1;1. Os voláteis também afetaram o processo de enraizamento adventício da planta alvo de uma maneira dose-dependente, afetando o tempo médio de enraizamento e o crescimento da maior raiz adventícia, mas não afetou a porcentagem de enraizamento nem o número de raízes por microestaca. A adição de uma auxina não reverteu os efeitos fitotóxicos induzidos pelos voláteis, mas a adição de uma citocina contribuiu na recuperação do atraso do processo de enraizamento quando os óleos essenciais de S. lentiscifolius e S. molle foram utilizados. Além disso, o Trolox®, um potente antioxidante, contribuiu na recuperação parcial dos efeitos inibitórios causados pelos óleos essenciais, indicando que eles induzem estresse oxidativo. Adicionalmente, foi realizada a detecção histoquímica de peróxido de hidrogênio nas microestacas expostas aos óleos essenciais. Os resultados demonstram que os efeitos fitotóxicos dos voláteis ocorrem por diversos mecanismos, incluindo estresse oxidativo e efeito sobre fitormônios. Esse estudo demonstrou que, devido às diversas técnicas que podem ser aplicadas, A. thaliana é uma espécie útil para ser utilizada em experimentos que avaliem o potencial alelopático de produtos naturais. / The essential oils of three Schinus species were evaluated for phytotoxic activity using Arabidopsis thaliana as target species. It was used the conventional approach, evaluating allelochemical effects on seed germination and seedling growth. Additionally, it was also employed new techniques in allelopathic potential area to understand the modes of action of volatiles, as the phytotoxic effects on adventitious rooting and the analysis of expression of genes by RT-qPCR. Furthermore, chemical characterization of essential oils using two-dimensional gas chromatography was carried out. S. lentiscifolius essential oil is mainly composed by sesquiterpenes, whereas S. molle and S. terebinthifolius presented high amounts of monoterpenes. Essential oils affected the germination rate (%), speed of accumulated germination, primary root length and shoot length of A. thaliana. However, the expression of the genes ANP1 and CDKB1; 1 was not affected. Volatiles also interfere on A. thaliana adventitious rooting in a dosedependent manner. Inhibitory effects were observed on mean rooting time and root length. Rooting percentage and number of roots per microcuttings were not affected by volatiles. Addition of an auxin not reversed phytotoxic effects induced by volatiles, but the addition of a cytokinin contributed to A. thaiana recover from the effects on mean rooting time caused by S. lentiscifolius and S. molle essential oils. Furthermore, Trolox®, a potent antioxidant, contributes to the partial recovery of the inhibitory effects caused by essential oils, indicating that volatiles induce oxidative stress. Histochemical detection of hydrogen peroxide after essential oil exposure was also carried out. Results demonstrated that the phytotoxic activity of volatiles may occur by several mechanisms, including oxidative stress and effects on phytohormones. This study also demonstrated A. thaliana is a useful species to be used in allelopathic potential evaluations due to the different techniques that can be applied.

Quitossomas são lipossomas revestidos por quitosana que representam uma alternativa aos lipossomas convencionais, no sentido de apresentarem uma melhor estabilidade e bioadesividade, características interessantes para formulações destinadas à via cutânea. Este trabalho teve como objetivo preparar e caracterizar suspensões de quitossomas contendo diferentes concentrações de melatonina (MEL) e avaliar in vivo a capacidade antioxidante da MEL associada aos quitossomas a partir da incorporação destes em hidrogéis. As suspensões de lipossomas e quitossomas apresentaram diâmetros médios entre 150 nm e 254 nm, índices de polidispersão em torno de 0,4, valores de potencial zeta entre -38 mV e -28 mV, pH em torno de 4,0, teor médio de MEL próximo a 100 % e eficiência de encapsulação entre 31,4 % e 60,8 %. Os resultados obtidos por raios- X a baixo ângulo revelaram a presença de estruturas unilamelares, também observadas nas fotomicrografias de microscopia eletrônica de transmissão. O estudo de estabilidade indicou que, no período de 90 dias, as suspensões de lipossomas apresentaram redução nos valores de diâmetro médio e de polidispersão, mas os valores de potencial zeta e do teor de MEL não sofreram alterações. As suspensões de quitossomas permaneceram estáveis em relação a estes parâmetros. Os resultados obtidos por Turbiscan LAb® foram semelhantes aos resultados demonstrados no estudo de estabilidade. As suspensões de lipossomas, de quitossomas e a solução hidroalcoólica da MEL foram incorporadas em hidrogéis de Natrosol® e apresentaram comportamento reológico pseudoplástico. Os gráficos de Turbiscan LAb® mostraram que os hidrogéis não apresentaram tendência à instabilidade. Os ensaios de estresse oxidativo revelaram uma maior proteção da pele dos camundongos que receberam tratamento tópico com hidrogéis contendo MEL frente aos efeitos deletérios gerados pela radiação UVA, apresentando menores níveis de formação de radicais livres e maiores níveis de tióis totais, comparados ao grupo submetido somente à radiação UV. As peles que receberam tratamento tópico com o hidrogel contendo MEL associada aos quitossomas apresentaram uma maior atividade da superóxido desmutase em relação aos demais tratamentos, indicando uma maior proteção cutânea. / Chitosomes are chitosan coated liposomes that represent an alternative to conventional liposomes since they present a better stability and bioadhesivity, characteristics which are interesting for formulations intented to cutaneous administration. The aim of this work was to prepare and characterize different concentrations of melatonin (MEL) loaded in chitosome suspensions and to evaluate, in vivo, the antioxidant capacity of MEL associated to chitosomes and incorporated in hydrogels. The liposome and chitosome suspensions presented mean diameters between 150 nm and 254 nm, polidispersity indexes around 0.4, zeta potential values between -38 mV and -28 mV, pH values close to 4.0, MEL content close to 100 % and encapsulation efficiency between 34.4 % and 60.8 %. The small angle X-rays analysis revealed the presence of unilamelar structures, also observed by transmission electronic microscopy. The stability studies indicated that, within 90 days, the liposome suspensions had a decrease in mean diameter values and in polydispersity indexes, but no alterations were detected in zeta potentials and MEL content. The chitosome suspensions remained stable in relation to these parameters during 90 days. The Turbiscan LAb® results were similar to those found in the stability studies. The liposome and chitosome suspensions and the hydroalchoholic melatonin solution were incorporated into Natrosol® hydrogels and presented pseudoplastic rheological profiles. The Turbiscan LAb® results showed that the hydrogels did not present instability tendency. The oxidative stress assays revealed an increase in mouse skin protection of those that were treated with hydrogels containing MEL, presenting free radical lower levels and total thiols higher levels compared to the group only submitted to UVA radiation. The skin that received hydrogels containing MEL associated to chitosomes presented higher superoxide dismutase activities compared to the other treatments, indicating a better cutaneous protection.

Orientador: Lucia Nassi Castilho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-08T17:01:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vasconcelos_EdilmaMariadeAlbuquerque_D.pdf: 990594 bytes, checksum: ec1dc188f8613c4270257732116a5e8b (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Atualmente, a aterosclerose é definida como uma doença crônica inflamatória caracterizada por elevado estresse oxidativo gerado por células da parede vascular. Neste estudo foi avaliada, em monócitos humanos, a contribuição de espécies reativas de oxigênio (EROs) mitocondrial nos processos do estresse oxidativo e inflamatório de pacientes dislipidêmicos. Vinte e nove indivíduos hiperlipidêmicos primários, sendo catorze portadores de hipercolesterolemia e quinze com hiperlipidemia mista (ambos sem uso de fármacos) e dezoito indivíduos normocolesterolêmicos, não tabagistas foram selecionados para este estudo. A geração de EROs e o potencial de membrana mitocondrial foram determinados em células mononucleares intactas, por meio de citometria de fluxo e a concentração plasmática de LDL oxidada (LDL-ox) por meio de ELISA. Apenas os monócitos isolados de indivíduos hipercolesterolêmicos apresentaram maior geração de EROs, porém ambos os grupos apresentaram concentração sérica de colesterol da LDL, LDL-ox e apolipoproteína B maiores do que o grupo-controle. Presença de LDL pequenas e densas também foi encontrada nos hiperlipidêmicos. Nos pacientes com hiperlipidemia mista igualmente foram detectadas, adicionalmente, concentrações significativamente maiores de insulina, triglicérides, colesterol de VLDL e ácidos graxos livres. Correlações positivas e significativas entre a geração de EROs mitocondrial com as concentrações séricas de LDL-oxidada e da proteína quimiotática para monócito-1 (MCP-1), foram encontradas. Esses resultados sugerem que a geração de EROs mitocondrial por monócitos circulantes em pacientes hiperlipidêmicos primários contribui para o estresse oxidativo e, portanto, para o desenvolvimento da aterosclerose, patologia comum nestes indivíduos. A hiperlipidemia está também acompanhada da elevação de marcadores inflamatórios séricos (ácido úrico e contagem global dos leucócitos). A correlação negativa encontrada entre a concentração sérica da interleucina 6 (IL-6) e da proteína induzida pelo IFN-? 10 (IP-10), nos pacientes hiperlipidêmicos, sugere que a IL-6 possa estar agindo como uma citocina antiinflamatória / Abstract: Actually, atherosclerosis is characterized like an inflammatory chronic disease due to a high oxidative stress state generated by vascular wall cells. In present study, we investigated the contribution of reactive oxygen species (ROS) generation by circulating monocyte mitochondria to the oxidative stress frequently observed in high risk hyperlipidemic subjects. Twenty-nine primary hyperlipidemic subjects (14 hypercholesterolemic and 15 combined hyperlipidemic) and 18 normolipidemic individuals, without any drug treatment and non-smokers, were enrolled in this study. The mitochondrial monocyte ROS generation and the mitochondrial electrical transmembrane potential in intact polymorphonuclear cells were estimated by flow cytometry and plasma oxidized LDL (ox-LDL) was measured by ELISA. The hypercholesterolemic, but not the combined hypelipidemic subjects presented higher levels of monocyte ROS generation when compared to control group. Both hyperlipidemic subjects presented elevated plasma levels of total LDL, oxidized LDL and apolipoprotein B. Combined hyperlipidemic individuals presented additionally increased levels of small dense LDL particles, insulin, triglycerides, VLDL-cholesterol and free fatty acids. Furthermore, highly significants positives correlations between monocyte ROS generation with oxidized LDL and monocyte chemotactic protein 1 (MCP-1) levels, were found. These data suggest that mitochondrial ROS production by circulating monocytes from primary hyperlipidemic subjects can contribute to the oxidative stress and hence to atherosclerosis, disease frequently found in this group. The hyperlipidemia is also associated with high levels of inflammatory markers (uric acid and leukocyte global count). A significant negative correlation between interleukin-6 (IL-6) and interferon-inducible protein 10 (IP-10) levels found in hyperlipidemic individuals may suggest an antinflamatory propertie of citokine IL-6 / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Eliana Cotta de Faria / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T21:51:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sodre_FabioLima_D.pdf: 2215244 bytes, checksum: d5f9f9a36b242a13e3536696c1a618e6 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A aterosclerose é uma doença crônica degenerativa das artérias, caracterizada pelo acúmulo de lipídios na parede arterial. Na década de setenta, Zilversmit postulou que o fenômeno pósprandial era promotor da aterosclerose. O mecanismo que conecta o estado pósprandial com a doença cardiovascular (DCV) inclui a disfunção endotelial, estresse oxidativo e inflamação. No presente estudo, foi estabelecida a composição química das subfrações das lipoproteínas de alta densidade (HDLs) em uma população adulta normolipidêmica brasileira e, comparada esta com outras populações. Além disto, as modificações na composição química desta partícula em indivíduos saudáveis normolipidêmicos foram descritas após a ingestão de uma dieta rica em lipídios. Estes dados demonstraram uma diminuição do conteúdo de ésteres de colesterol e aumento de triglicérides nas partículas de HDL, os quais refletem o aumento da atividade da enzima transferidora de ésteres de colesterol (CETP). Estas mudanças levam a uma atividade anti-oxidante reduzida da HDL. Por fim, este estudo evidenciou que a geração intracelular de espécies reativas ao oxigênio (ROS) está reduzida durante o período pósprandial. A diminuição do consumo de oxigênio celular e suas correlações com a geração de ROS indicam que a mitocôndria participa ativamente deste fenômeno. Disfunção endotelial foi outro achado durante este período. No mundo ocidental, o período pósprandial representa uma parte significativa do dia, ressaltando a importância deste estado no desenvolvimento da aterosclerose. A completa elucidação dos mecanismos envolvidos pode melhorar as intervenções dietéticas e levar a efeitos benéficos no combate ao estresse oxidativo e disfunção endotelial no período pós-prandial. / Abstract: Atherosclerosis is a chronic degenerative disease of the arteries, characterized by an accumulation of lipids in arterial walls. In 1970s, Zilversmit postulated that postprandial phenomenon was a promoter of atherosclerosis. The mechanisms that link the postprandial state with CVD include endothelial dysfunction, oxidative stress and inflammation. In present study, the chemical composition of high density lipoproteins (HDLs) subfractions in a Brazilian adult normolipidemic population was determinated and compared it with others populations. In addition, the modifications in chemical composition of this particle in healthy normolipidemic subjects after an intake of a fat-rich meal, was described. This data presents a diminished core content of cholesteryl ester (CE) and elevated triglyceride (TG) of postprandial HDL particles, which reflected enhanced activity of cholesteryl ester transfer protein (CETP). These changes lead to an impaired antioxidative activity of dense HDL. Finally, this study provides evidence that intracellular reactive oxygen species (ROS) generation is reduced during the postprandial period. The reduction of oxygen consumption and it correlation with ROS generation suggests that mitochondria plays a pivotal role in this phenomenon. Endothelial dysfunction was also found during this period. In western societies, a significant part of the day is spent in the postprandial state, further emphasising the importance of this period in the development of atherosclerosis. The complete elucidation of the involved mechanisms may improve the appropriateness of such dietary intervention supported by beneficial effects on postprandial oxidative stress and endothelial dysfunction. / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica