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Atividade mucosotrópica do Papilomavírus Humano (HPV) no processo carcinogênico em diferentes sítios de infecção. / Mucosotropic activity of Human Papilomavirus (HPV) in carcinogenic process at different infection sites.Sant'Ana, Thalita Araújo 24 October 2017 (has links)
O Papilomavírus Humano (HPV) é uma prevalente infecção do mundo atual, sendo o comportamento sexual um fator determinante para a o acometimento da infecção. O objetivo deste trabalho foi estudar o HPV em diferentes sítios de infecção, buscando um maior entendimento do seu mecanismo de disseminação. Foram analisadas amostras das mucosas cervical, oral e do sangue de 50 pacientes do sexo feminino. Foram identificados o HPV-16, HPV-18, HPV-31 e HPV-33. Nenhuma paciente foi negativa para os quatro tipos nos três sítios. O HPV-16 foi o mais detectado e o mais prevalente nos três sítios, simultaneamente, 32 pacientes apresentaram esse perfil. Todos os tipos virais presentes no sangue, também estavam presentes na mucosa cervical, na mucosa oral ou em ambas. Foram identificados seis achados citológicos, sugestivos da infecção pelo HPV. Foi realizada a detecção dos transcritos virais de E6, E6/E7 e L1 nos três sítios. Os resultados do nosso trabalho demonstram a alta prevalência do HPV, a atividade viral nos três sítios analisados e a provável disseminação do vírus. / Human papillomavirus (HPV) is one of the most prevalent infections of the current world, with sexual behavior being one determining fator of infection. The objective of this study was to study HPV in different sites of infection, seeking a better understanding of its mechanism and spreading. Cervical, oral and blood mucosa samples from 50 female patients were analyzed. HPV-16, HPV-18, HPV-31 and HPV-33 were identified. No patient was negative in the four types at all three sites. HPV-16 was the most detected and the most prevalent in the three sites, simultaneously, 32 patients presented this profile. All viral types present in the blood were also present in the cervical mucosa, oral mucosa, or both. Six cytological findings were identified, suggestive of infection by HPV. Detection of viral transcripts of E6, E6 / E7 and L1 was performed at the three sites. The results of our study demonstrate the high prevalence of HPV, viral activity in the three sites analyzed and the probable virus spreading.
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Efeito da luz e endotelina no mecanismo molecular do relógio em melanóforos de Xenopus laevis / Effect of light and endothelin on clock molecular mechanisms in Xenopus laevis melanophoresMoraes, Maria Nathália de Carvalho Magalhães 17 December 2014 (has links)
Os ciclos claro-escuro (CE) são considerados importantes pistas para o ajuste de relógios biológicos. Alças de retroalimentação positiva e negativa de transcrição e tradução de genes de relógio são a base molecular subjacente tanto a relógios centrais como periféricos. A opsina não visual, melanopsina (Opn4), expressa na retina de mamíferos, é considerada o fotopigmento circadiano pois é responsável pelo ajuste do relógio biológico endógeno. Este fotopigmento também está presente nos melanóforos de Xenopus laevis, onde ele foi descrito pela primeira vez, mas seu papel nestas células ainda não está completamente esclarecido. Espécies de vertebrados não mamíferos expressam duas ou mais melanopsinas e, no caso de X. laevis, há dois genes, Opn4m and Opn4x. Melanóforos de X. laevis respondem à luz com dispersão dos grânulos de melanina, a resposta máxima sendo atingida no comprimento de onda correspondente àquele de excitação máxima da melanopsina. Entre vários hormônios, endotelinas também dispersam os melanossomos em melanóforos de Xenopus através de via similar àquela evocada pela luz. Tendo esses fatos em mente, decidimos investigar se a luz e a endotelina modulam a expressão de genes de relógio em melanóforos de Xenopus, usando PCR quantitativo para avaliar os níveis relativos de RNAm de Per1, Per2, Clock e Bmal1. Ciclos CE promoveram alterações temporais na expressão de Per1, Per2 e Bmal1. Pulsos de 10 min de luz azul aumentaram a expressão de Per1 e Per2, diminuíram a expressão de Opn4x, mas não tiveram efeito sobre Opn4m. Ainda mais, diferentes localizações foram mostradas para cada melanopsina: imunorreatividade para OPN4x foi vista principalmente na membrana celular, enquanto OPN4m foi imuno-localizada no núcleo. Estes resultados em conjunto apontam para funções diferenciais das duas melanopsinas neste modelo. A translocação de grânulos de melanina foi maior quando um pulso de luz azul foi aplicado na presença de endotelina ET-3. E os níveis de RNAm de Clock exibiram variação temporal em melanóforos submetidos a CE após tratamento com ET-3 10-9M, enquanto a expressão de Per1 não foi afetada pelo tratamento hormonal. Em adição, ensaios farmacológicos indicaram que as respostas de Per1 e Per2 à luz azul são evocadas através da ativação da via de fosfoinositídeos, com crosstalks com GMPc/proteina quinase G (PKG) para ativar os genes de relógio. Estes dados sugerem a participação de melanopsina na foto-ativação de genes de relógio, e apontam para uma participação menor de endotelina como sincronizador desta linhagem celular. Nossos resultados constituem uma importante contribuição ao campo emergente dos relógios periféricos os quais, em espécies de não mamíferos têm sido mais extensivamente estudados em Drosophila melanogaster e Danio rerio. Dentro deste contexto, nós mostramos que os melanóforos de Xenopus laevis representam um modelo ideal para a compreensão da modulação de ritmos circadianos por luz e hormônios / Light-dark cycles (LD) are considered important cues to entrain biological clocks. Positive and negative feedback loops of clock gene transcription and translation are the molecular basis underlying the mechanism of both central and peripheral clocks. The non-visual opsin, melanopsin (Opn4), expressed in the mammalian retina, is considered a circadian photopigment because it is responsible of entraining the endogenous biological clock. This photopigment is also present in the melanophores of Xenopus laevis, where it was first described, but its role in these cells is not fully understood. Non-mammalian vertebrate species express two or more melanopsins, and in X. laevis there are two melanopsin genes, Opn4m and Opn4x. X. laevis melanophores respond to light with melanin granule dispersion, the maximal response being achieved at the wavelength of melanopsin maximal excitation. Among various hormones, endothelins also disperse melanosomes in Xenopus melanophores through a similar pathway as light does. Therefore, we decided to investigate whether light and endothelin modulate clock gene expression in Xenopus melanophores, using quantitative PCR to evaluate the relative mRNA levels of Per1, Per2, Clock and Bmal1. LD cycles elicited temporal changes in the expression of Per1, Per2 and Bmal1. A 10 min pulse of blue light increased the expression of Per1 and Per2, decreased Opn4x expression, but had no effect on Opn4m. In addition, a different localization was shown for each melanopsin: immunoreactivity for OPN4x was mainly seen in the cell membrane, whereas OPN4m was immunolocalized in the nucleus. These results taken together point to a differential role for each melanopsin in this model. Melanosome translocation was greater when a blue light pulse was applied in the presence of endothelin ET-3. And mRNA levels of Clock exhibited temporal variation in melanophores under LD cycles after 10-9 M ET-3 treatment, whereas Per1 expression was not affected by the hormone treatment. In addition, pharmacological assays indicated that Per1 and Per2 responses to blue light are evoked through the activation of the phosphoinositide pathway, which crosstalks with cGMP/protein kinase G (PKG) to activate the clock genes. These data suggest the participation of melanopsin in the photo-activation of clock genes and point to a minor role of endothelin as synchronizer for this cell line. Our results add an important contribution to the emerging field of peripheral clocks, which in non-mammalian species have been mostly studied in Drosophila melanogaster and Danio rerio. Within this context, we show that Xenopus laevis melanophores represent an ideal model to understanding circadian rhythms modulation by light and hormone
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Agressão nervosa na hanseníase: uma correlação clínica e laboratorial por meio da integrina beta 1 e proteína S-100 / Nerve aggression in leprosy: the correlation between clinical and laboratorial diagnoses by the use of beta1 integrin and S-100 proteinChacha, Jorge João 31 August 2006 (has links)
A hanseníase causada pelo Mycobacterium leprae é a infecção que mais gera danos ao sistema nervoso periférico. Este microrganismo tem como alvo a célula de Schwann, o qual se liga à laminina, um dos constituintes da lâmina basal. Através desta ligação o Mycobacterium leprae penetra nas células de Schwann onde se multiplica, infectando o sistema nervoso periférico e desse modo comprometendo sua estrutura e funções. Provavelmente tal como ocorre em outras neuropatias degenerativas, inflamatórias ou neoplásicas, no processo de agressão nervosa na hanseníase, participam outras moléculas como a integrina beta1 e a proteína S-100. O presente trabalho estudou 44 doentes de hanseníase, classificados de acordo com Ridley e Jopling, distribuídos em: 12 doentes indeterminados, 7 doentes tuberculóides, 17 doentes dimorfo-tuberculóides, 2 doentes dimorfo-dimorfos, 2 doentes dimorfo virchowianos e 4 doentes virchowianos. Os propósitos foram estudar o dano nervoso nas terminações nervosas da pele por meio da expressão da integrina beta1 e da proteína S100; e ainda a análise da relação entre as manifestações dermatológica, neurológica, reação de Mitsuda, bacterioscopia e os achados imunohistoquímicos. A alteração da expressão da integrina beta1 nas terminações nervosas da pele foi variável, precoce e constante em 100% dos doentes. A alteração da proteína S-100 nas terminações nervosas da pele nos doentes foi de 88,6%. Apesar da significativa correlação entre elas, a sensibilidade da integrina beta1 foi maior. Encontrou-se correlação entre a clínica dermatológica e neurológica, bem como com a bacteriscopia e a reação intradérmica de Mitsuda. Não houve correlação das reações imunohistoquímicas com os dados clínicos, provavelmente em decorrência das alterações moleculares ocorrerem antes das manifestações clínicas / Leprosy caused by Mycobacterium Leprae is the infection that most causes damage to the peripheral nervous system. This microorganism has its principal target in the Schwann cells, which bind themselves to laminin, one of the constituints of the basic lamina. The Mycobacterium Leprae, by way of this link, penetrates the Schwann cells, where they multiply, infecting the peripheral nervous system and thus compromising its structure and functions. Probably, as happens in other degenerative neuropathies, inflammatory or neoplastic, other molecules participate in the process of nervous aggression of leprosy, such as beta1 integrin and S-100 protein. This paper studied 44 patients with leprosy, classified according to Ridley and Jopling, distributed as: 12 indetermined patients, 7 tuberculoid patients, 17 borderline-tuberculoid patients, 2 mid-borderline patients, 2 borderline-lepromatous patients and 4 lepromatous patients. The aims were to study the damage to the skin nerve endings by way of the levels of beta1-integrin and S-100 protein; and also the analysis of relation between dermatological, neurological clinical manifestations, the Mitsuda reactions, bacterioscopical and the immunohistochemical findings. The alterations in the amounts of beta1 integrin in the skin nerve endings were variable, premature and constant in 100 % of the patients. The alteration in the S-100 level in the skin nerve endings in the patients was 88,6 %. In spite of the correlation between them, the sensibility of the beta1 integrin was greater. There was found to be correlation between dermatological and neurological clinical manifestations as well as with the bacterioscopy and the Mitsuda intradermal reactions. There was no correlation between immunohistochemical reactions with the clinical data, probably because of the molecular alterations that occur before the clinical manifestations
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Estudo das células gliais entéricas imunorreativas aos receptores P2x2 e P2x7 do íleo de ratos submetidos à isquemia e reperfusão intestinal. / Study of enteric glial cells immunoreactive for P2X2 and P2X7 receptors in the ileum of rats subjected to ischemia and reperfusion.Mendes, Cristina Eusébio 24 June 2013 (has links)
A resposta do sistema nervoso para diversas lesões acarreta a ativação das células gliais entéricas. Este trabalho tem como objetivo analisar o efeito da isquemia e reperfusão intestinal (I/R-i) sobre as células gliais entéricas, neurônios e receptores P2X2 e P2X7. Foram analisados o íleo de ratos Controle, Sham e I/R-i com 0 hora, 24 horas e 14 dias de reperfusão. Foram realizadas dupla marcação dos receptores P2X2 e P2X7 com Hu e S100, densidade, área do perfil e marcação de proliferação celular. Os resultados mostraram dupla marcação de células gliais entéricas e neurônios com os receptores P2X2 e P2X7; a densidade apresentou um aumento de células gliais e diminuição de neurônios imunorreativos ao Hu. A área do perfil de células gliais entericas S100-IR apresentaram diminuição nos grupos I/R-i e foi detectada proliferação de células gliais entéricas nos grupos I/R-i 0 hora e 24 horas. Conclui-se que a isquemia levou a alterações diferenciadas nos receptores P2X2 e P2X7, células gliais entéricas e neurônios, que podem causar disfunções gastrointestinais. / The nervous system response to various injuries involves the activation of enteric glial cells. The aim of the work was to analyze the effect of ischemia and reperfusion (I/R-i) on enteric glial cells, neurons and receptors P2X2 and P2X7. We analyzed the ileum of Control, Sham and I/R-i with 0 hour, 24 hours and 14 days of reperfusion. Double staining were performed P2X2 and P2X7 receptors with Hu and S100, density, area profile and marking of cellular proliferation. The results show double staining of neurons and enteric glial cell with the P2X2 and P2X7; density increased by glial cells and decrease of neurons immunoreactive to Hu. The area profile of enteric glial cell S100-IR showed decreased in Groups I/R-I and enteric glial cell proliferation was observed in groups I/R-i 0 hours and 24 hours. It is concluded that ischemia has led to changes in differential P2X2 and P2X7 receptors, neurons and enteric glial cells, which can cause gastrointestinal dysfunction.
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Influência do meio condicionado por células de carcinoma epidermoide de língua sobre linfoblastos e células mononucleares do sangue periférico / Influence of conditioned medium from squamous cell carcinoma of the tongue on lymphoblasts and peripheral blood mononuclear cellsCastro, Sofia Beviláqua de 22 October 2018 (has links)
O carcinoma epidermoide é a neoplasia maligna mais comum em boca e está entre as principais causas de morbidade e mortalidade em todo o mundo, devido a seu comportamento agressivo, evoluindo à metástase loco regional e a distância. O microambiente tumoral contém numerosos tipos celulares e muita atenção tem sido dada na literatura científica sobre a participação das células inflamatórias no desenvolvimento e progressão do câncer, pois as células neoplásicas são capazes de subverter a resposta imune. Os linfócitos T são o componente central na imunidade antitumoral, através da produção de citocinas por células e morte celular. Pouco se sabe sobre como substratos derivados de células neoplásicas influenciam as células no microambiente tumoral. Assim, o presente estudo propôs analisar a influência do meio condicionado derivado de células de carcinoma epidermoide de língua (SCC4 e MC SCC9) sobre linfoblastos (CEM) e células mononucleares do sangue periférico (PBMC-A e PBMC-B) para compreender melhor seu papel na imunidade anti-tumoral, imunoedição e evasão imune. Após estimulação com meio condicionado, os linfoblastos e as PBMCs foram submetidas ao ensaio de viabilidade celular, de citometria de fluxo e RT-qPCR para analisar a expressão de genes de apoptose e citocinas. O meio condicionado também foi coletado e avaliado por ELISA para verificar as citocinas secretadas pelas SCCs, bem como pela CEM e PBMC. Ambos meios condicionados foram capazes de reduzir a viabilidade da CEM e das PBMCs. A expressão de BCL2 e BAK não foi afetada na CEM, enquanto que MC SCC4 aumentou a expressão de BAK na PBMC-B. Os MCs das SCCs apresentaram expressão reduzida de IL-1?, IL-10 e INF-?. A IL-6 e IL-8 são expressas em níveis um pouco maiores pela SCC4 e superexpressas pela SCC9. A linhagem CEM não apresentou expressão de RNAm de IL-6, enquanto que a PBMC-B apresentou redução da expressão de IL-6 quando cultivada com ambos meios, sendo significativa com o meio MC SCC9. A expressão de RNAm de IL-8 reduziu na CEM e aumentou na PBMC-B com ambos os meios. A diferenciação para células CD4+ aumentou com ambos os MCs nas duas linhagens, reduzindo células CD34+. O MC SCC4 não alterou o número de linfócitos T CD4+/FOXP3+ da CEM e PBMC-B. O MC SCC9 induziu aumento da população CD4+/CD8+ na PBMC-B e amos os MCs induziram aumento da população CD8+/FOXP3+ da PBMC-B. Os resultados sugerem que os produtos derivados de carcinoma epidermoide de língua podem variar nas linhagens celulares, reduzindo a viabilidade, alterando a expressão de citocinas e aumentando as células CD4+ nas duas linhagens e aumentando o perfil CD8+/FOXP3+ e CD4+/CD8+ nas PBMCs. / Squamous cell carcinoma is the most common malignant neoplasm of the oral cavity, featuring as one of the main causes of morbidity and mortality due to its aggressive behavior, locoregional and distant metastases. Attention has been given to the tumor microenvironment and the role of the inflammatory cells may develop in the progression of cancer, because neoplastic cells are capable of subverting the immune response. T cells play is a central actor in the antitumor immunity because of their cytokine production by living and dying cells. Little is known about how the products derived from neoplastic cells interact with the cells in the tumor microenvironment. Therefore, the present study aimed to analyze the influence of a conditioned medium (CM) derived from tongue squamous carcinoma cells (SCC4 and SCC9) on lymphoblasts (CEM) and peripheral blood mononuclear cells (PBMC-A e PBMC-B), in order to better understand its role in the antitumor immunity, immunoediting and immune evasion. Lymphoblast and PBMCs were stimulated by the conditioned medium and then submitted to a cell viability assay, flow cytometry and RT-qPCR in order to analyze the expression of apoptotic and cytokine-related genes. To verify which cytokines were secreted by SCCs as well as by CEM and PBMCs, the conditioned medium was also collected and evaluated by ELISA. Both types of conditioned medium reduced CEM and PBMC viability. For CEM, BCL2 and BAK expression remained unaffected, wherea s for PBMC-B there was an increase in the expression of BAK using the CM-SCC4. CMs showed reduced expression of IL-1?, IL-10 and INF-?. IL-6 and IL-8 are expressed a bit higher levels by SCC4 and high expressed by SCC9.CEM showed no IL-6 mRNA expression. PBMC-B reduced the expression of IL-6 when cultivated with both types of CM, with a significant reduction with the CM- SCC9. For both types of medium, IL-8 mRNA was reduced in CEM and increased in PBMC-B. The differentiation towards CD4+ cells was increased with both MCs in the two cell lines. CM-SCC4 did not altered the number of CD4+/FOXP3 cells of CEM and PBMC-B. CM-SCC9 increased the population of CD4+/CD8+ cells of PBMC-B and both types of CM increased the population of CD8+/FOXP3+ of PBMC-B. Collectively, our results suggest that the products derived from tongue squamous cell carcinoma may vary between the cell lines and reduce the viability, change cytokine expression and increase CD4+ cells and also increase the population of CD8+/FOXP3+ and CD4+/CD8+ in PBMCs.
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AVALIAÇÃO DA POTENCIAL ATIVIDADE CITOTÓXICA DA PEÇONHA DE Caudisona durissa terrificus EM CÉLULAS MONONUCLEARES DO SANGUE PERIFÉRICO HUMANO / of the potential cytotoxic activity of Caudisona durissa terrificus venom in mononuclear cells of peripheral human blood.Dobrachinski, Leandro 13 March 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-03-13 / Venomous snakes have a real cocktail of pharmacological active substances and
drugs that act powerfully against microorganisms. The objective of the present study
was to evaluate in vitro the potential cytotoxic activity of Caudisona durissa terrificus
venom in mononuclear cells (MNC) of peripheral human blood. After obtaining MNC
for cell culture, the cytotoxic effect of different concentrations of crude venom was
evaluated. The peripheral blood MNC were separated using a density gradient and
were incubated (2x105 cells/well) with different venom concentrations (50, 5, 0,5,
0,05, 0,005 e 0,0005 µg/mL) for different times (1, 3, 6, 24, 48 e 72h) and in different
substrates (PHA, IL lly
examining the plates after 24, 48 and 72 hours. Was also observed with different
concentrations of crude venom induced ADN fragmentation in MNC. We observed
that the toxicity of crude C. d. terrificus venom varies proportionally with
concentration, i.e., the higher the concentration, the higher its cytotoxicity. For this
reason the 0.0005µg/mL concentration of crude Caudisona durissa terrificus venom
presented the lowest cytotoxic activity in peripheral human blood MNC and that the
fragmentation of cellular ADN was not seen in this study. Thus, it is suggested to
employ two or more different assays to confirm the induction of cell death is occurring
through apoptosis. / Serpentes peçonhentas produzem uma variedade de toxinas altamente citotóxicas.
Possuem um verdadeiro coquetel de substâncias farmacológicas, tornando-se uma
, que atualmente vem sendo utilizados por inúmeros
pesquisadores, para o desenvolvimento de novos fármacos com potente ação contra
microorganismos. O presente estudo visou avaliar a potencial atividade citotóxica da
peçonha de Caudisona durissa terrificus em células mononucleares (CMN) do
sangue periférico humano, in vitro. Após a padronização da obtenção de CMN para
cultivo celular, foi realizada a avaliação do efeito citotóxico de diferentes
concentrações do veneno bruto. As CMN do sangue periférico foram separadas por
meio gradiente de densidade e incubadas (2x105 células/poço) com diferentes
concentrações do veneno (50, 5, 0,5, 0,05, 0,005 e 0,0005 µg/mL), em diferentes
tempos (1, 3, 6, 24, 48 e 72h) e substratos (PHA, IL 2). A avaliação da atividade
citotóxica do veneno foi realizada, por meio da leitura das células em câmara de
neubauer, após 24, 48 e 72 horas. Em conclusão, foi possível identificar que a
citotoxicidade do veneno bruto de C. d. terrificus varia de forma proporcional à
concentração, ou seja, quanto maior a concentração do veneno, maior a sua
citotoxicidade. Com isso, a concentração de 0,0005µg/mL do veneno bruto de
Caudisona durissa terrificus, neste experimento, apresentou uma baixa atividade
citotóxica em CMN de sangue periférico humano e que a fragmentação do DNA
celular não foi visualizada neste estudo. Desta forma, sugere-se empregar dois ou
mais ensaios distintos para confirmar se a indução da morte celular está ocorrendo
por meio de apoptose.
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AVALIAÇÃO DA POTENCIAL ATIVIDADE CITOTÓXICA DA PEÇONHA DE Caudisona durissa collilineata EM CÉLULAS MONONUCLEARES DO SANGUE PERIFÉRICO HUMANO. / of the potencial cytotoxic activity of Caudisona durissa collilineata venom in mononuclear cells of peripheral human blood.Maineri, Marilissa Maciel 22 March 2012 (has links)
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MARILISSA MACIEL MAINERI.pdf: 1118474 bytes, checksum: eb4934dbea4478c904915745c3e64da5 (MD5)
Previous issue date: 2012-03-22 / Venomous snakes have a real cocktail of pharmacological active substances and
drugs that act powerfully against microorganisms. The objective of the present study
was to evaluate in vitro the potential cytotoxic activity of Caudisona durissa
collilineata venom in mononuclear cells (MNC) of peripheral human blood. After
obtaining MNC for cell culture, the cytotoxic effect of different concentrations of crude
venom was evaluated. The peripheral blood MNC were separated using a density
gradient and were incubated (2x105 cells/well) with different venom concentrations
(50, 5, 0,5, 0,05, 0,005 e 0,0005 µg/mL) for different times (1, 3, 6, 24, 48 e 72h) and
in different substrates (PHA, IL
visually examining the plates after 24, 48 and 72 hours. Was also observed with
different concentrations of crude venom induced ADN fragmentation in MNC. We
observed that the toxicity of crude C. d. collilineata venom varies proportionally with
concentration, i.e., the higher the concentration, the higher its cytotoxicity. For this
reason the 0.0005µg/mL concentration of crude Caudisona durissa collilineata
venom presented the lowest cytotoxic activity in peripheral human blood MNC and
that the fragmentation of cellular ADN was not seen in this study. Thus, it is
suggested to employ two or more different assays to confirm the induction of cell
death is occurring through apoptosis. / Serpentes peçonhentas produzem uma variedade de toxinas altamente citotóxicas.
Possuem um verdadeiro coquetel de substâncias farmacológicas, tornando-se uma
, que atualmente vem sendo utilizados por inúmeros
pesquisadores, para o desenvolvimento de novos fármacos com potente ação contra
microorganismos. O presente estudo visou avaliar a potencial atividade citotóxica da
peçonha de Caudisona durissa collilineata em células mononucleares (CMN) do
sangue periférico humano, in vitro. Após a padronização da obtenção de CMN para
cultivo celular, foi realizada a avaliação do efeito citotóxico de diferentes
concentrações do veneno bruto. As CMN do sangue periférico foram separadas por
meio gradiente de densidade e incubadas (2x105 células/poço) com diferentes
concentrações do veneno (50, 5, 0,5, 0,05, 0,005 e 0,0005 µg/mL), em diferentes
tempos (1, 3, 6, 24, 48 e 72h) e substratos (PHA, IL 2). A avaliação da atividade
citotóxica do veneno foi realizada, por meio da leitura das células em câmara de
neubauer, após 24, 48 e 72 horas. Em conclusão, foi possível identificar que a
citotoxicidade do veneno bruto de C. d. collilineata varia de forma proporcional à
concentração, ou seja, quanto maior a concentração do veneno, maior a sua
citotoxicidade. Com isso, a concentração de 0,0005µg/mL do veneno bruto de
Caudisona durissa collilineata, neste experimento, apresentou uma baixa atividade
citotóxica em CMN de sangue periférico humano e que a fragmentação do DNA
celular não foi visualizada neste estudo. Desta forma, sugere-se empregar dois ou
mais ensaios distintos para confirmar se a indução da morte celular está ocorrendo
por meio de apoptose.
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AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE NÃO CITOTÓXICA DO VENENO DE BOTHROPS JARARACUSSU EM CÉLULAS MONONUCLEARES DO SANGUE PERIFÉRICORivero, José Vitelio Ruiz 20 December 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010-12-20 / Snake venoms are biological resources of great pharmaceutical value. Besides
presenting a small number of antiviral drugs, a large amount of pathogens develop
mechanisms which escape from the action of the drugs, thus causing the growth
of resistance. It was demonstrated that biomolecules contained in venoms have
high therapeutic values which could be used as antimicrobial agents. The
objective of this research is to evaluate the non cytotoxic activity which was
isolated from the venom of Bothrops jararacussu in peripheral blood mononuclear
cells. In this research, mononuclear cells were separated from healthy donors.
After the activation of the cells with phytohemagglutinin and interleukin-2, different
concentrations of the poison were added in order to evaluate its non cytotoxic
activity. The concentration of the venom at 0.05 mg/mL showed no cytotoxicity, but
at 5 and 0.5 mg/mL it was cytotoxic. Our study opens the way to further
researches which aim to identify the antimicrobial activities of crude venoms and
their fractions. / Os venenos ofídicos são recursos biológicos de importante valor farmacológico.
Além do número pequeno de drogas antivirais, numerosos patógenos
desenvolvem mecanismos de escape à ação das drogas, resultando no
crescimento das taxas de resistência. Foi demonstrado que biomoléculas contidas
nos venenos ofídicos apresentam alto valor terapêutico, que poderiam ser usadas
como agentes antimicrobianos. O objetivo desta pesquisa é avaliar a atividade
não citotóxica do veneno bruto isolado da Bothrops jararacussu em células
mononucleares do sangue periférico. Nessa pesquisa foram separadas células
mononucleares de doadores sadios. Após ativação das células com
fitohemaglutinina e interleucina-2 foram adicionadas diferentes concentrações do
veneno para avaliar sua atividade não citotóxica. O veneno na concentração de
0,05 μg/mL não apresentou citotoxicidade, entretanto foi citotóxico nas
concentrações de 5 e 0,5 μg/mL. Nosso estudo abre caminho para novas
pesquisas voltadas para a identificação das atividades antimicrobianas dos
venenos brutos e suas frações.
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Benefícios e riscos do cateter central de inserção periférica (CCIP): experiência em 1023 procedimentos / Benefits and risks of the peripherally inserted central catheter (PICC): experience in 1023 proceduresSantolim, Thaís Queiroz 20 March 2018 (has links)
INTRODUÇÃO: As vantagens da utilização do Cateter Central de Inserção Periférica (CCIP) no ambiente hospitalar faz com que esse cateter ocupe uma posição de destaque na terapia intravenosa dos pacientes com indicação de administração de drogas com características que danificam a rede venosa periférica. A possibilidade de inserção do cateter a beira do leito por enfermeiros capacitados conferem maior facilidade para a inserção deste dispositivo. Por ser um cateter seguro e de fácil manutenção possibilita ainda a desospitalização precoce dos pacientes em antibioticoterapia e quimioterapia. Este trabalho relata o uso do CCIP nos pacientes do Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clinicas da Universidade de São Paulo (IOT-HC-FMUSP) nos últimos 10 anos. MÉTODOS: Foram analisados 1.057 prontuários de pacientes submetidos a inserção do CCIP por enfermeiros qualificados no Instituto de Ortopedia e Traumatologia do Hospital das Clinicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo entre os anos de 2007 e 2017. Destes, 34 foram excluídos por não apresentar dados completos no prontuário para a análise posterior. Foram incluídos 1023 prontuários no total, onde foram analisados: idade, sexo dos pacientes, veia puncionada, diagnóstico, número de punções, tempo em que o paciente permaneceu com o cateter, motivo da retirada e posicionamento da ponta do CCIP. RESULTADOS: Um total de 1023 CCIPs inseridos durante o período de 10 anos cumpriram os critérios para inclusão neste estudo. Destes, 720 (70,4%) foram considerados adequadamente posicionados. O tempo médio de utilização do cateter foi de 34,3 dias. A veia basílica foi utilizada em 528 (51,6%) pacientes enquanto que a veia cefálica foi utilizada em 392 (38,3%) pacientes. Cento e cinquenta e sete (15,4%) cateteres foram removidos devido a complicações, sendo a oclusão a complicação mais frequentemente reportada, com 58 (5,7%) casos. Nenhum caso de trombose ou infecção relacionada ao cateter foi encontrado. Oitocentos e sessenta e seis (84,6%) pacientes completaram o tratamento. Destes, 791 (77,3%) completaram durante a hospitalização e 75 (7,3%) receberam alta com o dispositivo. A principal indicação do CCIP nos pacientes ortopédicos é a antibioticoterapia. CONCLUSÃO: Este estudo sugere que o CCIP é um dispositivo intravenoso seguro e pode ser utilizado para terapia intravenosa de média e longa duração em pacientes ortopédicos hospitalizados ou desospitalizados Benefits and risks of the peripherally inserted central catheter (PICC) / INTRODUCTION: The advantages of using a Peripherally Inserted Central Catheter (PICC) in hospitalized patients gives this dispositive great importance for the intravenous therapy, especially in patients with the indication of drugs that have a potential to damage peripheral veins. The possibility of inserting this catheter at bedside, procedure that should be realized by trained nurses, gives the use of this device an excellent choice for intravenous therapies. Also, for being a safe an easy maintain dispositive, it gives the patient the option of an early dismissal from the hospital to continue the intravenous therapy at home. This paper describes the uses of the Peripherally Inserted Central Catheter (PICC) in adult patients that used this device for intravenous therapy, and had complete information in the medical records between 2007 and 2016, at the Orthopedics and Traumatology Institute of the Clinics Hospital of the Medical School of the University of São Paulo. METHODS: This is a retrospective study in which we used 1.057 medical records from patients that receive intravenous therapy through a Peripherally Inserted Central Catheter (PICC). The procedure was carried out by trained nurses from the Orthopedics and Traumatology Institute of the Clinics Hospital of the Medical School of the University of São Paulo between 2007 and 2017. From the 1.057 medical records studied, 34 were excluded due to the lack of information or incomplete data at the time of the analyses. There were 1.023 medical files with complete information included in the study. We obtained the following information: age, gender, place of insertion, punctured vein, number of punctures, diagnosis, duration of the catheterization, complications of the catheter and positioning. RESULTS: A total of 1023 PICCs inserted during a 10 year period met eligibility criteria for this study. Of these, 720 (70.4%) were considered successfully positioned. Mean duration of catheterization was 34.3 days. The basilic vein was used in 528 (51.6%) patients, while the cephalic vein was used in 392 (38.3%) patients. One hundred and fifty seven (15.4%) catheters were removed due to complications. Of the complications, occlusion was reported in 58 (5.7%) patients. Incidence of catheter related thrombosis or infection was not found. Eight hundred and sixty six (84.6%) patients completed the treatment. Of these, 791 (77.3%) completed it during hospitalization and 75 (7.3%) were discharged with the catheter. PICCs in orthopedic patients are mainly used for antibiotic treatment. CONCLUSION: Our study suggests that PICC is a safe intravenous device that can be successfully utilized for medium and long lasting intravenous therapy in hospitalized and non-hospitalized orthopedic patients
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Avaliação sensitiva de doentes com câncer colorretal tratados com oxaliplatina / Sensory evaluation of patients with colorectal cancer treated with oxaliplatinMalieno, Paula Braz 10 October 2016 (has links)
A avaliação sensitiva de pacientes tratados com oxaliplatina tem se tornado objeto de estudo, pelo fato deste medicamento causar como efeito colateral, uma neuropatia periférica com características sensitivas, imediatamente após início da infusão. Sintomas que causam restrições nas atividades de vida diárias e na qualidade de vida do paciente durante o tratamento. Para uma melhor compreensão do mecanismo das alterações sensitivas, atualmente tem se utilizado o teste quantitativo da sensibilidade (TQS), que através da mensuração quantitativa dos limiares de detecção aos estímulos quente, frio e de vibração, nos concede um perfil para melhor relacionar com as possibilidades de manejo ou tratamento. Neste estudo propomos uma análise da através do TQS e de instrumentos que quantificam e qualificam a neuropatia, a dor neuropática e suas características. Objetivos: Descrever de forma prospectiva as alterações de sensibilidade exteroceptiva somática causadas pelo uso da oxaliplatina em doentes com câncer colorretal. Métodos: Foram incluídos 110 doentes (média 55 anos) com câncer colorretal que realizaram tratamento antineoplásico com oxaliplatina por seis meses, e foram avaliados por mais seis após a quimioterapia. Os pacientes realizaram avaliação sensitiva com TQS e responderam questionário sócio demográfico e questionários específicos para dor e neuropatia na visita basal (VB), ao término da quimioterapia (VT) e novamente após 6 meses de seguimento (VS). Resultados: Os questionários de dor e neuropatia mostraram seu início e as suas características, na qual foi evidente a dor com características neuropáticas na visita término do tratamento em 21,7% dos participantes manifestada pela dormência, choque elétrico, alfinetadas e agulhadas e a sensibilidade ao frio. As principais alterações demonstradas pelo TQS foram: nos limiares de detecção mecânica; aumento dos limiares dolorosos térmicos; diminuição da hiperalgesia mecânica; diminuição do limiar de detecção vibratória na mão e aumento no pé. O TQS indicou alterações entre os participantes do estudo e o grupo de voluntários saudáveis em algum momento das avaliações. Conclusão: Os pacientes com câncer colorretal submetidos ao tratamento com oxaliplatina cursam com dor com características neuropáticas que interferem em suas atividades diárias. O TQS caracterizou as principais alterações relacionadas ao início do tratamento, término do tratamento e durante o seguimento. As comparações com voluntários saudáveis sugerem que a presença da neoplasia e outras comorbidades são capazes de causarem alterações no TQS / Sensory evaluation of patients treated with oxaliplatin has become an object of study, because this medication cause as a side effect, peripheral neuropathy with sensory characteristics, immediately after start of infusion. Symptoms that cause restrictions in daily activities and in the patient\'s quality of life during treatment. For a better understanding of the mechanism of sensory changes, currently it has used quantitative sensitivity testing (QST). That by the quantitative measurement of thresholds to warm stimuli, cold and vibration, gives us a profile to better relate to the possibilities of management or treatment. In this study we propose an analysis by QST and tools to quantify and qualify neuropathy, neuropathic pain and its features. Objectives: To describe prospectively the somatic exteroceptive sensitivity changes caused by the use of oxaliplatin in patients with colorectal cancer. Methods: We included 110 patients (mean 55 years) with colorectal cancer who underwent anticancer treatment with oxaliplatin for six months and were evaluated for six after chemotherapy. Patients underwent sensory evaluation with QST and answered sociodemographic questionnaire and specific questionnaires for pain and neuropathy at baseline, at the end of chemotherapy (visit six months) and again after 6 months of follow-up (visit twelve months). The instruments used were reduced McGill Pain Questionnaire (MPQ), Inventory symptoms of neuropathic pain (ISDN), Brief Pain Inventory (BPI-Brief Pain Inventory) Questionnaire neuropathic pain 4 (DN4), hospital scale of anxiety and depression (HADS). Results: The pain questionnaires and neuropathy showed its beginning and its characteristics, which was evident pain with neuropathic characteristics in the end visit of treatment in 21.7% of participants manifested by numbness, electric shock, pins and needles and sensitivity to cold. The main changes demonstrated by QST were in mechanical thresholds; painful increase in thermal thresholds; reduction in mechanical hyperalgesia; reduction of vibration detection limit for the hand and foot increases. The QST indicated changes between the study participants and the group of healthy volunteers at some point of the evaluations. Conclusion: Patients with colorectal cancer undergoing treatment with oxaliplatin occur with pain with neuropathic characteristics that interfere with their daily activities. QST characterized the major changes related to the start of treatment, end of treatment and during follow-up. Comparisons with healthy volunteers suggest that the presence of neoplasia and other comorbid conditions are capable of causing changes in the QST
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