Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2009-11-05T18:37:31Z No. of bitstreams: 1 2008_biancadamianimarquessilva.pdf: 153586 bytes, checksum: 747a4cf93d980464031d970148d5be7b (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2009-12-07T16:17:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_biancadamianimarquessilva.pdf: 153586 bytes, checksum: 747a4cf93d980464031d970148d5be7b (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-07T16:17:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_biancadamianimarquessilva.pdf: 153586 bytes, checksum: 747a4cf93d980464031d970148d5be7b (MD5) Previous issue date: 2008-02 / Este estudo teve por objetivo comparar o uso de PGF2 à associação de progesterona (P4) com gonadotrofina coriônica eqüina (eCG) na sincronização do estro em ovelhas da raça Santa Inês. Foram utilizadas 38 fêmeas ovinas divididas em dois grupos aleatoriamente e submetidas a dois protocolos de sincronização de estro: protocolo PGF2 (duas doses de 0,530 mg de PGF2 com nove dias de intervalo) e protocolo P4+eCG (pessário intravaginal de acetato de medroxiprogesterona por 12 dias e no momento da remoção do dispositivo aplicação de 250 UI de eCG). As ovelhas foram submetidas ao “cross-over”, com intervalo de dois ciclos estrais. Procedeu-se uma ultra-sonografia transretal no último dia do protocolo para avaliar diâmetro do maior e do segundo maior folículo e foi coletado sangue no dia sete do ciclo estral para avaliação da concentração sérica de P4. Exame laparoscópico foi realizado no dia 11 após o fim dos protocolos para contagem de corpos lúteos. Para os parâmetros taxa de sincronização, diâmetro do maior e do segundo maior folículo, período do final do protocolo ao estro e taxa de ovulação não foram observadas diferenças entre os protocolos. Foi observado que o protocolo P4+eCG produziu concentrações séricas de P4 maiores do que o protocolo PGF2 (3,9 e 2,8 ng/mL, respectivamente, P<0,05). Nas condições do presente estudo, embora o protocolo P4+eCG tenha apresentado superioridade em relação à concentração sérica de P4, o protocolo PGF2 foi tão eficiente em sincronizar o estro quanto o P4+eCG. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The aim of this study was to compare two protocols of estrus synchronization in Santa Inês ewes. Thirty-eight ewes were randomly divided into two groups and treated with two protocols of estrus synchronization: protocol PGF2 (two doses of 0.530 mg of PGF2, nine days apart) and protocol P4+eCG (intravaginal sponge impregnated with medroxyprogesterone acetate, for 12 days and then an injection of 250 IU of eCG). The experiment was in a cross-over design, two estrous cycles apart. On the final day of protocol a transrectal ultrasound examination was carried out to measure the size of the largest and second largest ovarian follicles and on day 7 of estrous cycle blood was collected to measure serum P4 concentration. Laparoscopy was carried out on day 11 after the end of protocols to count corpora lutea. Synchronization rate, size of largest and second largest ovarian follicles, hours between the end of the protocol to estrus and ovulation rate did not differ between protocols. Ewes synchronized with P4+eCG had greater serum P4 concentrations than ewes synchronized with PGF2 (3.9 and 2.8 ng/mL, respectively, P<0.05). Based on the results, it may be concluded that although the protocol P4+eCG was superior in inducing higher serum concentration of P4, the protocol PGF2 was equivalent regarding estrus synchronization.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Micropartículas desarrolladas a partir de materiales poliméricos han sido ampliamente investigados en los últimos años por diferentes protocolos de fabricación como transportadores de agentes terapéuticos (biomoléculas). En este estudio micropartículas de quitosano se prepararon usando una modificación del método de coacervación de van der Lubben, quien utiliza sulfato de sodio como agente entrecruzante. Albúmina sérica bovina (BSA) se uso como proteína modelo, siendo encapsulada por el método de incubación en las micropartículas de quitosano. Las micropartículas fueron caracterizadas por su tamaño y morfología, y se determinaron los parámetros de eficiencia de encapsulación (EE), capacidad de carga (CC) y se estudió la cinética de liberación in vitro de BSA usando una solución tampón fosfato (PBS) 5 mM de pH 7,4 a 37 ºC. Se obtuvieron micropartículas esféricas con una superficie lisa y tamaños que fluctuaron entre los 5 y 14 µm, tanto para las micropartículas vacías como las cargadas con BSA, el cual fue independiente de la concentración de BSA. Nuestros resultados mostraron que una mayor concentración de proteínas presentó mayores valores de EE y de CC. Los patrones de liberación de la proteína desde las micropartículas cargadas con BSA a diferentes concentraciones mostraron mayores valores de liberación de ésta a mayores concentraciones de BSA. En conclusión, este nuevo protocolo resultó ser adecuado en la formación de micropartículas de quitosano con valores de parámetros de liberación in vitro adecuados de bioméculas / Proyecto Fondecyt No. 1080185

Made available in DSpace on 2012-09-05T18:23:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 273.pdf: 735803 bytes, checksum: f3b584790347827b7b8e5f85f723595f (MD5) Previous issue date: 2006 / As controvérsias em torno da indicação terapêutica da albumina humana (AH) e o impacto nos custos hospitalares pelo uso irracional do produto, motivaram nas três últimas décadas, a realização de estudos a respeito do problema em diversos países. No Brasil, as iniciativas de racionalização de uso da AH são escassas e pouco difundidas. Esta tese é apresentada em três artigos que abordam os aspectos clínicos e epidemiológicos do uso da AH em hospitais do Rio de Janeiro, utilizando dados primários e secundários. (...)

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:24:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1066_1.pdf: 3918967 bytes, checksum: ae17612cf0dabcaa76051e66522c7c80 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A pouco mais de uma década surgiu uma nova classe de marcadores fluorescentes baseados em nanocristais de semicondutores do tipo II-VI conhecidos como pontos quânticos (quantum dots). Neste trabalho, apresentam-se metodologias de obtenção de pontos quânticos fluorescentes de semicondutores do tipo core/shell de ZnSe/ZnS e CdS/Cd(OH)2 através de técnicas de química coloidal em meio aquoso. O tamanho médio dos nanocristais (ZnSe = 3 nm e CdS = 6 nm) foi estimado utilizando-se as técnicas de espectroscopia de absorção na região do ultravioleta-visível, microscopia eletrônica de transmissão convencional e pela técnica de difração de Raios-X. A caracterização das propriedades ópticas foi realizada empregando-se espectroscopia de emissão e excitação eletrônica. Os sistemas apresentam alta intensidade de luminescência com máximos observados na região do azul para o ZnSe/ZnS e do verde para o CdS/Cd(OH)2. Para otimização de sua emissão os pontos quânticos de ZnSe/ZnS foram submetidos a processo de fotoativação, com radiação ultravioleta. Ambos sistemas foram bioconjugados à proteína albumina sérica bovina (BSA), empregando-se agentes de comprimento zero (carbodiimidas) para os pontos quânticos de ZnSe/ZnS e o crosslinker glutaraldeído para o CdS/Cd(OH)2. Foram desenvolvidos e avaliados protocolos de bioconjugação para os dois pontos quânticos, a fim de se estabelecer os mais eficazes. Os bioconjugados foram caracterizados através de técnicas espectroscópicas e confirmados pela detecção quantitativa da intensidade de fluorescência, empregando-se microplacas de poliestireno como substrato. Foi evidenciado por meio da técnica de dicroísmo circular, que a estrutura secundária da proteína foi preservada. Os espectros de luz polarizada da biomolécula conjugada aos pontos quânticos de CdS/Cd(OH)2, apresentaram alterações mínimas em relação ao padrão não conjugado, enquanto que os conjugados aos pontos quânticos de ZnSe/ZnS exibiram alterações estruturais significativas. Os bioconjugados obtidos podem ser considerados protótipos na preparação de imunocomplexos baseados em ligantes bioespecíficos, visando o desenvolvimento de imunoensaios heterogêneos para o diagnóstico sorológico de doenças.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-05-07T15:33:12Z No. of bitstreams: 1 Victor Jesus Huaringa Payano.pdf: 974550 bytes, checksum: 5f7a3b98e7a421edf891731a78c7236b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T15:33:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Victor Jesus Huaringa Payano.pdf: 974550 bytes, checksum: 5f7a3b98e7a421edf891731a78c7236b (MD5) Previous issue date: 2018-04-19 / Canine Visceral Leishmaniose (CVL) is an anthropozoonosis caused by a intracelular parasite Leishmania infantum. The canines can be classified by asymptomatic or symptomatic, the clinical signs depend on the immune response of each animal. The treatment is still a challenge, also the interpretation of hematologic and serum biochemical findings, because the results has not a consensus. The aim of this study was evaluate the clinical, haematological and serum biochemical findings of canines naturally infected with Leishmania infantum, submitted to experimental treatment. Were used 14 canines with positive parasitological diagnostic to Leishmania spp. them were separated in two treatment groups, one allopurinol associate with domperidone (DOA) (n=7) and other allopurinol associated with mitelfosine (MIA) (n=7). The animals were monitored every 30 days until 90 days of treatment, were made physical and clinical exam, parasitological analysis to find amastigote forms of Leishmania sp. on bone marrow, lymph node and skin cytology, also were made an complete blood count (CBC) and serum biochemistry (urea, creatinine, ALT, AST, total proteins, globulin and albumin). Al the animals showed clinical improve and were negative to parasitological exam since day 60. Both treatment groups revealed thrombocytopenia, plasmatic hyperproteinemia and anaemia on CBC, serum biochemistry revealed hyperglobulinemia, hipoalbuminemia, azotaemia and increased AST. After 90 days of treatment CBC and biochemistry alterations decreased, DOA treatment still has Anaemia (14,29%), thrombocytopenia (28,57%), hyperproteinemia (71,43%) and leucocytosis (42,86%) at CBC, and e azotaemia (14,29%), hipoalbuminemia (71,43%) and hyperglobulinemia (71,43%), at serum biochemistry. MIA group still present lymphocytosis (28,57%), eosinophilia (14,29%), thrombocytopenia (42,86%) e plasmatic hyperproteinemia (71,43%)at CBC, and azotaemia (42,86%), hyperglobulinemia (100%) and hipoalbuminemia (85,71%) at serum biochemistry. Was concluded that allopurinol associated with domperidone treatment is the best protocol because it decrease clinical signs and laboratorial findings. / A Leishmaniose visceral canina (LVC) é uma antropozonoose causada pelo parasito de tipo intracelular Leishmania infantum. Os cães podem ser classificados em assintomáticos ou sintomáticos, sendo os sinais dependentes da resposta imune de cada animal. O tratamento continua sendo um desafio, assim como a interpretação dos achados hematológicos e da bioquímicos sérica, pela falta de uniformização dos resultados. O objetivo deste trabalho foi a avaliar achados clínicos, hematológicos e da bioquímicos sérica de cães naturalmente infectados com Leishmania infantum, submetidos a tratamento experimental. Foram utilizados 14 cães com diagnóstico parasitológico positivo para Leishmania spp. Estes foram separados em dois grupos de tratamento, um com alopurinol associado a domperidona (DOA) (n=7) e o outro grupo alopurinol associado a miltefosina (MIA) (n=7). Os animais foram monitorados a cada 30 dias até o dia 90 pós tratamento, e realizou-se exame físico, clínico, pesquisa parasitológica de formas amastigotas de Leishmania sp. de aspirado de medula óssea, linfonodo e citologia esfoliativa de pele, além do hemograma e bioquímica sérica: ureia, creatinina, ALT, AST, proteínas totais, globulina e albumina. Todos os animais a partir do dia 60 apresentaram melhora clínica e negativaram na pesquisa parasitológica. Os dois grupos de tratamento no início do estudo revelaram trombocitopenia seguida por hiperproteinemia plasmática e anemia, os resultados da bioquímica sérica revelaram hiperglobulimenia, hipoalbuminemia, AST elevado e azotemía. Após 90 dias de tratamento as alterações hematológicas e bioquímicas diminuíram, mas no grupo DOA ainda apresentou anemia (14,29%), trombocitopenia (28,57%), hiperproteinemia (71,43%) e leucocitose (42,86%) no hemograma, e azotemía (14,29%), hipoalbuminemia (71,43%) e hiperglobulinemia (71,43%) na bioquímica sérica. No grupo MIA apresentou linfocitose (28,57%), eosinofilia (14,29%), trombocitopenia (42,86%) e hiperproteinemia plasmática (71,43%) no hemograma, e azotemia (42,86%), hiperglobulinemia (100%) e hipoalbuminemia (85,71%) na bioquímica sérica. Conclui-se que, o tratamento de alopurinol associado a domperidona é o melhor protocolo favorecendo a remissão dos achados clínicos e laboratoriais.

Orientador: Elizabeth Moreira dos Santos Schmidt / Resumo: A ovinocultura brasileira apresentou crescimento nos últimos anos e é responsável pela produção de carne e leite, assim como lã e couro, e as infecções por nematódeos gastrointestinais são o maior problema sanitário. O objetivo do estudo foi avaliar a infecção natural por nematódeos gastrointestinais de borregas inseridas em um sistema de produção agropecuária. Borregas da raça Corriedale foram divididas em três grupos de dez animais cada, definidos de acordo com o OPG e hematócrito obtidos após a primeira coleta. O grupo 1 (G1) foi composto por animais com OPG (ovos por grama de fezes) maior do que 5.000 e hematócrito menor ou igual a 24%; o grupo 2 (G2) com OPG maior do que 5.000 e hematócrito maior do que 24% e o grupo 3 (G3) com OPG menor do que 5.000 e hematócrito maior do que 24%. Amostras de fezes (testados para OPG e coprocultura) e sangue (hemograma e a determinação de variáveis bioquímicas séricas) foram coletadas em quatro ao longo do período experimental de 70 dias. Ao final do estudo duas borregas foram abatidas para coleta e identificação de parasitas adultos. Todas as variáveis foram avaliadas pelo teste de normalidade e variância homogênea, posteriormente testada pelo ANOVA, e comparação de médias pelo teste Tukey. Os gêneros Haemonchus, Trichostrongylus e Cooperia foram recuperados em coprocultura. As contagens de OPG apresentaram diferenças significativas (P<0,05) nos três grupos, nos momentos 1 e 2. Os valores do hematócrito foram significativamente menores... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Brazilian sheep population has grown in recent years, and It's responsible for meat and milk production, as well as wool and leather, and gastrointestinal nematode infections are the major sanitary problem. Our aim was to evaluate natural infection by gastrointestinal nematodes of lambs inserted in a integrated crop-livestock system. Corriedale’s lambs were divided into three groups of ten animals each, defined according to the EPG (eggs per gram of faeces) and hematocrit obtained after the first collection. Group 1 (G1) was composed by animals with EPG greater than 5,000 and hematocrit less than or equal to 24%; group 2 (G2) with EPG greater than 5,000 and hematocrit greater than 24% and group 3 (G3) with EPG lower than 5,000 and hematocrit greater than 24%. Stool samples (tested for EPG and stool test) and blood (blood count and determination of serum biochemical variables) were collected over the 70 day trial period.. At the end of the study, two ewes were slaughtered for collect and identification of adult parasites. All variables were evaluated by the normality test and homogeneous variance, later tested by ANOVA, and a comparison of means by the Tukey test. Haemonchus, Trichostrongylus, and Cooperia genera were recovered in a stool test. EPG counts presented significant differences (P <0.05) in the three groups at moments 1 and 2. The hematocrit values were significantly lower (P <0.05) for G1 in M1 and G2 in M2. The variables CHCM, total leukocytes, lipase, cholesterol... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Células tumorais têm sua proliferação e mobilidade modificada por diversos fatores de crescimento, citocinas e mediadores inflamatórios, dentre os quais a amilóide sérica A (SAA). Estudos prévios do nosso grupo mostraram o efeito direto da SAA em processos de proliferação, migração e invasão de células de glioblastoma multiforme (GBM), A172 e T98G. Neste estudo nós complementamos resultados prévios de migração e invasão; avaliamos SAA como possível indutora de moléculas importantes para a invasividade do tumor, como as MMP-2 e -9 e ROS; realizamos ensaio clonogênico com a intenção de investigar uma possível contribuição da rSAA no estágio inicial de desenvolvimento do tumor; avaliamos o impacto da hipóxia na expressão dos diferente genes da SAA; estimulamos as células com indutores hepáticos clássicos da SAA e analisamos a possibilidade destes induzirem os diferentes genes da SAA em células tumorais; avaliamos possíveis receptores e vias de sinalizações envolvidas nos processos de proliferação, migração e invasão. Construímos knockdowns (KDs) dos genes da SAA de fase aguda (SAA1 e 2) e constitutiva (SAA4) e avaliamos a função de cada um deles para a morfologia e para os processos de proliferação, migração e invasão de GBM. Por fim investigamos SAA como possível biomarcadora de gliomas em amostras clínicas. Nossos resultados sugerem que rSAA afetou a atividade das MMP-2 e -9 e a produção de ROS em ambos GBM, mas não se mostrou clonogênica. As citocinas IL-6, TNF-&#945; e IL-1&#946;, mas não a hipóxia, foram capazes de induzir os diferentes genes da SAA. A adição de rSAA às culturas celulares estimulou a transrição dos diferentes genes da SAA, sugerindo a ativação de mecanismos intracelulares retroalimentados. Efeitos pró-tumorais da rSAA parecem ser viabilizados via RAGE, enquanto efeitos anti-tumorais parecem ser induzidos via TLR-4. Pela primeira vez mostramos que SAA induz aumento de RAGE. KDs da SAA inibiram proliferação, migração e invasão, sugerindo que SAA seja um produto tumoral importante para a manutenção do fenótipo invasivo de GBM. A adição de SAA exógena reverteu grande parte dos efeitos nas células T98G KD, enquanto células A172 KD responderam parcialmente à rSAA. KDs da SAA sugerem a mesma como mantenedora da morfologia das células de GBM. De maneira inédita mostramos que o gene SAA4 até então descrito como um gene constitutivo de função desconhecida é importante para a proliferação, migração e invasão de GBM. Nós especulamos que os efeitos diferenciados induzidos por rSAA nos GBM estejam associados à natureza multiligante da SAA e às diferenças genéticas dos GBM. Pacientes com GBM apresentaram aumento significativo na transcrição e expressão de SAA1 no tecido tumoral, bem como aumento sérico de SAA. A correlação na expressão de SAA1 com moléculas importantes para progressão tumoral, como CXCR4, CXCR7, CD163 e HIF-1&#945; também a identificam como uma proteína associada à malignidade. / Tumor cells have their proliferation and migration modified by several growth factors, cytokines and inflammatory mediators, such as serum amyloid A (SAA). Previous studies from our group showed the direct effect of SAA on proliferation, migration and invasion of glioblastoma multiforme (GBM) cells, A172 and T98G. In this study we complemented previous migration and invasion data; evaluated SAA as possible inducer of MMP-2, -9 and ROS; performed clonogenic assay to investigate a possible contribution of rSAA in the early stage of tumor development; evaluated the impact of hypoxia on the expression of different genes of SAA; stimulated the cells with classics inducers of hepatic SAA and analyzed the possibility of these different genes to induce SAA in tumor cells; evaluated possible receptors and signaling pathways involved in proliferation, migration and invasion processes. SAA knockdowns (KDs) were made for acute phase (SAA1 and 2) and constitutive protein (SAA4) and evaluated their role in cell proliferation, migration, morfology and invasion. Finally it was investigated SAA as a possible biomarker of glioma grade in clinical samples. Our results suggest that rSAA affects MMP-2 and -9 activity and ROS production in both GBM, but did not affect clonogenicity. IL-6, TNF-&#945; and IL-1&#946;, but not hypoxia, were able to induce SAA expression. rSAA addition to cell cultures stimulated transcription of the three different SAA genes, suggesting the activation of intracellular feedback mechanisms. Pro-tumor effects of rSAA seem to occur via RAGE and anti-tumor effects appear to be induced via TLR-4. This was de first time that induction of RAGE triggered by rSAA was shown. Proliferation, migration and invasion were inhibited in SAA KDs, suggesting that SAA is an important tumoral product for the maintenance of the invasive phenotype of GBM. The addition of exogenous SAA largely reversed the effects on SAA KDs T98G cells, whereas SAA KDs A172 cells partially responded to the rSAA. The findings with SAA KDs suggest that SAA affect cell morphology. Another new contribution from our study was that SAA4, a constitutive gene with unknown function, was important for the proliferation, migration and invasion of GBM and it can be induced by rSAA, IL-6, TNF-&#945; and IL-1&#946;. We speculate that the different effects induced by rSAA in GBM are associated with the affinity of SAA to different receptors and the different genetic backgrounds of GBM. Patients with GBM showed a significant increase in the transcription and expression of SAA1 in tumor tissue as well as increased serum SAA. The correlation between the expression of SAA1 with important molecules for tumor progression, such as CXCR4, CXCR7, CD163 and HIF-1&#945; also identified SAA as a protein associated with malignancy.

Este trabalho tem como objetivo sintetizar e caracterizar um novo complexo mononuclear de rutênio (III) e enrofloxacina (enro, fármaco antibacteriano da família das fluoroquinolonas), [Ru(enro)3].nH2O. Foram testadas várias rotas sintéticas e apenas a partir de uma delas obteve-se o composto desejado. O produto foi caracterizado pelas técnicas espectroscópicas de absorção na região do UV-visível e do infra-vermelho. Através desta última técnica foi possível determinar o modo pelo qual a enrofloxacina se coordena ao íon rutênio: a coordenação ocorre de modo bidentado através do oxigênio da piridona e do oxigênio do grupamento carboxilato. Outro objetivo deste trabalho foi investigar a interação do complexo mononuclear de rutênio (III) e norfloxacina, [Ru(nor)3].nH2O, com a albumina de soro humano (HSA), através da técnica de luminescência. Mais especificamente pelo estudo da supressão da luminescência dos resíduos de triptofano, aplicando-se o modelo de tratamento da supressão bimolecular de Stern-Volmer. O estudo de supressão de fluorescência mostrou, por meio de espectros de emissão da HSA, que com o aumento da concentração do complexo [Ru(nor)3].nH2O na solução de HSA, ocorre uma redução gradual da luminescência da HSA, devido a alterações da conformação da proteína, que sugerem alteração do microambiente próximos aos resíduos de triptofano. A partir do tratamento dos dados pode-se determinar tanto K_sv quanto a constante cinética do processo de supressão, que mostraram uma dependência com a temperatura sugerindo como mecanismo predominante de supressão o mecanismo dinâmico. Porém essa conclusão foi revista a partir da determinação dos tempos de vida do estado excitado da HSA, e pode-se concluir que o mecanismo predominante à temperatura ambiente é o mecanismo estático, porém com o aumento da temperatura ocorre a predominância do mecanismo do tipo dinâmico. Através da determinação dos parâmetros termodinâmicos, concluiu-se que as interações entre a HSA e o complexo são espontâneas, e forças de van der Waals e ligações de hidrogênio estão envolvidas na ligação entre a HSA e o supressor. / This work aims to synthesize and characterize a new mononuclear ruthenium (III) complex and enrofloxacin (enro, antibacterial drug of the fluoroquinolone family), [Ru(enro)3].nH2O. Several synthetic routes were tested, but only from one of them it was obtained the desired compound. The product was characterized by spectroscopic techniques of absorption in UV-visible and infra-red regions. Through this last technique, it was possible to determine the coordination mode of enrofloxacin to the ruthenium ion: the coordination occurs in a bidentate way through the pyridone oxygen and the oxygen of the carboxylate group. Another aim of this study was to investigate the interaction of mononuclear ruthenium (III) complex and the norfloxacin, [Ru(nor)3].nH2O, with the human serum albumin (HSA), through the technique of luminescence. More specifically, by the study of the quenching of luminescence of tryptophan residues, by applying the Stern-Volmers model of treatment of bimolecular suppression. The fluorescence quenching study showed, through the emission spectra of HSA, that increasing the complex concentration in HSA solution, there is a gradual reduction of the luminescence of HSA, due to the conformational changes of the protein that suggests the change of microenvironment near tryptophan residues. From the data processing it is possible to determine both K_sv and the kinetic constant of the suppression process, which showed temperature dependence, suggesting as the predominant mechanism of quenching the dynamic mechanism. However, this conclusion has been revised from the determination of the lifetimes of the excited state of HSA, and it can be concluded that the predominant mechanism at room temperature is the static mechanism, but with the temperatures increase, it occurs the predominance of the dynamic type mechanism. By determining the thermodynamic parameters, it was concluded that the interactions between HSA and the complex are spontaneous, and Van der Waals forces and hydrogen bonds are involved in the binding between HSA and suppressor.

Apesar das evidências apontarem à participação da amilóide sérica A (SAA) em processos que favorecem a carcinogênese e metástase, associado à proposta da SAA como um marcador de progressão tumoral, não há ainda nenhum estudo avaliando a atividade direta da SAA em células tumorais. Este estudo examinou o efeito direto da SAA em duas linhagens de glioma humano. Gliomas são tumores cerebrais primários mais comuns em adultos e as linhagens deste estudo, A172 e T98G, representam carcinomas humanos caracterizados por um comportamento biológico altamente agressivo e quase sempre fatais, sendo classificados como grau IV. As linhagens A172 e T98G possuem algumas diferenças importantes em relação à invasividade; elas são respectivamente menos invasiva e mais invasiva. Para este estudo, avaliamos o efeito de SAA sobre a síntese de compostos representativos de algumas das diferentes classes de substâncias que estão envolvidas na progressão do tumor; entre elas estão a citocina IL-8, IL-6, TNF-&#945;, a molécula mensageira NO, as metaloproteases, MMP2 e MMP9 e o gene RECK. Além disso, nos perguntamos se SAA pode estar envolvida nos processos de proliferação, migração e invasão celular. SAA induziu a produção de NO em ambas as linhagens de glioma. Em relação a IL-8 observamos que sua produção basal é bastante diferente dependendo da linhagem, sendo pouco produzida pela linhagem A172 que foi a única que respondeu à SAA. IL-6 e TNF-&#945; não foram produzidas pelos gliomas quando estimulados com SAA. O tratamento das células com SAA aumentou a expressão das MMP-2 e MMP-9 e diminuiu a de RECK em ambas linhagens. SAA mostrou ser um estímulo mitogênico para os gliomas T98G e A172. SAA aumentou a migração e invasão da linhagem T98G e inibiu estes mesmos parâmetros nas células A172. SAA é constitutivamente expressa e produzida por ambas linhagens, sendo que a isoforma SAA1 é a predominante. A expressão gênica de todas as isoformas, SAA1, SAA2, SAA4, e a síntese protéica das SAA foram aumentadas pela adição de IFN-&#947;. Nossos resultados com base em ensaios in vitro suportam uma contribuição direta da SAA para a progressão e metástase do tumor, dependendo do tipo de célula e concentração da SAA. O fato de que IFN-&#947; é um indutor de SAA nos gliomas aponta que SAA pode exercer tanto um efeito intrácrino quanto autócrino ou parácrino nos tumores. / In spite of the evidences sustaining the participation of SAA in processes that favor carcinogenesis and metastasis, and the proposal of SAA as a marker of tumor progression, no studies have yet addressed a potential direct activity of SAA on tumor cells. This study examined the direct effect of SAA on two human glioma lineages. Gliomas are primary brain tumors more common in adults and the lineages of this study, A172 and T98G, represent human carcinomas characterized by a highly aggressive biological behaviour and almost always fatal, classified as grade IV. A172 and T98G have some important differences in the invasiveness, they are less invasive and more invasive, respectively. For this study, we evaluated the effect of SAA on the synthesis of compounds representing different classes of substances that are somehow involved in tumor progression, among them we can cite the cytokine IL-8, the messenger molecule NO, the metalloproteinases MMP2 and MMP9 and RECK gene. Furthermore, we wonder if SAA was involved in the processes of proliferation, migration and cell invasion. SAA stimulated the production of IL-8 in lineage A172, while T98G produced high amounts of IL-8 that were not modified by SAA addition. SAA did not stimulate the production of IL-6 and TNF-&#945;. SAA induced the production of NO, increased the expression of MMP-2 and MPP-9 and decreased the regulator of the expression of the MMPs; gene RECK. Moreover, we observed that SAA was a mitogenic stimulus, but it had a dual effect on migration and invasiveness behavior depending on cell lineage. For T98G SAA increased migration and invasion, and for A172 SAA inhibited migration and invasion. SAA was constitutively expressed and produced by both strains, and the isoform SAA1 predominated. The gene expression of all isoforms, SAA1, SAA2, SAA4, and protein synthesis of SAA were increased by the addition of INF-&#947;. Our findings based on in vitro assays support a direct contribution of SAA to tumor development, progression and metastasis depending on the cell type and concentration of SAA. Besides the role of SAA on tumor growth during an acute phase, the fact that SAA was expressed in tumor cells suggests an intracrine or an autocrine action of SAA.

A epilepsia compreende um grupo de alterações neurológicas frequentes em humanos e animais, caracterizada pela ocorrência periódica de crises convulsivas. A causa do processo pode ter várias origens sendo necessária a realização de exames complementares para o diagnóstico definitivo. A análise de biomarcadores, em especial as proteínas de fase aguda, como a proteína C-reativa (PCR), auxilia na identificação de doenças neurológicas inflamatórias e infecciosas, já que após serem produzidas pelo fígado conseguem atingir o tecido danificado e ter suas concentrações elevadas rapidamente na circulação. A concentração de PCR está diretamente relacionada à resposta de fase aguda, independentemente da origem ou natureza do estímulo, podendo ser um processo inflamatório, infeccioso ou até mesmo de origem neoplásica. Embora a PCR tenha sido estudada e monitorada em pacientes com as mais variadas doenças, até o momento não foi determinada a presença de PCR no soro e líquor de cães com epilepsia idiopática. O objetivo deste estudo foi avaliar as concentrações de PCR no líquor e soro de cães apresentando epilepsia idiopática e verificar se essa protéina pode ser utilizada como biomarcador para auxiliar no diagnóstico da doença. Para tanto foram compostos três grupos. O primeiro, denominado A, com 23 animais clinicamente normais; o segundo denomindo B, composto por 17 cães manifestando convulsão em até 24 horas anteriores ao momento da coleta de mateiral; e o terceiro denominado C, com 16 cães apresentando convulsões de 24 horas até 120 horas antecedendo o momento da coleta do líquor e do soro. Foram mensuradas as proteínas totais séricas e realizadas as eletroforeses, além da análise do líquor e tomografia computadorizada. Animais com alterações estruturais detectadas na tomografia foram excluidos do estudo. As concentrações de PCR séricas foram avaliadas por meio da técnica ELISA utilizando-se kit comercial Tridelta Development Ltd, espécie específico. Além desta avaliação, os grupos B e C foram alivados quanto à concentração de PCR no liquor. Os resultados foram analisados pelo teste de Kruskal Wallis, seguido pelo teste de Dunn, enquanto para eletroforese e análise de PCR no líquor utilizou-se teste T não pareado. Não houve diferença significante em relação à eletroforese de proteínas séricas nos três grupos, assim como não se observaram alterações na análise do líquor nos grupos B e C. As concentrações séricas de PCR em cães normais variaram níveis não detectáveis a 6,36 &micro;g/mL, com média de 0,98 &micro;g/mL. As concentrações séricas nos animais do grupo B variaram de 1,04 &micro;g/mL a 5,03 &micro;g/mL, com média 2,14 &micro;g/mL, enquanto no grupo C as concentrações foram de níveis não detectáveis a 1,9 &micro;g/mL com média 0,51 &micro;g/mL. A análise estatística demonstrou diferença significante entre os grupos sendo a média do grupo B superior aos demais (p= 0,0002). As concentrações liquóricas de PCR foram muito baixas quando comparadas àquelas observadas em cães com afecções inflamatórias e infecciosas e não foram em sua maioria detectáveis no líquor quando o período entre a convulsão e a coleta foi superior ao período de 24 horas. Concluiu-se que as convulsões associadas à epilepsia idiopática promovem uma resposta de fase aguda caracterizada pelo aumento de PCR sérica e liquórica nas primeiras 24 horas e que essas concentrações decaem após esse período, podendo estar associadas à liberação de mediadores inflamatórios no SNC e às contrações musculares. Assim sendo, a PCR sérica pode ser utilizada como um biomarcador para diferenciar a epilepsia idiopática de outras causas de convulsão. A técnica ELISA para análise de PCR no líquor, pode se somar às outras análises liquóricas, necessitando ainda de validação. / Epilepsy is a group of neurological disorders of humans and animals characterized by recurrent seizures. Epilepsy can have a number of causes and some complementary tests can help with a precise diagnosis. Biomarkers analysis, in special acute protein phase such as C reactive protein (PCR) can help identify inflammatory and infection neurological disease. Acute phase proteins are produced by liver and reach damaged tissue increasing blood concentration. Today studies show that increases in the PCR blood concentration is related to acute inflammatory response independent of mint, whether it is inflammatory, neoplastic or infection. Although PCR has been studied in many diseases, in special neurological disorder followed or not by seizures, until now PCR has not been founded in blood or liquor of dogs with idiopathic epilepsy. The purpose of this study is to evaluate PCR concentration in blood and liquor of patients with idiopathic epilepsy and verify if the protein can be considered a biomarker to help its diagnose. The study has 3 groups. The first named control group A, with 23 healthy animals, the second named B with 17 dogs that have had seizures within 24h, and the third named C with 16 dog that have had seizures after 24 to 120 hours from blood or liquor collection. The investigation is based on analyzing total protein and electrophoretic protein profile, liquor analysis and tomography. Patients with structural brain damages detected by tomography were excluded from the study. In the control group PCR concentration were analyzed by ELISA method and kit Tridelta Development Ltd, species specific. In groups B and C were also procedure PCR analyses in liquor sample. The results were analyzed by the Kruskal Wallis test and the Dun test, while electrophorese and PCR of liquor where analyzed by the T test not parried. There was no significant difference in electrophorese in the three groups and there were not found alterations in the liquor analyzes of the groups B and C. PCR blood concentration in healthy dogs vary between not detectable values to 6,36mcg/ml, with an average of 0,98mcg/ml. Blood concentrations from animal of group B vary from 1,04 mcg/ml to 5,03, with and average of 2,14mcg/ml. Meanwhile in group C blood concentration values were from not detectable to 1,9 mcg/dl, with an average 0,50 mcg/ml. Statistic analyses show significant difference between groups. Group B average was higher (p=0,0002). PCR liquor concentration was lower to those found on dogs with inflammatory infection diseases and the majority were not detectable in the liquor when the sample has been collected after 24 hours from the seizures. It is able to conclude that seizures associated with idiopathic epilepsy promote an acute phase response characterized by an increase of blood and liquor PCR concentrations within 24 hours, and after this period PCR concentrations declined due to the liberation of inflammatory mediators by the CNS and muscle contractions. Therefore blood can be used as a biomarker to differentiate idiopathic epilepsy from other seizures causes. The ELISA technique for PCR liquor analysis still needs to be validated.