Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a) é associado a periodontite agressiva. Na infecção, pode ocorrer ativação de vias de sinalização do hospedeiro e bacterianas. Objetivos: determinar a transcrição de genes relacionados à virulência bacteriana e das vias de transdução de sinais da célula epitelial após interação bactéria-célula epitelial. Métodos: cepas de A.a foram co-cultivadas com células epiteliais OBA-9. A transcrição dos genes bacterianos e das células epiteliais foi determinada por RT-qPCR e a concentração de citocinas determinada por ELISA. Resultados: A regulação da transcrição de certos genes de virulência de A.a é cepa e tempo específica. Quinze genes foram regulados positivamente nas células OBA-9 infectadas. Altos níveis de GM-CSF, TNF-<font face=\"Symbol\">&#945 e ICAM-1 foram detectados em células OBA-9 infectadas e tecidos gengivais de pacientes com periodontite. Conclusão: a interação entre A. a e célula epitelial pode modular a resposta do hospedeiro com a indução da expressão de fatores que exacerbam o processo inflamatório. / Aggregatibacter actinomycetemcomitans (A.a) is associated with the etiology of aggressive periodontitis. The activation of signaling pathways by the host and bacterial cells occurs during infection. Objectives: to determine the transcription of genes related to bacterial virulence and epithelial cell after bacterial-epithelial cell interaction. Methods: A.a strains were co-cultured with epithelial cells OBA-9. The transcription of A.a virulence genes and genes belonging to signaling transduction pathway were determined by RT-qPCR and the concentration of cytokines was determined by ELISA. Results: the transcription of some virulence genes is strain and time specific. Fifteen genes were up-regulated in OBA-9 cells. High levels of GM-CSF, TNF-<font face=\"Symbol\">&#945 and ICAM-1 were detected in infected OBA-9 cells and tissues of patients with periodontitis. Conclusion: the interaction between A.a and epithelial cell can modulate the host response with induction of factors which exacerbate inflammatory process.

Porphyromonas gingivalis é um dos principais mircrorganismos associados à periodontite. O objetivo do presente estudo foi testar a hipótese de que a colonização por diferentes genótipos fimA de P.gingivalis resultaria em diferenças na resposta ao tratamento periodontal. Foram analisados 20 pacientes com periodontite crônica, fumantes, portadores de P.gingivalis, divididos em 2 grupos: 1 grupo recebeu tratamento periodontal mecânico (RAR) e o outro recebeu, além da RAR, antibioticoterapia (amoxicilina e metronidazol). O efeito do tratamento foi avaliado com relação a parâmetros clínicos, prevalência e níveis subgengivais de P. gingivalis e dos genótipos fimA II e fimA IV em estudo quantitativo por PCR em tempo real, antes e 180 dias após o tratamento. Os dados sugerem que RAR associado a antibiotioticoterapia sistêmica é mais eficiente na redução dos níveis de P.gingivalis do que apenas RAR. Não foram detectadas diferenças na resposta ao tratamento periodontal quanto à presença dos genótipos fimA II ou fimA IV em relação aos demais genótipos de P.gingivalis. / Porphyromonas gingivalis is one of the main mircrorganisms associate to periodontitis. The present study proposed to test the hypothesis that the colonization by different P.gingivalis genotypes fimA would lead to different results on periodontal treatment. Twenty chronic periodontitis patients, smokers, bearers of P. gingivalis was analyzed and divided in 2 groups: one group received mechanic periodontal treatment (SRP) and the other group received, besides SRP, antibiotic therapy (amoxicillin and metronidazole). The effect of treatment was appraised under clinical parameters, prevalence and subgingival levels of P. gingivalis and genotypes fimA II and fimA IV in quantitative study by Real time PCR, before and after 180 days of the treatment. Data suggest that SRP associated with systemic antibiotic administration is more efficient in reducing P. gingivalis levels than SRP only. No difference on periodontal treatment results was detected about the presence of fimA II or fimA IV genotypes related to other P.gingivalis genotypes.

O objetivo deste estudo foi analisar a expressão dos fenótipos fibroblástico e osteoblástico em culturas tridimensionais na presença ou não de partículas de vidro bioativo. Fibroblastos derivados do ligamento periodontal humano (hPDLF) e células osteogênicas da calvária de rato recém-nascidos foram plaqueadas em superfícies bidimensionais - lamínulas de plástico ThermanoxTM (controle); superfícies colágenas bidimensionais - ThermanoxTM revestidas por colágeno I sem partículas de vidro bioativo (2D) e com partículas de vidro bioativo (2D+VB); e em gel colágeno tridimensional sem vidro bioativo (3D) e com partículas (3D+VB). Foram avaliados: Viabilidade celular (MTT) nos tempos 3, 7 e 10 dias; Atividade de fosfatase alcalina (ALP) normalizada pelo conteúdo de proteína total em 7 e 14 dias; Immunolocalização de proteínas da matriz não-colágena (ALP e OPN em células hPDLF aos 7 e 14 dias e OPN e BSP em células osteogênicas aos 7 dias) por imunofluorescência indireta; Expressão quantitativa (PCR em tempo real) dos genes Periostina (PRT), Calcium-Binding Protein (S100A4) e Fibromodulina (FBM), marcadores do fenótipo fibroblástico, em células hPDLF e Fosfatase Alcalina (ALP), Osteopontina (OPN), Sialoproteína Óssea (BSP), Osteocalcina (OC), Colágeno I (COL I) e Runx2, marcadores osteoblásticos, em ambos os tipos celulares; e Mineralização (coloração por vermelho de Alizarina). Os resultados obtidos nas culturas de hPDLF mostraram que aos 3 dias a viabilidade celular em 2D+VB foi maior que no controle (p<0,05) e nenhuma diferença significante entre os grupos foi observada aos 7 e 10 dias. O conteúdo de proteína total aos 7 e 14 dias foi maior nas culturas 3D e 3D+VB, sendo aos 7 dias significantemente diferente de 2D+VB (p<0,05) e controle (p<0,05) e aos 14 dias observou-se diferença significativa entre 3D e 2D. A atividade de ALP aos 7 dias foi maior nos grupos 2D e 2D+VB comparados com 3D (p<0,05) e 3D+VB (p<0,05); e em 3D+VB menor que no controle (p<0,05). Entretanto, aos 14 dias 3D e 3D+VB apresentaram maior atividade de ALP que o controle (p<0,05). Imunomarcações para OPN e ALP foram observadas nas células em 3D em ambos os períodos avaliados, e em 2D, 2D+VB, e controle apenas aos 14 dias. A expressão de RNAm para PRT aos 7 dias apresentou um perfil upregulated em 3D e 3D+VB comparados ao controle (p<0,05); para FBM a expressão gênica foi maior em 3D e 2D que em 3D+VB (p<0,05), e menor em 3D+VB comparado ao controle (p<0,05). As células em 2D exibiram maiores níveis de expressão de RNAm para S100A4 que as cultivadas em 2D+VB (p<0,05) e controle (p<0,05). Os níveis de RNAm para COL I e ALP em 2D+VB e 3D, para RUNX2 e OPN em 3D e 2D, e para OC em 2D apresentaram-se upregulated em relação ao controle (p<0,05). Em 2D o nível de expressão de OC foi maior que em 2D+VB (p<0,05). Aos 14 dias houve uma diminuição da expressão de todos os genes analisados em relação às análises de 7 dias. Células em 3D+VB expressaram menores níveis de PRT que em 2D+VB (p<0,05). A expressão de RNAm para FBM foi maior em 2D e 2D+VB e para S100A4 maior em 2D comparado com 3D (p<0,05), nos quais os níveis de S100A4 ficaram downregulated com relação ao controle. COL I e ALP apresentaram-se downregulated em 3D (p<0,05) e 3D+VB (p<0,05) em relação ao controle. Entre 2D+VB e 3D+VB também foi observada diferença significativa para ALP. A expressão de RUNX2 foi maior em 3D que em 3D+VB (p<0,05) e de OC maior no controle. Nos grupos com VB foi observada maior formação de matriz calcificada aos 10 e 14 dias. Aos 10 dias não foram observadas áreas coradas por Alizarina através da microscopia, mas a quantidade de mineralização em 2D+VB e 3D+VB foi significativamente maior que no controle (p<0,05), 2D (p<0,05) e 3D (p<0,05). Aos 14 dias marcações mais extensas foram observadas nas culturas com VB, porém os nódulos mineralizados apresentavam-se independentes das partículas. 2D+VB e 3D+VB foram significativamente diferentes do controle (p<0,05) e 2D (p<0,05). As culturas de células osteogênicas mostraram que aos 7 dias as células crescidas sobre os arcabouços 3D+VB e 3D exibiram menores índices de viabilidade. Diferenças significativas foram observadas quando 3D+VB foi comparado aos grupos 2D+VB (p<0,05) e controle (p<0,05); e entre 2D e 3D (p<0,05). Aos 3 e 10 dias não foram encontradas diferenças significativas na viabilidade celular entre os grupos. O conteúdo de proteína total foi maior em 3D+VB que em 2D+VB (p<0,05) e no controle (p<0,05) aos 7 e 14 dias. Diferenças significantes também foram observadas entre 3D e 2D (p<0,05) aos 14 dias. A atividade de ALP aos 7 dias foi maior em 2D+VB e 3D+VB. Diferenças significantes foram encontradas entre 2D e 2D+VB (p<0,05), 3D e 3D+VB (p<0,05) e entre 3D e controle (p<0,05). Entretanto, aos 14 dias, 3D e 3D+VB apresentaram os menores valores de atividade de ALP, sendo a significantemente diferentes de 2D (p<0,05) e 2D+VB (p<0,05). Imunomarcações para OPN e BSP foram observadas aos 7 dias em 2D, 2D+VB, 3D e controle. Aos 7 dias os níveis expressão do RNAm para ALP, COL I e RUNX2 foram maiores em 3D e 3D+VB. Os genes OPN, OC e BSP exibiram níveis de expressão mais altos em 2D+VB. A expressão de COL I foi maior em 3D+VB que em 2D+VB (p<0,05). As células em 2D+VB apresentaram maiores níveis de expressão de OPN e OC que em 2D (p<0,05) e 3D+VB (p<0,05), nos quais a expressão desses genes e de BSP estavam downregulated em relação ao grupo controle. Aos 10 e 14 dias áreas coradas por vermelho de Alizarina foram observadas em todos os grupos, sendo mais extensas nos grupos que continham VB. Aos 10 dias a quantidade de cálcio em 3D+VB foi maior que no controle (p<0,05); e maior em 2D+VB comparado com 2D (p<0,05) e controle (p<0,05). Aos 14 dias 2D+VB e 3D+VB apresentaram uma quantidade de cálcio significativamente maior que no controle (p<0,05) e em 2D (p<0,05). Em conclusão, este estudo demonstrou que os arcabouços tridimensionais colágenos são capazes de suportar a viabilidade, proliferação e diferenciação celular se in vitro de hPDLF e células osteogênicas derivadas de calvária de rato recém-nascidos e de favorecerem a expressão dos fenótipos fibroblástico e osteoblástico em hPDLF. As partículas de VB em ambos os tipos celulares também contribuiram para viabilidade, diferenciação, formação de matriz mineralizada e expressão fenotípica. / The aim of this study was to analyze the fibroblastic and osteoblastic phenotypes expression on three-dimensional cultures in the presence or not of bioactive glass particles. Fibroblasts derived from human periodontal ligament (hPDLF) and osteogenic cells from newborn rat calvaria were cultured on bi-dimensional surfaces - plastic coverslips ThermanoxTM (control), bi-dimensional collagen surfaces - ThermanoxTM coated with collagen I without bioactive glass particles (2D) and with bioactive glass particles (2D+BG), on three-dimensional collagen gel without bioactive glass (3D) and with particles (3D+BG). Were evaluated: Cell viability (MTT) in 3 days, 7 and 10 days; Phosphatase alkaline activity (ALP) normalized by total protein content at 7 and 14 days; Immunolocalization of non-matrix proteins collagen (ALP and OPN in hPDLF at 7 and 14 days, OPN and BSP in osteogenic cells at 7 days) by indirect immunofluorescence; Genes expression (real-time PCR) for Periostin (PRT), Calcium-Binding Protein (S100A4) and Fibromodulin (FBM): fibroblastic markers in hPDLF, and Alkaline phosphatase (ALP), Osteopontin (OPN), Bone sialoprotein (BSP), Osteocalcin (OC), Collagen I (COL I) and RUNX2: osteoblastic markers in both cell types; and Mineralization (staining with Alizarin red). The results obtained on hPDLF cultures showed that cell viability on 2D+BG was higher than on control at 3 days (p<0.05), and no significant difference between groups was observed at 7 and 10 days. The total protein content at 7 and 14 days was higher on 3D and 3D+BG cultures compared those on 2D+BG (p<0.05) and control (p<0.05) at 7 days. Significant difference was also observed between 3D and 2D at 14 days. The ALP activity at 7 days was higher on 2D and 2D+BG compared with 3D (p<0.05) and 3D+BG (p<0.05), it was also lower on 3D+BG than on control (p<0.05). However, at 14 days 3D and 3D+BG showed higher ALP activity than control (p<0.05). Immunolabeling for OPN and ALP were observed in cells on 3D at both periods and on 2D, 2D+ BG and control only at 14 days. At 7 days, the expression of mRNA for PRT was upregulated on 3D and 3D+BG compared with control (p<0.05), for the FBM it was higher on 3D and 2D than on 3D+BG (p<0,05), but it was lower on 3D+BG than on control (p<0.05). Cells on 2D exhibited higher levels of S100A4 mRNA expression than those grown on 2D+BG (p<0.05) and control (p<0.05). The mRNA levels expression for COL I and ALP on 2D+BG and 3D, and for RUNX2 and OPN on 3D and 2D, and for OC on 2D presented upregulated compared with control (p<0.05). Also, cells on 2D showed the level expression of OC higher than those on and 2D+BG (p<0.05). At 14 days, there was a decrease in all evaluated genes expression compared with 7 days analyses. Cells on 2D+BG expressed higher levels of PRT than on 3D+BG (p<0.05). 2D and 2D+BG showed the highest levels of mRNA expression for FBM. Gene expression of S100A4 on 2D was higher than on 3D (p<0.05) and 3D+BG (p<0.05), in which the levels of S100A4 were downregulated compared to control. COL I and ALP were downregulated on 3D (p<0.05) and on 3D+BG (p<0.05) compared with control. There was also a significant difference between 2D+BG and 3D+BG for mRNA ALP expression. RUNX2 expression was higher on 3D than on 3D+BG (p<0.05), and OC expression was higher on control. Calcified matrix formation was observed on BG cultures at 10 and 14 days. At 10 days, areas stained by Alizarin were no observed by microscopy, but the amount of mineralization on 2D+BG and 3D+BG was significantly higher than on control (p<0.05), 2D (p<0.05) and 3D (p<0.05). At 14 days, more extensive staining was observed on cultures with BG, but the mineralized nodules formation was independent of the particles. Calcium content on 2D+BG and 3D+BG was significantly higher than control (p<0.05) and 2D (p<0.05). Osteogenic cell cultures showed that cells grown on 3D and 3D+BG surfaces exhibited the lowest levels of cell viability. Significant differences were observed when 3D+BG was compared with 2D+BG (p<0.05) and control (p<0.05) and also between 2D and 3D (p<0.05). At 3 and 10 days, there were no significant differences for cell viabililty between the cultures. The total protein content was higher on 3D+BG than on the control (p<0.05) and 2D+BG (p<0.05) at 7 and 14 days. Significant differences were also observed between 3D and 2D (p<0.05) at 14 days. ALP activity at 7 days was higher on 2D+BG and 3D+BG. Significant differences were found between 2D and 2D+BG (p<0.05), 3D and 3D+BG (p<0.05), and between 3D and control (p<0.05). However, at 14 days 3D and 3D+BG had the lowest levels of ALP activity, significantly different from 2D (p<0.05) and 2D+BG (p<0.05). Immunolabeling for OPN and BSP were observed at 7 days on 2D, 2D+BG, 3D and control. At 7 days, the expression levels of mRNA for ALP, COL I and RUNX2 were higher on 3D and 3D+BG. OPN, BSP and OC exhibited higher expression levels on 2D+BG. COL I expression was higher on 3D+BG than on 2D+BG (p<0.05). Cells on 2D+BG showed higher expression levels of OPN and OC than those on 2D (p<0.05) and 3D+BG (p<0.05), in which both of these genes and BSP expression were downregulated compared with control. At 10 and 14 days areas stained with Alizarin red were observed all evaluated groups, especially on BG cultures. At 10 days the amount of calcium on 3D+BG was higher than on control (p<0.05), and it was also higher on 2D+BG compared with 2D (p<0.05) and control (p<0.05). At 14 days, 2D+BG and 3D+BG showed greater calcium amount than control (p<0.05) and 2D (p<0.05). In conclusion, this study demonstrated that in vitro 3D cultures of hPDLF and osteogenic cells from newborn rats calvaria were able of support cell viability, differentiation, and to contribute to expression of fibroblastic and osteoblastic phenotype in hPDLF. The BG particles also favored the viability, differentiation, mineralized matrix formation and phenotypic expression in both cell types.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-15T18:14:17Z No. of bitstreams: 1 alexamagalhaesdias.pdf: 604087 bytes, checksum: 8ea5c8f9051eac24c5b6b2dd4138c20c (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-26T20:20:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 alexamagalhaesdias.pdf: 604087 bytes, checksum: 8ea5c8f9051eac24c5b6b2dd4138c20c (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-26T20:20:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 alexamagalhaesdias.pdf: 604087 bytes, checksum: 8ea5c8f9051eac24c5b6b2dd4138c20c (MD5) Previous issue date: 2010-08-29 / Muitas evidências indicam que há uma relação entre a periodontite e a síndrome metabólica. Ao mesmo tempo, para muitos autores a doença periodontal pode contribuir para o desenvolvimento de doenças crônicas, dentre elas a obesidade, o diabetes e doenças cardiovasculares. Através de um estudo transversal de caso controle, procurou-se, avaliar as condições periodontais e os níveis séricos da interleucina-6 em indivíduos portadores de síndrome metabólica. Foram selecionados vinte pacientes com síndrome metabólica (caso) e dez pacientes saudáveis com doença periodontal (controle). Todos os indivíduos foram submetidos a uma avaliação periodontal e a coleta de sangue para pesquisa dos níveis de IL-6, triglicérides, HDL-C e glicemia. Foram realizadas aferições da pressão arterial e dos índices antropométricos. Verificou-se que as condições periodontais de indivíduos saudáveis foram sensivelmente piores no grupo controle. Houve uma prevalência de 100% de periodontite no grupo caso. Foi observado, no grupo portador de síndrome metabólica, correlações entre a perda de inserção clínica e a glicemia em jejum e, também entre a IL-6 e os níveis de HDL-C. No grupo controle não foram observadas correlações entre os parâmetros periodontais e os componentes da síndrome metabólica. Porém a IL-6 foi positivamente relacionada a perda de inserção periodontal. Os resultados sugerem que a perda de inserção clinica pode ter influência sobre os níveis glicêmicos de portadores de síndrome metabólica. Além disso, a alta prevalência de periodontite entre esses pacientes dão suporte a teoria da possível relação entre a doença periodontal e a síndrome metabólica. / Many evidences indicate that there is a relationship between periodontitis and metabolic syndrome. At the same time, many authors affirm that the periodontal disease can contribute for the development of systemic alterations as obesity, diabetes and heart diseases. Through a cross-sectional case control study, we sought to assess the periodontal condition and serum levels of interleukin-6 in individuals with metabolic syndrome. We selected twenty patients with metabolic syndrome (case) and ten healthy patients with periodontal disease (control). All participants underwent a clinical periodontal examination and venous blood samples were obtained for research in the levels of interlekin-6, tryglicerides, HDL-C and glucose. We performed measurements of pressure and anthropometric indices. It was found that the periodontal conditions in healthy subjects were feelingly worse in the control group. There was 100% prevalence of periodontitis in the case group. Was observed in the group with metabolic syndrome, correlations between clinical attachment loss and fasting glucose, and also between IL-6 levels and HDL-C. In the control group no correlation between periodontal parameters and components of metabolic syndrome. However, IL-6 was positively related to clinical attachment loss. Results suggest that clinical attachment loss may have influence on glucose levels in patients with metabolic syndrome. Moreover, the high prevalence of periodontitis in these patients support the theory of a possible relationship between periodontal disease and metabolic syndrome.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:30:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_luiz_eduardo_rilling_nova_cruz.pdf: 941247 bytes, checksum: b51c3277dc5892c9cf7c0ddc659e85c4 (MD5) Previous issue date: 2010-06-01 / The objective of the present study was the immunohistochemical evaluation of the proportion of mononuclear cells and the expression of MMP-2 and 9 on chronic periodontitis between smokers and non-smokers. From the 127 patients examined 31(16 non-smokers and 15 smokers) fulfill the inclusion criteria were included in the study. These patients underwent surgical procedures and 31 biopsies were collected and divided in two parts, one for histological preparation and the other for zymography. Each sample was histologically processed and exposed to monoclonal antibodies for B cells (anti-CD20), memory T cells (anti-CD45RO) and macrophages or monocytes (anti-CD68) detection. The samples showed a similar pattern, with connective tissue rich in inflammatory cells. The histometric analysis showed that the total amount of mononuclear inflammatory cells labeled did not differ significantly between smokers and non-smokers (p> 0.05). Evaluating each cell type separately, significant differences were not detected between groups (p> 0.05). When stratifying the samples into regions (coronal, middle and apical third) to evaluate the presence of individual cell types in each region significant differences between the groups were not detected (p> 0.05). The zymography of the samples suggested that the expression of MMP-2 and 9 showed no statistically significant differences between the two groups (p> 0.05). Thus, within the limits of this study, we can conclude that sites with chronic periodontitis in smokers and non-smokers did not differ in the amount of mononuclear inflammatory cells and in the expression of MMPs 2 and 9. / O estudo teve como objetivo a avaliação imunoistoquímica da proporção de células mononucleares e da expressão zimográfica da MMP-2 e 9 na periodontite crônica em fumantes e não-fumantes. Foram examinados 127 pacientes dos quais 31 preencheram os critérios de inclusão e foram inseridos no estudo, sendo 16 não-fumantes e 15 fumantes. Estes pacientes foram operados e 31 biópsias foram coletadas de área interproximal de dentes com bolsa periodontal >5mm e divididas longitudinalmente em duas partes, uma para análise histológica e outra para zimografia. As amostras foram processadas histologicamente e expostas aos anticorpos monoclonais para células B (anti-CD20), células T de memória (anti-CD45RO) e monócitos ou macrófagos (anti-CD68). De maneira geral, as amostras apresentaram padrão semelhante, com um tecido conjuntivo subjacente ao epitélio oral rico em células inflamatórias. A análise histométrica demonstrou que a quantidade total de células inflamatórias mononucleares marcadas não diferiu entre fumantes e não-fumantes (p>0,05). Ao avaliar cada tipo celular separadamente, também não foram detectadas diferenças estatisticamente significativas entre os grupos (p>0,05). Ao dividir as amostras em regiões (terço coronal, médio e apical) e avaliar a presença de cada tipo celular em cada uma das regiões também não foram detectadas diferenças estatísticas significantes entre os grupos (p>0,05). A avaliação das zimografias sugere que a expressão de MMP-2 e 9 não apresentaram diferenças estatisticamente significantes entre os dois grupos (p>0,05). Assim, dentro dos limites deste estudo, pode-se concluir que os sítios com periodontite crônica de fumantes e não-fumantes não diferem em relação à quantidade e localização de células inflamatórias mononucleares e na expressão de MMPs 2 e 9.

Our goal was to optimize the antimicrobial photodynamic effect of methylene blue (MB) by adding ethanol or oxygen carrier in the formulation. Pseudomonas aeruginosa PA01 biofilms were formed on acrylic disks for 5 days. Photoactivated formulations contained MB (250 μM) in: buffered water, 10% ethanol (buffer:ethanol, 90:10), 20% ethanol (buffer:ethanol, 80:20) and emulsion carrier (perfluorodecalin:buffer:triton-X100, 60:35:5). The buffer used was a Tris-HCl solution to a pH of 7.4; and sodium acetate/acetic acid to solutions at pH 5.6. Untreated biofilms and exposed to the buffer, 10% ethanol and 20% without polymerization were evaluated as controls. Production of singlet oxygen was measured by photo-oxidation of 1.3-difenilisobenzofuran (75μM). Data of photo-oxidation and CFU (log10) were evaluated by One-Way ANOVA and post hoc Tukey and Dunnett, respectively. Student t-test assessed differences between the same formulation with different pH. Increased production of singlet oxygen was determined on MB diluted in 10% ethanol and 20% at pH 7.4. However, these formulations showed no statistical difference compared to pH 5.6; or in comparison to the MB diluted in buffer. Average data of CFU log10 for compositions of pH 7.4 containing MB/ethanol 10%, MB/ethanol 20% and MB/carrier were 3.99 ± 1.74; 4.04 ± 1.82; 3.82 ± 1.63, respectively. The average microbial reduction of these formulations were 2.47 (P=0.03); 2.42 (P=0.03); and 2.64 (P=0.02), respectively. The other formulations had no significant antimicrobial effect. / Nosso objetivo foi otimizar o efeito fotodinâmico antimicrobiano do azul de metileno (AM) por meio da inclusão de etanol ou carreador de oxigênio na formulação. Biofilmes de Pseudomonas aeruginosa PA01 foram formados sobre discos de acrílico por 5 dias. Formulações fotoativadas continham AM (250 μM) em: água tamponada, etanol 10% (tampão:etanol, 90:10), etanol 20% (tampão:etanol, 80:20) e emulsão com carreador (perfluordecaleno:tampão:triton-X100, 60:35:5). O tampão utilizado foi o Tris-HCl para as soluções em pH 7,4; e acetato de sódio/ácido acético para as soluções em pH 5,6. Biofilmes sem tratamento e expostos ao tampão, etanol 10% e 20% sem fotoativação foram avaliados como controles. Produção de oxigênio singleto foi mensurada pela fotoxidação do 1,3-difenilisobenzofuran (75μM). Dados de foto-oxidação e UFC (log10) foram avaliados por One-Way ANOVA e post hoc Tukey e Dunnett, respectivamente. Teste t-Student avaliou diferenças entre a mesma formulação com diferente pH. Maior produção de oxigênio singleto foi verificada com AM diluído em etanol 10% e 20% no pH 7,4. Contudo, estas formulações não apresentaram diferença estatística em relação ao pH 5,6; ou em comparação ao AM diluído no tampão. Dados médios de UFC log10 para formulações com pH 7,4 contendo AM/etanol 10%, AM/etanol 20%, e AM/carreador foram de 3,99 ± 1,74; 4,04 ± 1,82; 3,82 ± 1,63, respectivamente. A redução microbiana média dessas formulações foi de 2,47 (P=0,03); 2,42 (P=0,03); e 2,64 (P=0,02), respectivamente. As demais formulações não apresentaram efeito antimicrobiano estatisticamente significante.

The purpose of this study was to evaluate the effects of an antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) employing the photosensitizer methylene blue dissolved in ethanol on the systemic oxidative status likewise on the gingival collagen content of rats with periodontitis. Male Wistar rats were randomly divided into two main groups: NC (negative control; no periodontitis) and the remaining animals were submitted to periodontitis induction group. In the last group, the cotton ligature was placed at the first right mandibular molar of each animal in a submarginal position to induce experimental periodontitis. The animals with periodontitis were subdivided into groups according to the periodontal treatment as follow: SRP group (scaling and root planing), aPDT I group (SRP+aPDT+MB dissolved in water), and aPDT II group (SRP+aPDT+MB dissolved in ethanol). After 7 days, the ligature was removed and periodontal treatments were performed. At 7, 15 and 30 days, rats were euthanized and gingival tissue was removed for morphometric analysis. The erythrocytes were used to evaluate systemic oxidative status. Besides that, it indicated a protective influence of aPDT II in erythrocytes already at 15 days observed by the elevation in levels of systemic antioxidant defense. The morphometric findings showed that aPDT II group was the only one that restored the percentage of total collagen area also in 15 days, as well as, aPDT II group recovered the type I collagen area at the same time-point. According to this study we could suggest that aPDT employed as an adjunct to the standard treatment of periodontitis (SRP) increases systemic protective response against oxidative stress periodontitis-induced facilitating and accelerating the periodontal healing particularly when methylene blue is dissolved in ethanol. / O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa) usando o fotossensibilizador azul de metileno (AM) dissolvido em etanol sobre o status oxidativo sistêmico, bem como sobre o conteúdo de colágeno gengival de ratos com periodontite. Ratos machos Wistar foram divididos aleatoriamente em dois grupos principais: CN (controle negativo; sem periodontite) e os animais restantes foram o grupo submetido a indução de periodontite. No último grupo, a ligadura de algodão foi colocada no primeiro molar inferior direito de cada animal em uma posição subgengival para induzir a periodontite experimental. Os animais com periodontite foram subdivididos em grupos de acordo com o tratamento periodontal, como segue: grupo RAR (raspagem e alisamento radicular), TFDa I grupo (RAR + TFDa + AM dissolvido em água), e grupo TFDa II (RAR + TFDa + AM dissolvido em etanol). Após 7 dias, a ligadura foi removida e foram realizados os tratamentos periodontais. Aos 7, 15 e 30 dias, os ratos foram submetidos à eutanásia e foi removido o tecido gengival para análise morfométrica. Os eritrócitos foram usados para avaliar o status oxidativo sistêmico. O status oxidativo demostrou maiores níveis de peroxidação lipídica no grupo CP em 7, 15 e 30 dias, e indicou uma influência protetora da TFDa II, nos eritrócitos, já em 15 dias, observada a partir da elevação dos níveis de defesa antioxidante sistêmica. Os achados morfométricos mostraram que o grupo TFDa II restabeleceu o percentual de área total de colágeno também em 15 dias, bem como recuperou a área de colágeno tipo I no mesmo tempo. A partir deste estudo podemos sugerir que TFDa utilizada como um adjuvante ao tratamento padrão periodontal (RAR) aumenta a resposta protetora sistêmica contra o estresse oxidativo induzido pela periodontite, facilitando e acelerando a cicatrização periodontal, particularmente quando o azul de metileno é solubilizado em etanol.

Os pacientes acometidos pela insuficiência renal crônica apresentam diminuição progressiva da função renal associada à redução da taxa de filtração glomerular. Possuem a resposta imune celular e humoral suprimidas e a existência de quaisquer alterações de saúde bucal pode representar focos de infecção a esses pacientes, os quais são extremamente susceptíveis a estas. A doença periodontal é uma doença inflamatória destrutiva que afeta os tecidos periodontais, e estudos têm mostrado que a prevalência desta é maior em pacientes com IRC quando comparados com a população em geral. Objetivo: Avaliar os parâmetros clínicos da doença periodontal em pacientes com doença renal crônica. Métodos: Foi realizado exame clínico periodontal de 125 indivíduos com alteração renal crônica que foram divididos em grupo controle (GC), grupo pré-diálise (GPD) e grupo hemodiálise (GHD), e os grupos foram subdivididos de acordo com a doença periodontal. Resultados: A perda de inserção clínica foi maior nos grupos GPD e GHD quando comparados ao controle (p=0,0058; p=0,0383), os demais parâmetros periodontais não apresentaram diferenças significantes. Os níveis de ácido úrico e ferritina foram estatisticamente maiores nos GPD e GHD com quando comparados ao GC (p<0,001); p=0,008; p=0,01); o nível de PCR foi maior no grupo GPD quando comparados aos grupos GC e GHD (p<0,05); e os níveis de fibrinogênio e triglicerídeos foram maiores no grupo GPD com doença periodontal quando comparados ao GC (p=0,01, p=0,008), o mesmo não ocorreu com os grupos sem doença periodontal. Conclusão: Assim sendo, conclui-se que a PIC e o número de dentes ausentes foi maior nos grupos testes quando comparados ao controle. Portanto, os profissionais de saúde devem ter uma atenção maior aos pacientes que apresentam a DRC no sentido de efetuar uma relação interdisciplinar para melhorar a condição de saúde deste. / Chronic renal failure (CRF) is a progressive and irreversible loss of renal function associated with a decline in the glomerular filtration rate. CRFs patients have a humoral and cellular immune responses suppressed and the existence of any oral complications may be outbreaks of such patients, which are extremely susceptible to these. Periodontal disease is a destructive inflammatory disease affecting periodontal tissues, and studies have shown that this is greater prevalence in patients with CRF compared to the general population. Aim: The aim of this study was to assess the clinical periodontal parameters CRFs patients. Methods: 125 CRFs patients were included in the study, and they were divided in control group (GC), foregoing dialysis group (GPD), and hemodialysis group (GHD), and the groups were subdivided in accordance with periodontitis. Results: Clinical attachment loss (CAL) was greater in GPD and GHD groups compared to the control (p = 0.0383; p = 0.0058), the other periodontal parameters did not provide significant differences. Uric acid and ferritin levels were statistically higher in GPD and GHD when compared to the GC (p<0.05); the PCR level was higher in GPD group when compared to the GC and HDG groups (p<0.05); and fibrinogen and triglycerides levels were greatest in the GPD with periodontitis than the GC (p = 0.01, p = 0.008), the same did not occur with groups without periodontitis. Conclusion: Accordingly, it is concluded that the clinical attachment loss and the number of dental lost of the tests groups were larger than the control group. Therefore, healthcare professionals must have an attention to CFRs patients to make a relationship interdisciplinary to improve the health condition.

Objetivo: Avaliar por meio de análises radiográfica e histológica os efeitos da associação do laser de diodo e do fator de crescimento de fibroblastos no tratamento de dentes de ratos reimplantados tardiamente. Método: Cinquenta ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) tiveram seus incisivos superiores direitos extraídos, a papila dental removida, e por via retrógrada, o preparo e preenchimento dos canais radiculares com pasta de hidróxido de cálcio. Em seguida, os espécimes foram aleatoriamente divididos em cinco grupos: C+ (controle positivo)- reimplante imediato; C- (controle negativo)- reimplante tardio, mantidos em meio ambiente seco por sessenta minutos, sem tratamento adicional; LA (laser de alta potência)-reimplante tardio associado ao tratamento prévio da superfície radicular com irradiação por varredura com laser diodo de alta potência (810nm, modo contínuo, fibra óptica de 600&#956;m, 1,5W input, 30s); FGF (Fator de crescimento de fibroblastos)- reimplante tardio associado à aplicação do fator de crescimento de fibroblastos 50 &#956;g na concentração de 0,2% FGF-2 em gel de hidroxipropilmetilcelulose (HPMC) a 3% sobre a superfície radicular lingual e no interior do alvéolo dental de cada espécime; LA+FGF (Laser de alta potência e FGF)- reimplante tardio, com tratamento prévio da superfície radicular com laser diodo nos mesmos parâmetros do grupo LA, associado à aplicação do FGF-2 da mesma forma que no grupo FGF. A eutanásia dos animais ocorreu após sessenta dias. Os espécimes foram radiografados digitalmente e processados para análise descritiva dos eventos histológicos e análise da porcentagem de fibras colágenas do tipo I por meio do método Picrosirius Red. Resultados: Na análise radiográfica, o grupo LA+FGF apresentou o menor número e porcentagem de áreas reabsorvidas (p<0,05). Com a análise dos eventos histológicos por meio de escores, o grupo LA apresentou as menores médias de reabsorção substitutiva e inflamatória e anquilose, seguido pelo grupo LA+FGF e não diferindo estatisticamente do grupo controle positivo. O grupo LA+FGF apresentou o melhor reparo periodontal entre os grupos experimentais, com a maior quantidade de fibras colágenas espessas, (p<0,05). Conclusões: A irradiação da superfície radicular com laser de diodo de alta potência associada ou não ao FGF-2 reduziu a incidência de reabsorções radiculares externas e anquilose. A aplicação do FGF-2 favoreceu o reparo do ligamento periodontal, embora a reinserção das fibras não tenha ocorrido em todos os espécimes. / Aim: The aim of this study was to evaluate, by radiographic and histological analyses, the effects of high-power diode laser irradiation and fibroblast growth factor (FGF) in the treatment of delayed replanted rat teeth. Methods: Fifty rats ratos (Rattus norvegicus albinus, Wistar) had their maxillary right incisors extracted, the dental papilla removed, and by a retrograde way, the root canals were prepared and filled with calcium hydroxide paste. Subsequently, the specimens were randomly assigned to five groups: C+ (positive control)- immediate replantation; C- (negative control)- delayed replantation, left on the bench for sixty minutes, without additional treatment; LA (Diode laser high potency)- delayed replantation and root surface treatment scanning irradiation with a high-power diode laser (810nm, continuous mode, optic fiber 600&#956;m, 1.5W input, 30s); FGF (Fibroblast Growth Factor) - delayed replantation and topical application of 50&#956;g 0,2% FGF-2 gel in 3% hydroxylpropyl methylcellulose matrix (HPMC) over the lingual root surface and into dental alveolus of each specimen; LA+FGF (Diode laser high potency + Fibroblast Growth Factor)- delayed replantation and root surface treatment irradiation with a diode laser using the same parameters as those used for LA group, associated to topical application of FGF-2 in the same way as FGF group. The rats were euthanized after sixty days of replantation. The specimens were digitally radiographed and processed for descriptive histological events analysis and percentage analysis of type I collagen fibers by the Picrosírius red method. Results: By radiographic analysis, the minnor number and percentage of resorpted areas were seen in LA+FGF group (p<0.05). In the histological analysis through scores, the LA group showed lower means of replacement and inflammatory resorption and ankylosis and followed by LA+FGF group and they were not statistically different of positive control group. The LA+FGF group showed the best periodontal healing of all experimental groups, with the greater number of thick collagen fibers stained (p<0,05). Conclusions: The irradiation of root surface treatment with high-power diode laser associated or not to FGF-2 reduced the occurrence of external root resorption and ankylosis. The FGF-2 application favored the periodontal ligament healing, but the fibers reinsertion not occurred in all the specimens.

Pacientes com câncer de mama sob quimioterapia tem níveis aumentados de marcadores inflamatórios, que podem piorar condições periodontais pré-existentes. Este estudo avaliou o efeito do tratamento periodontal nao cirúrgico (TPNC) e estabeleceu a correlação entre os parâmetros clínicos com os níveis de citocinas presentes no fluido crevicular gengival (FCG) antes e após TPNC. Quarenta indivíduos foram alocados em dois grupos; pacientes com periodontite cronica (PC) (n=20) e pacientes com câncer de mama com periodontite crônica (CAN/PC) (n=20). Os seguintes parâmetros clínicos e imunológicos foram analisados: i) profundidade de sondagem (PS), nível clinico de inserção (NCI), índice gengival (IG), índice de placa (IP), ii) avaliação dos níveis de Interleucina (IL) - 4, IL-10, IL-17, IL-2, IL-6, IL-1&beta;, Interferon gama (INF-&gamma;), Fator de Necrose Tumoral alfa (TNF-&alpha;) e Fator de Crescimento Tumoral-beta (TGF-&beta;) no fluido crevicular gengival (Luminex), no baseline, 45 dias e 180 dias após TPNC. Os dados obtidos foram estatisticamente analisados. Nas comparações entre grupos: No baseline, o grupo PC apresentou níveis maiores de INF-&gamma; e níveis menores de IL- 10 e TGF-&beta; quando comparados ao grupo CAN/PC. Aos 45 dias o grupo CAN/PC apresentou níveis mais reduzidos de TNF-&alpha; (p < 0,0001) em comparação com o grupo PC. Em relação aos 180 dias, o grupo PC apresentou níveis mais reduzidos de INF-&gamma; (p < 0,001), IL-2 (p < 0. 001), TNF-&alpha; (p < 0,0001) e níveis elevados de IL-10 (p < 0,01) e TGF-&beta; (p < 0,001), quando comparados ao grupo CAN/PC. Nas comparações entre períodos de tempo: o grupo CAN/PC apresentou uma redução significativa de IL-2 aos 45 e 180 dias (p < 0,05) em comparação com baseline, TNF-&alpha; teve uma redução aos 45 dias, em comparação com baseline (p < 0.0001), alem disso, houve uma redução significativa do TGF-&beta; aos 180 dias em comparação com baseline (p < 0,0001). Enquanto IL-1&beta;, foi aumentado aos 45 dias em comparação com baseline (p < 0,05). No grupo PC, houve uma redução significativa dos níveis de INF-&gama; aos 180 dias, em comparação com baseline (p < 0,0001) e 45 dias (p < 0,05). Da mesma forma, IL-2 e TNF-&alpha; reduziram aos 180 dias, em comparação com baseline (p < 0,0001) e 45 dias (p < 0,0001), bem como um aumento de TGF-&beta; aos 180 dias, em comparação com baseline (p < 0,05) e 45 dias (p < 0,0001). Na análise de correlação entre os parâmetros clínicos e os níveis de citocinas do FCG: No grupo CAN/PC, foi encontrado uma positiva correlação entre PS e os níveis de TNF-&alpha; (r = 0.6489, p = 0.002) no baseline. IL-17 foi positivamente correlacionado com redução de PS (r = 0.4596, p = 0.04) aos 180 dias; assim também IL-6 foi positivamente correlacionado com redução de PS e ganho de NCI (r = 0.4513, p = 0.05, r = 0.5578, p = 0.01, respectivamente) aos 180 dias. No grupo PC, IL-17 foi positivamente correlacionada com PS e NCI (r = 0.4558, p = 0.04, r= 0.5447, p = 0.01, respectivamente) no baseline. IL-1&beta; foi positivamente correlacionado com redução de PS e ganho de NCI (r = 0.5538, p = 0.01, r = 0.5902, p = 0.006, respectivamente), aos 45 dias. Uma negativa correlação foi encontrada entre IL-4 e ganho de NCI (r = -0.4981, p = 0.03) aos 180 dias. Pode-se concluir que a TPNC reduz os estímulos antigênicos e consequentemente ajuda a reduzir a carga inflamatória de pacientes com câncer de mama com periodontite crônica, melhorando assim as condições clinicas periodontais e sistêmicas. / Patients with breast cancer undergoing chemotherapy have increased levels of inflammatory markers, which may worsen pre-existing periodontal conditions. The aim of this study was to evaluate the effect of non-surgical periodontal treatment (NSPT) and to establish a correlation between clinical parameters and levels of cytokines present in the gingival crevicular fluid (GCF) before and after NSPT. Forty individuals were allocated in two groups; patients with chronic periodontitis (PC) (n = 20) and patients with breast cancer with chronic periodontitis (CAN/PC) (n = 20). The following clinical and immunological parameters were analyzed: i) probing depth (PD), clinical attachment level (CAL), gingival index (GI), plaque index (PI), ii) levels of Interleukin (IL) - 4, IL-10, IL-17, IL-2, IL-6, IL-1&beta;, Interferon gamma (INF-&gama;), tumor necrosis factor (TNF-&alpha;), transforming growth factor beta (TGF-&beta;) in gingival crevicular fluid (Luminex) in baseline, 45 days and 180 days after NSPT. The data were statistically analyzed. In the comparisons between groups: At the baseline, the PC group had higher levels of INF-&gama; and low levels of IL-10 and TGF-&beta; when compared to the CAN/PC group. At 45 days, the CAN/PC group had lower levels of TNF&alpha;- (p <0.0001) compared to the PC group. In 180 days, the PC group had lower levels of INF-&gama; (p <0.001), IL-2 (p < 0. 001), TNF-&alpha; (p <0.0001), and higher levels of IL-10 (p < 0.01) and TGF-&beta; (p < 0.001), compared to the CAN/PC group. In comparisons between periods: The CAN/PC group showed a significant reduction of IL-2 at 45 and 180 days (p < 0.05) compared to baseline, TNF-&alpha; had a reduction at 45 days, when compared to baseline (p < 0.0001). In addition, there was a significant reduction of TGF-&beta; at 180 days when compared to the baseline (p < 0.0001), while IL-1&beta; increased at 45 days when compared to baseline (p < 0.05). The P group showed a significant reduction of INF-&gama; at 180 days when compared to baseline (p < 0.0001) and 45 days, (p <0.05). In the same manner, IL-2 and TNF-&alpha; had a reduction at 180 days when compared to baseline (p < 0.0001) and 45 days (p <0.0001). Likewise, there was an increase of TGF-&beta; at 180 days when compared to the baseline (p < 0.05) and at 45 days (p <0.0001). IL-17, IL-6 and IL-4 had no statistically significant differences between groups in all time points. In the analysis of correlation between the clinical parameters and the cytokine levels of the GCF: In the CAN/P group, a significant positive correlation was found between PD and TNF-&alpha; levels (r = 0.6489, p = 0.002) at baseline. IL-17 was positively correlated with PD reduction (r=0.4596, p = 0.04) at 180 days; also IL-6 was significantly positively correlated with PD reduction and CAL gain (r = 0.4513, p = 0.05, r = 0.5578, p = 0.01, respectively) at 180 days. In the P group, IL-17 was also positively correlated with PD and CAL (r = 0.4558, p = 0.04, r = 0.5447, p = 0.01, respectively) at baseline. IL-1&beta; was positively correlated with PD reduction and CAL gain (r = 0.5538, p = 0.01, r = 0.5902, p = 0.006, respectively) at 45 days. A negative correlation was found between IL-4 and CAL gain (r = -0.4981, p = 0.03) at 180 days. In conclusion, these data suggest that NSPT reduces antigenic stimuli and consequently helps to reduce the inflammatory burden in breast cancer patients with chronic periodontitis.