Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, Florianópolis, 2010 / Made available in DSpace on 2012-10-25T05:40:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 284025.pdf: 1070317 bytes, checksum: 84f916ca93468446cc10852728c41148 (MD5) / O fungo Antrodia albida foi cultivado em quatro diferentes caldos de cultivo para estudo da produção da biomassa e da substância ativa. Os extratos obtidos a partir de micélio cultivado no meio MNM apresentaram maiores halos de inibição do crescimento bacteriano em comparação com os obtidos a partir de micélios cultivados nos outros meios. Foi observado um aumento progressivo da biomassa fúngica até o 30º dia de incubação. A substância ativa começou a ser produzida a partir do 15º dia de cultivo. Os extratos se mostraram instáveis quando armazenados sob vácuo por um período de tempo superior a 30 dias. A atividade antibacteriana de extratos obtidos a partir de A. albida foi avaliada contra três espécies bacterianas Gram-negativas (Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Enterobacter aerogenes ATCC 13048) e três espécies Gram-positivas (Staphylococcus aureus ATCC 25923, Micrococcus sp., Bacillus cereus ATCC 11778). Os extratos foram ativos contra S. aureus, B. cereus, Micrococcus sp. e P. aeruginosa. A partir do cultivo em meio sólido foi possível determinar a concentração inibitória mínima para S. aureus (15 mg/ml) e para E. coli (20 mg/ml). Os extratos obtidos foram caracterizados quimicamente através de GC-MS. As análises químicas realizadas identificaram um total de dezessete diferentes substâncias presentes nos extratos testados, dentre as quais, seis destas substâncias apresentaram registros sobre atividades biológicas e importância econômica na literatura consultada, tais como: efeito imunossupressor, efeito supressor da proliferação de linhagens de células cancerosas, diminuição dos níveis de colesterol, atividade neuroprotetora e hepatoprotetora, atividade antiinflamatória, atividade inibitória de Quorum Sensing e formação de biofilmes. / Antrodia albida was grown in four different broths to study the production of biomass and the active substance. The extracts obtained from mycelium grown in MNM medium showed greater inhibition zones of bacterial growth compared with those obtained from mycelia grown in other media. It was observed a progressive increase in fungal biomass until the 30th day of incubation. The active substance began to be produced from the 15th day of cultivation. The extracts were unstable when stored at -20ºC for a period exceeding 40 days. Antibacterial activity of extracts from A. albida was evaluated against three Gram-negative bacterial species (Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Enterobacter aerogenes ATCC 13 048) and three Gram-positive species (Staphylococcus aureus ATCC 25923, Micrococcus sp., Bacillus cereus ATCC 11 778). Extracts were active against S. aureus, B. cereus, Micrococcus sp. and P. aeruginosa. From the cultivation on solid medium was possible to determine the minimum inhibitory concentration for S. aureus (15 mg / ml) and E. coli (20 mg / ml). The extracts were chemically characterized by GC-MS. The chemical analysis identified a total of seventeen different substances in tested extracts. Six of these substances had records on biological activities and economic importance in the literature, such as immunosuppressive effect, suppressive effect of proliferation of cancer cell lines, decreased levels of cholesterol, neuroprotective and hepatoprotective activity, antiinflammatory activity, inhibitory activity of Quorum Sensing and biofilm formation.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química. / Made available in DSpace on 2012-10-23T21:17:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Este trabalho apresenta estudos referentes a produção e caracterização microbiológica de um material compósito do tipo poIímero-madeira com propriedade bactericida (BWPC), agregada pela adição de um agente biocida, o triclosan, no processo de extrusão. Durante as etapas de processamento foram realizados ajustes nas temperaturas de máquina e nas velocidades de rotação da rosca de extrusão e avaliado o efeito destes parâmetros na eficiência bactericida do compósito. Além da definição de formulações e ajustes dos parâmetros de processamento foi realizada a caracterização microbiológica do BWPC empregando testes de Difusão em Agar com bactérias Escherichia co/i (EC) e Staphylococcus aureus (SA) , sendo avaliado o seu efeito bactericida após sua exposição em condições consideradas de degradação; em ambientes com diferentes temperaturas e contendo radiação ultravioleta. Para a avaliação do efe~to de tais fatores foram produzidas amostras de BWPC com diferentes percentuais de aditivo bactericida (triclosan), diferentes percentuais de polipropileno e expostas por diferentes períodos de tempo em ambiente com diferentes valores de temperatura e em ambientes contendo radiação ultravioleta. Os experimentos realizados indicaram a presença do efeito bactericida no compósito dependente do percentual do aditivo triclosan, da temperatura do meio de exposição e do tempo de exposição nos ambientes com diferentes temperaturas e nos ambientes contendo radiação ultravioleta. Quanto aos parâmetros de processo e o percentual da matriz polimérica tais fatores não apresentaram efeitos significativos na propriedade bactericida agregadã ao compósito BWPc.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. / Made available in DSpace on 2012-10-24T04:29:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 257755.pdf: 25607035 bytes, checksum: 1cda68e05297814ff7edf3f79e43a74f (MD5) / Alguns microrganismos possuem a capacidade de produzir substâncias que podem influenciar no desenvolvimento de outros microrganismos. Desde os anos 50 é relatada a capacidade de várias espécies de bactérias do gênero Bacillus de produzir substâncias com atividade antimicrobiana como peptídeos, também denominados de bacteriocinas e enzimas como a subtilisina, subtilina, as proteases e as termolisinas. Muitos desses peptídeos e enzimas têm sido caracterizados bioquimicamente e geneticamente. Embora sejam conhecidas, a função estrutural, a biossíntese e modo de ação de alguns peptídeos antimicrobianos e enzimas, muitos aspectos desses compostos ainda permanecem desconhecidos. Frente a essa realidade, o presente estudo investigou a atividade antibacteriana e antifúngica e a toxicidade in vitro e in vivo do extrato bruto de Bacillus amyloliquefaciens R 10. O extrato bruto antibacteriano de Bacillus amyloliquefaciens R 10 foi obtido por técnicas de precipitação de proteínas, centrifugação, diálise e esterilização por filtração. A padronização das análises toxicológicas e de atividade antibacteriana e antifúngica foi realizada pela determinação da concentração de proteínas do extrato bruto de Bacillus amyloliquefaciens R 10. O ensaio de atividade antibacteriana e antifúngica foi realizado pela técnica de difusão em poços. Dentre os diferentes indicadores utilizaram-se bactérias Gram-positivas (Listeria monocytogenes NCTC 098630, Staphylococcus aureus ATCC 25923 e Enterococcus faecalis ATCC 29212), Gram-negativas (Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Enterobacter aerogenes ATCC 13048 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027), fungos (Aspergillus fumigatus ATCC 9197 e Penicillium commune J 238) e leveduras (Rhodotorula muscilaginosa J 350, Pichia anomala DSM 70255 e Kluveromyces marxianus ATCC 16045). O extrato bruto foi testado nas concentrações de 5, 20, 40, 60 e 80 g de proteínas, em ambos os ensaios de atividade antimicrobiana. Para avaliar a toxicidade do extrato bruto antibacteriano de Bacillus amyloliquefaciens R 10 foram utilizados ensaios in vitro (genotoxicidade) e in vivo (toxicidade aguda em ratos e camundongos e toxicidade de doses repetidas em camundongos). A investigação da genotoxicidade com células VERO ATCC-CCL 81 foi realizada pelo ensaio Cometa, utilizando-se 60, 80 e 100 g de proteínas do extrato bruto. Para análise toxicológica aguda em ratos Wistar (Rattus norvegicus), utilizou-se um grupo de 10 animais (5 machos e 5 fêmeas) tratado com o extrato bruto, por gavagem oral, com a dose de 2.000µg/kg (dose máxima recomendada). Os animais foram pesados no início e no final do experimento e observados por 14 dias quanto aos possíveis sinais de toxicidade (morte, coma, convulsão, prostração, ataxia, tremores, alteração na pele ou pêlo, alteração nas mucosas, diarréia e salivação). Para análise toxicológica aguda em camundongos Swiss (Mus musculus), utilizou-se o extrato bruto antibacteriano de Bacillus amyloliquefaciens R 10 por gavagem oral, numa única administração, nas doses de 5, 50, 500 e 5.000 g/kg a 80 camundongos (40 machos e 40 fêmeas, contendo 10 animais por grupo). Outros 20 camundongos (10 machos e 10 fêmeas) receberam veículo (salina, NaCl 0,9%), pela mesma via. Para análise toxicológica de doses repetidas em camundongos Swiss (Mus musculus) utilizou-se o extrato bruto antibacteriano de Bacillus amyloliquefaciens R 10 administrado por gavagem oral, por um período de 90 dias nas doses de 50, 500 e 5.000 g/kg em 120 animais (60 machos e 60 fêmeas, contendo 20 animais por grupo). Outros 40 camundongos (20 machos e 20 fêmeas) receberam veículo (salina, NaCl 0,9%), pela mesma via. Constatou-se nos ensaios de atividade antimicrobiana que o extrato bruto de Bacillus amyloliquefaciens R 10 não apresentou atividade contra os bolores e as leveduras nas concentrações testadas, e somente apresentou atividade antibacteriana frente Listeria monocytogenes NCTC 098630. O extrato bruto antibacteriano de Bacillus amyloliquefaciens R 10 não foi genotóxico para células VERO na concentração de 60µg/ml, porém apresentou genotoxicidade nas concentrações de 80 e 100µg/ml. Na análise toxicológica aguda em ratos a dose letal 50 (DL50) foi superior a 2.000µg/kg. Na análise toxicológica aguda em camundongos, o extrato bruto apresentou boa tolerabilidade e reduzidos efeitos tóxicos agudos importantes, com DL50 superior a 5.000µg/kg. Já na análise toxicológica de doses repetidas, a non toxic adverse effect level (NOAEL) para o extrato bruto antibacteriano de Bacillus amyloliquefaciens R 10 situa-se entre as doses de 50 e 500 g/kg. Os resultados indicam que o extrato bruto antibacteriano de Bacillus amyloliquefaciens R 10 apresenta um grande potencial como conservador natural de alimentos, dada sua marcante atividade antilisterial e sua relativa segurança toxicológica. Some microorganisms are able to produce substances that can influence the growth of other microorganisms. The ability of various bacterial species of the genus Bacillus to produce substances with antimicrobial activity such as peptides, also called bacteriocins, and enzymes such as subtilisin, subtilin, proteases and thermolysins has been reported since the 1950's. Many of these peptides and enzymes have been characterized biochemically and genetically. Although the structural function, biosynthesis and mode of action of some antimicrobial peptides and enzymes have been identified, many aspects of these compounds are still unknown. The present study investigated the antibacterial and antifungal activity and the in vitro and in vivo toxicity of the crude extract of Bacillus amyloliquefaciens R 10. The antibacterial crude extract of Bacillus amyloliquefaciens R 10 was obtained by techniques of protein precipitation, centrifugation, dialysis and sterilization through filtration. The standardization of the toxicological analysis, and antibacterial and antifungal activity was realized by determining the concentration of proteins in the crude extract of Bacillus amyloliquefaciens R 10. The assay of antibacterial and antifungal activity was done by agar diffusion technique in wells. Among the different indicators were used the Gram-positive bacteria (Listeria monocytogenes NCTC 098630, Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Enterococcus faecalis ATCC 29212), Gram-negative (Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella typhimurium ATCC 14028, Enterobacter aerogenes ATCC 13048 and Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027), molds (Aspergillus fumigatus ATCC 9197 and Penicillium commune J 238), and yeasts (Rhodotorula muscilaginosa J 350, Pichia anomala DSM 70255 and Kluveromyces marxianus ATCC 16045). The crude extract was tested in concentrations of 5, 20, 40, 60 and 80 g of protein in both assays of antimicrobial activity. To evaluate the Bacillus amyloliquefaciens R 10 antibacterial crude extract's toxicity were used in vitro (genotoxicity) and in vivo (acute toxicity in rats and mice and repeated doses toxicity in mice) assays. The research of the genotoxicity with VERO ATCC-CCL 81 cells was made by Comet assay, using 60, 80 e 100 g of protein of the crude extract. To the acute toxicological analysis in rats Wistar (Rattus norvegicus), were used one group with 10 animals (5 males and 5 females) treated with the crude extract by oral gavage, with dose of 2,000µg/kg (maximum dose recommended). The animals were weighed at the beginning and at the end of the experiment, and observed during 14 days as the possible toxicity signs (death, coma, convulsions, prostration, ataxy, tremors, skin or hair alterations, mucous alteration, diarrhea and salivation). To the acute toxicological analysis in Swiss mice (Mus musculus), the antibacterial crude extract of Bacillus amyloliquefaciens R 10 was used by oral gavage, in a single administration, in doses of 5, 50, 500 and 5,000 g/kg to 80 mice (40 males and 40 females, with 10 animals per group). Other 20 mices (10 males and 10 females) received the vehicle (saline, NaCl 0.9%), through the same route. To the repeated doses toxicological analysis in Swiss mice (Mus musculus) the antibacterial crude extract of Bacillus amyloliquefaciens R 10 was administrated by oral gavage during 90 days in doses of 50, 500 and 5,000 g/kg in 120 animals (60 males and 60 females, in groups of 20 animals). Other 40 mice (20 males and 20 females) received the vehicle (saline, NaCl 0.9%), through the same route. It was verified in the antimicrobial activity assays that the crude extract of Bacillus amyloliquefaciens R 10 didn't present activity against molds and yeasts in the tested concentrations, and only presented antibacterial activity against Listeria monocytogenes NCTC 098630. The antibacterial crude extract of Bacillus amyloliquefaciens R 10 was not genotoxic to VERO cells at concentration of 60µg/ml, but showed genotoxicity at concentration of 80 and 100µg/ml. In the acute toxicological analysis in rats the letal dose 50 (DL50) was higher than 2,000µg/kg. In the acute toxicological analysis in mice, the crude extract presented good tolerability and litle important acute toxic effects with DL50 higher than 5,000µg/kg. In the repeated doses toxicological analysis, a non toxic adverse effect level (NOAEL) for the antibacterial crude extract is between the doses of 50 and 500 g/kg. The results showed that the antibacterial crude extract of Bacillus amyloliquefaciens R 10 presents a great potential as a natural food preservative, due to its notable antilisterial activity, and its relative toxicological security.

La resistencia antimicrobiana constituye un problema actual y creciente que tiene un impacto tanto en la economía como en la salud pública. Esta resistencia se ha observado principalmente, según la OMS, en bacterias como Pseudomonas aeruginosa, la cual pertenece al grupo prioritario de patógenos para los cuales se necesita urgentemente nuevos tratamientos efectivos. Busca obtener bacteriófagos de Pseudomonas aeruginosa multidrogo-resistente a partir de muestras de agua de tres ríos de la provincia de Lima – Perú. Se logra aislar dichos bacteriófagos a partir de las muestras de los ríos Rímac, Chillón y Lurín. Estos fueron caracterizados de acuerdo con los parámetros cinéticos de periodo de latencia, tamaño de explosión y tasa de adsorción. Los periodos de latencia oscilaron, en su mayoría, entre 0 y 10 minutos; los tamaños de explosión variaron desde 15 UFP/célula hasta 3688 UFP/célula y las tasas de adsorción oscilaron entre 1,91 x 10-9 mL/min y 1,32 x 10-8 mL/min. Además, se evaluó la estabilidad térmica de los lisados a 50°C, 60°C, 70°C y 80°C, siendo el lisado denominado LR2 el que mostró una mejor estabilidad térmica a 50°C e incluso soportó temperaturas de 60°C y 70°C por un corto periodo de tiempo. Finalmente, evaluó el efecto de la presencia de Ca+2 en la tasa de adsorción de los bacteriófagos; sin embargo, no se logró establecer una relación entre ambos, ya que en uno de los casos la presencia del ion divalente Ca+2 aumentó la tasa de adsorción, en otro la disminuyó, y en un tercer caso no pareció alterarla. / Universidad Nacional Mayor de San Marcos (Lima). Vicerrectorado de Investigación y Posgrado / Tesis

A resistência aos antibióticos dos patógenos mais comuns do trato respiratório está aumentando mundialmente. Recentemente, Streptococcus pneumoniae resistente à penicilina tem sido isolado em diversos países, e a freqüência dessas cepas tem elevado de modo alarmante. O aumento da resistência, com conseqüentes implicações terapêuticas, tem levado a uma reavaliação do uso dos antibióticos ß-lactâmicos para o tratamento de infecções pneumocócicas. No presente trabalho, um total de 107 amostras de Streptococcus pneumoniae, obtidas de materiais provenientes de pacientes adultos ambulatoriais e hospitalizados, em dois centros médicos de duas cidades do Rio Grande do Sul (Porto Alegre e Caxias do Sul), os quais apresentavam quadro clínico-radiológico de infecção pulmonar, foram analisadas com o objetivo de estudar-se a resistência do germe à penicilina. As amostras constituídas de escarro (80,4%), lavado brônquico (13,5%) e aspirado traqueal (6,6%) foram coletadas no período compreendido entre Julho de 1998 e Julho de 1999. O material foi semeado em meio de Agar sangue e as colônias suspeitas de Streptococcus pneumoniae foram transferidas para meio de Mueller-Hinton para teste de optoquina e de sensibilidade à penicilina com discos de oxacilina. Um halo de inibição da oxacilina menor do que 20 mm indicava a realização de teste para determinação da concentração inibitória mínima (MIC) com E-test. Um total de nove cepas foi identificado como tendo resistência intermediária à penicilina (MIC 0,1-1,0μg/ml) e nenhuma cepa resistente (resistência elevada: MIC > 2,0 μg/ml) foi identificada. Uma monitorização local das cepas quanto à resistência antimicrobiana é de grande importância para os clínicos no manejo de infecções pneumocócicas. / Antibiotic resistance to the common respiratory tract pathogens is increasing worldwide. Recently, penicillin-resistant pneumococci have been isolated in several countries, and the incidence of these strains has risen alarmingly. The increased of resistance with consequence therapeutic implications has led to a re-evaluation of ß-lactam antibiotics for the treatment of streptococcal infections. In present study a total of 107 isolates of Streptococcus pneumoniae from samples of adult hospitalizated patients ando outpatients were prospectively collected in 2 different medical centers of Rio Grande do Sul - Brazil (Caxias do Sul and Porto Alegre) with clinical and radiologyc signs of respiratory infections, were analyzed with objective to study the penicillin-resistant pneumococci. The samples consisting of sputum (80,4%), bronchial lavage (13,5%) and inhaled traqueal (6,6%) had been colected in the period understood between 98 July and 99 July. The material was sown in agar-blood and the colonies suspicion of Streptococcus pneumoniae had been transferred to Mueller-Hinton for test of optochin and for sensitivity to penicillin test with oxacilin disks. One inhibition of the lesser that 20 mmm for oxacilin indicates the test accomplishment to determine minimum inhibitory concentration (MIC) with E-test. A total of 9 strains were intermediate-resistant to penicillin (MIC 0,1-1,0μg/ml) and neither was resistant to penicillin (MIC > 2,0 μg/ml). Monitoring local of antimicrobial resistant strains is of great importance to clinicians for the management of pneumococcal infections.

Bacteriocinas são peptídeos pequenos sintetizados por bactérias que possuem propriedades antimicrobianas. O presente estudo teve por objetivos identificar e caracterizar uma bacteriocina produzida por Bacillus amyloliquefaciens LBM 5006, isolado de solo da Mata Atlântica, Santa Catarina, Brasil. A produção da substância antimicrobiana tem início na fase exponencial de crescimento e sua atividade máxima ocorre na fase estacionária. O efeito do cocultivo de B. amyloliquefaciens com diferentes bactérias na produção do antimicrobiano foi investigado. O cultivo de células de Escherichia coli intactas ou inativadas pelo calor com a cepa produtora aumentou a síntese da substância antimicrobiana. A bacteriocina LBM 5006 apresentou amplo espectro de ação, produzindo atividade antagonista contra bactérias, fungos e amebas patogênicas. O modo de ação contra células de Listeria monocytogenes e Paenibacillus larvae foi bactericida e bacteriolítico. Atividade esporicida foi observada contra esporos de P. larvae após tratamento com 1600 UA mL-1. Efeitos amebistático e amebicida contra trofozoítos de Acanthamoeba polyphaga com a consequente lise celular foram observados. A bacteriocina não teve efeito inibitório em células Vero nas concentrações que foram efetivas contra as amebas. A substância antimicrobiana foi isolada por precipitação com sulfato de amônio, cromatografia de gel filtração e extração com 1-butanol. O espectro ultravioleta foi típico de um polipeptídeo e o infravermelho indicou a presença de ligações peptídicas e grupamentos acil na sua estrutura. Análises por espectroscopia de massas indicaram que B. amyloquefaciens LBM 5006 produziu dois peptídeos antimicrobianos, com 1058 Da e 1464 Da, correspondentes a peptídeos tipo-iturina e tipo-fengicina, respectivamente. / Bacteriocins are small peptides synthesized by bacteria which have antimicrobiall properties. This study aimed to identify and characterize a bacteriocin produced by Bacillus amyloliquefaciens LBM 5006, isolated from soil of Mata Atlântica, Santa Catarina, Brazil. It has been observed that the antimicrobial substance production starting at the exponencial grown phase and maximum activity occur at stationary phase. The effect of different bacteria on the production of antimicrobial activity by Bacillus amyloliquefaciens LBM 5006 was investigate. It was concluded that the presence of intact or thermally inactivated cells of Escherichia coli enhanced the synthesis of antimicrobial peptides by B. amyloliquefaciens strain. Bacteriocin LBM 5006 showed broad spectrum of action, producing antagonistic activity against bacteria, fungi and pathogenic amoebas. The mode of action against Listeria monocytogenes and Paenibacillus larvae was bactericidal and bacteriolytic. Sporicidal activity was observed against P. larvae spores after treatment whit 1600 AU mL-1. Amoebicidal and amoebistatic effects were detected against throphozoites of Acanthamoeba poliphaga and cell lysis. The bacteriocin had no inhibitory effect on Vero cells at concentrations that were effective against amoebas.The antimicrobial substance was isolated by ammonium sulfate precipitation, gel filtration chromatography and 1-butanol extraction.The ultraviolet spectrum was typical of a polypeptide and the infrared spectrum indicates the presence of peptide bonds and acyl group(s) in its structure. Mass spectroscopy analysis indicated that B. amyloliquefaciens LBM 5006 produces two antimicrobial peptides, with main peaks at m/z 1058 Da and 1464 Da, corresponding to iturinlike and fengycin-like peptides, respectively.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química. / Made available in DSpace on 2012-10-24T07:40:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 266273.pdf: 1432106 bytes, checksum: a3a0e6a1397546d97078960a9bc7a55f (MD5) / Um estudo fitoquímico de L. corniculatus foi realizado e biomonitorado através de bioensaios de atividade antioxidante, antibacteriana e anti-inflamatória. O estudo fitoquimico foi efetivado através de sucessivas cromatografias em coluna de sílica gel e monitoradas por cromatografia em camada delgada, sendo as estruturas elucidadas através de técnicas de IV, RMN de 1H e 13C e COSY. A atividade antioxidante in vitro foi avaliada nos modelos como a capacidade sequestrante DPPH, potencial redutor e peroxidação lipídica. O efeito antibacteriano foi avaliado através do método de microdiluição o qual produz a Concentração Inibitória Mínima e a Concentração Bactericida Mínima. Finalmente, o efeito anti-inflamatório de Lotus corniculatus foi analisado no modelo in vivo da pleurisia induzida pela carragenina em camundongos, que é um modelo de inflamação aguda. Foram isolados três compostos: dois terpenos, o ?-sitosterol e o ácido oleanólico e um flavonóide glicosilado canferitrina. Após realizados os ensaios de atividades biológicas, nossos resultados demonstraram que Lotus corniculatus cv. São Gabriel possui importante propriedade antibacteriana e anti-inflamatória. Estes efeitos podem ser atribuídos aos compostos isolados como o ácido oleanolico, ?-sitosterol e principalmente ao canferitrina o qual demonstrou o melhor efeito farmacológico.

CARNEIRO, Victor Alves. Inibição de formação de biofilme bacteriano através de lectinas vegetais. 2007. 89 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2007. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-07-15T13:40:45Z No. of bitstreams: 1 2007_dis_vacarneiro.pdf: 1083928 bytes, checksum: e8c87c7ccb243cae82022d5153e98560 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T20:25:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_dis_vacarneiro.pdf: 1083928 bytes, checksum: e8c87c7ccb243cae82022d5153e98560 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T20:25:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_dis_vacarneiro.pdf: 1083928 bytes, checksum: e8c87c7ccb243cae82022d5153e98560 (MD5) Previous issue date: 2007 / Natural and complementary medicine, especially phytotherapy, is becoming more and more useful to fulfill the needs of great part of the population when it comes to oral health, particularly in the developing countries. Among the phytotherapics, lectins may be valuable as anti-plaque and antimicrobial agents, since they can be intimately related with inference in biofilm formation, given that these proteins recognize carbohydrates in a specific and reversible way. Within that context, this study aimed to test the ability of five lectins (extracted from Canavalia ensiformis, Canavalia maritima, Cymbosema roseum, Acacia farnesiana and Hypnea cervicornis) in inhibiting the formation of biofilm and killing oral microorganisms(Streptococcus sanguis ATCC10556 e S. mutans UA159). The antimicrobial activity of the five lectins tested was determined by the convetional test of microdilution in polystyrene plaques. The lectin concentrations assayed against the microorganisms varied from 2mg/mL to 31. 5μ g/mL. To evaluate the adherence, a semi -quantitative assay was perfomed within microtitulation plaques (96 wells), to where were added 100μL of each lectin, and then 100μL of bacterial suspension (108 CFU/mL). This material was incubated in 10% CO 2 atmosphere at 37ºC. Adherence was revealed and quantified by violet crystal staining. Absorption of violet crystal was determined by spectophotometry (595nm). Only ConA presented bactericide or bacteriostatic activity against the strains tested. The assay of inhibition of biofilm formation revealed that almost all lectins had this kind of activity, reducing the adherence in a significant way (p<0.05). ConA had no effect on the formation of biofilm for any bacteria tested. / A medicina natural e complementar, especialmente a fitoterapia, se torna cada vez mais utilizada no combate as necessidades de grande parte da população em saúde bucal, particularmente nos países em desenvolvimento. Dentre os fitoterápicos, as lectinas podem ter um valor como agentes antiplaca e antimicrobianos, uma vez que podem estar intimamente relacionadas com a interferência da formação do biofilme dos microrganismos, já que se tratam de proteínas que reconhece carboidratos de forma específica e reversível. O objetivo deste estudo foi testar in vitro a capacidade de inibição das lectinas isoladas das espécies de Canavalia ensiformis, Canavalia maritima, Cymbosema roseum, Acacia farnesiana e Hypnea cervicornis, na formação de biofilmes bacterianos e atividade antimicrobiana contra microrganismos orais (Streptococcus sanguis ATCC10556 e S. mutans UA159). A atividade antimicrobiana das cinco lectinas testadas foi determinada pelo teste convencional da microdiluição em placas de poliestireno, sendo testada as concentrações de 2mg/mL à 31,5μg/mL contra os microrganismos em estudo. Para avaliação de aderência foi feito um ensaio semiquantitativo de aderência em placas de microtitulação de poliestireno (96 poços), onde foi adicionado 100 μL de cada uma das lectinas, em seguida adicionada 100 μL de suspensão bacteriana (108 UFC/mL) e incubado a 37ºC em uma atmosfera de 10% de CO2. A aderência foi revelada e quantificada por tintura com cristal violeta. A absorção do cristal violeta foi determinada através da leitura no espectrofotômetro (595nm). Somente a lectina de ConA apresentou a atividade bactericida ou bacteriostática contra os microorganismos estudados. No teste de inibição da formação do biofilme, todas as lectinas testadas foram favoráveis na inibição, reduzindo significativamente a aderência (p< 0,05). A lectina de ConA não teve ação sobre a formação do biofilme de nenhumas das bactérias testadas.

Evalúa la actividad antimicrobiana, antioxidante in vitro y determinar la composición química de los aceites esenciales de Senecio nutans Sch. Bip (Wiskataya), Senecio calvus Cuatrec (Huamanripa) y Senecio chiquianensis Cabrera (Remilla). Los aceites esenciales son obtenidos de las partes aéreas por el método de destilación por arrastre de vapor de agua, posteriormente se determinan sus propiedades físicas. Las muestras son sometidos a la determinación de la composición química mediante Cromatografía de Gases /Espectrometría de Masas (CG/EM). La actividad antimicrobiana se evalúa mediante el método de microdilución colorimétrica y se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI). Se evalúa la actividad antioxidante mediante el método de captación del radical 2,2-difeneil-1-picril-hidrazilo (DPPH). Los rendimientos obtenidos para los aceites esenciales de S. nutans Sch. Bip, S. calvus Cuatrec S. chiquianensis Cabrera son 0,97, 0,42 y 0,03% respectivamente. El análisis de CG/EM revela que los hidrocarburos monoterpenos son los componentes mayoritarios, seguidos de los sesquiterpenos. Por el método de microdilución, los aceites esenciales estudiados presentan actividad antimicrobiana frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Bacillus subtilis ambiental y escasa actividad frente Escherichia coli cepa clínica y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853. En el análisis de DPPH, se obtiene un IC50 de 11,06 mg/mL para el aceite esencial de Senecio nutans Sch. Bip, un IC50 de 8,85 mg/mL para Senecio calvus Cuatrec y un IC50 de 4,205 mg/mL para Senecio chiquianensis Cabrera, valores que exhiben capacidad antioxidante como donadores de electrones al radical DPPH menor que la sustancia de referencia Trolox® (IC50=0,0038 mg/mL). Se concluye que los componentes químicos de los aceites esenciales de S. nutans Sch. Bip, S. calvus Cuatrec y S. chiquianensis Cabrera, poseen actividad antimicrobiana frente a las bacterias Gram positivas analizadas, asimismo presentan capacidad antioxidante menor que el estándar Trolox, siendo el aceite esencial de S. chiquianensis Cabrera (Remilla) la que evidencia un prometedor efecto natural. / Tesis

VASCONCELOS, Suyane Maria Luna Cruz de. Avaliação in situ da influência da utilização de diferentes sistemas adesivos no desenvolvimento da cárie secundária em esmalte. 2008. 53 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-19T12:32:21Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_smlcvasconcelos.pdf: 1627430 bytes, checksum: dc91483ce3821b1b638f3d470fcb3d52 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-02T16:12:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_smlcvasconcelos.pdf: 1627430 bytes, checksum: dc91483ce3821b1b638f3d470fcb3d52 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-02T16:12:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_smlcvasconcelos.pdf: 1627430 bytes, checksum: dc91483ce3821b1b638f3d470fcb3d52 (MD5) Previous issue date: 2008 / Contemporary adhesives systems present satisfactory bonding to enamel and dentin. However, replacement of the restorations due to secondary caries formation is still a major problem and of great concern in Dentistry. Thus, this study assessed in situ the effects of adhesive systems containing or not fluoride and/or the antibacterial monomer 12-methacryloyloxydodecylpyridinium bromide (MDPB) on the microbiological composition of dental biofilm and on enamel demineralization. During two phases of 14 days each, ten volunteers wore palatal appliances containing four human enamel slabs, which were extra-orally restored using a resin composite (Z250 3M-ESPE) and one of the following adhesive systems: Adper™ Single Bond 2 (total etch, G1); All-Bond SE™ (self-etch, G2); One-Up Bond F Plus (self-etch containing fluoride G3) and Clearfil Protect Bond (self-etch containing fluoride and MDPB, G4). The volunteers were randomly allocated to treatments, and those who received G1 and G2 in the first phase received G3 and G4 in the second one, and vice versa. The volunteers were asked to drop a 20% sucrose solution onto the slabs eight times per day and to use fluoridated dentifrice 3 times per day. The biofilm formed on the slabs was analyzed with regard to total and mutans streptococci as well as lactobacilli counts. Demineralization was determined on enamel around the restorations by cross-sectional microhardness. The data were analyzed by analysis of variance, ANOVA. No differences were found for microbiological composition or enamel demineralization among the studied adhesive systems. It can be concluded that that fluoride or MDPB addition to adhesives systems presented no effect in controlling caries around resin restorations in this in situ model. / Os sistemas adesivos atuais apresentam resultados satisfatórios no que concerne à adesão ao esmalte e à dentina, entretanto, a maior causa de falhas em restaurações estéticas ainda é a ocorrência de recidiva de cárie ao longo de suas margens. Desta forma, este estudo avaliou a ação de sistemas adesivos com flúor e/ou com um novo monômero, brometo de metacriloiloxidodecilpiridinio (MDPB) na composição microbiológica do biofilme dental e no processo de desmineralização do esmalte adjacente à restauração de resina composta, mediante um delineamento in situ, cruzado e duplo-cego. Durante duas fases de 14 dias, dez voluntários utilizaram dispositivos palatinos, contendo, cada um, quatro blocos de esmalte dental humano, restaurados extra-oralmente com resina composta Z250 e um dos seguintes sistemas adesivos: Adper™ Single Bond 2 (condicionamento total, G1), All-Bond SE™ (autocondicionante, G2), One-Up Bond F Plus (autocondicionante com flúor, G3) e Clearfil Protect Bond (autocondicionante com flúor e MDPB, G4). Os voluntários foram aleatoriamente divididos entre os grupos, sendo que os que receberam os sistemas adesivos referentes aos grupos G1 e G2, na 1ª fase, receberam os tratamentos referentes aos grupos G3 e G4 na 2ª fase e vice-versa. Todos os voluntários foram instruídos a gotejar sobre os blocos, oito vezes por dia, uma solução de sacarose a 20%, simulando um desafio cariogênico, e a utilizar um dentifrício fluoretado padronizado três vezes por dia na higienização dentária. Após o término de cada fase o biofilme formado sobre cada bloco foi coletado e utilizado para a contagem de estreptococos totais, estreptococos mutans e lactobacilos. A perda de mineral foi analisada por meio do teste de microdureza em corte longitudinal do esmalte adjacente à restauração. Aplicou-se a análise de variância, ANOVA, não sendo observada diferença estatisticamente significante para a composição microbiológica ou desmineralização do esmalte entre os adesivos estudados. Concluiu-se que a incorporação de MDPB e/ou flúor nos sistemas adesivos autocondicionantes não foi capaz, nas condições deste estudo, de prevenir a ocorrência da cárie secundária.