Orientador: Daisy Maria Favero Salvadori / Banca: Celso Vieira de Souza Leite / Banca: Elza Tiemi Sakamato Hojo / Banca: Maria Rita Marques de Oliveira / Banca: Rozangela Verlengia / Resumo: A obesidade é uma desordem multifatorial que envolve fatores hereditários, ambiente e estilo de vida, e suas consequências não são apenas sociais ou psicológicas, mas estão também relacionadas à presença de co-morbidades como a hipertensão arterial, diabetes tipo 2, doenças cardiovasculares e vários tipos de câncer. Sabe-se, hoje, que há genes relacionados ao peso corporal, embora as relações entre genética e obesidade sejam ainda questões de muito debate. Portanto, o presente estudo teve como objetivos avaliar os níveis de danos no DNA (teste cometa) em linfócitos de pacientes obesas (n=300) e mulheres eutróficas (n=300); a frequência de polimorfismos dos genes FTO (rs9939609) e APM1: 45T/G (rs2241766) e a existência de associação entre essas variantes gênicas e a incidência de lesões genotóxicas nessas populações. Os dados obtidos evidenciaram que as mulheres obesas possuem maiores níveis de lesões primárias no DNA de linfócitos, incluindo purinas e pirimidinas oxidadas, independentemente de seus genótipos para os genes FTO e APM1. A avaliação das variantes do gene FTO mostrou que os genótipos AA e TT foram, respectivamente, mais e menos frequentes nas pacientes obesas do que nas mulheres do grupo controle e que aquelas com a variante AA em ambos os grupos apresentaram maiores níveis de lesões nos DNA. Para o gene APM1, o genótipo TT foi o mais frequente em ambos os grupos, mas as mulheres com as variantes TG+GG foram as que apresentaram níveis mais elevados de lesões genotóxicas. Esses resultados indicaram, portanto, que a obesidade está relacionada a níveis mais altos de lesões genotóxicas em linfócitos de sangue periférico e que o genótipo AA do gene FTO, além de ser mais frequente em mulheres com obesidade mórbida está associado a maiores níveis de danos no DNA, assim como o alelo G do gene APM1. Assim sendo, pode-se... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Obesity is a multifactorial disorder which involves heredity, environment and lifestyle. Its consequences are not just social or psychological, but also related to the presence of comorbidities such as hypertension, type 2 diabetes, cardiovascular disease and various types of cancer. Although some genes have been associated to body weight, the relationship between genetics and obesity are still object of debate. Therefore, this study aimed to assess the level of DNA damage (comet assay) in lymphocytes from morbid obese patients (n=300) and normal weight women (n=300); the frequencies of FTO (rs9939609) and APM1: 45T/G (rs2241766) gene polymorphisms and the relationship between these gene variants and the amount of genotoxic damage were also investigated. Data showed higher level of DNA primary lesions, including oxidized purines and pyrimidines, in lymphocytes of obese than in eutrophic women, regardless their FTO and APM1 genotypes. The AA and TT FTO genotypes were respectively more and less frequents in obese patients than in the control population. Those women with the AA variant, in both groups, presented the highest levels of DNA damage. For APM1 gene, TT genotype was the most frequent in both groups, however women with the allele G (TG+GG variants) presented the highest levels of genotoxic damage. These results indicated that obesity is associated to high levels of genotoxic damage in peripheral blood lymphocytes, and that the AA genotype of the FTO gene is related to morbid obesity and to the highest levels of DNA damage, as well as the G allele of the APM1 gene. In conclusion, obese patients with FTO AA genotypes are at higher risk... (Complete abstract, click access below) / Mestre

Orientador: Sueli Aparecida Calvi / Coorientador: Ana Carla Pereira / Coorientador: Edward A. Gravis / Banca: Lenice do Rosário Souza / Banca: Ida Maria Foschiani Dias Baptista / Banca: Fátima Regina Vilani Moreno / Banca: Ana Cláudia Pelizon / Resumo: Não disponível / Abstract: It is estimated that one-third of the total world population is latently infected with M. tuberculosis and only 5-10% of the infected individuals will develop active TB disease during their life-time. The reason why some infected individuals develop active disease, while others do not is not yet entirely understood. Given the central role of TLR-2 in the incitement of inflammation, polymorphisms in its gene might be involved in both infectious and inflammatory diseases. The aim of this study was to evaluate the influence of TLR2 - 16934A/T and GT repeat polymorphisms on the immune response of PTB patients undergoing anti-TB treatment at different time points of anti-tuberculosis treatment: T1 (beginning), T2 (3 months) and T3 (end). For this we genotyped TLR2 -16934 and (GT)n repeats polymorphisms and evaluated the immune response of pulmonary tuberculosis patients during the time of anti-tuberculosis treatment. The present study suggests that TLR2 - 16934A/T and GT repeats polymorphisms can influence differential TLR-2, NF-κB and cytokine levels during anti-TB treatment. We also suggest that PTB patients with TLR2 - 16934 AA genotype may have a worst outcome of the disease, since they have a lower IFN-γ, cytokine essential to initiate the protective immunity to active TB. This association could not be made in our study due to the low number of patients evaluated. Since TLR-2 play a major role in initiating immune response against M. tuberculosis other polymorphisms in TLR2 would be crucial to better understand protective immune responses and may serve as biomarkers of protection or susceptibility to TB / Doutor

Orientador: Fábio Porto-Foresti / Banca: Roberto Ferreira Artroni / Banca: Luis Antonio Carlos Bertollo / Resumo: Prochilodus lineatus constitui-se em uma espécie de grande ocorrência na bacia superior do rio Paraná, envolvendo, sobretudo, os rios Grande, Pardo e Mogi-Guaçu. Citogeneticamente, essa espécie apresenta número diploide de 54 cromossomos dos tipos meta/submetacêntricos e apresenta um interessante sistema de microcromossomos B, que pode ocorrer variação interindividual de zero a nove supranumerários, além de apresentar polimorfismo, sendo encontrados diferentes morfotipos. P. lineatus pode ser considerada uma espécie modelo de peixe neotropical, sendo muito utilizada para estudos concernentes à origem, comportamento meiótico e evolução dos cromossomos B, devido à facilidade de captura, manejo, alta frequência de supranumerários e polimorfismo. Atualmente existem muitas especulações a respeito de sua função, origem e herança, o que torna a análise da estrutura do DNA deste tipo cromossômico, assim como o estudo do seu padrão de herança de extrema importância. Diante disto, o presente trabalho teve como objetivo estudar a origem, manutenção e herança das variantes de cromossomos B encontradas em P. lineatus do rio Mogi-Guaçu, a partir da análise da composição do DNA, frequência na população natural e padrão de transmissão destes elementos genômicos. Os resultados obtidos a partir da análise da herança destes supranumerários mostrou dinamismo entre as variantes de supranumerários para prevalecerem nos genomas hospedeiros, por meio do padrão de transmissão (kB), onde o morfotipo B-metacêntrico apresentou kB acima da taxa Mendeliana, indicando um possível mecanismo de acúmulo (drive), enquanto que os morfotipos B-acro e B-submetacêntrico apresentaram kB abaixo da taxa Mendeliana, indicando estarem em estágio de extinção. Ao realizar a técnica de pintura cromossômica, utilizando as sondas B-específicas obtidas a partir da microdissecção de cada morfotipo, observou-se ... / Abstract: Prochilodus lineatus is a species of high incidence in the upper Paraná River basin, involving mainly the Grande, Pardo and Mogi-Guaçu Rivers. Cytogenetically, this species has a diploid number of 54 meta/submetacentric chromosomes and presents an interesting system of B microchromosomes, which can occur interindividual variation from zero up to nine supernumeraries, also it presents polymorphism and can be found in different morphotypes. P. lineatus can be considered a model species of neotropical fish, commonly used for studies concerning the origin, behavior and evolution of B chromosomes, due to ease of capture, handling, high frequency of supernumerary and polymorphism. Currently, there are only speculations about its function, origin and inheritance, which make the analysis of the DNA structure of this chromosomal type, as well as the study of the inheritance pattern, of the utmost importance. Faced with this, the present work aimed to study the origin, maintenance and inheritance of the B chromosomes variants found in P. lineatus from Mogi-Guaçu River, from DNA composition analysis, frequency in natural population and transmission pattern of these genomic elements. The results obtained from the inheritance analysis of these supernumerary showed a dynamism between supernumerary variants to prevail in the host genome through the transmission pattern (kB), in which the B-metacentric morphotype presented kB above Mendelian ratio, indicating a possible accumulation mechanism (drive), while the B-acro and B-submetacentric variants presented kB below Mendelian ratio, indicating that they were in extinction stage. When performing the chromosome painting technique, using B-specific probes obtained from each microdissected morphotypes, it was observed a homology between the B chromosome variants, indicating a common ancient variant origin. However, only the B-submetacentric chromosome probe (Bsm) showed ... / Mestre

Introdução: O Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2) é uma doença crônica complexa causada pela combinação de resistência à insulina no músculo esquelético, fígado e tecido adiposo, e desregulação na secreção de insulina pelas células-beta pancreáticas. Tanto o DM2 quanto a resistência à insulina são considerados como estado de inflamação crônica pré-clínica, resultantes de mudanças na resposta imune inata. Dessa forma, polimorfismos em genes que codificam proteínas do sistema imune inato, como os receptores do tipo Toll, podem influenciar a resposta imunológica bem como desenvolvimento do DM2. Este trabalho descreve um estudo de caso-controle e uma meta-análise realizada para determinar se os polimorfismos Asp299Gly (rs4986790) e Thr399Ile (rs4986791) no gene TLR4 estão associados com DM2. Métodos: No estudo de caso-controle foram incluídos 1.684 pacientes com DM2 e 584 indivíduos não diabéticos do Brasil. A pesquisa bibliográfica foi realizada a fim de identificar os estudos que investigaram a associação entre os polimorfismos referidos no gene TLR4 e DM2. As razões de chances (RC) dos grupos foram calculadas para os modelos de herança de contraste de alelos e dominante. Resultados: No estudo de caso-controle, as frequências genotípicas e alélicas dos polimorfismos Asp299Gly e Thr399Ile diferiram entre pacientes com DM2 e indivíduos não diabéticos (p <0,05). Além disso, a presença de alelos raros desses polimorfismos foi significativamente associada com proteção para DM2, após o ajuste para etnia, sob o modelo dominante [Asp299Gly: RC = 0,68 (IC 95% 0,49- 0,94); Thr399Ile: RC = 0,65 (IC 95%,46-0,90)]. Sete estudos foram selecionados para inclusão na meta-análise. Resultados da meta-análise mostram que o polimorfismo Asp299Gly foi associado à proteção para o DM2 [RC = 0,68 (IC 95% 0,46-1,00), modelo de contraste alelo]. A estratificação por etnia revelou que ambos os polimorfismos foram associados à proteção para DM2 sob os modelos de contraste de alelos e dominante na população brasileira, mas não em europeus. Conclusões: Em nosso estudo de caso-controle, demonstramos uma possível associação entre os polimorfismos Asp299Gly e Thr399Ile no gene TLR4 e proteção para DM2. Da mesma forma, os resultados da meta-análise mostraram uma associação do polimorfismo Asp299Gly com proteção para o DM2 em todos os grupos étnicos. No entanto, após estratificação por etnia, encontramos associação entre os dois polimorfismos estudados e proteção para o DM2 em brasileiros, mas não em descendentes de europeus. Essa é a maior meta-análise que investigou os polimorfismos Asp299Gly e Thr399Ile no gene TLR4 até o presente momento. Em outras etnias são necessários novos estudos com amostras maiores para confirmar essas associações, bem como elucidar os papéis possivelmente desempenhados por esses polimorfismos na patogênese do DM2. / Introduction: Type 2 Diabetes Mellitus (T2DM) is a chronic disease caused by a complex combination of insulin resistance in skeletal muscle, liver and adipose tissue, and deregulation of insulin secretion by pancreatic beta-cells. Both T2DM and insulin resistance are considered as a state of chronic pre-clinical inflammation resulting from changes in the innate immune response. Therefore, polymorphisms in genes encoding proteins of the innate immune system, such as Toll-like receptors, can influence the immune response and the development of T2DM. This work describes a case-control study and a meta-analysis conducted to determine whether the TLR4 Asp299Gly (rs4986790) and Thr399Ile (rs4986791) polymorphisms are associated with T2DM. Methods: In the case-control study were enrolled 1684 T2DM patients and 584 nondiabetic subjects from Brazil. A literature search was conducted in order to identify studies that investigated associations between the referred TLR4 polymorphisms and T2DM. Pooled odds ratios (OR) were calculated for allele contrast and dominant inheritance models. Results: In the case-control study, genotype and allele frequencies of the Asp299Gly and Thr399Ile polymorphisms differed between T2DM patients and nondiabetic subjects (P <0.05). Moreover, the presence of the minor alleles of these polymorphisms were significantly associated with protection for T2DM, after adjusting for ethnicity, under a dominant model [Asp299Gly: OR=0.68 (95% CI 0.49-0.94); Thr399Ile: OR=0.65 (95% CI 0.46-0.90)]. Seven studies were eligible for inclusion in the meta-analysis. Meta-analysis results showed that the Asp299Gly polymorphism was associated with T2DM protection [OR=0.68 (95% CI 0.46-1.00), allele contrast model]. Stratification by ethnicity revealed that both polymorphisms were associated with T2DM protection under allele contrast and dominant models in Brazilian population but not in Europeans. Conclusions: In our case-control study, we were able to demonstrate a possible association between the TLR4 Asp299Gly and Thr399Ile polymorphisms and protection for T2DM. In agreement, the meta-analysis results showed an association of the Asp299Gly polymorphism with T2DM protection in the whole group, and associations of the Asp299Gly and Thr399Ile polymorphisms with T2DM protection in the Brazilian group but not in European descendent. This is the largest TLR4 meta-analysis performed so far. In other ethnicities further studies with large sample size are necessary to confirm these associations as well as to elucidate the roles possibly played by these polymorphisms in the pathogenesis of T2DM.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2014. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Conteúdo restrito: páginas 90 a 108. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2014-10-16T20:18:02Z No. of bitstreams: 1 2014_RenatoMaranoRocha.pdf: 1898857 bytes, checksum: eac9acaab04808504f2e0a70288fdda6 (MD5) / Approved for entry into archive by Tania Milca Carvalho Malheiros(tania@bce.unb.br) on 2014-10-16T20:25:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_RenatoMaranoRocha.pdf: 1898857 bytes, checksum: eac9acaab04808504f2e0a70288fdda6 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-16T20:25:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_RenatoMaranoRocha.pdf: 1898857 bytes, checksum: eac9acaab04808504f2e0a70288fdda6 (MD5) / Introdução: A síndrome metabólica (SMet) é doença multifatorial, resultante da complexa interação entre fatores fisiológicos, comportamentais, culturais e genéticos que aumentam o risco de desenvolvimento de doenças crônicas, como diabetes mellitus tipo 2, hipertensão arterial sistêmica, dislipidemia, e consequentemente, aumento do risco cardiovascular e de morte prematura. Apesar do amplo conhecimento de que a adiposidade e resistência insulínica exercem papel relevante no desenvolvimento desta síndrome, os fatores genéticos envolvidos ainda não estão esclarecidos na sua totalidade. Os receptores ativados por proliferador de peroxissomo gama (PPAR) desempenham papel importante na adipogênese e no metabolismo de lipídeos e hidratos de carbono. Sua variabilidade genética, em particular, o polimorfismo rs1801282 (Pro12Ala), é investigado como possível marcador genético preditivo para a esteatose hepática, diabetes mellitus e outras condições. No entanto, os estudos que abordam essa questão no contexto da SMet são escassos na literatura. Objetivo: Este estudo destinou-se a determinar as frequências genotípicas e alélicas de rs1801282 em 179 controles e em 154 pacientes com SMet que vivem em Brasília, Brasil e também examinar a associação com variáveis antropométricas, bioquímicas e hemodinâmicas neste último grupo. Metodologia: DNA foi extraído pelo método de Chelex-100 e as determinações dos genótipos foram realizadas por meio da reação em cadeia da polimerase alelo específico. Resultados: A distribuição de frequência do genótipo no grupo SMet não foi estatisticamente diferente da frequência nos controles. Na SMet, a frequência do genótipo foi 0,869 para o CC, e 0,103 para CG, enquanto as frequências alélicas foram 0,948 para C e 0,052 para o alelo G. No grupo controle, as frequências genotípicas e alélicas foram 0,882 para CC, 0,117 para CG; e 0,941 para C e 0,059para G, respectivamente. O genótipo GG não foi encontrado em quaisquer dos dois grupos. As distribuições genotípicas e as frequências alélicas estavam em equilíbrio de Hardy-Weinberg. Nenhum marcador pôde ser detectado a partir da análise das variáveis antropométricas, bioquímicas e hemodinâmicas no grupo SMet. Conclusão: Nossos dados sugerem que esse polimorfismo não está correlacionado com predisposição à SMet. Este resultado, obtido em uma pequena amostra da população de Brasília, está em consonância com os achados anteriores relatados na literatura sobre a prevalência deste polimorfismo no PPAR em populações de diferentes origens étnicas. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: The metabolic syndrome (MetS) is a multifactorial disorder which results from the complex interaction between physiological, behavioral, cultural and genetic factors that increase the risk of developing chronic diseases such as hypertension, type 2 diabetes mellitus, dyslipidemia, and consequently, increased cardiovascular risk and early deaths. Despite current knowledge that adiposity and insulin resistance play a relevant role in the development of this syndrome, the genetic factors involved are still unclear in their entirety. Peroxisome proliferator activated receptor-gamma (PPAR) plays an important role in lipid homeostasis, adipogenesis and insulin resistance, which implicates a possible role for PPAR gene in predisposition to MetS. Indeed, variability in this gene, in particular, the rs1801282 (Pro12Ala) polymorphism, has been investigated as a possible predictive genetic marker for hepatic steatosis, diabetes mellitus and other conditions. However, studies addressing this issue in the context of MetS are scarce in the literature. Objective: This study aimed to determine the genotypic and allelic frequencies of the rs1801282 polymorphism in 179 controls and 154 patients with MetS from Brasilia, Brazil, and also to examine the correlation of the genotype with anthropometric, biochemical and hemodynamic variables, in the last group. Methods: DNA was extracted by the Chelex-100 method (121), and rs1801282 genotype assignments were conducted by allele-specific polymerase chain reaction. Results: The genotype frequency distribution in MetS group was not statistically different from the frequency in controls. In MetS, genotype frequency was 0,869 for the CC and 0,103 for CG, whereas allelic frequencies were 0,948 for C and 0,052 for G allele. In the control group, genotypic and allelic frequencies were 0,882 for CC, 0,117 for CG; and 0,941 for C and 0,059 for G, respectively. The GG genotype was not found in any of the two groups. Allelic and genotypic frequencies for this polymorphism were in Hardy-Weinberg equilibrium. No marker could be detected from the analysis of anthropometric, biochemical and hemodynamic variables in the MetS group. Conclusions: Our data suggest that this polymorphism is not correlated with predisposition to MetS. This result, obtained in a small sample of the population of Brasilia, is in line with previous findings reported in the literature of the prevalence of this polymorphism in PPAR in populations of diverse ethnic backgrounds.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Larissa Ferreira dos Angelos (ferreirangelos@gmail.com) on 2010-03-05T17:48:19Z No. of bitstreams: 1 2009_AnaClaudiadeMeloValeriano.pdf: 348938 bytes, checksum: 1dacb40fa7251b2be3b866121a3a4eab (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-03-09T01:46:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_AnaClaudiadeMeloValeriano.pdf: 348938 bytes, checksum: 1dacb40fa7251b2be3b866121a3a4eab (MD5) / Made available in DSpace on 2010-03-09T01:46:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_AnaClaudiadeMeloValeriano.pdf: 348938 bytes, checksum: 1dacb40fa7251b2be3b866121a3a4eab (MD5) Previous issue date: 2009-05-25 / Estudos baseados em genes candidatos buscam identificar polimorfismos e a prospecção de genes candidatos que estão envolvidos no processo de ovulação são ferramentas de importantes quando se pretende incrementar a eficiência reprodutiva de rebanhos e melhorar as respostas das biotécnicas de multiplicação animal. Sendo assim, o objetivo deste estudo foi sequenciar e detectar polimorfismos em parte do “exon” 10 do gene do receptor do hormônio folículo estimulante (FSHR); genotipar doadoras de embriões para um SNP nos genes receptor de estrógeno (ER) e FSHR; analisar se esses genes podem ser usados como marcadores moleculares para a resposta superovulatória em bovinos. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Candidate gene based studies intend to identify polymorphisms and to prospect candidate genes evolved in ovulation process are important tools to increase the cattle reproduction efficiency and to improve animal biotechnology response. Thus, the aim of this study was to sequence and to detect polymorphisms present in exon 10 from follicle stimulation hormone receptor (FSHR) gene; to genotype estrogen receptor gene (ER1) and FSHR SNPs in embryo donors; and to verify the possibility to use these genes as molecular markers to assess the bovine ovullatory response.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós Graduação em Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-10-18T14:52:24Z No. of bitstreams: 1 2013_LeonardoCostaPereira.pdf: 2444559 bytes, checksum: 48bcb389fa8bc06f54c9921d742aa8fe (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-10-21T11:03:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LeonardoCostaPereira.pdf: 2444559 bytes, checksum: 48bcb389fa8bc06f54c9921d742aa8fe (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-21T11:03:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LeonardoCostaPereira.pdf: 2444559 bytes, checksum: 48bcb389fa8bc06f54c9921d742aa8fe (MD5) / Introdução: Com o crescente envelhecimento da população brasileira estratégias que possam contribuir para a manutenção da saúde desse grupo etário são de suma relevância. Assim, estudos que abordam a prática de treino físico e a influencia genética sobre as respostas geradas no organismo de idosos vêm sendo desenvolvidos. Objetivo: A presente pesquisa teve por objetivo avaliar a relação do polimorfismo do gene promotor -174 C/G da IL-6 sobre as respostas da IL-6 sistêmica e dano muscular após treinamento de força excêntrico em homens idosos. Metodologia: Foram determinados os níveis de CK e de IL-6 nos momento pré, 0 h, 3 h, 24 h, 48 horas pós treino excêntrico para homens idosos. Foram identificadas as frequências genicas do polimorfismo do gene promotor IL6 G-174C e foram analisadas as possíveis relações genéticas com os níveis séricos da IL-6 e CK nos diferentes momentos. Para determinação da frequência genotípica foi empregado o teste de Hardy-Weinberg. Para efeito de análise estatística os sujeitos foram divididos em dois grupos genotípicos GG e CC/CG. Os dados contínuos foram expressos em média e erro padrão. Para comparar as medidas de CK e IL-6 foi utilizada ANOVA. As correlações entre o polimorfismo do gene promotor -174 C/G da IL-6 e os resultados de CK, IL-6, lipidograma, idade, altura e composição corporal foram determinadas pelo teste T independente. Resultados: Não foram encontradas diferenças significativas entre os grupos genotípicos e as variáveis antropométricas (p>0,05), perfil lipídico (p>0,05) e CK em todos os momentos (p>0,05). Foram verificadas diferenças entre os níveis de IL-6 basais e pós treino para todos os momentos entre os grupos (p=0,029). Conclusão: O treino excêntrico influenciou na modulação de CK e IL-6 independentemente do Polimorfismo do gene promotor - 174 C/G da IL-6. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: With the increasing aging of the Brazilian population, strategies that may contribute to the maintenance of the health of this age group are of supreme importance. Studies what approach the practice of physical training and the genetic influence on the responses generated in the body of the elderly are being developed. Objective: The present research purposed to assess the relationship between polymorphism of the gene promoter -174 C/G from IL-6 about the replies of systemic IL-6 and muscle damage after eccentric strength training in elderly men. Methodology: Were determined the CK and the IL-6 levels in pre moment, 0 h, 3 h, 24 h, 48 hours after eccentric training in elderly men. Were identified the gene frequencies of polymorphism of promoter gene IL6 G-174C and were analyzed the possible genetic relationships with serum levels of IL-6 and CK in different moments. For determination of the genotype frequency was employed the test of Hardy-Weinberg. For the purpose of statistical analysis the subjects were divided into two genotypic groups GG and CC/CG. Continuous data were expressed as average and standard error. To compare the measures of CK and IL-6 it was used ANOVA. The correlations between the polymorphism of the gene promoter -174 C/G of IL-6 and the results of CK, IL-6, lipidogram, age, height and body composition were determined by independent T test. Results: No significant differences were found between the genotypic groups and anthropometric variables (p>0,05), lipid profile (p>0,05) and CK in every moment (p>0,05). Differences were found between the levels of IL-6 basal and after training for all moments about the groups (p=0,029). Conclusion: The eccentric training was influenced in the modulation of CK and IL-6 independently of polymorphism of the gene promoter -174 C/G from IL-6.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-11-22T13:12:41Z No. of bitstreams: 1 2013_LilianCarlaPereiraBarbosa.PDF: 1701428 bytes, checksum: abb99f8df21806bc866cb91ce409ff1d (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-11-26T13:03:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LilianCarlaPereiraBarbosa.PDF: 1701428 bytes, checksum: abb99f8df21806bc866cb91ce409ff1d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-26T13:03:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LilianCarlaPereiraBarbosa.PDF: 1701428 bytes, checksum: abb99f8df21806bc866cb91ce409ff1d (MD5) / O íon ferro é fundamental para a homeostase celular; porém, pode ser altamente danoso ao organismo quando se encontra livre, pois sua capacidade de aceitar ou doar elétrons permite catalisar a formação de espécies reativas de oxigênio (ERO). Em circunstâncias normais, essa reação é minimizada pelo sequestro de ferro dentro de complexos com proteínas; na sobrecarga de ferro, os depósitos de ferro estão livres para promover a produção de ERO, sendo esta inevitável em pacientes que recebem transfusões frequentes, como na doença falciforme. A haptoglobina (Hp) é uma glicoproteína que se liga à hemoglobina (Hb) livre formando o complexo Hp-Hb que é essencial para a remoção de Hb do plasma, tendo um papel crucial contra o estresse oxidativo induzido por Hb. Outra proteína relacionada ao estresse oxidativo é a mieloperoxidase (MPO), uma enzima lisossômica com atividade microbicida oxigênio-dependente presente em monócitos e neutrófilos. Visto que ambas as proteínas apresentam polimorfismo genético que pode influenciar na proteção contra o estresse oxidativo, o objetivo do presente trabalho foi investigar a frequência dos polimorfismos nos genes da Hp e da MPO (G463A) em pacientes com doença falciforme (SS) e sua correlação com a gravidade clínica da sobrecarga de ferro, visando avaliar uma possível associação entre esses polimorfismos com a variabilidade clínica, a resposta aos tratamentos e o prognóstico, especialmente aqueles relacionados ao estresse oxidativo. Para tal, foi realizado um estudo transversal com amostra de conveniência composta por 78 pacientes com diagnóstico de doença falciforme atendidos no Hospital de Base do Distrito Federal (HBDF), sem e com sobrecarga de ferro. Os dados foram obtidos através de exames laboratoriais, questionário, pesquisa em prontuários e análises dos polimorfismos por métodos baseados na reação em cadeia da polimerase. Correlação positiva foi encontrada entre os genótipos de Hp e valores de ferritina (p=0,035; coeficiente de correlação de Spearman=0,239), tratamento com hidroxiureia (p=0,031; coeficiente de contingência= 0,369), internação por acidente vascular-cerebral (AVC) (p=0,023; coeficiente de contingência=0,379) e sequelas por AVC (p=0,031; coeficiente de contingência= 0,368), e entre os genótipos de MPO e número de internações no último ano (p=0,049; coeficiente de contingência= 0,332) e esplenectomia (p=0,024; coeficiente de contingência= 0,297). Associação significativa entre genótipos específicos da Hp e comorbidades também foram encontradas, enquanto para MPO os resultados sugeriram que a homozigose AA poderia potencializar os efeitos da asplenia. Desvio significativo no equilíbrio de Hardy-Weinberg foi observado apenas para o polimorfismo da Hp, sendo este compatível com deficiência de heterozigotos, sugerindo uma possível existência de seleção natural desfavorecendo o genótipo 1S-2 entre os pacientes com doença falciforme. Os resultados do Odds Ratio sugeriram a possibilidade de que principalmente o aumento de chances de hospitalização por AVC (OR= 6,346; IC 95%= 1,56–25,79; p=0,005) e de sequelas por AVC (OR= 6,556; IC 95%= 1,578–27,237; p=0,005) poderiam estar associados à menor frequência observada de 1S-2 em relação ao esperado. Apesar de não haver diferenças nas frequências genotípicas entre os grupos sem e com sobrecarga de ferro para nenhum dos polimorfismos analisados, quando analisadas as interações entre os polimorfismos, efeitos significativos foram mostrados apenas no grupo sem sobrecarga para o polimorfismo de Hp nos valores de proteína C-reativa ultra-sensível (PCR-us) (p=0,000) e número de transfusões (p=0,018), o mesmo ocorrendo em relação ao polimorfismo de MPO nos valores de PCR-us (p=0,000), e para a interação entre Hp/MPO também nos valores de PCR-us (p=0,000). Diferenças significativas nas comparações 2-a-2 foram observadas para MPO entre os genótipos GG e AA e entre GA e AA (p=0,000 para ambos). Apesar da associação reportada entre o fenótipo Hp1-1 e doença falciforme, nossos resultados corroboram outros indicando que existem *1diferenças entre os subtipos do alelo Hp . Esses resultados ressaltam a importância do presente estudo para um melhor entendimento do significado biológico do polimorfismo de Hp na variabilidade clínica e resposta aos tratamentos de indivíduos falcêmicos na nossa população, e também sugerem que a homozigose AA da MPO pode potencializar os efeitos da asplenia nesses indivíduos. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The iron ion is essential for cellular homeostasis; however, it can be highly damaging to the body when it is free, because its ability to accept or donate electrons allows the formation of reactive oxygen species (ROS) to be catalyzed. Under normal circumstances, this reaction is minimized by sequestering iron in complexes with proteins. However, in iron overload, iron deposits are free to promote the production of ROS, which is inevitable in patients who receive frequent transfusions, as occurs in sickle cell anemia. Haptoglobin (Hp) is a glycoprotein which binds free hemoglobin (Hb), forming the Hp-Hb complex that is essential for removal of plasma Hb, having a crucial role against oxidative stress induced by Hb. Another protein related to oxidative stress is myeloperoxidase (MPO), a lysosomal enzyme with oxygen-dependent microbicidal activity present in monocytes and neutrophils. Since both proteins show genetic polymorphisms that may influence the protection against oxidative stress, the objective of this study was to investigate the frequency of polymorphisms in the Hp and MPO ( G463A) genes of patients with sickle cell disease (SS) and its correlation with the clinical severity of iron overload, aiming to evaluate a possible association between these polymorphisms and clinical variability, response to treatment and prognosis, especially those related to oxidative stress. To this end, we conducted a cross-sectional study with a convenience sample comprising 78 patients with sickle cell disease treated at Hospital de Base do Distrito Federal (HBDF), with and without iron overload. Data were obtained from laboratory tests, questionnaires, the medical records and analysis of the polymorphisms by methods based on polymerase chain reaction. Positive correlations was found between Hp genotypes and values of ferritin levels (p=0.035, Spearman's correlation coefficient= 0.239), treatment with hydroxyurea (p=0.031, contingency coefficient= 0.369), hospitalization for stroke (p=0.023, contingency coefficient= 0.379) and sequelae of stroke (p=0.031, contingency coefficient= 0.368); and between MPO genotypes and number of hospitalizations in the past 12 months (p=0.049; contingency coefficient= 0.332) and splenectomy (p=0.024, contingency coefficient= 0.297). Significant associations between specific Hp genotypes and comorbidities were also found, while for MPO, results suggested that AA homozygosis could increase the effects of asplenia. Significant deviation from the Hardy-Weinberg equilibrium was observed only for the Hp polymorphism, which was compatible with heterozygous deficit, suggesting a possible existence of natural selection disfavoring the 1S-2 genotype among patients with sickle cell anemia. Results of the Odds Ratio suggested the possibility that mainly increased chances of hospitalization for stroke (OR= 6.346; IC 95%= 1.56–25.79; p=0.005) and of sequelae from stroke (OR= 6.556; IC 95%= 1.578–27.237; p=0.005) could be associated with less frequently observed 1S-2 than was expected. Although no differences were observed in genotype frequencies between the groups with and without iron overload for any of the polymorphisms analyzed, when the interactions between the polymorphisms were analyzed, significant effects between subjects were shown only in the group without overload for Hp polymorphism in the values of high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP; p=0.000) and number of transfusions (p=0.018), with the same occurring for MPO polymorphism (p=0.000) and the interaction between Hp/MPO (p=0.000) with hs-CRP values. Significant differences in 2-to-2 comparisons were observed for MPO between the genotypes GG and AA (p=0.000), and GA and AA (p=0.000) in the hs-CRP levels. Despite the reported association between Hp1-1 phenotype and sickle cell disease, our results corroborate others *1indicating that there are biological differences between the Hp allele subtypes. These results highlight the importance of this study to better understand the biological significance of Hp polymorphism in the clinical variability and response to treatment of individuals with sickle cell disease in our population, and also suggest that MPO AA homozygosis may increase the effects of asplenia in these individuals.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-04-08T13:52:58Z No. of bitstreams: 1 2013_AlexandreMagalhaesMartins.pdf: 3293712 bytes, checksum: ad5bfda53ed43d7d517651d2a439e4e9 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-04-28T14:29:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_AlexandreMagalhaesMartins.pdf: 3293712 bytes, checksum: ad5bfda53ed43d7d517651d2a439e4e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-04-28T14:29:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_AlexandreMagalhaesMartins.pdf: 3293712 bytes, checksum: ad5bfda53ed43d7d517651d2a439e4e9 (MD5) / Este estudo tem como foco o desenvolvimento e uso de ferramentas de bioinformática aplicadas à análise de grandes volumes de dados de sequenciamento para identificar e selecionar variações específicas de sequência de DNA, como polimorfismos de único nucleotídeo (SNP - Single Nucleotide Polymorphism), marcadores microssatélites (SSR – Single Sequences Repeats) e (indels - Insertions/Deletions), visando o seu emprego em programas de conservação de germoplasma e de melhoramento genético de Brachiaria ruziziensis. Além disto, pretende valer-se das análises in silico com base no genoma de espécies conhecidas como modelo para estudo (ex. arroz), para a caracterização do genoma de Brachiaria ruziziensis, uma espécie órfã de informação genômica. Objetivos específicos a. Sequenciar, montar de novo, analisar e caracterizar o genoma estrutural de Brachiaria ruziziensis, com ênfase no conhecimento da composição de elementos transponíveis, bem como do espaço gênico, em comparação com outras espécies; b. Desenvolver marcadores microssatélites para uso em análise genética e no programa de melhoramento de B. ruziziensis através de sequenciamento de alto desempenho (NGS – Next Generation Sequencing) do genoma nuclear de braquiária. c. Sequenciar, montar de novo, analisar e caracterizar o genoma cloroplástico das quatro principais espécies de braquiária no Brasil (B. ruziziensis, B. brizantha, B. decumbens e B. humidicola). Desenvolver e validar marcadores espécieespecíficos baseados inserções/deleções do DNA cloroplástico para a identificação de acessos destas espécies. d. Desenvolver marcadores SNPs para uso em análise genética e no programa de melhoramento de B. ruziziensis através de NGS.

Orientador: Carmen Silvia Bertuzzo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T05:02:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_IsabelCristinaJacintode_D.pdf: 2884064 bytes, checksum: ef1354c3f8b573c2a7b4dc0801a2f254 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A Asma é uma doença inflamatória crônica de vias aéreas, na qual várias células têm papel fundamental, tais como os eosinófilos, mastócitos e linfócitos T. O processo inflamatório está associado à hiper-responsividade brônquica a uma variedade de estímulos. A asma é uma doença genética complexa e multifatorial que não acompanha os padrões monogênicos de hereditariedade. Estudos de ligação sugerem que múltiplos genes estão envolvidos na patogenia dessa doença. O objetivo desse trabalho é verificar em uma amostra de pacientes com asma leve, moderada e grave, uma possível associação entre os polimorfismos dos genes TGF-'beta'1, CD14, IL-4, IL-4Ra, ADAM33 e a gravidade da asma. A análise do polimorfismo T869C do gene TGF-'beta'1 foi realizada pela técnica de PCR + ARMS. Os outros polimorfismos C-509T do gene TGF-'beta'1, C-159T do gene CD14, C-590T da IL-4, Ile50Val da IL-4Ra , S2 do gene ADAM33 foram detectados por PCR + enzima de restrição. Em relação ao polimorfismo T869C (TGF-?1), em nossa amostra observou-se uma associação entre o genótipo CC e os pacientes portadores de asma grave. Quanto ao polimorfismo C-509T(TGF-'beta'1), nenhuma associação foi encontrada. Quando se comparou a distribuição da frequência genotípica do polimorfismo C-159T(CD14) na asma grave com o grupo controle foi observado um resultado significativo com genótipos TT e CT. Não encontramos associação entre C-590T (IL4) e asma. Houve significância entre o genótipo Val/Val (IL-4Ra) e a asma leve. O heterozigoto GC do polimorfismo S_2 (ADAM33) com a asma leve e grave. O homozigoto CC com a asma leve. Nossos resultados indicam que os polimorfismos T869C(TGF-?1) e C-159T(CD14) podem estar envolvidos na modulação da gravidade da asma / Abstract: Asthma is a chronic inflammatory disease affecting air pathways, in which several cells, such as eosinophils, mastocytes and T lymphocytes, play fundamental roles. The inflammatory process is associated with bronchial hyperresponsiveness to a variety of stimulus types. Asthma is a complex and multifactorial genetic disease that does not follow the monogenic line of hereditary patterns. Linkage studies suggest that multiple genes are involved in its pathogenesis. The objective of this work was to verify, in a sample of patients with mild, moderate and acute asthma, a possible association between TGF-'beta'1, CD14, IL-4, IL-4Ra, ADAM33 gene polymorphisms and asthma severity. The T869C polymorphism of the TGF-'beta'1 gene was analyzed using the ARMS-PCR technique. The other polymorphisms C-509T of the TGF-'beta'1 gene, C-159T of the CD14 gene, C-590T of the IL-4 gene, Ile50Val of the IL-4Ra gene , S2 of the ADAM33 gene were be detected by PCR + restriction analysis. The T869C polymorphism (TGF-'beta'1) in our sample showed an association between the CC genotype and the patients who presented acute asthma. No association was found concerning the C-509T (TGF-'beta'1) polymorphism. Comparing the genotype distribution of the C-159T (CD14) polymorphism on the control group of acute asthma, a significant result with TT and CT genotypes was observed. There was no association between C-590T (IL4) and asthma. There was a significant association between Val/Val (IL-4Ra) genotype and mild asthma. The GC heterozygote of the S_2 polymorphism (ADAM33) with acute and mild asthma. The CC homozygote and mild asthma. The results indicated that T869C (TGF-'beta'1) and C-159T (CD14) polymorphisms can modulate asthma severity / Doutorado / Genetica Medica / Mestre em Ciências Médicas