Orientador: Edson Arantes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T19:45:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lintomen_Leticia_D.pdf: 1121941 bytes, checksum: 2c92a8ddfce83c01ed6c71e524096e0b (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Os eosinófilos participam da patogênese de várias doenças inflamatórias, incluindo infecções parasíticas e doenças alérgicas. Dentre as doenças alérgicas, a eosinofilia tem presença marcante na asma. Atualmente, a asma afeta 300 milhões de indivíduos no mundo, sendo considerada um problema de saúde pública mundial. A asma é uma doença inflamatória crônica que envolve interações entre fatores externos e genéticos, e tem como características principais a inflamação pulmonar e a hiperresponsividade brônquica. O recrutamento de eosinófilos para as vias aeríferas contribui para o caráter crônico da asma. A migração de eosinófilos para o tecido inflamado é um processo complexo, que é regulado por numerosos fatores, incluindo citocinas, quimiocinas, óxido nítrico (NO) e interações de moléculas de adesão. Estudos prévios investigaram as interações funcionais entre NO e CC-quimiocinas. Young e colaboradores (1999) mostraram que o número de eosinófilos no lavado broncoalveolar (LBA) de macacos desafiados está marcadamente aumentado 24 horas após o desafio, e que este aumento é acompanhado de altos níveis de NO no ar exalado e de eotaxina no LBA. Em pacientes com rinite, a eotaxina aumentou o número de eosinófilos no fluido do lavado nasal e também os níveis de NO nasal (Hanazawa et al., 1999). Em contraste, em modelos murinos de asma a inibição seletiva da NOS induzível resultou na redução da migração eosinofílica para os pulmões (Feder et al., 1997; Iijima et al., 2001), que estava associada com o aumento da expressão da CC-quimiocina proteína quimiotática para monócito-1 (MCP-1) no tecido pulmonar (Trifilieff et al., 2000). Além disso, NO (ou doadores de NO) também são capazes de inibir a produção de RANTES (Frank et al., 2000). O NO via formação de peroxinitrito (ONOO-) também pode reduzir a migração de eosinófilos induzida por eotaxina (Sato et al., 2000). Entretanto, o papel modulatório do NO nas funções do eosinófilo mediadas por CC-quimiocinas ainda permanece contraditório. Portanto, o presente trabalho investigou o efeito modulatório do NO na adesão aumentada, quimiotaxia e desgranulação do eosinófilo induzidas pelas Ccquimiocinas eotaxina e RANTES in vitro, e a expressão de VLA-4 e Mac-1 na superfície do eosinófilo. Nós realizamos ensaios funcionais (adesão e desgranulação), análise da expressão de moléculas de adesão por citometria de fluxo (VLA-4 e Mac-1) e a investigação de resíduos de tirosina nitrada para avaliar interações do NO com CC-quimiocinas em eosinófilos humanos. Os ensaios de MTT mostraram que as incubações de eosinófilos por 2, 3, ou 4 horas com eotaxina (10, 100 e 1000 ng/ml) ou RANTES (10, 100 e 1000 ng/ml) não afetam a viabilidade celular e, em determinadas condições, até promovem a ativação das células. Os resultados de adesão à fibronectina mostraram que a eotaxina (10, 100 e 1000 ng/ml) ou RANTES (10, 100 e 1000 ng/ml) não aumentam a adesão de eosinófilos em períodos de incubação de 2 e 3 horas. Entretanto, a incubação de eosinófilos por 4 horas com eotaxina ou RANTES aumentou significativamente a adesão à fibronectina. O L-NAME (0.1 mM), individualmente, aumentou significativamente a adesão de eosinófilos à fibronectina; porém a co-incubação de L-NAME com eotaxina (ou RANTES) não afetou a adesão observada com cada agente isoladamente. Além disso, a expressão de VLA-4 e de Mac-1 não foi modificada em nenhuma das condições experimentais testadas. Eotaxina e RANTES também não foram capazes de aumentar os níveis de GMPc nos eosinófilos, em condições onde o SNP (0.1 mM), usado como controle positivo, aumentou significativamente os níveis desse segundo mensageiro. Além disso, eosinófilos tratados com L-NAME, eotaxina e RANTES, individualmente, foram capazes de desgranular estas células, mas a co-incubação de LNAME com eotaxina (ou RANTES), não alterou esta resposta. Os resultados de quimiotaxia mostraram migração significativa de eosinófilos (tratados ou não com LNAME) em resposta à eotaxina ou RANTES. Os resultados obtidos de Western blotting para 3-nitrotirosina mostraram ausência de proteínas nitradas nos eosinófilos de indivíduos sadios ou asmáticos. No conjunto, nossos resultados mostram que, nas condições experimentais estabelecidas, o NO não modula adesão, migração e desgranulação em eosinófilos estimulados com eotaxina ou RANTES / Abstract: Eosinophils participate in the pathogenesis of many inflammatory diseases, including parasitic infections and allergic diseases. Of the allergic diseases, asthma is characterized by eosinophilia. Currently, asthma affects 300 million people in world, and is an important public health problem. Asthma is an inflammatory chronic disease that involves interactions between external and genetic factors, and has lung inflammation and bronchial hyperresponsiveness as major features. The recruitment of eosinophils into airways contributes to the asthma chronic character. The eosinophil migration to inflamed tissue is a complex process regulated by several factors, including cytokines, chemokines, nitric oxide (NO) and adhesion molecule interactions. Previous studies have investigated the functional interactions between NO and CC-chemokines. Young et al. (1999) showed that the number of eosinophils in the bronchoalveolar lavage (BAL) fluid of challenged monkeys is markedly increased at 24 h post-challenge, accompanied by higher levels of both exhaled NO and eotaxin in BAL fluid. In rhinitis patients, eotaxin increased the number of eosinophils in the nasal lavage fluid, and that was also accompanied by elevated nasal NO levels (Hanazawa et al., 1999). In contrast, in murine models of asthma, selective inhibition of inducible NOS resulted in a reduction in pulmonary eosinophil migration (Feder et al., 1997; Iijima et al., 2001), with an increased expression of the CC-chemokine monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the lung tissue (Trifilieff et al., 2000). Moreover, NO (or NO donors) have also been shown to inhibit the production of RANTES (Frank et al., 2000). Nitric oxide via peroxynitrite (ONOO-) formation is reported to reduce eotaxin-induced eosinophil migration (Sato et al., 2000). However, the modulatory role of NO in the CC-chemokines-mediated eosinophil functions is still not well understood. Therefore, the present study was designed to investigate the modulatory effect of NO in the enhanced eosinophil adhesion, chemotaxis and degranulation induced by the Ccchemokines eotaxin and RANTES in vitro, and the expression of VLA-4 and Mac-1 on the eosinophil surface. We therefore carried out functional assays (adhesion and degranulation), flow cytometry analysis of adhesion molecules (VLA-4 and Mac-1 expression) and investigation of tyrosine nitration to evaluate the interactions between NO and CC-chemokines in human eosinophils. MTT assays showed that incubation of eosinophils for 2, 3 or 4 hours with eotaxin (10, 100 and 1000 ng/ml) or RANTES (10, 100 and 1000 ng/ml) did not affect cellular viability and, in some conditions, even caused cellular activation. The results of adhesion to fibronectin showed that eotaxin (10, 100 and 1000 ng/ml) or RANTES (10, 100 and 1000 ng/ml) did not increase eosinophil adhesion at 2 or 3 hours of incubation. Nevertheless, the incubation of eosinophils for 4 hours with eotaxin or RANTES significantly increased adhesion to fibronectin. L-NAME (0.1 mM), alone, significantly increased eosinophil adhesion to fibronectin; however the co-incubation of L-NAME with eotaxin (or RANTES) did not affect the adhesion of each agent. Moreover, expression of VLA-4 and Mac-1 were not modified by any of the experimental conditions. Eotaxin and RANTES did not increase eosinophil cGMP levels under the same conditions in which SNP (0.1mM), used as a positive control, significantly increased the levels of this second messenger. Furthermore, eosinophils treated with L-NAME, eotaxin and RANTES, alone, demonstrated degranulation, however the co-incubation of eosinophils with L-NAME and eotaxin (or RANTES) did not alter this response. Chemotaxis assays showed a significant eosinophil (treated or not with L-NAME) migration in response to eotaxin or RANTES. Western blotting for 3-nitrotyrosine-3 showed a lack of nitrated proteins in eosinophils from healthy or asthmatic donors. Taken together, results show that, under the experimental conditions established, NO does not modulate adhesion, migration and degranulation in eotaxin or RANTES-stimulated eosinophils / Doutorado / Doutor em Farmacologia

Submitted by Geandra Rodrigues (geandrar@gmail.com) on 2018-01-10T11:20:37Z No. of bitstreams: 1 mairadoprado.pdf: 27438645 bytes, checksum: 23706315731d08c2400d4c554bf8ee9b (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2018-01-23T11:39:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mairadoprado.pdf: 27438645 bytes, checksum: 23706315731d08c2400d4c554bf8ee9b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-23T11:39:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mairadoprado.pdf: 27438645 bytes, checksum: 23706315731d08c2400d4c554bf8ee9b (MD5) Previous issue date: 2017-10-27 / Devido ao seu curto período de presa, o Biodentine permite aos endodontistas realizar o tratamento do canal radicular na mesma visita que o reparo da perfuraçãp de furca. O objetivo deste estudo foi avaliar o emprego do Biodentine no reparo de perfurações de furcas, através de análises de superfície e interface, avaliando o efeito de diferentes protocolos de irrigação, associados ao uso de NaOCl e diferentes agentes ácidos / quelante na resistência de união e morfologia do Biodentine. Perfurações na região de furca com diamentro de 1,5 mm foram produzidas em 60 molares inferiores permanentes. As paredes da área perfurada foram contaminadas com sangue. Para o selamento das perfurações empregou-se o Biodentine, que foi manipulado de acordo com as recomendações do fabricante. As perfurações foram seladas e após 10 minutos, tempo de presa do material, as amostras foram avaliadas em relação a topografia por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Em seguida as amostras foram divididas em 6 grupos de acordo com o regime de irrigação. No grupo de controle, todo procedimento de irrigação foi realizado com água destilada. Nos outros 5 grupos, utilizou-se NaOCl 5,25% como irrigante inicial, seguido de água destilada no grupo DW; EDTA 17% no grupo EDTA; ácido fosfórico 37% no grupo PA; ácido cítrico 10% no grupo CA; e ácido maleico 7% no grupo MA. Após os regimes de irrigação, os dentes foram novamente avaliados por MEV. As fotomicrografias foram avaliadas comparativamente, em relação a presença de alterações antes e após os regimes de irrigação, utilizando um sistema de escore. O teste de resistência de união por push-out foi realizado 7 dias após o preparo das amostra e os dados foram analisados estatisticamente usando os testes de Kruskal-Wallis e Dunn (p < 0,05). Todos os regimes de irrigação modificaram a topografia do Biodentine. Os efeitos do protocolos de irrigação na superfície do Biodentine levaram a alterações na interface desse material com a dentina. Os regimes que utilizaram água destilada e EDTA como irrigante final mostraram valores de resistência de união estatisticamente inferiores aos demais grupos. Os grupos controle, PA, CA e MA não diferiram estatisticamente. Conclui-se que todos os regimes de irrigação modificaram a topografia do Biodentine. Protocolos de irrigação utilizando NaOCl e NaOCl associado ao EDTA levaram a uma redução nos valores de resistência de união do Biodentine à dentina. / Due to its short setting time, Biodentine permits endodontists to perform the root canal treatment in the same visit of the furcal repair. The aim of this study was to evaluate the use of Biodentine in furcal repair through surface and interface analyzes, evaluating the effect of different irrigation protocols, associated to the use of NaOCl and different acids / chelating agents on the push-out bond strength and morphology of Biodentine. Furcal perforations with diameter of 1.5 mm were produced in 60 permanent mandibular molars. The walls of the perforated area were contaminated with blood. Biodentine was used for the perforations sealing, which was manipulated according to the manufacturer's recommendations. The perforations were sealed. After 10 minutes, the setting time, the samples were topographically evaluated by scanning electron microscopy (SEM). The samples were then divided into 6 groups according to the irrigation regime. In control group, all irrigation procedure was performed using distilled water. In the others 5 groups, 5.25% NaOCl was used as initial irrigant followed by distilled water in DW group; 17% EDTA in EDTA group; 37% phosphoric acid in PA group; 10% citric acid in CA group; and 7% maleic acid in MA group. Once more, after the irrigation regimens, the teeth were evaluated by SEM. The photomicrographs were evaluated comparatively, in relation to the presence of alterations before and after the irrigation regimes using a score system. Push-out bond strength (POBS) test was performed 7 days after sample preparation and data were statistically analyzed using Kruskal-Wallis and Dunn tests (p < 0.05). All irrigation regimens modified the topography of Biodentine. The effects of irrigation protocols on Biodentine surface led to changes in the interface of this material with dentin. The regimens that used DW and EDTA as final irrigant showed bond strength values statistically lower than the other groups. Control PA, CA, and MA groups did not differ statistically. In conclusion, all irrigation regimens modified the topography of Biodentine. Irrigation protocols, using NaOCl and NaOCl associated with EDTA, led to a reduction in bond strength values from Biodentine to dentin.

Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2015-11-19T17:05:05Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Amanda Rodrigues de Oliveira - 2015.pdf: 1754949 bytes, checksum: 32fc5784ffa91959642465ef80f3019f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-11-20T13:06:28Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Amanda Rodrigues de Oliveira - 2015.pdf: 1754949 bytes, checksum: 32fc5784ffa91959642465ef80f3019f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-20T13:06:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Amanda Rodrigues de Oliveira - 2015.pdf: 1754949 bytes, checksum: 32fc5784ffa91959642465ef80f3019f (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-03-10 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Paracoccidioides is a termodimorphic fungus that causes paracoccidioidomycosis (PCM), the most frequent systemic mycosis that affects mainly the rural population in Latin America. The fungus grows as yeast when grown at 35-37° C and as mycelium at temperatures below 28° C. The establishment and severity of the disease depends on factors inherent to the fungus and the host. The diversity presented among isolates of the same genus has been explored between the microorganisms and attempt to clarify differences possibly related to virulence existing between isolates that cause the same disease. The secretion of proteins in a cell is a highly dynamic mechanism and is directly involved in the first pathogen contact with the host cells, enabling their survival, multiplication and dissemination. In order to try to elucidate this diversity the proteomic profile of secretome of two isolates of Paracoccidioides, PbEpm83 and Pb01, that in our experimental conditions of infection showed different behaviors was characterized. The use of Ultra Performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry (UPLC-MSE) allowed the identification of 92 proteins / isoforms among the strains. Of the 92 proteins identified, 36 were preferentially secreted in PbEpm83 and 35 preferentially secreted in Pb01. Among the identified we can highlight proteins related to various biological processes: adhesion to the ECM, proteins related to thermal and oxidative stress, cell rescue, defense and virulence, proteins with immunogenic capacity, proteins related to defense against antifungal, heat shock proteins, among others. Our analysis showed that most of the proteins identified using non-conventional secretory pathways. Among the identified proteins there are already related proteins as virulence factors, such as, ATP synthase, mitochondrial Peroxiredoxin PRX 1, fructose bisphosphate aldolase, Didpeptidil peptidase, Thioredoxin, TCTP, Hsp70 and Hsp88. Our results highlight the importance of secreted proteins in the establishment of infection and that these species, within the same genus, maintain differences in the levels of protein expression that may reflect their behavior in the success of the infection. / Paracoccidioides é um fungo termodimórfico causador da paracoccidioidomicose (PCM), a mais frequente micose sistêmica que afeta, principalmente, a população rural na América Latina. O fungo cresce como levedura quando cultivado à 35-37 °C e como micélio à temperaturas inferiores à 28 °C. O estabelecimento e severidade da doença dependem de fatores inerentes ao fungo bem como ao hospedeiro. A diversidade apresentada entre isolados de um mesmo gênero tem sido explorada entre micro-organismos e procura elucidar diferenças possivelmente relacionadas à virulência existentes entre isolados que causam a mesma doença. A secreção de proteínas em uma célula é um mecanismo altamente dinâmico e que está diretamente envolvido nos primeiros contatos do patógeno com as células do hospedeiro, capacitando sua sobrevivência, multiplicação e disseminação. A fim de tentar elucidar essa diversidade o perfil proteômico do secretoma de dois isolados de Paracoccidioides, PbEpm83 e Pb01, pertencentes à duas espécies filogenéticas diferentes, que em nossas condições experimentais de infecção apresentaram comportamentos diferentes foi caracterizado. A utilização da Cromatografia Líquida de Ultraperformance acoplada à Espectrometria de Massas (UPLC-MSE) permitiu a identificação de 92 proteínas/isoformas entre as amostras testadas. Das 92 proteínas identificadas, 36 foram preferencialmente secretadas em PbEpm83 e 35 preferencialmente secretadas em Pb01. Dentre as identificadas podemos destacar proteínas relacionadas à vários processos biológicos: adesão à MEC, proteínas relacionadas ao estresse térmico e oxidativo, resgate celular, defesa e virulência, proteínas com capacidades imunogênicas, proteínas relacionadas à defesa contra antifúngicos, proteínas de choque térmico, entre outras funções. Nossas análises mostraram que a maioria das proteínas identificadas utilizam vias secretórias não-convencionais. Entre as proteínas identificadas estão proteínas já relacionadas como fatores de virulência: ATP sintase, Peroxirredoxina mitocondrial PRX 1, Frutose bifosfato aldolase, Didpeptidil peptidase, Tioredoxina, TCTP, Hsp70 e Hsp88. Nossos resultados ressaltam a importância das proteínas secretadas no estabelecimento da infecção e que estas espécies dentro do mesmo gênero mantêm diferenças nos níveis de expressão proteica que podem refletir em seu comportamento no sucesso da infecção.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-10-19T18:28:18Z No. of bitstreams: 1 dissertacao_final.pdf: 1500211 bytes, checksum: cba3879b89062de41a3abf1a3c4adeba (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-10-19T18:33:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dissertacao_final.pdf: 1500211 bytes, checksum: cba3879b89062de41a3abf1a3c4adeba (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-10-19T18:37:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 dissertacao_final.pdf: 1500211 bytes, checksum: cba3879b89062de41a3abf1a3c4adeba (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-19T18:37:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_final.pdf: 1500211 bytes, checksum: cba3879b89062de41a3abf1a3c4adeba (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objective: To describe the epidemiology and clinical data of tuberculosis patients, as well as monitoring by health services, and the relationship with the cure of new cases. Methods: Epidemiological and analytical study of new cases of tuberculosis diagnosed and residents in Manaus during 2014, according to the healing situation. Interviews with closed questions allowed the characterization of the subjects in terms of socioeconomic, demographic, health- disease process, relationship with health services and treatment outcome were applied to the subjects in the 1st and 6th month of treatment. The analyses were performed in the following sequence: (i) exploratory analysis and (ii) bivariate analysis with chi-square test at significance level under 5%. Results: We recruited 139 subjects, of whom 113 were cured, 2 deaths, 15 default treatment and 9 were still on treatment at 6th month. Most individuals are male, young adults, predominantly brown color and with low education. Among the patients pulmonary with sputum smear positive (72 cases), healing was associated to non-smokers, no use of illegal drugs, conducting control sputum smear, scheduling visits by doctors or nurses, care by the same professionals, sharing doubts about the disease and treatment with health professionals, not receiving home visit and the desire to continue treatment in the unit for which he was forwarded. Among the pulmonary cases of sputum smear negative (37 cases), the cure was associated to non-smokers, and among the extrapulmonary cases (19 cases) the cure was associated to appointments in the unit through records and care always by the same professionals. Conclusion: There are aspects that indicate weaknesses in the health services, among which, the concentration of TB diagnosis at the referral center of the city, even after the decentralization of the control actions to the basic municipal health network. Thus, there is the need to rethink a healthcare model that incorporates indeed the primary care as a gateway for the diagnosis, and in that context performing early diagnosis, treatment in an appropriate and timely manner, with appropriate follow-up of cases / Objetivo: Descrever o perfil epidemiológico e dados clínicos de doentes de tuberculose, bem como o acompanhamento pelos serviços de saúde, e a relação com a cura dos casos novos. Métodos: Estudo epidemiológico e analítico dos casos novos de TB, diagnosticados e residentes na cidade de Manaus no ano de 2014, de acordo com a situação de cura. Entrevistas com perguntas fechadas permitiram a caracterização dos sujeitos quanto aos aspectos socioeconômicos, demográficos, processo saúde-doença, relação com os serviços de saúde e resultado do tratamento foram aplicados aos sujeitos no 1º e 6º mês de tratamento. As análises foram feitas na seguinte sequência: (i) análise exploratória e (ii) análise bivariada, com teste qui-quadrado ao nível de significância menor que 5%. Resultados: Foram recrutados 139 sujeitos, dos quais 113 obtiveram cura, 2 óbitos, 15 abandonaram e 9 ainda continuavam em tratamento no 6º mês. A maioria dos indivíduos é do sexo masculino, adultos jovens, predominantemente da cor parda e baixa escolaridade. Entre os bacíliferos (72 casos) a cura esteve associada aos não-fumantes, não uso de drogas ilícitas, realização de baciloscopias de controle, marcação de consultas de retorno por médicos ou enfermeiros, atendimento pelos mesmos profissionais, compartilhamento de dúvidas sobre a doença e tratamento para os profissionais de saúde, não recebimento de visita domiciliar e o desejo de continuar o tratamento na unidade para o qual foi encaminhado. Entre os casos pulmonares não- bacilíferos (37 casos), a cura esteve associada aos não-fumantes, e entre os casos extrapulmonares (19 casos) a associação se deu a marcação de consultas na própria unidade por meio de fichas e atendimento sempre pelos mesmos profissionais. Conclusão: Há aspectos que indicam fragilidades dos serviços de saúde, dentre os quais, a concentração do diagnóstico da TB na unidade de referência do município, mesmo após a descentralização das ações de controle para a rede básica de saúde do município. Desse modo, existe a necessidade de repensar um modelo assistencial que incorpore de fato a atenção básica como porta de entrada para o diagnóstico, e que nesse âmbito seja realizado o diagnóstico precoce, o tratamento de forma adequada e oportuna, com adequado acompanhamento dos casos.

Muitas das lesões dentárias necessitam de restaurações indiretas que requerem cimentos adesivos para a sua fixação à estrutura dentária. Em algumas situações não é possível realizar o isolamento absoluto do campo operatório, o que pode levar à contaminação com saliva da dentina previamente aos procedimentos adesivos. Assim é necessário saber o nível de comprometimento da adesão em função deste fato. O presente estudo teve como objetivo analisar o tratamento da dentina contaminada com saliva na resistência adesiva dos cimentos resinosos convencional e autoadesivo através de testes de cisalhamento. Foram utilizados 50 incisivos bovinos que foram lixados até a exposição de dentina superficial e divididos em 6 grupos: Grupo ARC (controle): condicionamento ácido por 15s + sistema adesivo Scotchbond Multipurpose (3M/ESPE) + cimento RelyX ARC (3M/ESPE); Grupo ARClav: condicionamento ácido por 15s + contaminação com saliva + lavagem com água/ar 20 segundos + sistema adesivo + cimento RelyX ARC; Grupo ARCsec: condicionamento ácido por 15s + contaminação com saliva + secagem com papel absorvente + cimento autoadesivo RelyX ARC; Grupo ARCre: condicionamento ácido por 15s, contaminação + secagem jato de ar + recondicionamento por 15s + sistema adesivo Scotchbond Multipurpose + cimento RelyX ARC; Grupo U100 (controle): sem contaminação + cimento autoadesivo RelyX U100 (3M/ESPE); Grupo U100sec: contaminação + secagem jato de ar + cimento autoadesivo RelyX U100. Após a cimentação, os dentes foram armazenados em água destilada a 37ºC por 24 horas antes da realização do teste de cisalhamento. Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância a dois critérios e teste de Tukey com nível de significância de 5%. As médias gerais, dos grupos,expressas em MPa, foram G ARC: 9,02 ± 1,36 - G U100: 4,38 ± 0,74 - GARClav: 6,43 ± 0,98 GARCsec: 7,71 ± 1,14 GARCre: 5,68 ± 1,10 G U100sec: 3,87 ± 0,51. A análise dos resultados permitiu concluir que a adesão do cimento RelyX à dentina contaminada com saliva, lavada ou recondicionada com ácido fosfórico diminui significantemente quando comparada à adesão à dentina não contaminada ou àquela contaminada e apenas seca com papel absorvente. Já a contaminação com saliva não afetou significantemente a adesão do cimento RelyX U100 à dentina. / Many dental injuries require indirect restorations fixed by adhesive cements. In some situations is not possible to isolate the operative field, which can lead to contamination by saliva of the dentin. The aim of this study was to analyze the treatment of dentin contaminated with saliva on shear bond strength of conventional and self-adhesive resin cements. Fifty bovine incisors were ground until exposure of dentin surface and divided into six groups: Group ARC (control) no contamination + acid etch for 15s + Scotchbond Multipurpose system (3M/ESPE) + cement Rely X ARC (3M/ESPE); Group U100 (control): no contamination + self-adhesive cement RelyX U100 (3M/ESPE), Group ARClav: acid etch for 15s + saliva contamination + rising with water / air + adhesive system RelyX ARC, Group ARCsec: acid etch + contamination with saliva + drying with absorbent paper cement RelyX ARC, Group ARCre: acid etched, contamination with saliva + drying with absorbent paper + reetched for 15s + adhesive system Scotchbond Multipurpose + cement RelyX ARC, Group U100sec: contamination + drying with absorbent paper + self-adhesive cement RelyX U100. After cementation, the teeth were stored in distilled water at 37° C for 24 hours prior to shear testing. The results were analyzed by One-way ANOVA and Tukey\'sTests with a significance level of 5% were: G ARC: 9.02 ± 1.36 G U100: 4.38 ± 0.74 G ARClav: 6.43 ± 0.98 G ARCsec: 7.71 ± 1.14 G ARCre: 5, 68 ± 1.10 G U100sec: 3.87 ± 0.51.The results showed that there was a significant difference in bond strength of RelyX ARC to dentin contaminated by saliva when it was rinsed or re-etched, but there was no difference when the contaminated dentin was just dried with absorbent paper. No statistical difference was found between the adhesion resistance of the RelyX U100 to dentin with or without saliva contamination.

Considerando a importância da adesão ao tratamento para o controle da tuberculose (TB) e para a Enfermagem e a necessidade de dispor de elementos que identifiquem a vulnerabilidade de pacientes à não adesão, o estudo objetivou propor marcadores de adesão ao tratamento para serem adotados no âmbito da Atenção Primária à Saúde. Metodologia: estudo de desenvolvimento metodológico, de abordagem quanti-qualitativa, pautado na Teoria de Determinação Social do Processo Saúde-Doença e no conceito de adesão ao tratamento, proposto por Bertolozzi. Instrumento, cujos marcadores eram decorrentes de estudos do Grupo de Pesquisa do CNPq: Vulnerabilidades, adesão e necessidades em Saúde Coletiva, foi validado, por meio do Índice de Validação de Conteúdo por especialistas e por revisão de literatura para complementar os marcadores propostos. Após aprovação por comitê de ética em pesquisa, o instrumento foi aplicado junto a 89 pacientes com tuberculose, matriculados em Unidades Básicas de Saúde da Região Centro-Oeste do Município de São Paulo, nos primeiros 30 dias e no período entre 90 a 140 dias de tratamento, de 2010 a 2012. À cada resposta dos pacientes correspondiam escores com os valores de 1-3, que configuravam desde menor até maior potencialidade para a adesão ao tratamento. A confiabilidade e a validade dos marcadores foram verificadas por meio de testes estatísticos. Resultados: os conceitos atribuídos aos marcadores, pelos especialistas, apresentaram Índice de Validade de Conteúdo foi de 86,7%. Na primeira etapa da coleta de dados, os pacientes tiveram média de escore total de 76,5 (59 88). A segunda etapa da coleta de dados foi realizada com 59 pacientes, e a média de escore total foi de 80,4 (66 92). Os marcadores com mudanças significativas para melhor escore da primeira à segunda etapa foram: conhecer a causa da TB (p=0,002); impacto da doença na vida (p=0,007) e no trabalho (p<0,001); dificuldade no tratamento em relação à medicação (p<0,001); opinião sobre a evolução da doença durante o tratamento (p<0,001); apoio familiar (p<0,001) e ter recebido visita domiciliária durante o tratamento (p<0,001). Na análise univariada identificou-se seis marcadores com valor significativo, sendo que três permaneceram significativos após análise de regressão logística: situação empregatícia (p=0,0016), uso de droga (p=0,0282) e reação indiferente ao diagnóstico (p=0,0065), os quais explicariam em 92,3% a adesão ao tratamento. A análise de confiabilidade e validade, pelo método de Componentes Principais de rotação de Varimax, resultou em sete marcadores, divididos em três dimensões, com consistência interna (Alfa Cronbach): Vida e contexto familiar (=0,796), Trabalho e processo saúde-doença (=0,645) e Apoio no contexto do serviço de saúde (=0,601). O alfa total foi de =0,706; 91,7% de sensibilidade, 64,0% de especificidade e área de curva ROC: 79,8%. Conclusão: a proposição de instrumento com tais marcadores é inédita e mostrou-se confiável para medir a adesão ao tratamento dos doentes com TB. / Considering the importance of the adherence to the treatment in order to control tuberculosis (TB) and to Nursing and the need to have available instruments to identify the vulnerability to the non-adherence, this thesis aimed to validate an instrument containing adherence markers to the treatment to be adopted in the Primary Health Care. Methodology: methodological development study with quanti-qualitative approach and based on both Social Determination Theory of the Health-Illness Process and Bertolozzi´s adherence concept to TB treatment, whose markers were derived from studies of the CNPq Research Group: Vulnerabilities, Adherence and Needs in Health Collective. An instrument was validated by: calculation of Index of Content Validation by experts and literature review to complement the proposed markers. To validate the instrument, the following procedures were performed: content validation and the compliance average of three experts; bibliography review in order to complement those proposed markers; pre-test; application of the instrument on patients in their 30 and 90-140 early days of treatment, from 2010-2012, at basic health units in the center-west region of São Paulo City Municipality. After approval by the ethics committee on research, the instrument was applied to 89 tuberculosis patients. Each patient response scores corresponded the values of 1-3, which indicate the lowest to highest potential for treatment adherence. The reliability and validity of markers were verified by means of statistical tests. Outcomes: concepts assigned to the markers by experts indicated Index Validity Content was 86,7%. During the first stage of data collection, patients presented a mean total score of 76,5 (59-88). The second stage of data collection was performed with 59 patients, and the mean total score was 80,4 (66-92). The markers with significant changes for better score from first to second stage of the study were: knowledge about the cause of TB (p=0,002), impact of disease on life (p=0,007) and job (p<0,001); difficulty in treatment related to medication (p<0,001); opinion about disease progression during treatment (p<0,001), family support (p<0,001) and have received home visits during treatment (p<0,001). In the univariated analysis six markers were identified with a significant value, three of them remained significant after logistic regression analysis: employment status (p=0,0016), use of drugs (p=0,0282) and indifferent reaction to diagnosis (p=0,0065), which would explain 92,3% of adherence to treatment. The analysis of reliability and validity, by the method of Principal Component with Varimax Rotation, resulted in seven markers, divided into three dimension, with internal consistency Cronbach\'s Alpha: Life and family environment (=0,796), Job and health-illness (=0,645) and Support in the health service (=0,601). The total alpha was =0,706; with 91,7% of sensitivity, 64,0% of specificity and the ROC Curve area was 79,8%. Conclusion: The proposition of an instrument with these markers is innovative and presents reliability to measure the adherence to TB treatment.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:55:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thiago Mendes de Lima.pdf: 1095985 bytes, checksum: af3d342d9c71734320c0b651931b5083 (MD5) Previous issue date: 2014-02-21 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / A utilização de agentes antioxidantes tem sido proposta para melhorar a resistência adesiva após clareamento dental. O presente estudo in vitro avaliou o efeito do hidrogel de ascorbato de sódio a 10% (AS), aplicado após o clareamento com peróxido de hidrogênio a 35% (PH), na resistência adesiva em esmalte de uma resina composta (RC). Foram selecionados 50 dentes bovinos e aleatoriamente divididos em cinco grupos experimentais (n=10) subdividindo-os em grupos testados tardiamente (7 dias) e após envelhecimento (3 meses): Grupo 1 (G1: 7 dias/ G1A: 3 meses) - sem clareamento (grupo controle) + RC; G2/G2A PH + RC; G3/G3A PH + 14 dias + RC; G4/G4A PH 35% + AS 10% (30 min) + RC; G5/G5A PH + 14 dias + AS (30 min) + RC. Foram obtidos palitos de resina-adesivo-esmalte (1mm x1mm) e submetidos ao tese de resistência à microtração em uma máquina de ensaio universal EMIC DL2000 (100N a 0,5mm/min). Os tipos de falhas foram analisados em microscopia digital (40x) e eletrônica de varredura, classificado-as como coesiva, adesiva, mista. Os valores (Mpa) de resistência adesiva à microtração foram avaliados estatisticamente através da Análise de Variância a dois critérios (ANOVA) e do teste de Tukey para comparações das médias, com significância 1%. Os resultados foram: G1: 20,09Aab ± 5,33 / G1A: 24,09Abc ± 5,12; G2: 17,14Aa ± 4,94 / G2A: 20,84Aab ± 5,21; G3: 20,36Aab ± 5,30 / G3A: 22,76Abc ± 5,40; G4: 22,18Aabc ± 5,30 / G4A: 30,22Ad ± 8,05; G5: 21,92Aab ± 5,90 / G5A: 27,25Ac ± 7,12. Pode-se concluir que, o uso do ascorbato de sódio a 10% interfere positivamente na resistência adesiva de restaurações envelhecidas em 3 meses, aumentando os valores de resistência adesiva.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Trata-se de um estudo transversal sobre adesÃo ao tratamento da hi-pertensÃo e seus determinantes, realizado de novembro de 1997 a fevereiro de 1998, com 177 pacientes selecionados aleatoriamente e entrevistados apÃs a con-sulta mÃdica no ambulatÃrio do Hospital de Messejana, Fortaleza-CE. Tais pacien-tes foram visitados em domicÃlio para continuidade da entrevista e contagem de comprimidos, a primeira vez entre 13 e 25 dias apÃs a consulta e a segunda vez entre 13 e 25 dias apÃs a primeira visita. A maior parte (65,8%) dos medicamentos prescritos nÃo foi dispensada no hospital e destes 22,3% nÃo foram adquiridos em outro lugar, portanto 14,7% dos medicamentos prescritos nÃo foram adquiridos pe-los pacientes. A taxa de adesÃo determinada no presente estudo, pelo mÃtodo de entrevista, foi de 62,1%, e pelo mÃtodo contagem de comprimidos, foi de 38,4%. De acordo com o teste de Kappa, o grau de concordÃncia entre os dois mÃtodos foi muito baixo (33,68%). O desempenho da entrevista como uma medida de adesÃo teve as seguintes caracterÃsticas: baixa sensibilidade (52,3%) para detectar pacien-tes nÃo aderentes, alta especificidade (85,3%) para detectar pacientes aderentes, alto valor preditivo (85,1%) para a nÃo adesÃo e baixo valor preditivo (52,7%) para a adesÃo. Devido o baixo desempenho da entrevista para determinar adesÃo, os re-sultados apresentados referem-se ao mÃtodo contagem de comprimidos. As variÃ-veis que se mostraram significantes atravÃs do teste de Fisher (p < 0,15) na anÃlise univariada em relaÃÃo a uma maior adesÃo ao tratamento, foram analisadas para identificar efeitos independentes atravÃs de um modelo de regressÃo logÃstica. Na anÃlise multivariada, maior renda familiar e a ajuda que o paciente recebe da famÃlia para tomar os medicamentos favoreceram uma maior adesÃo ao tratamento (OR = 3,19 - IC [1,01 - 10,04] e OR = 3,00 - IC [1,16 - 7,74], respectivamente). Os resulta-dos tambÃm sugerem como fatores que dificultam a adesÃo dos pacientes ao tra-tamento: nÃmero reduzido de consultas/ano por paciente, grande intervalo entre as consultas, deficiÃncias na orientaÃÃo mÃdica durante a consulta, desabastecimento de medicamentos no hospital e pouco envolvimento dos pacientes no programa de apoio ao paciente hipertenso.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A principal causa de mortalidade em pacientes com cÃncer està relacionada com a presenÃa de tumores secundÃrios pelo organismo. Devido a falta de tratamento das metÃstases, muitos esforÃos estÃo sendo lanÃados para o desenvolvimento de novas drogas com potencial antimetastÃtico. Em estudos realizados em nosso laboratÃrio observamos que a biflorina, uma o-naftoquinona isolada das raÃzes da Capraria biflora, aumentava a sobrevida dos animais transplantados com o melanoma B16 sem expressiva toxicidade. Diante desse dado resolvemos avaliar a atividade antimetastÃtica desta naftoquinona, em modelos experimentais in vivo e in vitro, utilizando as linhagens celulares B16-F10 (melanoma murino) e MDAMB-435 (melanoma humano). A induÃÃo da metÃstase experimental foi realizada pela inoculaÃÃo da linhagem celular B16-F10 via veia caudal de animais C57BL/6. Neste ensaio, a biflorina (25 e 50 mg/kg/dia) inibiu a formaÃÃo dos nÃdulos metastÃtico em 57 e 71 %, respectivamente. Entretanto, em anÃlise histopatolÃgica dos pulmÃes dos animais tratados, foi observada a presenÃa de hemÃcias e hemossiderina, o que indica a presenÃa de hemorragia recente e tardia. Com objetivo de avaliar como a biflorina tem seu efeito sobre a metÃstase, foram realizados alguns ensaios in vitro utilizando duas linhagens de melanoma metastÃtico: B16-F10 e MDAMB-435. Em ensaio de adesÃo celular, a biflorina foi capaz de inibir a adesÃo de ambas as cÃlulas sobre o colÃgeno tipo I, um dos constituintes da matriz extracelular. AlÃm disso, em ensaio de migraÃÃo celular, utilizando o mÃtodo Wound healing (cicatrizaÃÃo), a biflorina tambÃm foi capaz de inibir a motilidade destas cÃlulas. Vale ressaltar que nesses ensaios foram utilizadas concentraÃÃes nÃo-citotÃxicas, o que exclue um efeito falso positivo. Por fim, em ensaio de zimograma com gelatina, foi observado que a biflorina nÃo alterava a liberaÃÃo das metaloproteinases -2 e -9 para o meio de crescimento, excluindo esse mecanismo de aÃÃo. Esses resultados sugerem que a biflorina apresenta um potencial antimetastÃtico bastante promissor atravÃs da sua aÃÃo sobre a adesÃo e migraÃÃo celular, eventos cruciais para que ocorra a formaÃÃo de metÃstase. Entretanto, futuros estudos sÃo necessÃrios para elucidar seu mecanismo de aÃÃo. / The main cause of mortality in cancer patients is related to the incidence of secondary tumors in the body. Owning up to the deficiency of therapeutic schemes direct to the treatment of metastasis, many efforts are being launched to develop drugs with anti-metastatic potential. In previous studies performed in our laboratory, biflorin, an o-naphthoquinone isolated from the roots of Capraria biflora, was found to increase the survival rates of B16-bearing mice without significant toxicity. In spite of these findings we decided to evaluate the anti-metastatic activity of biflorin using B16-F10 (murine melanoma) and MDAMB-435 (human melanoma) cells line. The experimental metastasis model was achieved by injecting B16-F10 cells in the tail vein of C57BL/6 mice. In this assay, biflorin (25 and 50 mg/kg/day) inhibited the formation of metastatic nodules in 57 and 71 %, respectively. Nevertheless, histopathological analyses of biflorin-treated lungs showed the presence of erythrocytes and hemosiderin, indicating the occurrence of recent and late hemorrhage. In order to evaluate how biflorin inhibits metastasis, we carried out in vitro tests using two cell lines of metastatic melanoma, B16-F10 and MDAMB-435. In the cell adhesion assay, biflorin inhibited adhesion of both cells lines on type I collagen, a substrate of the extracellular matrix. Moreover, biflorin was able to inhibit cell motility in the wound healing assay. The concentrations used in these assays did not show any cytotoxicity after 24 h of incubation, excluding a false-positive. Even so, in the zymogram assay we observed that biflorin did not alter the release of metallopeptidases -2 and -9 into growth medium, thus excluding this as the means by which biflorin exerts the anti-metastatic effect. These data suggest that biflorin has a promising anti-metastatic potential, as shown by its anti-adhesion and anti-migration properties on metastatic melanoma cell lines, however further studies are indispensable to elucidate its action mechanism.

Na natureza, os microorganismos podem apresentar forma de vida planctônica ou podem estar aderidos a superfícies formando comunidades conhecidas como biofilmes. A formação de biofilmes na indústria alimentícia é uma constante preocupação visto que os microorganismos aderidos podem causar contaminações persistentes, levando a deterioração do alimento e a transmissão de doenças. Uma alternativa para evitar a adesão bacteriana e a formação de biofilmes é o pré-condicionamento de superfícies com biosurfatantes, que são compostos tensoativos de origem microbiana capazes de alterar as propriedades físico-químicas e conseqüentemente modificar as interações entre a bactéria e a superfície. Os biosurfatantes, surfactina obtida de Bacillus subtilis e ramnolipídeo de Pseudomonas aeruginosa, foram testados quanto a capacidade de evitar a adesão e remover biofilmes de bactérias patogênicas de interesse alimentar. Foram avaliadas culturas individuais e mistas de Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, e Salmonella Enteritidis utilizando-se como modelo superfícies de poliestireno. O pré-condicionamento da superfície com surfactina na concentração de 0,25% reduziu a adesão de Salmonella Enteritidis e Listeria monocytogenes em 42%, enquanto que o tratamento com ramnolipídeo a 1% reduziu a adesão de Listeria monocytogenes e Staphylococcus aureus ao poliestireno em 57,8% e 67,8% respectivamente. O condicionamento com os biosurfatantes não se mostrou eficiente na redução da adesão das culturas mistas das bactérias se comparado aos resultados obtidos para as culturas individuais. O poliestireno condicionado com os biosurfatantes apresentou redução na hidrofobicidade devido ao caráter aniônico destas moléculas. A repulsão eletrostática e a redução das interações hidrofóbicas promovidas pelo condicionamento do poliestireno com ramnolipídeo foram fatores determinantes na atividade antiadesiva observada para L. monocytogenes e S. aureus, entretanto os resultados obtidos para a superfície tratada com surfactina sugerem que outros parâmetros influenciaram nos resultados observados. Após 2 h de contato a surfactina na concentração de 0,1% promoveu a remoção de 63,7% do biofilme de S. aureus, 95,9% do biofilme de L. monocytogenes, 35,5% do biofilme de S. Enteritidis e 58,5% do biofilme da cultura mista das três bactérias. Já o ramnolipídeo na concentração de 0,25% removeu 58,5% do biofilme de S. aureus, 26,5% do biofilme de L. monocytogenes, 23,0 % do biofilme de S. Enteritidis e 24% do biofilme da cultura mista após 2 h contato. De modo geral, o aumento do tempo de contato e da concentração dos biosurfatantes reduziu a remoção dos biofilmes. A surfactina e o ramnolipídeo demonstraram potencial para uso como agentes anti-adesivos assim como para a remoção de biofilmes de bactérias patogênicas de importância alimentar. / In nature, microrganisms can live as planktonic cells or can be found living in communities attached in surfaces forming biofilms. Biofilm represents a great concern for food industry, since it can be a source of persistent contamination that can lead to food spoilage and the transmission of diseases. To avoid the adhesion of bacteria and the formation of biofilms, an alternative is the pre-conditioning of surfaces using biosurfactants that are microbial compounds that can modify the physico-chemical properties of the surfaces changing bacterial interactions and consequently adhesion. The biosurfactants, surfactin obtained from Bacillus subtilis and rhamnolipids from Pseudomonas aeruginosa, were evaluated as agents to avoid the adhesion and to disrupt biofilms of food-borne pathogenic bacteria. Individual cultures and mixed cultures of Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes e Salmonella Enteritidis were studied using polystyrene as the model surface. The pre-conditioning with surfactin 0,25% reduces in 42,0% the adhesion of L. monocytogenes and S. Enteritidis, whereas the treatment using rhamnolipids 1,0% reduced in 57,8% the adhesion of L. monocytogenes and in 67,8% the adhesion of S. aureus to polystyrene. The conditioning of surface with biosurfactants was less effective to avoid adhesion of mixed cultures of the bacteria when compared with the results obtained for individual cultures. The polystyrene surface conditioned with the biosurfactants showed a reduction in the hydrophobicity due to the anionic character of the molecules. The electrostatic repulsion and the reduction on hydrophobic interactions promoted by the conditioning of surface with rhamnolipids were determinant factors to explain the anti-adhesive activity observed for L. monocytogenes and S. aureus, however, the data obtained with surfactin suggest that other parameters have influenced the results observed. After 2 h contact with surfactin at 0,1% concentration, the pre-formed biofilms of S. aureus were reduced by 63,7%, L. monocytogenes biofilms were reduce by 95,9% , S. Enteritidis biofilms by 35,5% and the mixed culture biofilm by 58,5%. The rhamnolipids at 0,25% concentration removed 58,5% of biofilm of S. aureus, 26,5% of the biofilm of L. monocytogenes, 23,0% the biofilm of S. Enteritidis and 24,0% the biofilm of the mixed culture after 2 h of contact. In general, the increase in concentration of biosurfactants and in the time of contact decreases the biofilm remove percentage. These results demonstrate that surfactin and rhamnolipids present potential to be used as agents to control the attachment and to disrupt biofilms of food-borne pathogens.