Assegurar o bem-estar dos animais de laboratório e evitar a dor e o sofrimento desnecessários são as principais considerações na experimentação. Por isso, a investigação em busca de novos protocolos anestésicos que garantam um mínimo ou nulo desconforto dos animais tem-se convertido num tema prioritário. Neste estudo realizou-se a comparação do efeito da combinação de xilazina (X) e ketamina (K) com acepromazina (A) e opióides [metadona (Me), morfina (Mo) e tramadol (T)] com a finalidade de avaliar sua influência nos parâmetros fisiológicos de ratos de laboratório, para ambos os sexos, bem como seu poder analgésico e o efeito da oxigenação sobre os mesmos. A associação XKA para ratos machos e fêmeas e a associação XKMe para fêmeas foram as mais seguras e eficazes para procedimentos anestésicos. Porém, os resultados do teste de formalina com a medição da vocalização ultrassônica (VUS) sugerem que o protocolo de XKA tem um poder analgésico baixo, não sendo indicado para procedimentos que possam gerar dor moderada ou severa. Todas as associações anestésicas tiveram efeitos importantes como diurese, manutenção dos olhos abertos e hiperglicemia, os quais devem ser considerados quando possam influenciar nos resultados experimentais. Também, se conseguiu demonstrar que a oxigenação melhora a saturação de oxigênio (SO2) e os valores da pressão parcial de oxigênio (pO2) confirmando que sua utilização deveria ser sempre parte dos procedimentos experimentais com anestesia injetável para evitar a hipoxemia. Não obstante, observou-se uma acidose respiratória por aumento da pressão parcial do CO2 (pCO2) e diminuição do pH, cuja causa se relacionou à hipoventilação por depressão respiratória e acúmulo de CO2 durante o transcorrer da anestesia. Tal situação demonstra a necessidade de oxigenar os animais desde a indução da anestesia e de administrar medicamentos para reverter a depressão respiratória como a naloxona, bem como utilizar animais que não apresentem nenhum tipo de comprometimento respiratório. Portanto, a inclusão de analgesia e a oxigenação nos protocolos anestésicos injetáveis devem ser utilizadas de forma rotineira garantindo a mínima presença de dor e, com isso, resultados mais confiáveis nos procedimentos experimentais. / Ensuring the wellbeing of laboratory animals and avoiding unnecessary pain and suffering is one of the main considerations in experimentation. Therefore, the investigation of new anesthetic protocols that guarantee a minimum or null discomfort of the animals has become a priority theme. In this study, it was made an evaluation of the effect of the combination of xylazine (X) and ketamine (K) with acepromazina (A) and opioids [methadone (Me), morphine (Mo) e tramadol (T)] with the purpose of comparing their influence on the physiological parameters of laboratory rats, for both sexes, and evaluating their analgesic power and the effect of the oxygenation on them. The XKA protocol for male and females rats and the XKMe protocol for females were the safest and most effective for anesthetic procedures. However, the results of the formalin test with the measurement of the ultrasonic vocalization (VUS) suggest that the XKA protocol had a low analgesic power, and it is not indicated for procedures that can generate moderate or severe pain. All anesthetic protocols had important effects as diuresis, maintenance of open eyes, and hyperglycemia; these effects should be considered when they could influence in the experimental results. It was demonstrated that oxygenation improves oxygen saturation (SO2) and oxygen partial pressure (pO2) confirming that its use should be considered in the experimental procedures with injectable anesthesia to avoid hypoxemia. Nevertheless, a respiratory acidosis was observed due to the increase in partial pressure of CO2 (pCO2) and the decrease in pH, that could be caused for the hypoventilation due to respiratory depression and CO2 accumulation during the course of anesthesia. This leads to consider the need to pre-oxygenate animals from induction, to use drugs to reverse respiratory depression such as naloxone, and to work with animals that are not respiratory compromised. Therefore the inclusion of analgesia and oxygenation in anesthesia protocols should begin to be used routinely ensuring minimal presence of pain and thus more reliable results in the experimental procedures.

A bactéria Lactococcus lactis subsp. lactis CECT-4434 foi empregada para investigar o efeito da composição do meio de cultivo na produção biotecnológica de biossurfactante e, adicionalmente bacteriocina. Utilizou-se resíduos agroindustriais, tais como soro de leite e vinhaça de uva, para formular meios de cultivos mais econômicos e naturais, suplementados sacarose e extrato de levedura. Um planejamento fatorial fracionado 24, com adição de três ensaios nos pontos centrais foi empregado para avaliar a influência destas variáveis. A produção de biossurfactante foi influenciada positivamente pela concentração soro de leite, onde 15 % deste demonstrou melhor resultado reduzindo a tensão superficial em cerca de 18,1 mN/m, alcançando produção máxima de biossurfactante equivalente em surfactina de 11,02 mg/L. Em relação à síntese de bacteriocina, a fonte de carbono adicional (sacarose) interferiu de forma antagonista, ou seja, quanto menor a concentração de sacarose, maior a síntese de bacteriocina (com aumento da zona de inibição em 14,2% contra Staphylococcus aureus CECT-239). Observou-se que o ensaio conduzido em biorreator, sob microaeração com 5% de oxigênio dissolvido, promoveu maior produção de biossurfactante (11,6 mg/L) quando comparados aos estudos conduzidos com maior concentração de oxigênio entre 30 a 100%, com produção em média de 2,3 mg/mL. Destaca-se que nenhum estudo da influência do oxigênio dissolvido, principalmente em microaerofilia, para a produção de biossurfactante por bactérias láticas já havia sido realizado. Ademais, o biossurfactante produzido se mostrou altamente estável frente a valores extremos de pH e temperatura, além de demonstrar notável propriedade antimicrobiana e antiadesiva, inibindo Listeria monocytogenes NADC 2045 e Salmonella entérica<i/> CECT-724 em mais de 90%. / Lactococcus lactis subsp. lactis CECT-4434 was used to investigate the effect of the composition of the culture media on the biotechnological production of biosurfactant and bacteriocin additionally. Agroindustrial residues, such as whey and grape vinasse, were used to formulate more economical and natural culture media, supplemented with sucrose and yeast extract. A fractional factorial design 24, with addition of three runs at the central points was used to evaluate the influence of these variables. The biosurfactant production was positively influenced by the concentration of whey, where 15% showed a better result reducing the surface tension by 18.1 mN/m, reaching a maximum production of biosurfactant equivalent in surfactin of 11.02 mg/L. In relation to bacteriocin synthesis, the sucrose interfered in an antagonistic way, that is, the lower the sucrose concentration, the greater the bacteriocin synthesis (with an increase in the zone of inhibition in 14.2% against Staphylococcus aureus CECT-239). It was observed that the bioreactor conducted under microaeration with 5% dissolved oxygen promoted a higher biosurfactant production (11.6 mg/L) when compared to studies conducted with a higher concentration of oxygen between 30 and 100%, with production on average 2.3 mg/mL. It is noteworthy that no study of the influence of dissolved oxygen, mainly in microaerophilic, for the biosurfactant production by lactic acid bacteria had already been carried out. In addition, the biosurfactant produced proved to be highly stable against extreme values of pH and temperature, and demonstrated remarkable antimicrobial and antiadhesive properties, inhibiting Listeria monocytogenes NADC 2045 and Salmonella entérica CECT-724 in more than 90%.

Hipercapnia, hipóxia e atelectasia pulmonar são eventos comuns em pacientes anestesiados. A ventilação mecânica pode ser usada nesses casos para garantir adequada troca de gases dos pacientes e melhora da oxigenação, porém seu uso implica em efeitos hemodinâmicos e pulmonares indesejáveis. Para minimizar estes, baixos valores volumes correntes são recomendados, além do uso de pressão positiva ao final da expiração (PEEP) e manobras de recrutamento alveolar (MRA). Este estudo intencionou avaliar o uso de volume corrente de 8mL/kg, além do uso de PEEP associada, ou não, a MRA quanto a oxigenação e troca gasosa de cães jovens, ASA I e II, submetidos a anestesia geral inalatória, para cirurgias ortopédicas e odontológicas, durante 1 hora e que permaneceram em decúbito dorsal. Para tanto, foram utilizados 27 cães, divididos em 2 grupos (14 no grupo PEEP e 13 no grupo MRA) de acordo com o uso isolado de PEEP ou associado a MRA. Todos os pacientes receberam acepromazina 0,03 mg/kg associada a meperidina 3 mg/kg (IM) como MPA, indução realizada com propofol em dose suficiente para intubação orotraqueal e manutenção realizada com isoflurano 1,0 a 1,6% em FiO2 de 50%. Todos os cães foram mantidos em decúbito dorsal logo após intubação, instituição do protocolo de ventilação determinado de acordo com o grupo em que foi alocado e uso de bloqueador neuromuscular rocurônio na dose de 0,6 mg/kg (IV). Após 15 minutos de instrumentação e estabilização do plano anestésico os dados de mecânica ventilatória, gasometria arterial, oxigenação e hemodinâmica foram coletados (M0). No grupo em que se realizou MRA, a PEEP saiu de 0, sofrendo acréscimos de 5 cmH2O a cada 3 minutos, chegando a 15 e retornando gradativamente a 5 cmH2O, pressão na qual foi mantido durante o resto do tempo anestésico. No grupo PEEP foi instituída a pressão de 5 cmH2O, sendo mantida até a extubação. Ao final da MRA (M15 15 minutos após M0) todos foram novamente coletados, assim como em M30 e M60 (respectivamente, 30 e 60 minutos após M15). Através dos parâmetros de capnometria, observou-se que o volume corrente utilizado foi eficiente para garantir troca gasosa em todos os pacientes incluídos no estudo. O uso da MRA foi suficiente para reabrir as áreas colapsadas do pulmão em M0, porém, quando comparado seus índices de oxigenação e complacência com aqueles encontrados no grupo PEEP, não houve superioridade de um dos grupos. O uso de PEEP 5 cmH2O foi capaz de manter os alvéolos sem sofrer re- colapso ao longo do período do estudo. O uso de MRA ou PEEP não interferiu nos parâmetros de hemodinâmica dos cães inseridos no estudo. / Hypercapnia, hypoxia and pulmonary atelectasis are common events in anesthetized patients. Mechanical ventilation can be used in these cases to ensure adequate gas exchange of patients and improvement of oxygenation, but its use implies undesirable hemodynamic and pulmonary effects. To minimize these, low tidal volumes are recommended, in addition to the use of positive end-expiratory pressure (PEEP) and alveolar recruitment maneuvers (ARMs). The aim of this study was to evaluate the use of current volume of 8mL / kg, in addition to the use of PEEP, associated to oxygenation and gas exchange of young dogs, ASA I and II, submitted to general inhalation anesthesia for orthopedic surgeries and dental implants for 1 hour and remained in the supine position. For this, 27 dogs were used, divided into 2 groups (14 in the PEEP group and 13 in the ARM group) according to the use of PEEP alone or associated with ARM. All patients received acepromazine 0.03 mg / kg associated with meperidine 3 mg / kg (IM) as MPA, induction with propofol in sufficient doses for orotracheal intubation and maintenance with isoflurane 1.0 to 1.6% in FiO2 of 50%. All dogs were kept in dorsal decubitus position immediately after intubation, ventilation protocol established according to the group in which they were allocated and use of neuromuscular blocker rocuronium at the dose of 0.6 mg / kg (IV). After 15 minutes of instrumentation and stabilization of the anesthetic plane the data of ventilatory mechanics, arterial blood gases, oxygenation and hemodynamics were collected (M0). In the group which was held MRA left PEEP 0, 5 cmH2O suffering increases every 3 minutes, reaching 15 and returning gradually to 5 cmH 2 O, in which pressure was maintained for the rest of the duration of anesthesia. In the PEEP group, a pressure of 5 cmH2O was instituted and maintained until extubation. At the end of the ARM (M15 - 15 minutes after M0) all were collected again, as well as in M30 and M60 (respectively, 30 and 60 minutes after M15). Through the parameters of capnometry, it was observed that the tidal volume used was efficient to guarantee gas exchange in all patients included in the study. The use of MRA was enough to reopen the collapsed lung areas M0, but compared their levels of oxygenation and compliance with those found in the PEEP group, there was no superiority of one group. The use of PEEP 5 cmH2O was able to maintain the alveoli without undergoing re-collapse over the study period. The use of MRA or PEEP did not interfere in the hemodynamic parameters of the dogs inserted in the study.

A cirurgia videolaparoscópica é considerada uma importante ferramenta diagnóstica e terapêutica na medicina veterinária, uma vez que possibilita ampla visualização da cavidade abdominal de maneira minimamente invasiva, promovendo menores escores de dor no período pós-operatório, menores tempos de recuperação cirúrgica, além de menores índices de complicações referentes à ferida operatória. Entretanto, a insuflação da cavidade abdominal com CO2 eleva a pressão intra-abdominal, piorando a relação ventilação perfusão pulmonar. Adicionalmente, quantidades significativas de CO2 podem ser absorvidas através da membrana peritoneal, resultando em hipercapnia e acidose caso não seja aumentado o volume minuto do paciente. Pacientes humanos pediátricos e neonatos submetidos a capnopneumoperitônio são especialmente sensíveis à hipercapnia pela absorção de CO2 devido a extensa superfície peritoneal em relação à massa corporal. Estudos correlacionando as taxas de absorção de CO2 durante a instauração de capnopneumoperitônio são ainda muito escassos em medicina veterinária. Entretanto, parece plausível que essas alterações ocorram de maneira similar na espécie canina.Foram avaliadas 40 cadelas pré-púberes e adultas submetidas à OSH videolaparoscópica ou convencional, divididas em quatro grupos: convencional adulto (CA), convencional pediátrico (CP), videolaparoscópico adulto (VA) e, videolaparoscópico pediátrico (VP). Foram registrados FC, FR, PAS, PAM, PAD, T°C, ETCO2, tempo inspiratório e pressão de pico inspiratória e, colhidas amostras de sangue arterial para mensuração de pH, SaO2 (%); PaO2 (mmHg); PaCO2 (mmHg); HCO3 - (mmol/L), EB e TCO2. Tomando como base os valores de PaCO2 e ETCO2 encontrados, foi determinada a Pa – ETCO2. Não foram encontradas diferenças significativas nos valores de PaCO2, ETCO2 e na Pa-ETCO2 entre os grupos VA e VP. / Endoscopic surgery is considered an important diagnostic and therapeutic tool in veterinary medicine. It allows a wide visualization of the abdominal cavity in a minimally invasive way, promoting lower pain scores in the postoperative period, shorter surgical recovery times, and lower indices of surgical wound complications. However, insufflation of the abdominal cavity with CO2 raises the intra-abdominal pressure, worsening ventilation/ perfusion relation. In addition, significant amounts of CO2 can be absorbed through the peritoneal membrane, resulting in hypercapnia and acidosis if the patient's minute volume is not increased. Pediatric and neonatal human patients submitted to capnopneumoperitoneum are especially sensitive to hypercapnia by absorption of CO2 due to extensive peritoneal surface in relation to body mass. Studies correlating the rates of CO2 uptake during capnopneumoperitoneum implantation are still very scarce in veterinary medicine. However, it seems plausible that these changes occur in a similar way in the canine species. Fourty prepubescent and adult bitches submitted to videolaparoscopic or conventional OSH were divided into four groups: adult conventional (CA), pediatric conventional (CP), adult videolaparoscopic (VA) and pediatric videolaparoscopic (VP). HR, RR, SAP, MAP, DAP, T ° C, ETCO2, inspiratory time, and peak inspiratory pressure were recorded and arterial blood samples were collected for pH measurement, SaO2 (%); PaO2 (mmHg); PaCO2 (mmHg); HCO3- (mmol / L), BE and TCO2. Based on the PaCO2 and ETCO2 values , Pa - ETCO2 was determined. No significant differences were found in the values of PaCO2, ETCO2 and Pa-ETCO2 between the VA and VP groups.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-31 / Objetivo: Investigar os efeitos da oxigenação hiperbárica (OHB) e da Nacetilcisteína (NAC) isoladamente ou em associação sobre a viabilidade de retalhos cutâneos em ratos. Métodos: 32 ratos Wistar machos foram distribuídos randomicamente em GS (sham/n=8), GNAC (N-acetilcisteína/n=8), GOHB (oxigenação hiperbárica/n=8) e GNH (NAC+OHB/n=8). Sob anestesia geral foi dissecado um retalho dorsal de base cranial medindo (2x8cm) conforme modelo preconizado por McFarlane; foi interposta uma lâmina de polietileno entre o retalho e seu leito impedindo a vascularização a partir do mesmo; o retalho foi suturado de novo sobre seu leito. Nos sete dias consecutivos cada animal recebeu: GS solução salina intraperitoneal, o grupo GNAC 300mg de NAC intraperitoneal, o grupo GOHB 2 horas de oxigenação hiperbárica a 2,4 ATA e o grupo GNH recebeu a associação dos tratamentos. No oitavo dia do experimento os animais foram novamente anestesiados e foram coletadas biópsias dos terços proximal, médio, distal e controle para análise imuno-histoquímica bem como fotografias digitais para posterior análise por meio do programa Image-Lab. Os dados obtidos foram estatisticamente analisados pelos testes ANOVA e Bonferroni (p<0,05). Resultados: A média da área de necrose no grupo GS foi de 18,3%, no grupo GNAC 24,3%, no grupo GOHB 12,6% e no grupo GNH 14,9%. A expressão do VEGF na epiderme, derme, tecido submuscular e vasos não demonstrou diferenças significativas nos diferentes grupos de tratamento. A acumulação de células em apoptose foi significativamente menor no terço médio em todos os grupos tratados, mas significativamente menor nos grupos tratados com OHB. Os resultados menos favoráveis foram observados no grupo GS e GNAC. Conclusão: A OHB está associada à menor expressão de apoptose celular e menor área de necrose de pele. A NAC não apresentou efetividade na proteção do retalho randômico quer pela avaliação da apoptose ou da necrose celular. A associação dos dois procedimentos não produziu potencialização dos resultados favoráveis do uso de ambos separadamente. Os achados sugerem que a difusão do oxigênio pelo interstício celular foi o fator determinante dos resultados mais favoráveis da OHB. / Objective: To investigate the effects of hyperbaric oxygen (HBO) and N-acetylcysteine (NAC) alone or in association on the viability of skin flaps in rats. Methods: 32 male Wistar rats were randomized in: GS (sham/n=8), GNAC (Nacetylcysteine/ n=8), GHBO (hyperbaric oxygen/n=8) and GNH (NAC+OHB/n= 8). A skin flap measuring cranial base (2x8cm) was performed (McFarlane) and brought a polyethylene film between the skin flap and its surgical bed prior to closure with interrupted polyamide sutures. For seven days the animals received injections of saline intraperitoneally (GS) and NAC at a dose of 300mg/kg (GNAC). HBO was performed for periods of two hours with 2.4 ATA (GOHB) for seven days and the association of NAC and HBO was carried out in group GNH. On the eighth day the dorsum of the animal was photographed and collected biopsy specimen of skin from the flap at thirds proximal, middle and distal flap. The areas of necrosis were evaluated (photos processed by the Image-Lab), assessment of apoptosis (cleaved caspase 3) and angiogenesis (VEGF). The data obtained were statistically analyzed by ANOVA and Bonferroni (p <0.05). Results: The mean areas of necrosis (mm2) were: GS 18.3%, GNAC 24.3%, GOHB 12.6% and GNH 14.9%. The expression of VEGF in the epidermis, dermis, submuscular tissue and vessels was not significant in the different treatment groups. The presence of cells undergoing apoptosis was significantly lower in the middle third of all treated groups compared to sham group, but significantly lower in the group treated with HBO alone or in combination with NAC. Conclusion: HBO is associated with reduced expression of apoptosis and reduced area of necrosis of skin flap. The NAC is not associated with lower expression of apoptosis and alone had the worst results in this experiment. The association of the two procedures did not produce potentiating of the favorable results of the use of both separately. The findings suggest that the diffusion of oxygen through the interstitial space was the determining factor of more favorable results of HBO. / TEDE

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:20:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseSSR.pdf: 4068903 bytes, checksum: 04896bfbefd0027002928519a22c3786 (MD5) Previous issue date: 2003-12-19 / Universidade Federal de Minas Gerais / Hemoglobin structural and functional aspects, as well as the presence of intraerythrocitic organic phosphates of 167 individuals of 10 species of bats, belonging to Phyllostomidae (Artibeus planirostris, Phyllostomus discolor, Artibeus lituratus, Carollia perspicillata, Desmodus rotundus, Glossophaga soricina), and Molossidae family (Molossus ater, Molossus molossus, Nyctinomops laticaudatus e Eumops perotis) were studied. These individuals were collected in different areas of São Paulo State. Hemoglobin of these individuals were submitted to starch gel electrophoresis and showed all the same pattern: one slow major, migrating close to A2 human hemoglobin and one minor fast component, migrating close to human hemoglobin A. No intra and inter specific variation were detected. Variations on functional properties in blood were detected. Most of the species (7) presented normal Bohr effect, while C. perspicillata, D. rotundus e M. molossus null Bohr effect. Artibeus planirostris presented reverse Bohr effect. All the hemoglobin samples showed normal Bohr effect in the stripped form as well as in the presence of 2,3-biphospho glicerate and inositol hexaphosphate. The addition of this organic phosphate has altered both Bohr effect and P50 values. The oxygen affinities were high in all hemoglobins. In vivo, the oxygen affinity of bat hemoglobins is lower due to modulator effect,probably ,3.biphospho glicerate. In the erythrocytes of all individuals studied 2,3-biphospho glycerate were found in varying concentrations and a little higher than most of Mammals. No inositol polyphosphates were found in any sample tested. / Foram estudados aspectos estruturais e funcionais da hemoglobina, bem como, a presença dos fosfatos orgânicos em 163 indivíduos de 10 espécies de morcegos pertencentes à família Phyllostomidae (Artibeus planirostris, Phyllostomus discolor, Artibeus lituratus, Carollia perspicillata, Desmodus rotundus, Glossophaga soricina), e Molossidae (Molossus ater, Molossus molossus, Nyctinomops laticaudatus e Eumops perotis). Essas espécies foram coletadas em regiões diferentes do estado de São Paulo. Através de eletroforese em gel de amido, foram detectado nas 10 espécies estudadas, dois componentes hemoglobínicos, um componente maior, de mobilidade próxima à hemoglobina A2., e outro menor, de mobilidade próxima a da Hb A humana. Não foi detectada qualquer variação intra ou interespecífica. Foram detectadas, variações nas propriedades funcionais do sangue. A maioria (7) das espécies apresentou efeito Bohr normal, enquanto que C. perspicillata, D. rotundus e M. molossus apresentou efeito Bohr nulo. Artibeus planirostris apresentou efeito Bohr reverso. Todas as espécies apresentaram hemoglobina com efeito Bohr normal na forma stripped, bem como na presença dos moduladores 2,3-bifosfoglicerato e inositol hexafosfato . A adição desses fosfatos orgânicos alterou tanto amplitude do efeito Bohr quanto os valores de P50. A afinidade ao oxigênio das hemoglobinas stripped das espécies estudadas é alta, sendo diminuída, in vivo, por ação de moduladores, provavelmente o 2,3,bifosfoglicerato. Nos eritrócitos de todas as espécies estudadas mostraram 2,3.bifosfoglicerato em concentrações que variaram dependendo da espécie, mas levemente superiores à da maioria dos mamíferos. Não foi detectado qualquer tipo de inositol polifosfatado nos eritrócitos das espécies estudadas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:21:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissHRS.pdf: 548212 bytes, checksum: 1c4f402bcc4318a0c91d0661cf16825d (MD5) Previous issue date: 2003-02-25 / Hemoglobin electrophoretic patterns, oxygen equilibrium experiments using unfractionated blood, stripped hemoglobin at 4oC, 21oC, 40oC, as well as the effect of inositol hexaphosphate (IHP) and 2,3-biphosphoglycerate (BPG), and the qualitative and quantitative determination of intraerythrocytic organic phosphate were done, in three species of Aves: Athene cunicularia &#8211; owl (Order Strigiformes, Family Strigidae), Coragyps atratus - vulture (Order Ciconiformes, Family Cathartidae) and Mimus saturninus - mocking bird (Order Passariformes Family Mimidae). On starch gel electrophoresis, pH 8.6, A. cunicularia and C. atratus showed one slow anodic major component and one fast minor components, a typical bird hemoglobin pattern. On the same electrophoretic conditions, M. saturninus showed two anodic major components, instead one major and one minor. Stripped hemoglobins at the three temperatures, in the presence of IHP, BPG, and blood showed normal Bohr effect and n values (Hill plots) were close to one, indicating very low or no cooperativity. Oxygen affinities were temperature-dependent (as lower the temperature higher is the affinity), BPG modulation was low, IHP was very effective as negative modulator. Vulture hemoglobin showed the highest P50 value, while the owl and the mocking bird presented lower and similar oxygen affinity to each other. No AMP, GTP and BPG were found, only ADP, ATP and inositols were detected in the erythrocytes of the three species. Inositol pentaphosphate (IP5) was the most abundant intraerythrocytic organic phosphate in the 3 species. A. cunicularia showed also inositol tetraphosphate and C. atratus and M. saturninus showed IHP, besides IP5. Although the three species belong to different Orders, have different habit; the functional properties of their hemoglobins are very similar. One hypothesis to explain such similarity is that the avian system to deliver and discharge oxygen to the tissues are so efficient, that works properly in a wide range of situations / Foram analisados, o padrão eletroforético, a finidade das hemoglobinas (Hbs) em experimentos de equilíbrio de oxigenação em sangue, hemoglobinas stripped à 4oC, 21oC e 40oC, o efeito de fosfatos orgânicos inositol hexafosfato (IHP) e 2,3 - bifosfoglicerato (BPG), bem como a determinação qualitativa e quantitativa de fosfatos orgânicos em três espécies de Aves: Athene cunicularia &#8211; coruja-buraqueira (Ordem Strigiformes, Família Strigidae), Coragyps atratus - urubu (Ordem Ciconiformes, Família Cathartidae) e Mimus saturninus - sabiá-do-campo (Ordem Passariformes Família Mimidae). O padrão eletroforético em gel de amido (pH 8,6), para A. cunicularia e C. atratus, mostra a presença de um componente maior lento, e outro menor rápido, padrão típico de hemoglobinas de aves. Para M. saturninus o padrão eletroforético mostra dois componentes maiores, um rápido e outro lento. As hemoglobinas stripped, nas três temperaturas, na presença de IHP, 2,3 - BPG e em sangue mostraram efeito Bohr normal e valores de n (Hill) próximos de um, indicando cooperatividade muito baixa ou ausente. A afinidade das Hbs ao oxigênio mostrou - se maior a medida que se diminuiu a temperatura. O 2,3 - BPG praticamente não modulou as Hbs, já o IHP atuou como modulador negativo efetivo das Hbs. Não foi detectado concentrações de AMP, GDP, GTP e 2,3 - BPG. Foram detectados somente ADP, ATP e inositóis nos eritrócitos das três espécies. O inositol pentafosfato (IP5) foi o fosfato intraeritrocitário mais abundante nas três espécies. A. cunicularia mostrou também inositól tetrafosfato (IP4) e C. atratus e M. saturninus, mostraram IHP. Apesar das três espécies estudadas pertencerem a ordens diferentes, com tipos de vôo e hábitos distintos, as propriedades funcionais de suas hemoglobinas são muito semelhantes. Já que as três espécies estudadas, com hábitos tão diferentes, apresentam características funcionais tão semelhantes, é possível que esses sistemas sejam tão eficientes que não necessitem modificações significativas para cumprir seu papel de fornecer oxigênio aos tecidos, numa gama grande de situações ecológicas

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-30Bitstream added on 2014-06-13T19:06:17Z : No. of bitstreams: 1 ricardi_es_me_sjrp.pdf: 2273724 bytes, checksum: eed74e01870d5b90b7fb020a587b9ac0 (MD5) / A Glutationa (GSH) é um tripeptídeo presente nas células, que em sua forma reduzida age como antioxidante, mantendo os grupamentos tiólicos nas proteínas em estado reduzido. Ao exercer função protetora, a glutationa é oxidada para sua forma dissulfeto, expondo quatro cargas negativas. A glutationa oxidada (GSSG) poderia interagir não covalentemente com moléculas capazes de ligar ânions, como a hemoglobina. Essa condição nos levou a investigar as possíveis mudanças estruturais e funcionais das hemoglobinas bovina, humana e majoritária do peixe matrinxã (Brycon cephalus) quando interagem alostericamente com a glutationa. As amostras de sangue bovina e humana foram purificadas e submetidas à eletroforese para verificação de pureza. As propriedades de ligação com oxigênio e controle alostérico foram analisados por tonometria a 20°C, calculando a afinidade de ligação com o O2 e a cooperatividade (n50). As condições experimentais adotadas foram, stripped, cloreto e glutationa oxidada (GSSG), nessas condições, as hemoglobinas bovina e humana apresentaram efeito Bohr alcalino. O cloreto induziu o maior efeito de diminuição da afinidade em praticamente todas as condições. As hemoglobinas apresentaram processo cooperativo de ligação de oxigênio, em todas as condições e em toda faixa de pH. No caso da hemoglobina bovina adulta, a GSSG aumentou a afinidade por O2, em toda a faixa de pH testada, enquanto para a humana isso ocorreu abaixo de pH 7,0. O cloreto capaz de diminuir a afinidade de forma efetiva em todas as condições. A hemoglobina bovina apresentou uma menor afinidade de ligação ao oxigênio em relação à hemoglobina humana. A glutationa oxidada atuou como efetor alostérico heterotrópico em hemoglobinas humana, bovina e matrinxã (Hb-II), aumentando a afinidade de ligação por oxigênio da hemoglobina. Entretanto, a glutationa na forma reduzida... / Glutathione (GSH) is an intracellular tripeptide, which in its reduced form acts as an antioxidant, keeping the cysteines in the reduced state. When exerting protective function, glutathione is oxidized to form its disulfide, exposing four negative charges. The oxidized glutathione (GSSG) could interact with molecules covalently able to bind anions, such as hemoglobin. That motivated us to investigate the possible structural and functional changes of bovine, human and a fish hemoglobin from the fish ‘matrinxã’ (Brycon cephalus) when they interact allosterically with glutathione. Samples of human and cattle blood were purified and subject to electrophoresis to verify their purity. The functional properties of oxygen binding and allosteric control were analyzed by the tonometric method at 20°C, calculating the affinity of O2-binding and cooperativity (n50). The tested experimental conditions involved hemoglobin in the absence (stripped) and in the presence of chloride and oxidized glutathione (GSSG). Under those circumstances, the human and bovine hemoglobins displayed an alkaline Bohr effect. Chloride induced the greatest effect of reducing affinity in all conditions. For all the experimental sets oxygen binding was cooperative. For bovine adult hemoglobin GSSG increased O2-affinity for all the tested pH values, whereas it occurred for human Hb for pH values above 7.0. Bovine Hb displayed lower O2-affinity than its human counterpart. Oxidized glutahione acted as a heterotropic allosteric effector in all the tested hemoglobins, increasing O2-affinity. However, GSH decreased O2-affinity of human and bovine Hbs. We assume that there is a binding site for GSSG at the R state, increasing O2-affinity, and another one for GSH at the T state, stabilizing its conformation and therefore lowering O2-affinity.

A cirurgia videolaparoscópica é considerada uma importante ferramenta diagnóstica e terapêutica na medicina veterinária, uma vez que possibilita ampla visualização da cavidade abdominal de maneira minimamente invasiva, promovendo menores escores de dor no período pós-operatório, menores tempos de recuperação cirúrgica, além de menores índices de complicações referentes à ferida operatória. Entretanto, a insuflação da cavidade abdominal com CO2 eleva a pressão intra-abdominal, piorando a relação ventilação perfusão pulmonar. Adicionalmente, quantidades significativas de CO2 podem ser absorvidas através da membrana peritoneal, resultando em hipercapnia e acidose caso não seja aumentado o volume minuto do paciente. Pacientes humanos pediátricos e neonatos submetidos a capnopneumoperitônio são especialmente sensíveis à hipercapnia pela absorção de CO2 devido a extensa superfície peritoneal em relação à massa corporal. Estudos correlacionando as taxas de absorção de CO2 durante a instauração de capnopneumoperitônio são ainda muito escassos em medicina veterinária. Entretanto, parece plausível que essas alterações ocorram de maneira similar na espécie canina.Foram avaliadas 40 cadelas pré-púberes e adultas submetidas à OSH videolaparoscópica ou convencional, divididas em quatro grupos: convencional adulto (CA), convencional pediátrico (CP), videolaparoscópico adulto (VA) e, videolaparoscópico pediátrico (VP). Foram registrados FC, FR, PAS, PAM, PAD, T°C, ETCO2, tempo inspiratório e pressão de pico inspiratória e, colhidas amostras de sangue arterial para mensuração de pH, SaO2 (%); PaO2 (mmHg); PaCO2 (mmHg); HCO3 - (mmol/L), EB e TCO2. Tomando como base os valores de PaCO2 e ETCO2 encontrados, foi determinada a Pa – ETCO2. Não foram encontradas diferenças significativas nos valores de PaCO2, ETCO2 e na Pa-ETCO2 entre os grupos VA e VP. / Endoscopic surgery is considered an important diagnostic and therapeutic tool in veterinary medicine. It allows a wide visualization of the abdominal cavity in a minimally invasive way, promoting lower pain scores in the postoperative period, shorter surgical recovery times, and lower indices of surgical wound complications. However, insufflation of the abdominal cavity with CO2 raises the intra-abdominal pressure, worsening ventilation/ perfusion relation. In addition, significant amounts of CO2 can be absorbed through the peritoneal membrane, resulting in hypercapnia and acidosis if the patient's minute volume is not increased. Pediatric and neonatal human patients submitted to capnopneumoperitoneum are especially sensitive to hypercapnia by absorption of CO2 due to extensive peritoneal surface in relation to body mass. Studies correlating the rates of CO2 uptake during capnopneumoperitoneum implantation are still very scarce in veterinary medicine. However, it seems plausible that these changes occur in a similar way in the canine species. Fourty prepubescent and adult bitches submitted to videolaparoscopic or conventional OSH were divided into four groups: adult conventional (CA), pediatric conventional (CP), adult videolaparoscopic (VA) and pediatric videolaparoscopic (VP). HR, RR, SAP, MAP, DAP, T ° C, ETCO2, inspiratory time, and peak inspiratory pressure were recorded and arterial blood samples were collected for pH measurement, SaO2 (%); PaO2 (mmHg); PaCO2 (mmHg); HCO3- (mmol / L), BE and TCO2. Based on the PaCO2 and ETCO2 values , Pa - ETCO2 was determined. No significant differences were found in the values of PaCO2, ETCO2 and Pa-ETCO2 between the VA and VP groups.

Orientador: Fabio Trindade Maranhão Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T03:13:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Blanco_YaraCarollo_M.pdf: 1932159 bytes, checksum: 7fa3ee714af53f1bf4da1434c08a29f5 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A malária é sem dúvida a doença parasitária mais importante do mundo, infectando 300-500 milhões de pessoas e levando a óbito cerca de 1-2 milhões de indivíduos anualmente. Malária cerebral (MC) é o mais importante tipo de complicação nas infecções maláricas. MC é uma síndrome multifatorial, entretanto sua patogênese ainda não foi totalmente elucidada. Diversos estudos mostram a adesão de eritrócitos infectados (EI) no endotélio microvascular do hospedeiro. No entanto, várias evidências indicam que um desbalanço da resposta imune e da homeostase, acarretando numa elevada expressão de citocinas pró-inflamatórias também desempenham um papel importante na patogênese da MC. O modelo utilizando camundongos C57BL/6 infectados com Plasmodium berghei ANKA (PbA) parece ser o que mais se assemelha a MC humana, já que em ambos casos ocorre um aumento significativo de citocinas próinflamatórias, da destruição neuronal, da hemorragia cerebral e da concentração de lactato. A terapia de oxigenação hiperbárica (HBO) tem sido amplamente utilizada como potencializador de cicatrização e contra microrganismos anaeróbicos. No entanto, nos últimos anos, diversos estudos têm mostrado que o oxigênio pressurizado é capaz de proteger contra a destruição da barreira hemato-encefálica (BHE), inibir a destruição neuronal, reduzir a produção de citocinas pró-inflamatórias e a expressão ICAM-1, receptor leucocitário, e de EI. Neste estudo, avaliamos os efeitos da HBO na prevenção dos sintomas da MC em camundongos infectados com PbA e nos eritrócitos expostos diretamente ao oxigênio hiperbárico. A utilização do oxigênio hiperbárico mostrou-se capaz de reduzir significativamente a taxa de mortalidade associada à malária cerebral experimental, assim como uma redução da queda da temperatura corporal e dos níveis de parasitemia. Além disso, nossos resultados demonstram que a terapia com oxigênio hiperbárico impede a destruição da BHE. Testes In vitro mostraram que a exposição direta de eritrócitos sadios e de eritrócitos infectados (EI), á HBO não é tóxica e nem capaz de alterar a viabilidade e infectividade de EI. Por último, mostramos que o tratamento com HBO realizado após o quarto dia de infecção (quando a parasitemia já é patente), retarda o aparecimento dos sintomas neurológicos da malária cerebral e morte associada / Abstract: Malaria is the world¿s most nefarious infectious disease, affecting 300-500 million people and leads to death of 1-2 million individuals per year. Cerebral malaria (CM) is the most serious complications that might occur during a malarial infection. CM is a multifactorial syndrome; however its pathogenesis is still a matter of debate. Several studies show that in adhesion of infected erythrocytes (IE) to the host microvascular endothelium is involved. Nevertheless, several bodies of evidence indicate that a unbalance in host immune response and homeostasis, leading to the expression at higher levels of proinflammatory cytokines. Infection of C57BL/6 mice with IE of Plasmodium berghei ANKA (PbA) is the largely used model for CM, as a significant augmentation in the expression levels of proinflammatory cytokines and lactate, neuronal damage and cerebral hemorrhage also occurs. Hyperbaric oxygen therapy (HBO) has been widely used against anaerobic microorganism and as an adjunct therapy in surgeries. However, in the last year several studies have shown that HBO is able to prevent brain-blood-barrier (BBB) breakdown, inhibit neural damage and the syntheses of proinflammatory cytokines and the expression of ICAM-1, a the host receptors involved in the adhesion of leukocytes and IE. Herein, we evaluated the HBO effects in preventing CM specific clinical signs in PbA-infected mice and directly against IE of PbA. The data provided by us demonstrated that HBO treatment reduces significantly CM associated mortality and clinical outcomes, such as hypothermia, BBB dysfunction and is able to inhibit parasite burden early on the infection. In vitro analysis showed that directly exposure to HBO, up to six hours, is not harmful to health erythrocytes neither inhibit parasite development and infectivity. Finally, HBO treatment was able to delay significantly the CM neurological signs and death, even thought administrated after parasite establishment / Mestrado / Mestre em Parasitologia