Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2017-10-02T12:52:56Z No. of bitstreams: 1 JOSÉ ANTONIO VIANA DE MORAIS 3.pdf: 4387158 bytes, checksum: 813e3206f05ae2289634baf546698b46 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-02T12:52:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JOSÉ ANTONIO VIANA DE MORAIS 3.pdf: 4387158 bytes, checksum: 813e3206f05ae2289634baf546698b46 (MD5) Previous issue date: 2010-05-26 / Human papillomavirus (HPV) is one of the infections through sexual intercourse more often disseminated throughout the world. In Brazil it is estimated that there are around 3 to 6 million cases of HPV. There are few studies about HPV in men. This study examined the therapeutic response of patients men infected with HPV and treated topic with a solution of 90% trichloroacetic acid (ATA 90%). Were treated between January 2007 and December 2008, at the Hospital for Tropical Diseases in Araguaina (TO) 1056 patients undergoing clinical analysis by means of physical examination and penioscopia. The records of these patients were analyzed and found that 589 (55.8%) were diagnosed with HPV. Of these, 529 were selected for study as these met the following inclusion criteria: patients with macroscopic and penioscópico of HPV, which did not undergo any treatment before consultation, which were treated only with ATA 90% before and monitored for any recurrence, at least twelve months. After collecting data it was found that only 68 (12,8%) patients treated with ATA 90% had recurrence of lesions. The age of initial and final of HPV ranged from 18 to 73 years. The average age of patients with recurrence was 34.9 years, coinciding with the peak of sexual activity and the presence of multiple parters. About 80% of cases of recurrence occurred in the first six months. The association with other sexual diseases was recorded and the most prevalent pathologies: balanoposthistis (31,3%), genital herpes (9,2%), gonococal urethritis (2,8%) and no-gonococcal urethritis (0,9%). We found that the presence of other STDs contributes to treatment failure, whereas 75% of cases had tumor recurrence ATA 90% occurred in patients with an STD associated with HPV. Regarding the location of the lesions, it was found that 61.1% occurred at the distal end of the male phallus. The number of lesions detected per patient ranged from 1 to 9, with the majority (82.3%) patients had 2-5 lesions. In this study, we identified that the prevalence of HPV infection in men, STD clinic with urological monitoring was high. The therapeutic efficacy of ATA 90% was higher than the values commonly found in the literature and the recurrence rate of patients was low. We suggest that monitoring of patients with HPV after treatment with ATA is 90% done with routine queries for up to twenty-four months and quarterly consultations with the cases of recurrence. We emphasize the need for a focus on serving the man aiming to prevent controllable diseases evolve into malignancies. / O papilomavírus humano (HPV) é uma das infecções por via sexual mais frequentemente disseminadas em todo o mundo. No Brasil estima-se que existam em torno de 3 a 6 milhões de casos de HPV. Há poucos estudos sobre o HPV em homens. Este trabalho analisou a resposta terapêutica de pacientes do sexo masculino infectados HPV e tratados topicamente com solução de ácido tricloroacético à 90% (ATA 90%). Foram atendidos entre janeiro de 2007 e dezembro de 2008, no ambulatório do Hospital de Doenças Tropicais de Araguaína (TO), 1056 pacientes submetidos a analise clínica por meio do exame físico minucioso e penioscopia. Os prontuários desses pacientes foram analisados e verificou-se que 589 (55,8%) apresentaram diagnóstico de HPV. Destes, 529 foram selecionados para o estudo por atenderem aos seguintes critérios de inclusão: pacientes com diagnóstico macroscópico e penioscópico de HPV, que não realizaram qualquer tratamento antes da consulta, que foram tratados exclusivamente com ATA 90% antes de qualquer recidiva e monitorados por, no mínimo, doze meses. Após coleta de dados verificou-se que apenas 68 (12,8%) pacientes que realizaram tratamento com ATA 90% apresentaram recidiva das lesões. A faixa etária de acometimento do HPV variou de 18 a 73 anos. A idade média dos pacientes com recidiva foi de 34,9 anos, coincidente com o pico de atividade sexual e a presença de múltiplos parceiros. Cerca de 80% dos casos de recidiva ocorreram nos seis primeiros meses. A associação com outras DSTs foi observada, sendo as patologias mais prevalentes: a balanopostite (31,3%), o herpes genital (9,2%), a uretrite gonocócica (2,8%) e a uretrite não gonocócica (0,9%). Verificamos que a presença de outra DST contribui para o insucesso terapêutico, visto que 75% dos casos de recidiva pós ATA 90% ocorreram em pacientes portadores de alguma DST associada ao HPV. Em relação à localização das lesões, verificou-se que 61,1% ocorreram na extremidade distal do falo masculino. O número de lesões encontradas por paciente variou de 1 a 9, sendo que a maioria (82,3%) dos pacientes apresentou de 2 a 5 lesões. Neste estudo, identificamos que a prevalência da infecção por HPV em homens, em ambulatório de DST com acompanhamento urológico foi elevada. A eficácia terapêutica do ATA 90% mostrou-se maior que os valores comumente encontrados na literatura e o índice de recidiva dos pacientes foi baixo. Sugerimos que o acompanhamento dos pacientes com HPV após o tratamento com ATA 90% seja realizado com consultas rotineiras por até vinte e quatro meses e com consultas trimestrais para os casos de recidiva. Reforçamos a necessidade de um enfoque no atendimento do homem com intuito de evitar que doenças controláveis evoluam para doenças oncológicas.

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-01-26T11:54:45Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AspectosClinicosEpidemiologicos.pdf: 1449412 bytes, checksum: 578476d05f286ad66ccb88c9b265d702 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-01-26T11:55:15Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AspectosClinicosEpidemiologicos.pdf: 1449412 bytes, checksum: 578476d05f286ad66ccb88c9b265d702 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T11:55:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_AspectosClinicosEpidemiologicos.pdf: 1449412 bytes, checksum: 578476d05f286ad66ccb88c9b265d702 (MD5) Previous issue date: 2013 / O papiloma vírus humano (HPV) é um vírus que infecta a pele e a mucosa. Está associado ao câncer do colo do útero, por aumentar a probabilidade deste acontecer, mas paralelo a este, outros fatores comportamentais de risco devem ser averiguados. Tendo como foco a investigação da prevalência e os aspectos clínicos epidemiológicos da infecção genital pelo HPV em mulheres de população Urbana e Ribeirinha do município de Santarém-Pará, foi realizado um estudo comparativo, observacional, descritivo e analítico, do tipo transversal, onde houve a seleção de 511 mulheres, sendo 391 mulheres da população Urbana (38,54 ± 11,4 anos de idade) e 120 da população Ribeirinha (37,2 ± 11,7 anos de idade). Para a coleta de dados, realizou-se uma entrevista contendo informações acerca dos fatores que podem estar associados à prevalência de HPV e câncer cervical, além de uma coleta de material biológico que foi analisado através da citologia oncótica, isolamento do DNA e PCR. A tabulação dos dados foi realizada no programa Excel e a análise estatística no aplicativo Bioestat 5.0®. Verificou-se uma baixa prevalência do HPV, comparando-se com resultados de pesquisas de outras regiões. Notou-se homogeneidade dos resultados das mulheres de ambas as populações, divergindo apenas nos tópicos escolaridade, tabagismo atual, número de parceiros sexuais durante a vida e uso de anticoncepcional oral durante a vida. Conclui-se que, apesar da localização geográfica, não há para o município de Santarém uma grande mudança no perfil das mulheres entre dados encontrados na população urbana e na população ribeirinha quanto à epidemiologia do HPV. / The human papilloma virus (HPV) is a virus that infects the skin and mucosa and is associated with cancer of the cervix, by increasing the likelihood of this happening, but parallel to this, other behavioral risk factors should be investigated. Focusing research on the prevalence and the clinical epidemiology of genital infection by HPV in women of urban and riverside municipality of Santarém-Para State proposed a comparative study to be observational, descriptive and analytical , transversal, where there was a selection of 511 women, with 391 women (38.54 ± 11.4 years) and 120 for Urban sample comprised the sample riverfront (37.2 ± 11.7 years). For data collection an interview was conducted, containing information about the factors that may be associated with the incidence of HPV and cervical cancer, plus a collection of biological material that was analyzed by cytology, DNA isolation and PCR . The analysis of these data was performed using the tab in excel and subsequent treatment through statistical software Bioestat 5.0, with the results a low prevalence of HPV compared with surveys from other regions, and homogeneity of results between urban and riverside, differing only in the topics of education, smoking status, number of sexual partners during their lifetime, and oral contraceptive used during life. Concluding that despite geographical location, there is for the municipality of Santarém a big change in the profile of woman between data found in the urban area and the waterfront on the epidemiology of HPV.

O câncer cervical é uma neoplasia muito prevalente na população feminina e está associado à infecção pelo papilomavírus humano (HPV). As oncoproteínas E6 e E7 de HPV de alto risco são as principais responsáveis pelas alterações celulares que levam ao desenvolvimento deste tipo tumoral. A dipeptidil peptidase IV (DPPIV/CD26) é uma enzima que exerce importantes funções relacionadas à progressão tumoral. Diversos estudos demonstram alterações na expressão e atividade desta proteína em diferentes tipos de câncer. Tendo em vista a relação entre a DPPIV/CD26 e o câncer, e que ainda não existem estudos relacionando esta proteína ao câncer cervical, neste estudo inicialmente investigamos a expressão e atividade da DPPIV/CD26 em linhagens celulares de carcinoma cervical humano (SiHa, HeLa e C33A) e em queratinócitos imortalizados (HaCaT). Nossos resultados demonstram uma baixa expressão da DPPIV/CD26 nas linhagens celulares estudadas, sendo praticamente indetectável na linhagem HeLa. Foi verificada a atividade enzimática dipeptidilpeptidásica tanto ligada à membrana quanto solúvel em todas as linhagens. Na presença do inibidor de DPPIV/CD26 (fosfato de sitagliptina) observamos que a linhagem SiHa apresentou um aumento na migração celular, e assim sugerimos que ao menos em parte a migração nesta linhagem é regulada pela atividade enzimática da DPPIV/CD26. A fim de investigar a relação da expressão da DPPIV/CD26 com as oncoproteínas E6 e E7 do HPV, avaliamos sua expressão em queratinócitos normais e transduzidos com estas oncoproteínas. Verificamos que queratinócitos expressando E6 de HPV de alto risco apresentam uma redução na expressão da DPPIV/CD26, e esta regulação parece ser dependente da degradação da p53. Considerando que as linhagens celulares estudadas apresentam baixa expressão e atividade da DPPIV/CD26, para melhor compreender a importância da expressão desta proteína, nós induzimos a superexpressão da DPPIV/CD26 em linhagem de câncer cervical (HeLa) para posterior avaliação dos efeitos em diferentes mecanismos tumorais. Os resultados demonstram uma redução no crescimento de células expressando DPPIV/CD26, sendo este efeito independente da atividade enzimática. Além disso, foi demonstrado que a indução da expressão de DPPIV/CD26 não afeta os mecanismos de migração e adesão celular na linhagem HeLa. Sendo assim, acreditamos que o esclarecimento do papel da DPPIV/CD26 no contexto do câncer cervical possibilita que novas abordagens diagnósticas e terapêuticas sejam implementadas no futuro. / Cervical cancer is a very prevalent neoplasm in female population and is associated with human papillomavirus (HPV) infection. The high risk HPV E6 and E7 oncoproteins are responsible for cellular alterations that lead to the development of this tumor type. The dipeptidyl peptidase IV (DPPIV/CD26) is an enzyme that exerts important functions related to tumor progression. Several studies have shown changes in the expression and activity of this protein in different types of cancer. Considering the relationship between DPPIV/CD26 and cancer, and that there are still no studies relating this protein to cervical cancer, in the present study we first investigated the DPPIV/CD26 expression and activity in human cervical carcinoma cell lines (SiHa, HeLa and C33A) and in immortalized keratinocytes (HaCaT). Our results demonstrate a low DPPIV/CD26 expression in the studied cell lines, being almost undetectable in HeLa cell line. The dipeptidylpeptidasic enzymatic activity was verified both membrane bound and in the soluble form in all cell lines. In the presence of the DPPIV/CD26 inhibitor (sitagliptin phosphate) we observed that SiHa cell line showed an increase in cell migration, thus we suggest that at least in part cell migration in this cell line is regulated by DPPIV/CD26 enzymatic activity. In order to investigate the relationship between DPPIV/CD26 expression and HPV E6 and E7 oncoproteins, we evaluated the expression of this protein in normal keratinocytes or transduced with these oncoproteins. We have found that keratinocytes expressing high-risk HPV E6 present a reduction in DPPIV/CD26 expression, and this regulation appears to be dependent on p53 degradation. Considering that the cell lines studied have low DPPIV/CD26 expression and activity, in order to better understand the importance of the expression of this protein, we induced the DPPIV/CD26 overexpression in a cervical cancer cell line (HeLa) for further evaluation of the effects on different tumor mechanisms. The results demonstrate a reduction in cell growth of DPPIV/CD26 expressing cells, being this effect independent of the enzymatic activity. In addition, it has been demonstrated that the induction of DPPIV/CD26 expression does not affect the cell migration and adhesion mechanisms in the HeLa cell line. Thus, we believe that the elucidation of the DPPIV/CD26 role in the context of cervical cancer enables new diagnostic and therapeutic approaches to be implemented in the future.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-11-16T14:07:55Z No. of bitstreams: 1 Sandra Ely Barbosa de Souza. Conhecimento e atitude...pdf: 1144576 bytes, checksum: 1cae38c0f9d2b1407f11598592cf5b02 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-11-16T14:10:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Sandra Ely Barbosa de Souza. Conhecimento e atitude...pdf: 1144576 bytes, checksum: 1cae38c0f9d2b1407f11598592cf5b02 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-16T14:10:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sandra Ely Barbosa de Souza. Conhecimento e atitude...pdf: 1144576 bytes, checksum: 1cae38c0f9d2b1407f11598592cf5b02 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / INTRODUÇÃO: A infecção viral pelo Papilomavírus Humano (HPV) é a mais frequente entre as mulheres no inicio da vida sexual, cuja persistência pode determinar câncer do colo do útero. O câncer do colo do útero pode ser prevenido secundariamente com triagem cervical e primariamente com vacinas para HPV, No Brasil, a vacina quadrivalente contra HPV passou a fazer parte do Programa Nacional de Imunização a partir de 2014, tendo como publico alvo meninas de 11 a 13 anos. O conhecimento dos enfermeiros sobre HPV, câncer cervical e vacinas contra HPV é importante para o sucesso do programa de vacinação. OBJETIVO: Avaliar o conhecimento e as atitudes de enfermeiros sobre câncer do colo do útero, infecção pelo HPV e vacinas contra HPV. Objetivos específicos: estimar a aceitabilidade da vacina contra HPV entre enfermeiros e identificar barreiras/obstáculos e facilitadores para a aceitação da vacina contra HPV por enfermeiros. MATERIAIS E MÉTODOS: Estudo de corte transversal, realizado com enfermeiros cadastrados no Conselho Regional de Enfermagem da Bahia. Foi enviado um questionário postado no SurveyMonkey®, via mala direta, sob a forma de link, para os enfermeiros com cadastro no conselho. O projeto foi aprovado previamente pelo comitê de ética em pesquisa da FIOCRUZ. RESULTADOS: Participaram do inquérito 1.283 enfermeiros, na sua maioria mulheres, pardas, casadas, Especialistas, atuando na área assistencial e na rede pública. Foram categorizados por tempo de graduação, sexo e local de atuação. Apesar de a maioria conhecer o HPV (99%) e saber da associação com o câncer cervical (98%), muitos desconhecem que o HPV também causa verrugas (10%) e acreditam que a camisinha protege completamente contra o HPV (59%). Os enfermeiros não conhecem as recomendações do Ministério da Saúde sobre a triagem do câncer cervical, acreditam que esse exame é muito sensível para detecção de lesões pelo HPV (95%). Desconhecem que o HPV pode causar câncer em outros sítios (47%) e em homens (40%). Estes achados não diferem significativamente por sexo. Os enfermeiros atuando na rede pública parecem conhecer menos sobre HPV, câncer e vacinas contra HPV. A quase totalidade (99,5%) aceita a vacina contra HPV. Itens facilitadores da aceitabilidade incluem: acreditar em vacinas como forma de prevenção, segurança da vacina e a prevenção do câncer de colo uterino. As barreiras identificadas foram: receio de eventos adversos, pouca idade da filha e falta de recomendação médica. CONCLUSÕES: Os enfermeiros conhecem moderadamente sobre HPV, câncer do colo do útero e vacinas contra HPV porém existem importantes lacunas nesse conhecimento. Os graduados há menos de cinco anos parecem conhecer menos, embora devessem estar mais atualizados. Os enfermeiros da rede pública conhecem menos que os da rede privada. / INTRODUCTION: The viral infection with Human Papillomavirus (HPV) is the most common among women after sexual debut, the persistence of which can determine cervical cancer. Cervical cancer can be secondly prevented by cervical screening and primarily by HPV vaccines. In Brazil, the HPV quadrivalent vaccine has become part of the National Immunization Program since 2014, targeting girls aged 11 to13 years old. The knowledge of nurses about HPV, cervical cancer and HPV vaccines is important for success of vaccination programs. OBJECTIVE: To evaluate knowledge and attitudes of nurses about cervical cancer, HPV infection and HPV vaccines. Specific objectives: to estimate the acceptability of HPV vaccine among nurses and identify barriers/obstacles and facilitators to accept the HPV vaccine by nurses. MATERIAL AND METHODS: A cross-sectional study carried out with nurses registered in the Regional Council of Nursing in Bahia. A questionnaire posted at the SurveyMonkey®, was sent via direct mail, in the form of link, to all nurses with registered in the board. The project was approved by the Ethics Research Committee of FIOCRUZ. RESULTS: Overall, 1,283 nurses took part in this survey, most of them women: mixed race, married, specialists, and working in patients’ assistance and on the public sector. They were stratified by time of graduation, gender and workplace. Even though most of them were aware of HPV (99%) and knew its relation to cervical cancer (98%), many were unaware that HPV causes warts (10%) and also believe that the use of condom protects against HPV (59%) successfully. The nurses did not know about the Ministry of Health recommendations regarding screening for cervical cancer, and believed that such test has high sensitivity for the detection of HPV lesions (95%). They were unaware of HPV as a cause of cancer in other sites (47%) and in men (40%). These findings did not differ significantly by gender. The nurses working in the public sector seemed to know less about HPV, cancer and HPV vaccines than those working in the private sector. Almost all accepted the HPV vaccine (99,5%). Facilitators items of acceptability included: to believe in vaccines as prevention, the vaccine safety and the prevention of cervical cancer. The barriers identified were: fear of adverse events, believing the daughter was too young and a lack of medical recommendation. CONCLUSION: Nurses moderately know about HPV, cervical cancer and HPV vaccines but there are important gaps in this knowledge. Those graduating less than five years ago seemed to know less about HPV. Also, nurses in the public sector less about HPV than those in the private sector.

Introdução. O Papilomavírus humano (HPV), particularmente o tipo 16, têm sido associado com risco e prognóstico de tumores de cabeça e pescoço. Contudo, o papel do DNA do HPV e resposta sorológica na sobrevida neste grupo de pacientes ainda não está claro. Objetivos. Avaliar o efeito do HPV (resposta sorológica e detecção do DNA no tecido tumoral) na sobrevida de pacientes com carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço, considerando-se as distintas localizações anatômicas (cavidade oral, orofaringe, hipofaringe e laringe). Material e métodos. Coorte de 1.475 pacientes com carcinoma epidermóide de cabeça e pescoço, oriundos de dois estudos multicêntricos, diagnosticados entre novembro de 1998 e dezembro de 2008 e acompanhados até 30 de junho de 2009. Detecção de DNA do HPV no tecido tumoral foi feita pela técnica de PCR (Polymerase Chain Reaction) em tecido fresco e material parafinado. Resposta sorológica às proteínas do HPV foi determinada pela técnica Multiplex Luminex. Sobrevida global e específica pela doença foram calculadas pelo método atuarial (tábuas de vida). Curvas de sobrevida de Kaplan-Meier e teste Log-rank para comparação de curvas de sobrevida foram calculados. Hazard ratio (HR) do efeito da infecção pelo HPV nos tumores de cabeça e pescoço e respectivo intervalo com 95 por cento de confiança (IC95 por cento ) foram calculados via modelo de regressão de Cox ajustado pelas variáveis: estudo de origem dos casos, sexo, idade, educação, consumo de tabaco e de álcool, estadiamento do tumor e tratamento, assim como hábitos sexuais para a subcoorte com esta informação. Resultados. Prevalência de DNA do HPV 16 no tecido tumoral foi de 6,7 por cento nos casos recentes (2003-2008) comparado com 1 por cento nos casos iniciais (1998-2002) para a subcoorte de São Paulo. Aumento da soropositividade para HPV 16 E7 nos casos do estudo mais recente (2003-2008) comparado com os casos do estudo inicial (1998-2002) resultou estatisticamente significante. Foi observada pobre concordância entre os resultados de sorologia e DNA do HPV. Pacientes mais jovens (50 anos), que não fumavam e com tumores de orofaringe apresentaram risco aumentado na resposta sorológica à proteína E6 do HPV 16. Prática de sexo oral associou-se com resposta sorológica conjunta às proteínas E6 e E7 do HPV 16. Pacientes soropositivos para HPV 16 E6 apresentaram maior sobrevida global (HR=0,62; IC95 por cento =0,44-0,87), adicionalmente observou-se que a resposta sorológica conjunta às proteínas E6 e E7 do HPV incrementou a sobrevida dos pacientes com tumores de cabeça e pescoço (HR=0,34; IC95 por cento 0,17-0,70) e de orofaringe (HR=0,17; IC95 por cento 0,05-0,59). Conclusões. A prevalência da infecção pelo HPV entre pacientes com tumores de cabeça e pescoço aumentou no período estudado. O estudo sugere que resposta sorológica conjunta às proteínas E6 e E7 do HPV 16 pode estar associada com maior sobrevida global nos tumores de cabeça e pescoço, especificamente nos pacientes com tumores de orofaringe / Introduction. Human papillomavirus (HPV), especially type 16, had been associated with risk and prognostic of head and neck cancer. However, the role of HPV DNA and serological response in survival of patients with head and neck cancer is not yet clear. Objectives. Evaluate the effect of HPV (serological response and HPV DNA tumor status) in survival of patients with squamous cell carcinoma of head and neck (SCCHN), according to anatomical sites (oral cavity, oropharynx, hypopharynx and larynx). Material and methods. Cohort of 1,475 patients with SCCHN, from two multicentre studies diagnosed between November 1998 and December 2008 and followed-up until 30 of June 2009. HPV DNA detection was evaluated by PCR (Polymerase Chain Reaction) in fresh tissue and paraffin blocks. Antibodies to HPV in the serum were determinated by Multiplex Luminex technique. Overall and disease specific survival were calculated by actuarial method. Kaplan-Meier survival curves and Log-rank test in order to compare survival curves were calculated. Hazard ratio (HR) and 95 per cent of interval confidence (95 per cent IC) for Cox model regression were used to evaluate the effect of HPV infection in SCCHN, adjusted by variables: study group, sociodemographics, tobacco and alcohol consumption, tumor clinical stage and treatment, and also sexual habits in the subcohort with available information. Results. HPV DNA 16 tumoral status prevalence was 6.7 per cent in recent cases (2003-2008) compared to 1 per cent in old cases (1998-2002), only for subcohort of São Paulo. Seropositivity to HPV 16 E7 increased in the late cases (2003-2008) compared to old cases (1998-2002) and was statistically significant. Poor concordance was showed between DNA HPV and serological response to HPV. Younger patients (50 years old), no smokers and with oropharyngeal tumors showed increased risk to HPV 16 E6 serological response. Oral sex was associated with HPV 16 E6 and E7 simultaneously. Seropositivity to HPV 16 E6 had longer overall survival (HR=0.62; 95 per cent CI=0.440.87), additionally HPV 16 E6 and E7 serological response increased the survival of head and neck cancers (HR=0.34; 95 per cent CI 0.17-0.70) and oropharyngeal cancer (HR=0.17; 95 per cent CI 0.05-0.59) Conclusions. Prevalence of HPV infection in patients with SCCHN had increased in the study period. The study suggests that HPV 16 E6 serological response could be associated with increased overall survival in patients with SCCHN tumors and specifically with oropharyngeal cancer

O câncer cervical é uma neoplasia muito prevalente na população feminina e está associado à infecção pelo papilomavírus humano (HPV). As oncoproteínas E6 e E7 de HPV de alto risco são as principais responsáveis pelas alterações celulares que levam ao desenvolvimento deste tipo tumoral. A dipeptidil peptidase IV (DPPIV/CD26) é uma enzima que exerce importantes funções relacionadas à progressão tumoral. Diversos estudos demonstram alterações na expressão e atividade desta proteína em diferentes tipos de câncer. Tendo em vista a relação entre a DPPIV/CD26 e o câncer, e que ainda não existem estudos relacionando esta proteína ao câncer cervical, neste estudo inicialmente investigamos a expressão e atividade da DPPIV/CD26 em linhagens celulares de carcinoma cervical humano (SiHa, HeLa e C33A) e em queratinócitos imortalizados (HaCaT). Nossos resultados demonstram uma baixa expressão da DPPIV/CD26 nas linhagens celulares estudadas, sendo praticamente indetectável na linhagem HeLa. Foi verificada a atividade enzimática dipeptidilpeptidásica tanto ligada à membrana quanto solúvel em todas as linhagens. Na presença do inibidor de DPPIV/CD26 (fosfato de sitagliptina) observamos que a linhagem SiHa apresentou um aumento na migração celular, e assim sugerimos que ao menos em parte a migração nesta linhagem é regulada pela atividade enzimática da DPPIV/CD26. A fim de investigar a relação da expressão da DPPIV/CD26 com as oncoproteínas E6 e E7 do HPV, avaliamos sua expressão em queratinócitos normais e transduzidos com estas oncoproteínas. Verificamos que queratinócitos expressando E6 de HPV de alto risco apresentam uma redução na expressão da DPPIV/CD26, e esta regulação parece ser dependente da degradação da p53. Considerando que as linhagens celulares estudadas apresentam baixa expressão e atividade da DPPIV/CD26, para melhor compreender a importância da expressão desta proteína, nós induzimos a superexpressão da DPPIV/CD26 em linhagem de câncer cervical (HeLa) para posterior avaliação dos efeitos em diferentes mecanismos tumorais. Os resultados demonstram uma redução no crescimento de células expressando DPPIV/CD26, sendo este efeito independente da atividade enzimática. Além disso, foi demonstrado que a indução da expressão de DPPIV/CD26 não afeta os mecanismos de migração e adesão celular na linhagem HeLa. Sendo assim, acreditamos que o esclarecimento do papel da DPPIV/CD26 no contexto do câncer cervical possibilita que novas abordagens diagnósticas e terapêuticas sejam implementadas no futuro. / Cervical cancer is a very prevalent neoplasm in female population and is associated with human papillomavirus (HPV) infection. The high risk HPV E6 and E7 oncoproteins are responsible for cellular alterations that lead to the development of this tumor type. The dipeptidyl peptidase IV (DPPIV/CD26) is an enzyme that exerts important functions related to tumor progression. Several studies have shown changes in the expression and activity of this protein in different types of cancer. Considering the relationship between DPPIV/CD26 and cancer, and that there are still no studies relating this protein to cervical cancer, in the present study we first investigated the DPPIV/CD26 expression and activity in human cervical carcinoma cell lines (SiHa, HeLa and C33A) and in immortalized keratinocytes (HaCaT). Our results demonstrate a low DPPIV/CD26 expression in the studied cell lines, being almost undetectable in HeLa cell line. The dipeptidylpeptidasic enzymatic activity was verified both membrane bound and in the soluble form in all cell lines. In the presence of the DPPIV/CD26 inhibitor (sitagliptin phosphate) we observed that SiHa cell line showed an increase in cell migration, thus we suggest that at least in part cell migration in this cell line is regulated by DPPIV/CD26 enzymatic activity. In order to investigate the relationship between DPPIV/CD26 expression and HPV E6 and E7 oncoproteins, we evaluated the expression of this protein in normal keratinocytes or transduced with these oncoproteins. We have found that keratinocytes expressing high-risk HPV E6 present a reduction in DPPIV/CD26 expression, and this regulation appears to be dependent on p53 degradation. Considering that the cell lines studied have low DPPIV/CD26 expression and activity, in order to better understand the importance of the expression of this protein, we induced the DPPIV/CD26 overexpression in a cervical cancer cell line (HeLa) for further evaluation of the effects on different tumor mechanisms. The results demonstrate a reduction in cell growth of DPPIV/CD26 expressing cells, being this effect independent of the enzymatic activity. In addition, it has been demonstrated that the induction of DPPIV/CD26 expression does not affect the cell migration and adhesion mechanisms in the HeLa cell line. Thus, we believe that the elucidation of the DPPIV/CD26 role in the context of cervical cancer enables new diagnostic and therapeutic approaches to be implemented in the future.

Infection with Human Papillomavirus (HPV) is the sexually transmitted viral disease most prevalent in world. The infections can range from asymptomatic establishment to induction of squamous cell carcinomas. It has been discussed the correlation of HPV infection and the development and/or aggravation of lesions in the oral mucosa. The aim of this study was to evaluate the occurrence of HPV and its genotypes in patients with oral lesions and in healthy oral mucosa of users and non-users of drugs in the state of Sergipe, Brazil. Thirty-nine patients aged 2 to 83 years with clinically detectable lesions in the oral mucosa and 106 patients with healthy oral mucosa between 11 and 79 years were evaluated. Samples were collected by exfoliating the oral mucosa. For quality control of DNA extraction beta-globin PCR was performed. HPV DNA was detected using primers MY09/MY11 and GP5+/GP6+. Genotyping was performed by multiplex-PCR with specific primers for HPV types 6, 16 and 18. Our study detected the virus in all types of lesions evaluated. The occurrence of HPV was 76.92% (30/39) in patients with oral lesions. The most common virus type was HPV-6 in 56.67% (17/30), followed by HPV-18 in 26.67% (8/30) and HPV-16 in 6.67% (2/30). Positive results were found in 83.02% (88/106) of patients with healthy oral mucosa. The most common virus type was HPV-6 in 45.45% (40/88), followed by HPV-18 in 35.23% (31/88) and HPV-16 in 4.54% (4/88). Between multiple drug users 86.67% (52/60) were positive and multiple HPV infections were identified in 23.08% (12/52). At |non-users| the occurrence was 78.26% (36/46). A high occurrence of HPV was found in the study, both in oral lesions and in healthy mucosa. Rates of HPV detection in the oral cavity vary markedly in the world and make the relationship between HPV and oral carcinogenesis still controversial. Additional studies to evaluate the role of human papillomavirus in the development of lesions in the oral mucosa are necessary. There are few data available on the frequency of oral HPV infection in Brazilian population and especially among drug users. Other studies on HPV prevalence among drug users are needed for a better understanding of their exposure to the virus and for the development of prevention strategies. / A infecção pelo Papilomavírus Humano (HPV) é a doença viral sexualmente transmissível mais prevalente no mundo. Suas infecções podem variar de assintomáticas à indução de Carcinomas de Células Escamosas. Entre os agentes infecciosos associados ao câncer oral, tem-se discutido a correlação da infecção por HPV em mucosa oral e o desenvolvimento e/ou agravamento das lesões. O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência do HPV e seus genótipos em pacientes com lesão oral e em mucosa oral saudável de usuários e não-usuários de drogas no estado de Sergipe, Brasil. Foram avaliados 39 pacientes com idade entre 2 e 83 anos, com lesões clinicamente detectáveis na mucosa oral e 106 pacientes com mucosa oral saudável entre 11 e 79 anos. As amostras foram coletadas por esfoliação da mucosa oral. Para o controle de qualidade da extração de DNA foi utilizado PCR para beta-globina. DNA-HPV foi detectado utilizando primers MY09/MY11 e GP5+/GP6+. A genotipagem foi realizada através de multiplex-PCR com primers específicos para os tipos virais 6, 16 e 18. Nosso estudo detectou DNA-HPV em todos os tipos de lesões avaliadas. A prevalência do HPV foi de 76,92% (30/39) nos pacientes com lesões orais. O tipo viral mais frequente foi o HPV-6, presente em 56,67% (17/30), seguido do HPV-18 em 26,67% (8/30) e do HPV-16 em 6,67% (2/30). DNA-HPV foi encontrado em 83,02% (88/106) dos pacientes com mucosa oral sadia. O tipo viral mais frequente foi o HPV-6, presente em 45,45% (40/88), seguido do HPV-18 em 35,23% (31/88) e do HPV-16 em 4,54% (4/88). Entre usuários de múltiplas drogas 86,67% (52/60) foram positivos e infecções múltiplas por mais de um tipo viral foram identificadas em 23,08% (12/52) dos indivíduos. Entre os "não usuários" a taxa de infecção pelo HPV foi de 78,26% (36/46). Desta forma, foi verificada uma alta ocorrência do HPV em nosso estudo, tanto em lesões orais quanto em mucosas saudáveis. As taxas de detecção do vírus em cavidade oral variam acentuadamente no mundo e tornam a relação do HPV com o processo de carcinogênese oral ainda controversa. Isso faz necessária a realização de estudos adicionais que avaliem o papel do Papilomavírus Humano no desenvolvimento de lesões na mucosa oral. Há poucos dados disponíveis sobre a frequência de infecção oral por HPV na população brasileira e especialmente entre usuários de drogas. Novos estudos sobre a prevalência do HPV entre usuários de drogas são necessários para melhor compreensão da sua exposição ao vírus e o desenvolvimento de estratégias de prevenção.

Submitted by Caroline Falcao (caroline.rfalcao@ufpe.br) on 2017-04-04T18:59:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2011-Dissertação-JanaineCarvalho.pdf: 1997829 bytes, checksum: 1182cc1385c167fb2f0bfaa773d3a959 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T18:59:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) 2011-Dissertação-JanaineCarvalho.pdf: 1997829 bytes, checksum: 1182cc1385c167fb2f0bfaa773d3a959 (MD5) Previous issue date: 2011-10-07 / O câncer cervical é a segunda maior causa de mortes entre mulheres no mundo. Esta neoplasia maligna está relacionada com a presença do Papilomavírus Humano (HPV), sendo o tipo 16 responsável por 60% dos casos. O HPV infecta o tecido epitelial mucoso ou cutâneo e é responsável pelo aparecimento de verrugas ou papilomas benignos que tendem a regredir naturalmente na maioria dos casos, mas que ainda assim causam prejuízos aos indivíduos infectados e aos sistemas públicos de saúde, sendo a papilomatose considerada a doença sexualmente transmissível mais prevalente no mundo, tornando essencial a aplicação de estratégias de combate à esta infecção. Vacinas baseadas em Virus-like particles (VLPs), formadas a partir das proteínas capsidiais L1 e L2 - que induzem a formação de anticorpos neutralizantes - já estão comercialmente disponíveis. Contudo, possuem um preço elevado considerando, principalmente, os países em desenvolvimento. A imunidade humoral é direcionada contra os epítopos conformacionais da proteína L1 que compõe 90% da estrutura capsidial. Para produção das VLPs os genes das proteínas capsidiais são expressos em sistemas heterólogos e o produto resultante é purificado. A escolha de um sistema mais simples e barato para essa expressão é fundamental para a redução do custo das vacinas. Uma alternativa promissora é a levedura Pichia pastoris. Este trabalho propôs a produção extracelular e intracelular da proteína L1 de HPV16, que teve seu gene inserido no vetor pPCIZAα e pPCIZA, respectivamente. As construções pPICZAαL1H16 e pPICZAL1H16 foram integradas no genoma da levedura Pichia pastoris e a transcrição do gene L1 e a expressão da proteína foram confirmadas por RT-PCR e imunodetecção em Dot Blot. A busca de uma melhor expressão da proteína L1 de HPV 16, em células de P. pastoris, é uma etapa essencial na busca do desenvolvimento de uma estratégia vacinal mais economicamente viável baseada em VLPs. / The Cervical cancer is the second leading cause of death among women worldwide. This malignancy is related to the presence of human papillomavirus (HPV) being the type 16 responsible for 60% of the cases. HPV infects cutaneous or mucosal epithelial tissue and is responsible for the appearance of benign papillomas or warts that tend to regress naturally in most cases, but still cause damage to infected individuals and public health systems, with papillomatosis being considered the most prevalent sexually transmitted disease worldwide, making essential to implement strategies to combat this infection. Vaccines based on viruslike particles (VLPs), formed from the capsid proteins L1 and L2 - that induce the formation of neutralizing antibodies - are already commercially available. However, they are expensive considering mainly the developing countries. Humoral immunity is directed against conformational epitopes of the L1 protein which represents 90% of the capsid structure. In order to produce VLPs the capsid protein genes are expressed in heterologous systems and the resulting product is purified. The choice of a simpler and cheaper system for this expression is fundamental to reduce the cost of vaccines. A promising alternative is the Pichia pastoris yeast. This paper proposed the extracellular and intracellular generation of HPV16 L1 protein, which had its gene inserted into the vectors pPCIZAα e pPCIZA, respectively. The pPICZAαL1H16 and pPICZAL1H16 plasmids were integrated into the Pichia pastoris yeast genome and the L1 gene transcription and protein expression were confirmed by RT-PCR and immunodetection in Dot Blot. The search for better expression of HPV 16 L1 protein, in cells of P. pastoris, is an essential step in the quest to develop a more economically viable vaccine strategy based on VLPs.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-09-19T13:13:44Z No. of bitstreams: 2 Tese - Kelly Deyse Segati - 2017.pdf: 1820249 bytes, checksum: 36ea5524af9118dfeefed599a8c8ef16 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-09-19T13:14:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Kelly Deyse Segati - 2017.pdf: 1820249 bytes, checksum: 36ea5524af9118dfeefed599a8c8ef16 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-19T13:14:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Kelly Deyse Segati - 2017.pdf: 1820249 bytes, checksum: 36ea5524af9118dfeefed599a8c8ef16 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-08-08 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Cervical cancer is caused by persistent high-risk HPV infection. In addition, genetic and epigenetic changes such as the silencing of Wnt signaling pathway inhibitor genes appear to be essential for the development and progression of the disease. This study aimed to analyze the prevalence of HPV infections in cervical cancer and to verify the associations between age, histological type, degree of tumor differentiation and the presence of methylation DKK3, SOX17 and SFRP2. This is a cross-sectional study including cases of cervical cancer, distributed in diagnoses of squamous cell carcinomas and adenocarcinomas. The samples were assayed for 25 HPV genotypes using the INNOLipa® kit, then performed M-PCR to identify the presence of methylation in the promoter region of the genes DKK3, SOX17 and SFRP2. The results of the research showed that the age is significantly lower for women with cervical adenocarcinomas compared to those with a diagnosis of squamous cell carcinoma. Infections with genotypes 18 and 45 were associated with the diagnosis of adenocarcinomas in women younger than 50 years. Methylation of inhibitors of the Wnt signaling pathway and HPV infections 16, 18 and 45 are frequent events during multistage carcinogenesis, however, only a significant association with SFRP2 methylation was observed. The methylation of gene promoter SOX17 was related to lower cervical cancer severity but not to HPV types. Adenocarcinomas were significantlyassociated with HPV infections 16, 18 and 45, and demonstrated a borderline association with DKK3 and SOX17 methylation. In summary, the results of the present study contribute to a better understanding of carcinogenesis of the cervix in the Center-West of Brazil. / O câncer de colo uterino é causado pela infecção persistente por HPV de alto risco oncogênico. Em adição, as alterações genéticas e epigenéticas como o silenciamento dos genes inibidoresda via de sinalização Wnt parecem ser essenciais para o desenvolvimento e progressão da doença. Esse estudo teve como objetivo analisar a prevalência de infecções por genótipos específicos de HPV em câncer de colo uterino e verificar as associações entre a idade, tipo histológico, o grau de diferenciação tumoral e a presença da metilação na região promotora dos genes DKK3, SOX17 e SFRP2. Trata-se de um estudo de corte transversal incluindo casos de câncer de colo uterino, distribuídos em diagnósticos de carcinomas de células escamosas e adenocarcinomas. As amostras foram testadas para 25 genótipos de HPV utilizando o kit INNOLipa®, em seguida foram submetidas a M-PCR para identificar a presença da metilação na região promotora dos genes DKK3, SOX17 e SFRP2. Os resultados da pesquisa mostraram que a idade é significativamente menor em mulheres com adenocarcinomas cervicais comparadas com aquelas com diagnóstico de carcinoma de células escamosas. A infecção por genótipos 18 e 45 foram positivamente associadas ao diagnóstico de adenocarcinomas em mulheres com idade menor que 50 anos. A metilação dos inibidores da via de sinalização Wnt e as infecções por HPV 16, 18 e 45 são eventos frequentes durante a carcinogênese em várias etapas, no entanto, apenas foi observada associação significativa com a metilação de SFRP2. A metilação da região promotora de SOX17 foi relacionada com menor gravidade do câncer de colo uterino, mas não com tipos de HPV. Os adenocarcinomas apresentaram associação significativa com infecções por HPV 16, 18 e 45, além de demonstrar uma associação limítrofe com a metilação de DKK3 e SOX17. Em resumo, resultados do presente estudo contribuem para o melhor entendimento da carcinogêneses do colo uterino na região Centro-Oeste do Brasil.

Seres humanos dependem incessantemente de um sistema de reconhecimento efetivo contra infecções para sobreviver. Dentre as diversas proteínas que compõem a resposta imune inata estão os receptores do tipo Toll (TLR Toll-like Receptors), que possuem a função de reconhecer padrões moleculares associados a patógenos e dar início a uma resposta imune adequada. O carcinoma do colo uterino é uma das principais causas de morte de mulheres por câncer mundialmente, sendo o terceiro tipo de câncer mais comum entre mulheres. Este tipo de neoplasia é vinculada etiologicamente à infecção pelo Papilomavírus humano (HPV). Dentre as principais proteínas virais, E6 e E7 são responsáveis pela manipulação dos processos celulares para promover ciclo viral, sendo essenciais no processo de transformação celular. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi investigar a importância da via de sinalização de TLRs sobre a infecção por HPV. O polimorfismo rs5743836, na região promotora de TLR9, capaz de alterar a expressão deste receptor, foi estudado quanto à influência sobre a história natural da infecção por HPV em uma coorte de mulheres brasileiras; nenhuma associação relevante foi encontrada, indicando que este polimorfismo não interfere significativamente na resposta à infecção e risco de desenvolvimento de lesões no colo do útero causadas por HPV. Proteínas componentes da via de TLRs demonstraram serem alvos de interação com E6 de HPV16; dentre elas, o notável adaptador MyD88 e IKKε, enzima ativadora de importantes transfatores do sistema imune. Estas interações foram aqui estudadas. A interação de E6 com MyD88 resultou em estabilização da proteína viral, o que parece não depender do sítio LxxLL presente em MyD88, como ocorre com outros parceiros moleculares de E6. O sítio de interação de E6 com IKKε coincide com a região onde se localiza o sítio catalítico desta enzima, sugerindo a ação de E6 na ativação de proteínas alvo de IKKε. Esta interação foi observada em queratinócitos, células alvo das infecções por HPV. A produção de citocinas foi afetada por E6 de HPV16, resultando num aumento da quantidade de IL-8 e IL-6; a indução desta citocina poderia ser explicada pela ativação de IKKε. Estes resultados apontam para a capacidade do HPV16 de interferir com o sistema imune, contribuindo para o processo de carcinogênese. / Humans constantly rely on an effective recognition system against infections in order to survive. Among various proteins that compose the innate immune response, Toll-like Receptors (TLRs) have the role to recognize pathogen associated molecular patterns and initiate a proper immune response. The cervical cancer is one of the main causes of women death worldwide, being the third most common cancer type among women. This type of neoplasia is etiologically associated with the Human papillomavirus (HPV) infection. E6 and E7, two main viral proteins, are responsible for manipulating the cellular processes to promote the virus\' life-cycle, being essential to the cellular transformation process. In the context, the objective of this work was to investigate the relevance of the TLR signaling pathway on the HPV infection. The rs5743836 polymorphism, in the TLR9 promoter region, capable of altering this receptor\'s expression, was studied regarding its influence on the natural history of HPV infection in a Brazilian women cohort; no relevant association was found, indicating that this polymorphism does not interfere significantly in the infection response and risk of developing cervix lesions caused by HPV. Component proteins of TLR pathway were shown to be interaction targets of HPV16 E6; among them, the notable adaptor MyD88 and IKKε, enzyme that activates important immune system transfactors. These interactions were studied in this work. The interaction of E6 with MyD88 resulted in the stabilization of the viral protein, which seems independent of the LxxLL site present on MyD88, as in other E6 molecular partners. The interaction site on IKK with E6 matches with the region containing the enzyme\'s catalytic site, suggesting an influence of E6 in the activation of IKKε target proteins. This interaction was observed in keratinocytes, natural targets of HPV infections. The cytokines production was altered by HPV16 E6, resulting in an increase of IL-8 and IL-6 concentration; the induction of the latter could be explained by the activation of IKKε. These results point to the ability of HPV16 of interfering with the immune system, contributing to the carcinogenesis process.