Considerando que o diabetes experimental altera a morfologia e função das glândulas salivares de ratos, o objetivo deste estudo foi analisar o efeito da irradiação com laser em baixa intensidade no metabolismo das glândulas parótidas (GP) e submandibulares (GSM) de ratas diabéticas, assim como analisar a glicemia destes animais. Ratas Wistar com aproximadamente 195 g foram divididas em diabéticas (D) e controles (C), e subdivididas de acordo com a dose de irradiação recebida: C-D0 (0 J/cm2), C-D5 (5 J/cm2), C-D10 (10 J/cm2), C-D20 (20 J/cm2). O diabetes foi induzido por injeção de estreptozotocina 60 mg/kg p.c., e confirmado após 72 h, através da glicemia. Vinte e nove dias após a indução, as ratas receberam a irradiação de acordo com o grupo a qual pertenciam. O laser de diodo (Ecco Fibras®), 660nm, foi utilizado nas áreas correspondentes às GP e GSM. Após 24 h, as ratas foram eutanasiadas e as glândulas removidas para posterior análise iônica, histológica e bioquímica de concentração total de proteína, atividade das enzimas catalase, peroxidase e amilase. Além disso, análise glicêmica também foi realizada. Análise de variância e teste de Tukey revelaram diminuição da glicemia nos grupos D5 e D20 (p<0,05), assim como diminuição na atividade da enzima catalase, nestas mesmas dosagens, nas GP e GSM para valores similares às ratas não-diabéticas (p>0,05), sendo que para as GSM, a dose de 10 J/cm2 também se mostrou efetiva. Análise histológica demonstrou acúmulo de lipídeos nas GP dos animais diabéticos, sendo que para os grupos que receberam irradiação, este acúmulo foi reduzido. Com base nos resultados, podemos concluir que a irradiação com laser vermelho nas GP e GSM altera a atividade enzimática da catalase, assim como altera a concentração de glicose sangüínea e o acúmulo de lipídeos. Com isto, mais estudos devem ser realizados objetivando continuar as análises de parâmetros antioxidantes, assim como, análise glicêmica, uma vez que a hiperglicemia e alterações no sistema antioxidante são diretamente relacionadas às complicações do diabetes. / Considering that experimental diabetes alters rat salivary gland morphology and function, the aim of this study was to evaluate the effect of laser irradiation (LI) on the glycaemic state and some biochemical parameters of the parotid glands (PG) and submandibulary glands (SMG) in diabetic and non diabetic rats, which were divided into 8 groups: D0/5/10/20 and C0/5/10/20, respectively. Diabetes was induced by administration of streptozotocin (60 mg/kg) and confirmed later by the glycaemia results. Twenty-nine (29) days after the induction, the PG and SMG of groups D-C5, D-C10 and D-C20, were irradiated with 5, 10 and 20 J/cm2 of laser diode (660nm/100mW) respectively. On the following day, the rats were euthanized and the blood glucose determined. The PG and SMG were removed and total protein concentration and amylase, peroxidase and catalase activities were performed, as well as, ionic and histological analysis. The analysis of the results (ANOVA and Tukey tests) revealed a decrease in the glycaemia level for groups D5 and D20 (p<0.05). In addition, diabetic rats showed higher catalase and peroxidase activities than non diabetic groups, without radiation. The doses of 5 and 20 J/cm2 decreased catalase activity, of PG and SMG, of diabetic groups to non diabetic values (p<0.05). Moreover, the dose of 10 J/cm2 also was effective to SMGs. Histological analysis showed accumulation of lipids droplets on parotid glands of diabetic animals. However, the lipid droplets quantity was lower in comparison with that observed to non irradiated diabetic animals. The results of the present study suggest that the classical organs which control glycaemia should also be analyzed after being irradiated with LI, once hyperglycaemia and alterations of the antioxidant system are the main causes of diabetes complications.

As glândulas salivares são glândulas exócrinas que vertem seus produtos para cavidade oral. As principais glândulas são as parótidas, sublinguais e submandibulares sendo elas as responsáveis pela contribuição do maior volume de saliva durante o processo de secreção que, assim como todas as atividades que nosso corpo exerce, também dependem de energia. A secreção salivar consome glicose e mobiliza o glicogênio para adquirir energia, e este processo pode sofrer influencia de alguns fatores dentre eles o estado diabético e o ritmo circadiano. O diabetes altera todo o metabolismo de carboidratos e diminui o fluxo salivar. Já o ritmo circadiano promove uma alteração fisiológica no fluxo e composição da saliva de acordo com o horário do dia. Desta forma o objetivo deste trabalho foi em um primeiro momento observar o comportamento da concentração de glicogênio em glândulas parótidas e submandibulares de ratos com diferentes idades e condições alimentares em um determinado período do dia. Em um segundo momento observar as alterações que ocorrem na concentração de glicogênio em ratos diabéticos durante o dia. Na primeira fase do estudo foram utilizados ratos saudáveis com 21, 30 e 60 dias de vida, divididos em grupos alimentado e alimentados com restrição. No grupo com restrição de alimento os animais ficaram restritos a alimentação noturna (19 7 horas) desde 2 dias antes do sacrifício. Na segunda fase do estudo, com ratos diabéticos, foram utilizados animais com 60 dias de vida e a indução do diabetes foi realizada através de uma injeção intraperitoneal de estreptozotocina (65 mg/Kg p.c.). 30 dias após a indução os animais foram sacrificados. Em todos os grupos o sacrifício foi realizado nos seguintes horários - 7, 9, 11, 13, 15, 17 e 19 horas. As glândulas submandibulares e parótidas foram removidas imediatamente para posterior análise da concentração de glicogênio. Os dados foram analisados estatisticamente pelos testes ANOVA e o teste de Tukey (p<0.05). Os resultados obtidos com os animais normais mostra uma variação da concentração de glicogênio durante o período analisado nas duas glândulas, sendo mais evidente quando os ratos não foram submetidos a restrição de alimento. Nesta condição a variação da concentração de glicogênio em glândulas parótidas pouco alterou independente da idade. Nos animais diabéticos observamos um acúmulo de glicogênio nas glândulas parótidas e uma diminuição da concentração de glicogênio em submandibulares. Durante o período analisado também houve pouca variação da concentração de glicogênio, assim como nos animais não diabéticos, sendo evidente a menor interferência do ritmo circadiano no estado diabético. Esse estudo nos mostrou que o ritmo circadiano interfere na concentração de glicogênio das glândulas salivares parótidas e submandibulares de ratos durante o período analisado e que a restrição de alimento durante o dia alterou a concentração de glicogênio principalmente nas glândulas parótidas. Observamos também que no estado diabético ocorre um acúmulo do glicogênio em glândulas parótidas e uma diminuição nas glândulas submandibulares. / The secretory process is very important for oral health. The majors salivary glands (parotid, submandibular and sublingual) are the most important for secretion of saliva, for this activity the glands needs energy and a common way obtain is using glucose from the mobilization of glycogen during the fast period. Because of the importance of glycogen in this process, this study aimed to analyze the behavior of glycogen concentration during the day (7 to 19 hours) in parotid, and submandibular glands of rats. In the first moment the study was made with health male rats in different ages (21, 30 and 60 days old), divided in a group with free access to food and other group fed only during the night (19 to 7 hours). The second part of the study was made using diabetic male rats to search for alterations caused by this disease in glycogen concentration. All animals were killed during the day in different hours (7, 9, 11, 13, 15, 17,19 hours), their glands were removed and clamped between aluminium plates pre-cooled in dry ice. The frozen glands were then stored at -80oC until analysis of glycogen concentration. The statistical analyses was made using ANOVA test and Tukey (p<0,5). In the group of health rats we observed a variation of the glycogen concentration during the period analyzed in both glands, but it became more evident when the animals had free access to food. When they were fed during the night the variation of the glycogen concentration in parotid glands were not so evident. The results with diabetics rats showed a higher accumulation of glycogen in parotid glands and a lower concentration of glycogen in submandibular glands. In this period we could not see the variation of glycogen that happen in health rats. This study showed that circadian rhythm modify the concentration of glycogen in parotid and submandibular glands in health rats and the restriction of food made alterations in glycogen concentration of parotid glands. In diabetic rats was possible to see a higher concentration of glycogen in parotid and lower concentration in submandibular gland compared with health rats.

O Diabetes mellitus é um distúrbio metabólico de etiologia múltipla que leva a uma hiperglicemia, podendo ocasionar inúmeras disfunções e falências de alguns órgãos e também alterações em cavidade oral. Estudos demonstraram diminuição da glicemia de ratas diabéticas com o uso de laser de baixa potência (LBP) em glândulas salivares. Como o insulin-like growth factor 1 (IGF-1) tem uma estrutura semelhante a da insulina, podendo mimetizar algumas de suas funções, o objetivo do presente trabalho foi analisar o efeito da irradiação com LBP na concentração de IGF-1, nas glândulas parótidas (GP) e submandibulares (GSM), e o efeito na glicemia de ratas diabéticas induzidas por estreptozotocina. Ratas da raça Wistar foram utilizadas e receberam uma injeção intraperitoneal de estreptozotocina ou de tampão conforme o grupo ao qual pertenciam, C (controle) ou D (diabético). Posteriormente, as ratas foram divididas em 4 subgrupos (C0, D0, C5 e D5), de acordo com a dose de irradiação recebida (0 ou 5 J/cm²). O estado diabético dos animais foi confirmado através da glicemia e, após 29 dias, os animais foram submetidos à simulação ou irradiação. O LBP utilizado foi o Photon Lase III (DMC Equipamentos LTDA®). Vinte e quatro horas após o procedimento os animais foram sacrificados para coleta de sangue e das glândulas salivares para as análises da glicemia (método da glicose oxidase e do glicosímetro) e concentração de IGF-1, respectivamente. Os resultados foram analisados pelo teste estatístico de Análise de Variância (ANOVA) e teste de contraste de Tukey, admitindo-se significância de 5%. A glicemia do dia do sacrifício, dos animais diabéticos que receberam irradiação, estava diminuída quando comparada com a glicemia de sacrifício dos animais diabéticos que não receberam o laser (p0,05). Além disso, a glicemia de sacrifício dos animais diabéticos irradiados foi menor que a aferida no dia do diagnóstico, quando foi utilizado o método do glicosímetro (p0,05). A concentração de IGF-1, entretanto, não sofreu influência da doença e nem da irradiação, se mostrando alterada somente quando comparada a GP e GSM. Com base nestes resultados podemos concluir que o LBP pode alterar a glicemia dos animais diabéticos, no entanto, este efeito parece não estar relacionado com a concentração de IGF-1. / Diabetes mellitus is a metabolic disorder of multiple etiologies that leads to hyperglycemia and can cause numerous dysfunctions and failures of some organs and also changes in the oral cavity. Studies have shown a decrease on glucose blood concentration in diabetic rats when low-power laser was used upom salivary glands. As insulin-like growth factor 1 (IGF-1) has a structure similar to insulin, the aim of this study was to analyze the effect of low-power laser irradiation on IGF-1 concentration of the parotid and submandibular glands as well as on glycemia of diabetic rats induced by streptozotocin. Wistar rats were used and received an intraperitoneal injection of streptozotocin or buffer, depending on the group to which they belonged, being C (control) or D (diabetic). Subsequently, the rats were divided into 4 subgroups (C0, D0, C5 and D5) according to the irradiation dose received (0 or 5 J / cm ²). The diabetic state of the animals was confirmed by blood glucose concentration and, after 29 days, the animals were subjected to irradiation or simulation, depending on the group to which they belonged. The laser used was the Photon Lase III (DMC Equipamentos LTDA®). Twenty-four hours after the procedure, the animals were sacrificed and blood and the salivary glands were collected to analyse the glycemia and IGF-1 concentration, respectively. The results were analyzed by Analysis of Variance statistical test (ANOVA) and Tukey\'s contrast test, assuming a significance of 5%. The sacrifice day glycemia of diabetic animals that received irradiation was decreased in comparison with the sacrifice day glycemia of non-irradiated diabetic animals as well as was lower than that measured on the day of diagnosis of irradiated animals (p0,05). The concentration of IGF-1, however, was not affected by diabetes or irradiation. However, IGF-1 concentration was increased on parotid than submandibular glands. Based on these results of the present study, we conclude that LBP can decrease blood glucose concentration of diabetic animals, however, this effect does not appear to be related to the concentration of IGF-1.

O presente estudo teve por objetivo avaliar a influência da administração do tungstato de sódio (2 mg/ml) num período de 6 semanas sobre alguns parâmetros de parótida, submandibular e saliva de ratas diabéticas induzidas por estreptozotocina. Os grupos estudados foram divididos em controle (C), controle tratado com tungstato de sódio (CT), diabético (D) e diabético tratado (DT). Os parâmetros estudados foram o metabolismo energético, a composição protéica das glândulas e de saliva total estimulada por pilocarpina e isoproterenol, bem como a via de secreção de proteínas. No metabolismo energético foi determinada a concentração de glicogênio e a atividade enzimática da hexoquinase, fosfofrutoquinase-1, piruvato quinase, glicose-6-fosfato desidrogenase, lactato desidrogenase. Foram determinadas a concentração de proteína total, a atividade enzimática da amilase e peroxidase e o teor de ácido siálico em glândulas salivares e saliva. A via de secreção de proteínas foi estudada pela avaliação da expressão de proteína quinase C por western blot. Os resultados obtidos confirmam o potencial hipoglicemiante do tungstato de sódio, bem como sua ação no controle da polifagia, da polidipsia e do peso corporal e glandular. A concentração de glicogênio sofreu um incremento nos grupos diabéticos e o tratamento com tungstato de sódio potencializou esse aumento nas glândulas salivares. A glândula parótida sofreu um aumento de alguns parâmetros da via glicolítica e de sua composição protéica nas semanas iniciais do estudo, com normalização nas semanas finais. O tungstato se mostrou efetivo no controle da atividade de peroxidase em glândulas salivares, com efeitos pouco significativos sobre os demais parâmetros estudados. Os animais diabéticos apresentaram um aumento da proteína total em saliva, porém nenhuma diferença foi observada na atividade da amilase e peroxidase. O tungstato de sódio potencializou o aumento da concentração de proteínas causado pelo diabete além de reduzir a atividade da amilase na saliva dos animais controle e diabético tratados. A glândula submandibular de ratos diabéticos sofreu uma estimulação na expressão de PKC ativa e inativa após uma semana experimental, além de uma alteração do perfil das isoformas da enzima, o tungstato de sódio potencializou esse aumento. Conclusão: O papel do tungstato de sódio no restabelecimento do metabolismo energético não foi observado em parótida e submandibular, mostrando que esse composto não modifica o metabolismo de tecidos periféricos como as glândulas salivares. A ação do tungstato de sódio sobre a atividade da peroxidase em glândulas salivares indica que esse composto pode atuar como auxiliar no sistema antioxidante no organismo. O tungstato de sódio potencializa uma das vias de secreção de saliva pelo estímulo da PKC. / The aim of study was evaluate the effect of sodium tungstate administration (2mg/ml) on some parameters of parotid, submandibular and pilocarpine/isoproterenol stimulated saliva of streptozotocin induced-diabetes, during six weeks. The groups were divided in untreated control (C), treated control (CT), untreated diabetic (D) and treated diabetic (DT). The parameters studied were energetic metabolism, proteic composition of glands and saliva, besides the protein secretion pathway. In the energetic metabolism were determinated hexokinase, phosphofructokinase-1, pyruvate kinase, glycose-6-phosphate dehydrogenase and lactate dehydrogenase activities. Were evaluated the total protein concentration, amylase and peroxidase activities and free and total sialic acid content on saliva and salivary glands. The protein secretion pathway was studied by evaluation of expression of protein kinase C by western blot. The results obtained confirm the tungstate potential as hypoglycemic, as well as its action in the polifagia, polidipsia and body and glandular weight control. The glycogen concentration suffered an increment in the diabetic group and the tungstate treatment potentialized the increase in the salivary glands. Parotid glands suffered an increased in some parameters of glycolitic pathway and its protein composition in the initial weeks of study, with normalization in the end of experiment. The tungstate was effective in the control of peroxidase activity in salivary glands, but few effects on the other parameters. Diabetic animals presented an increased of total protein concentration in saliva, but no difference was observed in the amylase and peroxidase activities. Sodium tungstate caused an increased in the total protein concentration and a reduction on amylase activity of saliva in the CT and DT groups. Submandibular gland of diabetic rats suffered stimulation in the active and inactive PKC expression after one week and alteration in the isoforms profile of enzyme. Sodium tungstate potencialized this increased. Conclusion: In this study, was not observed effect of sodium tungstate on energetic metabolism of parotid and submandibular, showing that this compound does not alter the metabolism in the peripheral tissue as salivary glands. The tungstate acts on peroxidase activity, this show the possible action of this compound in the antioxidant system. Sodium tungstate stimulates the protein secretion pathway in the salivary glands.

Orientador: Fernanda Klein Marcondes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-24T15:57:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_PatriciaOliveirade_D.pdf: 849171 bytes, checksum: 8d1338b60a2ebc4b9e9be0660be72427 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Além de doenças orais, o estresse e o ciclo menstrual também têm sido relacionados à produção de compostos sulfurados voláteis (CSV), principais gases responsáveis pela halitose. O objetivo deste trabalho foi investigar a relação entre alterações emocionais, associadas a atividades acadêmicas, e produção de CSV, por meio da determinação do nível de estresse, fluxo salivar, concentrações salivares de cortisol, IgA secretória (IgAs), proteínas totais, beta-defensina ¿ 2 (?-defensin-2), atividade de alfa-amilase e expressão das proteínas mucinas 5B, 7 e lactoferrina, na cavidade oral, em mulheres (na fase menstrual do ciclo reprodutivo) e homens dos 4 anos do curso de Graduação em Odontologia da Faculdade de Odontologia de Piracicaba (UNICAMP). Os dados da análise psicológica mostraram que o estresse associado às atividades acadêmicas varia entre os anos do curso. Mulheres apresentaram maiores concentrações bucais de CSV e metil mercaptana (CH3SH), menor fluxo salivar, maiores concentrações salivares de proteínas totais e IgAs e menor expressão salivar de mucinas 5B e 7 em relação aos homens. Em relação ao ano do curso, homens e mulheres cursando o terceiro ano do curso apresentaram maiores valores de CSV, sulfeto de hidrogênio (H2S), alfa-amilase e mucina 5B, em relação a alunos cursando o primeiro ano. Não houve diferença entre os quatro anos da graduação nas concentrações bucais de CH3SH e dimetil sulfeto, concentrações salivares de proteínas totais, IgAs e cortisol e valores de fluxo salivar. Alunos do terceiro ano apresentaram menores concentrações salivares de ?-defensina -2, em relação a alunos do primeiro ano. Alunas cursando o terceiro e quarto anos do curso de graduação apresentaram maior expressão salivar de lactoferrina, em relação às alunas do primeiro e segundo anos. Houve correlação significativa entre os valores de CSV e H2S, em ambos os gêneros. Nas mulheres, observou-se correlação direta entre estresse e CSV e estresse e alfa-amilase e, nos homens, entre estresse e MUC5B. Os resultados confirmam dados anteriores, reforçando a influência do estresse sobre a produção de CSV e sugerem que a ?-defensina -2, mucina 5B e lactoferrina podem estar envolvidas na associação entre estresse e produção de CSV / Abstract: Oral diseases, stress and menstrual cycle have been related to the production of volatile sulfur compounds (VSC), main gases responsible for halitosis. The aim of this study was to evaluate the relationship between emotional alterations associated with academic activities and production of VSC. The following parameters were determined: stress levels, salivary flow, salivary concentrations of cortisol, secretory IgA (SIgA), total protein and beta-defensin-2 (?-defensin -2), alpha-amylase activity, and the expression of the proteins mucin 5B, 7 and lactoferrin, in the oral cavity. Women, during menstrual phase of the reproductive cycle, and men, enrolled at Piracicaba Dental School, University of Campinas, participated in the study. The data of psychological analysis showed that the stress associated with academic activities varies between years of the course. Women showed higher oral concentrations of VSC and methyl mercaptan (CH3SH), lower salivary flow, higher concentrations of total protein and SIgA and lower salivary expression of mucins 5B and 7 compared to men. Men and women in the third year of undergraduate course presented higher values of VSC, hydrogen sulfide (H2S), alpha-amylase and mucin 5B compared to students in the first year. There was no difference on the oral concentrations of CH3SH and dimethyl sulphide; salivary proteins, SIgA and cortisol concentrations and salivary flow values between the four years of the undergraduate course. Men scholars in the third year of the undergraduate course showed lower salivary concentrations of ?-defensin-2 compared to the first year. Women scholars in the third and fourth years of the undergraduate course presented higher lactoferrin expression compared to students in the first and second years. There was significant correlation between VSC and H2S in both gender. In women, it was observed correlation between stress and VSC and between stress and alpha-amylase. In men, stress and MUC5B presented positive correlation. The results confirm previous data strengthening the stress influence on the VSC production. Moreover, suggest that the proteins beta-defensin-2, mucin 5B and lactoferrin may be involved in the association between stress and VSC production / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutora em Odontologia

Orientadores: Albina Messias De Almeida Milani Altemani, Elizabeth Ferreira Martinez / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T03:06:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Montalli_VictorAngeloMartins_D.pdf: 4723030 bytes, checksum: 1764455ec3666d02c7e74ee7c326caed (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: As lesões salivares tumorais compostas por dupla população celular (epitelial e mioepitelial) são consideradas originárias do ducto intercalado e estas lesões são subdivididas em diversas entidades que apresentam sobreposição morfológica, com delimitações entre elas nem sempre nítidas. Entre as neoplasias benignas estão o adenoma pleomórfico (AP) e o adenoma de células basais (ACB). Recentemente foi descrita uma nova entidade tumoral benigna, com composição epitelial e mioepitelial, denominada de lesão do ducto intercalado (LDI). Diante disso, o nosso primeiro objetivo foi analisar os perfis morfológicos e imuno-histoquímicos de LDIs e ACBs classificados em tubulares (ACB-T) e não tubulares (ACB-NT) para verificar se as LDIs e ACB-Ts representam entidades distintas. Ainda, dado o papel crítico da célula mioepitelial na morfogênese das lesões tumorais salivares histogeneticamente relacionadas ao ducto intercalado, nosso segundo objetivo foi avaliar in vitro a influência de fatores do microambiente tumoral (proteínas da matriz extracelular e fatores de crescimento) sobre a morfologia, viabilidade e proliferação de células mioepiteliais advindas de AP. Para a análise morfológica e imuno-histoquímica, foram estudados oito casos de LDIs, nove ACBs-T e 19 ACBs-NT. Todos os ACB-T continham áreas LDI-like, enquanto nos ACB-NT estas eram raras e escassas. As células luminais das LDIs e ACBs-T exibiram positividade para CK7, lisozima, S100 e DOG1. No grupo ACB-NT, poucas células luminais mostraram tal expressão, sendo principalmente positivas para CK14. As células mioepiteliais das LDIs, ACB-T e ACB-NT foram positivas para CK14, calponina, AML e p63, mas essas eram mais numerosas nos ACBs. No estudo in vitro, a morfologia e diferenciação das células mioepiteliais foram avaliadas qualitativamente por imunofluorescência indireta (expressão da vimentina e AML, respectivamente). As células mioepiteliais exibiram morfologia poliédrica em todas as matrizes, independentemente da suplementação do fator de crescimento. AML foi imunoexpressa de forma heterogênea nas células mioepiteliais, porém houve aumento da expressão desta proteína quando acrescentado o TGF- ?1, independentemente do tipo de matriz usada. TGF- ?1 também aumentou significantemente a viabilidade das células mioepiteliais cultivadas na matriz fibronectina. Conclusões: as LDI, ACB-T e ACB-NT formam um continuum de lesões onde as LDIs estão estreitamente relacionadas com o ACB-T, visto que em ambos o imunofenótipo das células luminais e mioepiteliais é semelhante àquele observado nos ductos intercalados. A principal diferença entre LDI e ACB-T é a quantidade de células mioepiteliais, que é maior no último. Além disso, nossos resultados indicam que pelo menos alguns ACBs podem surgir via LDI. Os estudos em cultura de células sugerem que as diferentes matrizes celulares não influenciam a morfologia e diferenciação da célula mioepitelial. Dentre os fatores de crescimento estudados apenas TGF- ?1 associou-se com aumento da expressão de AML (diferenciação celular) e aumentou significantemente a viabilidade celular associado à matriz fibronectina / Abstract: Salivary tumor lesions composed of dual cell population (epithelial and myoepithelial) are considered to originate from the intercalated duct. These lesions are subdivided into several entities that share morphological features. Among the benign tumors are pleomorphic adenomas (PA) and basal cell adenoma (BCA). Recently, a new entity was described that is a benign tumor with epithelial and myoepithelial composition, called intercalated duct lesion (IDL). Our first objective was to analyze the morphological and immunohistochemical profiles of IDLs and BCAs classified into tubular (T-BCA) and non-tubular subtypes (NT-BCA), to determine whether or not IDL and tubular BCA represent distinct entities. Also, given the critical role of myoepithelial cells in the morphogenesis of the salivary tumor lesions histogenetically related to the intercalated duct, our second objective was to evaluate in vitro the influence of tumor microenvironment factors (extracellular matrix proteins and growth factors) on the morphology, viability and proliferation of myoepithelial cells arisen from PA . Eight IDLs, nine tubular BCAs and 19 non-tubular BCAs were studied by immunohistochemical technique. All tubular BCAs contained IDL-like areas, which represented 20-70% of the tumor. In non-tubular BCA, IDL-like areas were occasional and small (<5%). One patient presented IDLs, tubular BCAs and IDL/tubular BCA combined lesions. Luminal ductal cells of IDLs and tubular BCAs exhibited positivity for CK7, lysozyme, S100 and DOG1. In the non-tubular BCA group, few luminal cells exhibited such immunoprofile; they were mainly CK14-positive. Basal/myoepithelial cells of IDLs, tubular BCAs and non-tubular BCAs were positive for CK14, calponin, ?-SMA and p63; they were more numerous in BCA lesions. The in vitro study analyzed morphology and differentiation of myoepithelial cells by vimentin and SMA expressions, respectively, which were qualitatively assessed using indirect immunofluorescence. Myoepithelial cells showed polyhedral morphology in all extra cellular matrixes regardless of the supplementation of growth factors. These cells expressed SMA heterogeneously but when TGF- ?1 was added such expression increased. This modification did not show relationship with the type of extracellular matix. The viability of myoepithelial cells cultured on fibronectin matrix increased significantly with addition of TGF - ?1. Conclusions: IDL, tubular BCA and non-tubular BCA form a continuum of lesions in which IDLs are related closely to tubular BCA. In both, the immunoprofile of luminal and myoepithelial cells recapitulates the normal intercalated duct. The difference between the adenoma-like subset of IDLs and tubular BCA rests mainly on the larger numbers of myoepithelial cells in the latter. Our findings indicate that at least some BCAs can arise via IDLs. The cell culture studies suggest that the different matrixes do not influence the morphology and differentiation of myoepithelial cells. Among the growth factors studied, only TGF - ?1 was associated with an increased expression of SMA (cell differentiation) and a significant increase of the cellular viability associated with the fibronectin matrix / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Osley Paes de Almeida / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-24T19:48:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_ElizabeteBrasildos_D.pdf: 4850924 bytes, checksum: 48a213e7b4224d15baf0fd77d7f93c59 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A candidose é a micose mais comum da boca, estando associada a fatores predisponentes locais ou sistêmicos. Neste estudo verificamos o desenvolvimento de candidose em ratos portadores de carcinoma de língua. É controvertido na literatura a ocorrência e a relevância da infecção por Candida em lesões bucais como liquen plano, leucoplasias e carcinomas espinos celulares. De acordo com alguns trabalhos, a maior presença de Candida em leucoplasias está associada a maior severidade de displasias epiteliais (RENSTRUP, 1970; ]ONES & RUSSEL., 1973; ZHANG et al., 1994). Ratos normais e sialoadenectomizados foram pinceladas com 4NQO por 4 meses e posteriormente acompanhados até o desenvolvimento de carcinoma de língua. Suspensão de C albicans foi então inoculada na boca de ratos normais e portadores de carcinoma e a ocorrência de candidose verificada histologicamente após 24 e 48h. Nos mesmos períodos, leveduras foram recuperadas da boca de todos os animais e os dados foram expressos em ufc/ ml. A sialoadenectomia aumentou a quantidade de leveduras recuperadas, assim como o número de áreas de candidose. Os animais portadores de carcinoma de língua tiveram maior quantidade de leveduras na boca e de áreas de candidose, em relação aos respectivos controles. Nos animais com carcinoma, as candidoses ocorreram principalmente nas áreas de hiperqueratose, sendo pouco frequentes nas regiões de carcinoma francamente invasivos. Concluiu-se que lesões hiperqueratóticas da boca são mais susceptíveis à infecção por C albicans em relação ao epitélio normal, mas o papel no desenvolvimento de displasias epiteliais precisa ser melhor determinado. Num estudo paralelo ao acima descrito verificou-se a aderência. de C albicans, a permanência e o desenvolvimento de candidose na boca de ratos. A aderência de microrganismos é considerada etapa fundamental para o desenvolvimento de infecções. Os estudos de aderência de Candida são feitos in vitro, não havendo na literatura relatos da aderência in vivo. Ratos normais ou sialoadenectomizados, tratados ou não com tetraciclina foram inoculados na boca com suspensão de C. albicans e a aderência das leveduras no dorso da língua e o desenvolvimento de candidose foram avaliados histologicamente após 5, 15, 30, 60 min., e 4, 12, 24 e 48h. Também foi feita a recuperação da levedura presentes na boca nos períodos de 4 a 48h. Os resultados mostraram que a aderência de C. albicans ocorre principalmente na queratina mole das papilas verdadeiras, sobre a placa bacteriana presente nesta área. A xerostomia aumentou a quantidade de placa bacteriana nas papilas linguais e facilitou a aderência da C. albicans, assim como o desenvolvimento de candidose, aumentando também o número de leveduras recuperadas. O tratamento com tetraciclina diminuiu a aderência de Candida, mas aumentou a recuperação de C. albicans e o desenvolvimento de candidose. Concluiu-se que a aderência de C albicans ocorre principalmente através de bactérias e que o desenvolvimento de candidose está associado a maior quantidade de leveduras presentes na boca, que no caso deste trabalho ocorreu pela xerostomia e/ou antibioticoterapia. Outros estudos são necessários para se determinar quais são os mecanismos envolvidos numa aderência transitória ou que caminhe para a formação de candidose / Abstract: Candidosis is the most common fungal infection in the oral cavity, usually associated with local and systemic predisposing factors. ln this study we verified the development of candidiasis in the tongue of rats with carcinomas provoked by 4NQO. The occurrence and relevance of candidal infection in orallesions such as lichen planus, leukoplakias and carcinomas are still to be understood. lt is interesting that according to some works, the prevalence of Candida in leukoplakia is associated with more severe epithelial displasia (RENSTRUP, .1970; JONES & RUSSEL, 1973; ZHANG et al., 1994). Normal and sialoadenectomizad mice were painted with 4NQO during 4 months and thereafter they were observed until the development of carcinomas in the tongue, when they were innoculated in the mouth with a suspension of C albicans. The development of candidosis was verified histologically after 24 and 48h. Yeasts were recovered from the oral cavity of all rats and the results were expressed in ufc/ ml. Sialoadenectomy alone increased the number of yeasts recovered from the mouth and of areas with candidosis. Rats, normal and sialoadenectomizad, bearing carcinoma of the tongue had a higher number of yeasts in the mouth and of candidosis than the respective controls. Candidosis was observed mainly in areas with hiperqueratosis and was less frequente in regions of carcinoma. We concluded that hyperqueratotic lesions of the mouth are more susceptible to candidal infection than normal epithelium, but the role of C albicans in the development of epithelial displasia must be better understood. In a parallel study we verified the adherence of C albicans, its recovery from saliva and the development of candidosis in the rat tongue. The adherence of microorganisms is considered a fundamental step in infection. Most of the studies about candidal adherence to epithelial cells are in vitro and there are no records about the mechanisms in vivo. In this study, normal and sialoadenectomized rats, treated or not with tetracycline received one oral innoculation of a suspension of C albicans and the adherence of the yeasts and the development of candidosis were vetified histologically after 5,15,30 and 60 min., and 4, 12, 24 and 48h. The results showed that the adherence of C albicans occurred in the "soft" keratin of the true papillae of the tongue, and mainly on the bacterial plaque present on this area. Xerostomia caused na increase in bacterial plaque of the papillae and facilitated the adherence of C albicans and the development of candidosis. The treatment with tetracycline decreased bacterial plaque and the adherence of Candida to epithelial cells, but increased the number of yeasts recovered from the mouth of rats and the number of areas of candidosis. We concluded that the adherence of C albicans occurs mainly on the bacterial plaque of the papillae and that the development of candidosis is related to na increased number of yeasts present in the mouths of rats, caused in this study by xerostomia and/or antibiotictherapy / Doutorado / Biologia e Patologia Buco-Dental / Doutor em Odontologia

Orientador: Oslei Paes de Almeida / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:29:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ito_ValdirSeije_M.pdf: 3314229 bytes, checksum: 6622452343f04740f9badbbd576aa17d (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: Os efeitos da xerostomia, provocada pela retirada cirúrgica das glândulas salivares maiores, nas estruturas buscais foram estudados em ratos albinos Wistar. Houve significante aumento de cárie dental, sendo que nos dentes inferiores os índices foram bem mais elevados do que nos superiores. Não se observou alterações da mucosa bucal, ou modificações na evolução da doença periodontal provocada pela colocação de irritante gengival an cervical dos primeiros molares inferiores. Após a sialoadenectomia houve perda de grande parte da placa dental dos incisivos inferiores, o mesmo ocorrendo quando os animais xerostómicos foram alimentados com ração pulverizada ou deixados em jejum. Estes resultados sugerem que as secreções das glândulas salivares maiores não são essenciais para a integridade da mucosa oral do rato, e que o incisivoo inferior é interessante modelo para o estudo da formação e degradação da placa dental / Abstract: The effects of xerostomia, provoked by removal of the major salivary glands, were studied in Wistar albino rats. Sialodenectomy resulted in an increase in dental caries, particularly in the lower molars. No alterations in the oral mucosa were observed. The development of periodontal disease caused by the placement of gingival irritant in the cervical region of the first lower molars was unchanged. Sialodenectomy was followed by loss of dental plaque from the lower incisor, and this was not modified by fasting or feeding powdery chow. It is suggested that the major salivary gland secretions are not essential for the integrity of the oral mucosa of the rat, and that the lower incisor is an interesting model to study dental plaque formations and degradation / Mestrado / Patologia / Mestre em Ciências

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-01-23T15:04:32Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2499744 bytes, checksum: 53d7b61863a6e4086f9d8de02864e860 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-23T15:04:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2499744 bytes, checksum: 53d7b61863a6e4086f9d8de02864e860 (MD5) Previous issue date: 2016-06-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os carrapatos são artrópodes hematófagos obrigatórios de grande importância médica e veterinária. Estes artrópodes tem desenvolvido adaptações evolutivas que permitem aos mesmos a sobrevivência por longos períodos de tempo sem se alimentarem ou que, após se alimentarem até a ingurgitação, vivam com a presença de altos níveis de substâncias que estimulam o estresse oxidativo. Além disso, apresentam uma anatomia bem conciliada ao seu modo de vida e aquisição de alimentos. Dentre os principais órgãos do carrapato, as glândulas salivares apresentam grande repertório de proteínas, que desempenham papéis essenciais para o seu desenvolvimento e para a manutenção de sua relação com os hospedeiros vertebrados. Essas proteínas também podem facilitar a transmissão de agentes patogênicos aos hospedeiros. Nesse projeto, o sialome do carrapato Amblyomma sculptum foi analisado utilizando cromatografia líquida acoplada com a espectrometria de massas. Essa abordagem combinada permitiu a identificação de 501 proteínas, das quais, aproximadamente, 15% foram classificadas como proteínas secretadas putativas. As classes do grupo de proteínas secretadas putativas que mais se destacaram foram: a) família das proteínas ricas em glicina; b) família das enzimas secretadas e c) ferritinas. As proteínas ricas em glicina podem desenvolver várias funções, dentre elas, a formação do cone de cemento e a resposta a estresse. Proteínas vinculadas com o citoesqueleto, com a maquinaria de modificação proteica e com o transporte intracelular também foram identificadas, as quais foram reunidas no grupo “putative housekeeping proteins”. A diferença na abundância das proteínas entre os gêneros macho e fêmea, encontradas nas glândulas salivares dos carrapatos A. sculptum, foi indicada pela identificação de proteínas em apenas um dos sexos. As proteínas ricas em glicina, do citoesqueleto e chaperonas foram identificadas em maior número em machos do que em fêmeas, sugerindo que esse gênero esteja melhor preparado para a produção de cemento, resposta ao estresse, modificação proteica e transporte intracelular do que as fêmeas. A caracterização funcional das proteínas permitiu uma correlação dentro de um contexto biológico e facilitou um melhor entendimento sobre o sialome de carrapatos A. sculptum. Essa informação pode auxiliar na identificação de novos candidatos a alvos para o controle de carrapatos, no entanto, estudos adicionais devem ser realizados com o objetivo de melhorar o conhecimento das vias de controle das diferentes funções celulares. / Ticks are obligate hematophagous arthropods of great medical and veterinary importance. These arthropods have developed evolutionary adaptations that allow them to survive for long periods of time without feeding or, after feeding until engorgement, live with the presence of high levels of substances that stimulate oxidative stress. In addition, they have an anatomy well reconciled for their way of life and food acquisition. Among the major organs of the tick, the salivary glands contain a large repertoire of proteins, which play essential roles for the tick’s development and for the maintenance of their relationship with their vertebrate hosts. These proteins may also facilitate the transmission of pathogens to the host. In this project, the sialome of the Amblyomma sculptum tick was analyzed using liquid chromatography coupled with mass spectrometry. This combinatorial approach allowed for the identification of 501 proteins, of which approximately 15% were classified as putative secreted proteins. The classes of the group of putative secreted proteins that most stood out were: a) family of glycine-rich proteins; b) family of secreted enzymes; and c) ferritins. Glycine-rich proteins can perform several functions, including cement cone formation and stress response. Proteins linked to the cytoskeleton, the protein modification machinery and intracellular transport were also identified, which were classified in the putative housekeeping proteins group. The difference in the abundance of the proteins between the male and female gender found in the salivary glands of A. sculptum ticks was indicated by the identification of proteins in only one sex. Glycine-rich, cytoskeletal and chaperon proteins were identified in greater numbers in males than in females, suggesting that the male gender is better prepared for cement production, stress response, protein modification and intracellular transport than females. The functional characterization of the proteins allowed a correlation within a biological context and facilitated a better understanding of the sialome of A. sculptum ticks. This information may aid in the identification of novel candidates for tick control; however, additional studies should be carried out in order to better understand the pathways that control with the different cellular functions.

Orientador: Fernanda Klein Marcondes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-07T23:50:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Calil_CarolineMorini_D.pdf: 1987640 bytes, checksum: 39cab7ddd21afb917b161e3e495138ce (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Alterações emocionais têm sido relacionadas à ocorrência da halitose que é caracterizada pelo aumento na produção de compostos sulfurados voláteis (CSV) no arbucal exalado. Além disso, oscilações hormonais do ciclo menstrual também têm sido relacionadas a alterações na homeostasia bucal. Porém, ainda não está esclarecida a relação entre halitose, alterações emocionais e ciclo menstrual. O objetivo desse estudo foi avaliar a influência da ansiedade e do ciclo menstrual sobre a produção de CSV em homens (n=17) e em mulheres (n=14) nas fases pré-menstrual, menstrual e folicular, determinadas pelo método do calendário. A ansiedade foi induzida pelo "Video-Recorded Stroop Color-Word Test" (VRSCWT), que consiste na leitura, em 2 min, das cores em que 100 palavras designativas de cores estão pintadas, sendo que cada palavra apresentada encontra-se em cor diferente de seu significado. Por meio do questionário "Beck Anxiety Inventory" (BAI), foi avaliado o nível basal de ansiedade. A concentração bucal de CSV (halímetro), pressão arterial sistólica, diastólica, freqüência cardíaca, cortisol salivar, fluxo salivar e concentração total de proteínas salivares foram avaliados antes e apos o VRSCWT. Os resultados foram analisados utilizando-se análise de variância (p<0,05). De acordo com o BAI, os voluntários não apresentaram alterações nos níveis basais de ansiedade. Na condição basal, as concentrações de CSV foram maiores durante as fases menstrual (131 ± 14) e pré-menstrual (124± 15) em relação à fase folicular (123± 15) e homens (85± 15 ppb; p<0,05). Mulheres na fase pré-menstrual (0,26 ± 0,04) apresentaram menor fluxo salivar do que as mulheres nas fases menstrual (0,31 ± 0,04), folicular (0,33 ± 0,05) e homens (0,40±0,04 mL/min; p<0,05). A concentração total de proteínas salivares foi maior em homens (1,OO± 0,06, p<0,05) em comparação as fases do ciclo reprodutivo (menstrual = 0,77 ± 0,12; pré-menstrual = 0,70± 0,06; folicular =0,78 ± 0,10 mg/mL). Em homens, a pressão sistólica (125± 2; p<0,05) foi maior em relação às mulheres (prémenstrual = 108±2; menstrual = 110± 2; folicular = 110±2 rnrnHg). Ao contrário, homens apresentaram menor freqüência cardíaca (69± 1 bpm; p<0,05) em relação às mulheres (pré-menstrual = 80 ± 2; menstrual = 77 ± 3; folicular = 79±3 bpm). Foi observada maior concentração salivar de cortisol na fase menstrual (1,7 ±0,2; p<0,05) em comparação com as fases pré-menstrual (1,3± 0,13), folicular (1,4± 0,19) e homens (1,4 ± 0,07 /lg/dL). Nos homens, o VRSCWT induziu aumento na concentração bucal de CSV (97 ±11 ppb), pressão arterial sistólica (128 ±2 mmHg) e frequência cardíaca (74 ± 1 bpm), sem alteração na pressão arterial diastólica, fluxo salivar, concentrações salivares de proteínas e de cortisol salivar. Ao contrário, nenhuma diferença nas variáveis de resposta foi observada nas mulheres, após o VRSCWT (p>0,05). Os resultados demonstraram que a ansiedade pode contribuir para o aumento da produção de CSV em homens, e que o status hormonal de homens e mulheres pode participar deste processo / Abstract: Psychological symptoms have been pointed out as a factor, which induces halitosis, which is characterized by the increased production of volatile sulfur compounds (VSC) presented in the oral breathing. ln addition, hormonal fluctuation of the menstrual cycle has been show to affect oral homeostasis. However, the relationship among menstrual cycle, emotional factors and halitosis is not clarified. The aim of this study was to evaluate the influence of anxiety and menstrual cycle on the production of VSC in women (n=14) and in men (n=17). After approval by the ethics committee, volunteers with good oral and general health were submitted to the Video-Recorded Stroop Color-Word Test (VRSCWT) used to elicit anxiety. ln women, the test was performed on the pre-menstrual, menstrual and follicular phases of their regular reproductive cycles. The menstrual phases were determined by the calendar method. The baseline level of anxiety was measured through the "Beck Anxiety Inventory:' (BAl) before the VRSCWT. The VSC (ppb-halimeter), salivary flow (mL/min), total salivary protein concentration (mg/mL), systolic and diastolic blood pressure (SBP, DBP, mmHg), heart rate (HR, bpm) and salivary cortisol (ug/dL) measurements were performed before and after the application of the VRSCWT. Data were compared by Analysis of Variance (p<0.05). According to BAl, none of the volunteers presented any anxiety disorder diagnosis. During basal situation, VSC was higher during the menstrual (131 ± 14) and pre-menstrual (124± 15) phases when compared to men (85± 15) and women in follicular (123 ±15) phase (p<0.05). Salivary flow was lower duting pre-menstrual phase (0.26 ± 0.04; p<0.05) than menstrual (0.31 ± 0.04), follicular (0.33 ±0.05) phases and also compared to men (0.40 ± 0.04). Total salivary protein concentration was higher in men (1.00 ± 0.18, p>0.05) as compared to women in any menstrual phase (menstrual = 0.77 ± 0.12; pre-menstrual = 0.71 ±0.06; follicular = 0.78 ±0.18). SBP was higher in men (125 ± 2) as compared to women (pre-menstrual = 108 ± 2; menstrual = 110 ± 2; follicular = 111 ± 2). Heart rate was lower in men (69 ± 1) as compared to women in any phase of the menstrual cyc1e (pre-menstrual = 80 ± 2; menstrual = 77 ± 3; follicular =80 ± 3). Salivary cortisol was higher in women during menstrual phase (1.7 ± 0.2) in comparison with men (1.3 ± 0.07) and women in pre-menstrual (1.3±0.13) and follicular (1.4 ±0.19) phases. In men, the VRSCWT induced an increase in oral concentration of VSC (97 ±11, p<0.05) without changes in salivary flow (0.40 ±0.03) and protein concentration (1.00 ± 0.06) (p>0.05). These changes were associated with increases of SBP (128±1) and heart rate (74± 1) (p<0.05). Gn the contrary, in women, no differences in any parameter were observed after the VRSCWT (p>0.05). The results of the present study showed that, in men, the anxiety might contribute to production of VSC. Also, the hormonal status of men and women might be involved in this process / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutor em Odontologia