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L’objectif de la présente étude était d’évaluer un test d’estérase leucocytaire (LE) pour le diagnostic de l’endométrite subclinique chez les vaches Holstein en période postpartum. Les tests effectués à partir d’échantillons provenant soit de l’endomètre (UtLE) ou du col utérin (CxLE) ont été comparés à la cytologie endométriale (CE). Par ailleurs, deux méthodes d’évaluation des lames ont été comparées. Deux cent quatre vingt-cinq vaches Holstein de 5 troupeaux laitiers commerciaux ont été évaluées entre 21 et 47 jours en lait (JEL). Soixante sept vaches ont été diagnostiquées avec une endométrite clinique suite à un examen transrectal et vaginoscopique et ont été exclues de l’étude. Deux cent dix-huit vaches ont eu des prélèvements pour la CE et le test LE. La fonction ovarienne a été déterminée à la palpation transrectale. La banque de données utilisée pour chacune des vaches a été effectuée à partir du logiciel DSA (Dossier de Santé Animale) laitier. Le pourcentage de neutrophiles était significativement corrélé avec les scores de LE utérin et cervical. L’activité de CxLE et UtLE diminuait significativement avec les JEL, mais n’était pas associée au risque de gestation à 90 JEL (n= 186). Le pourcentage de neutrophiles mesuré à la CE entre 32 et 47 JEL était associé significativement au risque de gestation à 90 JEL (n=94, P=0.04). Pour la même période, selon une analyse de survie, les vaches avec >2,6% de neutrophiles à la CE étaient définies comme étant atteintes d’une endométrite subclinique avec une prévalence de 56%. Les résultats indiquent que le test d’estérase utérin ou cervical a une bonne concordance avec le pourcentage de neutrophiles à la CE. Une endométrite subclinique diagnostiquée par cytologie endometriale entre 32 et 47 JEL est associée à une réduction du risque de gestation au premier service. / The point toward this study was to determine the diagnostic test characteristics of the leukocyte esterase activity test for subclinical endometritis in postpartum Holstein dairy cows. The objectives were 1) to compare uterine leukocyte esterase activity and the endometrial cytology (EC), 2) to compare leukocyte esterase activity of the cervix (CxLE) and the uterus (UtLE), 3) Compare two methods of assessing the slides (i.e. an exhaustive method and a rapid method). Two hundred eighty five post partum Holstein cows from 5 commercial dairy herds had a post partum evaluation between 21 and 47 days in milk (DIM). Sixty seven cows where diagnosed with clinical endometritis by transrectal and vaginoscopy examinations and were excluded from the study. Two hundred eighteen cows were enrolled for endometrial cytology and esterase activity test. The ovarian status was determined by transrectal examination. Computerized databank, dairy DSA (Dossier de Santé Animale) indexing all the cows was used to retrieve individual information for analysis. The percentage of neutrophils was significantly correlated with the LE from the uterus and cervix. The LE from cervix and uterus decreased significantly with DIM, however, they were not statistically associated with pregnancy risk at 90 DIM (n=186). Between 32-47 DIM, the percentage of neutrophils and risk of pregnancy at 90 DIM were associated (n=94, P=0.04). For the same period, survival analysis identified cows with > 2.6 % neutrophils on EC as subclinical endometritis cows with a prevalence of 56%. The two methods for assessing the slides were correlated by 81%. Subclinical endometritis diagnosed by endometrial cytology between 32 and 47 DIM was associated with reduced risk of pregnancy at first service.

In der vorliegenden Studie wurde die Sanierung einer durch S. aureus verursachten Eutergesundheitsstörung in einem hessischen Milchviehbestand mittels klassischer Sanierungsmaßnahmen über einen Zeitraum von 18 Monaten begleitet. Durch konsequente Einhaltung der Sanierungsmaßnahmen nach dem Fünf-Punkte-Plan und die räumliche Trennung der Herde in eine S. aureus-positive und -negative Gruppe sank die S. aureus-Prävalenz im Betrieb innerhalb von 15 Monaten von 30% auf <1%. Nach 18 Monaten waren erstmalig keine Neuinfektionen mehr mit S. aureus zu verzeichnen. Zusätzlich zu den im Abstand von drei Monaten durchgeführten Viertelanfangsgemelk (VAG)- Gesamtbestandsuntersuchungen wurden Umweltproben bakteriologisch auf das Vorhandensein von S. aureus untersucht. Diese Untersuchungen verliefen ausschließlich mit negativem Ergebnis. Die im Untersuchungszeitraum asservierten 218 S. aureus-Isolate aus diesem Betrieb wurden genotypisch mittels PCR untersucht. Thermonuklease-Gen, Protein A-Gen (IgG-bindende Region) und Polymorphismen bei Protein A-Gen (Xr-Region) sowie Koagulase-Gen ermöglichten die Unterscheidung in sechs Typen. Zusätzlich wurden 80 dieser Isolate mittels Pulsfeldgelelektrophorese (Pfge, Gold Standard) typisiert. Es konnten zwei Pfge-Typen gefunden werden: Pfge-Typ I mit insgesamt 10 Subtypen (bei 78 Isolaten) und Pfge-Typ II (bei zwei Isolaten). Der Pfge-Typ II wurde ausschließlich bei einem Zukaufstier nachgewiesen, das vor der Einstallung in diesen Betrieb nicht zytobakteriologisch untersucht worden war. Die 12 unterschiedlichen Pfge-Typen bzw. -Subtypen wurden zusätzlich mittels Staphylokokken-Protein A- (spa)-Typisierung untersucht. Dabei zeigte sich, dass alle Subtypen des Pfge-Typs I dem spa-Typ t2067 zugeordnet werden konnten und der Pfge-Typ II dem spa-Typ t2112 entsprach. 92 weitere bovine S. aureus-Mastitisisolate wurden möglichst randomisiert über das Landesgebiet Hessens entnommen und mittels dieser Typisierungsmethode untersucht. Die Isolate stammten ebenfalls aus S. aureus-Problembetrieben und wurden aus VAG von (sub-) klinischen Mastitiden in Reinkultur isoliert. Insgesamt konnten 28 spa-Typen unterschieden werden. Durch den Algorithmus BURP wurden 57 dieser Isolate dem Clonal Complex CC543 zugeordnet und waren demnach genetisch eng miteinander verwandt. Der in dem Sanierungsbetrieb vorherrschende spa-Typ t2067 war dem CC543 nicht zuzuordnen. Die Anwendung der spa-Typisierung in der Routinediagnostik und damit die Möglichkeit der laborübergreifenden, möglichst zentralisierten Datendokumentation der Ergebnisse könnten zukünftig die Identifizierung besonders häufig vorkommender und damit hochkontagiöser S. aureus-Stämme ermöglichen.

Die subklinische Klauenrehe stellt als Ausgangspunkt für eine Vielzahl daraus resultierender Klauenerkrankungen einen wichtigen Faktor in Bezug auf Tierschutz und Wirtschaftlichkeit von Hochleistungsmilchkühen dar. Die Ätiologie und Pathogenese dieser komplizierten Klauenerkrankung ist bis heute noch nicht eindeutig geklärt. Eine Vielzahl von Faktoren kann die Klauenlederhaut im Sinne einer Reheentwicklung negativ beeinflussen. In der vorliegenden Arbeit sollte der Einfluss der negativen Energiebilanz nach der Kalbung und eines daraus resultierenden Fettmobilisationssyndroms auf die Entwicklung rehetypischer Anzeichen an den Klauen untersucht werden. Weiterhin sollte geprüft werden, inwieweit die thermographische Untersuchung der Klauen nach der Kalbung, also dem predistinierten Zeitpunkt für die Entwicklung einer Klauenrehe, in der Lage ist, Aufschluss über den Entzündungszustand der Lederhaut zu geben und dementsprechend als frühdiagnostisches Mittel zur Erkennung der subklinischen Klauenrehe Anwendung finden kann. Die Temperaturverteilung über die einzelnen Hauptklauen und die Veränderung dieser im Laufe der Frühlaktation, sowie Unterschiede zwischen primiparen und multiparen Tieren wurde untersucht. Hierfür wurden die Klauen von 123 Kühen und Färsen bzw. Jungkühen aus drei Milchviehanlagen mit ähnlichen Jahresleistungen und verschiedenen Stallböden in der ersten Woche nach der Kalbung, sowie nach Vollendung des zweiten Laktationsmonats bezüglich des Vorliegens einer Lahmheit und, nach der Durchführung einer funktionellen Klauenpflege, auf Anzeichen der subklinischen Klauenrehe durch Vergabe eines Klauenscores untersucht und zusätzlich mittels Thermographie der Fußungsfläche analysiert. Um den Einfluss des Stoffwechsels auf die Reheentwicklung definieren zu können, erfolgten im Zeitraum von 8 Wochen vor der Kalbung bis 8 Wochen nach der Kalbung in regelmäßigen Abständen Messungen der Rückenfettdicke sowie Blutprobenentnahme zur Bestimmung der jeweiligen Freien-Fettsäuren- (FFS), ß-Hydroxybutyrat- (BHB) und Glucosekonzentrationen. Um den Einfluss anderer Stoffwechselentgleisungen abzugrenzen, wurden weiterhin die Parameter Lactat, Gesamtprotein, Albumin, Harnstoff, Calcium, Creatinkinase (CK), Aspartataminotransferase (ASAT) und Lactatdehydrogenase (LDH) bestimmt. Bei der Beurteilung von Lahmheit und Reheanzeichen stellte sich eine signifikante Zunahme letztgenannter nach dem zweiten Laktationsmonat dar. Die Lahmheitsinzidenz nahm dagegen leicht ab. Gummiböden hatten insgesamt einen positiven Effekt auf die Reheentwicklung. Jungkühe wiesen deutlich stärkere rehetypische Veränderungen (Hämorrhagien, Gelbverfärbungen im Horn, weiches Horn) auf als ältere Tiere. Die rehetypischen Veränderungen konzentrierten sich dabei bei allen Probanden auf die hinteren Lateralklauen. Die Thermographie zeigte gravierende Differenzen zwischen den Vorder- und Hintergliedmaßen, sowie zwischen Lateral- und Medialklauen. Die Hinterklauen waren deutlich (p<0,0001) wärmer als die Vorderklauen. Die Lateralklauen der Hintergliedmaßen zeigten sich wärmer als die Medialklauen, während es sich an den Vorderklauen tendenziell umgekehrt verhielt. Im Laktationsverlauf ließ sich eine leichte Zunahme der Differenzen beobachten, wobei sich die Absoluttemperaturen kaum unterschieden. Obwohl die Verteilung von rehetypischen Veränderungen dem Muster der Temperaturverteilung über die Hauptklauen entsprach (hintere Lateralklauen hatten die meisten rehetypischen Veränderungen und die höchsten Temperaturen), konnte keine eindeutige Korrelation zwischen der Klauentemperatur nach der Kalbung und den sichtbaren Reheveränderungen acht Wochen später gefunden werden. Die Temperaturverteilung auf den einzelnen Hauptklauen zeigte in den meisten Fällen (77,3 %) einen um ca. 2-3°C wärmeren Ballenbereich (Rusterholzstelle) im Vergleich zur Klauenspitze. Bei 16,5 % der Klauen waren beide Bereiche gleichwarm (Temperaturunterschied < 1°C) und bei einem geringen Anteil (6,2 %) zeigte sich die Spitze als wärmste Stelle an der Fußungsfläche. Zwischen der Höhe der Rückenfettdicke, der FFS-, BHB- und Glucosekonzentrationen und der Entwicklung einer subklinischen Klauenrehe ergaben sich keine aussagekräftigen Korrelationen. Tendenziell waren eher unterkonditionierte Tiere von Klauenveränderungen betroffen. Schlussfolgerung: Obwohl die Temperaturverteilung auf der Fußungsfläche dem Verteilungsmuster rehetypischer Veränderungen entsprach, war die Thermographie nicht als frühdiagnostisches Mittel zur Erkennung der subklinischen Klauenrehe geeignet. Die Temperaturen zwischen Vorder- und Hinterklauen sowie zwischen Lateral- und Medialklauen unterschieden sich deutlich. Eine direkte Beeinflussung der Klauen durch das Fettmobilisationssyndrom konnte in den hier durchgeführten Untersuchungen nicht gefunden werden.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:48Z : No. of bitstreams: 1 Publico-10871.pdf: 288428 bytes, checksum: 1c97fa2e91133c59ce89adf43ddcefed (MD5) / A sindrome de Cushing (SC) endogena e rara. Pacientes com SC subclinica (SCS) apresentam hipercortisolismo sem manifestacoes clinicas. SC ocorre em 2-3% de diabeticos mal controlados. Estudamos 103 pacientes adultos obesos ambulatoriais com diabetes mellitus tipo 2 para avaliar alteracoes do cortisol e SCS. Todos coletaram cortisol salivar as 23:00h e cortisol salivar e serico apos teste de supressao com 1mg de dexametasona (DST). Pacientes cujos resultados de qualquer teste estavam no quintil superior (253ng/dL, 47ng/dL e 1,8ƒÊg/dL, respectivamente para cortisol salivar 23:00h e salivar e serico pos-DST) foram reavaliados. Os valores medios desse grupo encontravam-se 2,5 vezes acima dos valores dos demais pacientes. Apos um teste confirmatorio com 2mgx2dias DST a investigacao da SC foi encerrada para 61 pacientes com todos os testes normais e 33 com apenas um teste (falso) positivo. Todos os 8 pacientes com dois testes alterados apresentaram cortisol urinario normal, mas 3 deles mostraram maior probabilidade diagnostica de SCS (hipercortisolismo e alteracoes em exames de imagem). Contudo, o diagnostico final nao pode ser confirmado por cirurgia ou patologia em nenhum deles. Embora nao confirmatorios, os resultados deste estudo sugerem que a prevalencia de SCS seja maior em populacoes de risco do que na populacao geral. / Endogenous Cushing’s syndrome (CS) is unusual. Patients with subclinical CS (SCS) present altered cortisol dynamics without obvious manifestations. CS occurs in 2-3% of obese poorly controlled diabetics. We studied 103 overweight adult outpatients with type 2 diabetes to examine for cortisol abnormalities and SCS. All collected salivary cortisol at 23:00h and salivary and serum cortisol after a 1mg dexamethasone suppression test (DST). Patients whose results were in the upper quintile for each test (253ng/dL, 47ng/dL and 1.8ìg/dL, respectively for the 23:00h and post-DST saliva and serum cortisol) were re-investigated. Average values from the upper quintile group were 2.5- fold higher than in the remaining patients. After a confirmatory 2mgx2day DST the investigation for CS was ended for 61 patients with all normal tests and 33 with only one (false) positive test. All 8 patients who had two abnormal tests had subsequent normal 24h-urinary cortisol, and 3 of them were likely to have SCS (abnormal cortisol tests and positive imaging). However, a final diagnosis could not to be confirmed by surgery or pathology. Although not confirmatory, the results of this study suggest that the prevalence of SCS is considerably higher in populations at risk than in the general population. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Viviane Lima da Cunha (viviane@biblioteca.ufpb.br) on 2017-06-22T13:50:51Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4112160 bytes, checksum: f2ca9f24a32b735dccc3f777c3ef3dfb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-22T13:50:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 4112160 bytes, checksum: f2ca9f24a32b735dccc3f777c3ef3dfb (MD5) Previous issue date: 2017-02-21 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / OBJECTIVE: To evaluate the association of total carbohydrate intake, total fat and saturated fats with hsCRP levels in adolescents aged 10 to 14 enrolled in public schools in Joao Pessoa, Brazil. METHODOLOGICAL CONSIDERATIONS: This is an epidemiological cross-sectional, school-based study, carried out based on data collected from a subsample of adolescents of both sexes, aged from 10 to 14 years, enrolled in the 6th grade – middle school in 2014, of the Longitudinal Study on Sedentary Behavior, Physical Activity, Eating Habits and Adolescent Health - Study LONCAAFS, held in João Pessoa, Brazil. The final sample consisted of 779 students. Socioeconomic data were collected (age, sex, economic class and skin color), nutritional status (BMI), food consumption data (total carbohydrates, total fats and saturated fats) and hsCRP. RESULTS: 54.56% female, 70.34% were between 11 and 12 years of age, 60.12% were of economic class C and 71.43% of the students were brown. 70% (539) of the students with altered levels of hsCRP. Of the students evaluated, 54.36% (293) are female. The prevalence of inadequate consumption was 29.25% in carbohydrates, 35.70% of total fats and 75.22% of saturated fats exceeding. 2.70% of the sample was classified as being underweight and 34.01% was the sum of those who were overweight or obese together. No significant independent associations were found between hsCRP and total carbohydrates, or total fats, or saturated fats, as well as skin color in the statistical models created. Significant associations of hsCRP with BMI, economic class and age were found. CONCLUSION: It is not possible to affirm the existence of an association between the inadequate consumption of macronutrients and the increase of serum levels of hsCRP in a sample of adolescents from public schools in Joao Pessoa, Brazil. The results also show a strong association between altered levels of hsCRP with nutritional status, age, and economic class. / OBJETIVO: Avaliar a associação do consumo de carboidratos, gorduras totais e saturadas com níveis de proteína C-reativa ultrassensível (PCR-us) em adolescentes de 10 a 14 anos matriculados em escolas públicas de João Pessoa, Brasil. CONSIDERAÇÕES METODOLÓGICAS: Trata-se de um estudo epidemiológico transversal, de base escolar, realizado com dados coletados de uma subamostra do primeiro ano (2014) do Estudo Longitudinal sobre Comportamento Sedentário, Atividade Física, Hábitos Alimentares e Saúde de Adolescentes – Estudo LONCAAFS, realizado em João Pessoa, com adolescentes de ambos os sexos, faixa etária de 10 a 14 anos, matriculados no sexto ano do ensino fundamental II. A amostra foi composta por 779 estudantes. Foram coletados dados socioeconômicos (idade, sexo, classe econômica e cor da pele), estado nutricional (índice de massa corporal – IMC), de consumo alimentar (carboidratos totais, gorduras totais e gorduras saturadas) e PCR-us. RESULTADOS: 54,56% da amostra era do sexo feminino, 70,34% tinha entre 11 e 12 anos de idade, 60,12% era da classe econômica C e 71,43% dos alunos eram pardos. A prevalência de PCR-us alterada foi de 70% (539) dos alunos. Destes, 54,36% (293) são do sexo feminino. Prevalência de consumo inadequado de macronutrientes foi de 29,25% nos carboidratos, 35,70% de gorduras totais e 75,22% de gorduras saturadas. A prevalência de sobrepeso/obesidade foi de 34%. Nos modelos estatísticos elaborados não foram encontradas associações independentes significativas entre PCR-us e carboidratos totais, ou gorduras totais, ou gorduras saturadas, assim como a cor da pele e sexo. Foram encontradas associações significativas da PCR-us com IMC, classe econômica e idade. CONCLUSÃO: Não é possível afirmar a existência de associação entre o consumo inadequado de macronutrientes e o aumento dos níveis séricos de PCR-us em uma amostra dos adolescentes de escolas públicas de João Pessoa, Brasil. Os resultados também mostram forte associação entre os níveis alterados de PCR-us com o estado nutricional, idade e classe econômica.

The objective was to evaluate the effect of the type of milking and the environment in the quality of raw milk by identification the Somatic Cell Count - CCS in samples obtained from farms in the mesoregion of south goiano and correlate it with the different types of milk, and the milk components: fat, protein, lactose and total solids (ST). Furthermore, we sought to diagnose the prevalence of subclinical mastitis by CCS, evaluate the correlation between CCS and milking type with antimicrobial residues, and check the influence of season, temperature and humidity index (THI) and Equivalent Temperature Index (ITE) on the CCS. The research developed in farms with different types of milking, being divided into manual and mechanical milking. The datas were collected from January 2011 to December 2013, and in each property was collected a monthly sample in the expansion tank, a total of 8242 samples, which were later sent for analysis. The diagnosis of the milk quality held by electronic count of somatic cells, for the FossomaticTM® and the levels of the components were analyzed using the MilkoscanTM FT®, the detection of antibiotic residues was performed using the Delvotest-P and meteorological data were obtained from the National Institute of Meteorology - INMET in Catalão-GO station. Among the variables type of it milks and subclinical mastitis, there was dependent relationship (p <0.05). The milking mechanics was the one with a higher prevalence of subclinical mastitis with 58% (910) of the samples presented CCS> 300.000 cells/mL. Among the variables type of milking and CCS advocated by Instruction n°62/2011 (BRASIL, 2011), there was a significant relationship (p <0.05). Only 19,53% (1610) of the samples had CCS > 500.000 cells/mL. According to the statistical analysis, there was a positive correlation between CCS and fat and ST, however, there was a negative correlation between the CCS and the protein and lactose contents. The type of milking and the somatic cell count did not affect the presence or absence of antimicrobial residues. During the rainy season has become a CCS elevation compared to the dry season, but there was no correlation between CCS and environmental indices (ITE and ITU). Regarding environmental indices can be seen that with the increase of the ITU occurred a decrease in fat and an increase in ST and lactose. It can be concluded that the type of manual milking showed the lowest prevalence of subclinical mastitis in relation to milking and with elevated CCS is a reduction in the concentrations of protein and lactose and an increase in fat and total solids in the raw milk. / Objetivou-se avaliar o efeito do tipo de ordenha e do ambiente na qualidade do leite cru por meio da identificação da Contagem de Células Somáticas - CCS nas amostras obtidas das propriedades rurais da mesorregião do sul goiano e correlacioná-las com os diferentes tipos de ordenha, bem como os componentes do leite: gordura, proteína, lactose e sólidos totais (ST). Ademais, buscou-se também diagnosticar a prevalência da mastite subclínica por meio da CCS, avaliar a correlação entre CCS e tipo de ordenha com os resíduos de antimicrobianos, verificar a influência do período do ano, Índice de Temperatura e Umidade (ITU) e Índice de Temperatura Equivalente (ITE) sobre a CCS. A pesquisa desenvolveu-se em fazendas com diferentes tipos de ordenha, sendo essas divididas em ordenha manual e mecânica. O trabalho de campo foi realizado de janeiro de 2011 a dezembro de 2013, sendo que em cada propriedade foi coletada uma amostra mensal no tanque de expansão, perfazendo um total de 8242 amostras, que posteriormente, foram enviadas para análise. O diagnóstico da qualidade do leite realizou-se por meio da CCS, pelo aparelho FossomaticTM®, os teores dos componentes foram analisados utilizando-se o MilkoscanTM FT®, a detecção de resíduos de antimicrobianos foi realizada através do Delvotest-P e os dados meteorológicos foram obtidos do Instituto Nacional de Meteorologia- INMET na estação de Catalão-GO. Entre as variáveis tipo de ordenha e mastite subclínica, houve relação de dependência (p<0,05). A ordenha mecânica foi a que obteve maior prevalência de mastite subclínica, 58% (910) com CCS > 300.000 células/mL. Entre as variáveis tipo de ordenha e a CCS preconizada pela Instrução Normativa n°62/2011 (BRASIL, 2011), houve relação significativa (p<0,05). Apenas 19,53% (1610) apresentaram CCS > 500.000 células/mL. De acordo com a análise estatística, existiu correlação positiva entre a CCS e o teor de gordura e ST, porém houve uma correlação negativa entre a CCS e os teores de proteína e lactose. O tipo de ordenha e a contagem de células somáticas não interferiram na presença ou ausência de resíduos de antimicrobianos. No período da chuva tem-se uma elevação de CCS se comparado ao período da seca, porém não houve correlação entre CCS e os índices ambientais (ITE e ITU). Em relação aos índices ambientais pode-se observar que com a elevação do ITU ocorreu uma redução nos teores de gordura e ST e um aumento no teor de lactose. Pode-se concluir que o tipo de ordenha manual obteve a menor prevalência de mastite subclínica em relação à ordenha mecânica e com a elevação da CCS tem-se uma redução nas concentrações dos teores de proteína e lactose e um aumento nos teores de gordura e sólidos totais do leite cru. / Mestre em Ciências Veterinárias

Os objetivos do presente estudo foram os de verificar a validade do método de reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR) para detectar e quantificar o Staphylococcus aureus em amostras de leite conservadas com bronopol oriundas de quartos mamários bovinos subclinicamente infectados, e de avaliar os efeitos da presença e da quantidade de células da bactéria sobre a contagem de células somáticas (CCS), a composição do leite (lactose, gordura, proteína bruta, proteína verdadeira e caseína), e a produção de leite de quartos mamários bovinos subclinicamente infectados pelo patógeno. Para a quantificação do S. aureus e das células somáticas bovinas por meio do qPCR, foi utilizado leite cru bovino para o preparo dos padrões como meio de diluição da inoculação seriada de células somáticas e do S. aureus ATCC 29213, e construídas as equações log10UFC = 37,86 23,54 log10CtSAU e log10CCS = 49,3 - 34,0 log10CtBMCB, com base nos resultados obtidos pelas metodologias de referência para cada procedimento. Para testar a equivalência dessas equações aos respectivos métodos de referência, determinar a sensibilidade e especificidade analíticas e a repetibilidade do método proposto, foram coletadas amostras de leite dos quartos mamários de 60 animais de 2 rebanhos leiteiros da região de Pirassununga dos quais se determinou previamente a ocorrência de casos subclínicos de mastite por S. aureus. Dos quartos mamários também foram mensuradas as produções e coletadas amostras de leite para análise de composição, diagnóstico da mastite, e determinação da sensibilidade e especificidade diagnósticas do procedimento de qPCR estabelecido no estudo. Cada amostra foi submetida à análise de composição, CCS, cultura microbiológica, contagem em placas do S. aureus, processadas para a extração do DNA genômico bovino e do S. aureus, e submetida à reação de qPCR. Para análise da concordância entre os resultados obtidos pelos métodos de referência para o diagnóstico da mastite por S. aureus e o de qPCR foi utilizado o teste Kappa. Para avaliação da equivalência das contagens obtidas pelos métodos de referência do S. aureus e de células somáticas bovinas, foi utilizado o teste das diferenças de Bland-Altman. Para a identificação do efeito da infecção subclínica pelo S. aureus sobre a composição e produção de leite do quarto mamário afetado foi utilizada a análise da variância num delineamento em parcelas subdivididas em faixas. Para estimar o grau de relação entre as contagens de S. aureus, a CCS, produção e composição do leite produzido pelo quarto mamário afetado foi utilizado o coeficiente de correlação de Pearson. A correlação entre os resultados de contagem de células somáticas bovinas determinados pelos métodos de rotina e de qPCR para a quantificação de células somáticas apresentou coeficiente r = - 0,978 (P < 0,001). A correlação entre os resultados da contagem do S. aureus ATCC 29213 determinados pelos métodos de rotina e de qPCR para a quantificação do patógeno apresentou coeficiente r = - 0,989 (P < 0,001). A especificidade analítica do qPCR para a detecção do S. aureus em amostras de leite frente a Escherichia coli, Enterococcus sp., Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, os estafilococos coagulase-negativa, e as espécies coagulase-positiva Staphylococcus hyicus e Staphylococcus intermedius foi de 100%. O método de qPCR aplicado à detecção de Staphylococcus aureus ATCC 29213 em amostras de leite é replicável e apresentou sensibilidade analítica com limite de detecção para a faixa de 10 UFC/mL à 4,2 x 106 UFC/mL. Em amostras de leite conservadas com bronopol provenientes de quartos mamários subclinicamente infectados, o S. aureus pôde ser detectado, mas não pôde ser quantificado pelo método de qPCR. Nessas amostras, a CCS pôde ser determinada de forma equivalente ao método de rotina. A CCS independe da contagem de S. aureus viáveis, mas foi observada correlação linear e negativa entre o número total de células do patógeno e a CCS. A mastite subclínica pelo S. aureus aumentou a CCS nos quartos mamários, mas não alterou a composição do leite. A doença diminuiu a produção de leite e de gordura dos quartos mamários anteriores acometidos pela infeção, mas não se observou efeito da interação entre o posicionamento da glândula e a infecção sobre a produção de leite. Houve correlação entre as concentrações de lactose (r = 0,42; P = 0,0051), de gordura (r = 0,46; P = 0,0016), de produção de gordura (r = 0,49; P = 0,001), e de leite com produção ajustada para o teor de 3,5% de gordura (r = 0,41; P = 0,006), e o número de S. aureus presentes na amostra de leite. / The objectives of this study were to verify the validity of the real-time polymerase chain reaction (qPCR) to detect and quantify Staphylococcus aureus in bronopol-preserved milk samples from subclinically infected mammary quarters, and to assess the effects of the presence and amount of the pathogen on the somatic cell count (SCC), the composition of milk and milk yield of bovine mammary quarters subclinically infected by the pathogen. In order to quantify S. aureus and bovine somatic cells through qPCR, raw bovine milk was used as a means of serial inoculation media of somatic cells and S. aureus ATCC 29213. From that, equations based on the reference methods for each procedure were built, log10UFC = 37,86 23,54 log10CtSAU and log10CCS = 49,3 - 34,0 log10CtBMCB, respectively. To test their equivalence with the reference methods, determine the analytical sensitivity and specificity, and repeatability of the proposed method, milk was sampled from quarters of 60 animals from two dairy herds in Pirassununga, where subclinical S. aureus mastitis cases had been previously diagnosed. Also, quarter milk yield had been measured and samples collected for milk composition analysis, diagnosis of mastitis, sensitivity and specificity of the procedure established in the study had been determined. Each sample was subjected to composition analysis, SCC, microbiological culture, plate counting of S. aureus, DNA extraction, and subjected to qPCR reaction. Agreement between results from reference methods and qPCR for the diagnosis of mastitis by S. aureus was assessed by Kappa test. Equivalence between S. aureus, SCC scores obtained by reference and qPCR was assessed with Bland-Altman procedures. The effect of S. aureus subclinical infection on milk composition and milk yield of affected quarters was measured using a strip plot design. To estimate the degree of relationship between the counts of S. aureus, SCC, yield and composition of the milk from affected quarters was assessed by the Pearson Correlation. Correlation between SCC determined by routine methods and qPCR was r = - 0.978 (P <0.001). Correlation between S. aureus ATCC 29213 determined by routine methods and qPCR was r = - 0.989 (P <0.001). Analytical specificity of qPCR to detect S. aureus in milk samples against Escherichia coli, Enterococcus sp., Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, coagulase-negative staphylococci and coagulase-positive species, Staphylococcus hyicus and Staphylococcus intermedius was 100%. The use of the qPCR to detect S. aureus ATCC 29213 in milk samples is replicable. Analytical sensitivity detection limit of the method ranged from 10 CFU/mL to 4.2 x 106 CFU/mL. S. aureus could be detected, but not quantified by qPCR in bronopol-conserved milk samples from subclinically infected quarters. In these samples, SCC could be determined by qPCR as it had been done by routine method. SCC was not dependent on S. aureus viable cells, but a negative linear correlation between the total number of cells of the pathogen and SCC was observed. S. aureus subclinical mastitis increased quarters SCC, but did not change milk composition. The disease decreased quarter milk and fat yield, but no interaction effect was observed between the gland positioning and S. aureus subclinical infection on milk production. Correlations between lactose (r = 0.42, P = 0.0051), fat (r = 0.46, P = 0.0016), fat yield (r = 0.49, P = 0.001), and 3.5% fat adjusted milk yield (r = 0.41, P = 0.006), and the number of S. aureus present in the milk sample were observed.

A mastite subclínica (MS) é a doença mais prevalente em rebanhos leiteiros e pode ser identificada pela contagem de células somáticas (CCS) individual das vacas. A partir disso, indicadores podem ser calculados como, por exemplo, prevalência e incidência. A prevalência diz respeito à proporção do rebanho infectada em determinado momento, enquanto que a incidência estima a taxa de novas infecções intramamárias ao longo do tempo. Altos valores de prevalência e incidência acabam resultando em elevada CCS do tanque de resfriamento (CCST), que por consequência leva a penalizações oriundas dos programas de pagamento por qualidade do leite (PPQL). Desta forma, estimar os valores atuais de prevalência e incidência de MS relacionados com valores futuros de CCST e as perdas financeiras oriundas dos PPQLs se torna importante para estimular a melhoria da qualidade do leite produzido no Brasil. Portando, o objetivo deste trabalho é estimar os indicadores epidemiológicos de MS em rebanhos leiteiros brasileiros, além prever a CCST relacionando-a as perdas financeiras devidas ao PPQL. Para isso, foram utilizados dois bancos de dados, sendo o primeiro com dados de CCS individual de vacas para estimação da prevalência e incidência de MS, e o segundo com dados de CCST para a previsão e cálculo de perdas financeiras devido ao PPQL. Como análise estatística, foi utilizado o modelo linear generalizado misto para comparar a prevalência e incidência de MS entre anos, regiões, tamanho de rebanhos e categorias de número de testes enviados durante o período de estudo, além de modelos de séries temporais para previsão da CCST e regressão linear múltipla para prever a probabilidade de mudança de classe de pagamento por qualidade do leite do PPQL. Os resultados encontrados indicam que, ambos, prevalência e incidência de MS permaneceram elevados e com leve tendência de aumento ao longo dos anos estudados, sendo que não houve diferenças entre regiões e tamanho de rebanhos. Por outro lado, rebanhos que realizaram mais testes ao longo do período estudado apresentaram menor prevalência, mostrando a importância da análise rotineira de CCS individual. Para CCST, os valores tem se mantido altos nos recentes anos e sem tendência de melhora. A probabilidade de mudança de classe foi fortemente afetada pela média e desvio padrão de CCST para as classes 1 e 2 (1.000 a 200.000 e 201.000 a 400.000 céls/mL, respectivamente). Os modelos de séries temporais indicaram que em algum ponto do ano, as fazendas não podiam permanecer na sua classe atual do PPQL e acumulavam perdas financeiras. Por fim, este estudo permite concluir que prevalência e incidência de MS estão elevadas e não melhoram ao longo dos anos, sendo que isto acaba elevando os valores de CCST. Além disso, existem perdas financeiras em todas as classes do PPQL, mostrando que os produtores não tem sido eficientes em captar a bonificação máxima dos PPQLs. Por isso, o desenvolvimento de programas de qualidade do leite deve ser uma prioridade em busca da melhoria da qualidade do leite de rebanhos brasileiros. / Subclinical mastitis (SM) is the most prevalent disease in dairy herds and can be identified by individual somatic cell counts (SCC) of cows. From this, indicators can be calculated as, for example, prevalence and incidence. Prevalence refers to the number of infected cows in a herd at a given time, while the incidence estimates the rate of new intramammary infections over time. High prevalence and incidence values result in high bulk tank SCC (BTSCC), which consequently leads to penalties from payment programs based on milk quality (PPBMQ). In this way, estimating current values of prevalence and incidence of SM related to future values of BTSCC and financial losses from PPBMQs becomes important to stimulate the improvement of the quality of milk produced in Brazil. Therefore, the objective of this study is to estimate the epidemiological indicators of SM in Brazilian dairy herds, besides to predicting the BTSCC and relating it to the financial losses due to the PPBMQ. For this, two databases were used, the first one with individual SCC data from cows to estimate the prevalence and incidence of SM, and the second with BTSCC data for prediction and calculation of financial losses due to PPBMQ. For statistical analysis, the mixed generalized linear model was used to compare the prevalence and incidence of SM between years, regions, herd size and number of test-day categories sent during the studied period, as well as time series models for prediction of BTSCC and multiple linear regressions to predict the probability of changing the current payment class for milk quality. The results indicate that both prevalence and incidence of SM remained high and with a slight tendency to increase over the years studied, and there were no differences between regions and herd sizes. On the other hand, herds that performed more test-day during the studied period presented a lower prevalence, showing the importance of the routine analysis of individual SCC. For BTSCC, values have remained high in recent years and no trend for improvement. The probability of class change was strongly affected by the mean and standard deviation of BTSCC for classes 1 and 2 (1,000 to 200,000 and 201,000 to 400,000 cells/mL, respectively). Time series models indicated that at some point of the year, farms could not remain in their current class and accumulated financial losses due to PPBMQ. Finally, this study allows to conclude that the prevalence and incidence of SM are high and do not improve over the years, and this ends up increasing the BTSCC values. In addition, there are financial losses in all classes of PPBMQ, showing that producers have not been efficient in capturing the maximum PPBMQs bonus. Therefore, the development of milk quality programs should be a priority in order to improve the quality of milk from Brazilian herds.

INTRODUÇÃO: Infertilidade atinge aproximadamente 15% dos casais em idade reprodutiva e afeta de maneira profunda a vida dessas pessoas. Dentre as causas identificáveis de infertilidade masculina, a varicocele é a mais frequente e acomete cerca de 40% dos homens inférteis ou subférteis. Um dos maiores desafios na abordagem cirúrgica da varicocele é a identificação de indivíduos que apresentarão maior benefício com o tratamento, uma vez que muitos pacientes não apresentam melhora da análise seminal. OBJETIVOS: Identificar um padrão histológico testicular como prognóstico da melhora da capacidade reprodutiva em pacientes submetidos à varicocelectomia microcirúrgica. METODOLOGIA: Estudo retrospectivo composto pela análise de 60 biópsias testiculares bilaterais de homens inférteis atendidos em clínica especializada de fertilidade masculina, entre os anos de 2006 e 2014. Como critérios de inclusão foram considerados homens com diagnóstico de varicocele clínica e subclínica entre 19 e 50 anos de idade com resultados de análise histopatológica testicular. Os sujeitos de pesquisa foram divididos em dois grupos. Grupo 1: homens com diagnóstico de varicocele subclínica (n = 20). Grupo 2: homens com diagnóstico de varicocele clínica (n =40). Foram excluídos do estudo homens com diagnóstico de criptorquidia, azoospermia obstrutiva e não-obstrutiva, usuários de drogas e anabolizantes, além de pacientes portadores de doenças sexualmente transmissíveis e de neoplasias no trato geniturinário. Os participantes foram submetidos ao exame físico urológico com a avaliação do volume testicular por meio de ultrassonografia da bolsa escrotal com Doppler-Colorido. O diagnóstico da varicocele foi realizado por meio da palpação cuidadosa do plexo pampiniforme com o paciente em posição ortostática. A manobra de Valsava foi utilizada para a classificação clínica do grau de varicocele. Para a determinação de um padrão histológico capaz de predizer a melhora da capacidade reprodutiva, foram criados valores de corte que associam os scores de Johnsen, os índices de Copenhagen e o volume testicular à melhora dos parâmetros seminais. RESULTADOS: No grupo 1, para a melhora da concentração espermática o score de Johnsen deve ser superior a 8,2 (lado esquerdo) e o volume testicular acima de 12,8 mL (lado direito). Adicionalmente, para a avaliação da motilidade total de espermatozoides os scores de Johnsen devem ser superiores a 8,2 (bilateral) e o dígito II de Copenhagen inferior a 2,5 em ambos os testículos. Todavia, para a motilidade progressiva de espermatozoides o score de Johnsen deve ultrapassar a 9,1 (bilateral) e na avaliação da morfologia espermática, este deve se apresentar acima de 7,9 e com volume testicular acima de 13,6 mL (lado direito). Quanto aos valores de corte obtidos no grupo 2, para a concentração de espermatozoides, os scores de Johnsen devem ser superiores a 5,5 com volume testicular acima de 11,5 mL em ambos os testículos. Finalmente, quanto à motilidade espermática total e progressiva, o dígito III do índice de Copenhagen deve ser inferior a 1,5 (lado direito). CONCLUSÃO: Valores prognósticos da melhora da capacidade reprodutiva obtidos por meio de biópsia testicular podem auxiliar com eficácia no prognóstico e na avaliação dos pacientes candidatos à correção microcirúrgica da varicocele / BACKGROUND: Infertility affects approximately 15% of couples in reproductive age and profoundly changes the lives of these people. Among the identifiable causes of male infertility, varicocele is the most common and affects about 40% of infertile or subfertile men. One of the challenges in the surgical approach is the identification of individuals who will present benefits with the treatment, since many patients do not show improvement of semen analysis. OBJECTIVE: To identify a testicular histological pattern as prognostic value of improved reproductive capacity in patients submitted to microsurgical correction of varicocele. METHODS: we retrospectively analyzed bilateral testicular biopsies of 60 men attending specialized clinic of male fertility between the years 2006 and 2014. As inclusion criteria were considered men diagnosed with clinical and subclinical varicoceles between 19 and 50 years old with results of testicular histopathology and seminal analysis. The patients were divided into two groups. Group 1: Men diagnosed with subclinical varicocele (n = 20). Group 2: men diagnosed with clinical varicocele (n = 40). Men diagnosed with cryptorchidism, obstructive and non-obstructive azoospermia, users of drugs and anabolic steroids were excluded of the study. All Participants were submitted to urological physical examination with the evaluation of testicular volume by ultrasonography of the scrotum with Color Doppler. The diagnosis of varicocele was performed by careful palpation of pampiniform plexus with the patient in standing position. The Valsalva maneuver was used to classify the grade of varicocele. The determination of a testicular histological pattern as prognostic value of the improved reproductive capacity was performed by the creation of cut-off values that associate Johnsen scores, Copenhagen indices and testicular volume to improvement in semen parameters. RESULTS: In Group 1, for improvement of sperm concentration, the Johnsen score must be greater than 8.2 (in the left testicle) and testicular volume must be greater than 12.8 mL (in the right testicle). Concerning evaluation of sperm total motility, the Johnsen score must be greater than 8.2 (bilateral) and digit II of Copenhagen indices must be less than 2.5 (bilateral). However, for sperm progressive motility, the Johnsen score must exceed 9.1 (bilateral) and evaluation of sperm morphology must be greater than 7.9 with right testicular volume greater than 13.6 mL. In Group 2, the cut-offs values for sperm concentration indicates that Johnsen scores must be greater than 5.5 with testicular volume greater than 11.5 mL in both testicles. Finally, regarding the sperm total and progressive motility, the digit III of Copenhagen indice must be less than 1.5 (in the right testicle). CONCLUSION: Prognostic values of improved reproductive capacity obtained from testicular biopsy can assist effectively in the prognosis and evaluation of patients candidates for microsurgical correction