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Estudo Retrospectivo da Doença de Chagas em doadores de sangue daregião noroeste do Rio Grande do Sul, Brasil / A Retrospective Study of Chagas Disease In Blood Donors from Northwest of Rio Grande do Sul State, Brazil

Pedroso, Débora 16 March 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_debora_pedroso.pdf: 815380 bytes, checksum: db4c202243281a1794848721f2e3153e (MD5) Previous issue date: 2012-03-16 / Chagas Disease was discovered by Carlos Chagas in 1909. It is an hematological and tissue infection caused by flagellate protozoan Trypanosoma cruzi, which is transmitted by an hematophagous insect. In addition to transmission by the vector this parasitic infection can be acquired by humans in other ways, such as blood transfusion, laboratory accidents, organ transplants, oral transmission by penetration of trypomastigotes through oral mucosa or through placenta. Although blood transmission shows a decline after implementation of donor screening this is still present, and therefore needs constant vigilance. In view of this, the study aims to describe from a retrospective analysis a serological profile for Chagas disease in blood donors from the municipality of Santiago located in the northwestern state of Rio Grande do Sul, in which high levels of endemic disease appeared in past decades. The results of serological blood donors from the Blood Bank of municipality of Santiago were analyzed during the period 2001-2011. Of the 10,164 units of blood collected, with an average of 1,016 units per year, 2.68% were reactive to T. cruzi, being the main cause of discarding blood bags. The higher frequency of positive cases occurred in men, with mean age of 38.84 years old, coming from the urban area of the municipality of Santiago. Regarding the positive cases among women, 25% were younger than 31 years old. From these results, an expressive serum reactivity to T. cruziamong donors in this region could be noticed during the study period, more frequently in men over thirty years old. Although serological screening detects the majority of cases positive for Chagas disease, it does not make impossible transmission via transfusion. Therefore it is important to devise epidemiological strategies to determine the main form of infection that is occurring in the region. / A doença de Chagas, descoberta em 1909 por Carlos Chagas, é uma infecção tecidual e hematológica causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi, esse protozoário é transmitido por intermédio do inseto hematófago. Além da transmissão pelo vetor a infecção parasitária pode ser adquirida pelo homem por outras vias, tais como transfusões sanguíneas, acidentes de laboratório, transplantes de órgãos, transmissão oral através da penetração de tripomastigotas pela mucosa oral e por via placentária. Embora a transmissão transfusional mostre um declínio após a implementação da triagem de doadores, esta ainda permanece presente, necessitando, portanto, de constante vigilância. Em vista disso, o presente estudo visa descrever,a partir de uma análise retrospectiva, o perfil sorológico para doença de Chagas em doadores de sangue da cidade de Santiago, localizada na região noroeste do estado do Rio Grande do Sul, na qual a endemia figurava em índices elevados em décadas passadas.Para isso foram analisados os resultados sorológicos de doadores de sangue do Banco de sangue de Santiago durante o período de 2001-2011. Das 10.164 unidades de bolsas de sangue coletadas, com uma média de 1.016 bolsas de sangue por ano, destas 2,68% apresentaram reatividade para T. cruzi, sendo a primeira causa de descarte de bolsas de sangue. A maior frequência de casos positivos ocorreu em homens, com idade média de 38,84 anos, procedentes da zona urbana do município de Santiago. Com relação aos casos positivos do sexo feminino 25% delas tinham idade inferior a 31 anos. A partir destes resultados constatou-se a presença expressiva de soro-reatividade a T. cruzi entre os doadores da região, sendo mais frequente em homens acima de 30 anos. Embora a triagem sorológica detecte a maioria dos casos positivos para doença de Chagas, isso não inviabiliza totalmente a transmissão via transfusional, fazendo-se importante traçar estratégias epidemiológicas para determinar a principal forma de infecção que está ocorrendo na região.
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Toxoplasmose: Perfil Sorológico em gestantes atendidas em Postos de Saúde do Município de Pelotas-RS / Toxoplasmosis: serological analysis in pregnant women who attend primary health centres in Pelotas - RS

Cademartori, Beatris González 28 June 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_beatris_cademartori.pdf: 636391 bytes, checksum: 43565196211ab5284ee321f2b82e0430 (MD5) Previous issue date: 2007-06-28 / The toxoplasmosis acquired during pregnancy of benign course in imunocompetentes patients and asymptomatic in 85% of the cases may infect the fetus and result in congenital infection. Although most of the newborns do not present symptoms or clinical signs, there may be sequelae during the childhood and adult life, being the corioretinitis the most frequent one. Among the strategies to prevent congenital toxoplasmosis we can find the education for health and the preconception trial, which aim is to reduce the exposition to the risk factors that may lead to an infection by T. gondii, to detect and to treat acute infection in pregnant woman. The aims of this study were to evaluate the prevalence and risk of congenital transmission by Toxoplasma gondii, through serological analysis of the pregnant women and also through their knowledge about the zoonose transmission routes, to check the possible association between the soropositivity of the pregnant women and their exposition to the infection risk factors, and also to compare the Chemiluminescence and Indirect Immunofluorescence techniques in the diagnosis of the toxoplasmosis in the studied sample. A transversal study was conducted, with 425 pregnant women who were attending prenatal care in public health centres of Pelotas (RS-Brazil), during the period of May to November 2006. It was verified a T. gondii soroprevalence of (IgG) 54,8% and it was not detected the presence of IgM antibodies. The analysis of the risk factors showed a significant association (p<0.05) between the soropositivity of the pregnant women and their age, the handle of raw meat, the intake of raw vegetables, raw or undercooked meat and raw or nonpasteurized milk and direct contact with the soil. The Logistic Regression Model confirmed the above associations to the intake of raw or undercooked meat (OR=1.85) and to the direct contact with the soil (OR=2.67). The interaction with cats did not present a significant association with the T. gondii soropositivity patients. It was observed that the pregnant women who were interviewed did not know much about the disease and its main sources of infection. The Chemiluminescence technique proved to be an adequate one in the routine diagnosis of the T. gondii infection as, besides being a practical technique, it showed results comparable to the ones of the Indirect Immunofluoresence, sensibility, specificity and accuracy. The results indicate the necessity of implementing T. gondii primary prevention programmes for the pregnant women who as a way of reducing the risks of congenital toxoplasmosis. / A toxoplasmose adquirida durante a gestação, de curso benigno em pacientes imunocompetentes e assintomática em 85% dos casos, pode ser transmitida para o feto e resultar em infecção congênita. Embora maioria dos recém- nascidos não apresente sintomas ou sinais clínicos, pode evoluir para seqüelas na infância e vida adulta, sendo que a coriorretinite é a lesão mais freqüente. Entre as estratégias de prevenção da toxoplasmose congênita incluem-se a educação em saúde e a triagem pré-natal, com o objetivo de reduzir a exposição aos fatores de risco para a infecção por Toxoplasma gondii, detectar e tratar a infecção aguda na gestante. Os objetivos foram avaliar a prevalência e o risco de transmissão congênita por T. gondii, através da análise do perfil sorológico das mesmas e do conhecimento sobre as formas de transmissão da zoonose, verificar possíveis associações entre soropositividade das gestantes e a exposição aos fatores de risco da infecção, além de comparar as técnicas de Quimioluminescência e Imunofluorescência Indireta para o diagnóstico sorológico da toxoplasmose na amostra estudada. Foi realizado um estudo transversal, com 425 gestantes que realizaram o pré-natal nos Postos de Saúde de Pelotas-RS, no período de maio a novembro de 2006. Constatou-se uma soroprevalência (IgG) de 54,8% para T. gondii e não foi detectado a presença de anticorpos IgM. Na análise dos fatores de risco foi verificada associação significativa (p<0,05) entre a soropositividade das gestantes e a idade, manuseio de carne crua, consumo de vegetais crus, de carnes cruas ou mal cozidas, de leite cru não pasteurizado e contato direto com o solo. Através do modelo de regressão logística, essa associação foi confirmada para o consumo de carnes cruas ou mal cozidas (OR=1,85) e o contato direto com o solo (OR=2,67). O convívio com gatos, não apresentou associação significativa com a soropositividade para T. gondii nas pacientes estudadas. Constatou-se elevado desconhecimento da doença e das principais fontes da infecção pelas gestantes entrevistadas. A técnica de Quimioluminescência mostrou-se adequada ao diagnóstico de rotina da infecção por T. gondii, pois, além da praticidade, apresentou de sensibilidade, especificidade e acurácia comparáveis aos da Imunofluorescência Indireta. Os resultados obtidos indicam a necessidade da implantação de programas de prevenção primária da infecção por T. gondii para gestantes, a fim de reduzir o risco da toxoplasmose congênita.
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Helminto e artropodofauna de Paroaria coronata (Miller, 1776) (Passeriformes: Emberzidae) / Helminth and Arthropodfauna of the Paroaria coronata (Miller, 1776) (Passeriformes: Emberezidae)

Mascarenhas, Carolina Silveira 22 July 2008 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_carolina_mascarenhas.pdf: 23937030 bytes, checksum: 4ede460c8b3f9046c6af286984b4b306 (MD5) Previous issue date: 2008-07-22 / Paroaria coronata (red-crested cardinal) occurs only of South America. The species is not in danger of extinction, but it is appreciated by the illegal trade in wild animals. His parasite fauna is little known and has been recorded only one Nematoda and three Phthiraptera. The diet is mainly based greasses seeds, but can consume small fruit and insects. The study aimed to identify helminths and arthropods associated with red-crested cardinal and for that were examined wild birds, captives and of undetermined origin, totaling 40 specimes. The wild birds and undetermined origin were the most parasitized. The helminthfauna was composed of Aproctella carinii, Dispharynx nasuta, Capillaria sp. Diplotriaena sp. (Nematoda); Tanaisia oviaspera, Tanaisia valida, Tanaisia sp., Prosthogonimus ovatus (Trematoda); Orthoskrjabinia sp. (Cestoda); Mediorhynchus sp. (Acanthocephala). Tanaisia sp. was most prevalent (10%) and more abundant (0.48), D. nasuta and Orthoskrjabinia sp. occurred with greater mean intensity of parasitism (5 helminths/host). The arthropodfauna was represented by Myrsidea coronatae, Philopterus sp. and Brueelia sp. (Phthiraptera); Ptilonyssus sairae and Sternostoma pirangae (Gamasida), where M. coronatae and P. sairae were the most prevalent with 65% and 50%, respectively. All helminths are reported for the first time in P. coronata, Orthoskrjabinia sp. is recorded for the first time in Brazil; A. carinii, Diplotriaena sp., T. valida, T. oviaspera and Mediorhynchus sp. are cited for the first time in the Rio Grande do Sul state. The helminthfauna found in P. coronata, indicates that the species is omnivorous eating habits. Among the arthropods, Philopterus sp., Brueelia sp., P. sairae and S. pirangae have your first record infecting P. coronata; M. coronatae is recorded for the first time in Brazil, this report marks the first occurrence of S. pirangae in Brazil and the first of P. sairae in the Rio Grande do Sul state. / Paroaria coronata (cardeal) ocorre apenas na América do Sul. A espécie não está em perigo de extinção, mas é visada pelo comércio ilegal de animais silvestres. Sua fauna parasitária é pouco conhecida, tendo sido registrado somente um Nematoda e três Phthiraptera. A dieta desta ave baseia-se principalmente em sementes de gramíneas, mas pode consumir pequenos frutos e insetos. O estudo teve por objetivo identificar os helmintos e artrópodes associados à P. coronata e para tal foram examinadas aves silvestres, cativas e de origem indeterminada, totalizando 40 espécimes. As aves silvestres e de origem indeterminada foram as mais parasitadas. A helmintofauna esteve composta por Aproctella carinii, Dispharynx nasuta, Capillaria sp. Diplotriaena sp. (Nematoda); Tanaisia oviaspera, Tanaisia valida, Tanaisia sp., Prosthogonimus ovatus (Trematoda); Orthoskrjabinia sp. (Cestoda); Mediorhynchus sp. (Acanthocephala). Tanaisia sp. foi mais prevalente (10%) e mais abundante (0,48), D. nasuta e Orthoskrjabinia sp. ocorreram com maior intensidade média de parasitismo (5 helmintos/hospedeiro). A artropodofauna esteve representada por Myrsidea coronatae, Philopterus sp. e Brueelia sp. (Phthiraptera); Ptilonyssus sairae e Sternostoma pirangae (Gamasida), onde M. coronatae e P. sairae foram os mais prevalentes com 65% e 50%, respectivamente. Todos os helmintos são relatados pela primeira vez em P. coronata, Orthoskrjabinia sp. é registrado pela primeira vez no Brasil; Aproctella carinii, Diplotriaena sp., Tanaisia valida, Tanaisia oviaspera e Mediorhynchus sp. são citados pela primeira vez no Rio Grande do Sul. A helmintofauna encontrada em P. coronata, indica que a espécie tem hábito alimentar onívoro. Entre os artrópodes, Philopterus sp., Brueelia sp., P. sairae e S. pirangae são citados pela primeira vez parasitando P. coronata; M. coronatae é registrado pela primeira vez no Brasil; este relato caracteriza a primeira ocorrência de S. pirangae no Brasil e a primeira de P. sairae no Rio Grande do Sul.
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Helmintos e artrópodes de Vanellus chilensis (Molina, 1782), quero-quero, da região sul do Rio Grande do Sul / Identification of helminths and arthropods in Vanellus chilensis (Molina, 1782) (Charadriiformes: Charadriidae), lapwing, in the south region of the Rio Grande do Sul state

Avancini, Luciano Fagundes 23 December 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_luciano_avancini.pdf: 1128794 bytes, checksum: 84f53c68ac05e202ba01bcdff9c6d5cb (MD5) Previous issue date: 2009-12-23 / Vanellus chilensis is a bird species of the family Charadriidae distributed across Central and South America. Despite its high abundance and broad distribution, there are few records of parasites on this species. Aiming to identify the helminths and arthropods that parasitize V. chilensis in southern Brazil, twenty eight birds were necropsied. For collection of ectoparasites, the birds were individually washed in water containing detergent. After that, they were necropsied and their organs were examined for helminths under a stereomicroscope. The helminths found and its respective prevalence, mean abundance and mean intensity were: Brevithominx asperodorsus (Enoplida, Capilariidae) 53.6%, 4.5 and 8.4; Heterakis psophiae (Oxyurida, Heterakidae) 39.3%, 1.0 and 2.55; Dispharynx nasuta (Spirurida, Acuariidae) 28.6%, 4.11 and 14.38; Echinostoma aphylactum (Echinostomida, Echinostomatidae) 17.9%, 0.64 and 3.6; Stomylotrema vicarium (Plagiorchiida, Stomylotrematidae) 10.7%, 0.25 and 2.33; Neivaia cymbium (Cyclocoeloidea, Cyclocoelidae) 7.1%, 0.14 and 2.0; Gyrocoelia perversa (Cyclophyllidea, Dioecocestidae) 60.7%. The Phthiraptera found were Actornithopilus sp. (Amblycera, Menoponidae) and Quadraceps guimaraesi (Ischnocera, Philopteridae). Another arthropod collected was the nasal mite Rhinonyssus sp. (Acarina, Rhinonyssidae). H. psophiae is cited for the first time parasitizing the order Charadriiformes in RS. B. asperodorsus, E. aphylactum, N. cymbium represent new records for Charadiidae in the State. This is the first report of natural infection in Charadriidae by the parasite S. vicarium in the region of study. The cestode G. perversa and the nematode D. nasuta are cited for the first time parasitizing V. chilensis in RS. The lice Actornithopilus sp. and Quadraceps guimaraesi are new records in RS as parasites of V. chilensis, which is also reported as a new host for the nasal mite Rhinonyssus sp / Vanellus chilensis, quero-quero, tem distribuição na América do Sul e América Central, é uma ave muito comum na região sul do RS. Há poucos relatos a respeito de parasitos nesta espécie, o que incentivou o desenvolvimento deste trabalho. Com o objetivo de conhecer os helmintos e artrópodes que ocorrem em V. chilensis foram examinadas 28 aves, as quais foram lavadas, individualmente, em água com detergente para obtenção dos ectoparasitos e após necropsiadas para a coleta de helmintos. Os helmintos encontrados e respectivas prevalências, abundância média e intensidade média foram Brevithominx asperodorsus (Enoplida, Capilariidae) 53,6%, 4,5 e 8,4; Heterakis psophiae (Oxyurida, Heterakidae) 39,3%, 1,0 e 2,55; Dispharynx nasuta (Spirurida, Acuariidae) 28,6%, 4,11 e 14,38; Echinostoma aphylactum (Echinostomida, Echinostomatidae) 17,9%, 0,64 e 3.6; Stomylotrema vicarium (Plagiorchiida, Stomylotrematidae) 10,7%, 0,25 e 2,33; Neivaia cymbium (Cyclocoeloidea, Cyclocoelidae) 7,1%, 0,14 e 2,0; Gyrocoelia perversa (Cyclophyllidea, Dioecocestidae) 60,7%. Os Phthiraptera encontrados foram Actornithopilus sp. (Amblycera: Menoponidae) e Quadraceps guimaraesi (Ischnocera, Philopteridae), e o ácaro nasal Rhinonyssus sp. (Acarina: Rhinonyssidae). B. asperodorsus, E. aphylactum, N. cymbium, tem seu primeiro registro na família Charadriidae para o RS, H. psophiae tem seu primeiro registro na ordem Charadriiformes para o RS. Este é o primeiro registro de infecção natural por S. vicarium em Charadriidae para o RS. G. perversa e D. nasuta tem seu primeiro registro em V. chilensis no RS.
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Artrópodes e helmintos parasitos de Cavia aperea Exerleben, 1777 (Rodentia: Caviidae) no sul do Brasil / Parasitic Arthropods and helminths from Cavia aperea Exerleben, 1777 (Rodentia: Caviidae) in southern Brazil

KRÜGER, Cristiane Pereira 31 August 2006 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_cristiane_kruger.pdf: 1966216 bytes, checksum: 66de5146aa5816f5e065444215ce151b (MD5) Previous issue date: 2006-08-31 / Cavia aperea, or popularly preá (Brazilian guinea pig), it is a rodent of diurne habits, mainly in the first hours of the morning and in finish them of the afternoon. They are fed of herbaceous vegetables, they live in tunnels of grassy, being able many times to inhabit agricultural peridomiciliar regions, close to highways of the south region it Brazil, being many adopted times as animal of esteem. With the objective to know the diversity of parasites of this rodent, were examined 33 specimens of Cavia aperea that after abated according to Protective Association of the Animals, they had been brushed and washed for collection of ectoparasites, being after that necropsied and its organs examined in search of endoparasites. The ectoparasites after removed from the animal, were clarified in acetate of metila and mounted in slides with Canada balsam. For collection of the helminths it was examined and one washed separately each organ in sieve, nematodes had been clarified in lactofenol and the members of the Classes Trematoda and Cestoda were prepared according Amato s technique diaphaned in creosote and mounted in slides with Canada balsam. Of the total of examined animals, 100% were infested by lice of the species: Trimenopon hispidum, Gyropus ovalis, Gliricola lindolphoi and G. porcelli, with exception of this, all others are registered for the first time in the State Rio Grande do Sul. Of Siphonaptera, Polygenis (Neopolygenis) atopus it was registered prevalence of 6,1%. The helminthes were: of the Phylum Nematoda - Trichostrongylus sp., Paraspidodera uncinata, Vianella travassosi, Ackertia burgosi and Graphidioides subterraneus; Class Trematoda - Pseudoquinqueserialis caviae, Pseudohippocrepis suttonae n.g. n.sp., Taxorchis caviae and the Cestoda Monoecocestus parcitesticulatus, all cited for the first time in the state Rio Grande do Sul, with exception of Paraspidodera uncinata. / Cavia aperea, ou popularmente preá, é um roedor de hábito diurno, principalmente nas primeiras horas da manhã e nas ultimas da tarde. Alimentam-se de vegetais herbáceos, vivem em túneis de gramíneas, podendo muitas vezes habitar regiões peridomiciliares rurais, perto de rodovias da região sul do Brasil, sendo muitas vezes adotados como animais de estimação. Com o objetivo de conhecer a diversidade de parasitos deste roedor, examinou-se 33 exemplares de Cavia aperea que após eutanásiados segundo a Associação Protetora dos Animais, foram escovados e lavados para coleta de ectoparasitos, sendo em seguida necropsiado e seus órgãos examinados em busca de endoparasitos. Os ectoparasitos após removidos do animal foram clarificados em acetato de metila e montados em lâminas com bálsamo do Canadá. Para coleta dos helmintos examinou-se e lavou-se cada órgão em separado em tamis, os nematóides foram clarificados em lactofenol e os membros das classes Trematoda e Cestoda foram preparados segundo técnica de Amato e em seguida diafanizados em creosoto de Faia e montados em lâminas com bálsamo do Canadá. Dos dos animais examinados, 100% estavam infestados por piolhos das espécies: Trimenopon hispidum, Gyropus ovalis, Gliricola lindolphoi e G. porcelli, e com exceção deste último, todos os outros são registrados pela primeira vez no Rio Grande do Sul. De Siphonaptera encontrou-se Polygenis (Neopolygenis) atopus com prevalência de 6,1%. Os helmintos encontrados foram: do Filo Nematoda Trichostrongylus sp., Paraspidodera uncinata, Vianella travassosi, Ackertia burgosi e Graphidioides subterraneus; Classe Trematoda Pseudoquinqueserialis caviae, Pseudohippocrepis suttonae n.g. n.sp. e Taxorchis caviae e a Classe Cestoda - Monoecocestus parcitesticulatus, todos citados pela primeira vez no Rio Grande do Sul, com exceção de Paraspidodera uncinata.
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Avaliação da susceptibilidade de Lutzomyia migonei (Diptera: Psychodidae) ao desenvolvimento de Leishmania (Leishmania) infantum / Evaluation of the susceptibility of Lutzomyia migonei (Diptera: Psychodidae) to Leishmania (Leishmania) infantum

Guimarães, Vanessa Cristina Fitipaldi Veloso January 2016 (has links)
Submitted by Stephany Silva (stephany.silva@cpqam.fiocruz.br) on 2016-09-19T12:39:49Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado_Vanessa Fitipaldi final. 15.07.16pdf.pdf: 4368605 bytes, checksum: 43e7621075f176708936269193abf2d3 (MD5) / Approved for entry into archive by Adagilson Silva (adagilson@cpqam.fiocruz.br) on 2016-09-19T18:06:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado_Vanessa Fitipaldi final. 15.07.16pdf.pdf: 4368605 bytes, checksum: 43e7621075f176708936269193abf2d3 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-19T18:06:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado_Vanessa Fitipaldi final. 15.07.16pdf.pdf: 4368605 bytes, checksum: 43e7621075f176708936269193abf2d3 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A oferta e uso das Práticas Integrativas e Complementares (PICs) tem aumentado no Brasil e no mundo. Dentre as que mais cresceram no Brasil estão as chamadas Práticas Corporais (PCs). Esse artigo objetivou traçar um perfil dos usuários de PCs analisando sua qualidade de vida, os aspectos sociodemográficos e de saúde e os motivos que os levaram a procurar um serviço de PICs. Se tratou de um estudo exploratório e analítico, de abordagem quantitativa. Os dados foram coletados por meio dos prontuários e da avaliação qualidade de vida pelo WHOQOL-bref de 147 usuários de práticas corporais ofertadas por uma unidade de práticas intergrativas em Recife-PE. Os resultados apontaram associações significantes entre os aspectos sócio demográficos e de saúde, a qualidade de vida e os motivos de procura dos usuários de práticas corporais pelo serviço de PICs (AU)
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Genes de cisteíno proteases (Catepsina L-like) de Trypanosoma rangeli: polimorfismo, relações filogenéticas e alvos para diagnóstico e genotipagem. / Cathepsin L-like genes of Trypanosoma rangeli: phylogenetic analysis and polymorphic sequences as markers for lineage genotyping and diagnosis.

Vargas, Paola Andrea Ortiz 19 February 2009 (has links)
Nós isolamos e seqüenciamos genes que codificam Catepsina L-like em diversos isolados de T.rangeli de humano, mamíferos silvestres e Rhodnius spp., do centro e sul da América. Análises filogenéticas de seqüências que codificam a proteína madura de T. rangeli, outras espécies de Trypanosoma e Leishmania e duas espécies de bodonídeos, posicionaram T.rangeli próximo a T.cruzi de acordo com a ordem de divergência determinada em filogenias baseadas em SSUrDNA. Uma análise de 17 seqüências do domínio catalítico de CatL-like de isolados representativos da diversidade filogenética e distribuição geográfica de T. rangeli, apoiaram as mesmas linhagens filogenéticas previamente definidas. Seqüências do gene CatL-like também foram usados para padronizar ensaios de PCR para diagnóstico de T. cruzi e T. rangeli. Além disso, um método de genotipagem por PCR multiplex segregou os isolados de T. rangeli nas principais linhagens previamente estabelecidas. Este é o primeiro estudo usando um gene codificador de proteína para comparar isolados de T. rangeli de linhagens distintas. / We have isolated and sequenced genes encoding cathepsin L-like (CatL-like) cysteine proteases from isolates of T. rangeli from human, wild mammals and Rhodnius spp., from Central and South America. Phylogenetic analysis of sequences encoding the mature CatL-like enzymes from T. rangeli (Rangelipain), other Trypanosoma and Leishmania species, and two species of bodonids, positioned T. rangeli closest to T. cruzi corroborating the same order of divergence showed in phylogenies based on SSU rDNA. Analysis of 17 sequences of the catalytic domains of CatL-like genes isolates representative of the phylogenetic diversity and geographical range of T.rangeli supported previously defined phylogenetic lineages. Sequences of CatL-like genes were used to standardize PCR assays for the diagnosis of T. rangeli and T. cruzi, and a genotyping method of multiplex-PCR distributed of isolates of T. rangeli in the major phylogenetic lineages previously established. This is the first study using protein-encoding genes to compare isolates from T. rangeli of distinct lineages.
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Imunopatologia hepática da infecção experimental do vírus dengue em Callithrix penicillata

HENRIQUES, Daniele Freitas 25 September 2015 (has links)
Submitted by Eliete Santos (profliete@hotmail.com) on 2018-03-14T18:58:24Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_ImunopatologiaHepaticaInfeccao.pdf: 4042036 bytes, checksum: fdd989701e3ca93ed1baeec85a2d8ec1 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliete Santos (profliete@hotmail.com) on 2018-03-14T18:59:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_ImunopatologiaHepaticaInfeccao.pdf: 4042036 bytes, checksum: fdd989701e3ca93ed1baeec85a2d8ec1 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-14T18:59:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_ImunopatologiaHepaticaInfeccao.pdf: 4042036 bytes, checksum: fdd989701e3ca93ed1baeec85a2d8ec1 (MD5) Previous issue date: 2015-09-25 / A Dengue constitui um dos principais problemas de Saúde Pública no mundo, e um dos fatores que colaboram com esta situação é a falta de uma vacina eficaz contra a doença, sendo que em parte, essa dificuldade para obtenção, se deve à inexistência de um modelo experimental que represente o quadro de infecção e manifestação da doença similar aos observados em humanos. Dessa forma, o Instituto Evandro Chagas demonstrou a presença de antígenos virais de dengue, através do teste de Imuno-histoquímica, em primata não humano (PNH) da espécie Callithrix jacchus, o qual evoluiu a óbito com quadro de dengue hemorrágica. Diante do exposto, aliados ao fato de que o fígado é o órgão onde se observa as principais alterações provocadas pelo Virus Dengue (VDEN) em humanos, torna-se importante analisar o fígado de primatas do gênero Callithrix a fim de estudar a patogênese e a imunopatologia da infecção sequencial pelo VDEN. No total, 26 PNH da espécie Callithrix penicillata foram submetidos a infecção primária (IP) por via subcutânea com VDEN-3 (3,23 x 103 PFU/mL), sendo 13 destes animais anestesiados e sacrificados diariamente por sete dias pós-infecção (dpi) (fase aguda) e em intervalos aleatórios até 60 dpi (fase convalescente); a infecção secundária (IS) com VDEN-2 (4,47 x 104 PFU/mL) foi realizada dois meses após a IP nos demais 13 animais. Animais sentinelas não infectados foram reservados até o final do experimento. O fígado dos animais foram processados para histopatologia e imunohistoquímica usando anticorpos policlonais para VDEN e anticorpos para análises da resposta imune inata, celular e citocínica. Os PNH estudados foram suscetíveis à replicação sequencial do VDEN-3 e VDEN-2 no fígado, havendo expressão de antígenos virais em hepatócitos, células de Kupffer e nos corpúsculos de Councilman; o comprometimento histopatológico do fígado foi caracterizado por: presença de apoptose; focos de necrose lítica; esteatose; tumefação cellular; inflamação acinar, no espaço porta (EP) e na veia hepática central (VHC); hiperplasia/hipertrofia em células de Kupffer, bem como, hemossiderina em células de Kupffer; e dilatação dos sinusóides. A intensidade da lesão hepática foi proeminente na fase aguda da IP e IS, apresentando discreta hepatite aguda. A apoptose foi a forma predominante de morte em hepatócitos; bem como, necrose lítica e o infiltrado inflamatório apresentaram padrão de distribuição predominante em Z2. Observou-se aumento na expressão acinar de macrófagos ativados, células NK, proteína S-100 e linfócitos B durante as fases da IP e IS; houve ainda, aumento da expressão acinar de linfócitos TCD4+ durante a fase aguda da IP; observou-se aumento na expressão acinar de IFN- durante as fases da IP e IS, TNF-α e IL-8 com maior prevalência na IS, TGF-β e IL-10 mais expressas na fase aguda da IP, proteína Fas durante a fase aguda da IP e IS e VCAM na fase aguda da IS e aumento na expressão nos EP. Esses achados foram semelhantes aos observados em fígados de casos fatais de dengue em humanos, porém com intensidade e amplitude menor, sugerindo que PNH da espécie Callithrix penicillata é um bom modelo experimental para o estudo da infecção pelo VDEN, especialmente os aspectos imunopatológicos. / Dengue is one of most important public health problem in the world, and one of the factors that contribute with this situation is the lack of an effective vaccine against the disease, and in part, this difficulty to obtain is due clinical the lack of an experimental model that mimic the infection and manifestation of the disease as those observed in humans. Then, the Evandro Chagas Institute showed the presence of dengue antigens using the Immunohistochemistry assay, in the liver of a non-human primate (NHP) of the species Callithrix jacchus, with a fatal outcome following dengue hemorrhagic fever. Based in the above considerations and in addition to the fact that the liver is the targetb organ for Dengue Virus (DENV) in humans, it is important to analyze the liver of primates of the genus Callithrix in order to study the pathogenesis and the immunopathology of sequential infection by DENV. A total of 26 NHP Callithrix penicillata were submitted to primary infection (PI) subcutaneously with DENV-3 (3.23 x 103 PFU/mL), and 13 of these animals anesthetized and sacrificed daily for seven days post-infection (dpi) (acute phase) and in random intervals until 60 dpi (convalescent phase); the secondary infection (SI) with DENV-2 (4.47 x 104 PFU/mL) was performed two months after the PI in the remaining 13 animals. Uninfected sentinels animals were reserved up ending of the experiment. The liver of the animals were processed for histopathology and Immunohistochemical assay using polyclonal antibodies to DENV and antibodies for analyses of the innate and cellular immune response as well as the cytokine expression . The NHP were susceptible to sequential infection by DENV-3 and DENV-2; in the liver viral antigens were expressed in hepatocytes, Kupffer cells and Councilman bodies; the histopathological changes in liver was characterized by the presence of apoptosis, focal lytic necrosis, steatosis, swelling cellular, inflammation (acinar, EP and HCV), hyperplasia/hypertrophy in Kupffer cells, hemosiderin in Kupffer cells and sinusoidal dilatation; the intensity of the liver damage was prominent in the acute phase of PI and SI resulting in acute hepatitis. In addition the apoptosis was the most frequent mechanism of death of hepatocytes; lytic necrosis and inflammatory infiltrate showed predominant distribution pattern in Z2. An increase of the acinar expression of activated macrophages, NK cells, S-100 protein and B-lymphocytes during the stages of PI and SI; as well as, increased acinar expression of TCD4 + lymphocytes during the acute phase of PI; as to the quantification of cytokines and molecules, was observed an increase in acinar expression of: IFN- during the stages of PI and SI, TNF-α and IL-8 with higher prevalence in SI, TGF-β and IL-10 with prevalence in acute phase of PI, Fas protein during the acute phase of PI and SI and VCAM in acute phase of SI, as well as increase in expression in the EP. These findings were similar to those observed in livers from fatal cases of dengue fever in humans, but with lower intensity and amplitude, thus indicating that NHP Callithrix penicillata species is a good experimental model for infection by DENV, involving immunopathologic studies.
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Aspectos microbiológicos e epidemiológicos da doença diarréica aguda no município de Juruti, Pará

SOUSA, Eveline Bezerra 20 December 2010 (has links)
Submitted by Cleide Dantas (cleidedantas@ufpa.br) on 2014-02-07T15:07:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AspectosMicrobiologicosEpidemiologicos.PDF: 851018 bytes, checksum: f713aeec800e37b90f99491580013653 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-07T15:07:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AspectosMicrobiologicosEpidemiologicos.PDF: 851018 bytes, checksum: f713aeec800e37b90f99491580013653 (MD5) Previous issue date: 2010 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente estudo descreveu os aspectos epidemiológicos e etiológicos da diarréia aguda no município de Juruti, Pará, Brasil. Foram avaliadas 261 amostras de fezes (170 diarréicas e 91 controles) de pacientes atendidos em Unidades de Saúde Pública, no período de fevereiro a julho de 2009. Para o isolamento de bactérias enteropatogênicas, utilizou-se meios seletivos indicadores e de enriquecimento. A caracterização bioquímica foi realizada utilizando os Sistemas API-20E e a sorologia, através de antisoros polivalentes e monovalentes. Para a detecção das categorias de E. coli diarreiogênicas foram executados dois ensaios de PCR multiplex. A pesquisa de Campylobacter jejuni e Campylobacter coli e Rotavírus foi executada através da técnica de ELISA, nas amostras de fezes. No exame parasitológico foram utilizados os métodos diretos (salina/Lugol) e sedimentação espontânea. Das 154 amostras positivas (118 diarréicas e 36 controles), 75,4% eram de infecções únicas e 24,6% de infecções mistas. A maioria dos casos incluiu crianças menores de 10 anos de idade (55,9%), sem diferença significante entre os sexos feminino e masculino. Os enteropatógenos mais frequentes no grupo diarréico foram E. histolytica/E. dispar (26%), Shigella spp (15,7%), G. lamblia (13,3%) e E. coli diarreiogênicas (12,8%), com Shigella spp associada à diarréia aguda (p = 0,0028). Quanto às categorias patogênicas de E. coli, a ETEC (7,2%) foi o tipo mais frequente nos casos de diarréia aguda, seguido de EAEC (5,9%). Os agentes menos frequentes nos casos diarréicos foram representados por C. jejuni/C. coli (4,7%), Rotavírus (2,8%), Salmonella Panama, A. hydrophila e A. sóbria (0,5%). Os resultados encontrados fornecem subsídios importantes para a vigilância epidemiológica e ambiental da doença diarréica aguda, no município de Juruti. / The presente study described the epidemiological and etiological aspects of acute diarrhea in Juruti, Pará, Brazil. A total of 261 fecal samples were investigated (diarrheagenic, n = 170 and control, n = 91), from patients attended in Public Health Units in the period from February to July 2009. Samples were investigated for bacterial, Rotavírus and parasitic enteropathogens using microscopic examination, immunological tests (ELISA) and bacterial culture techniques. Two multiplex PCR were designed for the detection of all categories of diarrheagenic Escherichia coli. A total of 154 samples were positive (diarrheagenic, n = 118 and control, n = 36), in which 75,4% were represented for mono infections and 24,6% for mixed infections. Most of cases included children less than 10 years of age (55,9%), which no significant difference were found between female and male. The most common enteropathogens in diarrhoeal samples were E. histolytica/E. dispar (26%), Shigella spp (15,7%), Giardia lamblia (13,3%) and diarrheagenic E. coli (12,8%), from which Shigella spp (p = 0,0028) were shown to be associated to the cases of acute diarrhea. The most frequent categories of E. coli in diarrhoeal cases were ETEC (7,2%) and EAEC (5,9%). The less frequent enteropathogens, in diarrhoeal samples were Campylobacter jejuni/coli (4,7%), Rotavírus (2,8%), Salmonella Panama, A. hydrophila and A. sóbria (0,5%). These results are useful for environmental and epidemiological surveillance of acute diarrhea disease in Juruti.
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Caracterização das proteínas de superfície Flag e Sup de Leishmania potencialmente envolvidas na interação com o vetor

Lobo, Amanda Revoredo January 2008 (has links)
Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-10-11T12:57:27Z No. of bitstreams: 1 amanda_r_lobo_ioc_bp_0013_2008.pdf: 4777016 bytes, checksum: a9e75760e9cb6f61af23579591306cb1 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-11T12:57:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 amanda_r_lobo_ioc_bp_0013_2008.pdf: 4777016 bytes, checksum: a9e75760e9cb6f61af23579591306cb1 (MD5) Previous issue date: 2008 / Cnpq - PDTIS/FIOCRUZ / Universidade do Estado do Rio de Janeiro. Laboratório de Farmacologia Bioquímica e Celular. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leishmaniose visceral é uma doença de alta mortalidade quando não tratada. Aproximadamente 500.000 novos casos ocorrem todo ano, freqüentemente em países pobres e em desenvolvimento. No Brasil, a leishmaniose visceral é causada pela Leishmania chagasi, que é transmitida principalmente pelo inseto vetor Lutzomyia longipalpis. Após 72 h de alimentação sanguínea num hospedeiro infectado, parasitas procíclicos são vistos aderidos ao intestino do inseto via flagelo. Esta adesão é vital para a evolução do ciclo de transmissão do parasita. Em vetores espécie–específicos foi proposto um papel para um lipofosfogligano (LPG) de superfície de Leishmania na adesão, porém, em vetores permissíveis, tem-se sugerido que esta adesão seja independente de LPG. Com o interesse de identificar e caracterizar moléculas que possam ter uma participação na interação parasito-vetor, nós iniciamos o estudo de duas moléculas de L. chagasi denominadas Flag e Sup, pertencentes à família de proteínas pequenas miristiladas (SMP’s), que anteriormente haviam sido implicadas em adesão ao tubo digestivo de flebotomíneos. Amplificamos e seqüenciamos o gene Flag de L. chagasi e observamos por alinhamento múltiplo o alto grau de conservação deste gene entre as espécies de Leishmania. Proteínas Flag e Sup recombinantes foram produzidas e utilizadas para produção de anticorpos policlonais em coelhos. Vimos por Western Blot de extrato protéico de várias espécies de Leishmania, que os anticorpos monoclonal e policlonal anti-Flag/MBP e o anticorpo policlonal anti-Sup, reconhecem as proteínas em todas as espécies, evidenciando a conservação destas. A imunolocalização destas proteínas mostrou que a proteína Flag está preferencialmente localizada na forma promastigota na bolsa flagelar e no flagelo, e, em amastigota, na bolsa flagelar e no flagelo interno curto, enquanto que a proteína Sup mostrou localização em toda a superfície do corpo em ambas as formas. Experimentos de RT-PCR mostraram que há transcrição diferencial de Flag e Sup quando comparamos entre as formas evolutivas amastigotas e promastigotas. Flag tem uma expressão parecida nas duas formas evolutivas enquanto Sup é mais expresso em amastigotas. Ensaios de inibição ex-vivo incubando previamente L. chagasi com anticorpo monoclonal anti-Flag ou policlonal anti-Sup, mostrou redução significativa de parasitas aderidos ao intestino de L. longipalpis Na tentativa de identificar um potencial receptor para o parasita no intestino de L. longipalpis, observamos a marcação de uma proteína de 27 kDa no extrato protéico do vetor utilizando parasita biotinilado em experimentos de “ligand blot”. / Visceral leishmaniasis is an illness of high mortality if not treated. Approximately 500,000 new cases occur per year, frequently in poor countries. In Brazil, visceral leishmaniasis is caused by Leishmania chagasi, transmitted by the insect vector Lutzomyia longipalpis. After 72h of blood feeding in an infected host, procyclic parasites are seen adhered to insect gut by the flagellum. This adhesion is vital for the completion of the parasite cycle of transmission. In species-specific vectors a role for a surface lipophosphoglycan (LPG) of Leishmania in the adhesion has been considered, while in the permissible vectors, this adhesion may be independent of LPG. Aiming to identify and characterize molecules that may be involved in the parasite- vector interaction, we initiated a study of two molecules of L. chagasi, Flag and Sup, which belong to the small myristylated protein family (SMP's), that have previously been implicated in adhesion to the sandfly midgut. We amplifyed and sequenced the Flag gene of L. chagasi and, using multiple alignments, observed a high degree of conservation of this gene among Leishmania species. Recombinant protein Flag and Sup were produced and used for polyclonal antibodies production in rabbits. By Western Blot of total protein extract of some species of Leishmania, we observed that the anti-Flag monoclonal and polyclonal antibodies and the anti-Sup polyclonal antibody, recognized proteins in all the analyzed species, evidencing their conservation. Immunolocalization of these proteins showed that Flag is preferentially located in the flagellar pocket and flagellum in the promastigote form and in the flagellar pocket and internalized short flagellum in the amastigote, while Sup showed localization on the cell surface in both forms. Experiments of RT-PCR showed that there is a differential transcription of Flag and Sup between amastigotes and promastigotes. Flag has similar levels of expression in both evolutive forms while Sup is more expressed in amastigotes. Assays of ex-vivo inhibition with L. chagasi previously incubated with monoclonal antibodies anti-Flag or anti-Sup showed a significant reduction of the number of adhered parasites to the L. longipalpis midgut. In an attempt to identify a potential receptor for the parasite in the intestine of L. longipalpis, we observed the labelling of a protein of 27 kDa in the protein extract of the vector using biotinylated parasites in experiments of "ligand blot".

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