Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The skin, tegument which covers the body of animals, presents various important functions to the organism. The maintenance of its integrity is fundamental to prevent penetration of microorganisms and exit of liquids essential to life maintenance. Due to its constant environment exposure, the skin is highly susceptible to trauma which can result in solutions of continuity. Excision of tumoral masses or infectious lesions, iatrogenic lesions, extensive surgical complications, burns, automobile accidents, snake bites or insect stings, injection of irritant drugs or even gunshots or traps are causes that can result in lesions in any area of the animal‟s skin. The healing of wounded skin should be fast, in order to assure the return of its integrity, however, some complications can occur as in limb lesions or patients with extensively burned areas. Many alternatives are searched for, aiming to reduce repair time and to guarantee a functional and esthetically acceptable scar. One option to repair injured tissues which is ever more viable is cellular therapy with adult stem cells. To carry out this experiment, 20 rabbits were randomly divided in four groups with five animals each. Group A did not receive any treatment; group B received only one cellulose membrane; and groups C and D, in addition to receiving the membrane, were submitted to autologous transplant of total mononuclear cell fraction (TMCF) from bone marrow or stromal vascular fraction (SVF) from adipose tissue, respectively. The aims of this study consisted in evaluating the transplant of these fractions, associated with the use of cellulose membrane. Therefore, after induction of the experimental cutaneous wound in all the animals, this was followed by application of the membrane and autogenous TMCF transplant, with total cell value between 6,92 x 106 and 4,91 x 107 and a viability of 82 to 97%, or SVF, with total cell value between 9,6 x 105 and 6,5 x 106 and a viability of 66 a 87%. The animals were submitted to photographic evaluation, measurement of wounds and biopsy at 7, 14 and 21 postoperative days. At the end of the evaluation period, the three treated groups presented significant statistical difference of wound area in relation to the control group, and the group which received SVF from adipose tissue presented the shortest wound healing time. / A pele, tegumento que reveste o corpo dos animais, apresenta diversas funções importantes para o organismo. A manutenção de sua integridade é fundamental para impedir a penetração de microorganismos e a perda de líquidos essenciais à manutenção da vida. Por estar constantemente exposta ao meio, a pele é altamente susceptível a traumas que podem acarretar em soluções de continuidade. Excisão de massas tumorais ou lesões infecciosas, lesões iatrogênicas, complicações de cirurgias extensas, queimaduras, acidentes automobilísticos, picadas de cobras ou insetos, injeção de medicamentos irritantes e até mesmo tiros ou armadilhas são causas que podem ocasionar feridas em qualquer região da pele do animal. A cicatrização da pele ferida deve ser rápida, para garantir o retorno de sua integridade, entretanto algumas complicações podem ocorrer como em lesões nos membros ou pacientes com grandes áreas de queimadura. Diversas alternativas são buscadas, visando a redução do tempo de reparo e para garantir uma cicatriz funcional e esteticamente aceitável. Uma opção cada vez mais viável para reparar tecidos danificados é a terapia celular com células-tronco adultas. Para realização deste experimento, 20 coelhos foram divididos aleatoriamente em quatro grupos com cinco animais cada. O grupo A, não recebeu nenhum tratamento, o grupo B, recebeu apenas uma membrana celulósica e os grupos C e D, além de receberem a membrana, foram submetidos a transplante autólogo da fração total de células mononucleares (FTCM) da medula óssea ou a fração vascular estromal (FVE) do tecido adiposo, respectivamente. Os objetivos deste trabalho consistiram em avaliar o transplante destas frações, associado ao uso da membrana celulósica. Para tanto, após a indução da ferida cutânea experimental em todos os animais, seguiu-se a aplicação da membrana nos grupos tratados e o transplante autógeno da FTCM, com valor total de células entre 6,92 x 106 a 4,91 x 107 e uma viabilidade de 82 a 97%, ou da FVE, com valor total de células entre 9,6 x 105 e 6,5 x 106 e uma viabilidade de 66 a 87%. Os animais foram submetidos à avaliação fotográfica, mensuração de suas feridas e biópsia aos 7, 14 e 21 dias de pós-operatório. Ao final do período de avaliação, os três grupos tratados apresentaram diferença estatística significativa da área da ferida em relação ao grupo controle e o grupo que recebeu a FVE do tecido adiposo apresentou o menor tempo de cicatrização da ferida.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissPMC.pdf: 6652992 bytes, checksum: ded1eb1eecf60367b1a7f8223eddbe63 (MD5) Previous issue date: 2004-02-18 / A lot of therapeutic techniques are used to accelerate and/or stimulate the tendineous repair process, among this techniques we have the low level laser therapy (LLLT). Therefore, this study had the aim of evaluating the effects of LLLT, in different wavelengths and different densities energy, on the tendineous repair process of calcaneal tendon of mice. In this study was used 48 male mice. 40 animals were submitted to the unilateral total tenotomy induced in the middle portion of the right calcaneal tendon. The tendons weren’t sutured after the surgery, just the skin around the surgery. The animals were randomized divided in 3 experimental groups (1, 2 and 3) and each group were divided in two subgroups. The subgroup A was treated with laser of 685 nm, 3 J/cm2, the subgroup B was treated with laser 685 nm, 10 J/cm2, the subgroup C was treated with 830 nm, 3 J/cm2 and the subgroup D with laser 830 nm, 10J/cm2; the subgroups E and F were classifieds as injured control/placebo treatment and non-injured control. It was used the lasers 685 nm and diode GaAlAs (830 nm), the parameters used in both lasers were 15 mW, continuos, power density of 5,4 W/cm2 and doses of 3 J/cm2 and 10 J/cm2. The applications were made punctually in each 24 hours, during 12 consecutive days, in just one point on the injured lesion. All animals were killed on the 13º day after the surgery and the tendons were extracted cirurgically and prepared for qualitative and quantitative analysis carry out through of polarization microscopy for obtain data of state of concentration, aggregation, orientation and deposition of collagen fibers in the site of tenotomy, was used measures of total birefringence take in polarization microscopy. After, it was obtained a picture of each tendon in the polarization microscopy for the qualitative histologic analysis of the tissue. The data analysis were made using the non-parametric test of multiple comparations in order to compare the data of all subgroups. It was found through of difference of OR (nm) values corresponding for the total birefringence that the molecules of collagen of tendons in process of tissue repair answered to the LLLT during the period of data collection, probabily through the increase in the fibroblastic proliferation and collagen synthesis. The tendinous repair of the subgroup A (685 nm, 3 J/cm2) showed the best result, considering the level of tissue organization, orientation, state of macromolecular aggregation and collagen deposition in the site of lesion. This subgroup was statistically different from the other subgroup, because it showed a higher OR value than the other subgroups treated with laser and the subgroup injured control/placebo treatment. We can conclude that, in the conditions our work was developed, there are different organizational answers in the injuried tendineous tissue and treated with LLLT. Therefore, there is a relationship between the improvement in the tendineous repair and the laser parameters used. In this case there were an acceleration of the tendineous repair when used the laser 685 nm and the dose of 3 J/cm2. / Várias técnicas terapêuticas são utilizadas para acelerar e/ou estimular o processo de reparo tendíneo, dentre elas a terapia laser de baixa potência (LLLT). Assim, este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos do laser de baixa potência, aplicado a diferentes comprimentos de onda e diferentes densidades de energia sobre o processo de reparação tendínea no tendão calcanear de rato. Foram utilizados 48 ratos machos, onde 40 animais foram lesados por uma tenotomia total unilateral feita por cisalhamento induzida na porção média do tendão calcanear direito, os tendões não foram suturados após a incisão cirúrgica, somente a pele ao redor da incisão sofreu sutura. Os animais foram divididos aleatoriamente em 3 grupos experimentais homogêneos (1, 2 e 3), sendo que cada grupo foi subdividido em 2 subgrupos; o grupo 1 foi dividido em subgrupo A que recebeu tratamento com laser de 685 nm, 3 J/cm2 e subgrupo B que recebeu tratamento laser 685 nm, 10 J/cm2; o grupo 2 foi dividido em subgrupo C que recebeu tratamento com laser de 830 nm, 3 J/cm2 e subgrupo D cujo tratamento foi com laser de 830 nm, 10J/cm2 e o grupo 3 que também foi dividido em subgrupo E (CL/PL) e F (CP) que foram classificados como controle lesado/tratamento placebo e controle padrão respectivamente. Foram utilizados os lasers de 685 nm e o diodo Ga-Al-As (830 nm), os parâmetros dosimétricos utilizados para ambos os lasers foram (15 mW, contínuo, densidade de potência de 5,4 W/cm2 e doses de 3 J/cm2 e 10 J/cm2), as aplicações foram feitas pontualmente a cada 24 horas, durante 12 dias consecutivos, irradiando-se transcutaneamente um único ponto sobre a região da lesão. Todos os animais foram sacrificados no 13º de P.O. e seus tendões foram retirados cirurgicamente e processados para a análise qualitativa e quantitativa realizadas por meio da microscopia de luz polarizada para se obter dados sobre o estado de concentração, agregação, orientação e deposição das fibras colágenas no local da tenotomia, foi utilizado medidas de birrefringência total tomadas no microscópio de luz polarizada. Posteriormente os tendões foram fotografados no microscópio de polarização para a análise histológica qualitativa do tecido. A análise estatística utilizada foi o teste não-paramétrico de comparações múltiplas para a comparação de todos os subgrupos dois a dois afim de detectar possíveis diferenças estatísticas. Os achados demonstraram por meio de diferenças de valores de OR (nm), correspondentes à birrefringência total, que as moléculas de colágeno presentes nos tendões em processo de reparação tecidual responderam a LLLT durante o período da coleta do material, provavelmente através do aumento da proliferação fibroblástica e síntese de colágeno. A reparação tendínea do subgrupo A tratado com laser de 685 nm e 3 J/cm2 apresentou melhores resultados considerando o nível de organização, orientação, estado de agregação macromolecular e deposição das fibras colágenas no local da lesão, diferindo-se estatisticamente dos demais subgrupos, uma vez que este subgrupo apresentou valor de OR considerado estatisticamente maior que o OR dos demais subgrupos tratados com laser e o subgrupo controle lesado/tratamento placebo. Com base nos nossos resultados podemos concluir, nas condições que o nosso trabalho foi desenvolvido, que há diferenças na resposta organizacional do tecido tendíneo lesado e estimulado pela LLLT, há portanto uma relação de melhora do reparo tendíneo com a combinação dos parâmetros laser utilizados; neste caso houve aceleração do processo de reparação tendínea quando utilizou-se o laser de 685 nm e 3 J/cm2.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-04-20Bitstream added on 2014-06-13T19:49:27Z : No. of bitstreams: 1 rodrigues_rf_me_rcla.pdf: 5396854 bytes, checksum: 53dc5df0dd553ffb8f11bf6074d163cc (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Quando um tecido ou órgão é alvo de algum tipo de injúria, dá-se início ao processo de inflamação tecidual. As reações celulares e humorais que tomam parte desta reação são evocadas a fim de exterminar ou neutralizar o agente infeccioso e seus produtos, permitindo que o reparo tecidual se dê da melhor forma possível. Contudo, algumas vezes o resultado desta ação pode ser prejudicial, levando ao comprometimento ou a perda das funções do tecido ou órgão em questão, com conseqüências que podem afetar a saúde do indivíduo como um todo. Em contrapartida, a atividade física moderada tem sido apontada como um grande aliado no combate à várias doenças, potencializando a ação do sistema imune e reduzindo os possíveis danos e minimizando os efeitos nocivos das respostas inflamatórias. Desta forma, nos propomos a verificar os efeitos da atividade física moderada no processo inflamatório e de reparação tecidual, comparando 10 ratos Wistar que realizaram exercícios físicos moderados com 10 sedentários, por meio da análise numérica (microscopia de luz) e ultra-estrutural (microscopia eletrônica de transmissão) de mastócitos, macrófagos e fibroblastos, células muito importantes para tais fenômenos. O modelo de estudo escolhido foi o implante subcutâneo de esponjas de PVC, que mimetiza situações clínicas importantes como, por exemplo, implantes de marcapasso. Nossos resultados indicam que as células do grupo treinado respondem de maneira mais ágil (precoce) e efetiva à injúria, que o número de cada tipo celular foi significativamente maior neste grupo e ainda que, para quaisquer dos grupos, os tipos celulares em estudo agem estreitamente interrelacionados... / When a tissue or organ is target of some offense, it feels beginning to the process of tissue inflammation. Cellular and humoral reactions that participate of this reaction are evoked to exterminate or to neutralize the infectious agent and your products, allowing the tissue repair to feel in the best possible way. However, the result of this action can sometimes be harmful, taking to the compromising or the loss of the functions of the tissue or organ in subject, with consequences that can affect the individual's health as a completely. On the other hand, the moderate physical activity has been pointed as a great ally in the combat to several diseases, improving the action of the immune system and reducing the possible damages and minimizing the noxious effects of the inflammatory answers. Thus, we intend to verify the effects of the moderate physical activity in the inflammatory and tissue repair process, comparing 10 Wistar rats that had carried through moderate physical exercises with 10 sedentary ones, through the numeric analysis (light microscopy) and ultrastructural (transmission electronic microscopy) of mast cells, macrophages and fibroblasts, which are very important cells for such phenomena. The model of chosen study was the subcutaneous implantation of PVC sponges, that simulates important clinical situations as, for instance, implant of pacemaker. Our results indicate that the cells of the trained group answer in a more agile (precocious) and effective way to the offense, that the number of each cellular type was significantly larger in this group and although, for any of the groups, the cellular types in study act narrowly interrelated. Therefore, we ended in our work that the moderate physical activity can contribute positive and significantly for the inflammation and tissue repair process, making possible that the homeostasis is reestablished more easily and, like this, avoiding larger damages to the individual.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:02:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6801.pdf: 11048203 bytes, checksum: 8a72f69d416355a991979721e7b4ee7c (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Financiadora de Estudos e Projetos / This study aimed to evaluate the effects of low level laser therapy (LLLT) in the expression genes related to bone defect repair in tibia in rats. For this, one hundred male Wistar rats (3 months ± 250 g) were submitted to bilateral tibial defects and randomly distributed in two experimental groups (n=50). In the first study the effects of the LLLT in the expression of inflammatory and angiogenic genes in bone repair of rats were investigated in three groups: bone defect group (CG) and bone defect treated with laser 830nm (GL). Laser irradiation started immediately after the surgery and it was performed for two (36 h), three (3 days) or seven (7 days) sessions, with an interval of 24 hours between sessions. The application was punctual transcutaneously above the site of the injury. Rats were euthanized individually by carbon dioxide asphyxia in different set points (36 hours, 3 days and 7 days after surgery). Histopathological analysis showed that LLLT was able to modulate the inflammatory process in the area of the bone defect and to produce an earlier deposition of granulation tissue and newly formed bone. Microarray analysis demonstrated that LLLT produced an up-regulation of genes related to the inflammatory processes (MMD, PTGIR, PTGS2, Ptger2, IL1, 1IL6, IL8, IL18) and angiogenic genes (FGF14, FGF2, ANGPT2, ANGPT4 and PDGFD) at 36 h and 3 days, followed by a decrease of the gene expression on day 7. Immunohistochemical analysis revealed that treated animals presented a higher expression of COX-2 at 36 h after the surgery and an increased VEGF expression on days 3 and 7. Our findings indicate that LLLT was efficient on accelerating the development of newly formed bone probably by modulating the inflammatory and angiogenic gene expression and COX2 and VEGF immunoexpression during the initial phase of bone healing. In the second study, aspects related to bone cell stimulation and newly formed bone were evaluated in five groups: CG and LG. The laser treatment started immediately after the surgery to produce the bone defects and there have been 1, 2, 3, 5 e 7 sessions with an interval of 24 hours. Rats were euthanized in different set points (12 hours, 36 hours, 3 days, 5 days and 7 days after surgery). Histopathology revealed that treated animals produced increased amount of newly formed bone at the site of the injury. Also, microarray analysis evidenced that LLLT produced a significantly increase in the expression TGF-β, BMP, FGF, RUNX-2 and BMP, which could have stimulated osteoblast proliferation and differentiation, which may be related to improving the deposition of newly formed bone at the site of the injury. Thus, it is possible to concluded that LLLT improved bone healing by producing a significant increase in the expression of osteogenic genes. Finally, we concluded that LLLT was effective to stimulate newly formed bone by active expression of inflammatory, angiogenic and osteogenic genes and also stimulate immunoexpression of proteins related to the initial phases of bone healing in tibial defects in rats. / Este trabalho teve como objetivo verificar os efeitos da terapia laser de baixa intensidade (LLLT) na expressão de genes relacionados à regeneração óssea de defeitos tibiais em ratos. Para isso, 100 ratos machos Wistar (3 meses de idade ± 250 gramas) foram submetidos a defeitos tibiais bilaterais e distribuídos aleatoriamente em 2 grupos experimentais (n=50). No primeiro estudo, foram avaliados os efeitos da LLLT na expressão de genes inflamatórios e angiogênicos no reparo ósseo de ratos, a partir de três grupos experimentais: grupo controle com defeito ósseo e sem tratamento (GC); grupo defeito ósseo tratado com laser 830 nm (GL). Os animais foram submetidos a irradiação laser em um único ponto sobre o defeito ósseo por 2, 3 e 7 sessões de tratamento, a cada 24 horas. A eutanásia dos animais aconteceu em diferentes períodos (36 horas, 3 dias e 7 dias após a cirurgia). A análise histológica revelou que a LLLT foi capaz de modular o processo inflamatório e induzir a deposição de tecido de granulação e osso recém formado na região do defeito ósseo. A análise com microarray demonstrou que a LLLT estimulou a expressão de genes relacionados com o processo inflamatório (MMD, PTGIR, PTGS2, Ptger2, IL1, 1IL6, IL8, IL18) e genes angiogênicos (FGF14, FGF2, ANGPT2, ANGPT4 e PDGFD) após 36 horas e 3 dias, seguido pela a diminuição da expressão gênica no 7° dia. A análise imunohistoquímica revelou que os animais tratados apresentaram maior imunoexpressão de COX-2 após 36 horas e aumentou a imunoexpressão de VEGF após 3 e 7 dias. Assim, os achados indicam que a LLLT foi eficiente em acelerar a deposição de tecido ósseo neoformado, provavelmente através da modulação de genes inflamatórios e angiogênicos e a imunoexpressão de COX-2 e VEGF durante a fase inicial de reparo ósseo. No segundo estudo, foram avaliadas os aspectos relacionados a estimulação de células ósseas e a neoformação do tecido ósseo, a partir de cinco grupos experimentais: GC e GL. O tratamento laser iniciou-se imediatamente após a cirurgia dos defeitos ósseos e realizaram-se 1, 2, 3, 5 e 7 sessões, com um intervalo de 24 horas entre elas. A eutanásia dos animais aconteceu em diferentes períodos (12 horas, 36 horas, 3 dias, 5 dias e 7 dias após a cirurgia) As análises histológica e morfométrica revelaram que o GL apresentou aumento de osso neoformado no defeito ósseo após 3, 5 e 7 dias. A análise com microarray evidenciou que a LLLT aumentou significantemente a expressão de TGF-β, BMP, FGF, RUNX-2 e OC que podem ter estimulado a proliferação e diferenciação dos osteobastos e consequentemente aumentado a deposição de osso neoformado. Dessa forma, pode-se concluir que a LLLT aumentou a expressão de genes osteogênicos, o que culminou na aceleração do reparo ósseo. Finalmente, podemos concluir que a LLLT foi eficaz em estimular a deposição óssea, ativando a expressão de genes inflamatórios, angiogênicos e osteogênicos e ainda, estimulando a imunoexpressão de proteínas relacionados a fase iniciais do reparo ósseo em defeitos tibiais em ratos.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AdilsonST_DISSERT.pdf: 1536537 bytes, checksum: ea209d9f1b9abb20e4a9c39ef312c31d (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Sugarcane has an importance in Brazil due to sugar and biofuel production. Considering this aspect, there is basic research being done in order to understand its physiology to improve production. The aim of this research is the Base Excision Repair pathway, in special the enzyme MUTM DNA-glycosylase (formamidopyrimidine) which recognizes oxidized guanine in DNA. The sugarcane scMUTM genes were analyzed using four BACs (Bacterial Artificial Chromosome) from a sugarcane genomic library from R570 cultivar. The resulted showed the presence in the region that had homology to scMUTM the presence of transposable elements. Comparing the similarity, it was observed a highest similarity to Sorghum bicolor sequence, both nucleotide and peptide sequences. Furthermore, promoter regions from MUTM genes in some grass showed different cis-regulatory elements, among which, most were related to oxidative stress, suggesting a gene regulation by oxidative stress / A cana-de-a??car ? uma das principais culturas brasileiras e importante, principalmente, pela produ??o de a??car e biocombust?vel. Por isso, manter a qualidade das cultivares desta esp?cie tornou-se alvo das pesquisas envolvendo gen?tica e bioqu?mica moleculares. Um dos objetivos destas pesquisas ? descobrir informa??es ?teis sobre o material gen?tico que as cultivares da cana-de-a??car possuem, para utiliz?-las como ferramentas no melhoramento contra intemp?ries que afetam sua produ??o, muitas vezes, de forma dr?stica. O foco deste trabalho ? a via de reparo de DNA conhecida por Reparo por Excis?o de Base, mais precisamente, a enzima DNA-glicosilase MUTM (formamidopirimidina-DNA-glicosilase), a qual reconhece e repara guaninas oxidadas no DNA. A caracteriza??o dos genes MUTM da cana-de-a??car foi realizada a partir das an?lises de quatro BACs (Bacterial Artificial Chromosome) de uma biblioteca gen?mica da cultivar R570. Os resultados obtidos dos alinhamentos mostraram a presen?a marcante de elementos de transposi??o. Al?m disso, foi verificado que os genes MUTM foram altamente similares aos de Sorghum bicolor, tanto em sequ?ncias nucleot?dicas e pept?dicas, como na estrutura g?nica. Foi analisado tamb?m que as regi?es promotoras de genes MUTM em algumas gram?neas apresentam v?rios elementos reguladores de express?o, associados com o estresse oxidativo, indicando uma regula??o por estresse oxidativo

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-07-11T17:13:30Z No. of bitstreams: 1 LeorikPereiraDaSilva_DISSERT.pdf: 1755248 bytes, checksum: 7c7295f3b5a7cf31b5ae4aa23ab61afd (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-07-14T22:02:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 LeorikPereiraDaSilva_DISSERT.pdf: 1755248 bytes, checksum: 7c7295f3b5a7cf31b5ae4aa23ab61afd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-14T22:02:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LeorikPereiraDaSilva_DISSERT.pdf: 1755248 bytes, checksum: 7c7295f3b5a7cf31b5ae4aa23ab61afd (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Introdu??o: A endonuclease apur?nica/apurimid?nica (APE-1) ? uma prote?na essencial para a via do reparo por excis?o de bases (BER) do DNA, al?m de regula??o de atividades redox. A capacidade de c?lulas malignas em reconhecer e reparar danos no DNA ? um mecanismo importante para sobreviv?ncia tumoral, e estudos recentes sugerem que a superexpress?o da APE-1 pode se relacionar com o pobre progn?stico em alguns tumores. Objetivo: Analisar a imunoexpress?o da APE-1 em Adenomas Pleom?rficos (AP) e Carcinomas Ex-Adenomas Pleom?rficos (CaExAP) de gl?ndulas salivares. Materiais e M?todos: Foram selecionados 49 tumores fixados em formol e inclu?dos em parafina (33 AP e 16 CaExAP) que foram submetidos a estudo imuno-histoqu?mico pela t?cnica da imunoperoxidase. A imunoexpress?o da APE-1 foi avaliada de forma quantitativa pelo percentual de c?lulas imunopositivas. Para an?lise estat?stica foi adotado n?vel de signific?ncia de 5% (p ? 0,05). Resultados: Todos os casos de AP e CaExAP (n=49) foram positivos para APE-1, no entanto, houve maior express?o em CaExAP havendo diferen?a estatisticamente relevante (p<0,001). N?o foi encontrada associa??o da express?o da APE-1 entre tumores de gl?ndula salivar maior ou menor, entretanto, em AP n?o encapsulados (Mediana de express?o= 54,2%) houve maior express?o quando comparados a tumores encapsulados (p=0,02). A superexpress?o da APE-1 foi constatada principalmente em casos de CaExAP com met?stase linfonodal (Mediana de express?o= 90,3% - p=0,002) e padr?o invasivo (Mediana de express?o= 89,9% - p=0,003) quando comparados aos casos sem met?stase e intracapsulares. Conclus?o: Este estudo sugere que a APE-1 encontra-se desregulada nos tumores estudados. A maior express?o da APE-1 est? associada com a aus?ncia de c?psula completa em AP e a superexpress?o est? relacionada com o comportamento mais agressivo do CaExAP. / Introduction: Apurinic/Apyrimidinic Endonuclease 1 (APE-1) is an essential protein for DNA base excision repair (BER) pathway and regulation of redox activities. The ability of malignant cells to recognize and repair DNA damage is an important mechanism for tumor survival, and recent studies suggest that APE-1 overexpression is related to poor prognosis in some tumors. Purpose: To analyze the immunoreactivity of APE-1 in Pleomorphic Adenomas (PA) and Carcinomas Ex Pleomorphic Adenomas (CaExPA) of salivary glands. Materials and Methods: A total of 49 tumors fixed in formalin and embedded in paraffin (33 PA and 16 CaExPA) underwent immunohistochemical study by the immunoperoxidase technique. APE-1 immunoreactivity was evaluated quantitatively by the percentage of immunopositive cells. For statistical analysis a significance level of 5% (p? 0.05) was adopted. Results: All cases of PA and CaExPA (n=49) were positive for APE-1, however, there was a higher expression in CaExPA, with statistically significant difference (p<0.001). There was no association between APE-1 expression and tumors of major or minor salivary gland, however, not encapsulated PA (median expression = 54.2%) showed higher expression when compared to encapsulated tumors (p=0.02). APE-1 overexpression was found mainly in cases of CaExAP with lymph node metastasis (median expression = 90.3% - p=0.002) and invasive pattern (median expression = 89.9% - p=0.003), when compared to cases without metastasis and intracapsular pattern. Conclusion: This study suggests that APE-1 is deregulated in the studied tumors. The increased expression of APE-1 is associated with the absence of complete capsule in PA and it is associated with more aggressive behavior in CaExPA.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A aplicação tópica de doadores de óxido nítrico é conhecida pelos seus efeitos benéficos no reparo tecidual cutâneo. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da associação de biomateriais com doadores de óxido nítrico no reparo tecidual cutâneo de camundongos. Camundongos swiss machos foram submetidos a lesões excisionais por punch de biópsia de 8 mm no dorso. Os animais foram separados em 4 grupos (n=6 em cada grupo) de acordo com a aplicação do curativo de polivinil álcool e hidrogel sobre a lesão de punch: a) grupo polivinil álcool com grupos tiol e Pluronic F-127 (PVA-SH/F127) - tratado com hidrogel sem S- nitrosoglutationa (GSNO) e filme sem óxido nítrico; b) grupo polivinil álcool S-nitrosado (PVA-SNO/F127-GSNO) - tratado com hidrogel contendo GSNO e filme com óxido nítrico; c) grupo PVA-SNO - tratado apenas com filme óxido nítrico e d) grupo PVA-SNO/ F127 - tratado com hidrogel sem GSNO e filme com óxido nítrico. Os animais foram tratados por 7 dias consecutivos com aplicação diária de curativos com seus respectivos biomateriais. Após 7 dias de tratamento, foram retirados os curativos e as lesões foram deixadas cicatrizar por segunda intenção. O grupo tratado com filme de PVA-SNO (d) associado ao hidrogel F127, comparado com os demais grupos descritos acima, apresentou melhora no reparo tecidual, melhora da contração da lesão, diminuição do gap epitelial e densidade celular, aceleração da fase inflamatória, aumento da diferenciação miofibroblástica e aumento da expressão de colágeno do tipo III (p<0,05, ao menos). Com base nesses dados, a combinação de filmes PVA liberadores de óxido nítrico com F-127 pode representar uma nova abordagem para o tratamento de lesões cutâneas. / Topical application of nitric oxide donors is known for its beneficial effects on skin tissue repair. The objective of this study was to evaluate the effects of biomaterials association with nitric oxide donors in skin tissue repair in mice. Males swiss mice underwent excisional lesion 8 mm biopsy punch on the back. The animals were separated in 4 groups (n=6 in each group) in according with dressing application of polyvinyl alcohol and hydrogel on punch lesion: a) poly (vynil alcohol) with thiol groups and Pluronic F-127 hydrogels (PVA-SH/F127) group - treated with hydrogel without S- nitrosoglutathione (GSNO) and film without nitric oxide; b) poly(vinyl alcohol) S-nitrosated (PVA-SNO/F127-GSNO) group - treated with hydrogel with GSNO and film with nitric oxide; c) PVA-SNO group - treated only with film containing nitric oxide and d) PVA-SNO/ F127 group - treated with hydrogel without GSNO and film with nitric oxide. The animals were treated for 7 consecutive days with daily application of dressings to the respective biomaterial. After 7 days of treatment, the dressings were removed and the lesions were allowed to heal by second intention. The group treated with PVA-SNO film associated with the hydrogel F127 (d), compared with the other groups described above, showed improvement in tissue repair, enhancing wound contraction, decreased wound gap and cellular density, acceleration of the inflammatory phase, increased myofibroblast differentiation and increased expression of collagen type III (p<0,05, at least). Based on these data, the combination of PVA films releasing nitric oxide with F-127 may represent a new approach treatment of cutaneous lesions.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RitaCBS.pdf: 230650 bytes, checksum: bb819a094849de9d25290b1c27ab5346 (MD5) Previous issue date: 2009-02-27 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The total number of prokaryotic cells on Earth has been estimated at 4 to 6x1030 and only about 1% of microorganisms present in the environment can be cultivated by standard techniques of cultivation and plating. Therefore, it is a huge biological and genetic pool that can be exploited, for the identification and characterization of genes with biotechnological potential. Within this perspective, the metagenomics approach was applied in this work. Functional screening methods were performed aiming to identify new genes related to DNA repair and / or oxidative stress resistance, hydrocarbon degradation and hydrolytic activities (lipase, amylase and protease). Metagenomic libraries were built utilizing DNA extracted from soil samples collected in Jo?o C?mara RN. The libraries were analyzed functionally using specific substrate containing solid medium (hydrolytic activity), supplemented with H2O2 (DNA repair and / or resistance to oxidative stress) and liquid medium supplemented with light Arabian oil (activity, degradation of hydrocarbons). After confirmation of activity and exclusion of false-positive results, 49 clones were obtained, being 2 positive for amylase activity, 22 resistant to oxidative stress generated by H2O2 and 25 clones active for hydrocarbons degradation. Analysis of the sequences showed hypothetical proteins, dienelactona hydrolase, DNA polymerase, acetyltransferase, phosphotransferase, methyltransferase, endonucleases, among other proteins. The sequence data obtained matched with the functions tested, highlighting the success of metagenomics approaches combined with functional screening methods, leading to very promising results / O n?mero total de c?lulas procari?ticas na Terra tem sido estimado em 4 a 6x1030 sendo que apenas cerca de 1% dos microrganismos presentes no meio ambiente pode ser cultivado, atrav?s de t?cnicas padr?o de cultivo e plaqueamento, se apresentando, portanto, como um enorme pool biol?gico e gen?tico que pode ser explorado, visando a identifica??o e a caracteriza??o de genes com potencial biotecnol?gico. Dentro desta perspectiva, a abordagem metagen?mica foi aplicada neste trabalho a partir de metodologias de sele??o funcional visando ? identifica??o de novos genes relacionados ao reparo de DNA e/ou resist?ncia a estresse oxidativo, genes relacionados com atividade de degrada??o de hidrocarbonetos, e atividade hidrol?tica (lipase, amilase e protease). Com esse objetivo, uma biblioteca metagen?mica, constru?da a partir de amostras de solo coletadas no munic?pio de Jo?o C?mara RN, foi analisada funcionalmente utilizando meios s?lidos contendo substratos espec?ficos (atividade hidrol?tica), suplementados com H2O2 (reparo de DNA e/ou resist?ncia a estresse oxidativo) e meio liquido suplementado com ?leo ?rabe leve (atividade de degrada??o de hidrocarbonetos). Ap?s confirma??o da atividade e exclus?o de falsos-positivos foram obtidos 49 clones, sendo 2 positivos para atividade amilase, 22 resistentes ao estresse oxidativo gerado por H2O2 e 25 com atividade de degrada??o de hidrocarbonetos, cuja an?lise das seq??ncias revelou,al?m de prote?nas hipot?ticas, dienolactona hidrolase, DNA polimerases, acetiltransferase, fosfotransferase, metiltransferase, endonucleases entre outras, cuja coer?ncia com as fun??es ensaiadas, ressalta o sucesso da abordagem metagen?mica aliada a metodologias funcionais e, os resultados obtidos bastante promissores. PALAVRAS CHAVE: Metagenoma, Biotecnologia

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:18:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 VivianeKM.pdf: 34009 bytes, checksum: 80f5f4645fd6e0b6573613b53e2fcf67 (MD5) Previous issue date: 2007-02-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Plants are organisms sessile and because of this they are susceptible to genotoxic effects due to environmental exposure such as light [including ultraviolet (UV)], heat, drought and chemicals agents. Therefore, there are differents pathways in order to detect a lesion and correct. These pathways are not well known in plants. The MutM/Fpg protein is a DNA glycosylase that is responsible for detect and correct oxidative lesions. In the sugarcane genome, it was found two possible cDNAs that had homology to this protein: scMUTM1 and scMUTM2. The aim of this work was to characterize the role of these cDNAs in plants. In order to do this, the expression level after oxidative stress was evaluated by semiquantitative RT-PCR. Another point analyzed in order to obtain the full-length gene, it was to use a sugarcane genomic library that was hybridized with both cDNAs as a probe. It was found two clones that will bought and sequenced. The promoter region was also cloned. It was obtained sequences only for scMUTM2 promoter region. The sequences obtained were divided into six groups. It was found regulatory motifs such as TATA-box, CAAT-box, oxidative stress element response and regulatory regions that response to light. The other point analyzed was to characterize the N-terminal region by PCR constructs. These constructs have deletions at 5 region. These sequences were introduce into Escherichia coli wild type strain (CC104) and double mutant (CC104mutMmutY). The results showed that proteins with deletions of scMUTM1 N-terminal region were able to complement the Fpg and MutY-glycosylase deficiency in CC104 mutMmutY reducing the spontaneous mutation frequency / As plantas s?o organismos particularmente suscept?veis aos efeitos genot?xicos devido a sua constante exposi??o a agentes do meio ambiente tais como a luz [incluindo a ultravioleta (UV)], o calor, a seca e diferentes subst?ncias qu?micas. Entretanto, existem diferentes mecanismos de reparo para detectar estas les?es e corrigi-las. Entretanto, em plantas estas vias s?o pouco compreendidas. Uma das vias ? a por excis?o de bases (BER). A prote?na MUTM/FPG ? uma DNA glicosilase da via BER que corrige danos oxidativos. No genoma da cana-de-a??car foram encontrados dois poss?veis cDNAs que possuem homologia de seq??ncia a esta prote?na: scMUTM1 e scMUTM2. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o papel destes genes em plantas. Para isto, o n?vel de express?o dos genes ap?s estresse oxidativo foi avaliado atrav?s de RT-PCR semiquantitativo. Para obter a sequ?ncia completa dos gene, uma biblioteca de DNA gen?mico de cana-de-a??car foi hibridizada com sondas radioativas para ambos cDNAs, encontrando-se dois clones em potencial. A regi?o promotora foi clonada, seq?enciada e analisada. Dentro das seq??ncias obtidas para a regi?o promotora de scMUTM2, estas podem ser divididas em seis grupos. Os motivos regulat?rios foram identificados, tais como o TATA-box, CAAT-box, elementos de resposta ao estresse oxidativo e elementos de resposta ? luz. Um outro ponto de interesse neste trabalho foi a caracteriza??o da regi?o N-terminal da prote?na scMUTM1. Para isto, foram realizadas algumas constru??es via PCR. Estas constru??es foram posteriormente introduzidas em cepas selvagem (CC104) e duplo mutante (CC104mutMmutY) de Escherichia coli e foram realizados ensaios de complementa??o de modo a avaliar a import?ncia de cada regi?o para o reconhecimento e corre??o das les?es. Os resultados mostraram que as prote?nas com dele??es na por??o N-terminal de scMUTM1 s?o capazes de complementar a defici?ncia de Fpg and MutY-glicosilase na bact?ria CC104 mutMmutY reduzindo assim a freq??ncia de muta??o espont?nea

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-02-15T11:17:49Z No. of bitstreams: 1 AllanaAzevedoDoNascimento_DISSERT.pdf: 3970437 bytes, checksum: 117bfe2f45af82aa1ce79c2ec7c811e1 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-02-16T11:03:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AllanaAzevedoDoNascimento_DISSERT.pdf: 3970437 bytes, checksum: 117bfe2f45af82aa1ce79c2ec7c811e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-16T11:03:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AllanaAzevedoDoNascimento_DISSERT.pdf: 3970437 bytes, checksum: 117bfe2f45af82aa1ce79c2ec7c811e1 (MD5) Previous issue date: 2017-10-16 / As t?cnicas de auto-reparo em resinas ep?xi v?m sendo desenvolvidas buscando aumentar a vida ?til e reduzir os custos associados ? manuten??o desses materiais durante o servi?o. A adi??o de termopl?sticos ? matriz termofixa produzindo resinas repar?veis aparece como t?cnica de reparo promissora. Neste trabalho, o termopl?stico poli (etileno-co-?cido-metacr?lico) (EMAA) foi adicionado no plano m?dio de laminados comp?sitos carbono-ep?xi para fabrica??o de um sistema de reparo. Foram fabricadas placas com 5%, 10% e 15% de EMAA em massa de resina do prepreg. Ensaios de resist?ncia ao cisalhamento interlaminar (ILSS), an?lise din?mico mec?nica (DMA), espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR), microscopia eletr?nica de varredura (MEV) e microscopia eletr?nica de varredura com fonte de emiss?o de campo (MEV-FEG) foram conduzidos para avaliar o efeito da adi??o desse termopl?stico ao comp?sito e seu comportamento antes e ap?s o reparo. As amostras reparadas n?o apresentaram aumento na resist?ncia ao cisalhamento interlaminar (ILSS) ap?s o reparo. Entretanto, para maiores porcentagens de EMAA, houve redu??o dessa propriedade, al?m de redu??o de m?dulo de elasticidade e da temperatura de transi??o v?trea (Tg), em rela??o aos valores apresentados pelo comp?sito puro. Imagens de MEV confirmaram a forte ades?o entre o EMAA e a resina ep?xi, formando uma camada adesiva que impediu a forma??o de delamina??es no plano m?dio do laminado. / Self-healing techniques in epoxy resins have been developed to improve the durability and reduce costs associated with repairs of these materials during service. The addition of thermoplastics into the thermoset matrix producing mendable resins appears as a promising self-healing technique. In this study, poly(ethylene-co-methacrylic acid) (EMAA) was added in the mid-plane of carbon fiber-epoxy composites laminates to produce a self-healing system. Plates were manufactured with addition of 5%, 10% and 15% of EMAA as related to the resin weight of prepreg. Interlaminar shear strength test (ILSS), dynamic mechanical analysis (DMA), Fourier-transform infrared (FTIR) spectroscopy, scanning electron microscopy (SEM) and field-emission gun scanning electron microcopy (FEG-SEM) were employed in order to evaluate the effect of the addition of the thermoplastic to the composite and its behavior before and after a healing cycle. The healed samples did not show an increase in interlaminar shear strength (ILSS) after healing. However, for higher percentages of EMAA there was a reduction of this property, besides a reduction of Young?s modulus and glass transition temperature (Tg), in relation to the values presented by the unmodified composite. SEM images confirmed the strong adhesion between EMAA and epoxy resin, which produced an adhesive layer that prevented delamination in the mid-plane of the laminate.