Jacaranda decurrens Cham., Jacaranda caroba (Vell.) DC. e Piper umbellatum L. são plantas nativas do Brasil, presentes no estado de São Paulo, com relatos de uso popular para atividade antiúlcera. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antiúlcera de J. caroba, J. decurrens e formulações de nanocápsulas contendo P. umbellatum. Também pretendeu-se caracterizar a fitoquímica de tais formulações e extratos. Adicionalmente, foi avaliada a toxicidade aguda e subaguda de J. caroba. Os extratos de Jacaranda apresentaram compostos fenólicos em seus perfis cromatográficos obtidos por CCD e CLAE, característicos para cada espécie. Os diferentes extratos de J. caroba variaram sua composição química conforme a procedência e idade da planta. As espécies J. decurrens e J. caroba de três diferentes regiões não apresentaram ação antiúlcera aguda em ratos em modelo de indução por etanol acidificado, embora o extrato e as frações de J. caroba apresentaram potencial atividade anti Helicobacter pylori, com CIM variando entre 125 e 1.000 µg/mL. O extrato de J. caroba não promoveu sintomas de toxicidade aguda e subaguda em ratos. A DL50 observada foi maior que 5.000 mg/kg. Não foram relatadas alterações significativas na aparência macroscópica e peso dos órgãos, porém houve indicação de atividade mutagênica em teste de Ames na linhagem TA98 de S. typhimurium, o qual apresentou uma tendência dose-resposta para concentrações entre 7,5 e 15,0 mg/placa após ativação metabólica (S9). A formulação de nanocápsulas de poli-ε- caprolactona com extrato de P. umbellatum apresentou partículas com diâmetro médio de 181,6 ± 0,9 nm e potencial zeta de -31 ± 4 mV. Através de análise por CLAE observou-se maior eficiência de encapsulamento para a porção mais apolar da fração, enquanto que os compostos mais polares ficaram dispersos no meio. As nanocápsulas poliméricas apresentaram atividade gastroprotetora mesmo sem a adição de ativos e tiveram sua atividade aumentada pela fração clorofórmica de P. umbellatum. / Jacaranda decurrens Cham., Jacaranda caroba (Vell.) DC. and Piper umbellatum L. are native plants in Brazil, present in the state of São Paulo, with popular usage reports for anti-ulcer activity. This study aimed to evaluate the anti-ulcer activity of J. caroba, J. decurrens and nanocapsules formulations containing P. umbellatum. Also, we intended to characterize the phytochemistry of such formulations and extracts. Additionally, we evaluated the acute and subacute toxicity of J. caroba. Extracts from Jacaranda presented phenolic compounds in their chromatographic profiles obtained by TLC and HPLC, with variations between species. Samples of J. caroba extracts showed different chemical composition according to the origin and age of the plant. The species J. decurrens and J. caroba from three different regions showed no acute anti-ulcer action when tested in rats by acidified ethanol induction model. However, extract and fractions from J. caroba showed potential anti Helicobacter pylori activity, with MIC ranging from 125 and 1,000 ug/mL. J. caroba extract did not cause symptoms of acute and subacute toxicity in rats. The DL50 was determined above 5,000 mg/kg. Also, there were no significant changes to the macroscopic appearance of organs or changes in their weights. Meanwhile, an indication of mutagenic activity was observed in the Ames test. The TA98 strain of S. typhimurium, showed a tendency of dose-response for concentrations between 7.5 and 15.0 mg/plate after metabolic activation (S9). The nanocapsules formulation of poly-ε-caprolactone containing P. umbellatum extract had an average particle diameter of 181.6 ± 0.9 nm and zeta potential of -31 ± 4 mV. HPLC analysis showed better entrapping efficiency for the more apolar portion of the fraction, while the more polar compounds were dispersed in the medium. The polymeric nanocapsules showed gastroprotective activity even without the addition of active molecules and had their activity increased by chloroform fraction of P. umbellatum.

Jacaranda decurrens Cham., Jacaranda caroba (Vell.) DC. e Piper umbellatum L. são plantas nativas do Brasil, presentes no estado de São Paulo, com relatos de uso popular para atividade antiúlcera. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antiúlcera de J. caroba, J. decurrens e formulações de nanocápsulas contendo P. umbellatum. Também pretendeu-se caracterizar a fitoquímica de tais formulações e extratos. Adicionalmente, foi avaliada a toxicidade aguda e subaguda de J. caroba. Os extratos de Jacaranda apresentaram compostos fenólicos em seus perfis cromatográficos obtidos por CCD e CLAE, característicos para cada espécie. Os diferentes extratos de J. caroba variaram sua composição química conforme a procedência e idade da planta. As espécies J. decurrens e J. caroba de três diferentes regiões não apresentaram ação antiúlcera aguda em ratos em modelo de indução por etanol acidificado, embora o extrato e as frações de J. caroba apresentaram potencial atividade anti Helicobacter pylori, com CIM variando entre 125 e 1.000 µg/mL. O extrato de J. caroba não promoveu sintomas de toxicidade aguda e subaguda em ratos. A DL50 observada foi maior que 5.000 mg/kg. Não foram relatadas alterações significativas na aparência macroscópica e peso dos órgãos, porém houve indicação de atividade mutagênica em teste de Ames na linhagem TA98 de S. typhimurium, o qual apresentou uma tendência dose-resposta para concentrações entre 7,5 e 15,0 mg/placa após ativação metabólica (S9). A formulação de nanocápsulas de poli-ε- caprolactona com extrato de P. umbellatum apresentou partículas com diâmetro médio de 181,6 ± 0,9 nm e potencial zeta de -31 ± 4 mV. Através de análise por CLAE observou-se maior eficiência de encapsulamento para a porção mais apolar da fração, enquanto que os compostos mais polares ficaram dispersos no meio. As nanocápsulas poliméricas apresentaram atividade gastroprotetora mesmo sem a adição de ativos e tiveram sua atividade aumentada pela fração clorofórmica de P. umbellatum. / Jacaranda decurrens Cham., Jacaranda caroba (Vell.) DC. and Piper umbellatum L. are native plants in Brazil, present in the state of São Paulo, with popular usage reports for anti-ulcer activity. This study aimed to evaluate the anti-ulcer activity of J. caroba, J. decurrens and nanocapsules formulations containing P. umbellatum. Also, we intended to characterize the phytochemistry of such formulations and extracts. Additionally, we evaluated the acute and subacute toxicity of J. caroba. Extracts from Jacaranda presented phenolic compounds in their chromatographic profiles obtained by TLC and HPLC, with variations between species. Samples of J. caroba extracts showed different chemical composition according to the origin and age of the plant. The species J. decurrens and J. caroba from three different regions showed no acute anti-ulcer action when tested in rats by acidified ethanol induction model. However, extract and fractions from J. caroba showed potential anti Helicobacter pylori activity, with MIC ranging from 125 and 1,000 ug/mL. J. caroba extract did not cause symptoms of acute and subacute toxicity in rats. The DL50 was determined above 5,000 mg/kg. Also, there were no significant changes to the macroscopic appearance of organs or changes in their weights. Meanwhile, an indication of mutagenic activity was observed in the Ames test. The TA98 strain of S. typhimurium, showed a tendency of dose-response for concentrations between 7.5 and 15.0 mg/plate after metabolic activation (S9). The nanocapsules formulation of poly-ε-caprolactone containing P. umbellatum extract had an average particle diameter of 181.6 ± 0.9 nm and zeta potential of -31 ± 4 mV. HPLC analysis showed better entrapping efficiency for the more apolar portion of the fraction, while the more polar compounds were dispersed in the medium. The polymeric nanocapsules showed gastroprotective activity even without the addition of active molecules and had their activity increased by chloroform fraction of P. umbellatum.

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-06-02T20:29:26Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Allana Souza Pereira - 2015.pdf: 1763326 bytes, checksum: 42ca3d39923194187444a08c3a9a330c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-06-03T12:46:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Allana Souza Pereira - 2015.pdf: 1763326 bytes, checksum: 42ca3d39923194187444a08c3a9a330c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-03T12:46:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Allana Souza Pereira - 2015.pdf: 1763326 bytes, checksum: 42ca3d39923194187444a08c3a9a330c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-11-13 / The use of plants is a bequest from popular culture and perpetuated from generation to the present day, the population uses plants with a possible activity in order to treat several infectious and metabolic diseases and it is dated since the Antiquity. The use of plants and natural products has been replaced by the use of synthetic sybstances through the years, but the use of natural products is returning daily with a use of plants in the form of teas and potions especially among the population with less access to terapeutic wherewithal. The Synadenium umbellatum is used in Brazil by the by the possible antitumor, antiinflammatory, antimicrobial, antiviral and antiparasitic activities from your latex. There are few studies to investigate the possible bioactivity from this plant, and no studies have investigate its compounds. The present study performed analysis by chromatographic methods in order to elucidate the composition of the S. umbellatum latex, by dividing it into Ethyl Acetate, Ethanolic, Chloroform and Hexanic fractions and evaluating the potential antiparasitic activity of this fractions in promastigotes and amastigotes of Leishmania amazonensis, and its interference the release of Nitric Oxide by infected macrophages infected in vitro. The latex was collected and referred to lyophilization to obtain drying and stabilization from the products to avoid enzymatic degradation. The lyophilized material was fractionated based on their polarity, obtaining the Ethyl Acetate, Etanolic, Chotoform and Hexanic fractions. The polar fractions weres analyzed by High Performance Liquid Chromatography and the apolar fractions were analyzed by Gas Chromatography with Mass Spectrometry. The chromatographic analyzes analyzed by software and compared to the available literature demonstrated unpublished profiles of the four fractions, suggesting the presence of novel compounds. In analyzing the antileishmanicidal activity, it was observed a ability in reduces the leishmanial’s viability at 48 hours at the 250; 125; 62.5; 31.25; 15.62; and 7,81μg / mL concentrations, standing out the leishmanicidal activity of the Ethyl Acetate fraction. When evaluating the leishmanicidal activity in amastigotes, only the polar fraction Ethyl Acetate showed antileishmanial activity at 250 and 125 μg/ml concentration, suggesting that Ethanol, Chloroform and Hexane fractions are not able to permeate into the macrophages. The Ethyl Acetate fraction activity is independent of NO’s release from infected macrophages, suggesting that it is ROS release’s dependent. In conclusion, the antiparasitic activity credited to S. umbellatum latex is from compounds presents in the polar fraction Ethyl Acetate. / O uso de plantas com possível bioatividade para tratamento ou cura de enfermidades metabólicas e infecciosas é datado desde a Antiguidade de modo que a cultura do uso de produtos naturais a fim de tratar doenças e/ou sintomas perpetuou dentre gerações até os dias atuais. Embora o uso de produtos naturais tenha sido substituído pelo uso de substâncias sintéticas, a cultura popular disseminou-se e o uso de plantas em forma de garrafadas ou chás está presente na atualidade principalmente dentre a população com menor acesso aos recursos terapêuticos. Dentre as plantas utilizadas no Brasil, destaca-se o uso do látex da planta Synadenium umbellatum pelas possíveis atividades antitumoral, antiinflamatória, antimicrobiana, antiviral e antiparasitária. Atualmente, há poucos estudos sobre este espécime, e apenas as partes aéreas são utilizadas como objeto de estudo, porém o uso popular é realizado com o látex exsudado do caule da planta. Esta pesquisa analisou por métodos cromatográficos a composição do látex da planta S. umbellatum, fracionando-o em frações Acetato de Etila, Etanólica, Clorofórmica e Hexânica e avaliando a possível atividade antiparasitária das frações em promastígotas e amastígotas de Leishmania amazonensis, bem como sua interferência na liberação de NO por macrófagos infectados in vitro. O látex foi liofilizado para estabilização e secagem, evitando degradações enzimáticas e oxidação, e fracionado. A frações Acetato de Etila e Etanólica foram analisadas pela Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, enquanto as frações Clorofórmica e Hexânica foram analisadas por Cromatografia Gasosa Acoplada à Espectrometria de Massas. As análises cromatográficas foram analisadas por softwares e comparadas à bibliografia disponível e demonstraram perfis inéditos das quatro frações, sugerindo a presença de compostos inéditos. A análise de atividade leishmanicida em 48h revelou a capacidade de as quatro frações agirem de maneira tóxica nas concentrações de 250; 125; 62,5; 31,25; 15,62; e 7,81μg/mL, onde destacou-se a atividade leishmanicida da fração Acetato de Etila. Na análise de atividade leishmanicida sobre amastígotas, apenas a fração Acetato de Etila demonstrou atividade leishmanicida nas concentrações de 250 e 125μg/mL, sugerindo que as frações Etanólica, Clorofórmica e Hexânica não são capazes de adentrar aos macrófagos. A atividade da fração Acetato de Etila é independente da liberação de NO, sugerindo que seja dependente de mecanismos de liberação de ROS. Conclui-se que a atividade antiparasitária creditada ao látex da planta S.umbellatum seja de compostos inéditos presentes na fração Acetato de Etila.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-04-11T12:35:08Z No. of bitstreams: 1 brunaesteves.pdf: 2439325 bytes, checksum: 09d8c043ba1c10b373f855d1b13f52d1 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-04-17T20:03:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 brunaesteves.pdf: 2439325 bytes, checksum: 09d8c043ba1c10b373f855d1b13f52d1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T20:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 brunaesteves.pdf: 2439325 bytes, checksum: 09d8c043ba1c10b373f855d1b13f52d1 (MD5) Previous issue date: 2017-02-10 / As plantas medicinais são uma grande fonte para o desenvolvimento de novos medicamentos. Neste contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade anti-inflamatória e antitumoral de extratos de Solidago chilensis (G10, G11, G12), Aristolochia cymbifera (G13) e Piper umbellatum (G14). Estas espécies vegetais foram selecionadas com base em seu extenso uso na medicina popular para o tratamento de queimaduras, doenças reumáticas e inflamatórias, como sedativas, antipiréticas, entre outros. Como metodologia, primeiramente os extratos foram testados para sua citotoxicidade em células RAW264.7 (método de MTT). Em seguida, a atividade antiinflamatória dos extratos foi determinada através da produçao de óxido nítrico (método de GRIESS) e das citocinas TNF-α e MCP-1 (método de ELISA). Uma vez determinado o extrato mais promissor, sua ação foi avaliada sobre a produção de outras citocinas pro-inflamatórias (IL-1β, IL-6 e IL-12), bem como sobre a expressão de moleculas co-estimuladoras, proliferação celular e produção de IFN-. A influência do extrato no processo inflamatório também foi determinada in vivo, utilizando o modelo de edema de orelha. A atividade antitumoral foi determinada em linhagens murinas de câncer de mama (4T1) e de melanoma (B16) pelo método de MTT. Como resultados, nas concentrações não toxicas, o extrato G14 foi o único capaz de reduzir a produção de NO, TNF-α e MCP-1, sendo assim selecionado para os testes posteriores. Este extrato também inibiu a produçao de IL-1β, IL-6 e IL-12, a expressão dos coestimuladores CD40 e CD80, além de reduzir a proliferação de esplenócitos e a produção de IFN- . No ensaio in vivo, o extrato G14 foi efetivo em reduzir o edema, o infiltrado inflamatório, a produção de IL-1β, IL-6 e MCP-1 assim como da enzima mieloperoxidase. Resultados semelhantes foram encontrados nos testes in vitro realizados como o 4-nerolidilcatecol, composto majoritário presente no extrato G14. Em relação a atividade antitumoral, o extrato G12 foi o que mais se destacou, reduzindo a sobrevivência das duas linhagens estudadas em até 50%. Os resultados apresentados nos permitem concluir que tanto o extrato G14 quanto o composto 4NC foram efetivos na redução do processo inflamatório enquanto o extrato G12 se destacou por reduzir a sobrevivência de células tumorais. / Medicinal plants are a great source for the development of new medicines. In this context, the objective of the present study was to evaluate the anti-inflammatory and antitumor activity of Solidago chilensis (G10, G11, G12), Aristolochia cymbifera (G13) and Piper umbellatum (G14) extracts. These plant species were selected based on their extensive use in folk medicine for the treatment of burns, rheumatic and inflammatory diseases, such as sedatives, antipyretics, among others. As a methodology, the extracts were first tested for their cytotoxicity in RAW264.7 cells (MTT method). The anti-inflammatory activity of the extracts was determined by the production of nitric oxide (GRIESS method) and the cytokines TNF-α and MCP-1 (ELISA method). Once the most promising extract was determined, its action was evaluated on the production of other proinflammatory cytokines (IL-1β, IL-6 and IL-12), as well as on the expression of costimulatory molecules, cell proliferation and production of IFN-. The influence of the extract on the inflammatory process was also determined in vivo using the ear edema model. Antitumor activity was determined in murine (4T1) and melanoma (B16) murine cell lines by the MTT method. As a result, in the non-toxic concentrations, the G14 extract was the only one able to reduce the production of NO, TNF-α and MCP-1, being thus selected for the subsequent tests. This extract also inhibited the production of IL-1β, IL-6 and IL-12, the expression of CD40 and CD80 costimulators, as well as reducing splenocyte proliferation and IFN-γ production. In the in vivo assay, G14 extract was effective in reducing edema, inflammatory infiltrate, IL-1β, IL-6 and MCP-1 production as well as the myeloperoxidase enzyme. Similar results were found in the in vitro tests performed as 4-nerolidylcaltechol, the major compound present in the G14 extract. In relation to the antitumor activity, G12 extract was the most outstanding, reducing the survival of the two strains studied by up to 50%. The results show that both the G14 extract and the 4-NC compound were effective in reducing the inflammatory process while the G12 extract was highlighted by reducing the survival of tumor cells.

<p>Predmet ovog istraživanja je varijabilnost taksona&nbsp; <em>Ornithogalum umbellatum</em>&nbsp; L. 1753. (Hyacinthaceae) na području Srbije i Mađarske. Ovaj najpoznatiji i najrasprostranjeniji predstavnik roda&nbsp;<em> Ornithogalum&nbsp;</em> L. izučava se dugi niz godina sa različitih aspekata: kao gajena ba&scaron;tenska vrsta i kao invazivni korov; kao otrovna biljka i potencijalno lekovita. Sa ekolo&scaron;kog aspekta&nbsp; ove biljke su značajne kao&nbsp; domaćini insektima polinatorima koji su vi&scaron;estruko i u različitim fazama razvića vezani za ove lukovičaste geofite. Veliki areal&nbsp; i prilagođenost različitim tipovima stani&scaron;ta uzrokuju značajnu varijabilnost, koja rezultuje taksonomskom konfuzijom.&nbsp; Jedan od razloga za&nbsp; istorijski prepoznatljive taksonomski i filogenetski nerazja&scaron;njene relacije&nbsp; su&nbsp; područja sa prirodnim stani&scaron;tima populacija&nbsp;<em> O.&nbsp; umbellatum</em>&nbsp; čijem izučavanju nije posvećeno dovoljno pažnje. Jedno od takvih je i ovde istraživano područje. Kako je u Flori Srbije kao podvrsta&nbsp;<em> O. umbellatum&nbsp;</em> opisan i&nbsp; <em>O. umbellatum&nbsp; subsp.&nbsp; divergens</em>&nbsp; (Boreau), analizama su obuhvaćene i populacije ovog taksona.</p><p>RAPD-PCR metodom ustanovljen je vi&scaron;i nivo genetičkog diverziteta između nego u<br />okviru populacija, bez jasnog geografskog trenda dispozicije ove varijabilnosti. Ovi su<br />rezultati očekivani za poliploidne taksone sa velikim udelom vegetativnog razmnožavanja u reproduktivnoj strategiji biljke, koji su pritom &scaron;iroko rasprostranjeni<br />a u istraživanom području predstavljeni uglavnom relativno udaljenim te izolovanim<br />populacijama.&nbsp; Determinacija genetičke struktuiranosti među ispitivanim&nbsp; genotipovima ukazala je na razdvajanje populacija dva taksona u dva klastera. Rezultate u saglasnosti sa ovim dala&nbsp; je i analiza parametara poprečnih preseka lista, skapusa i plodnika, a ustanovljeni su i diskriminativni anatomski karakteri koji su razdvojili populacije dva taksona. Izdvojeni su pojedini kvantitativni karakteri, kako anatomski tako i morfolo&scaron;ki, koji su&nbsp; najvi&scaron;e doprineli varijabilnosti na interpopulacionom nivou. Pokazana je velika raznolikost morfolo&scaron;kih karaktera i heterogenost populacija&nbsp;<em> O. umbellatum</em>, &scaron;to je u skladu sa podacima u postojećoj litaraturi. Poznato je i da&nbsp; habitus ovih&nbsp; biljaka&nbsp; veoma&nbsp; zavisi&nbsp; od&nbsp; uslova&nbsp; sredine,&nbsp; kao&nbsp; i&nbsp; stadijuma&nbsp; razvića&nbsp; biljke,&nbsp; dok&nbsp; na molekularne&nbsp; markere&nbsp; ovi&nbsp; faktori&nbsp; ne&nbsp; utiču.&nbsp; Sa&nbsp; druge&nbsp; strane,&nbsp; iako&nbsp; primenjena&nbsp; RAPD metoda&nbsp; nije&nbsp; dovoljna&nbsp; za&nbsp; determinaciju&nbsp; filogenetski&nbsp; blisko&nbsp; srodnih&nbsp; taksona&nbsp; poput&nbsp; ovih, pokazala&nbsp; se&nbsp; pouzdanom&nbsp; i&nbsp; efikasnom&nbsp; za&nbsp; ispitivanje&nbsp; diverziteta&nbsp; na&nbsp; populaciono-genetičkom&nbsp; nivou.&nbsp; Stoga&nbsp; je&nbsp; u&nbsp; cilju&nbsp; &scaron;to&nbsp; sveobuhvatnije&nbsp; procene&nbsp; stanja&nbsp; kori&scaron;ćena kombinacija&nbsp; različitih&nbsp; pristupa,&nbsp; koji&nbsp; su&nbsp; dali&nbsp; usagla&scaron;ene&nbsp; rezultate,&nbsp; istovremeno&nbsp; dajući uvid&nbsp; u&nbsp; nivo&nbsp; polimorfnosti&nbsp; i&nbsp; struktuiranosti&nbsp; populacija&nbsp; i&nbsp; ukazujući&nbsp; na&nbsp; jedinstvene&nbsp; oblike<br />varijabilnosti morfo-anatomskih karakteristika</p><p>Sa&nbsp; jedne&nbsp; strane&nbsp; ovo&nbsp; je&nbsp; važno&nbsp; zbog&nbsp; razja&scaron;njenja&nbsp; komplikovane&nbsp; taksonomije,&nbsp; a&nbsp; sa&nbsp; druge zbog&nbsp; značaja&nbsp; ovih&nbsp; biljaka&nbsp; sa&nbsp; aspekta&nbsp; potencijalne&nbsp; koristi&nbsp; odnosno&nbsp; &scaron;tete&nbsp; za&nbsp; čoveka,&nbsp; ali&nbsp; i iz&nbsp; ugla&nbsp; za&scaron;tite&nbsp; biodiverziteta.&nbsp; Uvid&nbsp; u&nbsp; nivo&nbsp; varijabilnosti&nbsp; populacija&nbsp; doprineće adekvatnim&nbsp; strategijama&nbsp; konzervacije&nbsp; i&nbsp; menadžmenta&nbsp; kako&nbsp; ovih&nbsp; biljnih&nbsp; vrsta,&nbsp; tako&nbsp; i insekatskih sa kojima su povezane.</p> / <p>Variability of&nbsp; <em>Ornithogalum umbellatum&nbsp;</em> L. 1753. (Hyacinthaceae) in&nbsp; Serbia and Hungary&nbsp; was analyzed in this research. This most famous and the most&nbsp; widespread taxon in genus <em>Ornithogalum</em> L. has been a research subject for many years for various reasons: as garden plant and invasive weed; for its toxic and pharmaceutical properties. From an ecological point of view those bulbous geophytes&nbsp; are the important host-plants for insect pollinators associated with them in different life stages.&nbsp; Large distribution area and adaptation to diverse habitat types result in significant variability of these plants which is followed by&nbsp; taxonomic confusion. Persisting taxonomic problems arise also from the fact that there are under-investigated regions with native populations of <em>O.</em>&nbsp;<em>umbellatum, </em>such as&nbsp; localities&nbsp; in Serbia and neighbouring countries. Since published floras of these countries&nbsp; include&nbsp; <em>O. umbellatum&nbsp;</em> subsp.&nbsp; <em>divergens</em> (Boreau), analyses involve populations of this taxon as&nbsp; well.</p><p>RAPD-PCR method revealed higher levels of genetic diversity among than within populations, without distinct geographical trend in the disposition of the variability. These results have been expected for polyploid taxa with high levels of vegetative reproduction, widespread and represented mostly with relatively distant and isolated populations in the given region. Genetic structure analyses have separated&nbsp; populations of the two investigated taxa into two clusters. Analyses of the anatomical characteristics of the leaf, scapus and ovary cross-sections have shown results in accordance with those. Discriminative characters which divided populations of the two&nbsp; taxa were determined. Distinctive quantitative characters, both anatomical and morphological, which have contributed the most to the interpopulation variability, were&nbsp; singled out. Great diversity of morphological characters and population heterogeneity&nbsp; of&nbsp; <em>O.&nbsp; umbellatum&nbsp;</em> has been&nbsp; shown, which&nbsp; was&nbsp; already described in literature dealing with the subject. Additionally, the high diversity is explained by the fact that habitus of those plants with very plastic phenotypes is influenced by environmental conditions and life stage of the plant. Those factors do not affect molecular markers; however techniques like RAPD-PCR could not be used independently for&nbsp; characterization&nbsp; of phylogenetically close taxa such as these. Nevertheless, RAPDs proved to be a reliable and efficient method suitable for distinguishing genetic differentiation on population level. Therefore, combination of different approaches was used in order to give comprehensive assessment of the situation. The results were consistent, revealing the levels of populations&rsquo;&nbsp; polymorphism and structure, as well as certain variations of morpho-anatomical features.</p><p>This is important in the light of complicated&nbsp; taxonomy clarification, and on the other hand from the aspect of potential value or harm of these plants to humans. In terms of&nbsp; biodiversity conservation, insight into population variability levels might contribute to adequate management strategies for both plants and insects related to them.</p>

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Iara.pdf: 1398731 bytes, checksum: 09725a515b6fb603a60d85a3604b669e (MD5) Previous issue date: 2008-03-11 / Synadenium umbellatum Pax is a vegetable belonging to Euphorbiaceae, popularly known as cola-nota , milagrosa , and cancerola , is empirically used as a natural remedy for fighting cancer. In this study we assessed the antitumoral and antiangiogenic activity in vitro and in vivo of ethanolic crude extract and hexanic and chloroformic fractions of S. umbellatum. Citotoxicity assessment tests in vitro were carried out through MTT reduction and Trypan blue exclusion methods, by using Ehrlich ascitic tumor cells and K-562 lineage. Antitumoral and antiangiogenic activity in vivo essays were carried out through Ehrlich ascitic tumor experimental model in Swiss mice. Ethanolic crude extract was tested in 5, 10 and 25 mg/kg/day doses, whereas chloroformic fraction was tested in 1.2; 2.3 and 5.8 mg/kg/day doses, and hexanic fraction in 0.4; 0.8; and 1.9 mg/kg/day doses, for 10 days. The results showed concentration-dependent citotoxic activity, presenting through MTT method the inhibitory concentrations of 50% (Cl 50) 0.4, 0.1, and 0.08 mg/ml for ethanolic crude extract, chloroformic and hexanic fractions, respectively. And in the Trypan blue exclusion test, cell inhibition was 75%, 68%, and 80%, and 95%, 58%, and 64% for Ehrlich ascitic tumor cells and K-562 lineage, respectively. Ethanolic crude extract in the 25mg/kg/day dose increased the animals survival rate, parallely with the reduction of the amount of tumoral cells, beyond present activity on the tumor angiogenesis, and reduce vascular endothelial growth factor levels. Chloroformic and hexanic fractions, in in vivo essays, did not present significant outcomes. Thus, can conclude in the condition this study, that S. umbellatum shows antitumoral and antiangiogenic activity / Synadenium umbellatum Pax é uma planta pertencente à família Euphorbiaceae, conhecida popularmente como cola-nota , milagrosa e cancerola . É usado empiricamente como remédio natural para o combate ao câncer. Neste trabalho avaliou-se a atividade antitumoral e antiangiogênica in vitro e in vivo do extrato bruto etanólico e das frações clorofórmica e hexânica de S. umbellatum. Testes in vitro de avaliação de citotoxicidade foram realizados, usando os métodos de redução do MTT e de exclusão do azul de Tripano, utililizando células do tumor ascítico de Ehrlich e da linhagem K-562. Ensaios in vivo de atividade antitumoral e antiangiogênica foram realizados usando o modelo experimental do tumor ascítico de Ehrlich, em camundongos Swiss. O extrato bruto etanólico foi testado nas doses 5, 10 e 25 mg/kg/dia, enquanto a fração clorofórmica foi testada nas doses 1,2; 2,3 e 5,8 mg/kg/dia e a fração hexânica nas doses de 0,4; 0,8 e 1,9 mg/kg/dia, por 10 dias. Os resultados obtidos mostraram atividade citotóxica de forma concentraçãodependente, apresentando pelo método de MTT as concentrações inibitórias 50% (CI50) 0,4; 0,1 e 0,08 mg/ml para o extrato bruto etanólico, fração clorofórmica e fração hexânica, respectivamente. Já no teste de exclusão do azul de Tripano, a inibição celular foi de 75, 68 e 80% e 95, 58 e 64% para as células do tumor ascítico de Erlich e linhagem K-562, respectivamente. O extrato bruto etanólico na dose de 25 mg/kg/dia aumentou a sobrevida dos animais paralelamente com a redução do número de células tumorais, além de apresentar atividade sobre a angiogênese do tumor e reduzir os níveis de fator de crescimento endotelial vascular. As frações clorofórmica e hexânica, nos ensaios in vivo, não apresentaram resultados significativos. Assim, pode-se concluir nas condições deste estudo, que o S. umbellatum apresenta atividade antitumoral e antiangiogênica

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mariana mota.pdf: 5250493 bytes, checksum: f500835835d88733c77f12bd10fa8a80 (MD5) Previous issue date: 2010-03-03 / In search of new antineoplasic agents natural products have played an important role, given that about 40% of available medicines in current treatments have been developed from natural sources, 25% approximately of plants. Synadenium umbellatum belongs to Euphorbiaceae family and is popularly known as "cola-nota", "avelós," "milagrosa", "cancerola", and the latex is empirically used in Brazil for the treatment of cancer. Preliminary studies have shown that the crude extract of the leaves of S. umbellatum has significant antitumor and antiangiogenic activity in vivo. In this study, we investigated the cytotoxicity and the mechanisms of apoptosis induction of S. umbellatum in Ehrlich ascitic tumor (EAT) cells, and the myelotoxic potential of this plant. The cytotoxicity studies were carried out by trypan blue exclusion and reduction of tetrazolium (MTT) tests. The mechanisms of apoptosis induction were investigated by light and fluorescence microscopy, immunocytochemistry and flow cytometry. Investigation of the myelotoxic potential was performed by clonogenic assay of colony forming units of granulocyte-macrophage (CFU-GM). The data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) and a posteriori Tukey test (myelotoxicity) and by t test for all other assays. The means were considered statistically significant when P < 0.05. S. umbellatum was cytotoxic to EAT cells and the morphological analysis of these cells indicated that the plant extract treatment induced cell death by apoptosis. Apoptosis was also observed by increase on reactive oxygen species generation and in the concentration of intracellular Ca2+, alterations in mitochondrial membrane potential, phosphatydylserine externalization and activation of caspases 3, 8, and 9. S. umbellatum presented myelotoxicity to normal bone marrow cells in a concentrationdependent fashion. However, this toxicity was 8-fold lower than to tumor cells. The presented data showed that S. umbellatum had cytotoxic activity to EAT cells and induced these cells to apoptosis. / Na busca de novos agentes antineoplásicos os produtos de origem natural têm desempenhado um papel de destaque, uma vez que cerca de 40% dos medicamentos disponíveis na terapêutica atual foram desenvolvidos de fontes naturais, sendo 25%, aproximadamente, de plantas. Synadenium umbellatum pertence à família Euphorbiaceae e é conhecido popularmente como cola-nota , avelós , milagrosa , cancerola , sendo o látex empiricamente utilizado no Brasil para o tratamento do câncer. Estudos preliminares demonstraram que o extrato bruto das folhas de S. umbellatum possui importante atividade antitumoral e antiangiogênica in vivo. Neste trabalho foram investigados a citotoxicidade e os mecanismos de indução de apoptose de S. umbellatum sobre células do Tumor Ascítico de Ehrlich (TAE), bem como o potencial mielotóxico da planta. Os estudos de citotoxicidade foram realizados por meio dos ensaios de exclusão do azul de tripano e redução do tetrazolium (MTT). Os mecanismos de indução de apoptose celular foram investigados por microscopia de luz e de fluorescência, imunocitoquímica e citometria de fluxo e a investigação do potencial mielotóxico foi feita por ensaio clonogênico de unidades formadoras de colônias de granulócitos e macrófagos (CFU-GM). Os dados foram analisados por Análise de Variância (ANOVA) e teste a posteriori de Tukey (mielotoxicidade) e teste de t para os demais ensaios. As médias foram consideradas estatisticamente significativas quando P < 0,05. S. umbellatum foi citotóxico para as células do TAE e a análise morfológica destas células indicou que o tratamento com o extrato da planta induziu morte celular por apoptose. A apoptose foi constatada também pelo aumento na geração de espécies de oxigênio reativas e da concentração de Ca2+ intracelular, pela alteração no potencial de membrana mitocondrial, pela externalização da fosfatidilserina e pela ativação das caspases 3, 8 e 9. Os dados obtidos permitiram concluir que S. umbellatum apresentou mielotoxicidade para células normais de medula óssea de forma concentraçãodependente. Porém, essa toxicidade foi 8 vezes menor que para as células tumorais. A partir da análise dos resultados foi possível concluir que S. umbellatum apresenta atividade citotóxica e indutora de apoptose em células de TAE.

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Flaubertt 1iniciais.pdf: 86457 bytes, checksum: 527b584507a695284399e78f10a55608 (MD5) Previous issue date: 2008-03-12 / O uso de plantas medicinais tem sido muito significativo nos últimos anos, sendo incentivado pela Organização Mundial de Saúde (OMS). Synadenium umbellatum Pax, Euphorbiacea (vulgo cola-nota, cancerola, milagrosa) tem o látex usado empiricamente como anti-tumoral e antiinflamatório. Por existir espécies tóxicas nesta família e visando à segurança no uso de extratos vegetais, tal estudo avaliou a toxicidade pré-clinica do látex e do extrato etanólico das folhas (EEF) de S. umbellatum, por via oral, em ratas Wistar. O estudo seguiu diretrizes da OECD (Organisation for Economic Cooperation and Development) para teste de toxicidade aguda (Guideline 423) e de toxicidade subaguda (Guideline 407). Na toxicidade aguda do látex e do EEF, não se observou, na dose de 2000 mg/kg, alterações fisiológicas e comportamentais, e nem a morte dos animais. No entanto, o látex ocasionou congestão e infiltrado leucocitário nos rins, fígado e pulmões, efeitos não observados com o EEF. Na toxicidade subaguda, doses de 50, 100 e 200 mg/kg de EEF não produziram alterações dose-dependentes significativas nos parâmetros laboratoriais e nem alterações fisiológicas, macroscópicas e histopatológicas dos órgãos. O EEF da S. umbellatum é praticamente atóxico em exposição aguda, já o látex pode ocasionar alterações histopatológicas no fígado e pulmões. O uso crônico da planta S. umbellatium merece mais estudos.