Submitted by JONÂTAS RAFAEL DE OLIVEIRA null (jroliveira16@hotmail.com) on 2016-04-06T20:01:18Z No. of bitstreams: 1 #TESE COMPLETA.pdf: 2320841 bytes, checksum: da9a41fcb44d79b7879a708f1c2de87e (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-04-08T16:37:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 oliveira_jr_dr_sjc.pdf: 2320841 bytes, checksum: da9a41fcb44d79b7879a708f1c2de87e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-08T16:37:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 oliveira_jr_dr_sjc.pdf: 2320841 bytes, checksum: da9a41fcb44d79b7879a708f1c2de87e (MD5) Previous issue date: 2016-02-12 / Não recebi financiamento / No presente estudo foram avaliadas algumas atividades biológicas dos extratos de R. officinalis L. (alecrim) e T. vulgaris L. (tomilho), verificando: I. Atividade antimicrobiana sobre biofilmes monomicrobianos de Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans e Pseudomonas aeruginosa e associações de C. albicans com cada uma destas bactérias, após determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração microbicida mínima (CMM) sobre culturas planctônicas destes micro-organismos; II. Viabilidade celular sobre macrófagos de camundongo (RAW 264.7), fibroblastos gengivais humanos (FMM-1), linhagem tumoral de carcinoma mamário (MCF-7) e linhagem tumoral de carcinoma cervical (HeLa); III. Atividade anti-inflamatória sobre RAW 264.7 estimulada por lipopolissacarídeo (LPS) de Escherichia coli; e IV. Atividade genotóxica. Após verificação da capacidade antimicrobiana dos extratos, por método de microdiluição em caldo, as concentrações mais efetivas foram aplicadas nos demais testes. Sobre os biofilmes mono e polimicrobianos, formados por 48 h em poços de placa de microtitulação, a ação dos extratos foi analisada após exposição de 5 min, com quantificação de UFC/mL e analise de sua viabilidade. Da mesma forma, sobre as linhagens celulares (RAW 264.7, FMM-1, MCF-7 e HeLa), cultivadas por 24 h em placas de microtitulação, os extratos foram analisados com os ensaios de MTT, vermelho neutro (VN) e cristal violeta (CV). Foi analisado o efeito anti-inflamatório dos extratos com ensaio imunoenzimático ELISA, pela quantificação de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α e IL-1β). A genotoxicidade dos extratos foi verificada pela frequência de micronúcleos (MN) formados em 1000 células. Os resultados foram analisados por T-Test ou ANOVA e Tukey Test (p ≤ 0,05). Em relação ao extrato de R. officinalis L. foi observada redução significativa de todos os biofilmes após exposição de 5 min, bem como, redução de sua viabilidade. Quanto às células, foi observado viabilidade celular acima de 50% a ≤ 50 mg/mL. O nível de IL-1β não se alterou com as concentrações do extrato, entretanto quando RAW 264.7 foi estimulada por LPS, houve inibição da produção desta citocina. Em relação ao nível de TNF-α, houve modulação da síntese desta citocina, sem e com LPS. Foi constatado também ausência de genotoxicidade, uma vez que, a frequência de MN foi semelhante ou menor ao grupo controle. Em relação ao extrato de T. vulgaris L., todos os biofilmes mono e polimicrobianos apresentaram reduções significativas em comparação ao grupo controle. A viabilidade dos biofilmes também foi reduzida. Sobre todas as linhagens celulares foi observada viabilidade celular acima de 50%. Efeito imunomodulador foi observado na síntese de IL-1β e TNF-α. A formação de MN foi semelhante ou inferior ao grupo controle, em todas as linhagens. Com isso, foi concluído que ambos os extratos foram efetivos sobre biofilmes mono e polimicrobianos, proporcionaram viabilidade celular para as culturas acima de 50%, apresentaram efeito imunomodulador e não foram genotóxicos. / This study performed some biological activities of R. officinalis L. (rosemary) and T. vulgaris L. (thyme) extracts, such as: I. Antimicrobial activity on monomicrobial biofilms of Candida albicans, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Streptococcus mutans and Pseudomonas aeruginosa and C. albicans association with each of these bacteria, after determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum microbicidal concentration (MMC) on planktonic cultures of these microorganisms; II. Cell viability on mouse macrophages (RAW 264.7), human gingival fibroblasts (FMM-1), human breast carcinoma cells (MCF-7) and cervical carcinoma cells (HeLa); III. Anti-inflammatory activity on lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7; and IV. Genotoxic activity. After checking the antimicrobial capacity of the extracts by broth microdilution method, the most effective concentrations were applied in the other tests. On mono- and polymicrobial biofilms formed by 48 h in microtitre plate wells, the action of the extracts was analyzed after 5 min exposure, with counting of CFU/mL and analysis of their viability. Likewise, in the cell lines (RAW 264.7, FMM-1, MCF-7 and HeLa cells) cultured for 24 h in microtitre plates, the extracts were analyzed by MTT, neutral red (NR) and crystal violet (CV) assays. By ELISA assay, anti-inflammatory effect of the extracts was analyzed with quantification of proinflammatory cytokines (TNF-α and IL-1β). The genotoxicity of the extracts was verified by the micronuclei frequency (MN) formed in 1000 cells. The results were analyzed by T-Test or ANOVA and Tukey test (p ≤ 0.05). Regarding the R. officinalis L. extract was observed significant reduction of all biofilms after 5 min of exposure, as well as reduction their viability. Additionally, cell viability above 50% to ≤ 50 mg/mL was observed on lineages. The IL-1β level did not change with the concentrations of the extract, but when RAW 264.7 was stimulated by LPS, there was inhibition of the production of this cytokine. In relation to the level of TNF-α, was modulation of the synthesis of this cytokine with and without LPS. It was also observed lack of genotoxicity, since the frequency of MN was similar or less than the control group. Regarding to T. vulgaris L. extract, all mono and polymicrobial showed significant reductions compared to the control group. Their viability was also reduced. On all cell lines was observed cell viability above 50%. Immunomodulatory effect was observed in IL-1β and TNF-α synthesis. The MN formation was similar or lower than the control group in all cell lines. Thus, it was concluded that both extracts were effective on mono- and polymicrobial biofilms, promoted cell viability above 50% for cultures, presented immunomodulatory effect and were non-genotoxic.

Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae), popularmente conhecida como carqueja, é nativa da América sendo amplamente empregada na medicina popular para problemas hepáticos, digestivos, e como anti-inflamatória. Em sua composição química destaca-se maior acúmulo de flavonas, flavonóis e de diterpenos labdanos e clerodanos. Diversos estudos vêm sendo realizados, em especial para as atividades anti-inflamatórias e antimicrobianas. Com isso, iniciou-se o fracionamento do extrato de B. trimera visando à identificação da fração ou compostos responsáveis pela atividade anti-inflamatória. Das partes aéreas de B. trimera foram obtidas as frações diclorometano, acetato de etila, n-butanol e aquosa, além das frações saponinas e flavonóides. Essas seis frações foram avaliadas para a atividade anti-inflamatória através do modelo de inflamação aguda da pleurisia induzida por carragenina e foram avaliados os seguintes parâmetros no líquido pleural: volume de exsudato, contagem de leucócitos totais, diferencial citológico, concentração protéica e determinação de NO no exsudato. Todas as frações testadas diminuíram significativamente os parâmetros analisados quando comparados ao grupo carragenina (ANOVA, P < 0,05), evidenciando assim potencial atividade antiinflamatória. A determinação de fenóis totais e a atividade antioxidante foram avaliadas através dos métodos de Folin-Ciocalteu e através do ensaio espectrofotométrico com o radical 2,2 difenil-1-picril-hidrazil (DPPH.), respectivamente. As frações flavonóides e acetato de etila (1 mg/ml) apresentaram alto potencial antioxidante, não se diferenciando estatisticamente (ANOVA, P < 0,05) das substâncias de referência vitamina C, quercetina e luteolina nas mesmas concentrações, sugerindo dessa forma que a ação antioxidante destas frações devese à presença de flavonóides. A continuidade dos estudos fitoquímicos e a identificação do potencial antioxidante e anti-inflamatório de B. trimera, além de contribuir para a diferenciação química das espécies do gênero Baccharis poderão credenciá-la para o desenvolvimento de um fármaco com atividade anti-inflamatória e antioxidante. / Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae), popularly known as "carqueja", is native to America and it is widely used in traditional medicine for gastrointestinal treatments, for liver diseases, as digestive and to anti-inflammatory purposes. It presented accumulation of flavones, flavonols and diterpenes. Several studies have been performed to study its anti-inflammatory and antimicrobial activities. Considering this, we initiated the fractionation of B. trimera extract in order to identify the fraction or compounds responsible for its anti-inflammatory activity. From the aerial parts of B. trimera it were obtained the fractions: dichloromethane, ethyl acetate, n-butanol, aqueous and also saponins and flavonoids fractions. All fractions were characterized by TLC. These six fractions were evaluated for the anti-inflammatory activity using the carrageenan-induced pleurisy, as a model of acute inflammation via i.p. The following parameters were determined in the pleural fluid: the exudate volume, total leukocyte count, cytological differences, protein concentration and determination of NO. All tested fractions decreased significantly the analyzed parameters when compared to the carrageenan group (ANOVA, P < 0.05), showing potential antiinflammatory activity. The determination of total phenols and antioxidant activity were evaluated by the Folin-Ciocalteu spectrophotometric assay and by the radical 2.2- diphenyl-1-picryl-hidrazil (DPPH.) method, respectively. The flavonoid and ethyl acetate fractions (1 mg / ml) showed high antioxidant potential that were similar (ANOVA, P < 0.05) from that of the reference substances: vitamin C, quercetin and luteolin in the same concentrations, thus suggesting that the antioxidant activity of these fractions is due to the presence of flavonoids. The phytochemical studies and the identification of potential antioxidant and anti-inflammatory activities of B. trimera, will contribute to the chemical differentiation of Baccharis species and also it should support the development of a drug with anti-inflammatory and antioxidant activity.

Submitted by Rosana Amâncio (rosana.amancio@ufcg.edu.br) on 2018-07-27T12:46:04Z No. of bitstreams: 1 ANA EMILIA FORMIGA MARQUES-DISSERTAÇÃO PPGCNBio 2016..pdf: 2835398 bytes, checksum: a8f067a8cdbaaf34bcd0fd842ae3c37c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T12:46:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANA EMILIA FORMIGA MARQUES-DISSERTAÇÃO PPGCNBio 2016..pdf: 2835398 bytes, checksum: a8f067a8cdbaaf34bcd0fd842ae3c37c (MD5) Previous issue date: 2016-11-04 / CNPq / A fitoquímica se dedica à caracterização estrutural, avaliação de propriedades e investigações biossintéticas de substâncias naturais produzidas pelo metabolismo secundário de organismos vivos. Dessa forma, a fitoquímica contribui para a divulgação e geração de novos conhecimentos, colaborando com a manutenção da saúde e a cura de doenças. A família Malvaceae apresenta grande importância econômica, destacando-se na alimentação do homem e de outros animais, na indústria têxtil, na produção de óleos e fibras, na madeireira, como ornamental e na medicina. Nesse trabalho objetivou-se contribuir com o estudo fitoquímico e farmacológico de Sida santaremnensis, uma espécie da família Malvaceae, a partir do isolamento, purificação e determinação estrutural de constituintes químicos dessa planta, bem como pela avaliação da atividade antiinflamatória e antitumoral do constituinte isolado de forma majoritária. Através dos métodos cromatográficos usuais foram obtidos dois flavonoides de Sida santaremnensis: canferol e canferol 3-O-β-D-glicosil-6’’-α-L-ramnosídeo, ambas as moléculas com atividades biológicas comprovadas na literatura, sendo a primeira inédita na espécie. A identificação estrutural dessas substâncias foi realizada utilizando-se o método espectroscópico de Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio e de Carbono 13 e comparações com dados da literatura. A avaliação imunofarmacológica desenvolvida com o canferol 3-O-β-D-glicosil-6’’-α-L-ramnosídeo revelou que este apresenta possível ação anti-inflamatória e essa ação não relacionada com a morte celular. Enquanto a avaliação da atividade antitumoral demonstrou que este flavonoide glicosilado não apresenta atividade contra leucemia promielocítica humana. / The phytochemical is dedicated to the structural characterization, evaluation of properties and biosynthetic investigations of natural substances produced by the secondary metabolism of living organisms, which contributes to the dissemination and generation of new knowledge. The Malvaceae family has great economic importance, highlighting in the feed of man and other animals, textile industry, in the production of oils and fiber, in the timber, such as ornamental and medicine. This work aimed to contribute to the phytochemical and pharmacological study of Sida santaremnensis, a species of Malvaceae family, from the isolation, purification and structure determination of chemical constituents of this plant, as well as the evaluation of the immunomodulatory activity and antitumor isolated constituent a majority manner. Through usual chromatographic methods were obtained two flavonoid in Sida santaremnensis: kaempferol and kaempferol 3-O-β-D-glycosyl-6‖-α-L-rhamnoside, both molecules with biological activity evidenced in the literature, the first unprecedented in species. The structural identification of these compounds was carried out using the spectroscopic method of Nuclear Magnetic Resonance Hydrogen and Carbon 13 and comparisons with literature data. The evaluation immunopharmacological developed with kaempferol 3-O-β-D-glycosyl-6 ''-α-L-rhamnoside showed that this presents potential anti-inflammatory action and that is unrelated to the cell death activity. While the evaluation of the antitumor activity demonstrated that this glycosylated flavonoid does not have activity against human promyelocytic leukemia.

Made available in DSpace on 2015-04-01T14:16:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 5574506 bytes, checksum: a2d785f5339e8cb5e573693458ab5abd (MD5) Previous issue date: 2011-09-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Ouabain, known as a cardiotonic glycoside capable of inhibiting the Na+/K+ ATPase, was widely used for heart failure treatment. Identified as an endogenous substance, ouabain is capable of interfering with various physiological functions, including immune system modulation. Besides that, little is known about the involvement of this substance in nociceptive and inflammatory processes. The present study investigated the role of ouabain in acute peripheral inflammation induced by intraplantar administrartion of different phlogistic agents (carrageenan, compound 48/80, histamine, bradykinin, and PGE2) and in nociceptive processes (abdominal writhing induced by acetic acid and hot plate). Ouabain produced a significant reduction in the mouse paw edema induced by carrageenan and compound 48/80. This antiinflammatory effect of ouabain is associated to the inhibition of PGE2, bradykinin, and mast-cell degranulation, but not to histamine. Ouabain also presented a central and peripheral anti-nociceptive activity. This analgesic potential might be related to the inhibition of inflammatory mediators and to activation of opioid receptors, since it was reversed by naloxone, an opioid antagonist. Additionally, the analgesic effect of ouabain was not related to sedative effect or to motor function. Taken together, the present work demonstrated for the first time, in vivo, the antiinflammatory and analgesic potential of ouabain / A Ouabaína é um glicosídeo cardiotônico, inibidor da Na+/K+-ATPase, utilizada na clínica para o tratamento de insuficiência cardíaca. Atualmente, sabe-se que essa substância é endógena, e capaz de interferir em várias funções fisiológicas, inclusive em diversos aspectos do sistema imunológico. Apesar disso, pouco se sabe sobre seu envolvimento em processos inflamatórios e nociceptivos. Neste trabalho, foi avaliada a atividade da Ouabaína na inflamação aguda desencadeada pela administração de diversos agentes flogísticos (carragenina, composto 48/80, histamina, PGE2 e bradicinina) e em modelos nociceptivos (contorções abdominais induzidas por ácido acético e placa quente). A Ouabaína produziu uma redução no edema de pata produzido por carragenina e pelo composto 48/80. Esse potencial anti-inflamatório está relacionado ao bloqueio da degranulação de mastócitos, bem como pela inibição da via da PGE2 e da bradicinina, porém é independente da via da histamina. A Ouabaína também apresentou uma atividade anti-nociceptiva central e periférica. Esse efeito está vinculado à inibição da via dos mediadores inflamatórios e a mecanismos opióides, visto que foi revertido pela administração da naloxona, um inibidor dos receptores opióides. Adicionalmente, foi descrito que a inibição da dor pela Ouabaína não possui envolvimento com sedação ou diminuição da capacidade motora. O conjunto desses dados demonstra pela primeira vez, in vivo, a atividade anti-inflamatória e anti-nociceptiva da Ouabaína.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2017-02-23T12:31:51Z No. of bitstreams: 1 PDF - Natan Emanuell de Sobral e Silva.pdf: 2512646 bytes, checksum: 803100d8d15d7d5d832f6862efe48740 (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2017-03-07T16:09:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Natan Emanuell de Sobral e Silva.pdf: 2512646 bytes, checksum: 803100d8d15d7d5d832f6862efe48740 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-07T16:09:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Natan Emanuell de Sobral e Silva.pdf: 2512646 bytes, checksum: 803100d8d15d7d5d832f6862efe48740 (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Chitosan is a polysaccharide derived from chitin has been arousing great interest in the tissue regeneration area, especially because of its biodegradability characteristics, biocompatibility and antimicrobial activity. It has also been frequently used in systems for controlled drug release, especially for the low aqueous solubility, such as simvastatin. Simvastatin, statin with hypolipidemic activity, in several studies have been show an interesting anti-inflammatory activity by an independent primary mechanism of action. However, those pharmaceutical forms in which this drug is available, unfeasible its use in cutaneous lesions. Therefore, the aim of this work was to develop and evaluate polymerics films for topical delivery of simvastatin. Chitosan, coming from two suppliers, was utilized to prepare films containing two concentrations of simvastatin (10 and 20 mg) for Sol-gel method. Fourier-transform infrared spectroscopy, X-ray diffraction and Thermal analysis were used to structural characterization. Additionally, in vitro release study using the Franz apparatus was realized. To in vivo testing, determination of residual wound area and total leukocyte count was conducted by analyzing statistically the data collected. In the infrared spectrum can be inferred that there were several intermolecular interactions between chitosan and simvastatin, while the X-ray diffraction and Thermal analysis, indicated the presence of the drug in amorphous form in the polymeric film. The films displayed similar release profiles, with its release governed by an anomalous transport, described in the Korsmeyer-Peppas model and in vivo evaluation of anti-inflammatory and wound healing activity, the groups receiving treatment with films with simvastatin 20 mg significantly reduced (p˂0.05) the leukocyte response and had the most efficient cicatrization that groups with white film and SALINA. Evidencing, the developed films are promising for the controlled administration of simvastatin topically in skin inflammation. / A quitosana é um polissacarídeo derivado da quitina que vem despertando grande interesse na área de regeneração tecidual, principalmente devido as suas características de biodegrabilidade, biocompatibilidade e atividade antimicrobiana. Também vem sendo bastante utilizada em sistemas para liberação controlada de fármacos, sobretudo para os de baixa solubilidade aquosa. A sinvastatina, estatina redutora de colesterol, tem exibido em diversos estudos uma interessante atividade anti-inflamatória por uma via independente do seu mecanismo de ação principal. Contudo, as formas farmacêuticas nas quais esse fármaco está disponibilizado no mercado inviabilizam seu uso em casos de lesões cutâneas. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e avaliar filmes poliméricos para a liberação controlada de sinvastatina para uso tópico em eventos inflamatórios. A quitosana, proveniente de dois fornecedores, foi utilizada para preparar filmes brancos e filmes contendo duas concentrações de sinvastatina (10 e 20 mg) pelo método sol-gel. Para caracterização físico-química, técnicas como infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), difração de raios-X (DRX) e análise térmica foram utilizadas. Além disso, foi realizado o estudo de liberação in vitro utilizando o aparato de Franz. Para o ensaio in vivo, foi realizada a determinação da área residual da ferida e contagem de leucócitos totais, analisando-se estatisticamente os dados obtidos. Nos resultados do FTIR pode-se inferir que ocorreram várias interações intermoleculares entre a quitosana e sinvastatina, enquanto a DRX e análise térmica indicaram a presença do fármaco na forma amorfa no retículo polimérico. Os filmes apresentaram perfis de liberação semelhantes, regidos por um transporte anômalo, descrito no modelo de Korsmeyer-Peppas e na avaliação in vivo da atividade anti-inflamatória e cicatrizante, os grupos que receberam o tratamento com filmes com 20 mg de sinvastatina reduziram significativamente (p˂0,05) a reposta leucocitária e apresentaram uma cicatrização mais eficiente que os grupos com o filme branco e SALINA. Evidenciando assim, que os filmes desenvolvidos são promissores para a administração controlada, via tópica de sinvastatina em inflamações cutâneas.

Submitted by Jean Medeiros (jeanletras@uepb.edu.br) on 2017-04-04T12:52:52Z No. of bitstreams: 1 PDF - Nadjaele de Melo Apolinário.pdf: 34122558 bytes, checksum: 2fff7eeb25a5efb380b59ca754c1ffec (MD5) / Approved for entry into archive by Secta BC (secta.csu.bc@uepb.edu.br) on 2017-07-20T12:18:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PDF - Nadjaele de Melo Apolinário.pdf: 34122558 bytes, checksum: 2fff7eeb25a5efb380b59ca754c1ffec (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-20T12:18:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Nadjaele de Melo Apolinário.pdf: 34122558 bytes, checksum: 2fff7eeb25a5efb380b59ca754c1ffec (MD5) Previous issue date: 2016-12-22 / The N-acylhydrazone functionality has been reported as the pharmacophoric group of compounds with a wide variety of biological properties, including anti-inflammatory, analgesic and antimicrobial activities. The objective of this study was to elucidate structurally and to evaluate the analgesic, anti-inflammatory and antimicrobial potential of N- acylhydrazone derivatives (JR04, JR09 and JR19). The previously synthesized compounds were physico-chemically characterized and the structural elucidation was performed by spectroscopic and spectroscopic techniques. In the pharmacological tests Swiss adult albino mice of both sexes were used. The models used for anti-inflammatory activity were: peritonitis and paw edema induced by carrageenan, and pockets of subcutaneous air. For the antinociceptive potential was performed: formalin-induced nociception and orofacial pain induced by formalin. The acute toxicity test was also performed. In the microbiological assays American Type Culture Collection (ATCC) standard bacterial and fungal strains were used by disc diffusion and microdilution methods. The compounds showed yields above 50%. Regarding the melting range, the temperature variation for most compounds was up to 3° C. All compounds presented LogP <5, being in agreement with the rule of Lipinsk, and chemical displacement signals characteristic of the proposed struct ures as being (2-cyano-N'-[4-(methylsulfonyl) benzylidene] acetohydrazide (JR04), '-(benzylidene)-2-cyanoacetohydrazide (JR09) and N'-[(1-H-indol-3-yl)methylene]-2-cyanoacetohydrazide (JR19) in RMN of 1H and RMN of 13C DEPT-Q spectra. In the carrageenan-induced peritonitis model, oral administration of the compounds JR04 (10 and 20mg/kg), JR09 (20mg/kg) and JR19 (10 and 20mg/kg) inhibited significantly at 48, 54, 61, 59 and 52%, respectively, leukocyte migration when compared to the control group, and there was no significant difference between doses of 10 and 20 mg/Kg of JR04 and JR19. The dose of 10mg/kg was selected for the other tests. In the pockets of subcutaneous air, all compounds significantly inhibited cell migration when compared to the negative control, at 55, 52 and 66%, for JR04, JR09 and JR19, respectively. They also reduced carrageenan-induced paw edema, especially compounds JR19. Confirming the anti-inflammatory activity in paw edema, the compounds significantly reduced serum C-reactive protein (CRP) concentration when compared to the control group. In the models of formalin-induced nociception and orofacial pain induced by formalin, compounds JR09 and JR19 were active only in the second phase, suggesting to be devoid of central analgesic effect and possibly anti-inflammatory action retainer. The compound JR04 increased the reactivit y time in the two phases in these models, this is suggestive of an increase in the synthesis and/or initial release of BK promoting an intensification of action of this vasoactive peptide. In the evaluation of the acute toxicity of compounds JR09 and JR19 at the dose of 100mg/Kg there was no death or behavioral or physiological changes, indicating low toxicity of the molecules tested. In the tests of antimicrobial activit y, no inhibition of the growth of the tested microorganisms was observed, indicating absence of antimicrobial activit y, by the methods used. The results indicate the effectiveness of the N-acylhydrazone derivatives as anti-inflammatory, favoring H and RMN of C DEPT-Q spectra. In the carrageenan-induced the prospects for its future use with this therapeutic objective. / A funcionalidade N-acilhidrazona tem sido relatada como o grupo farmacofórico de compostos com uma ampla variedade de propriedades biológicas, incluindo as atividades anti- inflamatória, analgésica e antimicrobiana. O objetivo deste estudo foi elucidar estruturalmente e avaliar o potencial analgésico, anti-inflamatório e antimicrobiano dos derivados N- acilhidrazônicos (JR04, JR09 e JR19). Os compostos previamente sintetizados foram caracterizados físico-quimicamente e a elucidação estrutural foi realizada pelas técnicas espectrométricas e espectroscópicas. Nos ensaios farmacológicos foram utilizados camundongos albinos Swiss adultos de ambos os sexos. Os modelos utilizados para atividade anti-inflamatória foram: peritonite e edema de pata induzido por carragenina, e bolsão de ar subcutâneo. Para o potencial antinociceptivo foi realizado: nocicepção induzida por formalina e dor orofacial induzida por formalina. Foi realizado também o teste de toxidade aguda. Nos ensaios microbiológicos foram utilizadas linhagens bacterianas e fúngicas padrão American Type Culture Collection (ATCC) pelos métodos de disco-difusão e microdiluição. Os compostos apresentaram rendimentos acima de 50%. Em relação a faixa de fusão, a variação de temperatura para a maioria dos compostos foi de até 3 C. Todos os compostos apresentaram LogP<5, estando de acordo com a regra de Lipinsk, e sinais de deslocamento químico característicos das estruturas propostas, como sendo 2-ciano-N’-[4-(metilssulfonil)benzilideno]-acetohidrazida (JR04), N’-(benzilideno)-2-cianoacetohidrazida (JR09) e N’-[(1-H-indol-3-il)-metileno]- 2-cianoacetohidrazida (JR19) nos espectros de RMN de 1H e RMN de 13C DEPT-Q. No modelo de peritonite induzida por carragenina, a administração oral dos compostos JR04 (10 e 20mg/Kg), JR09 (20mg/kg) e JR19 (10 e 20mg/Kg) inibiram de forma significativa em 48, 54, 61, 59 e 52%, respectivamente, a migração leucocitária quando comparado com o grupo controle, não havendo diferença significativa entre as doses de 10 e 20 mg/Kg de JR04 e JR19 . A dose de 10mg/kg foi selecionada para os demais testes. No bolsão de ar subcutâneo, todos os compostos inibiram significativamente a migração celular quando comparados ao controle negativo, em 55, 52 e 66%, para JR04, JR09 e JR19, respectivamente. Reduziram também o edema de pata induzido por carragenina, especialmente os composto JR19. Confirmando a atividade anti-inflamatória no edema de pata, os compostos reduziram significativa a concentração sérica da proteína C reativa (PCR) quando comparados ao grupo controle. Nos modelos de nocicepção induzida por formalina e dor orofacial induzida por formalina, os compostos JR09 e JR19 foram ativos apenas na segunda fase, sugerindo ser desprovido de efeito analgésico central e possivelmente retentor de ação anti- inflamatória. O composto JR04 aumentou o tempo de reatividade nas duas fases nestes modelos, isto é sugestivo de um aumento na síntese e/ou liberação inicial de BK promovendo uma intensificação da ação deste peptídeo vasoativo. Na avaliação da toxicidade aguda dos compostos JR09 e JR19 na dose de 100mg/Kg não houve morte nem alterações comportamentais ou fisiológicas, indicando baixa toxicidade das moléculas testadas. Nos testes de atividade antimicrobiana, não foi verificada inibição do crescimento dos microrganismos testados, apontando ausência de atividade antimicrobiana, pelos métodos utilizados. Os resultados obtidos indicam a efetividade dos derivados N- acilhidrazônicos C DEPT-Q. No modelo de peritonite induzida por carragenina, a como anti-inflamatórios, tornando favoráveis as perspectivas para sua futura utilização com esse objetivo terapêutico.

Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae), popularmente conhecida como carqueja, é nativa da América sendo amplamente empregada na medicina popular para problemas hepáticos, digestivos, e como anti-inflamatória. Em sua composição química destaca-se maior acúmulo de flavonas, flavonóis e de diterpenos labdanos e clerodanos. Diversos estudos vêm sendo realizados, em especial para as atividades anti-inflamatórias e antimicrobianas. Com isso, iniciou-se o fracionamento do extrato de B. trimera visando à identificação da fração ou compostos responsáveis pela atividade anti-inflamatória. Das partes aéreas de B. trimera foram obtidas as frações diclorometano, acetato de etila, n-butanol e aquosa, além das frações saponinas e flavonóides. Essas seis frações foram avaliadas para a atividade anti-inflamatória através do modelo de inflamação aguda da pleurisia induzida por carragenina e foram avaliados os seguintes parâmetros no líquido pleural: volume de exsudato, contagem de leucócitos totais, diferencial citológico, concentração protéica e determinação de NO no exsudato. Todas as frações testadas diminuíram significativamente os parâmetros analisados quando comparados ao grupo carragenina (ANOVA, P < 0,05), evidenciando assim potencial atividade antiinflamatória. A determinação de fenóis totais e a atividade antioxidante foram avaliadas através dos métodos de Folin-Ciocalteu e através do ensaio espectrofotométrico com o radical 2,2 difenil-1-picril-hidrazil (DPPH.), respectivamente. As frações flavonóides e acetato de etila (1 mg/ml) apresentaram alto potencial antioxidante, não se diferenciando estatisticamente (ANOVA, P < 0,05) das substâncias de referência vitamina C, quercetina e luteolina nas mesmas concentrações, sugerindo dessa forma que a ação antioxidante destas frações devese à presença de flavonóides. A continuidade dos estudos fitoquímicos e a identificação do potencial antioxidante e anti-inflamatório de B. trimera, além de contribuir para a diferenciação química das espécies do gênero Baccharis poderão credenciá-la para o desenvolvimento de um fármaco com atividade anti-inflamatória e antioxidante. / Baccharis trimera (Less.) DC. (Asteraceae), popularly known as "carqueja", is native to America and it is widely used in traditional medicine for gastrointestinal treatments, for liver diseases, as digestive and to anti-inflammatory purposes. It presented accumulation of flavones, flavonols and diterpenes. Several studies have been performed to study its anti-inflammatory and antimicrobial activities. Considering this, we initiated the fractionation of B. trimera extract in order to identify the fraction or compounds responsible for its anti-inflammatory activity. From the aerial parts of B. trimera it were obtained the fractions: dichloromethane, ethyl acetate, n-butanol, aqueous and also saponins and flavonoids fractions. All fractions were characterized by TLC. These six fractions were evaluated for the anti-inflammatory activity using the carrageenan-induced pleurisy, as a model of acute inflammation via i.p. The following parameters were determined in the pleural fluid: the exudate volume, total leukocyte count, cytological differences, protein concentration and determination of NO. All tested fractions decreased significantly the analyzed parameters when compared to the carrageenan group (ANOVA, P < 0.05), showing potential antiinflammatory activity. The determination of total phenols and antioxidant activity were evaluated by the Folin-Ciocalteu spectrophotometric assay and by the radical 2.2- diphenyl-1-picryl-hidrazil (DPPH.) method, respectively. The flavonoid and ethyl acetate fractions (1 mg / ml) showed high antioxidant potential that were similar (ANOVA, P < 0.05) from that of the reference substances: vitamin C, quercetin and luteolin in the same concentrations, thus suggesting that the antioxidant activity of these fractions is due to the presence of flavonoids. The phytochemical studies and the identification of potential antioxidant and anti-inflammatory activities of B. trimera, will contribute to the chemical differentiation of Baccharis species and also it should support the development of a drug with anti-inflammatory and antioxidant activity.

Submitted by Chaylane Marques (chaylane.marques@ufpe.br) on 2015-03-13T18:05:39Z No. of bitstreams: 2 ANA CARINA CAVALCANTI DE FREITAS - DOUTORADO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS - 2012.pdf: 10008315 bytes, checksum: 38c6ac0aa331fea67fa107d6df28fdba (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T18:05:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ANA CARINA CAVALCANTI DE FREITAS - DOUTORADO EM CIÊNCIAS BIOLÓGICAS - 2012.pdf: 10008315 bytes, checksum: 38c6ac0aa331fea67fa107d6df28fdba (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-12-18 / FACEPE / As plantas constituem uma importante fonte de produtos naturais ativos. Dentre os metabólitos primários vegetais, estão as lectinas, proteínas ubíquas na natureza que se ligam de forma específica e reversível a carboidratos, o que lhes permite várias aplicações biotecnológicas. Libidibia (Caesalpinia) ferrea var. parvifolia, popularmente conhecida como “pau-ferro”, é uma árvore largamente distribuída no Brasil utilizada na medicina popular devido às suas numerosas propriedades terapêuticas. O objetivo deste trabalho foi avaliar as propriedades biológicas (atividades citotóxica, antitumoral, anti-inflamatória, analgésica, artemicida e moluscicida) de preparações obtidas de L. ferrea, visando empregá-las como fitofármacos ou agentes de controle biológico. Na avaliação da atividade anti-inflamatória, o extrato etanólico da vagem (EECf, 50 mg/kg) reduziu significativamente o edema de orelha (66,6%) em relação ao controle, inibiu a permeabilidade vascular induzida por ácido acético, e a migração de leucócitos polimorfonucleares para a cavidade peritoneal induzida pelo tioglicolato. No teste de contorções induzidas por ácido acético, EECf (12,5; 25 e 50 mg/kg) reduziu significativamente o número de contorções em 24,9%; 46,9% e 74,2%, respectivamente. No teste de formalina, EECf apresentou efeitos nociceptivos apenas na segunda fase, relacionada à dor inflamatória. O extrato bruto aquoso da vagem (CE) e uma fração proteica obtida por precipitação com sulfato de amônio (F80), ambos em 100 mg/kg, também apresentaram efeito anti-inflamatório significativo, evidenciado pela redução (40,9% e 38,2%, respectivamente) do número de leucócitos no exsudato inflamatório, na peritonite induzida por carragenina. Ambos os preparados provocaram um decréscimo significativo nas concentrações de óxido nítrico e reduziram em 56,60% e 72,72%, respectivamente, o número de contorções induzidas por ácido acético, demonstrando forte ação antinociceptiva destas preparações. Na atividade citotóxica, as preparações não inibiram o crescimento nas linhagens celulares testadas. A redução no peso do tumor Sarcoma-180 promovida por F80 também não foi significativa (8,68%, 100 mg/kg peso corporal). A LD50 para ambos os preparados ficou estabelecida em 2.500 mg/kg peso corporal. As lectinas CfePL, CfeBL e CfeLL, obtidas respectivamente das vagens, entrecasca e folhas, foram testadas em diferentes concentrações (12,5; 25; 50 e 100 ppm), quanto às suas atividades artemicida (frente à Artemia salina) e embriotóxica (contra embriões de Biomphalaria glabrata). Quanto à atividade artemicida, todas as lectinas testadas promoveram a morte de A. salina, com LC50 de 10,728; 25,78 e 54,18 ppm, para CfeLL, CfeBL e CfePL respectivamente. Apenas CfePL e CfeLL apresentaram atividade embriotóxica nas concentrações testadas. As LC50 de CfeLL e CfePL foram de 36,30 e 94,95 ppm, respectivamente. Em conclusão, CE e F80 não apresentam atividades citotóxica e antitumoral significativas contra as células e o tumor testados; porém, a baixa toxicidade permite seu uso com certa segurança em atividades biológicas ou na medicina popular. Contudo, possuem atividades anti-inflamatória e antinociceptiva promissoras, assim como EECf, corroborando a base farmacológica do uso etnomédico de L. ferrea. Os resultados obtidos da atividade artemicida apresentada por CfeLL e CfeBL, além da significativa atividade moluscicida de CfeLL demonstram potenciais aplicações biotecnológicas para estas lectinas.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:26:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2109_1.pdf: 2735340 bytes, checksum: 9eec1389edfda8071ea76404501b0077 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Em estudos prévios, 2-isoxazolinas aza-bicíclicas foram obtidos por nosso grupo de pesquisa, dando origem a núcleos como o 2-isoxazolina[5,4-b]piperidina e 2-isoxazolina[5,4- b]pirrolidina. Amidas N-benzoiladas derivadas dessas substâncias, apresentaram-se biologicamente ativas, (teste antiinflamatório e de efeitos gerais). Substâncias contendo as funções hidrazida e hidrazona são descritas na literatura, apresentando inúmeras e pronunciadas atividades biológicas. A funcionalidade hidrazona consiste no grupo farmacofórico de inúmeras substâncias, induzindo às atividades analgésicas, antiinflamatória, e anticonvulsivante. Diante desses fatos, obtivemos, através da hibridação molecular, hidrazidas e hidrazonas, contendo tais aza-biciclos. Os ésteres isoxazolínicos foram obtidos através de reações de cicloadição 1,3-dipolar entre enecarbamato Nbenziloxicarbonil- 2-pirrolina e óxido de nitrila (CEFNO), seguido por hidrogenólise e Nbenzoilação. Obteve-se primeiramente as hidrazidas, reagindo-se os ésteres da série pirrolidínica com hidrazina. Rendimentos de 80 a 90% foram obtidos em condições brandas. Em seguida submeteu-se as hidrazidas à reações de condensação com aldeídos aromáticos para obtenção de 20 novos derivados N-acil-arilhidrazonas, que foram obtidas com rendimentos variando de 75 a 97%. Todas as hidrazidas e hidrazonas foram devidamente identificadas por métodos espectrométricos (RMN 13C e 1H, IVFT). A atividade antiinflamatória das hidrazonas foi avaliada pelo método de peritonite em camundongos nas doses de 50, 100 e 200 &#956;mol/kg; A indometacina foi utilizada como padrão na dose de 50 &#956;mol/kg. A hidrazona (R1 = Cl, R2 = OMe) apresentou 27%, 39% e 44% de inibição da inflamação, respectivamente nas doses testadas. A atividade antinociceptiva foi realizada pelo método de contorções abdominais induzida por ácido acético. A hidrazona (R1 = NO2 e R2 =F) apresentou 74% de efeito analgésico contra 65% da dipirona, fármaco padrão. Uma segunda abordagem deste trabalho foi dada a síntese assimétrica. Diante dos excelentes resultados de atividade anti-inflamatória do derivado 3-carboxamidas-N-(benzoil)- 2-isoxazolina[5,4-b]pirrolidina, sintetizamos ambos os enantiômeros puros, para averiguarmos a influência da estereoquímica relativa e absoluta da 2-isoxazolina azabicíclica, em questão, na atividade anti-inflamatória, isoladamente de cada antípoda óptico, assim como para o desenvolvimento de metodologia sintética de isoxazolinas bicíclicas quirais. Partindo do ácido L-piroglutâmico, realizou-se a proteção da função ácido como éster benzílico. Em seguida, o nitrogênio do éster do ácido piroglutâmico foi protegido com o grupamento terc-butóxidocarbonila (Boc). Redução da carbonila carbamídica levou à formação de um lactamol, com 81% de rendimento. Eliminação da hidroxila do lactamol levou a formação do enecarbamato quiral, com 82% de rendimento. Utilizando o enecarbamato quiral, com um centro assimétrico com configuração absoluta definida, houve, através da reação de cicloadição 1,3-dipolar assimétrica com N-óxido de nitrila-CEFNO, a formação de um par de diastereoisômeros. Após separação dos mesmos por cromatografia, remoção do indutor quiral, que ocorre em 3 etapas, obteve-se portanto os enantiômeros separados. Reação de eliminação do grupamento Boc, seguida de acilação do nitrogênio com o grupo p-fluorobenzoila e por fim a amonólise do éster etílico, conduziu à formação das amidas quirais enantiomericamente puras. A atividade anti-inflamatória dos enantiômeros separados e da mistura racêmica, foi realizada pelo método de peritonite em camundongos, sendo testada a dose de 150 &#956;mol/Kg. A mistura racêmica apresentou uma atividade anti-inflamatória de 67%, contra 65% para um enantiômero 59% para o outro enantiômero. A exploração sintética dos núcleos 2-isoxazolina[5,4-b]piperidina e 2- isoxazolina[5,4-b]pirrolidina, foi realizada de forma bastante satisfatória neste trabalho, demonstrando o grande potencial destes heterociclos. Através de síntese assimétrica obtivemos os derivados 3-carboxamidas N-(benzoil)-2-isoxazolina[5,4-b]pirrolidina enantiomericamente puro. A etapa chave para a obtenção dos enantiômeros foi a reação de cicloadição 1,3-dipolar assimétrica envolvendo enecarbamatos endocíclicos quirais com Nóxido de nitrila, reação esta, ainda não relatada na literatura até o momento

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-04-20T15:56:22Z No. of bitstreams: 1 Maria Taciana Ralph.pdf: 1518939 bytes, checksum: 6323c9b273c3c6fe6cd2f08eca1537a5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-20T15:57:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maria Taciana Ralph.pdf: 1518939 bytes, checksum: 6323c9b273c3c6fe6cd2f08eca1537a5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Calotropis procera (Apocynaceae) is a medicinal plant by which its laticifer proteins have been reported as having important biological activities. In particular, a protein fraction rich in cysteine proteases (LPPII) was shown antinflammatory and capable to maintain blood clotting homeostasis in Salmonella-infected mice. In the present study, a murine model of systemic infection caused by Salmonella Typhimurium was used to evaluate the influence of LPPII on control of infection-induced inflammation. Preventive and curative treatment regimens were evaluated. In the preventive treatment schedule, experimental animals received LPPII (10mg/kg) intravenously (ev), whereas the control groups were administered with LPPII + IAA (10mg/kg), whose proteases were inactivated with Iodoacetamide, PBS intravenously or dexamethasone (0.5mg/animal) (ip). After 30 min, the animals were challenged with S. Typhimurium (105 CFU/mL) intraperitoneally (ip). After 6 hours of infection, the mice were submitted to euthanasia procedures and analyzes. In the curative treatment schedule, the animals were infected with S. Typhimurium (105 CFU/mL) (ip) and for two consecutive days were treated with LPPII (10mg/kg) or administered with LPII + IAA (10mg/kg), PBS intravenously or dexamethasone (ip). After 72 hours of infection, the groups were submitted to euthanasia procedures for sample collection and analysis. The results showed that, in the two treatment regimens, there was no bacterial clearance in the spleen, liver, peritoneal fluid and blood of the experimental animals when compared to the controls. The treatments with LPPII significantly reduced the amount of leukocytes in the peritoneal cavity of the animals in comparison to the LPPII + IAA and PBS control groups. The treatments also reduced gene expression of TNF-α, IL-12 and IFN-γ in animals receiving LPPII. Furthermore, there was no increase in survival of LPPII-treated and Salmonella-infected animals. Finally, peritoneal macrophages previously stimulated with LPS were exposed to an osmotin isolated from LPPII. It was observed that the treatments significantly reduced the IL-1 gene expression, but not TNF-α. We have shown that cysteine proteases present in the latex of C. procera are capable to decrease inflammation in the peritoneum of Salmonella Typhimurium-infected mice. Although the mechanisms involved in this effect are not fully elucidated, it has been demonstrated that an osmotin present in LPPII possesses anti-inflammatory potential and possible therapeutic relevance. / Calotropis procera (Apocynaceae) é uma planta medicinal, cujas proteínas extraídas do seu látex têm sido reportadas por apresentar importantes atividades biológicas. Em particular, foi identificado que uma fração proteica rica em proteases cisteínicas (LPPII), quando administradas em animais de laboratório, demonstra relevante ação anti-inflamatória e mantem a homeostase da coagulação sanguínea em camundongos infectados por Salmonella. No presente estudo, um modelo murino de infecção sistêmica causada por Salmonella Typhimurium foi utilizado para avaliar a influência de LPPII sobre o controle da inflamação decorrente da infecção. Dois esquemas de tratamentos foram avaliados, preventivo e curativo. No modelo de tratamento preventivo, os animais experimentais receberam LPPII (10mg/kg) por via endovenosa (ev), enquanto os grupos controles foram administrados com LPPII+IAA (10mg/kg), cujas as proteases foram inativadas com Iodoacetamida, PBS (ev) ou dexametasona (0,5mg/cavidade). Após 30 min, os animais foram desafiados com S. Typhimurium (105 UFC/mL), por via intraperitoneal (ip). Após 6 horas da infecção, os camundongos foram submetidos aos procedimentos de eutanásia e análises. No modelo de tratamento curativo, os animais foram infectados com S. Typhimurium (105 UFC/mL) (ip) e durante dois dias consecutivos foram tratados com LPPII (10mg/kg) ou administrados com LPII+IAA (10mg/kg), PBS (ev) ou dexametasona (ip). Após 72 horas de infecção, os grupos foram submetidos aos procedimentos de eutanásia para coleta de amostras e análises. Os resultados demonstraram que, nos dois esquemas de tratamento, não houve depuração bacteriana no baço, fígado, fluido peritoneal e sangue dos animais experimentais quando comparados aos controles. Também foi possivel observar que o tratamento com LPPII reduziu significativamente a quantidade de leucócitos na cavidade peritoneal dos animais, em relação aos grupos controles LPPII+IAA e PBS. Também houve redução da expressão gênica de TNF-α, IL-12 e IFN-γ nos animais que receberam LPPII. Ainda, não houve aumento da sobrevida de animais tratados com LPPII e infectados com Salmonella. Finalmente, uma osmotina obtida de LPPII foi exposta a culturas de macrófagos peritoneais previamente estimulados com LPS. Foi observado que os tratamentos reduziram de forma significativa da expressão gênica de IL-1β, mas não TNF-α. Conlui-se que proteases cisteínicas presentes no látex de C. procera são capazes de diminuir a inflamação no peritoneo de camundongos infectados com Salmonella Typhimurium. Apesar dos mecanismos envolvidos neste efeito não estejam completamente elucidados, foi demonstrado que uma osmotina presente em LPPII apresenta potencial anti-inflamatório e possível relevância terapêutica.