Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2012. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2013-03-05T00:42:14Z No. of bitstreams: 1 2012_CarlosAlbertoCarneiroRangeldeCastro.pdf: 52928829 bytes, checksum: acbd54bbf5915fffbf45d0497af9216d (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2013-03-05T14:04:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_CarlosAlbertoCarneiroRangeldeCastro.pdf: 52928829 bytes, checksum: acbd54bbf5915fffbf45d0497af9216d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-05T14:04:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_CarlosAlbertoCarneiroRangeldeCastro.pdf: 52928829 bytes, checksum: acbd54bbf5915fffbf45d0497af9216d (MD5) / Introdução: Os taxanos são quimioterápicos inibidores da tubulina e amplamente utilizados no tratamento de tumores malignos. Apesar de seu uso disseminado, pouco se conhece sobre sua farmacodinâmica e sobre as possíveis alterações crônicas que possam causar. A pneumonia induzida pelo docetaxel é entidade conhecida e pouco estudada, com incidência estimada em 10% nos pacientes em uso de docetaxel, sendo fatal em até 40% dos casos. O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações pulmonares induzidas pelo uso do docetaxel. Material e Métodos: Utilizamos 42 ratos Wistar, com peso entre 280 e 310g, divididos em 3 grupos de estudo e um grupo controle (GC), sendo realizada aplicação intra-peritoneal única de docetaxel em doses de 70 mg/m2 (G70 - 10 animais), 140 mg/m2 (G140 - 10 animais) e 210 mg/m2 (G210 - 12 animais). Quatro semanas após a aplicação do docetaxel, as propriedades mecânicas do sistema respiratório (elastância estática, dinâmica e resistência) foram medidas e foi realizada análise histológica por morfometria com microscopia óptica dos pulmões dos animais. Foram analisadas as alterações no colágeno, fibras elásticas, infiltração celular e índices morfométricos no parênquima pulmonar e artérias pulmonares. Resultados: Foram estudados 40 animais. Observamos alterações histológicas em 90% dos animais do G70 e em 100% dos animais dos G140 e G210, caracterizadas por aumento na quantidade de fibras colágenas, infiltração mononuclear nos septos alveolares e edema nos espaços alveolares. As lesões foram significativas (p <0.05) e proporcionais à dose de docetaxel administrada. Ainda, foram observadas alterações na mecânica do sistema respiratório compatíveis com provável lesão da musculatura inter-costal. Conclusões: O docetaxel produziu pneumonia intersticial e aumento do colágeno nos septos alveolares de ratos Wistar, após aplicação única por via i.p. Este é o primeiro estudo experimental que foi capaz de demonstrar a lesão pulmonar por docetaxel e estabelecer uma relação de proporcionalidade entre grau lesão pulmonar e a dose de docetaxel utilizada. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Taxanes are tubulin-inhibitor-chemotherapy agents, widely prescribed in clinical practice and used for the treatment of malignant tumors. Despite broadly used, little is known about their long-term side effects and pharmakodynamics. Taxotere-induced pneumonitis is a new well-recognized entity, with estimated incidence in taxotere-chemotherapy users of 10%, being fatal in almost 40% of cases. Our goal was to evaluate, in a controlled model, lung tissue alterations due to docetaxel exposure. Materials and Methods: Fourtytwo Wistar rats were divided in four groups, according to the docetaxel administered dose: 1) GC (10 rats) - control, 2) G70 (10 rats) - 70 mg/m2, 3) G140 - (12 rats) - 140 mg/m2 and 4) G210 - (10 rats) - 210 mg/m2. Docetaxel was given as a single i.p. shot. After 28 days, the mechanical properties of the respiratory system (dynamic and static elastance, and resistance) were obtained, and morphometric and histological analysis were performed using optic microscopy and the point-counting technique. Results: A total of 40 animals were studied. Lung tissue alterations were observed in 90% of G7- and in 100% of G140 and G210. Main histological findings were collagen fiber deposition in the alveolar septa, alveolar edema and mononuclear cell intersticial (septal) infiltration. All changes had significance (p <0.05). A proportionality between docetaxel dose administration and the amount of lung tissue damage could be established. Also, alterations in animal’s chest wall properties were noted. Conclusions: Docetaxel was capable to produce interstitial pneumonitis and alveolar septal collagen deposition in Wistar rats after a single i.p. dose. The amount of lung-tissue injury was proportional to the docetaxel administered dose. This is the first experimental study to establish those findings.

A própolis vermelha brasileira tem atraído interesses científicos e econômicos devido às suas variadas atividades biológicas. Este produto natural possui composição química diferente de acordo com a região na qual é encontrado, sendo necessária uma completa caracterização química para cada tipo de própolis, a fim de se elucidar os compostos presentes e possivelmente responsáveis por estas atividades. Dentre as atividades biológicas mais investigadas, destacam-se as atividades antioxidante e antitumoral. Neste trabalho, buscou-se caracterizar quimicamente o extrato hidroalcoólico da própolis vermelha brasileira, avaliar as atividades antioxidantes e antitumorais, além de investigar o padrão proteico de células tumorais de laringe tratadas e não tratadas com extratos da própolis vermelha através da análise proteômica comparativa. A caracterização química realizada através de espectrometria de massas com ionização por electrospray mostrou que a própolis apresenta moléculas complexas, principalmente isoflavonoides, compostos com importantes atividades biológicas. Os extratos hidroalcoólicos obtidos a partir da própolis vermelha revelaram um significante conteúdo de polifenóis associados a uma habilidade de sequestrar radicais livres DPPH·. Os extratos também apresentaram atividades superóxido-dismutase-/ike e catalase-/ike, indicando que podem exercer um papel fundamental na manutenção fisiológica do equilíbrio redox quando em um organismo. A atividade citotóxica dos extratos da própolis foi avaliada nas linhagens tumorais Hep-2, HeLa e não tumoral Hek-293, sendo que os valores de IC50 foram menores para a linhagens tumorais em relação a não tumoral. Desta forma, sugere-se uma seletividade da própolis vermelha quanto às linhagens tumorais. A análise proteômica, usando eletroforese bidimensional associada à cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrômetro de massa, permitiu a comparação dos mapas proteicos da linhagem Hep-2, na ausência ou presença de extratos da própolis vermelha, nas concentrações 6 f.1g/mL (não citotóxica) e 120 f.lg/mL (IC50). A excisão manual de 325 spots foi efetuada nos géis 2D- SDS-PAGE, em que 177 proteínas foram identificadas. Estas proteínas foram relacionadas com diversos processos metabólicos e estruturais como produção e conversão de energia, transporte e metabolismo de carboidratos, modificação pós-traducional, reciclagem de proteínas e chaperonas, proteínas do citoesqueleto, proteínas de reparo, entre outros. Das proteínas identificadas com expressão diferencial, cinco apresentaram expressão reduzida na presença do extrato da própolis, este em sua maior concentração (120 f.lg/mL). Apenas duas proteínas identificadas neste estudo mostraram expressão aumentada na concentração não citotóxica (6 f.lg/mL) do extrato da própolis vermelha. Os resultados da proteômica comparativa mostram que a própolis interfere em um conjunto de eventos intracelulares e, assim, passa a ser uma candidata promissora para inibir o crescimento celular e contribuir para os diferentes passos relacionados com o processo de carcinogênese. Embora os mecanismos moleculares pelos quais a própolis vermelha interaja com o metabolismo das células permaneçam ainda desconhecidos, estudos adicionais servirão para melhor elucidar as atividades antioxidantes e antitumorais aqui observadas. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Brazilian red propolis has attracted scientific and economic interests because of its varied biological activities. This natural product has different chemical compositions according to the region in which it is found, requiring a robust chemical characterization to elucidate the compounds responsible for the activities in each type of propolis investigated. So far antioxidant and antitumor properties are amongst the most studied biological activities. This study aimed to characterize chemically the hydroalcoholic extract of Brazilian propolis from the state of Sergipe, evaluate the antitumor and antioxidant activities, and to investigate the pattern o f proteins in tumor cells o f the larynx treated o r not with extracts of propolis through comparative proteomic analysis. The chemical characterization by mass spectrometry with electrospray ionization showed that propolis presents complex molecules, especially isoflavones, which has important biological and antioxidant capacity. The hydroalcoholic extracts obtained from propolis revealed a significant content of polyphenols associated with the ability to scavenge DPPH. radicais. The extracts also showed significant activities for superoxide dismutase-like and catalase-like, indicating an important role in maintaining physiological redox equilibrium, decreasing oxidative stress. Cytotoxic activity was assessed for tumor cell !ines Hep-2, HeLa and non-tumor cell line Hek-293, showing IC50 values greater for Hek-293 compared to Hep-2 and HeLa cells, which suggests a selectivity of propolis for the tumor !ines. The proteomic analysis using two-dimensional electrophoresis associated with high performance liquid chromatography coupled with mass spectrometer allowed the comparison of the protein maps of Hep-2 cell line in the absence or presence of propolis extracts in concentrations of 6 f.lg/mL (not cytotoxic) and 120 f.lg/mL (IC50). 325 spots were manually excised from the gels 2D SDS-PAGE and 177 proteins were identified. These proteins have been linked to various structural and metabolic processes, such as production and energy conversion, transport and carbohydrate metabolism, post-translational modification, protein tumover and chaperones, cytoskeletal proteins, repair proteins, among others. From the identified proteins that showed differential expression five were downregulated in the presence of propolis extract in the highest concentration (120 J.lg/mL). Only . two proteins identified in this study showed increased expression in the no cytotoxic concentration (6 J.tg/mL) ofthe red propolis extract. The results of comparative proteomic showed that the propolis interacts with a series of intracellular events and hence becomes a promising candidate to inhibit cellular growth and contribute to the different steps related to the process of carcinogenesis. Although the molecular mechanisms by which propolis interacts with the metabolism of the cells remain unknown, additional studies will better elucidate the antitumor and antioxidant activities here observed.

Orientadores: João Ernesto de Carvalho, Mary Ann Foglio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-18T04:00:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pais_ViniciusAndradeArce_M.pdf: 3917209 bytes, checksum: 81f3730bcb96d1f985bbe7ac68e8c8cf (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: O câncer é um conjunto de mais de 100 doenças diferentes que afligem a população mundial e caracteriza-se pela perda de função celular e ausência de diferenciação, além da proliferação descontrolada. Somente no Brasil, estima-se que foram registrados 489.270 novos casos de câncer em 2010. O Brasil é o país com a maior diversidade genética vegetal do mundo, representando uma das mais ricas fontes de materiais farmacologicamente ativos. Os extratos de plantas medicinais e seus compostos derivados são conhecidos por serem efetivos agentes contra vários tipos de cânceres. Estima-se que 60% das drogas antitumorais sejam de origem vegetal. A partir da coleta aleatória realizada no projeto BIOPROSPECTA-FAPESP (04/15410-0), foram selecionadas 10 espécies que apresentaram efeitos antiproliferativos. Dessas espécies, 5 foram novamente coletadas, sendo elas: Miconia latecrenata (DC.)Naudin, Mollinedia schottiana (Spreng.)Perkins, Boehmeria caudata Sw., Boehmeria cylindrica Sw. e Acnistus arborescens. Foram preparados extratos diclorometânicos (EBD) e etanólicos (EBE) das folhas destas espécies os quais foram avaliados quanto à atividade antiproliferativa in vitro, em linhagens de células tumorais humanas. Todos os extratos apresentaram pelo menos efeito citostático no teste in vitro à exceção daqueles obtidos de Mollinedia schottiana. A partir desses resultados e da disponibilidade de material vegetal, foram selecionados para dar continuidade ao estudo Boehmeria caudata e a B. cylindrica. Assim, por existir dados referentes a alcalóides com efeitos citostáticos descritos na literatura, realizou-se extração ácido-base dos dois espécimes, onde se isolou alcalóides de polaridades diferentes. Os alcalóides isolados, e suas frações neutras, das duas plantas, EBAEN e EBCA, para Boehmeria cylindrica e FALCBC e FAENBC para Boehmeria caudata, foram encaminhados a testes in vitro, onde apenas os alcalóides da espécie B. caudata, retornou resultados positivos. O EBD de Boehmeria cylindrica e os extratos EBE e EBD de Boehmeria caudata, juntamente com a fração FALCBC foram submetidos a testes in vivo, utilizando o modelo do Tumor Sólido de Ehrlich. O EBD de Boehmeria cylindrica e de Boehmeria caudata apresentaram resultados significativos ( p<0,05) diminuindo a progressão tumoral.Os EBDs de B. cylindrica e de B. caudata apresentaram redução significativa (p<0,05) na progressão tumoral. Por outro lado, o EBE de B. caudata e a fração FALCBC não apresentaram atividade no teste in vivo, sugerindo que em função da maior polaridade dos compostos presentes nessas amostras, essas substâncias que apresentaram atividade antiproliferativa in vitro foram metabolizadas e excretadas antes de atingirem seus sítios de ação no modelo in vivo. Concluindo, as espécies estudadas apresentaram significativa atividade antitumoral, corroborando com os relatos existentes de estudos de atividade antitumoral para outras espécies do gênero Boehmeria, e indicando o potencial do gênero para o desenvolvimento de uma droga anticâncer / Abstract: Cancer is a group of 100 different diseases that afflict the world's population and is characterized by loss of cell function, due to absence of differentiation, in addition to uncontrolled proliferation. In Brazil alone, an estimated 489,270 new cancer cases were reported in 2010. Brazil is the country with the greatest plant genetic diversity of the world, representing one of the richest sources of pharmacologically active materials. Extracts of medicinal plants and their derived compounds are known to be effective agents against several types of cancers. It is estimated that 60% of anticancer drugs are of plant origin. Based on the random collection performed in the project BIOprospecTA-FAPESP (04/15410-0), 10 species that had significant anti-proliferative effects, were selected. From these, five were collected again, as follows: Miconia latecrenata (DC.)Naudin, Mollinedia schottiana (Spreng.)Perkins, Boehmeria caudata Sw., Boehmeria cylindrica Sw. and Acnistus arborescens. These species were submitted for extraction process, resulting in dichloromethane and ethanolic extracts, subsequently which was evaluated with in vitro tests of human tumor cell lines. All of them showed cytocidal or cytostatic effects with in vitro assays, except for Mollinedia schottiana that produced no positive results. The available specimens with positive results were selected to continue the study; they are Boehmeria caudata and Boehmeria cylindrica. Thus, since data of alkaloids with cytostatic effects have been described in the literature, an acid-base extraction was made of the two specimens, where alkaloids of different polarities were isolated. Isolated alkaloids, and the respective neutral fractions of the two plants, EBAEN and EBCA for Boehmeria cylindrica, FALCBC and FAENBC for Boehmeria caudata, were used in in vitro assays, where only the alkaloids from B. caudata, gave positive results. The DBE of Boehmeria cylindrica and the extracts, EBE and DBE of Boehmeria caudata, along with the FALCBC fraction were tested in vivo using the solid Ehrlich's tumor model. The DBE of Boehmeria cylindrica and of Boehmeria caudata showed significant results (p <0.05), decreasing tumor progression. The brute ethanol extract of Boehmeria caudata, along with its fraction, FALCBC, showed no anti-proliferative activity. The genus Boehmeria was subject to several studies for different species, indicating a potential of the genus for the discovery of a new anticancer drug. The species studied showed significant antitumor activity. The negative results of the alkaloidal fraction and the EBE of Boehmeria caudata in in vivo tests, do not invalidate its potential because these samples were possibly metabolized and excreted before reaching their action sites, probably due to the polarity of these substances / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Douglas Soares Galvão / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb Wataghin / Made available in DSpace on 2018-08-09T13:13:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_RaimundoNonatoPereirada_M.pdf: 1961662 bytes, checksum: c76c13d8b6707d17ff50eb0c0fe25a21 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A descoberta de tratamentos eficazes contra o câncer é um dos maiores desafios da ciência. No Brasil o câncer se tornou a segunda maior causa de morte. As estimativas para o ano de 2005 apontam que ocorrerão 467.440 casos novos de câncer. O investimento para o desenvolvimento de uma droga moderna é de U$850milhões e o tratamento com estas variam de U$4000 a U$17000 por mês. Estudos de relação atividade-estrutura (SAR) quantitativa têm um importante papel no design de drogas. Neste trabalho foi aplicado a Metodologia de Índices Eletrônicos (MIE) para estudar a correlação da atividade antineoplásica de 36 moléculas derivadas das carboquinonas. A MIE é baseada nos conceitos de densidade local de estado, da qual se extrai o índice D, e na diferença de energia dos estados de fronteira, índice h , obtidos por cálculo de mecânica quântica ab initio ou semi-empírico. Os cálculos foram efetuados utilizando o método PM3 (Parametric Method 3) disponível no pacote computacional MOPAC. Os resultados demonstram que a MIE consegue diferenciar com uma precisão de 92% os compostos mais ativos biologicamente. A Análise de Principal Componente (PCA), utilizando-se os parâmetros da MIE, resultou em 100% de acerto na diferenciação da atividade biológica, enquanto com o método de análise hierárquica de grupo (HCA) obteve-se padrão de agrupamento com 94% de acerto. Concluímos que o uso dos índices D e h pode ser uma eficaz ferramenta para estudos de relação atividade-estrutura qualitativa das carboquinonas e para o desenvolvimento e aprimoramento de novas drogas / Abstract: The discovery of efficient treatments against cancer is one of the great challenges of science. In Brazil the cancer became the second greatest cause of death. For the year 2005 467,440 new cases of cancer are expected. The investment for the development of a modern drug is about U$ 850 millions and the treatment with those drugs varies from U$ 4,000 to U$ 17,000 per month. Structure-Activity Relationship (SAR) studies play an important role in design of drugs. In this work the Methodology of Electronic Indices was applied (MEI) to the study of anticancer activity of 36 molecules derived from carboquinones. The MEI is based on the concepts of local density of states, from which the index D is extracted, and in the difference of energy of the frontier orbitals, which defines the other MEI parameter h. The geometrical and electronic aspects for the carboquinone set were obtained using the semi-empirical PM3 (Parametric Method 3) available in computational package MOPAC. Our results show that the MEI is able to classify (with an accuracy of 92%) active and inactive compounds. More standards statistical methods such Principal Component Analysis (PCA) and Hierarchic Cluster Analysis (HCA) were also used also producing results of identifying active/inactive molecules with high accuracy (100 and 94%, respectively). We conclude that the use of the MEI indices D and h can be an efficient tool for studies of qualitative SAR studies of carboquinones, as well as, to be used for the development and improvement of new drugs / Mestrado / Estrutura, Conformação e Estereoquimica / Mestre em Física

Orientadores: Cesar Costapinto Santana, Maria Helena Andrade Santana / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Química / Made available in DSpace on 2018-08-23T22:47:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guimaraes_CarlaAiolfi_D.pdf: 2218359 bytes, checksum: 4601d72639c63e8a3a04c5b06354c5bf (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: O carcinoma adrenocortical (CAC) é uma neoplasia rara e maligna que surge no córtex das glândulas adrenais. A terapia mais utilizada é o tratamento com mitotano, um derivado do inseticida, que possui uma baixa solubilidade aquosa e permeabilidade intestinal. O mitotano é administrado como uma mistura racêmica composto de dois enantiômeros: R-(+) - o,p'-DDD e S-(-) - o,p'-DDD. Os carreadores lipídicos nanoestruturados (NLCs) são utilizados como suporte para a encapsulação de agentes ativos lipofílicos como é o caso do mitotano, ajudando a aumentar sua solubilidade. O objetivo deste trabalho foi caracterizar os enantiômeros e preparar NLCs encapsulando a forma enantiomérica (S) - (-) - o,p'-DDD, pela técnica de homogeneização de alta pressão a quente, caracterizar a formulação, estudar sua estabilidade, avaliar a permeação intestinal ex vivo pelo modelo do saco intestinal invertido e a retenção do enatiômero (S) - (-)- o,p'-DDD nas NLCs expostas em diferentes valores de pH in vitro. Foi utilizado NLCs contendo mitotano racêmico como controle. NLCs encapsulando (S) - (-) - o,p'-DDD tiveram diâmetro médio 95,36 nm, polidispersidade 0,288 e potencial zeta baixo -20,9 mV com uma eficiência de encapsulação alta. Os resultados de absorção intestinal ex vivo indicaram que a absorção das NLCs encapsulando o (S) - (-) - o, p'-DDD foi maior em comparação com o (S) - (-) - o, p'-DDD na forma livre e com a NLCs encapsulando o mitotano racêmico. No entanto, o teste com pH mostrou que cerca de 70% do (S) - (-) - o, p'-DDD encapsulado ficou retido nas NLCs durante 3h. Estes resultados indicaram que a formulação de NLCs produzida foi eficiente como carreador da forma S(-)-o,p'-DDD, podendo ser explorada como uma possível formulação alternativa para o tratamento do CAC. / Abstract: The adrenocortical carcinoma (ACC) is a rare malignant neoplasm that appears in the adrenal cortex. The main pharmacological choice is mitotane, a insecticide derivative, which has low aqueous solubility and low intestinal permeability. Mitotane is administered as a racemic mixture composed of two enantiomers R-(+) - o, p'-DDD and S-(-) - o, p'-DDD. The nanostructured lipid carriers (NLCs) are used as support for the encapsulation of lipophilic actives such as mitotane to improve their solubility. The aim of this work was to characterize the enantiomers and prepare the NLCs encapsulating the enantiomeric form (S) - (-) - o, p'-DDD by high pressure homogenization method and than characterize, study the stability, evaluate the ex vivo intestinal permeation by gut sac model and the retention of enantiomer (S) - (-) - o, p'-DDD in the NLCs in different pH values in vitro. NLCs encapsulating racemic mitotane was used as a control. The mean diameter and polydispersity index of NLCs encapsulating (S) - (-) - o, p'-DDD was 95.36 nm and 0.288 with a low zeta potential -20.9 mV and Higher entrapment efficiency. The ex vivo intestinal absorption results indicated that the absorption of NLCs loading(S)-(-)- o,p'-DDD was greatly improved compared to micronized free powder and when compared to NLCs loading mitotano racemic. However, the pH test showed that about 70% of (S) - (-) - o, p'-DDD encapsulated was retained in the NLCs for 3h. These results indicated that the NLC produced was effective as S (-)-o, p'-DDD carrier and could potentially be exploited as a possible alternative formulation for the ACC treatment. / Doutorado / Desenvolvimento de Processos Biotecnologicos / Doutora em Engenharia Quimica

Unidad de práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas / Sin duda que, de todos los lugares donde el químico farmacéutico puede desempeñar su labor, es en el área asistencial donde este profesional podrá tener una mayor intervención en la farmacoterapia de pacientes. Es por esto, y con el objetivo de conocer el trabajo que es desempeñado por él y como requisito para optar al título de químico farmacéutico, se realiza una práctica prolongada en el área ya mencionada. Ésta es llevada a cabo en una clínica privada, específicamente en el Servicio de Farmacia de Clínica Dávila en el período comprendido entre los meses de junio y diciembre del año 2006. Los primeros pasos fueron destinados a conocer el servicio de farmacia, su organización, la planta física, el personal que trabaja en sus dependencias, ya sea que se trate de profesionales ó auxiliares, y las diferentes áreas de la clínica con las que éste servicio interactúa. Posteriormente, se comienza a conocer cada una de las labores especificas que realiza el químico farmacéutico y su equipo de trabajo en cuanto a: gestionar la adquisición de medicamentos, control de existencias, recepción, etiquetado y posterior almacenaje de ellos, manejo de medicamentos sometidos a control legal, elaboración de preparados estériles y diluciones oncológicas, preparación de preparados magistrales y dosis unitaria, además de la recepción de solicitudes y despacho de recetario electrónico a los distintos servicios clínicos. Además, formando parte de los requerimientos de la institución donde se realiza la práctica, se elaboró un Manual de Consulta de Preparación y Reacciones Adversas de Medicamentos Oncológicos que fue solicitado por el servicio de oncología. Las actividades que fueron realizadas para conocer y aprender el trabajo que realiza el químico farmacéutico, me llevó a adquirir las habilidades que son necesarias para ejercer esta hermosa profesión en una de las áreas donde el químico farmacéutico tiene una relación más directa con el paciente y que, con el avance de la farmacia clínica esta relación podría crecer aún más

OLIVEIRA, Lorena Almeida. Caracterização estrutural e atividade antitumoral de polissacarídeo extraído do fruto de Morinda citrifolia Linn (Noni). 2014. 85 f. Dissertação (Mestrado em química)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2014. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-10-11T16:45:52Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_laoliveira.pdf: 1742961 bytes, checksum: 150d926afa1dcc028017080ebb11f779 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-10-11T23:51:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_laoliveira.pdf: 1742961 bytes, checksum: 150d926afa1dcc028017080ebb11f779 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-11T23:51:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_laoliveira.pdf: 1742961 bytes, checksum: 150d926afa1dcc028017080ebb11f779 (MD5) Previous issue date: 2014 / Currently, cancer is a global public health problem. As an alternative therapy, many natural products have been evaluated for selection of active and with less undesirable effects capable of reducing malignant tumors more efficiently compounds. Morinda citrifolia, commonly known as noni, is a species native to Southeast Asia and Australia that has been popularly used for many therapeutic and nutritional purposes. The polysaccharide extracted from the pulp of Morinda citrifolia Linn fruits (Noni-ppt 1) was purified by reprecipitation in ethanol, yielding the subfractions: Noni-ppt 3 and Noni-ppt 5. The objective of this study was to investigate the antitumor activity in vitro and in vivo of Noni-ppt and carry out their physico-chemical characterization by high performance liquid chromatography (HPLC), gas chromatography (GC), fourier transform infrared spectrometry (FTIR), gel permeation chromatography (GPC), thermal gravimetric analysis (TGA), elemental analysis and 13C nuclear magnetic resonance (NMR). The in vitro cytotoxic activity of the three fractions of Noni-ppt (50 μg/mL) was evaluated on three tumor cell lines (HCT-116, SF-295 and OVCAR -8) by colorimetric method bromide 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). The in vivo antitumor effect of Noni-ppt 3 was analyzed in mice with tumor Sarcoma 180 at doses of 25 and 50 mg/kg/day orally and intraperitoneally. The physico-chemical analyzes showed that Noni-ppt consists of protein (12.1-13.7%), uronic acids (44.2-58.8%) and of total carbohydrates (65.4-71.3%). The monosaccharide composition analysis showed that Noni-ppt is a heteropolysaccharide composed predominantly of rhamnose, arabinose, galactose and galacturonic acid. The Noni-ppt samples showed no direct cytotoxic activity against tumor cells in vitro. Moreover, the treatment with Noni-ppt 3 did not show any inhibition of tumor growth in mice inoculated with Sarcoma 180 cells. / O câncer tem se configurado como um grande problema de saúde pública mundial. Como alternativa terapêutica, muitos produtos naturais têm sido avaliados para seleção de compostos ativos com menos efeitos indesejáveis e capazes de reduzir tumores malignos de modo mais eficiente. Morinda citrifolia, conhecida popularmente como noni, é uma espécie nativa do sudeste asiático e da Austrália que tem sido utilizada popularmente para diversos fins terapêuticos e nutricionais. O polissacarídeo extraído da polpa do fruto de Morinda citrifolia Linn (Noni-ppt 1) foi purificado por reprecipitação em álcool etílico, originando as subfrações: Noni-ppt 3 e Noni-ppt 5. O objetivo do presente trabalho foi investigar a atividade antitumoral in vitro e in vivo do Noni-ppt, bem como realizar sua caracterização físico-química utilizando técnicas de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), espectroscopia de infravermelho (FT-IR), cromatografia de permeação em gel (GPC), análise termogravimétrica (TGA), análise elementar de nitrogênio e ressonância magnética nuclear de 13C (RMN). A atividade citotóxica in vitro das três frações de Noni-ppt (50 μg/mL) foi avaliada sobre três linhagens de células tumorais (HCT-116; SF-295 e OVCAR-8) por meio do método colorimétrico brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT). O efeito antitumoral in vivo do Noni-ppt 3 foi analisado em camundongos com tumor Sarcoma 180 nas doses de 25 e 50 mg/Kg/dia por via oral e intraperitoneal. As análises físico-químicas demonstraram que o Noni-ppt é composto por 12,1-13,7% de proteínas, 44,2-58,8% de ácidos urônicos e 65,4-71,3% de carboidratos totais. A análise da composição monossacarídica demonstrou que o Noni-ppt é um heteropolissacarídeo constituído, predominantemente, por ramnose, arabinose, galactose e ácido galacturônico. Os resultados da avaliação da atividade antitumoral in vitro demonstraram que as amostras de Noni-ppt 1, 3 e 5 não apresentam nenhuma atividade citotóxica direta sobre as células tumorais na concentração testada. Além disso, não foi observada qualquer inibição do tumor nos camundongos inoculados com as células tumorais.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Retido.pdf: 19733 bytes, checksum: 6aad255badc436a06364517de2344ab6 (MD5) Previous issue date: 2013-09-20 / Universidade Federal de Minas Gerais / This thesis focus on the synthesis, characterization and evaluation of the biological properties of three series of phosphinic ruthenium complexes containing bioligands of purine and pyrimidine derivatives. Series 1: [RuCl(alo)(dppb)(bipy)]PF6, [RuCl(alo)(dppb)(bipy)] Cl, [RuCl(alo)(dppb)(4mebipy)]PF6, [RuCl(alo)(dppb)(5mebipy)]PF6, [RuCl(Im) (dppb)(bipy)]PF6, [RuCl(Bzm)(dppb)(bipy)]PF6, [RuCl2(alo)2(dppb)], [RuCl2(alo)2 (PPh3)2] and [RuCl3(alo)(dppb)], where alo = allopurinol, Im = imidazole, benzimidazole Bzm =, bipy = 2,2'-bipyridine, 4mebipy = 4,4'-dimethyl-2,2 '-bipyridine, 5mebipy = 5,5'-dimethyl-2, 2'- bipyridine, PPh3 = triphenylphosphine and dppb = 1,4-bis (diphenylphosphino)butane. Series 2: [Ru(tim)(dppb)(bipy)]PF6 and [Ru(cit)(dppb)(bipy)]ClO4, trans- [Ru(PPh3)2(5FU)(bipy)]PF6, trans-[Ru(PPh3)2(tim) (bipy)]PF6 and trans- [Ru(PPh3)2(CTD)(bipy)]ClO4, where tim = thymine, cit = cytosine, 5-FU = 5-fluorouracil, CTD = cytidine . Series 3: cis-[Ru(PPh3)2(2TU)2], cis-[Ru(PPh3)2(6m2TU)2], [Ru(2TU)2(dppb)] and [Ru(6m2TU)2(dppb )], trans-[Ru(PPh3)2(2TU)(bipy)]PF6 and trans- [Ru(PPh3)2(6m2TU)(bipy)]PF6, [Ru(2MT)(dppb) (bipy)]PF6, cis-[Ru(PPh3)2(2MT)2] and trans-[Ru(PPh3)2(2MT)(bipy)]PF6. (2TU = 2-thiouracil; 6m2TU = 6-methyl-2-thiouracil, 2MT = mercaptothiazoline). These compounds were characterized by 31P{1H} 13C and 1H nuclear magnetic resonance and by cyclic voltammetry and differential pulse, conductometry, absorption spectroscopy in the infrared region, elemental analysis, mass spectrometry and Xray diffraction, and absorption spectroscopy in the UV/Vis which has assisted the spectroscopic study of DNA interactions. The interaction constants (Kb) values are in the range of 103-104 M-1, suggesting a weak interaction between the complex and DNA (noncovalent). Cationic compounds with regions suitable to be involved hydrogen bonding present greater interaction constant (104 M-1) than the neutral complexes and with less possibility of intermolecular bonds. The complexes were also evaluated, in vitro, against breast cancer cells (MDA-MB-231 and MCF-7), as well as fibroblasts cells (L-929). It was observed that the compounds of the series 1 and 2 are more selective against tumor cells than the complexes of series 3. In addition, the compounds of series 1 were also tested against xanthine oxidase, an enzyme which is directly involved in the gout disease. The complexes RuCl(alo)(dppb)(bipy)]PF6 (IC50 = 2.2 &#956;M), [RuCl(alo)(dppb)(4mebipy)]PF6 (IC50 = 2.8 &#956;M) and [RuCl(alo)(dppb)(5mebipy)]PF6 (IC50 = 0.75 &#956;M) are more active than free allopurinol (IC50 = 4.2 &#956;M), showing that the coordination of allopurinol enhances the effect of the drug. Also, series 1 and compounds with 2MT were evaluated against the T. cruzi parasite (trypomastigote) in order to screening their potential against Chagas' disease. The [RuCl(alo)(dppb)(4mebipy)]PF6 (IC50 = 1.87 &#956;M), [Ru(2MT)(dppb)(bipy)]PF6 (IC50 = 0.16 &#956;M) and trans-[Ru(PPh3)2(2MT)(bipy)]PF6 (IC50 = 0.011 &#956;M) complexes were the most active ones, in which the last one is 1000-fold better than the benznidazole drug (IC50 = 10.6 &#956;M). / A presente tese tem como foco principal a síntese, caracterização e avaliação das propriedades biológicas de três séries de complexos fosfínicos de rutênio contendo bioligantes derivados de purina e pirimidina. Série 1: [RuCl(alo)(dppb)(bipy)]PF6, [RuCl(alo)(dppb)(bipy)]Cl, [RuCl(alo)(dppb)(4mebipy)]PF6, [RuCl(alo)(dppb)(5mebipy)]PF6, [RuCl(Im)(dppb)(bipy)]PF6, [RuCl(Bzm)(dppb)(bipy)]PF6, [RuCl2(alo)2(dppb)], [RuCl2(alo)2(PPh3)2] e [RuCl3(alo)(dppb)], onde alo = alopurinol, Im = imidazol, Bzm = benzoimidazol, bipy = 2,2 -bipiridina, 4mebipy = 4,4 -dimetil-2,2 - bipiridina, 5mebipy = 5,5 -dimetil-2,2 -bipiridina, PPh3 = trifenilfosfina e dppb =1,4 bis(difenilfosfina)butano. Série 2: [Ru(tim)(dppb)(bipy)]PF6 e [Ru(cit)(dppb)(bipy)]ClO4, trans-[Ru(PPh3)2(5FU)(bipy)]PF6, trans-[Ru(PPh3)2(tim)(bipy)]PF6 e trans- [Ru(PPh3)2(CTD)(bipy)]ClO4, onde tim = timina, cit = citosina, 5FU = 5-fluorouracil, CTD = citidina. Série 3: cis-[Ru(PPh3)2(2TU)2], cis-[Ru(PPh3)2(6m2TU)2], [Ru(2TU)2(dppb)] e [Ru(6m2TU)2(dppb)]; trans-[Ru(PPh3)2(2TU)(bipy)]PF6 e trans- [Ru(PPh3)2(6m2TU)(bipy)]PF6; [Ru(2MT)(dppb)(bipy)]PF6, cis-[Ru(PPh3)2(2MT)2] e trans- [Ru(PPh3)2(2MT)(bipy)]PF6. (2TU = 2-tiouracil; 6m2TU = 6-metil-2-tiouracil; 2MT = 2- mercaptotiazolina). Estes complexos foram caracterizados por várias técnicas analíticas, que incluem espectroscopia de ressonância magnética nuclear de 31P{1H}, 13C e 1H, por técnicas de voltametria cíclica e de pulso diferencial, condutimetria, espectroscopia de absorção na região do infravermelho, análise elementar, espectrometria de massa e difração de raios X por monocristal, além de espectroscopia de absorção na região do UV/Vis que auxiliou no estudo de interações espectroscópicas com o DNA. Os valores das constantes de interação (Kb) dos complexos com o DNA estão em uma faixa de 103 104 M-1, o que indicam uma interação fraca com o DNA (não covalente). Observa-se que os compostos que apresentam mais regiões para realizar ligações de hidrogênio, bem como a presença de carga positiva, apresentam valores de constantes de interações com o DNA mais elevadas (104 M-1) do que os complexos neutros e com menos possibilidade de realizar ligações intermoleculares. Os complexos sintetizados também foram avaliados, in vitro, como agentes antitumorais contra a linhagens de células de câncer de mama MDA-MB-231 (compostos da série 1 e da série 3 exceto com 2MT) e MCF-7 (compostos da série 2 e da série 3 contendo 2MT). Também foram realizados ensaios contra células de fibroblastos (L-929) para avaliar a toxicidade em células sadias. Observou-se que os compostos das séries 1 e 2 apresentam maior seletividade para células tumorais de câncer de mama do que os complexos da série 3. Em adição, os compostos da série 1 foram testados também contra xantina oxidase, enzima que está diretamente ligada à doença de gota. Os testes mostraram que os complexos RuCl(alo)(dppb)(bipy)]PF6 (IC50 = 2,2 &#956;M), [RuCl(alo)(dppb)(4mebipy)]PF6 (IC50 = 2,8 &#956;M) e [RuCl(alo)(dppb)(5mebipy)]PF6 (IC50 = 0,75 &#956;M) apresentaram inibição enzimática superior a do fármaco alopurinol (IC50 = 4,2 &#956;M), mostrando que a sua coordenação potencializa o efeito do fármaco. Também, para a série 1 e os complexos com 2MT (série 3), realizou-se ensaios contra o parasita T. cruzi (forma tripomastigota) para avaliar o potencial contra doença de Chagas. Os complexos mais ativos foram o [RuCl(alo)(dppb)(4mebipy)]PF6 (IC50 = 1,87 &#956;M), [Ru(2MT)(dppb)(bipy)]PF6 (IC50 = 0,16 &#956;M) e trans-[Ru(PPh3)2(2MT)(bipy)]PF6 (IC50 = 0,011 &#956;M), no qual o último apresentou ser 1000 vezes mais ativo do que o fármaco de referencia benznidazol (IC50 = 10,6 &#956;M).

A própolis vermelha brasileira tem atraído interesses científicos e econômicos devido às suas variadas atividades biológicas. Este produto natural possui composição química variada de acordo com a região na qual é encontrado, sendo necessária uma completa caracterização química para cada tipo de própolis, a fim de se elucidar os compostos presentes e responsáveis pela atividade biológica observada. Neste trabalho, buscou-se caracterizar quimicamente os extratos da própolis vermelha brasileira, avaliar sua atividade antitumoral, bem como alguns mecanismos de morte celular, além de investigar o padrão proteico de células tumorais de laringe (Hep-2) e não tumorais de rim (Hek-293) tratadas e não tratadas com extratos da própolis vermelha através da análise proteômica comparativa. A caracterização química mostrou que a própolis apresenta moléculas complexas, principalmente isoflavonoides, que possuem importantes atividades biológicas, dentre elas a atividade antitumoral. A atividade citotóxica de duas frações e do extrato hidroalcoólico da própolis foi avaliada na linhagem tumoral Hep-2, a qual se revelou mais citotóxica nos tratamentos com as frações investigadas. Os ensaios de citometria mostraram que as células que receberam tratamento apresentaram menor potencial de membrana mitocondrial, maior quantidade de células em apoptose tardia (TUNEL e Anexina-V/PI), menor geração de espécies reativas do oxigênio e o aumento de fragmentação do DNA. Além disto, as colorações revelaram a presença de corpos apoptóticos e condensação de cromatina. A análise proteômica permitiu a comparação dos mapas proteicos da linhagem Hep-2, na ausência ou presença de extratos da própolis vermelha, com a linhagem não tumoral Hek-293. Estas proteínas foram classificadas de acordo com os processos biológicos as quais estão envolvidas. Além disto, doze proteínas identificadas na linhagem Hep-2 apresentaram expressão reduzida comparada ao grupo controle, dentre as quais muitas estão presentes em grande quantidade em outros tumores e são consideradas biomarcadores tumorais. Os resultados, de forma geral, mostram que a própolis interfere em um conjunto de eventos intracelulares e, assim, passa a ser uma candidata promissora para inibir o crescimento celular e contribuir para os diferentes passos relacionados com o processo de carcinogênese. Embora os mecanismos moleculares pelos quais a própolis vermelha interaja com o metabolismo das células permaneçam ainda desconhecidos, estudos adicionais servirão para melhor elucidar a atividade antitumoral da própolis vermelha brasileira e de suas frações. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-04-18T16:59:16Z No. of bitstreams: 1 Tese Caroline Olivieri da Silva Frozza.pdf: 11179534 bytes, checksum: b2ae6a4dfa6013728ea3f7c81bc40380 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-18T16:59:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Caroline Olivieri da Silva Frozza.pdf: 11179534 bytes, checksum: b2ae6a4dfa6013728ea3f7c81bc40380 (MD5) Previous issue date: 2017-04-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / The Brazilian red propolis has attracted scientific and economic interests due to its varied biological activities. This natural product has diversify chemical composition according to the region in which it is found, then it is necessary a complete chemical characterization for each type of propolis, in order to elucidate the present compounds and responsible for the biological activity observed. In this work, we attempted to chemically characterize the extracts of Brazilian propolis, evaluate their antitumor activity as well as some cell death mechanisms, and to investigate the protein profile of larynx tumor cells treated and not treated with propolis extracts through comparative proteomic analysis. The chemical characterization showed that propolis has complex molecules, particularly isoflavones, which present significant biological activities, such as antitumor activity. The cytotoxic activity of two fractions and of the hydroalcoholic extract of propolis was assessed in Hep-2 tumor cell line, which proved to be more cytotoxic treatments in the investigated fractions. Flow cytometric assays showed that treated cells had lower mitochondrial membrane potential, increased amount of cells in late apoptosis (TUNEL and Annexin-V / PI), less generation of reactive oxygen species and increase in DNA fragmentation. Furthermore, the staining revealed the presence of apoptotic bodies and chromatin condensation. The proteomic analysis has allowed comparison of the maps of the protein Hep-2 cell line, in the absence or presence of propolis extracts, with non-tumor cell line Hek-293. These proteins were classified according to the biological processes which they are related. Besides, twelve identified proteins in Hep-2 showed reduced expression from the control group. Between them, many are presented in large quantities in other tumors and are considered tumor biomarkers. The results in general show that propolis interferes with a series of intracellular events and hence becomes a promising candidate to inhibit cell growth and contribute to the different steps relating to the process of carcinogenesis. Although the molecular mechanisms by which propolis interact with the metabolism of the cells remain unknown, further study will serve to better elucidate the antitumor activity of Brazilian propolis and its fractions.

A própolis vermelha é uma resina natural produzida por abelhas do gênero Apis a partir de exsudados vegetais e tem atraído a atenção dos pesquisadores de todo o mundo devido à sua potente atividade em diversos modelos biológicos. Essa resina natural é rica em polifenóis e compostos voláteis, sendo que mais 300 compostos químicos já foram identificados em amostras de diferentes regiões. Técnicas de identificação química de alta precisão são imprescindíveis para a correta elucidação dos compostos químicos presentes nas amostras e para o entendimento dos efeitos biológicos. Neste estudo, buscou-se utilizar técnicas de fracionamento como uma metodologia capaz de ser explorada em estudos envolvendo amostras de própolis vermelha, buscando-se a identificação e caracterização de frações ativas, bem como o uso de modelos celulares de câncer de cólon para o screening de moléculas bioativas. As frações ativas foram identificadas por meio HPLC-MS e ESI-MS/MS, evidenciando uma composição química complexa baseada em compostos fenólicos e flavonoides. Entre os resultados obtidos, destacam-se as frações 05 e 06, as quais foram capazes de produzir inibição significativa sobre as linhagens tumorais HT-29 e HCT-116, respectivamente, com menores efeitos sobre as células não-tumorais. As frações obtidas no estudo apresentaram menor diversidade química do que a encontrada no extrato total da própolis, favorecendo a sua bioatividade in vitro, e, como resultado, esta técnica pode favorecer a descoberta e o desenvolvimento de novos fármacos utilizando a própolis como fonte de potencial de moléculas contra o câncer. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-04-26T12:12:54Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Denis Amlton dos Santos.pdf: 1867020 bytes, checksum: 9a2b6e047762ce4edebdc69379893739 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T12:12:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Denis Amlton dos Santos.pdf: 1867020 bytes, checksum: 9a2b6e047762ce4edebdc69379893739 (MD5) Previous issue date: 2017-04-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / Red propolis is a natural resin produced by bees of the genus Apis from plant exudates and has attracted the attention of researchers worldwide due to its potent activity in several biological models. This natural resin is rich in polyphenols and volatile compounds and more than 300 chemical compounds have been identified in samples from different regions. High precision chemical identification techniques are essential for the correct elucidation of the chemical compounds present in the samples and for the understanding of the biological effects. In this study, we sought to use fractionation techniques as a methodology able to be explored in studies involving samples of red propolis, seeking the identification and characterization of active fractions, as well as the use of cellular models of colon cancer for screening of bioactive molecules. The active fractions were identified by techniques of HPLC-MS and ESI-MS/MS, evidencing a complex chemical composition based on phenolic compounds an flavonoids. Among the obtained results, we highlight the fractions 05 and 06, which are able to produce significant inhibition on the HT-29 and HCT-116 tumor lines.The fractions obtained in this study showed lower chemical diversity than that found in the total extract of propolis, favoring its bioactivity, and as a result, this technique may favor the discovery and development of new drugs using propolis as a potential source of molecules against cancer.