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EFEITOS DE ATIVIDADE FÍSICA INTENSA NOS NÍVEIS SÉRICOS DE CREATINA QUINASE, IL-6 E PROTEÍNA C-REATIVA EM ATLETAS

Macedo, Andréia Borges 10 March 2017 (has links)
Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2017-05-12T13:01:11Z No. of bitstreams: 1 ANDRÉIA BORGES MACEDO.pdf: 4548667 bytes, checksum: 638d9b201287383c7aafa2ce65c913d8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-12T13:01:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANDRÉIA BORGES MACEDO.pdf: 4548667 bytes, checksum: 638d9b201287383c7aafa2ce65c913d8 (MD5) Previous issue date: 2017-03-10 / The Environmental Walk takes place every year in Goiás-Brazil, this is an event that athletes walk along 310 Km in 5 days, stimulating the environmental awareness, specially, the Cerrado Biome. During the strenuous physical activity, of long way, physiological changes occur, triggering the release of inflammation-related markers. The present study had as objective to verify, in athletes of the Environmental Walk of 2014. the behavior of serum levels of the CK, PCR e IL-6 markers, before and during the walk.Venous Blood samples were taken from 24 athletes of mankind who were on the environmental walk and it was evaluated the serum levels of CK, PCR e IL-6. The 24 athletes were about 45,1 + 8,50. The medium Serum levels of PCR had increased from 1,22 + 1,28 on the baseline to 13,1 + 13,9, after the fourth walking day (+973,8%; p < 0,001). The Serum levels of IL-6 had increased from 2,19 pg/ml (DP + 1,96), on the baseline to 4,59 pg/ml (DP + 3,95), at the end of the walk (+109,6%; p < 0,001). Similarly, it was verified a significant increasing on the concentration of enzyme CK on the evaluated periods. The medium Serum levels increased from 588,6 + 1.024,5 to 1.473,2 + 1.797,6 (+150,3%; p < 0,001). The present study evidenced progressive tissue injury estimated by the CK Enzyme Serum levels. However, the subsequent inflammatory response, evidenced by the IL-6 and PCR levels, showed itself limited, getting the maximum expression on the second and third day respectively, decaying itself since then. Such results contribute to the comprehension of the physiological alterations generated during the physical stress and the capacity of the organism of reestablishing the normal levels. / A caminhada ecológica ocorre anualmente em Goiás, evento em que atletas percorrem 310 Km em 5 dias, estimulando a conscientização da preservação do meio ambiente, principalmente, do Bioma Cerrado. Durante a atividade física extenuante, de longa distância, ocorrem alterações fisiológicas, desencadeando a liberação de marcadores relacionados à inflamação. O presente estudo teve como objetivo verificar, em atletas da caminhada ecológica de 2014, o comportamento dos níveis séricos dos marcadores CK, PCR e IL-6, antes e durante a caminhada. Foram colhidas amostras de sangue venoso de 24 atletas do sexo masculino da caminhada ecológica e foram avaliados os níveis séricos de CK, PCR e IL-6. Os 24 atletas apresentaram idade média de 45,1 + 8,50. Os níveis séricos médios de PCR aumentaram de 1,22 + 1,28 na linha de base para 13,1 + 13,9, após o quarto dia de caminhada (+973,8%; p < 0,001). Os níveis séricos da IL-6 aumentaram de 2,19 pg/ml (DP + 1,96), na linha de base, para 4,59 pg/ml (DP + 3,95), ao final da caminhada (+109,6%; p < 0,001). Da mesma forma, verificou-se um aumento significativo na concentração da enzima CK nos períodos avaliados. Os níveis séricos médios aumentaram de 588,6 + 1.024,5 para 1.473,2 + 1.797,6 (+150,3%; p < 0,001). O presente estudo evidenciou lesão tecidual progressiva estimada pelos níveis séricos da enzima CK. Contudo, a resposta inflamatória subsequente, evidenciada pelos níveis de IL-6 e PCR, mostrou-se alto-limitada, atingindo expressão máxima no segundo e no terceiro dia respectivamente, decaindo a partir de então. Tais resultados contribuem para a compreensão das alterações fisiológicas geradas durante o estresse físico e a capacidade do organismo de restabelecer os níveis de normalidade.
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Clonagem, expressão e purificação de alfa receptores de folato de Homo sapiens para aplicações bioanalíticas em câncer / Cloning, expression and purification of alpha folate receptors from Homo sapiens for bioanalitical aplications in cancer research

Beatriz Nogueira Messias de Miranda 22 August 2014 (has links)
Nos últimos anos a incidência do câncer tem crescido significativamente mundialmente, porém, as técnicas atualmente empregadas para a detecção da doença não são individualmente conclusivas, além de serem extremamente invasivas e não permitirem seu diagnóstico precoce, o que justifica o desenvolvimento de novas tecnologias alternativas para a detecção do câncer. Células cancerígenas possuem receptores específicos de alta afinidade com folato e por serem altamente replicativas, são extremamente dependentes do suprimento de folato reduzido. Os alfa-receptores de folato (FR &alpha;) são proteínas com propriedades bioquímicas específicas as quais podem ser exploradas pela estratégia de marcação para detecção e tratamento do câncer (biomarcadores). Com raras exceções, são induzidos seletivamente em tecidos cancerígenos e raramente expressos em células normais, mostrando-se, assim, altamente seletivos e específicos. Sendo assim, neste projeto objetivou-se a expressão e a purificação dos FR &alpha;, além da sua imobilização em microssistema para estudos subsequentes em biossensores. Foram promovidos testes de expressão da proteína heteróloga (rFR &alpha;) em E. coli em diferentes linhagens, temperaturas e tempos de indução da expressão sendo observada a expressão da proteína recombinante de forma insolúvel. Paralelamente foram promovidos testes de expressão da proteína rFR &alpha; em P. pastoris, os quais não se mostraram eficientes, uma vez que não foi possível a detecção da proteína em estudo. Como alternativa, uma nova construção, em fusão com a proteína Trigger fator (TF) de E. coli, uma chaperona molecular de alta solubilidade, foi testada. Através de análises por SDS-PAGE, Western Blot, OFFGEL e espectrometria de massas, foi possível comprovar a produção da proteína recombinante TFFR&alpha;. Ainda, a proteína foi imobilizada em lipossomos, o que proporcionou o desenvolvimento de um padrão analítico que poderá ser utilizado em estudos subsequentes com biossensores de FR &alpha;. Este estudo será útil para o desenvolvimento de drogas visando a inativação desta proteína, como os anti-folatos, que são hoje os agentes anti-neoplásicos mais investigados, e possibilitará a caracterização bioanalítica da proteína FR &alpha; recombinante (rFR &alpha;) bem como o desenvolvimento de novos biossensores. / In recent years the incidence of cancer has grown significantly globally. Even though, the techniques currently employed for the detection of cancer are not individually conclusive due to the subjectivity of the analysis, inherently invasive, and are unable to provide early diagnosis. Therefore, the development of new technologies for cancer detection and prognostic are justified. Cancer cells have specific receptors with high affinity towards folate and are highly replicative. Alpha folate receptor (FR &alpha;) are extracellular proteins with specific biochemical properties since, with rare exceptions, are induced selectively in cancerous tissues and rarely expressed in normal cells, being highly sensitive and specific. In this work we produced FR &alpha; heterologously and we immobilized it on a microsystem mimicking a cancer cell that will become an analytical standard for studies with biosensors. Firstly, we produced rFR &alpha; in different E. coli strains, exploring variation of temperature and induction times, in which we observed the expression of insoluble protein. We also tried the expression in P. pastoris system, which was not efficient as well. Alternatively, we cloned FOLR1 gene in a special vector that enables the expression of FR &alpha; fusioned with the Trigger fator from E. coli, a highly soluble molecular chaperone. Using SDS-PAGE, Western Blot, OFFGEL and mass espectrometry we observed the production of soluble TFFR &alpha;. The recombinant protein was immobilized in liposomes, producing an analytical standard for studies with FR &alpha;-based biosensors. Our findings open research possibility in drug development, like anti-folates, besides the development of new biosensors.
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Espectroscopia de absorção no infravermelho em pele queimada: avaliação de potenciais biomarcadores para o reparo tecidual / Infrared absorption spectroscopy in burned skin: evaluation of potential biomarkers in the wound healing

Pedro Arthur Augusto de Castro 07 February 2018 (has links)
Uma caracterização bioquímica eficiente da cicatrização das feridas por queimadura pode melhorar a rotina clínica para a ajustar os tratamento dos pacientes. Considerando a dificuldade de monitoramento de cicatrização, a espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier acoplado com o acessório de Reflexão Total Atenuada (ATR-FTIR) é uma técnica analítica a qual tem demonstrado capacidade de prover biomarcadores espectrais no materiais biológicos. Esse estudo avaliou a capacidade de usar ATR-FTIR para classificar a pele queimada com o intuito de monitorar o reparo tecidual em pacientes. Ratos Wistar com pele queimada foram avaliados pela espectroscopia ATR-FTIR nos dias 3, 7, 14 e 21 após a queimadura e comparados com amostras de grupos sadios. Os espectros obtidos foram separados nas regiões entre 900 a 1800 cm-1 e entre 2800 a 3000 cm-1 para posterior adequação quimiométrica. Avaliou-se as amplitudes das derivadas de segunda ordem dos espectros como parâmetro de discriminação, nos quais demonstraram diferenças significativas para os grupos não queimados com controle e entre grupos de queimadura usando Glicogênio (1030 cm-1), Amida I (1628 cm-1), Amida II (1514 cm-1), Colágeno em 1281 cm-1 e Colágeno em 1336 cm-1. Esses resultados indicam que ATR-FTIR é sensível para detectar os estágios de reparo tecidual e pode futuramente ser um instrumento auxiliar para a rotina clínica. / Efficient biochemical characterization of burn wound healing stages can improve clinical routine to adjust the patient treatment. Considering the difficulty to monitoring wound healing, the Fourier Transform Infrared spectroscopy coupled with Attenuated Total Reflectance (ATR-FTIR) is an analytical technique that has capability to provide spectral biomarkers in biological materials. This study aims to evaluate the classification feasibility of ATR-FTIR in burned skin to follow the regenerative process in patients. Wistar rat burn tissues were evaluated by ATR-FTIR spectroscopy at 3, 7, 14, 21 days after burn and compared with the healthy group samples. The spectra was separated in the region 900 to 1800 cm-1 and the region 2800 to 3000 cm-1 for further chemometric adequation. The second derivative of amplitude was applied for discrimination which results demonstrated differences to control with non-wounded groups and between non-wounded using Glycogen (1030 cm-1), Amide I (1628 cm-1), Amide II (1514 cm-1), Colllagen in 1281 cm-1 and Collagen in 1336 cm-1. These findings indicate that ATR-FTIR is suitable to detect the burn wound healing stages and in the future can be auxiliary instrument for clinical routine.
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ESTUDO DE RISCO CARDIOVASCULAR: UMA PROPOSTA DE USO DA MIELOPEROXIDASE SÉRICA E AVALIAÇÃO DE PRESSÃO INTRACRANIANA

Silva, Anderson José de Melo e 06 October 2017 (has links)
Made available in DSpace on 2017-07-21T14:35:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Anderson Jose de Melo Silva.pdf: 2395463 bytes, checksum: ffa3d1c0f5669babc3c89ef037bd4833 (MD5) Previous issue date: 2017-10-06 / The Acute Coronary Syndrome (ACS) defines a range of clinical changes that are compatible with myocardial ischemia, resulting in the death of myocardial cells due functional deficit of blood flow, characterizing the acute myocardial infarction (AMI). The AMI is evidenced through clinical data that are reinforced by electrocardiogram (ECG), imaging and even the biochemical markers (biomarkers) evaluation, such as serum creatine phosphokinase (CK), its isoenzyme MB fraction (CK-MB), troponin and new biomarkers not yet included in routine laboratory tests, such as myeloperoxidase (MPO). In addition to new laboratory markers, science allows the development of new technologies for clinical assessment of patients, providing new information and less risk, such as non-invasive evaluation of intracranial pressure (ICP). This study is justified by the need to predict earlier the complications in patients with suspected AMI, as well as evaluate them as to the diagnosis and prognosis of the event in question. Thus, we sought to study patients with suspected ACS/AMI about the cardiovascular risk and possible PIC change through traditional biomarkers, most current markers ( "gold standard") and new biomarkers and new ICP monitoring technology. Therefore, from a population of 20 patients, randomly selected according to gender and age, separated into two groups: CK-MB≥25 IU (n = 6) and CK-MB<25 IU (n = 14), which were submitted to measurement of PIC and PAS, as well as biochemical and hematological measurements, and specific cardiac biomarkers. As a result, there was correlation of clinical significance between the values of creatine kinase MB fraction (CK-MB) and glycated hemoglobin (HGBA1C). From these data, it started to study two cases that were selected two patients. It was observed that even with changes of CK-MB, troponin and myeloperoxidase (compared to laboratory practice reference values for traditional markers and "gold standard" and MPO value considered normal in the literature), it was found not manifestations that have allowed to observe reduction of cerebral compliance, where the waves P2 are larger than P1, and therefore, there were no PIC changes identified for patients under the conditions studied. Thus, it was concluded that, even without demonstration of PIC change in this work, it is not possible to exclude the value of its inclusion in the clinical evaluation, considering that biases, like the sample universe and the time of collection of PIC or the use of medication at the admission time on hospital, may have contributed to the non-registration of changes in ICP, even in cases where patients had an unfavorable evolution of the clinical picture. / A Síndrome Coronariana Aguda (SCA) define uma gama de alterações clinicas que são compatíveis com um quadro de isquemia miocárdica, acarretando na morte de células do tecido miocárdico devido ao déficit funcional do fluxo sanguíneo, caracterizando o Infarto Agudo do Miocárdio (IAM). O IAM pode se revelar através de dados clínicos que são reforçados pelo eletrocardiograma (ECG), exames de imagem e ainda a pesquisa de marcadores bioquímicos (biomarcadores), tais como Creatinafosfoquinase (CK), sua isoenzima fração MB (CK-MB), troponina e novos biomarcadores ainda não inclusos na rotina laboratorial, tais como mieloperoxidase (MPO). Além de novos marcadores laboratoriais a ciência permite o desenvolvimento de novas tecnologias para avaliação clínica dos pacientes, proporcionando novas informações e menor risco, tais como a avaliação não invasiva da pressão intracraniana (PIC). O presente trabalho justifica-se pela necessidade de se prever intercorrências com maior antecedência em pacientes com suspeita de IAM, assim como em avaliá-los quanto ao diagnóstico e prognóstico do evento em questão. Desta forma, buscou-se estudar pacientes com suspeita de SCA/IAM quanto ao risco cardiovascular e possível alteração de PIC por meio biomarcadores tradicionais, marcadores mais atuais ("padrão ouro") e novos biomarcadores e nova tecnologia de acompanhamento da PIC. Para tanto, de uma população de 20 pacientes, escolhidos aleatoriamente quanto ao gênero e idade, separou-se em dois grupos: CK-MB≥25 UI (n=6) e CK-MB˂ 25 UI (n=14), os quais foram submetidos à aferição de PIC e PAS, além de dosagens bioquímicas e hematológicas, bem como biomarcadores cardíacos. Como resultado, observou-se correlação de significância clinica entre os valores de creatinofosfoquinase fração MB (CK-MB) e hemoglobina glicada (HgbA1C). A partir destes dados, passou-se ao estudo de dois casos clínicos em que foram selecionados dois pacientes. Foi observado que, mesmo com alterações de CK-MB, troponinas e Mieloperoxidase (comparando-se a valores de referencia da prática laboratorial para os marcadores tradicionais e "padrão ouro" e valor de MPO considerado normal em literatura especializada), constatou-se não haver manifestações que permitissem observar redução da complacência cerebral, quando as ondas P2 se dão maiores que ondas P1 e, portanto, não foram identificadas alterações de PIC para os pacientes nas condições estudadas. Com isso, concluiu-se que, mesmo não havendo demonstração de alteração de PIC neste trabalho, não se pode excluir o valor de sua inclusão na avaliação clínica, dado que vieses como universo amostral, bem como o momento da coleta da PIC e ou uso de medicação no momento da admissão hospitalar, podem ter contribuído para o não-registro de alterações da PIC, mesmo em casos que os pacientes tiveram uma evolução desfavorável do quadro clínico.
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Determinação urinária das proteínas albumina, ligadas à vitamina D e ao retinol, e de Tamm-Horsfall, em cães com doença renal crônica / Evaluation of urinary albumin, urinary vitamin D-binding protein, urinary retinol-binding protein, and Tamm-Horsfall in dogs with chronic kidney disease

Chacar, Fernanda Chicharo 23 September 2015 (has links)
A proteína ligada à vitamina D (VDBP) é a principal responsável pelo transporte dos metabólitos da vitamina D e a sua presença na urina pode indicar lesão tubulointersticial, conforme observado em ratos e humanos. A determinação urinária da proteína ligada ao retinol (RBP), responsável por carrear o retinol do fígado para os tecidos periféricos, por sua vez, está associada à fibrose intersticial dos rins. A albuminúria pode estar relacionada a lesões glomerulares e/ou tubulares (não reabsorção). A proteína de Tamm-Horsfall (THP) normalmente é observada na urina, sendo sintetizada exclusivamente pelas células epiteliais da alça de Henle e do túbulo contornado distal, entretanto quando não detectada, pode indicar lesão nestes segmentos do néfron e/ou diminuição do número de néfrons. Em cães, há poucos estudos sobre as referidas proteínas na urina, especialmente nos casos de doença renal crônica (DRC). A hipótese deste estudo seria de que a avaliação da razão proteína:creatinina urinária (RPC) em cães com DRC per si não forneceria informações suficientes, pois não identificaria os segmentos dos néfrons comprometidos, mas que a determinação de proteínas específicas, pela análise conjunta da eletroforese e do Western blotting, sinalizariam a presença de lesões glomerulares e/ou tubulares, e que a THP poderia estar ausente ou presente em menor intensidade nos estágios avançados da DRC, indicando lesão tubular distal e/ou perda importante do número de néfrons. O presente estudo objetivou avaliar a presença de albumina, VDBP, RBP e THP na urina de cães com DRC, nos estágios 1 ao 4 (IRIS), pela análise conjunta da eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) e Western blotting. O total de 49 cães compuseram os grupos: grupo C clinicamente normal (n&#61; 9), grupo E1 (estágio 1; n&#61;10), grupo E2 (estágio 2; n&#61;10), grupo E3 (estágio 3; n&#61;10) e grupo E4 (estágio 4; n&#61;10). Houve o predomínio de bandas de proteínas de baixo peso molecular (PM &lt;60kDa) em todos os grupos de cães com DRC (E1, E2, E3 e E4), e especificamente para o grupo E4 que apresentava média da RPC de 4,37 e, portanto, esperar-se-ia o predomínio de proteínas de alto PM (PM&gt; 60kDa). Neste grupo, além da imunodetecção da albumina, também foi identificada, em grande intensidade, proteínas de baixo PM (VDBP e RBP). No grupo E3 também foram imunodetectadas a VDBP e RBP, com média da RPC de 1,51 e de 3 a 7 bandas de proteínas de baixo PM. Ainda, a imunodetecção da VDBP e RBP foi constatada nos estágios inicias (E1 e E2) da DRC frente a valores da RPC normais (não proteinúricos), sendo este achado considerado como marcador precoce de lesão renal. A VDBP e RBP não foram identificadas em cães clinicamente normais. A menor intensidade de imunodetecção da THP nos estágios mais avançados pode sugerir mau prognóstico. Conclui-se que o valor da RPC per si não foi capaz de indicar a origem da proteinúria, se glomerular e/ou tubular, sendo necessário, portanto, a análise conjunta da eletroforese (PM) e do Western blotting (albumina, VDBP, RBP e THP) e que, assim, permitiu identificar o segmento do néfron comprometido que acarretou na perda ou na diminuição urinária de proteínas. / Vitamin D-binding protein (VDBP) is the main carrier of the Vitamin D metabolites and its presence in urine is associated with the development of tubulointersticial injury, according to previous studies in rats and humans. Retinol-binding protein (RBP) carries retinol from liver to peripheral tissues, and its urinary detection is also associated with tubulointersticial injury. Albuminuria suggests glomerular lesion, but also may indicate tubular dysfunction (impairment of reabsorption). The presence of Tamm-Horsfall protein (THP) is expected in the urine of clinically normal people and animals, because it is synthesized exclusively by the epithelial cells of the distal segment of nephron, and when it is not detected it may indicate distal tubular injury and/or massive nephrons loss. However in dogs, there are few studies about these urinary proteins especially in cases of chronic kidney disease (CKD). The hypothesis of the present study was to investigate that not only urinary protein-to-creatinine ratio (UPC) measurements would be enough to localize properly the injury to a specific nephron site, but also the evaluation of specifics urinary proteins by electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blotting could provide information regarding to the presence of glomerular and/or tubular injury; in addition, less excretion of THP, or its absence in urine, could be associated with advanced stages of CKD. The aim of the present study was to evaluate albumin, VDBP, RBP e THP in the urine of 40 CKD dogs, on stages 1 to 4 (IRIS), by using of electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blotting. Forty-nine dogs were subdivided into: C group healthy dogs (n&#61; 9), E1 group (stage 1; n&#61;10), E2 group (stage 2; n&#61;10), E3 group (stage 3; n&#61;10) e E4 group (stage 4; n&#61;10). The predominance of low molecular weight proteins (MW &lt;60kDa) was detected in all CKD groups, mainly in E4 group that the mean of UPC was 4.37, and then it would be expected high MW proteins findings (MW &gt;60 kDa). In fact, in E4 group, albumin was immunodetected, however low molecular weight proteins (VDBP and RBP) were also detected and in high intensity. VDBP and RBP were also observed in E3 group (mean UPC &#61; 1.51) and 3 to 7 bands of low molecular weight were detected. In the early stages of CKD (E1 and E2 groups), VDBP and RBP were also identified but UPC values were normal (non-proteinuric), which may suggest the role of these proteins as an early marker of renal injury. VDBP and RBP were not detected in healthy dogs. THP was observed in less intensity in the advanced stages of CDK that may suggest bad prognosis. In conclusion, UPC measurement per se was not able to indicate adequately the injury to a specific nephron site (e.g. glomerular and/or tubular), and therefore the additional information of electrophoresis (MW) and Western blotting (VDBP, RBP and THP) testing could allow the identification of the nephron site injured that caused loss (proteinuria) or decrease in urinary proteins.
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"Metodologia para determinação de biomarcadores geoquímicos orgânicos em sedimentos - Hidrocarbonetos Alifáticos e Aromáticos, Esteróis e Alquenonas" / "Methodology for determination of organic geochemistry biomarkers in sediment - Aliphatic hydrocarbons, PAHs, Sterols and Alkenones"

Lourenço, Rafael André 18 June 2003 (has links)
O destino de grande parte da matéria orgânica presente nos oceanos é o sedimento marinho. Essa matéria orgânica, que vai sendo armazenada ao longo dos anos, produz uma reserva única de informações sobre os processos biogeoquímicos ocorridos no passado e como esses processos responderam às mudanças ambientais. Certas moléculas orgânicas são sintetizadas apenas por organismos marinhos ou somente por plantas superiores terrestres. A abundância relativa desses compostos em sedimentos marinhos pode ser usada para determinar a contribuição de matéria orgânica terrestre ou marinha que foi depositada. Outros compostos, cujas fontes naturais são raras ou inexistem, encontrados em sedimentos, refletem a influência antrópica no meio. Há ainda compostos, com origem biológica especifica, cujas estruturas são influenciadas pelo controle enzimático dos organismos que os produzem, que são influenciados pelo meio. Esses compostos, cuja presença pode fornecer evidências inequívocas da sua fonte ou informações sobre condições oceanográficas recebem o nome de marcadores biológicos e são comumentemente abreviados como biomarcadores. Esse trabalho produziu uma metodologia analítica para identificação e quantificação de biomarcadores como os hidrocarbonetos alifáticos, hidrocarbonetos policíclicos aromáticos, esteróis e alquenonas através de uma única extração lipídica. Essa metodologia foi avaliada por diversos critérios analíticos e validada através de materiais de referência e de exercícios de comparação entre laboratórios. A metodologia foi aplicada em um testemunho de sedimento marinho obtido em Cabo Frio. A quantificação das alquenonas nas amostras do testemunho permitiu estimar a variação da temperatura da superfície oceânica ao longo dos anos e correlacioná-la com variações na intensidade da ressurgência, além de permitir verificar como os demais biomarcadores variaram em função da variação da temperatura do meio onde foram sintetizados. / The fate of most organic matter in the oceans is the marine sediment. This preserved organic matter became an unique reservoir of information about the operation of biogeochemical processes in the geological past, and how these processes responded to environmental changes. Some molecules are only synthesized by sea organisms, others only by higher plants. The relative abundance among these compounds in sea sediments can be used to determine the source of the organic matter. Other organic compounds, without natural sources, are an indicative of anthropogenic influence. The marine sediment also can accumulate compounds with the specific biological sources, which structures are influenced by the enzymatic control of the precursor organisms. All of these compounds, which can provide clear evidences of its sources or information about oceanographic conditions, are called biological markers or biomarkers. The present work put out an analytic method to identify and quantify biomarkers like aliphatic hydrocarbons, PAHs, sterols and alkenones with only one lipidic extraction. This method was evaluated by several analytic criteria and validated by reference material and by interlaboratory comparison study. The method was used to analyze a marine sediment core from Cabo Frio. The alkenones quantification in this core allowed not only appreciate changes in the sea surface temperature (SST) along the years and correlate them with changes in the upwelling, but also verify how the other biomarkers responded to SST changes.
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Avaliação dos anticorpos anti-alfa-enolase na doença de Behçet como marcador de atividade / Anti-alpha-enolase antibodies evaluation in Behçet´s disease as a marker of disease activity

Prado, Leandro Lara do 23 April 2018 (has links)
Objetivo: este estudo objetivou avaliar a presença do anticorpo anti-alfaenolase (AAAE) IgM na doença de Behçet (DB) e suas possíveis associações com as manifestações clínicas e atividade da doença. Métodos: noventa e sete pacientes com DB foram comparados a 36 pacientes com enteroartrite (EA) [24 com doença de Crohn (DC) e 12 com retocolite ulcerativa (RCU)], além de 87 controles saudáveis. Os testes para detecção do AAAE IgM foram realizados por Immunoblotting. A atividade de doença foi avaliada por índices padronizados, como o Formulário de Atividade Atual da Doença de Behçet (BR-BDCAF) para os pacientes com DB e o Índice de Harvey-Bradshaw (HBI) para os pacientes com DC e RCU. Uma segunda avaliação foi realizada somente nos pacientes com DB (n=56) para a detecção do AAAE IgM, avaliação de atividade de doença e dosagem de proteína-C-reativa (PCR). Resultados: maior prevalência do AAAE IgM foi encontrada na DB (17,7%) comparativamente à EA (2,8%) e aos controles saudáveis (2,3%), p < 0,001. A frequência do AAAE IgM foi maior na DB ativa quando comparada à DB inativa (30,2% vs. 7,4%, p=0,006). Este achado foi confirmado em uma segunda avaliação de 56 pacientes do grupo com DB (45,5% vs. 13,3%, p=0,02). A média do BR-BDCAF foi maior no grupo com AAAE IgM positivo, em ambas avaliações (9,1 ± 5,4 vs. 4,9 ± 4,9, p=0,002; 5,0 ± 4,9 vs. 2,2 ± 2,9, p=0,01, respectivamente). Os pacientes com DB em atividade mucocutânea e articular apresentaram maior incidência do AAAE IgM, tanto na primeira quanto na segunda avaliação (64,7% vs. 27,5%, p=0,005; 36,4% vs. 7,1%, p=0,039, respectivamente). Conclusões: os presentes dados corroboram que a alfa-enolase é um antígeno alvo na DB, particularmente associada à atividade mucocutânea e articular da doença. Além disso, o AAAE IgM pode distinguir a DB da EA, especialmente em pacientes com alta atividade de doença / Objective: this study aimed to assess IgM AAEA in systemic Behçet\'s disease (BD) and its possible association with clinical manifestations and disease activity. Methods: ninety-seven consecutively selected BD patients were compared to 36 enteropathic spondyloarthritis (ESpA) [24 Crohn\'s disease (CD) and 12 ulcerative colitis (UC)] patients and 87 healthy controls. IgM AAEA was detected by Immunoblotting. Disease activity was assessed by standardized indexes, Brazilian BD Current Activity Form (BR-BDCAF) for BD and Harvey-Bradshaw Index (HBI) for CD and UC patients. A second evaluation was performed in BD patients (n=56), regarding IgM AAEA presence, disease activity scores and C-reactive protein (CRP). Results: higher IgM AAEA prevalence was found in BD (17.7%) compared to ESpA (2.8%) and healthy controls (2.3%), p < 0.001. IgM AAEA frequency was higher in active BD compared to inactive BD (30.2% vs. 7.4%, p=0.006), a finding confirmed in the second cross-sectional evaluation of 56 of these BD patients (45.5% vs. 13.3%, p=0.02). Mean BR-BDCAF scores were higher in IgM AAEA positive group on both evaluations (9.1 ± 5.4 vs. 4.9 ± 4.9, p=0.002; 5.0 ± 4.9 vs. 2.2 ± 2.9, p=0.01, respectively). BD patients with mucocutaneous and articular symptoms presented higher IgM AAEA positivity in the first and second evaluations (64.7% vs. 27.5%, p=0.005; 36.4% vs. 7.1%, p=0.039 respectively). Conclusions: these data support the notion that alpha-enolase is a target antigen in BD, particularly associated with disease activity, mucocutaneous and articular involvement. In addition, IgM AAEA may distinguish BD from ESpA, especially in patients with high disease activity
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Espectroscopia de absorção no infravermelho em pele queimada: avaliação de potenciais biomarcadores para o reparo tecidual / Infrared absorption spectroscopy in burned skin: evaluation of potential biomarkers in the wound healing

Castro, Pedro Arthur Augusto de 07 February 2018 (has links)
Uma caracterização bioquímica eficiente da cicatrização das feridas por queimadura pode melhorar a rotina clínica para a ajustar os tratamento dos pacientes. Considerando a dificuldade de monitoramento de cicatrização, a espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier acoplado com o acessório de Reflexão Total Atenuada (ATR-FTIR) é uma técnica analítica a qual tem demonstrado capacidade de prover biomarcadores espectrais no materiais biológicos. Esse estudo avaliou a capacidade de usar ATR-FTIR para classificar a pele queimada com o intuito de monitorar o reparo tecidual em pacientes. Ratos Wistar com pele queimada foram avaliados pela espectroscopia ATR-FTIR nos dias 3, 7, 14 e 21 após a queimadura e comparados com amostras de grupos sadios. Os espectros obtidos foram separados nas regiões entre 900 a 1800 cm-1 e entre 2800 a 3000 cm-1 para posterior adequação quimiométrica. Avaliou-se as amplitudes das derivadas de segunda ordem dos espectros como parâmetro de discriminação, nos quais demonstraram diferenças significativas para os grupos não queimados com controle e entre grupos de queimadura usando Glicogênio (1030 cm-1), Amida I (1628 cm-1), Amida II (1514 cm-1), Colágeno em 1281 cm-1 e Colágeno em 1336 cm-1. Esses resultados indicam que ATR-FTIR é sensível para detectar os estágios de reparo tecidual e pode futuramente ser um instrumento auxiliar para a rotina clínica. / Efficient biochemical characterization of burn wound healing stages can improve clinical routine to adjust the patient treatment. Considering the difficulty to monitoring wound healing, the Fourier Transform Infrared spectroscopy coupled with Attenuated Total Reflectance (ATR-FTIR) is an analytical technique that has capability to provide spectral biomarkers in biological materials. This study aims to evaluate the classification feasibility of ATR-FTIR in burned skin to follow the regenerative process in patients. Wistar rat burn tissues were evaluated by ATR-FTIR spectroscopy at 3, 7, 14, 21 days after burn and compared with the healthy group samples. The spectra was separated in the region 900 to 1800 cm-1 and the region 2800 to 3000 cm-1 for further chemometric adequation. The second derivative of amplitude was applied for discrimination which results demonstrated differences to control with non-wounded groups and between non-wounded using Glycogen (1030 cm-1), Amide I (1628 cm-1), Amide II (1514 cm-1), Colllagen in 1281 cm-1 and Collagen in 1336 cm-1. These findings indicate that ATR-FTIR is suitable to detect the burn wound healing stages and in the future can be auxiliary instrument for clinical routine.
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Determinação dos níveis de testosterona e cortisol na saliva de atletas de alto rendimento / Determination of testosterone and cortisol levels in the saliva of high performance athletes

Ueda, Alexandre Jun Zerbini 15 February 2017 (has links)
A atividade esportiva nos últimos anos vem se mostrando uma ferramenta de saúde pública muito importante, o desenvolvimento do esporte em todos os setores que a ele se dedicam tem como base o acompanhamento evolutivo em seu aumento de rendimento e prevenção de lesões físicas ou psicológicas. O treinamento desportivo consiste em repetições programadas e sistematizadas com objetivo de gerar um processo adaptativo contínuo relacionado diretamente a sínteses de proteínas. O treinamento desportivo consiste em repetições programadas e sistematizadas com objetivo de gerar um processo adaptativo contínuo relacionado diretamente a sínteses de proteínas. O atleta, por exigir mais do seu físico em relação às demais pessoas, necessita estar sempre atento à sua saúde, e a saúde bucal não pode ficar fora deste contexto. Constatou-se que o rendimento de um atleta pode ser reduzido se ele tiver algum distúrbio na sua saúde bucal. Deste modo, visando uma melhoria no desempenho do atleta, faz-se necessário um exame odontológico minucioso, a fim de promover o tratamento de eventuais doenças ou mesmo atuar de forma preventiva. Além do sangue, a saliva é apontada como uma fonte potencial de biomarcadores do exercício físico. O exercício físico induz alterações bioquímicas nos sistemas corporais que modificam a composição de alguns componentes salivares. A análise destes componentes é utilizada como indicadora da reposta fisiológica dos vários sistemas aos exercícios físicos. Os hormônios são produzidos pelo organismo em reposta às necessidades fisiológicas basais e a alguns estímulos externos. Na fisiologia do exercício, estudos sobre a relação entre a liberação hormonal e desempenho envolvem principalmente o cortisol e a testosterona, catabolizante e anabolizante, respectivamente. E a determinação dos níveis de testosterona e cortisol em atletas e esportistas pode orientar a carga e a periodicidade adequada de exercícios, prevenindo danos à saúde, bem como aperfeiçoar a manutenção do rendimento esportivo. Nessa oportunidade analisaremos os prontuários de atletas de alto rendimento e apresentaremos uma referência para atletas do alto rendimento brasileiro do ciclo olímpico 2012/2016 utilizando saliva como matriz para análise de biomarcadores, cortisol e testosterona, e com as concentrações obtidas correlacionar com índices fisiológicos de rendimento esportivo para os atletas de alto rendimento. / Sports activity in recent years has been proving to be a very important public health tool. The development of sport in all its sectors is based on the evolutionary monitoring of its increase in performance and prevention of physical or psychological injuries. Sport training consists of programmed and systematized repetitions aiming to generate a continuous adaptive process directly related to protein syntheses. Sport training consists of programmed and systematized repetitions aiming to generate a continuous adaptive process directly related to protein syntheses. The athlete, for demanding more of his physique in relation to the other people, needs to be always attentive to his health, and the oral health cannot be left out of this context. It has been found that an athlete\'s performance can be reduced if he has some disturbance in his oral health. Thus, in order to improve the performance of the athlete, a detailed dental examination is necessary in order to promote the treatment of possible diseases or even to act in a preventive way. In addition to blood, saliva is targeted as a potential source of biomarkers of physical exercise. Physical exercise induces biochemical changes in body systems that modify the composition of some salivary components. The analysis of these components is used as an indicator of the physiological response of the various systems to physical exercises. Hormones are produced by the body in response to the basal physiological needs and some external stimuli. In exercise physiology, studies on the relationship between hormone release and performance mainly involve cortisol and testosterone, catabolic and anabolic, respectively. And the determination of testosterone and cortisol levels in athletes and athletes can guide the load and the appropriate periodicity of exercises, preventing health damage, as well as improving the maintenance of sports performance. In this opportunity we will analyze the charts of high performance athletes and present a reference for athletes of the Brazilian high performance of the 2012/2016 Olympic period using saliva as a matrix for the analysis of biomarkers, cortisol and testosterone, and with the concentrations obtained correlate with physiological indices of yield for high-performance athletes.
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Análises Geoquímicas e respostas Ecotoxicológicas na Avaliação da Qualidade Ambiental de uma Área Estuarina Protegida / Geochemical analyzes and ecotoxicological responses to assess the environmental quality in an estuarine protected area

Araújo, Giuliana Seraphim de 09 December 2014 (has links)
Este estudo teve como objetivo analisar a qualidade dos sedimentos do complexo estuarino de Cananéia-Iguape-Peruíbe (CIP), utilizando Biomarcadores, análises químicas e ecotoxicológicas, a fim de determinar se os metais nos sedimentos estariam biodisponíveis para os organismos bentônicos. As estações PT e PM apresentaram as piores condições, com toxicidade crônica (PT e PM) e aguda (PT), concentração de metais no sedimento e maior indução dos biomarcadores. As piores condições tendem a estar associadas aos sedimentos finos. Os elementos Pb, V, Co, Ni e ZN ultrapassaram os limites de \"Sediment Quality Guidelines\" (SQVs) nas estações PT e PM, Pb ultrapassou também os limites de TEL. A indução dos biomarcadores analisados e danos nos tecidos apresentaram maiores valores durante o inverno. As diferentes ferramentas utilizadas mostram que a contaminação por metais, advindas das atividades de mineração do Alto do Rio Ribeira de Iguape estão influenciando o estuário. A toxicidade encontrada foi atribuída principalmente aos metais, sugerindo que os fatores antrópicos produzem riscos ecológicos. Além disso, como a toxicidade durante o verão se apresenta mais na parte superior do estuário e no inverno essa mesma toxicidade se apresenta nas estações mais ao sul, esse estudo evidenciou que as áreas de deposição parecem mover-se ao longo do estuário, o que depende da quantidade da entrada de água doce no sistema, que se apresenta associada a sazonalidade. / This study aimed to analyze the sediment quality of the Cananéia-Iguape-Peruíbe estuarine complex (CIP) by using biomarkers, geochemical and ecotoxicological analyses, in order to determine if metals from sediments were bioavailable to benthic organisms to the point of causing negative effects. Stations PT and PM presented the worst conditions, with chronic (PT and PM) and acute toxicity (PT), metal contamination and biomarkers induction. Worst condition tend to be associated to fines. Elements Pb, V, Co, Ni and Zn exceeded Sediment Quality Guidelines (SQVs) limits for stations PT and PM, Pb exceeding also TEL values. Biomarkers induction and tissue damage appears to be worse during winter. The different lines of evidence showed that the metal contamination from mining activities on upper Ribeira de Iguape River alters the estuary. Toxicities were attributed mainly to metals suggesting that the anthropic factors are capable of producing ecological risks. Additionally, such as summer toxicity are present in the northern estuarine portion and during winter, this same toxicity appears to be in the southern portion, this study evidenced that depositional areas appears to move along the estuary, which in its turn depends on the freshwater inputs associate to seasonality.

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